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PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTEMICA EN EL CONTROL DE Lasidoplodia theobromae RESULTADOS DE ENSAYOS EN EL CONTROL QUIMICO DE Lasidoplodia theobromae EN PALTO. Dr. Martin Delgado Junchaya Asesor- Catedrático UPAO V SEMINARIO INTERNACIONAL DE LA PALTA CAMET TRADING S.A.C PROGRAMACION 16 Y 17 DE AGOSTO

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PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTEMICA EN EL CONTROL DE Lasidoplodia theobromae –

RESULTADOS DE ENSAYOS EN EL CONTROL QUIMICO DE Lasidoplodiatheobromae EN PALTO.

Dr. Martin Delgado JunchayaAsesor- Catedrático UPAO

V SEMINARIO INTERNACIONAL DE LA PALTACAMET TRADING S.A.C

PROGRAMACION 16 Y 17 DE AGOSTO

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M. Delgado J.

Superficie sembrada:…………. Has ?? 22-25,000 Has de HassCosta 1,000 has nuevas/añoSierra 500 has nuevas /año

0

50000

100000

150000

200000

250000

2004 2006 2008 2010 2012 2014 2016 2018

Ton

247,00027% más

2016Producción

Nacional>470,000

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ENFERMEDADES ESTUDIDAS EN PALTO EN EL NORTE DEL PERÚ

2. Pudrición de la raíz del palto: Phytophthora cinnamomi Rands.

3. Antracnosis y Pudrición del fruto:Colletotrichum gloesporioides

4. Escaldadura solar (Avocado Sundblotch ) Viroide

5. Pudrición de flores: Cladosporiumspp.

1. Muerte regresiva: Lasiodiplodia theobromae

E.E.E.P.

E.E.E.P.

E.E.

E.S.

E.S.

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Muerte Regresiva yCancrosis de ramas

y frutosLasiodiplodiatheobromae

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Decoloración del ápice del plantón

Decoloración y necrosis del ápice

con exudado.

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Inóculo para

nuevas infecciones

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Patógenovirulento

Hospedantesusceptible

Hombre >SEVERIDAD

Agroecosistema

Martín A. Delgado J.

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ClimaSuelo

Fitopatógeno

ControlBiológico

Control Químico

Planta

•Legal•Físico,

•Genético,•Biotecnológico

Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas

Caracterización del

AgroecosistemaCambios climáticos

Aridez

Control Cultural:

Control químico

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ClimaSuelo

Fitopatógeno

ControlBiológico

Control Químico

Planta

•Legal•Físico,

•Genético,•Biotecnológico

Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas

Caracterización del

AgroecosistemaCambios climáticos

Aridez

Control Cultural:

Eliminación

de restos de poda

105c.v./g.

Control químico

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ObjetivoEstimar la densidad de inóculo de

Lasiodiplodia theobromae, que puede generarse a partir de los

restos originados de la poda, con muestreos en dos localidades o

fundos: Agualima y Norte Verde, ubicados en Virú, La Libertad,

Perú.

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Muestreos en Agualima, Virú, La Libertad, Perú, 2016.

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Zona de muestreo en Norte Verde, Virú, La Libertad, Perú, 2016.

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Tratamiento con hipoclorito de sodio al 2% después alcohol al 80% y luego flameado por 5 segundos.

Incubación en cámara húmeda durante 25 días a temperatura ambiente

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Pesado:gramos Sacudido

Primer filtradoSegundo filtrado:

tamiz de 180 micras

Suspensión de conidias, lista

para el contaje con la cámara de Neubauer

Sumersión en 10 mL de agua estéril

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RESULTADOS: NORTE VERDE

ZONA LONGITUD

(CM)DIAMETRO

(CM)PESO /G

CONIDIAS/G

NORTE VERDE 7.00 1.00 5.00 7.2 X 104

NORTE VERDE 8.00 0.40 2.28 6.0 X 104

NORTE VERDE 5.00 0.40 2.34 1.3 X 105

NORTE VERDE 6.20 1.20 3.75 6.8 X 105

NORTE VERDE 4.00 0.60 1.23 1.3 X 105

NORTE VERDE 6.50 1.10 6.37 7.4. X 104

TOTAL 36.70 4.70 20.97 11.46 X 105

PROMEDIO 6.11 0.78 3.49 1.91 X 105

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ZONALONGITUD

(CM)DIAMETRO

(CM)PESO /G

CONIDIAS/G

AGUALIMA 6.00 1.00 6.89 0.00

AGUALIMA 6.50 0.80 4.57 7.6 X 104

AGUALIMA 5.20 0.80 3.59 1.9 X 105

AGUALIMA 5.80 0.80 5.83 1.4 X 104

AGUALIMA 7.00 1.29 7.39 1.9 X 105

AGUALIMA 6.00 1.20 4.76 3.7 X 105

TOTAL 36.50 5.89 33.03 8.2 X 105

PROMEDIO 6.08 0.98 5.51 1.4 X 105

RESULTADOS: AGUALIMA

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Patogenicidad de Lasiodiplodia theobromae1. Conidias procedentes de material de poda fueron colectadas con la ayuda de

una pinza y en un tubo de prueba con agua destilada estéril.2. La suspensión formada se calibró a 2 x 106 c/mL, con la ayuda de la cámara

de Neubauer. Posteriormente se hicieron diluciones de 1:100 para obtener104 y 102 c/mL.

3. Plantones de palto de la variedad Topa Topa se podaron a la altura de 0.50m.4. En la zona del corte de depositó una gota de una suspensión de conidias

calibrada, según tratamiento, a: 2x102, 2x104 y 2x106 conidias/mL, lo cualequivale a: 10, 1,000, 100,000 conidias, respectivamente.

6. Como control se depositó sobre el corte un disco de agar (PDA) con/sinmicelio.

7. La zona inoculada fue cubierta con parafilm.

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10 conidias/corte. Lesiones de 0.5-0.7 cm 1,000 conidias/corte. Lesiones de 0.5 a 1.3 cm

100,000 conidias/corte. Lesiones de 0.5-0.6 cm. Disco de agar con micelio: Lesiones de 1.1-3.1 cm.

Avance de la infección de Lasiodiplodia theobromae a los 6 días de ala inoculación

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Conclusión:

Los restos de poda: ramas y ramillas, en las plantaciones de palto infectadas

con el hongo Lasiodiplodia theobromae de Virú, La Libertad, Perú, contienen de 1.4 a 1.9 x 105 conidias

viables y con habilidad patogénica por cada gramo, lo cual constituye una

densa fuente de inóculo para permanentes infecciones del hongo en los nuevos brotes.

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1.4-1.9 X 105 c/g

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ClimaSuelo

Fitopatógeno

ControlBiológico

Control Químico

Planta

•Legal•Físico,

•Genético,•Biotecnológico

Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas

Caracterización del

AgroecosistemaCambios climáticos

Aridez

Control Cultural:

Eliminación

de restos de poda

105c.v./g.

Control químico Experiencias: 2016-2017.

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ClimaSuelo

Fitopatógeno

ControlBiológico

Control Químico

Planta

•Legal•Físico,

•Genético,•Biotecnológico

Formas o Procedimientos para el Control o Manejo Integrado de Enfermedades en Plantas

Caracterización del

AgroecosistemaCambios climáticos

Aridez

Control Cultural:

Eliminación

de restos de poda

105c.v./g.

Control químicoCúpricos orgánicos e inorgánicos, Benzimidazoles, Triazoles, Strobilurinas, Prochloraz, Imidazoles, mezclas de estos ingredientes etc.

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Tratamiento N 1 2 3

Phyton 0.5 L/200L 3 1.00

Licthor 0.5 L/200L 3 1.00

Epoxi Duo 0.4 L/200L 3 1.00

T-Agua 3 1.00

Licthor 1 L/200L 3 1.33

T-Lasiodiplodia 3 5.00

Cupron 1L /200L 3 9.00

Champion 1 L/200L 3 11.00

Sig. 0.859 1.000 0.253

Se visualizan las medias para los grupos en los

subconjuntos homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media

armónica = 3,000.b. Alfa = 0.05.

ENSAYO 1: DUNCAN.EVALUACIÓN

DE FUNGICIDAS QUE INTERFIEREN

EL INGRESO DE Lasiodiplodia

theobromae A TRAVÉS DE HERIDAS

EN PANTONES DE PALTO VAR.

ZUTANO. CASA MALLA.

TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.PROME

DIO

I II III

1 Champíon 1.0 8 15 7 30 10.00

2 Cupron 1.0 6 13 5 24 8.00

3 Phyton 0.5 0 0 0 0 0.00

4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00

5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33

6 Epoxi Duo 0.4 0 0 0 0 0.00

7 T-Agua 0.0 0 0 0 0 0.00

8 T-Lasiodip. 106 c/mL 4 4 4 12 4.00

ENSAYO1: EVALUACIÓN DE FUNGICIDAS QUE

INTERFIEREN EL INGRESO DE Lasiodiplodia theobromae A

TRAVÉS DE HERIDAS EN PANTONES DE PALTO VAR.

ZUTANO. CASA MALLA.TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

Longitud de

Lesión en mm.Trat. Producto Con.A.L/2

00L

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Tratamiento N 1 2 3

Phyton 0.5 L/200L 3 1.00

Licthor 0.5 L/200L 3 1.00

Epoxi Duo 0.4 L/200L 3 1.00

T-Agua 3 1.00

Licthor 1 L/200L 3 1.33

T-Lasiodiplodia 3 5.00

Cupron 1L /200L 3 9.00

Champion 1 L/200L 3 11.00

Sig. 0.859 1.000 0.253

Se visualizan las medias para los grupos en los

subconjuntos homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media

armónica = 3,000.b. Alfa = 0.05.

ENSAYO 1: DUNCAN.EVALUACIÓN

DE FUNGICIDAS QUE INTERFIEREN

EL INGRESO DE Lasiodiplodia

theobromae A TRAVÉS DE HERIDAS

EN PANTONES DE PALTO VAR.

ZUTANO. CASA MALLA.

TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.PROME

DIO

I II III

1 Champíon 1.0 8 15 7 30 10.00

2 Cupron 1.0 6 13 5 24 8.00

3 Phyton 0.5 0 0 0 0 0.00

4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00

5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33

6 Epoxi Duo 0.4 0 0 0 0 0.00

7 T-Agua 0.0 0 0 0 0 0.00

8 T-Lasiodip. 106 c/mL 4 4 4 12 4.00

ENSAYO1: EVALUACIÓN DE FUNGICIDAS QUE

INTERFIEREN EL INGRESO DE Lasiodiplodia theobromae A

TRAVÉS DE HERIDAS EN PANTONES DE PALTO VAR.

ZUTANO. CASA MALLA.TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

Longitud de

Lesión en mm.Trat. Producto Con.A.L/2

00L

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Tratamiento N 1 2 3

Phyton 0.5 L/200L 3 1.00

Licthor 0.5 L/200L 3 1.00

Epoxi Duo 0.4 L/200L 3 1.00

T-Agua 3 1.00

Licthor 1 L/200L 3 1.33

T-Lasiodiplodia 3 5.00

Cupron 1L /200L 3 9.00

Champion 1 L/200L 3 11.00

Sig. 0.859 1.000 0.253

Se visualizan las medias para los grupos en los

subconjuntos homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media

armónica = 3,000.b. Alfa = 0.05.

ENSAYO 1: DUNCAN.EVALUACIÓN

DE FUNGICIDAS QUE INTERFIEREN

EL INGRESO DE Lasiodiplodia

theobromae A TRAVÉS DE HERIDAS

EN PANTONES DE PALTO VAR.

ZUTANO. CASA MALLA.

TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.PROME

DIO

I II III

1 Champíon 1.0 8 15 7 30 10.00

2 Cupron 1.0 6 13 5 24 8.00

3 Phyton 0.5 0 0 0 0 0.00

4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00

5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33

6 Epoxi Duo 0.4 0 0 0 0 0.00

7 T-Agua 0.0 0 0 0 0 0.00

8 T-Lasiodip. 106 c/mL 4 4 4 12 4.00

ENSAYO1: EVALUACIÓN DE FUNGICIDAS QUE

INTERFIEREN EL INGRESO DE Lasiodiplodia theobromae A

TRAVÉS DE HERIDAS EN PANTONES DE PALTO VAR.

ZUTANO. CASA MALLA.TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

Longitud de

Lesión en mm.Trat. Producto Con.A.L/2

00L

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Qué pasó?? Lasiodiplodia NO SE DETUVO !!!!!!!....NO MURIÓ.

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Patógenovirulento

Hospedantesusceptible

Hombre >SEVERIDAD

Agroecosistema

Martín A. Delgado J.

Page 34: V SEMINARIO INTERNACIONAL DE LA PALTA CAMET TRADING …cametrading.com/downloads/V-seminario/Semin.Internac. Palta. Ago… · 4 Licthor 0.5 0 0 0 0 0.00 5 Licthor 1.0 0 0 1 1 0.33

Patógenomenos

virulento

HospedanteResistente

Hombre <SEVERIDAD

Agroecosistema

Martín A. Delgado J.

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Representación esquemática del modo de acción de un

antagonista y la interacción entre este organismo,

la planta y el patógeno ( Bayer CropScience. Adaptación, M.

Delgado 2007.)

Antagonista“enemigo”

Antibiosis

Promotor deldesarrollo

CompetenciaExclusión

Resistenciasistémica

Aumento deproducción

Planta

Escape dela enfermedad

Fortalecimientode la planta:

hipovirulencia

Parasitismo

Hombre

Planta más resistente

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•ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS

FITOPATÓGENOS

•ASPECTO GENÉTICO:

•Resistencia monogénica,

•Resistencia oligogénica o

•Resistencia poligénica.

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•ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS FITOPATÓGENOS

•ASPECTO EPIDEMIOLÓGICO:

•Resistencia vertical o diferenciada o cualitativa.

•Resistencia horizontal o general o cuantitativa.

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ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS FITOPATÒGENOS

• ASPECTO PATOFISIOLÓGICO:

• Pre infeccionales: están presentes antes de la infección: físicos y químicos. Ejemplos: Físicos: dureza de cutícula,

Químicos: sustancias tóxicas como la

pirocatequina.

• Post-infeccionales: se forman como resultado de la infección: Físicos y químicos. Ejemplos:

Físicos: Tilosas, gomas, acumulación de agregados celulares.

Químicos: fenoles (metabolitos secundarios): FITOALEXINAS

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ASPECTOS O ENFOQUES DE LA RESISTENCIA DE LAS PLANTAS A LOS FITOPATÒGENOS

• ASPECTO PATOFISIOLÓGICO:

• Pre infeccionales: están presentes antes de la infección: físicos y químicos. Ejemplos: Físicos: dureza de cutícula,

Químicos: sustancias tóxicas como la

pirocatequina.

• Post-infeccionales: se forman como resultado de la infección: Físicos y químicos. Ejemplos:

Físicos: Tilosas, gomas, acumulación de agregados celulares.

Químicos: fenoles (metabolitos secundarios): FITOALEXINAS

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RESISTENCIA SISTÉMICA EN PLANTAS CONTRA FITOPATÓGENOS

Las plantas pueden generar resistencia cuando son tratadas con agentes bióticos patogénicos o no patogénicos, virulentos o no virulentos, fragmentos de la pared celular, extractos de plantas o incluso sustancias químicas sintéticas.

Este fenómeno conocido como resistencia inducida, puede ser local o sistémica y, si bien no conduce a una resistencia total, sin embargo reduce la severidad e incidencia de lesiones.

M. Delgado J. 2017.

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RESISTENCIA SISTÉMICA EN PLANTAS CONTRA FITOPATÓGENOS

La resistencia inducida contra patógenos microbianos, puede dividirse en : Resistencia Sistémica Adquirida

(SAR) y Resistencia Sistémica Inducida (ISR).

M. Delgado J. 2017.

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RESISTENCIA SISTÉMICA ADQUIRIDA (SAR)

Es el fenómeno mediante el cual las plantas desarrollan unaresistencia sistémica de amplio espectro al ataque depatógenos y se inicia con una infección localizada(penetración o intento de penetración del patógeno) o conun tratamiento localizado con los llamados activadores deresistencia ( ácido 2,6- dicloroisonicotinico, Bion/Actigard(acibenzolar-S-metil (ASM), Syngenta), Regalia Maxx(extracto de Reynoutria sachalinensis), Elexa (chitosan,SafeScience, USA), y Messenger (harpin protein, EdenBioscience, USA).

M. Delgado J. 2017.

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Patógeno

Receptores de la

célula del

hospedero

Elicitores del patógenoElicitores del patógeno

Activación

de la

respuesta de

defensa

Elicitores

del patógeno

Receptores de la célula del

hospederoReceptores activados

Elicitores

reaccionan con

los receptores

de la célula Activación de receptores

Membrana celular

CitoplasmaParedcelular

Producción o activación de ácido salicílico y otras señales transductoras

Proteínas relacionadas con la patogénesis: PR

Agrios, 2005. Adaptado por Delgado, 2017.

RESISTENCIA SISTÉMICA ADQUIRIDA. Inhibe el inicio de nuevas infecciones en la planta

Proteína ligada al ADN altera la

expresión del gen.

Colapso oxidativoDisrupción de la membrana

Atividad de las lipoxigenasas: AJAtividad de las fenoloxidasas y

acumulación de fenoles: ASColapso o muerte de la célula

HR

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Reacción de hipersensibilidad en tabaco, cuando es infiltrado con una bacteria fitopatógena.

M. Delgado J. 2017.

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Patógeno

Receptores de la

célula del

hospedero

Elicitores del patógenoElicitores del patógeno

Activación

de la

respuesta de

defensa

Elicitores

del patógeno

Receptores de la célula del

hospederoReceptores activados

Elicitores

reaccionan con

los receptores

de la célula Activación de receptores

Membrana celular

CitoplasmaParedcelular

Producción o activación de ácido salicílico y otras señales transductoras

Proteínas relacionadas con la patogénesis: PR

Agrios, 2005. Adaptado por Delgado, 2017.

RESISTENCIA SISTÉMICA ADQUIRIDA. Inhibe el inicio de nuevas infecciones en la planta

Proteína ligada al ADN altera la

expresión del gen.

Colapso oxidativoDisrupción de la membrana

Atividad de las lipoxigenasas: AJAtividad de las fenoloxidasas y

acumulación de fenoles: ASColapso o muerte de la célula

HR

X

X

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Ciclo de

Krebs

GLICOLOSIS

C-6

C-2

Adaptado por M. Delgado J. 2017.

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C-4

Ciclo de

Krebs

GLICOLOSIS

Ácido Salicìlico

C-6

C-2

Fenil-alanina-liasa, Tirosinasa

Adaptado por M. Delgado J. 2017.

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FUNDAMENTOS

RESISTENCIA SISTÉMICA INDUCIDA (ISR)

En contraste al SAR, la ISR desarrolla como resultado de la colonización de las raíces de plantas por ciertos strains de rizobacterias que promueven el desarrollo (PGPR), y se produce por la intermediación de las vías metabólicas del acido jasmónico (JA) y etileno (ET).

M. Delgado J. 2017.

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Martín A. Delgado J.Bertha Carrera S.

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Ciclo de Krebs

Acetato malonato y acetato mevalonato: IRS

Ácido Jasmónico

Adaptado por M. Delgado J. 2017.

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C-4

Ciclo de

Krebs

GLICOLOSIS

ETILENO: ISR

Jazmonato: ISRAcetato: ISR

Ácido Salicìlico

Adaptado por M. Delgado J. 2017.

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Trichoderma también general ISR

• Análisis de señales moleculares involucradas en el mecanismo de defensa y aplicación de inhibidores específicos han mostrado que el etileno y el ácido jasmónico están envueltos en el efecto protector conferido por Trichoderma sp contra Pseudomonassyringae pv lachrymans.

• Shores, M., Yedidia, I., and Chet, I. 2005.

Phytopathology 95: 76- 84.

M. Delgado J. 2017.

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ESTRÉS ABIÓTICOS INTERFIEREN LA EFICACIA DE INDUCTORES DE RESISTENCIA EN EL CAMPO.

• Las plantas responden a los estrés abióticos mediante señales hormonales que pueden interferir el mecanismo de resistencia sistémica inducida.

• Roatti et al. (2013) sometieron a plantas de vid a estrés por altas temperaturas, por sequia o por ambos con el propósito de investigar el efecto de estos estreses sobre la resistencia inducida por Trichodermaharzianum T39 al desarrollo del Mildiu causado por Plasmoparaviticola.

• La resistencia inducida por el T39 no fue afectada cuando la planta se expuso a altas temperaturas o a la sequía, sin embargo si fue significantemente reducida cuando la planta fue expuesta a ambos factores.

• Phytopathology 103: 1227- 1234.

M. Delgado J. 2017.

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NO SIEMPRE LOS RIZOSFÉRICOS GENERAN RESISTENCIA SISTÉMICA INDUCIDA EN LA PLANTA.

• Morrison (et al 2017), recientemente encontraron que la cepa LBUM636 de Pseudomonas fluorescens inhibe el desarrollo de Phytophthora infestans, (tizón de la papa) debido a que produce un metabolito que actúa como potente antibiótico identificado como el ácido Phenazine-1-Carboxilico.

• Morrison et al. (2017). Phytopathology 107: 273- 279.

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OBJETIVO

• El objetivo de esta investigación consistió enevaluar la respuesta de plantones de palto de lavar. Zutano, al ataque de Lasiodiplodiatheobromae, cuando éstos fueron tratados conproductos inorgánicos, orgánicos y otros deorigen biológico, entre ellos, por ejemplo, elproducto Regalia Maxx (Extracto del algaReynoutria sacchalinensis) producto RegaliaMaxx, y otros de origen orgánico o biológico.

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TABLA 1. PRODUCTOS ESAYADOS COMO POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA CONTRA

LASIODIPLODIA THEOBROMAE EN PLANTONES DE PALTO DE LA VAR. ZUTANO. CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBERTAD,

2017.

No.

TRAT.PRODUCTO

CONCENTRACIÓN DE APLICACIÓN

L/200 L (follaje o suelo-drench)

1 REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria sachalinensis 0.4 (Follaje)

2 REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria sachalinensis 0.5 (Follaje)

3 JMR2: Producto nanotecnológico 1.0 ( Follaje)

4 B.N. Bacteria aislada de cáscara de café. 106 ufc/mL

5

ALE 155. Paenibacillus macerans aislada de rizósfera de

espárrago106 ufc/mL

6 BP-1. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL

7 BP-2. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL

8 CODAPHOS CU: Fosfito de Cu 0.6

9 CODAPHOS K: Fosfito de K 0.5

10

DALGIN ACTIVE: Aminoácidos. Extracto de algas con

vitaminas. 0.6

11

LICHTOR: Carbohidratos, Ácido urónico, A. Succínico,

Mg, M.O., Aminácidos activos1.0

12 Trich-1. Trichoderma virens endofito de piña 106 ufc/mL

13 Trich-2. Trichoderma virens endofito de piña 106 ufc/mL

14

AVIBIOL: enmienda orgánica líquida. Fermentación

anaeróbica de estiércol de gallinas ponedoras 20.0

15 TESTIGO AGUA 0.0

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Aplicación de los tratamientos.

• Los tratamientos fueron aplicados al follaje, como aspersiónmediante una pistola de pintar de alta presión GS 1450, cuyodiámetro de boquilla fue de 1.5.-1.7mm, con capacidad de 600mL, abanico de 110-220 mm y presión de trabajo 4.8 bar,proveniente de una bomba WORK con 2HP. Para tratamientosaplicados al suelo, se calculó primero el agua necesaria parallegar en la maceta a capacidad de campo y, según este volumeny la concentración de aplicación, se calculó la cantidad deproducto a aplicar. Se efectuaron dos aplicaciones de losproductos en las fechas siguientes:

• Primera aplicación: 22 de junio del 2017.

• Segunda Aplicación: 22 de julio del 2017.

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Determinación de la altura de plantas.

Esta variable se obtuvo un día antes de la inoculación.

La altura fue tomada, en metros, desde la base del tallo hasta la última bifurcación de una ramilla.

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• Inoculación.• La inoculación se efectuó el 22 de agosto del 2017, 31 días después de

haber efectuado la segunda aplicación de los tratamientos.

• El inóculo de Lasiodiplodia theobramae, se obtuvo de los picnidios formados en los residuos de poda que fueron traídos del campo, específicamente del Fundo Norte Verde, Virú La Libertad.

• El material fue limpiado exteriormente y con la ayuda de una pizeta con agua se lavaron los picnidios concentrando el material fungoso hasta tener una suspensión equivalente a 106 conidias maduras/mL según el contaje realizado con la cámara Neubauer.

• Para la inoculación se podaron los plantones a 1m de altura y en el tejido vascular expuesto se depositó 50 microlitros de la suspensión de conidios, lo cual fue equivalente a 50,000 conidias/plantón.

• Concluida la inoculación, la herida fue cubierta con cinta parafilm para evitar desecación y posible contaminación con agentes extraños.

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•Evaluación de daños:• La evaluación del daño producido por Lasiodiplodia

theobromae tuvo dos componentes:

• a) Lesión externa causada por L. t. cuya intensidad fue expresada en mm, como indicador del avance de la infección en el plantón

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• b) Evaluación del avance sistémico de L.t. en tejido externamente asintomático.

Descarte

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Avance del patógeno

Resistenca de la planta

?

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• Determinación del contenido de Ácido Jasmónico y Ácido Salicílico.

• La presencia de estos compuestos en el tejido vegetal, por lo general, está asociada a respuesta de resistencia sistémica inducida (ácido jasmónico y etileno) o resistencia sistémica adquirida ( ácido salicílico)( Reglinski y Walters, 2009).

• Para tal fin se concertó el servicio de análisis cromatográficos(Cromatotografía de Gases de Alta Perfomance. BC-CMA 500) ofrecido por la Firma Baltic Control CMA S.A. Lima , Perú.

• Para la toma de muestra se cortó 10 cm de tallo de cada repetición, con lo cual se obtuvo más de 400g de tejido de cada uno de los tratamientos que se consideraron para los análisis.

• Se incluyó el Tratamiento Testigo, que consistió en aplicación de agua y una muestra adicional conformada por 10 cm de tallo de plantones que no fueron inoculados ni habían sido cortados.

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Determinación del peso de raíces.

Después de la toma de muestra para el análisis cromotográfico, se extrajo el plantón cortándose la raíz en la base y eliminándose los restos de la semilla (pepa). La raíz fue cuidadosamente lavada y secada con toallas de papel para después ser pesada, según tratamiento.

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•RESULTADOS

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TABLA 2: ALTURA DE PLANTONES DE PALTO TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA

SISTÉMICA CONTRA LASIODIPLODIA THEOBROMAE .

CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

TRAT. PRODUCT.CONC. DE APL.L/200L

(DRECH)

ALTURA DE PLANTA EN M

21.08.17.

I II III TOTAL PROM

1 REGALIA MAXX 0.4 (Follaje) 1.59 1.49 1.52 4.60 1.53

2 REGALIA MAXX 0.5 (Follaje) 1.28 1.13 1.36 3.77 1.26

3 JMR2 1 ( Follaje) 1.32 1.32 1.23 3.87 1.29

4 B.N. 106 ufc/mL 1.23 1.64 1.20 4.07 1.36

5 ALE 155 106 ufc/mL 1.37 1.48 1.39 4.24 1.41

6 BP-1 106 ufc/mL 1.47 1.45 1.62 4.54 1.51

7 BP-2 106 ufc/mL 1.62 1.42 1.39 4.43 1.48

8 CODAPHOS CU 0.6 1.30 1.32 1.30 3.92 1.31

9 CODAPHOS K 0.5 1.20 1.28 1.12 3.60 1.20

10 DALGIN ACTIVE 0.6 1.47 1.48 1.52 4.47 1.49

11 LICTHOR 1.0 1.50 1.50 1.54 4.54 1.51

12 Trich-1 106 ufc/mL 1.31 1.45 1.47 4.23 1.41

13 Trich-2 106 ufc/mL 1.31 1.30 1.39 4.00 1.30

14 AVIBIOL 20.0 1.50 1.48 1.42 4.40 1.46

15 TEST. AGUA 0.0 1.27 1.50 1.26 4.03 1.34

16 TEST.LASIO. 106 c/mL 1.32 1.24 1.40 3.96 1.32

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Tipo I de

suma de

cuadrados Gl

Media

cuadrátic

a F Sig.

Bloques 63,292 2 31,646 ,320 ,729

Tratamient

o4725,146 15 315,010 3,186 ,003

Error 2966,042 30 98,868

Total 933773,000 48

Total

corregido 7754,479 47

Análisis de Varianza de la Alrura de platones de palto

Trujullo, La Libertad, Perú, 2017.

Origen

1 2 3 4 5 6

Codaphos K 0.5 L/200L 3 120,0000

Regalia Maxx 0.5L / 200L ( Follaje) 3 125,6667 125,6667

JMR2 1L/ 200L 3 129,0000 129,0000 129,0000

Codaphos Cu 0.6 L/200L 3 130,6667 130,6667 130,6667 130,6667

Lasiodiplodia 1 06 c/ mL 3 132,0000 132,0000 132,0000 132,0000 132,0000

Tricho-2 106 ufc/ mL 3 133,3333 133,3333 133,3333 133,3333 133,3333

Agua 3 134,3333 134,3333 134,3333 134,3333 134,3333 134,3333

B.N. 106 ufc/mL 3 135,6667 135,6667 135,6667 135,6667 135,6667 135,6667

Tricho-1 106 ufc/mL 3 141,0000 141,0000 141,0000 141,0000 141,0000

ALE-155 106ufc/ mL 3 141,3333 141,3333 141,3333 141,3333 141,3333

Avibiol 20L/200L 3 146,6667 146,6667 146,6667 146,6667

BP-2 106 ufc/mL 3 147,6667 147,6667 147,6667 147,6667

Dalgin Active 0.6L/200L 3 149,0000 149,0000 149,0000

BP-1 106 ufc/mL 3 151,3333 151,3333

Licthor 1L/200L 3 151,3333 151,3333

Regalia Maxx 0.4L / 200L ( Follaje) 3 153,3333

Sig. ,106 ,108 ,058 ,063 ,051 ,054

Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.

Se basa en las medias observadas.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 3,000.

b. Alfa = 0,05.

Prueba de Duncan de la Altura de Plantones de palto var. Zutano

Trujllo, La Libertad, 2017.

Tratamiento N

Subconjunto

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TABLA 3: MAGNITUD DE LA LESIÓN CAUSADA POR LASIODIPLODIA THEOBROMAE EN PLANTONES DE PALTO TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA:

CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBEERTAD, 2017.

TRAT. PRODUCTO

CONCENTRACIÓN

DE APLICACIÓN

L/200 L (follaje o

suelo)

MEDICION DE LESIONES EN MM

17/10/2017

TOTAL PROMEDIO PUESTOI II III

1REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria

sachalinensis0.4 (Follaje) 7.0 5.0 9.0 21.0 7.0 4

2REGALIA MAXX: Extracto de Reynoutria

sachalinensis0.5 (Follaje) 5.0 3.0 9.0 17.0 5.6 3

3 JMR2: Producto nanotecnológico 1 ( Follaje) 6.0 5.0 9.0 16.0 5.3 2

4 B.N. Bacteria aislada de cáscara de café. 106 ufc/mL 6.0 9.0 6.0 21.0 7.0 4

5ALE 155. Paenibacillus macerans aislada de

rizósfera de espárrago106 ufc/mL 20.0 20.0 14.0 54.0 18.0 10

6 BP-1. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL 7.0 9.0 7.0 23.0 7.6 5

7 BP-2. Bacteria endofita de palto 106 ufc/mL 9.0 10.0 10.0 29.0 9.6 6

8 CODAPHOS CU. Fosfito de Cu 0.6 11.0 14.0 11.0 36.0 12.0 7

3 CODAPHOS K: Fosfito de K 0.5 5.0 4.0 6.0 15.0 5.0 1

10DALGIN ACTIVE: Aminoácidos. Extracto de

algas con vitaminas.0.6 31.0 6.0 22.0 59.0 19.6 11

11LICHTOR: Carbohidratos, Ácido urónico, A.

Succínico, Mg, M.O., Aminácidos activos1.0 9.0 26.0 11.0 46.0 15.3 9

12 Trich-1. Trichoderma endofito de piña 106 ufc/mL 6.0 6.0 25.0 37.0 12.3 8

13 Trich-2. Trichoderma endofito de piña 106 ufc/mL 5.0 5.0 5.0 15.0 5,0 1

14

AVIBIOL: enmienda orgánica líquida.

Fermentación anaeróbica de estiércol de gallinas

ponedoras

20.0 9.0 35.0 34.0 78.0 26.0 12

15 TESTIGO AGUA 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0

16 TESTIGO: Lasiodiplodia thoebromae 106 c/mL 4.0 4.0 21.0 29.0 9.6 6

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Tipo I de suma

de cuadradosGl

Media

cuadrá

tica

F Sig.

Tratamiento 1419.083 15 94.606 1.130 0.374

Bloques 78.881 2 39.441 0.471 0.629

Error 2511.952 30 83.732

Total 11262.000 48

Total corregido 4009.917 47

ENSAYO 3: ANVA DE MAGNITUD DE LA LESIÓN

PRODUCIDA POR Lasiodiplodia theombromae EN

PLANTONES DE PALTO DE LA VAR. ZUTANO TRATADOS

CON PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA. CASA

MALL. TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

Fuente

a. R al cuadrado = ,374 (R al cuadrado ajustada = ,019)

1 2 3

T-Agua 0.0 2 1.0000

Codaphos K 0.5 3 6.0000 6.0000

Trich-2 106 ufc/mL 3 6.6667 6.6667

Regalia Maxx 0.5 3 7.0000 7.0000

Regalia Maxx 0.4 3 8.0000 8.0000

BP-1 106 ufc/mL 3 8.6667 8.6667 8.6667

BP-2 106 ufc/mL 3 10.6667 10.6667 10.6667

JMR2 1 3 12.0000 12.0000 12.0000

T-Lasiodiplodia 106 ufc/mL 3 13.0000 13.0000 13.0000

Codaphos Cu 0.6 3 14.0000 14.0000 14.0000

ALE-155 106 ufc/mL 4 14.5000 14.5000 14.5000

B.N. 106 ufc/mL 4 15.0000 15.0000 15.0000

Trich-1 106 ufc/mL 3 16.0000 16.0000 16.0000

Licthor 1.0 3 16.3333 16.3333 16.3333

Dalgin Active 0.6 3 20.6667 20.6667

Avibiol 20 2 26.5000

Sig. 0.099 0.114 0.054

Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos

homogéneos.a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 2,909.

b. Los tamaños de grupo no son iguales. Se utiliza la media

armónica de los tamaños de grupo. Los niveles de error de tipo I c. Alfa = 0.05.

kg-

L/200L

ENSAYO 3: DUNCAN DE MAGNITUD DE LA

LESIÓN PRODUCIDA POR Lasiodiplodia

theombromae EN PLANTONES DE PALTO DE LA

VAR. ZUTANO TRATADOS CON PROMOTORES

DE RESISTENCIA SISTÉMICA. CASA MALL.

TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

TratamientoN

Subconjunto

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TABLA 4. COLONIZACIÓN DE LASIODIPLODIA THEOBROMAE EN TEJIDO VASCULAR Y CORTICAL DE PLANTONES DE PALTO VAR. ZUTANO,

TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES PROMOTORES DE RESISTENCIA SISTÉMICA. CASA MALLA. TRUJILLO,

LA LIBERTAD, 2017.

TRAT. PRODUCT.CONC. DE APL.L/200L

(DRECH)

EVALUACIONES: Colonización de Lasiodiplodia sp. en tejido inoculado.

Medio de cultivo PDA enmendado

56 días después de la inoculación.

I II III SUMA PROM PUESTO

1 REGALIA MAXX 0.4 (Follaje) 60 100 60 220 73.30 4

2 REGALIA MAXX 0.5 (Follaje) 60 100 80 240 80.00 5

3 JMR2 1 ( Follaje) 60 40 100 200 66.67 3

4 B.N. 106 ufc/mL 100 100 80 280 93.33 6

5 ALE 155 106 ufc/mL 60 40 40 140 46.67 1

6 BP-1 106 ufc/mL 100 100 100 300 100.00 7

7 BP-2 106 ufc/mL 100 100 100 300 100.00 7

8 CODAPHOS CU 0.6 100 100 100 300 100.00 7

9 CODAPHOS K 0.5 100 100 100 300 100.00 7

10 DALGIN ACTIVE 0.6 0 100 40 140 46.67 1

11 LICHTOR 1.0 100 40 40 180 60.00 2

12 Trich-1 106 ufc/mL 40 100 100 240 80.00 5

13 Trich-2 106 ufc/mL 100 40 100 240 80.00 5

14 AVIBIOL 20.0 100 100 100 300 100.00 7

15 TEST. AGUA 0.0 0 0 0 0 0.00

16 TEST.LASIO. 106 c/mL 100 100 100 300 100.00 7

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Avance del patógeno

Resistenca de la planta

46.6%

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TABLA 5.CONTENIDO DE ÁCIDO JASMÓNICO Y ÁCIDO SALICÍLICO EN MUESTRAS DE TALLO

DE PLANTONES DE PALTO VAR. ZUTANO TRATADOS CON PRODUCTOS POSIBLES

PROMOTORES DE RESISTENIA SISTÉMICA CONTRA Lasiodiplodia theobromae. CASA MALLA,

TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

EXPRESADO EN P.P.M.

No.Muestra Ácido Jasmónico Ácido Salicílico

2Regalia Maxx: 0.5 L/100L 0.06 0.10

5ALE-155. Paenibacillus

macerans. 106 ufc/mL0.06 0.07

9 Codaphos K. 0.5L/200L 0.05 0.05

10 Dalgin Active.0.6L/200L 0.06 0.05

11 Licthor 1.0L/200L 0.06 0.05

13

Trich.-2( Trichoderma sp).106

ufc/mL0.03 0.03

15 Testigo-Agua 0.05 0.08

16 Lasiodiplodia 0.07 0.09

17 Testigo sin corte 0.04 <0.02

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TABLA 6. PESO DE RAÍCES DE PLANTONES DE PALTO TRATADOS CON PRODUCTOS ORGÁNICOS Y

BIOLÓGICOS PARA PROMOVER RESISTENCIA SISTÉMICA CONTRA LASIODIPLODIA THEOBROMAE .

CASA MALLA. TRUJILLO, LA LIBERTAD, 2017.

TRAT. PRODUCT.

CONC. DE

APL.L/200L

(DRECH)

PESO DE RAÍZ (GRAMOS)

29.11.17.TOTAL PROMEDIO

I II III

1 REGALIA MAXX 0.4 (Follaje) 171.0 220.1 156.9 548.0 182.7

2 REGALIA MAXX 0.5 (Follaje) 104.3 149.6 161.7 415.6 138.5

3 JMR2 1 ( Follaje) 126.3 190.6 143.1 460.0 153.3

4 B.N. 106 ufc/mL 128.2 133.2 320.6 582.0 194.0

5 ALE 155 106 ufc/mL 197.4 197.8 220.0 615.2 205.1

6 BP-1 106 ufc/mL 133.7 97.7 135.5 366.9 122.3

7 BP-2 106 ufc/mL 125.7 122.1 133.6 381.4 127.1

8 CODAPHOS CU 0.6 172.3 106.8 143.0 422.1 140.7

9 CODAPHOS K 0.5 152.2 131.3 177.2 460.7 153.6

10 DALGIN ACTIVE 0.6 132.9 115.2 122.1 370.2 123.4

11 LICHTOR 1.0 122.5 140.0 128.3 390.8 130.3

12 Trich-1 106 ufc/mL 91.8 180.9 210.2 482.9 161.0

13 Trich-2 106 ufc/mL 161.9 159.3 130.6 451.8 150.6

14 AVIBIOL 20.0 132.0 116.0 57.4 305.3 101.8

15 TEST. AGUA 0.0 187.7 83.3 99.3 370.3 123.4

16 TEST.LASIO. 106 c/mL 113.1 219.4 164.9 497.4 165.8

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Tipo I de suma

de cuadrados gl

Media

cuadrática F Sig.

Bloques 198494,292 2 99247,146 ,528 ,595

Tratamient

o3606005,979 15 240400,399 1,278 ,275

Error 5643419,708 30 188113,990

Total 115082021,000 48

Total

corregido9447919,979 47

Análisis de Varianza del peso de raíz de palto var. Zutano

Trujillo, La Libertad, 2017.

Origen

a. R al cuadrado = ,403 (R al cuadrado ajustada = ,064)

1 2

Avibiol 20L/200L 3 101. 8

BP-1 106 ufc / mL 3 122.3 122.3

Dalgin Active 0.6 L/200L 3 123.4 123.4

Agua 3 123.4 123.4

BP-2 106 ufc/mL 3 127.1 127.1

Licthor 1L/200L 3 130.3 130.3

Regalia Maxx 0.5 L/200L (Follaje) 3 138.5 138.5

Codaphos Cu 0.6L/200L 3 140.7 140.7

Tricho-2 106 ufc/mL 3 150.6 150.6

JMR2 1L/200L (Follaje) 3 153.3 153.3

Codaphos K 0.5 L/200L 3 153.6 153.6

Tricho-1 106 ufc / mL 3 160.9 160.9

Lasiodiplodia 106 ufc/mL 3 165.8 165.8

Regalia Maxx 0.4 L/200L (Follaje) 3 182.7 182.7

B.N. 106 ufc / mL 3 194.0

ALE-155 106 ufc/mL 3 205.1

Sig. ,064 ,059

Prueb de Duncan del peso de raíz de palto var

Zutano

TratamientoN

Subconjunto

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Conclusiones:• Los tratamientos en los que se observó el menor daño (lesión externa): Codaphos

K: 0.5 L/ 200L, Tricho-2; Trichoderma virens endófito de piña: 106 c/mL, JMR2, compuesto nanotecnológico: 1L/200L, Regalia Maxx 05.L/200L y Regalia Maxx0.4L/200L.

• El menor avance sistémico de Lasiosiplodia se encontró en el tejido tratado con Dalgin Active, Paenibacillus macerans strain ALE-155 y Licthor.

• El más alto contenido de ácido salicílico y ácido jasmónico se registró en el tejido tratado con 0.5L/ 200L de Regalia Maxx que, presentó 5 veces más que la muestra conformada por plantones que no habían sido cortados.

• Paenibacillus macerans starin ALE 155, B.N. (bacteria aislada de la cáscara del café) promovieron significativamente el desarrollo radicular de los plantones.

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RECONOCIMIENTO