número más probable - microbiología

8/15/2019 Número Más Probable - Microbiología

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UNIVERSIDAD DR. JOSÉ MATÍAS DELGADOFACULTAD DE AGRICULTURA E INVESTIGACIÓN AGRÍCOLA

JULIA HILL DE O’SULLIVAN

MICROBIOLOGÍA

“Método De N!"e#o M$% o'('e)

Do*e+te, L-*. C#-%t('e C#/

A"+o0(, M(#t1( G(d(2e A"(3( Ro"e#o

C(#+é, 456756896

G#2o, 6:6

C(##e#(, I+;e+-e#


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INTRODUCCIÓN

En este reporte se llegará a identificar el método NMP (Número más

probable, el cual consiste en una técnica de estimación estadística

basada en el hecho que a maor número de bacterias en una muestra,

maor será la dilución necesitada para reducir la densidad hasta el

punto en que ninguna bacteria se le permita crecer en la serie de

tubos de dilución! Muestras microbianas son a"adidas a tubos con

caldos de lactosa la presencia o ausencia de gas formado en la

fermentación da un estimado de número de células! Este método es

más útil cuando las bacterias que están siendo contados no crecerán

en medios sólidos, como en el caso de las bacterias nitrificantes

quimioautótrofas! #ambién es útil cuando el crecimiento de la bacteria

es en un medio líquido diferencial, usado para identificar microbios,

como en bacterias coliformes! El NMP es la única afirmación en la cuale$iste %&' de probabilidad que la población bacteriana sea de rango

correcto, siendo el número estadístico más probable! n sustrato es

donde crecen se desarrollan los microorganismos el sustrato puede

ser de diferentes tipos, estos podrían ser las personas los animales

las plantas hasta el mismo medio ambiente!

Para ello se utili)an diluendo la muestra poder reali)ar los

recuentos en las diluciones, si la muestra es sólida se utili)a *gr si es

líquida es un *ml!


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OBJETIVO GENERAL

+a Microbiología es una ciencia básica que requiere un enfoque

eminentemente aplicado, a que constitue la base de conocimiento

para diferentes actiidades, por e-emplo. caracteri)ar las

enfermedades infecciosas, sus mecanismos de patogenicidad;

entender el fundamento del tratamiento terapéutico, de la higiene

tecnología de los alimentos, de las aplicaciones industriales

ambientales de los microorganismos, etc!

OBJETIVOS ESPECIFICOS

/dquirir un concepto claro de los diferentes grupos de hongos

leaduras!

0onocer la estructura los tipos de colonia de los mismos!

0onocer la biología de los microorganismos. su multiplicación1

fisiología1 mecanismos genéticos1 ta$onomía, etc!

Estudiar sus actiidades en la naturale)a con ob-eto de

aplicarlas para su aproechamiento a niel industrial!

PROCEDIMIENTO


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Materiales y reactivs

*2 tubos de ensao

* mechero

3esinfectante

0aldo. +auril

algodón

alcohol

Papel toalla

4eringas

Muestra. +eche

5e limpió se desinfecto el área de traba-o donde se iba a llear a cabo el

desarrollo del laboratorio!

5e procedió a encender el mechero para tener un espacio libre de

microorganismos!

5e desinfecto con alcohol cada tubo luego se rotularon con una i"eta con

nuestros respectios datos!


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+uego se prepararon el medio este fue lauril

5e les coloco % ml de medio a cada tubo!

n tubo se de-ó sin muestra, a este se le llamo 6testigo7

+uego se puso * ml de la muestra (en este caso fue leche8 al tubo que se le

coloco la i"eta que dice patrón! /l tubo de *.*9 se le coloco * ml del patrón así sucesiamente como lo

muestra la imagen de aba-o!


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+uego del tubo *.*9 se sacaron otras tres muestras (*.*9, *.*99 *.*.9998

se hi)o el mismo procedimiento que se muestra en la imagen! 5e repitió el mismo proceso con el tubo de *.*99 el *.*999!

+uego se introdu-eron los *2 tubos enueltos en papel aluminio en una olla

con agua hiriendo!

1

+uego se de-aronenfriar en agua!

5e de-aron en un

raquet se introdu-eron en la incubadora por :2 horas!

RESULTADOS

Lec!e "Patr#$%

*.*9 +++++

&'&(( ++++

6,6555 +++


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M)estra *el t)+ &'&(

/* ++++

A, +++

A- ++


8/14

M)estra *el t)+ &'&((

;* ++++

B, ++

B- +

M)estra *el t)+ &'&(((

0* ++

C, -

C- -


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#ubos 9!* ml de muestra

= con * ml de dilución *.*99 > 9!9* ml de muestra

= con * ml de dilución *.*999 > 9!99* ml de muestra

N./er M0s Pr+a+le De Or1a$is/s- t)+s = tubos = tubos

&'&( &'&(( &'&(((- - &

N./er M0s Pr+a+le "NMP% 23(4( NMP51

CONCLUSIONES

El método del Número más probable (NMP8, también conocido

como el método de los ceros de Poisson, es una forma de

obtener datos cuantitatios en concentraciones de elementos


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discretos a partir de datos de incidencia positia?negatia! Es una estrategia eficiente para estimar densidades de población

que se emplea cuando una ealuación cuantitatia de elementos

indiiduales no es factible! El método se basa en determinar la

presencia o ausencia (positio o negatio8 de atributos

específicos de microorganismos en copias obtenidas por

diluciones consecutias a partir de muestras de suelo u otros

ambientes! 5e basa en el principio de que una única célula ia

puede desarrollarse producir un cultio turbio! El método requiere la reali)ación de una serie de diluciones en

serie de la muestra de cultio, en un medio líquido adecuado

para el crecimiento de dicho organismo de un olumen die)

eces maor! +uego, se incuban las muestras deseos tubos ,

pasado un tiempo, se e$aminan los tubos! /quellos tubos que

recibieron una o más células microbianas procedentes de la

muestra, se pondrán turbios, mientras que los tubos que no

recibieron ninguna célula permanecerán transparentes!

RECOMENDACIONES

Medir bien los medios para que estos alcancen!

0umplir con las indicaciones respectias para reali)ar las practicas!

#ener el área limpia desinfectada para que no haa ninguna alteración

en el resultado de la práctica!

Poner en práctica siempre los métodos de esterili)ación!

5er puntual responsable con la hora indicada para iniciar finali)ar la


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práctica!

ANE6OS

Cal* La)ryl Try7tse

Medio recomendado por /!P!@!/! para detección recuento de coliformes enaguas, aguas residuales alimentos!

Aundamento

Medio rico en nutrientes, que permite un rápido desarrollo de los microorganismos

fermentadores de la lactosa, aún de los fermentadores lentos!

+a triptosa es la fuente de nitrógeno, itaminas, minerales aminoácidos, la

lactosa es el hidrato de carbono fermentable, las sales de fosfato proeen un

sistema buffer, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico

Es un medio selectio, a que el lauril sulfato de sodio inhibe el desarrollo de la

flora acompa"ante!

Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido gas, éste último se eidencia

al utili)ar las campanas 3urham!

F#r/)la "e$ 1ra/s 7r litr% I$str)cci$es

Tri7tsa :9!9 5uspender =&,B g del polo en *


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litro de agua destilada! 3e-ar

reposar & minutos! 0alentar a

ebullición hasta la disolución

total! 3istribuir en tubos

conteniendo tubos de

fermentación! Esterili)ar en

autoclae durante *& minutos a

*:*C0!

Lactsa &!9

Clr)r *e s*i &!9

La)ril s)l8at *es*i

9!*

Fs8at *i7t0sic :!D&

Fs8at

/$7t0sic

:!D&

79 8i$al' 34: ; (4,

5iembraPara recuento de coliformes totales, técnica del Número Mas Probable.

a! Para el análisis de muestras fluidas como el agua, sembrar por triplicado. *9 ml

en caldo doble concentración *ml 9,* ml en caldo simple concentración!

N./er

*et)+s

Vl)/e

$ *e la

/)estr a

Vl)/e

$ *e

/e*i

C$ce$traci#

$

*el /e*i

- *9 ml *9 ml 3oble

- * ml *9 ml 5imple

- 9!* ml *9 ml 5imple

b! Para muestras sólidas (alimentos, cosméticos, fármacos8, efectuar diluciones

seriadas *9*

, *9:

*9=

sembrar cada dilución por triplicado en medio de cultiosimple concentración!

N./er Dil)ci#

$ *ela

Vl)/e

$ *e la

Vl)/e

$ *e

C$ce$traci#

$


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*e

t)+s

/)estra /)estra /e*i *el /e*i

- *9* * ml *9 ml 5imple

- *9: * ml *9 ml 5imple

- *9= * ml *9 ml 5imple


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0aracterísticas del medio!

Medio preparado. ámbar claro a ligeramente opalescente! 5i se consera en frío,

generalmente flocula o forma precipitado!

/lmacenamiento.5i se consera entre :&=9 I0 o estufa de incubación a =&=D I0 permanece claro!

Prese$taci#$

> &((1 'C#*i1' B(,?

&@2?(<

$ &99g .0ódigo. ;9:

*D29B

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