Clases Prcticas Uninorte

Microbiologa .Semana 1: El Laboratorio de MicrobiologaOBJETIVOS del laboratorio:Proporcionar informacin exacta sobre: la presencia o ausencia en una MUESTRA de microorganismos que producen una Enfermedad Infecciosa.

Cuando sea relevante proveer INFORMACIN de la SENSIBILIDAD o RESISTENCIA de grmenes aislados a los ANTIMICROBIANOS.2Para lograr estos objetivosDepende de la INTERACCIN: Mdico Microbilogo

Eleccin de las MUESTRAS APROPIADAS

Funciones del Laboratorio de MicrobiologaExaminar y cultivar muestras en busca de Microorganismos.Identificar con certeza especies involucradas en aislamientos imp.Realizar pruebas de SusceptibilidadPara evaluar el curso de una terapiaProveer informacin epidemiolgica.

La principal funcin del Laboratorio de Microbiologa Clnica:

Ayudar al mdico en el diagnstico y tratamiento del paciente con enfermedades infecciosas5Enfermedades infecciosas:

De todas las enfermedades que sufre el ser humano, la mayora de las que conocemos su etiologa, son curables y se pueden prevenir, estn causadas por uorgs.PRUEBAS:Para detectar:Microorganismos o productos en muestras del paciente.Resultados de la Respuesta InmunitariaMuestra y PruebaapropiadaMdicoMicrobilogoPaciente

7DATOS MNIMOS en el pedido mdico:Identificacin y localizacin del pacienteNombre del MdicoTipo preciso de muestra enviada y de Examen requeridoDx de presuncin y Tto.Da y hora de Toma de la muestraMicroscopios:pticoElectrnico: *Transmisin*Barrido

Principales equipos utilizados en el Laboratorio de MicrobiologaUsos de cada tipo de microscopio

Sistemas del microscopioSistema ptico OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo. OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.

Sistema iluminacinCONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. FUENTE DE LUZ Y ESPEJO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. FILTROS: Frenadores y excitadores de la luz.

MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO PTICOColocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias.

Fig. 2.4. Objetivos: distancia focal y aumento5-6 mm 0,5-1,5 mm 0,15-0,20 mmx 10x 40x 100Sistema soporteMantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazoo vstago. REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.CARRO: desplazamiento. CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular.

Sistema enfoqueTORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.

Para realizar el enfoque: Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.

Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin. Empleo del objetivo de inmersin: Bajar totalmente la platina. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.

Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio.MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONESAl finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin.No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador). El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos. Autoclaves.1. Fuente de calor2. Cmara de esterilizacin3. Aparatos de controlEsterilizacin a 1,5 atmsfera de presin, aproximadamente 126C durante 30-35 minutos.Usar indicadores de esterilizacin

Fig. 2.5. AutoclaveAguaFuente de calorCalderaTermmetro y manmetroVlvula de seguridadVlvula de escapeEstufas

Incubacin o de cultivoEsterilizacin (calor seco)

Equipos para anaerobiosCentrfugas.

Otros equipos y elementos necesarios.Asa bacteriolgica con alambre de nquel-cromo.Baja lenguas desechables.Balanza.Bandejas para coloraciones.Bao mara para temperaturas variables hasta 80 C.Bistur con hojas desechables.Cepillos para limpiezas de tubos diversos.Congeladora.Cubetas para coloraciones.Embudos de varios tamaos.

Esptulas.Frascos de boca ancha y tapa rosca.Frascos de Erlenmeyer Gradillas para tubos de ensayo, centrfuga y de precipitacinHeladera Jarra con tapa hermtica para anaerobios y atmsfera de CO2.Jeringas estriles desechables de 1, 3, 5 y 10 ml.Lminas portaobjetos.Laminillas cubreobjetos.Lancetas estriles desechables Lpices marcadores para vidrio.

Vasos de precipitados, embudos, frascos cnico, cubetas.ide PetriFig. Mechero a gas o lmpara de alcohol.Mortero de porcelana o vidrio.Papel para determinacin de pH.Pinza anatmica sin dientes.Pipetas automticas, en un rango de 5 a 1000 l.Pipetas de vidrio de 1, 2, 5, 10 y 20 ml.Pipetas Pasteur.Placas de Petri.Probetas de 50, 100 y 1000 ml.

Reloj Timer, de 0 a 60 minutos.Soporte para coloraciones.Tela metlica.Trpode metlico.Tubos cnicos para centrfuga de 10 a 15 ml.Tubos de ensayo con tapa rosca, de distintos tamaos.Tubos de ensayo, de distintos tamaos.Varillas de vidrio.Vasos de precipitados de 250, 500 y 1000 ml,Vasos cnicos, de 250 y 500 ml.La lista de equipos necesarios en un laboratorio de microbiologa puede muy extensa, y debe adecuarse a las necesidades en cada caso.

Y el mdicoSin duda los avances biotecnolgicos han invadido el campo del laboratorio clnico, se han incorporado nuevos instrumentos que agilizan y optimizan el diagnstico, muchos de los cuales estn siendo utilizados de rutina, por lo que el mdico clnico debe estar en conocimiento de sus ventajas y desventajas. Por ejemplo : la biologa molecular diagnstica.

El correcto uso clnico del laboratorio de Microbiologa:Conocimientos de tcnicas disponibles, indicacin, toma y transporte de muestras clnicas SensibilidadEspecificidadValores Predictivos

y EL LABORATORIO ???Debe comprender la naturaleza del proceso del paciente y ayudar a la interpretacin del informe.ACTUALIZADO?Control y Certificacin de Calidad?Buen relacionamiento?

FUTUROControl Calidad Interno: Certeza y Precisin.nfasis: Discriminar el uso del Labor.Grado de eficiencia con que aplicarn resultados de estudios a atencin y manejo de pacientes.

MUCHAS GRACIAS