práctica nro 6 diagnostico de las principales micosis oportunistas

8/9/2019 Prctica Nro 6 Diagnostico de Las Principales Micosis Oportunistas

1/11

PRCTICA NRO 6: DIAGNSTICO DE LAS PRINCIPALES

MICOSIS OPORTUNISTAS

OBJETIVO:

Al finalizar la prctica el estudiante estar en la capacidad de:

Establecer las diferencias macroscpicas y microscpicas de los

diferentes agentes de micosis oportunistas.

Las micosis oportunistas son infecciones fngicas que se presentan en

pacientes inmunocomprometidos, causadas por hongos que ien como

saprfitos en la naturaleza o en caidades de seres humanos.

!ualquier hongo saprfito, que sea termotolerante, puede transformarse en

patgeno secundario en el hu"sped inmunocomprometido.

Entre los principales agentes causales de micosis oportunistas se

encuentran:

Candida sp

Cryptococcus neoformans

Aspergillus sp

Zygomicetos

Pneumocystis jirovecci

Penicillium sp

CANDIDOSIS:

#icosis primaria o secundaria ocasionada por leaduras endgenas y

oportunistas del g"nero Candida, que pueden afectar piel, mucosas, estructuras

profundas y rganos internos.

DIAGNSTICO: $er esquema diagnstico en prctica de micosis

superficiales.


2/11

CRIPTOCOCOSIS:

Es una micosis que afecta tanto a hombres como a animales, es

ocasionada por las tres ariedades de la leadura capsulada Cryptococcus

neoformans:

C. neoformans var. grubii, serotipo A

C. neoformans var. neoformansserotipo % y !

C. neoformans var. gattiserotipo &

Las ariedades grubii y neoformanshan sido aisladas de la naturaleza en

casi todo el mundo, en asociacin con e'crementos de aes, especialmente

palomas. La ariedad Gatti ha sido aislada de la naturaleza en asociacin con

detritos, flores y oquedades de numerosos rboles, entre ellos, los eucaliptos,

acacias, ficus y almendros.

El hombre adquiere la enfermedad por la inhalacin de blastoconidias poco

capsuladas ()*+ m- presentes en el ambiente. En el hospedero este patgeno

desarrolla una cpsula polisacrida protectora. e establece un foco primario

pulmonar que puede ser asintomtico en hospederos inmunocompetentes o

diseminada en inmunocomprometidos. Las presentaciones cl/nicas ms

frecuentes de la criptococosis son la meningitis y la meningoencefalitis, aunque en

menor frecuencia se pueden obserar lesiones en /sceras, hueso, piel, ri0on y

prstata.

La criptococosis es de distribucin mundial, afecta a ambos se'os y todas

las edades, aunque es poco frecuente en ni0os, y aquellos con enfermedad de

base que comprometan tanto la inmunidad celular como la humoral.

DIAGNSTICO

Muestra:


3/11

L!1

Esputo, laado broncoaleolar

2rina

&iopsias

angre, m"dula sea

E'udado de ulceras, material purulento ecrecin prosttica.

Examen directo:

2bseracin entre lmina y laminilla

3inta china o nigrosina

!oloraciones histolgicas (4E, 5A, plata metenamina, mucicarmina de

#eyer, Azul de Alcin-

Al realizar una tincin negatia con la tinta china, se obseran

blastoconidias proistas de una pared bien definida y una cpsula refringente, con

o sin gemacin, redondas u oaladas de 6*7 m de dimetro y hasta de 8)*)9

m, dependiendo del tama0o de la cpsula (igura 69-. En las preparaciones en

fresco, para obserar la cpsula, se ba;a el condensador, se cierra el diafragma y

se obsera con poca luz.

igura 69: Leaduras encapsuladas de Cryptococcusneoformans (f lechas azules-. 3inta china.http:


4/11

En los estudios histopatolgicos, la intensidad de la respuesta inflamatoria

a a depender del rgano y de las caracter/sticas del hospedero. 4ay formacin de

granulomas con necrosis.

Cultivo:

e realiza en Agar abouraud u otros medios de cultio sin ciclohe'imida,

ya que inhibe su crecimiento. e incuba a una temperatura de +) a +@ !,

temperaturas mayores o iguales a 69 ! inhiben su crecimiento. La colonia se

desarrolla en 6B horas, son blancas o amarillentas, lisas y brillantes, a los cinco

d/as toman un aspecto mucoide que recuerdan el aspecto de la leche

condensada. 5or ser el C. neoformans el nico g"nero que utiliza la enzima

fenolo'idasa, crece en medios con semillas pulerizadas de Guizotia abyssinica

(medio de taib o agar de semillas de niger o agar cido cafeico-, donde adopta

un color ocre. 3ambi"n se puede sembrar en un medio a base de semillas de

girasol.

Estudio inmunolgico:

5or el estado de inmunodeficiencia de los pacientes y por la escasa

antigenicidad de la cpsula que rodea al hongo, no se han obtenido ant/genos

adecuados para detectar hipersensibilidad retardada en los pacientes.

El diagnstico inmunolgico de criptococosis se establece mediante el uso

de la t"cnica de aglutinacin de part/culas de lte', la cual permite detectar

ant/genos polisacridos capsulares en las muestras cl/nicas.

ASPERGILOSIS

&a;o este t"rmino se incluyen una serie de enfermedades cl/nicamente

diferentes, pero producidas por especies de mohos hialinos septados, del genero

Aspergillus. Este grupo de hongos se caracteriza por tener distribucin mundial y


5/11

ser ubicuos en la naturalezaC sin embargo, se presentan con mayor frecuencia en

ambientes hmedos, asociados con todo tipo de material orgnico como plantas,

tierras, telas, condimentos y filtros de aire acondicionado.

La clasificacin cl/nica de aspergilosis es muy comple;a y e'tensa, seconsideran tres grupos de enfermedades, basados en la asociacin establecida

entre el hongo y el hospedero: Aspergilosis por hipersensibilidad, colonizacin por

Aspergillus y Aspergilosis inasia.

DIAGNSTICO

Muestra:

Escamas, detrito subungueal Esputos, laado broncoaleolar

#aterial purulento o necrtico

&iopsias

4emocultios (raramente positios-

Examen directo:

En fresco, entre lmina y laminilla

D24 al 89*)9 con tinta

Fegro de clorazol E !alcofluor

!oloraciones histolgicas (4E, 5A, plata*metenamina-

Al e'amen directo se obseran hifas hialinas, septadas, con un dimetro de

+*7 m, de pared lisa y gruesa, con ramificaciones dicotmicas en ngulo de 6G. A

eces se obseran clamidoconidias. Las hifas proliferan en el te;ido con arreglo

radial o paralelo a esteC ocasionalmente las hifas e'iben caracter/sticas

morfolgicas at/picas y se en globosas, distorsioonadas y ms amplias que lo

usual, hasta de 8) m de dimetro, con escaso o ningn septo, por lo que pueden

confundirse con las de zigomicetos.

En algunas muestras, especialmente en aquellas proenientes de otitis y

aspergiloma pulmonar y nasal, pueden encontrarse cabezas aspergilares. En los


6/11

casos de aspergiloma, en las caidades pulmonares y de senos (paranasal,

etmoidal y ma'ilar-, se obseran masas o bolas del hongo, constitu/das por hifas

septadas dicotmicas, con proyeccin radiada. Las hifas no inaden la pared de la

caidad o caerna.

En las biopsias de aspergilosis inasora, se obseran numerosas hifas con

tendencia a proyectarse en forma radial. Las hifas, por crecer en la luz de los

asos y perforarlos, se en rodeadas de reas hemorrgicas e infiltrado

inflamatorio constitu/do principalmente por leucocitos polimorfonucleares

neutrfilos y grados ariables de necrosis.

Cultivo:

e realiza en abouraud con y sin antibiticos, Lactrimel o !zapeH. Es un

hongo de crecimiento rpido, + 6 d/as, son de color blanco, erde amarillo, caf"

o ro;izo y puede haber difusin del pigmento al medio de cultio. on de aspecto

aterciopelado, granuloso, pulerulento. Las caracter/sticas tanto macro como

microscpicas dependern de la especie deAspergillus (igura 68-.

igura 68: 5rincipales estructuras morfolgicas del g"nero Aspergillus.

III.uprm.edu


7/11

Estudio inmunolgico:

Las pruebas serolgicas para la determinacin de anticuerpos son tiles en

pacientes al"rgicos y las pruebas de ant/genos lo son en las formas inasias.

5ueden realizarse J%%, Jnmunoelectroforesis, contrainmunoelectroforesis, ELJA y

fi;acin de complemento.

ZIGOMICOSIS:

&a;o este t"rmino se agrupan una ariedad de infecciones oportunistas

producidas por arios g"neros de mohos aceptados, pertenecientes a la clase

Kygomycetes, orden mucorales. on hongos termotolerantes, saprfitos, que se

a/slan con frecuencia de suelos y de materia orgnica en descomposicinC

tambi"n son contaminantes de alimentos y enda;es almacenados en ambientes

hmedos.

Las infecciones ms frecuentes producidas por estos hongos, pueden ser

clasificadas de acuerdo con su ubicacin anatmica en rinocerebral, pulmonar,

gastrointestinal, subcutnea y sist"mica, pero tambi"n pueden manifestarse en un

rgano aislado como cerebro, ri0n y corazn.

La mucormicosis es de distribucin mundial, no son factores

predisponentes la edad, el se'o y el tama0o del inculo.

DIAGNSTICO

Muestra:

&iopsias (se debe obtener material abundante y de buena calidad-

3e;idos necrticos

ecreciones

Aspirado de senos nasales y paranasales

Esputos, laado broncoaleolar.

Examen directo:


8/11

En fresco, entre lmina y laminilla

D24 al 89 con o sin tinta

Fegro de clorazol E

!alcofluor

!oloraciones histolgicas (5A, 4E, plata*metenamina-.

e obseran hifas anchas, de @*8G m de dimetro, aceptadas o

infrecuentemente septadas, que se ramifican en ngulo de =9. on de paredes

delgadas y fle'ibles por lo que se doblan y colapsan, dando la apariencia de

falsos septos o de ramificaciones en diferentes ngulos y de cintas ms que de

cilindro.

Las tinciones usuales de las biopsias, tambi"n permiten la isualizacin de

los elementos micticos. e obsera edema y necrosis tisular. El infiltrado celular

es escaso y est constituido principalmente por polimorfonucleares neutrfilos.

Cultivo:

e realiza en agar abouraud sin ciclohe'imida y se incuban a +@ !. El

crecimiento es rpido (8) a 6B horas-, las colonias son eleadas y cubren toda la

superficie del medio de cultio. 5ara demostrar su patogenicidad se deben

realizar cultios repetidos y obserar la presencia del hongo en todos los tubos

sembrados. Las caracter/sticas macro y microscpicas an a depender de la

especie inolucrada.

NEUMOCISTOSIS:

Feumon/a ocasionada por el hongo Pneomocystis jiroveci (P. carinii-. Es

una infeccin cosmopolita oportunista muy bien reconocida y estudiada en los

pacientes infectados con el $J4. La infeccin se adquiere por /a a"rea. En

hospederos inmunodeficientes la infeccin cursa casi siempre con una neumonitis

bilateral con infiltrados intersticiales difusos. La taquipnea con disnea progresia,

la tos seca y la cianosis son los s/ntomas habituales. %esde el pulmn el hongo

puede diseminarse a otros rganos como ganglios linfticos, bazo, h/gado,


9/11

corazn, medula sea y con menor frecuencia a cerebro, pncreas, timo, tiroides,

retina, coroides, o/do y piel, entre otros.

DIAGNSTICO

Muestra.

Laado broncoaleolar

!epillado bronquial

Esputos inducidos

&iopsias

Examen directo:

?iemsa, right %iff*MuiH

5lata*metenamina

Azul de toluidina 2

!alcofluor

e obseran trofozo/tos (ascosporas- y quistes (ascas- de P. jiroveci (P.

carinii-. Los trofozo/tos tienen un dimetro de 8*+ m, su ncleo es redondeado y

su citoplasma es de contornos irregulares. Los quistes constituyen solo el 8 de

los microorganismos, tienen 6*@ m de dimetro y su forma ar/a de redonda aooide, obserndose tambi"n formas colapsadas. 5oseen una gruesa pared

celular y estn proistos de una u ocho ncleos dependiendo de su estado de

maduracin.

El cuadro histolgico t/pico en cortes te0idos con 4E se caracteriza por un

e'udado intra*aleolar eosinfilo, espumoso, con aspecto de panal de abe;as, lo

cual se considera diagnstico an en ausencia de la demostracin de P. jirovecci

(P. carinii- mediante coloraciones especiales. En preparaciones te0idas con 5lata*metenamina, se aprecian claramente quistes y trofozo/tos.


10/11

Cultivo:Aun no se ha podido recuperar en cultio.

Otros mtodos diagnsticos: Amplificacin del A%F por 5!1.

igura 68: Muistes de Pneumocystis jiroveci en pulmn (flechas-.

!oloracin histological 5lata*metenamina. %isponible en:

student.ccbcmd.edu


11/11

ACTIVIDAD PRCTICA

%ibu;e las estructuras obseradas al microscopio de los principales agentes

de micosis oportunistas.

Candida spp Aspergillus spp

Cryptococcus

neoformans4ifas no septadas

práctica nro 6 diagnostico de las principales micosis oportunistas

Documents