PRACTICA 1: OBSERVACION EN FRESCO Y COLORACION

OBSERVACION DE CULTIVO EN FRESCO OBJETIVOS:

Poder reconocer y observar estructuras microbianas con el uso del microscopio.con diferentes tipos de preparaciones como en fresco, y apreciar el uso de la microbiología con diferentes microorganismos

METODOLOGIA:1) Se esteriliza el porta objeto con el mechero2) Se agrega dos gotas de melaza en el porta objeto3) Se esparce en la superficie de la lamina 4) Se agrega el cultivo a la muestra5) Se coloca el cubre objeto6) Se observa en el microscopio

RESULTADOS

Fig. numero 01: vista microscópica del preparado en fresco de la bacteria “BACILLUS NICHELIFORMIS”

Material biológico: Bacillus licheniformisTipo de preparado: En frecoObservaciones: BacillusObjetivo: 40xAumento: 400 aumento

OBSERVACION DE CULTIVO EN SECO OBJETIVOS:

Poder observar en la muestra, su forma , color, tamaño por medio del microscopio.

METODOLOGIA: Se esteriliza el porta objeto con el mechero Se agrega dos gotas de melaza en el porta objeto Se agrega el cultivo a la muestra Se pasó por el mechero para secar la muestra

RESULTADOS:

Muestra : Cultivo

Preparacion: En seco

Aumento : 400x

COLORACION GRAM O COMPUESTA OBJETIVOS:

Aprender a identificar la morfología bacteriana y tipo de tinción gran positivao gran negativas

METODOLOGIA:1) Esterilizar el portaobjeto2) Esterilizar el gancho 3) Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto4) Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo 5) Secamos la muestra6) Colocar dos gotas de violeta de cristal en la muestra dejándolo colorear por

dos minutos , quitar el exceso7) Colocar el lugol dejándolo reposar 2 minutos, quitar el exceso8) Lavar las láminas con alcohol de acetona hasta llegar a decolorar9) Por último echar zafranina dejándolo colorear 2 minutos10) Finalmente lavar con agua y dejar secar11) Llevar al microscopio

RESULTADOS:

g

Figura 02: Observacion de la bacteria BACILLUS LICHENIFORMIS en coloración compuesta

Muestra: Cultivo o suspensión bacterianaPreparación: En frescoAumento: 400x

COLORACION SIMPLE OBJETIVOS:

Aprender la técnica de preparación , y de coloración en el estudio microscópico de cultivos bacterianos

METODOLOGIA:1) Esterilizar el portaobjeto2) Esterilizar el gancho 3) Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto

4) Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo

5) Secamos la muestra6) Colocar dos gotas de azul de

metileno dejándolo colorear por un minuto

7) Se lava con agua 8) Se lleva al microscopio

RESULTADOS:

Figura 03: Observación microscópica de la bacteria BACILLUS LICHENIFOMIS en coloración simple

Muestra: Cultivo o suspensión bacterianaPreparacion : En frescoAumento: 400x

PRACTICA 2: MEDIOS DE CULTIVO

DILUSIONES

OBJETIVOS:

Es generar colonias aisladas mediante una dilución, en un medio de cultivo

METODOLOGIA:1) Preparar 250 ml de solución salina fisiológica al 0,85%2) Agregar 4,5 ml de solución salina fisiológica a cada frasco: 10−1, 10−2 y 10−3.3) Agregar una muestra de microbio utilizando el asa bactereológica añadiendo

dicha muestra al frasco de 10−1 solución salina fisiológica.

4) Transportar una parte de la muestra (0,5ml) de la dilusión del frasco de 10−1 a otro

frasco ( 10−2) realizando éste mismo proceso para el frasco de 10−3.

5) Del frasco de 10−1 extraer 0.1ml y colocar una gota en la muestra de agar MacK Conkey

6) Esterilizar el asa triangular, pasar por la superficie de la placa Petri para su enfriamiento

7) Esparcir la gota de la dilusión por todo el cultivo8) Esterilizar el asa triangular 9) Se realizó en mismo procedimiento con el frasco de 10−2

10) Para finalizar se cubrieron las placas. RESULTADOS:

Figua01: Diluciones con solución salinica

PRACTICA 3: OBSERVACION DE CULTIVOS

RESULTADOS:

PRACTICA 4: INHIBICION DE LAS BACTERIAS EFECTO DE LOS DESINFECTANTES Y ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO

BACTERIANO

OBJETIVOS:Saber si el microorganis puede ser resistente

RESULTADOS:p

BACTERIAS INIBICION POR DESINFECTANTES

RESISTENTES INTERMEDIOS SENSIBLE

BACILUS SP X

ECHARICHIA COLI X

ESPECIE BACTERIANA

CARACTERÍSTICAS

COLOR TAMAÑO BORDE ASPECTO ELEVACIÓN

E. COLI Mostaza Mediano Ondulado Cremoso Convexo

BACILUS SP Crema Grande Ondulado Cremoso Plano

BACILUS SP Crema Pequeño Ondulado Cremoso Plano

VIBRIO PARAEMOLITUCUS

Verde Pequeño Ondulado Brillante Convexo

VIDRIO PARAEMOLITUCOS

PRACTICA 5: METABOLISMO BACTERIANO

Prueba 01: Hidrolisis de almidón

OBJETIVOS:

Ver si las bacterias son capaces de llegar a utilizar el almidón como nutrienteSaber que bacterias producen amilasa

Metodologia:

Sembramos un cultivo en una placa Petri, en donde la especie bacteriana será BACILLUS, y lo sembramos en un medio de AGAR ALMIDÓN (AA).

Este medio de cultivo se colocó a una temperatura de 37°C por 24 horas. Luego añadimos una cantidad suficiente de solución yodada de lugol al medio de

cultivo sin tener contacto el BACILLUS directamente, es decir la solución debe ser añadida al contorno de la especie bacteriana.

Luego esperamos unos segundos para ver cómo actúa la solución yodada en este medio de cultivo.

Finalmente apuntamos lo observado.

RESULTADOS:

Figura 01: resultado de la prueba de hidrolisis de almidon

Identificación de gran (+) y gran (-) Muestra que hay almidón por la coloración azul alrededor de la placa petri

Prueba 02: Diferenciación de pseudomas

METODOLOGIA:

Tenemos 2 tubos de ensayo, en donde cada uno es una muestra diferente, las cuales, estuvieron en AGAR DESOXICOLATO.

Observamos cómo reaccionan cada una de ellas.

Finalmente apuntamos la reacción tanto del tubo de ensayo donde había presencia de SALMONELLA y en el otro tubo de ensayo donde había presencia de ESCHERICHIA COLI.

FIGURA 02 : Identificación de Pseudomonas en el tubo amarillento.

Prueba 03: SIEMBRA EN PUNTURA

METODOLOGIA:

Para esta prueba trabajamos con dos tipos de muestras diferentes. Una de ellas es

SALMONELLA y la otra es ESCHERICHIA COLI.

Estas muestras fueron colocadas en un medio de cultivo de AGAR TRIPLE AZUCAR

HIERRO (TSI).

Con un asa bacteriológica (en punta) coger una cantidad significativa del medio de

cultivo.

Introducir la punta hasta el fondo

del tubo.

Luego se retira el asa, se estría el

pico con un movimiento en forma

de zigzag, de un lado al otro

Incubar a una temperatura de 35-

37°C por 24 horas

Luego esperamos a ver los

cambios que ocurrieron en las dos

muestras

RESULTADOS:

FIGURA 03: Observacion de bacterias reductoras (E. coli)

PRUEBA Nº04: OBTENCIÓN DE DIÓXIDO DE CARBONO (CALDO GLUCOSADO)

Objetivos:

Determinar crecimiento de hongos y levaduras

METODOLOGIA:

Colocamos glucosa en un tubo de ensayo.

Luego colocamos la campana de Durham

dentro del tubo de ensayo para la obtención

del Dióxido De Carbono

Luego observar si hay presencia de Dióxido

De Carbono en el tubo de ensayo.

RESULTADOS:

FIGURA 04: Observacion de gas en los tubos

PRUEBA 05: CALDO PECTONADO

METODOLOGIA:

Poner en un tubo de ensayo el caldo de

peptona

Luego poner el papel acetato de plomo,

para incubar la muestra por 37

centígrados por 24 horas.

Luego revisar si se ha manchado el papel

de color negro.

RESULTADOS:

FIGURA 05: Turbidez en las soluciones del tubo