Informe: búsqueda y aplicaciones del

Staphylococcus aureus

Tecnólogo Químico

Grupo A2

Alejandra HernándezJulieta Perdomo

Juliana Viera

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ÍNDICE

BÚSQUEDA

TINCIÓN DE GRAM

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

RESULTADOS DE LA BÚSQUEDA

APLICACIONES

IMPORTANCIA DEL STAPHYLOCOCCUS AUREUS EN DISTINTAS INDUSTRIAS

Industria de la carne

Industria de la leche

Industria de la pasta

MAPA CONCEPTUAL

BIBLIOGRAFÍA

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BÚSQUEDA

Una búsqueda consiste en:

a) Enriquecimiento: que sirve parra aumentar la cantidad de microorganismos en medios no selectivos favoreciendo el crecimientos de todas las especies presentes.

b) Aislamiento selectivo: se hace en medio sólido generalmente selectivos y diferenciales. Se debe reconocer el crecimiento de colonias típicas de acuerdo al microorganismo buscado.

c) Reaislamiento: se hace en medio no selectivo por método de estrías. Es necesario para asegurar la obtención de un cultivo anéxico verificando que no crezcan otros microorganismos inhibidos en la etapa anterior.

d) Identificación través de pruebas bioquímicas: donde se estudia su metabolismo y la actividad enzimática.

Se preparó 10g de muestra con 90 mL de caldo TSB y se realizó un aislamiento con siembra en superficie en 3 medios selectivos para 3 microorganismos:

Medios selectivos para aislamiento

Colonias típicas

Escherichia Coli EMB-Levine Colonias negras habitualmente con brillo metálico verdoso bajo luz reflejada

Mac Conkey Colonias rojas comunmente con halo de bilis precipitado

Pseudomonas aeruginosa

Agar cetrimida Colonias castaños claro con pigmento verde-azulado que flluorece al UV y difunde al medio

Staphylococcus aureus

Manitol Sal Agar Colonias amarillas rodeado de halo amarilloBaird Parker Colonias negra brillantes rodeadas de un halo claro

Mac Conkey selectivo para Escherichia Coli.

Componentes CantidadPeptona 17gLactosa 10g

Sales Biliares 1,5gNaCl 5gAgar 13,5g

Rojo Neutro 0,03gCristal Violeta 1g

Agua 1L

Las Peptonas son la fuente de Carbono y Nitrógeno como nutrientes. Contiene también Lactosa para saber si el microorganismo es capaz de fermentar, que se nota por el viraje de rojo a anaranjado del Rojo Neutro (indicador). Las sales biliares que se encuantran solo en el

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intestino porque lo que permite el crecimiento de enterobacterias. Cristal Violeta que sirve para inhibir gram positivas, y NaCl para mantener presión osmótica.

Agar cetrimida selectiva para Pseudomonas aeruginosa.

Componentes CantidadPeptona de gelatina

(como fuente de Nitrógeno y Carbono)

20g

Cloruro de Mg 1,4gK2SO4 10,0g

Cetrimide 0,3gAgar-agar 13gGlycerol 10mL

Agua 1L

Cetrimida tiene poder antimicrobiano, por lo que inhibe la mayoría de los microorganismos que estan con las Pseudomonas, siendo ésta resistente. El glicerol que no todos los microorganismos son capaces de aprovechar.

Manitol Sal Agar (MSA) selectivo para Staphylococcus aureus .

Componentes CantidadPeptonas 10g

Extractos de carne 1gNaCl 75g

D-Manitol 10gRojo Fenol 0,025g

Agar 12gAgua 1L

Concentración de NaCl debido a que Staphylococcus resiste altas concentraciones. Manitol debido a que solo algunos son capaces de fermentarlo y se visualiza por el viraje del medio debido al Rojo Fenol (indicador) a color amarillo.

Luego de la incubación de todos los medios durante 48 hrs a 35±2ºC se observó crecimiento de colonias en el medio MSA. Las colonias eran típicas de Staphylococcus aureus en MSA: amarillas rodeadas de un halo amarillo (medio). En nuestro ensayo casi todo el medio había virado a color amarillo pues la observación se realizó una semana después del comienzo de la incubación. Solo se veía al

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medio original (rojo) en la porción de placa donde no había crecimiento de ningún microorganismo.

Se hizo un reaislamiento en medio NO selectivo (Agar nutriente) para corroborar que el microorganismo aislado era un cultivo anéxico. Se obtuvieron colonias uniformes y algunas aisladas del microorganismo.

Para el diagnóstico de Staphylococcus aureus se considera:

a) La habilidad de crecer en presencia de 7,5-10% de NaClb) La habilidad de crecer en presencia de 0,01-0,05% de LiClc) La habilidad de crecer en presencia de 0,12-1,26% de glicinad) La habilidad de crecer en presencia de 40mg/L de polimixina (antibioticos selectivos

para gram negativos)e) La habilidad de reducir el K2TeO3 produciendo colonias negras aeróbica y

anaeróbicamentef) La forma, color , apariencia y tamaño de la coloniag) Actividad coagulasah) La habilidad de hidrolizar yema de huevoi) La producción de fosfatosj) La producción de β-galactocidasak) La producción de α-toxinasl) La producción de acetonam) La resistencia al novobiocina (antibiótico)n) La presencia de ácido teicoico y proteína Ao) La fermentación de manitol, maltosa, xilosa, sucrosa y trealosap) Crecimiento a 42/43ºC en medio selectivo

TINCIÓN DE GRAM

Luego del procedimiento de coloración de gram se visualizaron al microscopio con aumento 100x cocos gram positivos agrupados en racimos.

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PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Por último se realizaron las prubas bioquímicas del metabolismo para la identificación del microorganismo, con la finalidad de analizar la producción de enzimas, capacidad o no de fermantación o producción de gases, etc.

Pruebas para Staphylococcus aureus: Dnasa, Coagulasa, Catalasa

Catalasa

La catalasa es una enzima que descompone el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua. La catalasa es una hemoproteína de estructura similar a la de la hemoglobina, excepto que los 4 átomos de hierro de la molécula están en estado oxidado (Fe3+) en lugar de reducido (Fe2+).

Excluyendo los estreptococos, la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas poseen actividad catalasa.

Principio: El peróxido de hidrógeno se forma como uno de los productos finales del metabolismo oxidativo aeróbico de los carbohidratos. Si se deja acumular, el peróxido de hidrógeno es letal para las células bacterianas. La catalasa transforma el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno de acuerdo a la siguiente reacción:

H2O2 → H2O + O2 (burbujas de gas)

La prueba de la catalasa llevada a cabo en portaobjetos con palillo estéril, para evitar la contaminación del anza si tiene hierro, es comúnmente utilizada para diferenciar Streptococcus (catalasa negativa) de Staphylococcus (catalasa positiva). Se coloca una gota de H2O2 y se añaden los microorganismos. Éste posee catalasa si se producen en la superficie burbujas, de lo contrario la enzima no está presente. Hay otras enzimas que producen gas a partir de

la descomposición de peróxido pero lo hacen de forma mucho mas lenta.

Se observó un burbujeo intenso al colocar con palillo estéril parte de una colonia sobre el peróxido, confirmando la capacidad de reaccionar formando oxígeno gaseoso.

DNAsa

La actividad desoxirribonucleasa (DNAsa) se ha demostrado fundamentalmente en los géneros Staphylococcus y Serratia y consiste en la propiedad de degradar el ADN a fracciones de menor peso molecular. Weckman y Catlin demostraron la estrecha correlación entre la producción de DNAsa de los cultivos de Staphylococcus aureus con la producción de coagulasa.

Principio: Los micoorganismos DNAsa positivos degradan el DNA cuando son incubados en un medio que lo contiene. Esto puede ser visualizado de diferentes maneras: ya sea inundando las placas crecidas con HCl 0,1 N y observando zonas transparentes alrededor de las

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estrías o incorporando al medio indicadores como azul de toluidina o verde de metilo (viran a rosado cuando el test es positivo).

Medios y reactivos

Componentes CantidadTriptosa 20g

ADN 2gNaCl 5gAgar 15g

Azul de toluidina o verde de metilo 0,1gAgua 1L

Procedimiento

Estriar la superficie de la placa e incubar a 35°C durante 18-24 horas.

Interpretación

Observar el viraje del indicador a rosado alrededor de las estrías.

Se pudo visualizar con dificultad a través de la placa, utilizando una lámpara a contraluz, tres estrías que viraron a color rosado.

Medio sin inocular Cultivo inoculado

Vista de la placa

a la luz

Coagulasa: es una enzima producida por Staphylococcus aureus por lo que sirve para diferenciar especies dentro del género Staphylococcus:

Especie Ensayo CoagulasaS. aureus Positivo

S. epidermidis Negativo

Dicha enzima es resitente al calor (temperaturas por encima de 60ºC durante 30 minutos).

Para dicha prueba se verifica la coagulación del plasma de humanos, otros animales (como conejo) y de yema de huevo.

Procedimiento

a) Se inocula tubos conteniendo BHI broth (brain heart infusion) medio líquido con 0,1 % agar y 6,5 % NaCl y TSA

b) Se incuba a 35-37 ºC por 18-24 hrsc) Se agragan 0,5 mL de plasma con EDTA y se mezclad) Se incuba otras 6 hrs a 35-37ºC con examinación periódica de formación de coágulos.

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Interpretación

Reacción positiva: 3+ y 4+ se aprecia la formación de un coágulo firme dentro de las 6 horas.1+ y 2+ necesitan confirmarse realizando más pruebas.

Reacción negativa: si no se forma coágulo.

Termonucleasa

Estas placas contienen nutrientes de agar Baird Parker modificado con un agente gelificante soluble en agua fría y nucleasa termoestable (TNasa).La TNasa es una enzima producida por el S. aureus que permanece estable a altastemperaturas. La detección de la Tnasa, al igual que la coagulasa, es un método deconfirmación de la presencia de S. aureus. La reacción de la TNasa se ve como una zona de color rosado alrededor de una colonia roja o azul.

Procedimiento: a) Inocule 1 mL.b) l de la dilución de la muestra y espárzalo.c) Incube la placa a 35°C durante 24 horas.d) Pase la placa a una segunda temperatura de incubación de 62°C por 1 hora para

eliminar las nucleasas que no son termoestables.e) Levante la película superior y coloque el disco de TNasa y vuelva a colocar la película

superior.f) Incube nuevamente la placa a 35°C por 1 a 3 horas.g) Cuente las colonias confirmadas.

Interpretación

TNasa positivo: se considera no apto para el consumo humano, salvo que se verifique ausencia de Staphylococcus aureus controlando si tiene la enterotoxina.

TNasa negativo: a pesar de contener Staphylococcus aureus pueden comercializarse pues es improbable la presencia de enterotoxinas.

RESULTADOS DE LA BÚSQUEDA

Presencia de Staphylococcus aureus en 10g de muestra Ausencia de Escherichia Coli en 10g de muestra Ausencia de Pseudomonas aureginosa en 10g de muestra

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APLICACIONES

Introducción

S. aureus es un común contaminante de productos alimenticios por lo que tiene importancia su búsqueda para prevenir enfermedades por intoxicaciones debido a la ingesta. Se cree que 1/3 de la población es portador del microorganismo, y se encuntra en diversas partes del cuerpo como ser:

Tracto superior respiratorio:

La nariz, la garganta y la boca dentro de las más importantes. A partir de heridas puede pasar a la sangre para infectar al huesped.

La piel

Es un microorganismo oportunista (no todas las cepas son patógenas), afecta huéspedes que tienen el sistema inmunológico debilitado. Se pueden controlar con antibióticos pero se han encontrado cepas resistentes, por lo que se hace importante analizar su respuesta frente a los mismos.

Las cepas patógenas de Staphylococcus aureus produce una serie de enzimas o toxinas extracelulares. Una enzima relacionada con la patogenisidad es la coagulasa que generan una barrera protectora de fibrina que hace difícil que los agentes inmunitarios del huesped tengan contacto, evitando la fagocitosis. También producen leucocidina que desturye los leucocitos y también una exotoxina (liberada en el crecimiento, produciendo efecto tóxico sobre la célula del hospedador)del síndrome del shock tóxico. Durante el crecimiento de Staphylococcus aureus se generan entrotoxinas termoestables, siendo los síntomas de intoxicación: vómitos y diarrea que se produccen luego de 2-6 hrs de la ingesta. Produce 7 enterotoxinas (son exotoxinas que actuan sobre el intestino delgado produciendo una pérdida de líquido corporal por vómitos y diarrea) diferentes A, B, C1, C2, D y E. Siendo la enterotoxina A (es un péptido pequeño de PM = 30000g/mol) es un superantígeno que determina una forma de envenamiento alimenticio.

Condiciones de crecimiento:

Temperatura: 6,5 y 46ºC. La bacteria muere con calor suave pero la toxinas resisten tratamientos de 11 minutos a121ºC.pH: 5,5-9,0actividad de agua mínima: 0,86Hábitat: el S. aureus resiste altas concentraciones de sal, y no se produce la toxina en alimentos ácidos.

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Los métodos utilizados para las búsquedas o recuentos dependen de la razón por la que se busca:

a) Para confirmar que el microorganismo es causante de enfermedades alimenticiasb) Para determinar si la comida como sus ingredientes son fuente portadoras de

enterotoxinas estafilocócicas. La presencia de ésta bacteria puede relacionarse con la producción de enterotoxinas que pueden ser ingeridas por el consumidor.

c) Para indicador de higiene y de buenas prácticas de manufactura en productos terminados por lo que se requiere la implementación de métodos más sensibles.

Algunos datos de Staphylococcus aureus en Uruguay

En Uruguay, en el periodo 1993-2001, los datos recogidos del Sistema de Información Regional para la Vigilancia Epidemiológica de las enfermedades de transmición alimentaria, se registraron 12 brotes de intoxicación estafilocóccica, con un total de 164 afectados sin fallecimientos. En 9 brotes se identificaron lácteos como el alimento responsable, siendo carnes rojas y aves en los 3 restantes. En cuanto a los locales de origen, 7 brotes ocurrieron en comedores, 2 en viviendas y los 3 restantes en restaurants, escuela y otros.Estos valores se encuentran muy por debajo de lo real, debido a que muchos casos no son reportados pues se los confunde con enfermedades comunes.

Para el entendimiento de las cantidades máximas y mínimas permitidas en los alimentos es necesario explicar algunos conceptos:c = número de aceptaciónn = número de muestras o ensayosm = valor pueden superar sólo hasta c muestrasM = máximo permitido en el total de las muestras

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Industrias en la que es importante la busqueda de Staphylococcus aureus

INDUSTRIA DE LA CARNE

Carnes Crudas

Staphylococcus aureus se puede encontrar en pequeñas cantidades ya sea por procedencia animal o humana; siendo la de tiene mayor importancia la humana debido a sus consecuencias.

El microorganismo tiene poca posibilidad de competir con la flora típica de la carne por lo que para que haya un riesgo sanitario la flora normal de la carne debe estar restringida o puede haberse producido un abuso de la temperatura de almacenamiento.

Carnes Procesadas

Las carnes procesadas consisten en productos cárnicos elaborados con diversas tecnologías incluyendo procesados térmicos, curados, secados, fermentación, acidificación y envasado.En las carnes y productos de origen animal desecados.

Carnes de Aves y productos derivados

Razones del muestreo: los productos en estado crudo contienen microorganismos capaces de generar enfermedades luego de la ingesta del alimento. Por ejemplo: Salmonella, Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Campylobacter fetus y Yersinia enterocolitica.

Carne cruda y congelada

Staphylococcus aureus, es parte de la flora intestinal habitual de un ave, y no compite con microorganismos comunes del medio, por lo que es improbable la contaminación en productos que son refrigerados. Llega a ser un problema, luego de la cocción del mismo, y si se mantienen a temperaturas no aptas y largos períodos de tiempo. Por lo tanto un buen manejo (comiendo enseguida la carne de pollo cocinada o refrigerándola con brevedad) no genera intoxicaciones por Staphylococcus aureus.

Sin embargo resulta importante el analisis del nivel de contaminación que pueda producirse en máquinas desplumadoras.

Productos precocidos y congelados

Su estudio tiene relevancia para la evaluación de la contaminación de productos avícolas precocidos y posteriormente congelados.

Es innecesario el estudio si el procesamiento térmico fue adecuado utilizando bolsas o cubiertas plásticas, tomando importancia si los mismos son manipulados o reenvasados.

Los estafilococos son mas resistentes a la congelación que las bacterias Gram Negativas por lo que sirven como indicadores de contaminación luego de tratamiento térmico.

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Productos ahumados, curados o deshidratados

Se hace el seguimiento de Staphylococcus aureus, con la finalidad de observar si los procesos que se llevaron a cabo sobre el producto fueron los adecuados, que se contaminó luego de las operaciones (envasamiento) o que tanto el almacenamiento como su distribución fueron usando condiciones de temperatura no adecuadas para el producto congelado o refrigerado (no respetandose la cadena de frío). La aw de éstos productos inhiben la flora típica alterante pero no al Staphylococcus aureus.

INDUSTRIA DE LA LECHE

Debido a los brotes de estafilocócicos (1953-56) tanto la leche en polvo como los quesos madurados se someten a medidas de control antes de la distribución y consumo.

Leche cruda

Es la secreción mamaria natural obtenido del oredeñe sin adición, ni sustracción ninguna. Que proviene de vacas sanas, en forma higiénica y sin contener calostro.

Ésta debe cumplir con un límite de 5*106 ufc/ml de bacterias mesófilas aerobias y para el S.

aureus el límite máximo permitido es de 1*103 ufc/ml.

Leche tratada térmicamente

Según el tratamiento térmico al que hayan sido sometidos y se distinguen:1) Leche pasteurizada: ha sido sometida a 30 minutos a 63ºC (LHT) o 15 segundos a 72ºC (HTST)2) Leche UHT (UAT): ha sido sometida a 2-4 segundos a temperaturas entre 130-150ºC enfriada rápidamente a menos de 32ºC y envasada en condiciones asépticas.3) Leche esterilizada: luego de ser homogeneizada, preesterilizada y envasada, es sometida a un proceso de esterilización industrial que asegure su conservación por un tiempo prolongado.

El recuento de unidades formadoras de colonias por mL, de acuerdo a normas estandar, referida a mesófilos, no debe sobrepasar el límite de 5*104ufc/mL de abril a agosto y 1*105ufc/mL el resto del año. Para el Staphylococcus aureus coagulasa y termonucleasa positivo no debe superar los 10ufc/mL

Leche en polvo

Las pruebas analíticas se realizan para evitar los riesgos sanitarios graves si no se utilizaron las buenas prácticas de manufactura en la fabricación de la leche. Pues esto produce el desarrollo del microorganismo en la leche antes de su concentración o en la posterior deshidratación, generando contaminación por enterotoxinas. Staphylococcus aureus, es un riesgo potencial en la leche en polvo y no puede permitirse su presencia o al menos mantener los niveles al mínimo. La probabilidad de encontrar al microorganismo en la industria deshidratadora es baja debido al conocimiento del mismo, los controles y las medidas de prevención que esto conlleva pero puede ser que se recontamine luego del proceso. Si la leche se expone a

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condiciones de tiempo y temperatura aptas para el estafilococo como en escuelas, comedores, hospitales, etc es factible la presencia de enterotoxinas.

El máximo permitido de Staphylococcus aureus coagulasa positivo (n=5 c=1 m=10 ufc/g M=100ufc/g)

Crema de leche

Productos lácteos , relativamente ricos en grasa, separados por procesos tecnológicos autorizados que deben ser tratadas térmicamente.

Requisitos microbiológicos para cremas pasteurizadas: microorganismos aerobios mesófilos (n=5 c=2 m=1000ufc/g M=100000ufc/g)

Staphilococcus coagulasa positivos: (n=5 c=1 m=10ufc/g M=100ufc/g) siendo para la manteca las mismas especificaciones

Quesos

El queso es un producto que se fabrica a partir de diferentes tipo de leche (cruda, pasteurizada, a tratada con calor) y produce intoxicaciones alimentarias con escasa frecuencia.

Los quesos fabricados en base a leche tratada con calor a una temperatura de 65,5ºC por 15/20 segundos reducen la carga microbiana inicial significativamente, incluyendo la cantidad de estafilococos. Si el tratamiento no alcanza éstas condiciones puede desarrollarse una población residual de estafilococos, por lo que debe descontaminarse la maquinaria para no recontaminar la materia prima.

La presencia final exesiva de Staphylococcus aureus, puede deberse a la contaminación tras el calentamiento o a alguna falla en el proceso de fabricación del queso (como por ejemplo la inactividad del cultivo iniciador) Ésta es la causa mas importante del crecimiento de estafilococos y es causada por infeccion con bacteriófagos o por antibióticos o sustancias inhibidoras presentes en la leche. El mayor riesgo de intoxicación se debe a la presencia de enterotoxinas producidas por el Staphylococcus aureus y es común encontrarlas en quesos duros o semiblandos. La etapa de máximo crecimiento es luego de el desuerado y antes del salado del queso. Durante la maduración y secado los microorganismos van desparenciendo, pero perduran las toxinas liberadas anteriormente si la cantidad es superior a 1-5 millones por gramo de queso en el proceso de fabricación. Para interpretar los resultados se debe tener cuidado pues la carga microbiana en un queso maduro es solo una pequeña porción de la que estaría presente en la maduración.

Quesos duros y semiduros el recuento de estafilococos coagulasa positivos tienen un límite de 10000 por gramo de queso. Si es menor significa que no alcanzó la detección de los niveles asociados con la enterotoxina.

Pruebas a realizar: se sugiere el uso de termonucleasa (TNasa) para verificar el crecimiento del Staphylococcus aureus y de la posible detección de la enterotoxina en el queso.

Otra forma de caracterizar los quesos es según su humedad obteniéndose límites para el

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El Staphylococcus coagulasa positivos los siguientes límites:

Condiciones del ensayon c m M

Quesos de baja humedad 5 2 100ufc/g 1000ufc/gQuesos de mediana humedad 5 2 100ufc/g 1000ufc/g

Quesos de alta humedad 5 2 100ufc/g 1000ufc/gQueso cuartirolo, cremoso y criollo 5 2 100ufc/g 1000ufc/g

Quesos de muy alta humedad(con alta cantidad de bacterias lácticas

viables)5 5 10ufc/g 100ufc/g

Quesos de muy alta humedad(sin alta cantidad de bacterias lácticas

viables)5 1 100ufc/g 500ufc/g

Queso rallado 5 2 100ufc/g 1000ufc/gQuesos fundidos o reelaborados y quesos procesados por UHT o UAT

5 2 100ufc/g 1000ufc/g

Helados

Es el producto obtenido por congelación y agitación simultánea de mezclas líquidas, cuyos ingredientes principales son leche, derivados lácteos, agua y edulcorantes nutritivos naturales.Las especificaciones microbiológicas para los helados es de: 1*102 ufc/g

Helados de agua

Helados crema y de leche

Helados que contengan productos no pasteurizados

INDUSTRIA DE LAS PASTAS

Las pastas congeladas y secadas

Las pastas son productos crudos hechos de la harina de trigo, de la sémola, del farina, del agua, y de otros ingredientes (e.g., huevo) para formar una masa tiesa que contiene generalmente humedad cerca del 30%. La pasta se saca en varias formas y para ciertos tipos (por ejemplo: ravioles) que se puede rellenar con algún ingrediente que contenga carne. Debido a los ingredientes usados, las temperaturas, velocidad y condiciones del almacenaje antes de la sequedad, es necesaria para prevenir daño a ciertos tipos de pastas que pueden contener Salmonella y el Staphylococcus aureus. Estos productos deben ser cocinados antes de la consumición, por lo que se recomienda (n=5,c=1, m=1*10-2ufc/g, M=1*104ufc/g) Sin embargo, si Staphylococcus aureus se encuentra en pastas o los productos de las pastas superior a 1*103ufc/gramo pruebas adicionales tales como la prueba del termonucleasa (o pruebas ideales para las enterotoxinas) se deben utilizar ya que Staphylococcus aureus puede ser destruido durante el proceso pero las enterotoxinas pueden estar activas.

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Aerobios mesófilos Máx 2*105 ufc/gColiformes totales Máx. 2*102/g

[Escriba una cita del documento o del

Aerobios mesófilos Máx 1*105 ufc/gColiformes totales Máx. 1*102/g

Aerobios mesófilos Máx 3*104 ufc/gColiformes totales Máx. 10/g

Mapa conceptual

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BIBLIOGRAFÍA:

Libros:

Madigan, M.; Matinko, J.M., Parker, J.. (2004). Brock: Biología de los Microorganismos. (10a edición) Madrid, España: Pearson, Prentice Hall.

Prescott, L.M.; Harley, J.P.; Klein, D.A.. (2004). Microbiología. (5a edición). España: McGraw-Hill.

Compendium of the Methods for the Microbiological examination of foods, (4a edition). cap 39; Lancette G.A.; Bennett R.W., editorial: APHA, American Public Health Association

Reglamento Bromatológico Nacional. (5/7/1994) Decreto 315/994. (2a edición). Uruguay: IMPO, Dirección Nacional de Impresiones y Publicaciones Oficiales

Cuaderneta de Microbiología General Facultad de Química.

Páginas web:

Staphylococcus aureus. «http://www.bvsops.org.uy/pdf/aureus.pdf» (en español). Consultado el 2 de noviembre del 2010

Staphylococcus aureus METICILINO RESISTENTE. (julio 2004) «http://www.bvsops.org.uy/pdf/enftrans01.pdf» (en español). Consultado el 2 de noviembre del 2010

3M Placas petrifilm. «http://multimedia.mmm.com/mws/mediawebserver.dyn?KKKKKKtrCWZKdnLK8nLKKkMiOvGjjjji-» (en español). Consultado el 4 de noviembre del 2010

Investigación y recuento de staphylococcus aureus. «http://virus.usal.es/web/demo_microali/Saureus/Saureus.htm» (en español). Consultado el 4 de noviembre del 2010

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