necropsia de rumiante

7/31/2019 necropsia de rumiante

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UNA HERRAMIENTA DE DIAGNSTICO BASADAEN LA IDENTIFICACIN DE PARSITOS Y LASLESIONES QUE PRODUCEN

ATLAS

DE PATOLOGAPARASITARIAEN RUMIANTES

Magdalena Garijo ToledoJoaqun Ortega PorcelJess Cardells PerisM Teresa Gmez Muoz


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. TOMA, CONSERVACIN Y ENVO DE MUESTRAS. DIAGNSTICO LABORATORIAL

NECROPSIA

El objetivo de una necropsia es identificar los principales procesos patolgicos que presenta un animal y, sies posible, conocer la causa de la muerte. Para ello se realiza un examen minucioso, ordenado y completodel cadver y se toman las muestras necesarias para llevar a cabo distintas pruebas laboratoriales.

1. Preparacin de la necropsiaLa necropsia debe realizarse lo ms rpido posible para evitar los procesos de autolisis y putrefaccin.

Si no se puede hacer de forma inmediata, se debe refrigerar el cadver, pero no congelarlo, ya que laformacin de cristales de hielo alterara la estructura de los tejidos.

Hay varias cosas que deben realizarse antes de comenzar la necropsia:

- Recopilar informacin relacionada con el animal que se va a estudiar. Es importante conocer cuntos

animales estn afectados (o han muerto), qu edad tienen, qu signos clnicos presentan (diarrea, pro-

blemas respiratorios, etc.), cundo comenzaron estos signos...

- Preparar el material necesario para realizar la necropsia. Se usarn cuchillos, tijeras, pinzas, un cos-

totomo para abrir la cavidad torcica (se pueden usar unas tijeras de podar) y un hacha o sierra para elcrneo (figura 1). Tambin es conveniente tener cerca una fuente de agua para poder lavar las vsceras y

examinarlas con detalle.

- Si el animal an est vivo, se realiza un examenante mrtem. Este examen es muy til para diag-nosticar signos neurolgicos (por ejemplo, en una oveja con cenurosis se puede identificar el torneo

caracterstico de esta enfermedad). Tambin se puede obtener sangre de la vena yugular si se considera

necesario.

- Sacrificio (en animales enfermos que se han remitido vivos). Para realizar el sacrificio se utilizar una

inyeccin intravenosa de solucin eutansica en la vena yugular (figura 2). Es importante sujetar bien al

animal, para evitar que se mueva, ya que esta solucin causa necrosis tisular si se extravasa.

- Examen post mrtem externo. Se valora el estado de conservacin del cadver y el estado nutricional.

Se palpan los ganglios linfticos superficiales, las articulaciones y los huesos. Se examina la piel, la gln-

dula mamaria, el ombligo, las pezuas y la posible presencia de ectoparsitos. Tambin se examinan las

aberturas naturales (fosas nasales, cavidad oral, conjuntiva ocular, odo externo, vulva, prepucio y ano)

en busca de contenidos anormales o cambios en la coloracin de las mucosas (color blanquecino es

indicativo de anemia o amarillo de ictericia; figuras 3 a 5).


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DIAGNSTICO POST MRTEM

Figura 2. Inyeccin de solucin eutansica en vena yugular.

Figura 1. Kit bsico de necropsias: cuchil lo, sierra y costotomo.


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Figura 5. Examen del ano.

Figura 3. Examen de la conjuntiva ocular. Figura 4. Examen de la cavidad oral.


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2. Realizacin de la necropsia*a) Colocacin y estabilizacin del cadver

La necropsia se puede realizar de dos formas: en decbito supino (figura 6) o en decbito lateral (figura 7).En este ltimo caso, siempre se har con el lado izquierdo apoyado en el suelo para que la localizacindel rumen no dificulte el examen de la cavidad abdominal. En pequeos rumiantes se pueden usarambas formas, aunque en vacuno, debido a su tamao, es ms cmodo hacerla en posicin lateral. Encualquier caso, lo importante es realizar siempre la necropsia del mismo modo, para familiarizarse conla localizacin anatmica de las vsceras y as poder identificar posibles anomalas.

Si se realiza la necropsia en decbito supino, el cadver se estabiliza separando las cuatro extremidades.Para separar las extremidades posteriores es necesario cortar el ligamento de la cabeza del fmur y desar-ticular la cadera (figura 8). Si se opta por la necropsia en decbito lateral, solo se separar la extremidadanterior y posterior derecha (figura 9).

*Nota del autor: Teniendo en cuenta el objetivo de este libro, se han resumido algunos aspectos de la tcnica de necropsia y se ha profun-dizado en aquellos que se consideran ms importantes para el diagnstico de enfermedades parasitarias.

Figura 6. Necropsia en decbito supino.


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Figura 7. Necropsia en decbito lateral.

Figura 8. Desart iculacin de la cadera. Figura 9. Separacin de la extremidad anterior derecha.


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Figura 12. Corte del ndulo linftico inguinal supercial.

Figura 10. Desollado. Figura 11. Desollado.

b) DesolladoPara retirar la piel se hace una incisin longitudinal por la lnea media que va desde el mentn hastala snfisis pbica (figura 10). Despus, se va retirando la piel hacia ambos lados y se examina el tejidosubcutneo (figura 11). Tambin se palpan y cortan lo distintos ndulos linfticos que se van observando(axilar, inguinal superficial, retrofarngeo, etc.) (figura 12), as como las glndulas salivares (mandibular,parotdea, etc.). Si se trata de un macho, el pene se deja a un lado y si es una hembra, la ubre se retirajunto con la piel y, posteriormente, se realizan cortes seriados para examinar la glndula mamaria.


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c) Apertura de la cavidad abdominal y torcicaLa apertura de la cavidad abdominal se realiza practicando un corte por la lnea alba, desde la apfisisxifoides del esternn hasta el borde anterior del pubis (figura 13). Despus, se corta la musculatura ab-dominal desde el esternn hasta la columna vertebral, hacia ambos lados, siguiendo la curvatura de lasltimas costillas.

A continuacin, se separan la grasa abdominal y los omentos, se observa la posicin de las vscerasabdominales y si existe algn contenido en dicha cavidad (sangre, orina, fibrina, heces, etc.). En estemomento, se pueden encontrar vesculas de cisticercos adheridas al mesenterio o a las serosas de losrganos abdominales (figura 14).

Para abrir la cavidad torcica, se har un corte aproximadamente a media altura de cada pared costal(para una necropsia en decbito supino) o un corte junto a la unin de las costillas con las vrtebras yotro junto a la unin costoesternal (para necropsias en decbito lateral). Se comprobar si existe algncontenido en cavidad torcica y, finalmente, se cortar el diafragma para dejar expuestas las vscerastorcicas (figura 15).

Figura 13. Apertura de la cavidad abdominal.


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Figura 15. Examen de la cavidad torcica.

Figura 14. Examen de las vsceras abdominales.


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d) Examen de los rganos abdominalesPara extraer el tracto digestivo se tiene que separar el esfago a la entrada de la cavidad abdominal ycortarlo cranealmente al cardias (figura 16). Despus se localizar el recto, se desplazarn las heces yse cortar (figura 17). En ese momento, se pueden tomar muestras de contenido fecal si se consideranecesario (figura 18).

Figura 16. Separacin del esfago (ntese la presencia de quistes de Sarcocystis spp.).


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Figura 18. Toma de muestra de contenido fecal.

Figura 17. Separacin del recto.


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Primero se extrae el bazo, que est adherido al rumen, y se realizan varios cortes seriados para examinarsu parnquima.

Para examinar el tracto digestivo se har un corte a nivel del ploro y se separar el intestino del abomasoy de los preestmagos. Este es un buen momento para examinar el pncreas, que se encuentra juntoal duodeno. Para examinar el rumen, se incide en el esfago y, desde ah, se abren los sacos dorsal yventral siguiendo los pilares ruminales. A continuacin, se abren el retculo, el omaso y el abomaso(por la curvatura mayor), se retira el contenido y se examina la mucosa (figura 19). Si se sospecha dehemoncosis u ostertagiosis, hay que guardar el contenido abomasal y enviarlo al laboratorio para suestudio parasitolgico.

Aunque es bastante laborioso, en el caso de las enfermedades parasitarias, es fundamental abrir y exa-minar la totalidad del intestino delgado y grueso. Para ello, se separar el intestino del mesenterio, sedispondr en horquillas paralelas y se abrirn las porciones rectas por el borde antimesentrico. Se bus-car la presencia de nematodos o cestodos en la luz intestinal, as como las lesiones que estos producentanto en la mucosa como en la serosa (figuras 20 y 21). Las zonas curvas quedarn sin abrir y se fijarn enformol para su estudio histopatolgico. En caso de que se necesite realizar aislamiento microbiolgicoo parasitario, antes de abrir el intestino se ligan algunos tramos que se consideren representativos (10-20 cm)y se envan refrigerados al laboratorio lo antes posible.

Figura 19. Mucosa abomasal con lesiones caractersticas de Ostertagia spp.


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Figura 21. Lesiones en serosa intestinal causadas por Oesophagostomum spp.

Figura 20. Lesiones en mucosa intestinal causadas por Stilesiaglobipunctata.


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A continuacin, se separar el hgado, que est adherido al diafragma (figura 22) y se examinar la cpsu-la heptica, que debe ser fina, lisa y trasparente (algunos parsitos como Fasciola hepatica o Cysticercustenuicollisproducen lesiones capsulares durante su migracin). Se valorar su tamao, forma, consisten-cia y coloracin y se realizarn mltiples cortes seriados. Al examinar la superficie de corte es importanteobservar si la pared de los conductos biliares est engrosada, lo cual sera indicativo de trematodosisheptica (fasciolosis o dicroceliosis). La apertura de la vescula biliar, as como el examen de su pared ycontenido, tambin es muy importante para el diagnstico de estas enfermedades (figura 23).

Para extraer el aparato genitourinario se separarn los riones de la grasa perirrenal, se localizarn lasglndulas adrenales (craneomediales al rin) y se les realizar un corte transversal para observar lacorteza y la mdula adrenal. Despus se desprenden caudalmente ambos riones, junto con los urte-res, hasta la vejiga de la orina. Para abrir la cavidad pelviana se realizarn cortes (con costotomo) craneal

y caudalmente a los agujeros obturados y se retirar el suelo de la pelvis. A continuacin se extraernambos riones, urteres, vejiga de la orina y el aparato reproductor. En el caso de las hembras se sepa-rarn las adherencias y los ligamentos que unen el aparato genital a la cavidad pelviana para extraerde forma conjunta con el aparato urinario. En los machos se cortar el escroto y se separar el testculo,el epiddimo y el cordn espermtico. Despus, se separarn las glndulas accesorias y se eviscerartodo junto. Los riones se cortarn sagitalmente, comenzando por la curvatura mayor. Una vez abiertos,se desprender la cpsula renal con unas pinzas y se examinarn la corteza, la mdula y la pelvis renal(figura 24).

Figura 22. Separacin del hgado.


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Figura 24. Examen de la corteza, mdula y pelvis renal.

Figura 23. Apertura de una vescula biliar que contiene Dicrocoelium dendriticum.


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e) Cavidad oral, cuello y cavidad torcicaLa evisceracin de la cavidad torcica se desarrolla de forma conjunta con los rganos del cuello y lacavidad oral. Por lo tanto, se va a separar de forma conjunta lengua, laringe, tiroides, trquea, esfago,timo, pulmones y corazn. La lengua se retirar a travs de la arcada mandibular, mediante dos cortesparalelos e internos a la rama de la mandbula (figura 25). Se tirar de la lengua caudalmente y, trascortar la unin con el paladar blando, se llegar al aparato hioideo. Este se podr desarticular cortandocon el cuchillo la unin cartilaginosa que hay entre el estilohioides y el queratohioides, o cortando loshuesos con el costotomo (figura 26). Para la extraccin de los rganos del cuello, se retirar la muscu-latura superficial de la zona hasta dejar al descubierto la trquea y el esfago. Aqu se podr examinarel tiroides a ambos lados de la laringe. A continuacin, se seguir cortando y tirando hacia atrs, conlo que se llevarn la lengua, trquea y esfago hasta la entrada del trax y se eviscerarn junto con los

rganos torcicos (figuras 27 y 28).

Figura 25. Extraccin de la lengua a travs de la mandbula.


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Figura 26. Desarticulacin del hioides.

Figura 27. Separacin de trquea y esfago.


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Posteriormente, con las tijeras, se abrir el esfago en toda su longitud. Es importante observar tanto lamucosa (donde podemos ver las lesiones caractersticas de Gongylonema spp.), como la tnica serosay muscular (donde es frecuente encontrar quistes de Sarcocystisspp.). De igual modo, se cortar lalaringe, se abrir la trquea y se continuar hasta los bronquios principales. Es importante examinarcon detalle la luz de estos rganos para poder detectar la presencia de nematodos broncopulmonares(figura 29).

La pleura que recubre al pulmn ha de ser lisa, brillante y transparente (aunque en el vacuno es lige-ramente ms gruesa y opaca que en otras especies, sobre todo en la zona caudal). En el pulmn seevaluar su forma, tamao, peso, consistencia y cambios de coloracin. Cabe sealar que es funda-mental prestar atencin a las zonas dorsales de los lbulos caudales, ya que ah es donde se localizan lamayora de las lesiones granulomatosas producidas por los nematodos broncopulmonares (figura 30).Despus, se realizarn cortes seriados de todos los lbulos para examinar el parnquima pulmonar.

Figura 28. Extraccin de los pulmones y el corazn.


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Figura 30. Granulomas parasitarios en los lbulos caudales del pulmn y linfadenomegalia.

Figura 29. Apertura de los bronquios principales mostrando la presencia de nematodos.


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La apertura del corazn se har siguiendo la circulacin sangunea: para ello, se entra por la vena cavaa la aurcula derecha, se pasa al ventrculo derecho, se contina paralelo al septo interventricular, sedeja el vrtice del corazn a la derecha de la tijera y se sale por la arteria pulmonar. El lado izquierdodel corazn se abre realizando un corte por la zona media del ventrculo y la aurcula izquierda. Poste-riormente, se corta por debajo de la vlvula mitral y se sale por la aorta (figura 31). Hay que evaluar lasuperficie endocrdica y las vlvulas tricspide, mitral y semilunares. Para el examen del miocardio, sedar un corte en el septo interventricular, a nivel del msculo papilar, y se observar tanto el color comola consistencia del msculo cardaco. En vacuno, se debe prestar atencin por si existiesen quistes ondulos calcificados de Cysticercus bovisy en ovino de C. ovis.

Figura 31. Corte de la vlvula mitral para mostrar la aorta.


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Figura 32. Apertura de la articulacin de la rodilla.

f) LocomotorTras la extraccin de todos los rganos, se procede al examen de las articulaciones y de la musculaturadel animal. Si no se observan alteraciones articulares evidentes, se realizar un muestreo representativode varias articulaciones. El estudio de estas se har tanto externa como internamente, tras su aperturamediante una seccin transversal (figura 32).

Del mismo modo, se realizarn cortes en distintos grupos musculares y se observar la consistencia y la coloracin.


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g) Cabeza y columna vertebralEn primer lugar hay que separar la cabeza del cuello a nivel de la articulacin atlanto-occipital. Justoantes de cortar la duramadre que recubre la mdula espinal es un buen momento para sacar lquidocefalorraqudeo (figura 33). Posteriormente, se retira la piel de la cabeza y la musculatura de la zona delos temporales y parietales para facilitar la adherencia de la sierra al hueso. Para abrir el crneo se reali-zarn tres cortes. Un corte a cada lado del agujero magno, que ir desde la cara interna de los cndilosdel occipital hacia el ngulo lateral del ojo y el ltimo corte, que une los dos anteriores, se realizar aunos 2 cm por detrs de las rbitas (figura 34). Si el animal presenta cuernos, este corte ser caudal ala insercin de los mismos. Una vez separada la bveda craneana, se proceder a la separacin de laduramadre. Por ltimo, se extraer el encfalo una vez cortados los nervios craneales y se introducircompleto en formol (figura 35).

Figura 33. Extraccin de lquido cefalorraqudeo.


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Figura 35. Examen del encfalo.

Figura 34. Apertura del crneo (encfalo cubierto por la duramadre).


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Para explorar la cavidad nasal se har un corte sagital y se examinarn los cornetes nasales (figura 36).A continuacin, con el hacha, se abrirn los senos frontales y maxilares (una de las localizaciones msfrecuentes de Oestrus ovis).

El examen del canal raqudeo ymdula espinal es ms fcil si se separa la columna vertebral del restodel animal. Se proceder a quitar la musculatura de la parte superior de las apfisis espinosas y trans-versas, luego se incidir con la sierra en ngulo de 45o a ambos lados para dejar al descubierto el canalmedular. Por ltimo, se eviscerar la mdula con ayuda de pinzas.

Figura 36. Corte sagital de la cabeza para examinar los cornetes nasales.


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Figura 37. Toma de muestras para histopatologa.

3. Toma de muestras para histopatologaSe deben tomar muestras de todos los rganos, ya que determinadas enfermedades no manifiestan lesionesmacroscpicas evidentes o bien pasan desapercibidas. En aquellos rganos en los que observemos lesio-nes, se tomar siempre una muestra del margen de la lesin, incluyendo tanto tejido afectado como sano.

En rganos parenquimatosos, las muestras se tomarn de forma perpendicular a la cpsula, mientrasque en los rganos membranosos (huecos) cuyo dimetro sea pequeo (como el intestino delgado), hayque tomar la circunferencia completa de una zona que est sin abrir.

El grosor de las piezas debe ser menor a 1 cm para garantizar una fijacin correcta. Las muestras debencolocarse en frascos rgidos con formol tamponado al 10% y la proporcin entre la muestra y el formoldebe ser de 1/10. El tejido tarda aproximadamente 24/48 h en fijarse.

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