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ELABORACIÓN DE UN PROTOCOLO VETERINARIO PARA EL MANEJO Y
PROCESAMIENTO DE MUESTRAS SANGUÍNEAS EN EL LABORATORIO DE
LA CLÍNICA MASCOTAS & MASCOTICAS SAN GIL - SANTANDER
CAMILO ANDRÉS RODRÍGUEZ CHAPARRO
UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, NATURALES Y AGROPECUARIAS
MEDICINA VETERINARIA
BUCARAMANGA
2020
ELABORACIÓN DE UN PROTOCOLO VETERINARIO PARA EL MANEJO Y
PROCESAMIENTO DE MUESTRAS SANGUÍNEAS EN EL LABORATORIO DE
LA CLÍNICA MASCOTAS & MASCOTICAS SAN GIL - SANTANDER
CAMILO ANDRÉS RODRÍGUEZ CHAPARRO
Trabajo de grado para optar al título de Médico Veterinario
Director:
MVZ MSC. ANGEL ALBERTO FLOREZ MUÑOZ
UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, NATURALES Y AGROPECUARIAS
MEDICINA VETERINARIA
BUCARAMANGA
2020
DEDICATORIA
A mis padres, Alfonso Rodríguez Patiño y Herminia Chaparro, por su inmenso amor,
respaldo y apoyo incondicional.
A mi novia Melissa Hernández, por animarme a seguir adelante, su lealtad, paciencia,
serenidad y adorable compañía.
AGRADECIMIENTOS
Agradezco a Dios, por hacerme a su imagen y semejanza, por conservarme con salud y
vida, por guiarme con su luz para prepararme, y culminar esta etapa de mi vida académica y
profesional.
Al doctor Carlos Bonces por el aprendizaje profesional y personal, al profesor Ángel
Alberto Flórez Muñoz, quien me oriento, con sus aportes académicos, dedicación y
profesionalismo.
Al cuerpo docente del Programa de Medicina Veterinaria, de la Universidad de
Santander UDES, quienes, me dieron las bases necesarias, para encaminarme hacia una
vida profesional colmada de posibilidades, brindándome su colaboración de manera
oportuna y desinteresada.
Tabla de contenido
Introducción ........................................................................................................................................ 9
1. Planteamiento del problema ..................................................................................................... 11
2. Justificación .............................................................................................................................. 13
3. Objetivos ................................................................................................................................... 14
3.1. Objetivo general ................................................................................................................ 14
3.2. Objetivo específicos: ......................................................................................................... 14
4. Estado del arte ........................................................................................................................... 15
5. Marco teórico ............................................................................................................................ 18
5.1.1. Identificación de riesgos ............................................................................................ 18
5.1.2. La importancia de la calidad en el laboratorio .......................................................... 19
5.2. Hematología ...................................................................................................................... 22
5.3. Muestra sanguínea ............................................................................................................. 24
6. Metodología .............................................................................................................................. 27
6.1. Recolección de la información .......................................................................................... 27
6.1.1. Toma de la muestra y registro de resultados ............................................................. 28
6.2. Análisis estadístico ............................................................................................................ 30
7. Resultados ................................................................................................................................. 31
8. Discusión ................................................................................................................................... 38
9. Conclusiones ............................................................................................................................. 40
Lista de figuras
Figura 1. Aspectos del funcionamiento del laboratorio .................................................................... 20
Figura 2. Itinerario del flujo de trabajo. ............................................................................................ 21
Figura 3. Sofware Veterinario Vetesoft ............................................................................................ 27
Figura 4. Historia Clinica. ................................................................................................................ 28
Figura 5. Ingreso datos de laboratorio .............................................................................................. 29
Figura 6. Ingreso datos de hemograma. ............................................................................................ 29
Figura 7. Registro y actualización Historia Clínica VETESOFT….…….……………………... …30
Figura 8. Anticoagulante. ................................................................................................................. 31
Figura 9. Tubo vial ........................................................................................................................... 31
Figura 10. Gradilla. ........................................................................................................................... 31
Figura 11. Vacoutainer tapa morada ................................................................................................. 31
Figura 12. Microscopio..................................................................................................................... 32
Figura 13. Cámara de recuento Howard ........................................................................................... 32
Figura 14. Módulos de ingreso de información. ............................................................................... 32
Figura 15. Rotulado …………………………………………………….……………………….…32
Figura 16. Analizador Hematológico Scil Vet ABC Classic.…………….………………… .34
Lista de tablas
Tabla 1. Protocolo veterinario para el manejo y procesamiento de muestras sanguineas. ................ 31
Tabla 2. Tubos para extracción de sangre. ........................................................................................ 33
Tabla 3. Medidas de las agujas.......................................................................................................... 34
Titulo: Elaboración de un Protocolo veterinario para el manejo y procesamiento de
muestras sanguíneas en el laboratorio de la Clínica Mascotas & Mascoticas San Gil –
Santander
Resumen.
Introducción: Los protocolos son documentos que establecen una sistemática de trabajo.
El valor de los protocolos y de las normas de actuación es indudable. Trabajar con
protocolos de actuación se ha convertido en una necesidad, no sólo en el ámbito clínico,
sino en la mayoría de las actividades que ofrecen un servicio o un producto. Los protocolos
médicos veterinarios, son un conjunto de recomendaciones sobre los procedimientos
diagnósticos a utilizar ante cualquier paciente con un determinado cuadro clínico, o sobre la
actitud terapéutica más adecuada ante un diagnóstico clínico o un problema de salud.
Actualmente, en la clínica Mascotas & Mascoticas de San Gil Santander, no se cuenta con
un protocolo para el manejo de muestras de sangre. Objetivo: elaborar un protocolo de
manejo de muestras sanguíneas en la clínica Mascotas & Mascoticas en San Gil –
Santander. Resultados: Obtención del protocolo para el manejo de muestras sanguíneas; de
acuerdo a la revisión realizada a otros protocolos se identifican que todos coinciden con la
importancia y necesidad de sistematizar los procesos y procedimientos que se realizan en el
laboratorio clínico. Conclusiones: con este protocolo se pretende garantizar una mejora en
la atención al paciente; asi como también, dejar un documento de referencia y apoyo para el
procedimiento de toma de muestras de sangre, que permita garantizar bienestar y atención
oportuna.
Palabras claves: protocolo, muestras sanguíneas, recolección, transporte,
conservación, hemograma
Title: Preparation of a veterinary protocol for the handling and processing of blood
samples in the laboratory of the San Gil - mascotas & mascoticas – Santander.
Summary.
Introduction: The protocols are documents that require a systematic work. The value of
protocols and standards of action is undeniable. Working with action protocols has become
a necessity not only in the clinical setting, but in most of the activities that offer a service or
a product. Veterinary medical protocols are a set of recommendations on the diagnostic
procedures to be used before any patient with a specific clinical picture, or on the most
appropriate therapeutic attitude when faced with a clinical diagnosis or a health problem.
Currently at the Pets and Pets clinic in San Gil, they do not have a protocol for handling
blood samples. Objective: to develop a protocol for handling blood samples at the Mascotas
& Mascoticas clinic in San Gil - Santander. Results: Obtaining the protocol for handling
blood samples. Conclusions: this protocol aims to obtain an improvement in patient care; as
well as leaving a reference and support document for the blood sampling procedure,
allowing well-being permits and timely care.
Key words: protocol, blood samples, collection, transport, conservation, blood count.
9
Introducción
En la práctica clínica se tiene la necesidad de establecer diagnósticos precisos, que
garanticen seleccionar el tratamiento adecuado y aplicar los protocolos necesarios, para
preservar la salud y el bienestar del paciente. La toma de muestra de sangre es un
procedimiento necesario para poder establecer una patología; por lo que obtener muestras
de calidad y cantidad adecuada y correctamente identificadas es vital, para poder realizar un
estudio de laboratorio pertinente. La fiabilidad de un análisis y su interpretación dependen
en gran medida de la calidad de la muestra que se analiza o que se envía al laboratorio. El
manejo adecuado de las muestras desde que se obtienen hasta que se procesan es
fundamental para poder realizar un análisis correcto y no obtener resultados erróneos.
La Organización Mundial de Sanidad Animal ( (OIE) recomienda que los veterinarios
“sean principales defensores del bienestar de todos los animales, reconociendo la
contribución clave que los animales hacen a la sociedad humana a través de la producción
de alimentos, el compañerismo, la investigación biomédica y la educación”. Además, la
Federación de Veterinarios de Europa (FVE), junto con la Asociación Canadiense de
Medicina Veterinaria (CVMA) y la Asociación Americana de Medicina Veterinaria
(AVMA) declaran que "los veterinarios son, y deben esforzarse continuamente por ser, los
principales defensores del bienestar de los animales en una sociedad en continua evolución”
. Los centros veterinarios principalmente de animales de compañía (gatos, perros), deben
disponer de protocolos que garanticen la correcta actuación clínica en los diferentes
procedimientos que se realizan con el fin de garantizar el mejor bienestar posible de los
animales dentro de la clínica veterinaria. Así mismo los protocolos contribuyen a reducir
10
los riesgos de eventos zoonóticos, riesgos biológicos, físicos y químicos en la interacción
entre los animales y el hombre (Ryan, y otros, 2018).
El presente documento presenta una propuesta de investigación que se enfoca en la
realización de un protocolo veterinario para el manejo, procesamiento de muestras
sanguíneas en el laboratorio de la Clínica Mascotas & Mascoticas San Gil – Santander.
Inicialmente se aborda el problema objeto de la de investigación, con la descripción y
formulación del mismo, exponiendo las razones que justifican el desarrollo de la propuesta,
los objetivos que se pretenden alcanzar y la formulación de la pregunta de investigación.
Posteriormente se presenta el marco referencial, en donde se mencionan y describen
algunas investigaciones que han sido desarrolladas relativas al tema de investigación,
continuando con el marco teórico que respalda la investigación referenciando estudios
realizados en el contexto internacional, nacional y regional.
Consecutivamente, se presenta el diseño metodológico para el desarrollo de la propuesta,
que integra el desarrollo de la misma, en fases, encaminadas al cumplimiento de los
objetivos de la investigación.
Finalmente se presentan las conclusiones y bibliografía, correspondientes.
11
1. Planteamiento del problema
Los protocolos permiten seguir una sistemática de trabajo, garantizan una uniformidad
de criterios a la hora de trabajar, establecen los procedimientos a seguir para cada actuación
y disminuyen el nivel de error, aumentando de manera indiscutible la calidad de un servicio
y de la atención al cliente. Los protocolos tienen como finalidad el orientar en la toma de
decisiones clínicas, mejorar la calidad de la práctica clínica, proporcionar mayor protección
legal a los profesionales sanitarios.
En el artículo titulado “Tras la palabra de moda: ¿Qué son los protocolos médicos?”
(Álvarez Cañete, 2014) indica: Los protocolos médicos son un conjunto de
recomendaciones sobre los procedimientos diagnósticos a utilizar ante cualquier enfermo
con un determinado cuadro clínico, o sobre la actitud terapéutica más adecuada ante un
diagnóstico clínico o un problema de salud. Se han convertido en una herramienta de gran
utilidad para los profesionales sanitarios, facilitándoles el diagnóstico y tratamiento de
enfermedades. Esto a su vez implica una mayor eficacia de la asistencia sanitaria en
beneficio del paciente: diagnósticos más tempranos y conocimiento rápido de cómo abordar
el cuadro clínico diagnosticado.
El laboratorio clínico es un servicio indispensable, cuya importancia ha ido creciendo y
desarrollándose a lo largo de los años hasta ocupar un lugar central en la medicina actual.
El Laboratorio Clínico es el espacio físico donde se efectúan una gran diversidad de
procedimientos médicos, científicos, técnicos, etc., que en conjunto representan un valioso
recurso de la clínica al documentar el estado de salud (Medicina Preventiva) o de
enfermedad (Medicina Curativa). Las pruebas de laboratorio son una poderosa herramienta
12
para la toma de decisiones. El diagnóstico es un ejercicio multidisciplinario en el que el
clínico sospecha, los gabinetes apoyan y los laboratorios confirman o descartan (Terrés,
2018)
El análisis de sangre es un examen de laboratorio clínico muy común que constituye una
herramienta fidedigna como apoyo para determinar el diagnóstico de determinadas
patologías que afectan los animales, se convierte en una herramienta de enorme valor
práctico por su fácil acceso en todos los casos donde se sospeche una enfermedad.
A nivel nacional el número de animales de compañía en las ciudades colombianas, ha
ido en aumento, las mascotas llenan espacios afectivos en los entornos familiares,
principalmente se registran aumento de población canina (perros) y felina (gatos) por ser
animales domésticos y de fácil adaptación, estadísticas señalan que por cada diez personas
hay un perro y un gato por cada cincuenta. En muchos países como Suecia, Estados Unidos
y Australia, se reconocen las bondades de la compañía de las mascotas y su importancia en
la vida humana. En los Estados Unidos hay leyes que permiten la residencia de un animal
con fines terapéuticos en las viviendas, donde no se considera como una mascota sino como
parte necesaria de un tratamiento o apoyo a una discapacidad. El vínculo afectivo entre el
hombre y las mascotas crece, así como el interés por brindarles una vida saludable y en
óptimas condiciones, lo que ha contribuido al crecimiento en la atención de clínicas
veterinarias, en las diferentes patologías
El presente estudio tuvo como objetivo la realización de un protocolo veterinario para el
manejo y procesamiento de muestras sanguíneas en el laboratorio de la Clínica Mascotas &
Mascoticas San Gil – Santander.
13
2. Justificación
Debido a las necesidades que se presentan en la clínica veterinaria Mascotas &
Mascoticas, en relación con la demanda de exámenes de laboratorio clínico,
específicamente “muestras de sangre”, como requerimiento para el procedimiento de
atención a pacientes, y que la clínica no cuenta con un protocolo establecido para el manejo
y procesamiento de las mismas, se hace necesaria su realización; garantizando que la oferta
de servicios, los procedimientos y protocolos, sean acordes con las necesidades de los
pacientes, conllevando a la prestación de un servicio integral.
Teniendo en cuenta esta situación, se identifica la necesidad de la realizar el protocolo
que servirá como herramienta de apoyo para los especialistas de la clínica, contribuyendo a
que se pueda conocer de manera más oportuna el estado de salud del paciente,
disminuyendo los riesgos de complicación del mismo; además de minimizar errores como:
mal transporte de la muestra, mal diligenciamiento de los formatos entre otros.
Por tanto, el objetivo del presente trabajo fue la elaboración del protocolo de manejo de
muestras hematológicas en la Clínica Mascotas y Mascoticas San Gil – Santander, ya que
no cuenta con un protocolo definido para su realización.
14
3. Objetivos
3.1. Objetivo general
Realizar un Protocolo veterinario para el manejo y procesamiento de muestras sanguíneas en el
laboratorio de la Clínica Mascotas & Mascoticas San Gil – Santander.
3.2. Objetivo específicos:
Documentar los procedimientos llevados a cabo para la toma y transporte de muestras
sanguineas en el laboratorio de la Clinica Mascotas & Mascoticas
Documentar los procedimientos llevados a cabo a la muestra sanguínea en el laboratorio
de la clínica Mascotas & Mascoticas.
15
4. Estado del arte
Debido a la importancia y la necesidad de documentar e implementar los
procedimientos, que son realizados en las clínicas veterinarias, se han elaborado diversos
protocolos y documentos que incluyen a realización de los mismo, a continuación, se
referencian algunos de toma de muestras de sangre.
(Daniel de la Sota, 2005), elaboró en Buenos Aires el “Manual de procedimientos,
recolección y envío de muestras sanguíneas, en donde en diferentes pasos explica cómo
obtener una muestra fiable, y además indica que: Es importante tener en cuenta que el tipo
de muestra, las condiciones de envío y su conservación son factores claves para interpretar
correctamente los resultados analíticos. La capacidad de un laboratorio para confirmar la
sospecha de una enfermedad está directamente relacionada con la calidad de las muestras
remitidas para el diagnóstico.
Así mismo en México (Aguilar Bobadilla, 2009), incluyo en el módulo “Colección,
manejo y envío de muestras para hematología, bioquímica, urianálisis y citología”, del
Diplomado "En Medicina, Cirugía y Zootecnia en Perros y Gatos”, indicando los errores
que se cometen con frecuencia en la extracción de sangre y que inciden en el resultado del
mismo como los son la hemolisis en la sangre que puede originarse por el uso de jeringas
húmedas, recalca la importancia de la cantidad de sangre adecuada teniendo en cuenta el
tipo de prueba y el método usado por el laboratorio, para la química clínica se recomiendan
2 ml de suero.
16
(Gallo Lamping, 2014) en el Manual de diagnostico con énfasis en el laboratorio clínico
veterinario, establece las pruebas que se pueden efectuar de una muestra de sangre como:
hematológica, bioquímica, bacteriológico, serológico, parasitológico, toxicológico. En
cuanto a las muestras de sangre, recalca la importancia de la asepsia, manejo del paciente,
cantidad de la muestra, se recomienda para caninos de talla grande 3ml y punción venosa, y
para caninos de talla media y pequeña, felinos: 1- 2ml y punción cutánea. Con la
realización del manual en mención, el autor quiso documentar de una manera clara, paso a
paso con toda la información necesaria acerca de las características de un laboratorio
clínico y cuáles deben ser las " buenas prácticas de laboratorio", la extracción, conservación
y remisión de los diferentes tipos de muestras, las metodologías e interpretación de los
resultados.
En el contexto nacional (Gutierrez, 2016), como trabajo de grado, elaboró el documento
“Creación del laboratorio clínico en la clínica veterinaria APAP (Asociación protectora de
animales y plantas de Pereira)”, debido a que la clínica en mención no cuenta con un
laboratorio propio, por lo que remite los exámenes de laboratorio a otros centros de
diagnóstico trayendo consigo los siguientes problemas: Demora en la entrega de resultados,
Mal transporte, Complicación de pacientes por demora en la entrega de resultados. En
donde concluye, “Es necesario identificar protocolos estándar para el funcionamiento del
laboratorio con el fin de cumplir con las normas establecidas, conllevando a la disminución
de errores analíticos y pre analíticos del laboratorio”.
(Restrepo, 2016), realizó la “Pasantía con énfasis en Laboratorio Clínico de Pequeñas
Especies, en la Clínica Veterinaria el Poblado”, en el municipio de Caldas, en donde
17
menciona en lo referente a la clínica “El promedio de pacientes atendidos por diferentes
patologías en un periodo de abril a mediados de Julio fue de 953 pacientes. todos los
pacientes ingresados pasan inicialmente por una valoración médica y de allí se define si
ingresan a hospitalización, cirugía o tratamiento ambulatorio”. Una de las conclusiones de
trabajo fue “Las ayudas diagnósticas y los exámenes de laboratorio son una herramienta
que guía al médico veterinario a la hora de establecer un diagnóstico definitivo”.
Posteriormente (Pérez, 2018) realizó la “Guía de laboratorio veterinaria”, para la
Corporación Universitaria Rafael Núñez, en donde especifica:
El Hemograma o Cuadro Hemático es el examen de laboratorio
rutinario utilizado con mayor frecuencia por el veterinario, su principal
objetivo es valorar cualitativa y cuantitativamente los elementos formes de la
sangre e indirectamente se emplea para valorar la actividad de la médula ósea
como productora de células sanguíneas, valora además la concentración de
hemoglobina, el hematocrito y el volumen de los glóbulos rojos.
Al efectuar este examen se debe tener en cuenta que la morfología de
las células animales es diferente, en mayor o menor grado de acuerdo con la
especie analizada, y que, por tanto, cada especie posee sus propios valores de
referencia.
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5. Marco teórico
Para abordar el desarrollo del presente estudio, se considera pertinente enunciar los
conceptos técnicos en los que se fundamentan sus objetivos.
5.1 Buenas prácticas de laboratorio clínico
Se definen como el conjunto de reglas, procedimientos operacionales, prácticas
establecidas y promulgadas por determinadas organizaciones; consideradas de obligatorio
cumplimiento para asegurar la calidad e integridad de los datos producidos en determinados
procesos de laboratorio, con el fin de armonizar protocolos, información y documentación
de los procedimientos operativos estandarizados
5.1.1. Identificación de riesgos
La siguiente clasificación por grupos de riesgo se utilizará exclusivamente para el
trabajo de laboratorio, según lo estipulado por la OMS (Organización Mundial de la Salud).
Grupo de riesgo tipo 1: se indica que corresponde a microorganismos que tienen pocas
probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales.
Grupos de riesgo tipo 2: este tipo corresponde a agentes patógenos que pueden provocar
enfermedades humanas o animales, pero que tienen pocas probabilidades de entrañar un
riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, el ganado o el medio ambiente.
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En caso de exposición en laboratorio puede provocar una infección grave; sin embargo,
existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de propagación es limitado.
Grupo de riesgo tipo 3: Encontramos agentes patógenos que suelen provocar
enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propagan de un
individuo a otro.
Grupo de riesgo tipo 4: Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en
el ser humano o los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa
o indirectamente.
5.1.2. La importancia de la calidad en el laboratorio
La calidad de un laboratorio se puede definir como la exactitud, fiabilidad y puntualidad
de los resultados analíticos notificados.
En el manual (Sistema de Gestión de la Calidad en el Laboratorio, 2016); encontramos
que los laboratorios producen resultados analiticos que se utilizan de manera generalizada
en los contectos clínicos y de salud pública y los resultados relacionados con la salud
dependen de la exactitud de los análisis y de su notificación. Si los resultados son
inexactos, las consecuencias pueden ser muy significativas, entre ellas:
Tratamientos innecesarios
Compilaciones del tratamiento
Falta de proporcionar el tratamiento adecuado
Retrasos en el dignóstico correcto
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Pruebas diagnósticas adicionales e innecesarias
Teniendo en cuenta los diversos procesos y procedimientos que son inherentes a las
pruebas de laboratorio; el modelo de sistema de gestión de calidad, es indispensable para
lograr un buen rendimiento en el mismo, ya que abarca todos los aspectos del
funcionamiento del mismo.
Figura 1. Aspectos del funcionamiento del laboratorio
Fuente: (Sistema de Gestión de la Calidad en el Laboratorio, 2016)
21
El conjunto entero de operaciones que se producen en el análisis se llama itinerario del
flujo de trabajo. El itinerario del flujo de trabajo empieza en el paciente y finaliza en la
notificación e interpretación de los resultados.
Figura 2. Itinerario del flujo de trabajo.
Fuente: (Sistema de Gestión de la Calidad en el Laboratorio, 2016)
22
5.2. Hematología
Hemograma: CSC (Conteo Sanguíneo Completo) o biometría hemática es uno de los
elementos de diagnósticos básicos. Es un cuadro de fórmulas sanguíneas en el que se
expresan cantidad y variaciones de los elementos sanguíneos.
Recoge:
Cantidad de eritrocitos, hematocrito, hemoglobina e índices eritrocitarios
Recuento y fórmula leucocitaria,
Cantidad de plaquetas
En la Guia de Laboratorio Veterinario (Pérez, 2018); expone al hemograma como:
“El Hemograma o Cuadro Hemático es el examen de laboratorio rutinario utilizado con
mayor frecuencia por el veterinario, su principal objetivo es valorar cualitativa y
cuantitativamente los elementos formes de la sangre e indirectamente se emplea para
valorar la actividad de la médula ósea como productora de células sanguíneas, valora
además la concentración de hemoglobina, el hematocrito y el volumen de los glóbulos
rojos”.
Para (González De Cara, 2017); La hematologia es una de las ramas originarias de la
patologia clínica y del análisis laboratorial. En veterinaria, dada la amplia diversidad de
especies objetivo de la misma, es importante considerar las caraceristicas especie-
23
especificas de cada parámetro hemático, existiendo en numerosas ocasiones marcadas
idiosincrasias que impiden la extrapolación de datos entre las mismas.
Analizador hematológico: Un analizador hematología o analizador hematológico es un
aparato que permite efectuar un hemograma completo. En otras palabras, efectúa un
análisis cualitativo y cuantitativo de los glóbulos rojos (eritrocitos), de los glóbulos blancos
(leucocitos) y de las plaquetas (trombocitos).
Analizador hematológico Scil Vet ABC Classic: realiza un recuento completo de sangre
(eritrocitos, hemoglobina, leucocitos y trombocitos), diferenciando en tres poblaciones de
glóbulos blancos (linfocitos, monocitos y granulocitos), en 90 segundos. Muy fácil de usar,
con sólo pulsar un botón, la medición se inicia tomando 12 µl de sangre con EDTA.
EDTA (Ácido Etilen Diamino Tetracético): sales de sodio o potasio del ácido
etilendiaminotetraacetico, son poderosos anticoagulantes y suelen elegirse para el trabajo
hematológico normal (Gallo Lamping, 2014). Es el anticoagulante que mejor conserva las
células sanguíneas. Actúa como anticoagulante por ser quelante del calcio de la muestra. La
concentración de la muestra debe ser de 1-2 mgr/ml de sangre.
Posteriormente, los resultados se pueden transferir automáticamente a la impresora o a
un software de gestión clínica, mediante nuestra herramienta scil veterinary Instrumet
Program (scil vIP), para una mejor gestión de sus pacientes. El equipo lleva un pack de
reactivo integrado en el aparato, de forma que los líquidos están disponibles sin la
24
necesidad de molestas botellas y tubos, y de la misma manera, los desechos se recogen en
el mismo pack (Medicalexpo, S,f)
Muy fácil de usar, con sólo pulsar un botón, la medición se inicia tomando 12 µl de
sangre con EDTA. Posteriormente, los resultados se pueden transferir automáticamente a la
impresora o a un software de gestión clínica, mediante nuestra herramienta scil veterinary
Instrumet Program (scil vIP), para una mejor gestión de sus pacientes.
El equipo lleva un pack de reactivo integrado en el aparato, de forma que los líquidos están
disponibles sin la necesidad de molestas botellas y tubos, y de la misma manera, los
desechos se recogen en el mismo pack (Medicalexpo, S,f).
5.3. Muestra sanguínea
La muestra de sangre es el procedimiento que permite acceder al torrente sanguíneo para
extraer una pequeña muestra de sangre, que será utilizada en diversas pruebas.
Sangre: es un tejido líquido, está formada por dos partes, las células y el líquido en el
que sobrenadan, que se denomina plasma.
(Pituco, Garcia, del Fava et al., 2017) en el “Manual Veterinario de Toma y Envió de
Muestras “, indican: La sangre representa cerca del 8% del peso corporal de un animal. Los
análisis de sangre son un importante apoyo para el diagnóstico clínico. Para que sean
representativas, se debe mantener la composición y la integridad de las muestras de sangre
durante las fases pre analíticas de recolección, manipulación, transporte y eventual
almacenamiento. Antes de la recolección de sangre para análisis de laboratorio, es
25
importante conocer, controlar y, si es posible, evitar algunas variables que pueden interferir
en la exactitud de los resultados como modificaciones en la dieta y uso de medicamentos.
Existen en el mercado diversos tipos de tubos de ensayo, que de acuerdo a su color se determina
el tipo de muestra a procesar; en el caso de los tubos de tapa color lila, los cuales contienen EDTA
una sal de potasio que sirve como anticoagulante, el cual se encuentra esparcido por las paredes del
tubo. Este sirve para almacenar la muestra de sangre (entera) cuando se van a realizar pruebas
hematológicas (conteo de células sanguíneas) o realizar frotis para ver en microscopio; por su parte
los tubos de tapa color rojo, contienen coagulantes y son utilizados cuando se requiere suero.
Existen dos modelos para este color, los que tiene el tubo hecho de material plástico y los de
material de vidrio. Los primeros contienen dentro agentes coagulantes, esparcido por las paredes, se
utiliza cuando se necesita del suero para hacer análisis; mientras que los segundos no contiene
ningún liquido o sustancia interna. Estos son usados para realizar estudios de presencia de drogas o
analizar anticuerpos (Velasquez, 2018).
(Pituco, Garcia, del Fava et al., 2017) en el “Manual Veterinario de Toma y Envío de Muestras”
describen que existen 5 tipos de tubos para la extracción de sangre, cada uno con características
diferentes para el tipo de análisis de laboratorio que sea necesario, se dividen en 2 grupos y se
diferencian por su color de tapa; uno con anticoagualnte (Lila, blanco y verde) y otro sin
anticoagulante (amarillo y rojo)
Tapa lila: recuento de sangre total.
Tapa blanca: recuento de sangre total, aislamiento biología molecular.
Tapa verde: exámenes bioquímicos y toxicológicos.
Tapa roja: identificación de anticuerpos, plasma.
Tapa amarilla: identificación de anticuerpos, suero separado por gel.
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Teniendo en cuenta que el tamaño de la aguja a utilizar es importante para prevenir
coagulación y formación de hematomas; (Morton et al., S,f) indican, es posible extraer
sangre de la mayoría de las especies con una variedad de agujas de entre 10-50 mm de
longitud y entre 15-27 G de calibre. Así, la extracción de sangre de la vena yugular de
grandes mamíferos, por ejemplo animales de granja, perros, gatos y algunos primates
podría llevarse a cabo con una variedad de agujas de entre 14-20 G x 25-40 mm.
Anticoagulante: es una sustancia endógena o exógena que interfiere o inhibe
la coagulación de la sangre, creando un estado antitrombótico o prohemorrágico.
Se distinguen sustancias endógenas, producidas por el propio organismo y
sustancias exógenas (fármacos).
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6. Metodología
6.1. Recolección de la información
La clínica en cuestión cuenta con el Sofware Veterinario Vetesoft; sistema que contiene
diferentes módulos, entre los que se encuentran Historia Clínica, Laboratorio y Control de
Vacunación.
Figura 3. Sofware Veterinario Vetesoft
Fuente: Fotografía tomada en Clínica Veterinaria Mascotas & Mascoticas.
Una vez ingresa el paciente a la clínica, se procede a realizar el registro y la revisión o
creación de la Historia Clínica correspondiente; asi como la actualización de datos y
verificación de los mismos.
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Figura 4. Historia Clinica.
Fuente: Fotografía tomada en Clínica Veterinaria Mascotas & Mascoticas
6.1.1. Toma de la muestra y registro de resultados
Tomando como base esta información y el diagnóstico de la anamnesis y examen físico
sistemático; se determina sí el paciente requiere de una muestra de sangre, en dado caso es
tomada y posteriormente se realiza el registro de los datos arrojados.
Los resultados son arrojados por el analizador hematológico Scil Vet ABC Classic.
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Figura 5. Ingreso datos de laboratorio.
Fuente: Fotografía tomada en Clínica Veterinaria Mascotas & Mascoticas
Figura 6. Ingreso datos hemograma.
Fuente: Fotografía tomada en Clínica Veterinaria Mascotas & Mascoticas
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6.2. Análisis estadístico
De acuerdo a los objetivos planteados para el desarrollo de la presente propuesta, se llevo a cabo
un estudio descriptivo cualitativo; partiendo de la investigación observacional en el entorno habitual
del estudio clínico y el análisis del comportamiento basado en la experiencia.
Teniendo en cuenta que el tipo de estudio es descriptivo cualitativo, el análisis se realiza
tomando como base la obsevación y la aplicación de los conocimientos adquiridos, para de
esta manera poder realizar el protocolo de una manera lógica.
31
7. Resultados
Tabla 1. Protocolo veterinario para el manejo y procesamiento de muestras sanguineas.
3.3. PROCESO DE DIAGNÓSTICO & TOMA DE MUESTRAS
3.1. Ingreso de paciente, valoración y diagnóstico
En este proceso al ingreso del paciente, se revisa su historia clínica o se le realiza apertura de la misma en Sistema Veterinario VETESOFT. La cuál de debe especificar datos como: raza, edad, sexo,
Se realiza diligenciamiento de la ficha de ingreso, para conocer la sintomatología y proceder a realizar una anamnesis minuciosa y un examen físico sistemático, que permita confirmar la presencia o ausencia de patologías graves; también se solicita información sobre si el paciente se encuentra al día tanto con las vacunas correspondientes como con los antiparasitarios.
Sí posterior a la valoración realizada por el médico veterinario, éste establece que es necesario realizar la toma de muestra de sangre del paciente, con la finalidad de tener un diagnóstico más oportuno, se procede a su realización.
Imágenes de apoyo
Figura 7. Registro y actualización Historia Clínica VETESOFT
Fuente: Clínica Mascotas & Mascoticas
3.2. Toma de muestra
Si el paciente está asustado, nervioso o agresivo, se le debe suministrar una dosis de tranquilizante.
Posteriormente se procede a colocar el bozal y a desinfectar la zona, de donde va a ser extraída la muestra de sangre, por lo que se procede a colocar un torniquete y a desinfectar con alcohol.
Generalmente la toma de la muestra se realiza de la braquial, pero si el paciente es muy cachorro se debe tomar de la yugular, ahora, si el paciente se encuentra en estado crítico o no se le encuentra la vena, o viene de otra clínica donde ya le han extraído muestras, también se puede tomar de la femoral.
Se usa una aguja tamaño 21
Se puede utilizar un tubo vial, y se le adiciona una gota de anticoagulante EDTA, o un tubo vacutainer tapa morada.
El tubo tapa lila: cuadro hemático o conteo celular, incluido plaquetas y
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cualquier otro resultado que se obtiene del tupo tapa lila.
El tubo tapa roja: perfil bioquímico, pruebas de funcionalidad de integralidad hepática, toroides, colesterol y todas las prunas de un perfil bioquímico, y serologia.
Durante todo el procedimiento el Médico Veterinario debe utilizar guantes de látex.
Una vez tomada la muestra es procesada en el analizador hematológico Scil Vet ABC Classic.
En el caso fortuito de que, no se pueda utilizar el analizador (ya sea porque no hay luz, o no está funcionando), se realiza analiza mediante microscopio, realizando un extendido de sangre sobre las cámaras de recuento, para poder realizar el análisis del hemograma correspondiente.
Finalmente, la muestra de sangre es colocada en la gradilla para su conservación y posterior desecho.
Se debe tener en cuenta que pasadas 12 horas, la sangre empieza a presentar coágulos por lo que es necesario revolverla, lo que hace que el resultado no sea tan fiable, ya que se desintegran los glóbulos rojos.
Imágenes de apoyo
Figura 8.Anticoagulante Figura 9.Tubo Vial
Fuente: Clínica Mascotas & Mascoticas Fuente: Clínica Mascotas & Mascoticas
Figura 10. Gradilla Figura 11. Vacutainer tapa morada
Fuente: Heathrow Scientific HD27512A Fuente: legacy.bd.com vacutainer tapa
Gradilla para tubos de ensayo morada
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Figura 12. Microscopio Figura 13. Cámara de recuento Howard
Fuente: Clínica Mascotas & Mascoticas Fuente: marienfeld-superior.com/camaras-de-
Recuento.html
Tabla 2. Tubos para extracción de sangre.
Fuente: (Pituco, y otros, 2017)
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Tabla 3. Medidas de las agujas.
Fuente: (Pituco, y otros, 2017).
3.3. Identificación de la muestra
La muestra debe ser identificada en el momento de la extracción para minimizar errores. Con el fin de garantizar la rastreabilidad de la muestra, ésta debe ser identificada o rotulada, con una etiqueta adhesiva y un sharpie, como mínimo debe enunciarse el nombre o número del paciente y el número de historia clínica; edad, sexo y hora y fecha de muestreo; lo cual debe coincidir con el registrado en el formulario de recolección. Los datos de la muestra se deben incorporar al Sistema Veterinario Vetesoft donde figuran todos los análisis; los que se realizaron y los que se encuentran en espera.
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Imágenes de apoyo
Figura 14. Módulos de ingreso información de resultados de laboratorio
Fuente: Clínica Mascotas & Mascoticas
Figura 15. Rotulado
Fuente: http://www.atensalud.com/2017/10/analisis-de-sangre.html
3.4 Análisis hematológico
Hemograma El hemograma proporciona el recuento de glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas. Para la realización del análisis hematológico se tiene en cuenta el hecho de que la sangre se encuentre en buen estado y en el tubo correspondiente; se debe verificar que la sangre no contenga ningún coagulo. También debe ajustarse la cantidad de sangre que se echa al anticoagulante que hay en el tubo. En llegado caso en el que no se realice el análisis dentro de las dos o tres horas siguientes a la toma de la muestra, esta debe ser refrigerada a 4° C. La clínica cuenta con el analizador hematológico Scil Vet ABC Classic realiza un recuento completo de sangre (eritrocitos, hemoglobina, leucocitos y trombocitos), diferenciando en tres poblaciones de glóbulos blancos (linfocitos, monocitos y granulocitos), en 90 segundos. Analiza sangre de 5 especies diferentes: Conejos, vacas, gatos, perros y caballos.
Muy fácil de usar, con sólo pulsar un botón, la medición se inicia tomando 12 µl de sangre con EDTA. Posteriormente, los resultados se pueden transferir automáticamente a la impresora o a un software de gestión clínica
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El analizador lleva un pack de reactivo integrado en el aparato, de forma que los líquidos están disponibles; de la misma manera, los desechos se recogen en el mismo pack. Los resultados son totalmente fiables, ya que, al encender la máquina se realiza una prueba de error, en la cual se desechan las células remanentes de otras muestras, garantizando que el programador inicie de cero. Frotis sanguíneo Para completar un análisis hematológico se realiza un frotis sanguíneo. Se obtienen lecturas de posibles hemoparasitos o morfología celular u cualquier otra característica o condición que pueda ser observada. Recogida de muestra, se extenderá una pequeña gota de sangre sobre una lámina de vidrio (portaobjetos) para formar una película delgada (frotis sanguíneo). Se dejará secar al aire, y luego se fijará con metanol, después se teñirá. Los frotis sanguíneos también deben ser preparados inmediatamente después de haber obtenido la muestra o como máximo transcurridas 2 horas tras la extracción de la sangre. • Si el frotis, una vez hecho, no puede teñirse inmediatamente, es importante por lo menos fijarlo sumergiéndolo en metanol durante dos minutos Análisis bioquímicos La sangre es un tejido líquido, está formada por dos partes, las células y el líquido en el que sobrenadan, que se denomina plasma. El plasma se obtiene tras centrifugar la sangre que se ha introducido en un tubo con anticoagulante. Contiene factores de la coagulación (fibrinógeno). Si se pone sangre en un tubo de ensayo sin anticoagulante y se deja reposar unos minutos se forma un coágulo; posteriormente, el coágulo se contrae y se separa de un líquido ambarino y transparente, el suero sanguíneo. Suero Para obtener suero para hacer las pruebas bioquímicas la muestra de sangre debe introducirse en un tubo seco sin anticoagulante. Esta muestra de sangre para suero se deja a temperatura ambiente en posición vertical hasta que se coagule y se inicie la retracción del coágulo (30-40 minutos después de obtener la muestra). Posteriormente se centrifuga el tubo a 2500-3000 rpm (5-10 minutos) para separar el suero del coágulo. Esta separación se realizará preferentemente dentro de las dos horas siguientes a la toma de muestras para evitar el intercambio de compuestos entre las células y el suero y que la muestra se deteriore. Plasma Para obtener plasma, las muestras se recogerán en tubos que contengan heparina, preferentemente de litio, ya que este anticoagulante interfiere en muy pocas determinaciones bioquímicas. Es muy importante adicionar al tubo el volumen de sangre indicado en el mismo. • El plasma se obtiene centrifugando la muestra a 2500-3000 rpm (5-10 min). Se separará el plasma de las células dentro de las dos horas después de la toma de muestras.
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Imágenes de apoyo Analizador hematológico Scil Vet ABC Classic
Figura 16. Analizador Hematológico Scil Vet ABC Classic
Fuente: Clínica Mascotas & Mascoticas
3.5 Conservación y almacenamiento de la muestra
Si las determinaciones no se realizan una vez obtenida la muestra, se conservará de la siguiente manera:
El suero/plasma a 4ºC (refrigeración)
Se conservará el suero/plasma a -18 ºC (congelación): Hay muy pocos compuestos que no son estables a esta temperatura durante largo tiempo
3.6. Recepción de muestras de otros laboratorios
Teniendo en cuenta que, en el laboratorio de la clínica se recepcionan muestras de sangre, provenientes de municipios aledaños, se debe tener en cuenta: A estos pacientes también se les crea la historia clínica y el registro del paciente. Es importante exigir a los veterinarios que junto al envió de la muestra, se especifiquen datos de especie, raza, edad, datos del dueño del paciente y nombre y diagnóstico del paciente; con el fin de garantizar que la historia clínica pueda ser diligenciada en su totalidad. Lo ideal es que la muestra sea enviada en una cava para que se conserve adecuadamente. Una vez se cuente con los resultados, se ingresan al sistema, se realiza la impresión y son enviados a través de correo electrónico o por WhatsApp.
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8. Discusión
En el Manual de diagnóstico en laboratorio clínico veterinario. Realizado en Managua
por Gallo Lamping, (2014); se indica que la obtención de una muestra en buenas
condiciones dependerá de la asepsia, la sujeción del paciente, la técnica para la extracción
de sangre; así como también la manipulación y remisión de la muestra. En el método de
recogida de sangre resalta la punción cutánea para pequeñas cantidades de sangre y la
punción venosa para grandes cantidades, en el laboratorio de la clínica veterinaria Mascotas
& Mascoticas generalmente la toma de muestra se realiza de la branquial, pero si el
paciente es muy cachorro se debe tomar de la yugular, ahora, si el paciente se encuentra en
estado crítico o no se le encuentra la vena, o viene de otra clínica donde ya le han extraído
muestras, también se puede tomar de la femoral.
En lo referente a la sangre en el manual se especifica que debe ser fresca, recién
obtenida y en lo posible evitarse realizar frotis de sangre con anticoagulante; pues la más
fina morfología de las células resalta en sangre sin anticoagulante, mientras que la mayoría
de anticoagulantes tienden a distorsionar las células. En caso que no pueda evitarse usar
sangre con anticoagulante, debe tenerse en consideración las características de los
diferentes anticoagulantes. En la clínica Mascotas & Mascoticas dado el caso en el que no
se realice el análisis dentro de las dos o tres horas siguientes a la toma de la muestra, esta
debe ser refrigerada a 4° C; además teniendo en cuenta que las muestras son procesadas en
el analizador hematológico Scil Vet ABC Classic que realiza el recuento completo de
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sangre en 90 segundos, las determinaciones se realizan una vez se tome la muestra, a la
mayor brevedad posible.
En el procedimiento de identificación de la muestra especificado por la Clínica Mascotas
& Mascoticas; se encuentra relación con lo expuesto por Aguilar Bobadilla, J. (2009), en el
módulo Métodos y Técnicas de Diagnostico del diplomado en medicna, cirugía y
zootecnia en perros y gatos; en donde enuncia que, las muestras deben identificarse
correctamente con los siguientes datos: Nombre del paciente, especie, raza, sexo, edad,
hora y fecha de muestreo. Esto es necesario para hematología, bioquímica, urianálisis y
citología de líquidos. Señalar con tinta roja si existe sospecha de rabia, tuberculosis, bru-
celosis, leptospirosis, salmonelosis u otra enfermedad transmisible al hombre, con el fin de
tomar las precauciones debidas durante el manejo de la muestra en el laboratorio. Describir
la anamnesis con los hechos más relevantes, como la presencia de diarrea, vómito,
anorexia, hiporexia, fiebre, etcétera, y mencionar los días de duración.
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9. Conclusiones
Se elabora el protocolo detallando los procedimientos para el manejo y
procesamiento de muestras sanguienas en el laboratorio de la Clínica Mascotas &
Mascoticas San Gil – Santander.
Se realiza la redacción clara, técnica y sistematica del trabajo que debe
seguirse para la toma de muestras sanguienas en el laboratorio de la Clinica
Mascotas & Mascoticas San Gil – Santander.
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