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Conociendo al Bacilo de la
Tuberculosis
Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos
Depto. de Bacteriología Lab. de Micobacterias
MC. Alberto Alfaro López / Junio 2014
«Parece como si el bacilo tuberculoso
estuviera rodeado de una pared especial de
propiedades inusuales y que la penetración
de un colorante a través de ella sólo
sucediera en presencia de un álcali, de
anilina o de una sustancia similar»
Primer obra de R. Koch
Descubrimiento del Bacilo de la Tuberculosis
Describió por primera vez al agente causal de la tuberculosis, Mycobacterium
tuberculosis o bacilo de Koch.
Robert Koch 1882
“De la etiología de la tuberculosis”. R. Koch. Ilustración del original
Herzog H. Respiration. 1998; 65:5-15. Ilustración : http://es.wikipedia.org/wiki/Historia_de_la_tuber culosis
Modificado de: http://es. wikipedia.org/wiki/Mycoba cterium
Estructura de la Envoltura Celular de MTB
1. Lípidos externos
2. Ácidos micólicos
3. Polisacáridos (arabinogalactano)
4. Peptidoglicano
5. Membrana celular
6. Lipoarabinomanana (LAM)
7. Fosfatidilinositol-manosido
8. Porinas
FormaRigidez
CarácterHidrofóbicoTaxonómico
Molécula Anfipática
CarácterAntigénico
Unión conÁc. grasos
Pared Celular
8
Gram-NegativasPorina
Proteínas
MembranaCelular
EP
Peptidoglicano
MembranaExterna
LPSProteínas deSuperficie
Ác. Teicoico
Ác. Lipoteicoico
Gram-Positivas
Arabinoga-lactano
Ác.Micólicos
LAMPorinaLípidosExternos
Micobacterias
¿Por qué MTB es un Bacilo Ácido Alcohol Resistente?
Modificado de: Parsons L M, et al. Infect Dis Clin of North America. 1997; 11 (4):90 8-910.
Bacilo largo ligeramente curvo o recto, inmóvil, no forma esporas y nopresenta cápsula.
Mide 3-5 µm x 0.2-0.6 µm.
División binaria (18 a 22 horas).
Crece en presencia de oxígeno, a un pH de6.8 a 7.2.
Muy resistente al frio, congelación y desecación.
Sensible al calor y a la luz solar.
Características Biológicas de MTB
Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient C are. Chapter 3:93-109.
Tinción Ziehl-Neelsen
Tinción Fluorocromos
NADPH
NADPHAT
PATP
NH3
NH3
CO2+
H20
NADH
FADH
Acetil CoA
glicólisis y víade pentosafosfato
Metabolismo de MTB-Requerimiento Nutricional
Proteínas, péptidos
ASPARAGINA
Proteínas, péptidos y aminoácidos
ASPARAGINA
Aminoácidos
Ciclo ATC
Cetoácidosis
GLICEROL
Fosfolípidos
GLICEROLLípidos y
Fosfolípidos
Intermediarios
Proteínas, ácidos nucleicos, polisacáridos, etc…
MICOBACTINA
EXOQUELINA
Fe+3
Fe+3
HOSPEDERO
Transporte de e-
Adaptado de: Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient C are. Chapter 3:102-104.
CarbohidratosGLUCOSA
Medio Sólido Lowenstein Jensen
Crecimiento “in vitro” y Morfología Colonial en Cultivo
Glicerol (estimula el crecimiento deMTB) y Asparagina.
Recuperación bacilar (3 a 4 semanas).
Colonias rugosas (forma de coliflor) y secas.
Tonalidad crema (no pigmentadas).
Medio Líquido BBL MGIT M7H9
Caldo Middlebrook 7H9 modificado (medio enriquecido).
Recuperación bacilar (1 a 2 semanas).
Factor cuerda.
Se debe realizar tinción para confirmar BAAR positivo.
Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient C are. Chapter 3:100, 102-104.
Metabolismo de MTB-Marcadores Bioquímicos
Aminoácidos
MACRÓFAGOAdaptado de: Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient C are. Chapter 3:106-107.
Proteínas, péptidos y aminoácidos
NIACINA(Ac. nicotínico)
ATPATP
CO2+
H20
NAD-H
FADH
Acetil CoA
Reparación del ADN
Ciclo ATC Transporte de e-
CATALASAPEROXIDASA
H2 + O2
2H2O + O2
Ácidos nucleicos, enzimas, polisacáridos, etc…
2H2O2
H2O2
H2
O2
NITRATO
NO3
NH3
NH3
e-e-
NITRATOREDUCTASA
NO3 + 2e + H2
NO2 + H2ONITRITO
NO
TERMOLÁBIL A 68 °C
Marcadores Bioquímicos-Identificación de MTB
NIACINA ( + )
NITRATOS ( + )
CATALASA A 68 °C ( - )
Mycobacterium tuberculosis
NIACINA
NITRATOS
CATALASA PEROXIDASA
Manual para el diagnóstico bacteriológico de la tub erculosis. Normas y guía técnica. Parte 2 Cultivo. OPS/OMS. 2008.
Características Genéticas de MTB
4,000 genes: 200 involucrados en la codificación deenzimas y proteínas de la familia PE y PEE.
Presenta un elevado contenido de G + C en su ADN(65.5%).
Secuencia de inserción IS6110 presente en MTB.
Genes que codifican para la proteína hsp65, proteína defusión (126kD) y el gen de la subunidad-β de lapolimerasa de ARN.
Genes asociados a resistencia: katG, inhA y kasA (INH),rpoβ (RIF), pncA (PZA) y embC, embA y embB (EMB).
Palomino J C. et al. Tuberculosis 2007 From Basic Science to Patient C are. Chapter 3:106-107. http://www.google.com.mx/ search=imagenes_del_genoma_de_tuberculosis
Mycobacterium tuberculosis
Arabinoga-lactano
LAMPorinaLípidosExternos
Ác.Micólicos
Inhibe la elongación del mARN
Inhibe la síntesis de la pared celular (Ác. micólicos)
Actúa en medio ácido. Inhibe la biosíntesis de nucleótidos. ATP y membrana celular?
Inhibe la síntesis de la pared celular
(arabinogalactano)
ETAMBUTOLembA, embC y embB
RIFAMPICINArpoβ
ISONIACIDAkatG, inhA y kasA
PIRAZINAMIDApncA
Inhibe la traducción del mARN
ESTREPTOMICINArrs y rpsL
Adaptado de: Palomino J C, et al. Tuberculosis 2007 From Basic Sciencie to Patient Care. Chapter 3:612-616 y Parsons L M, et al. Infect Dis Clin of North America. 1997; 11 (4):90 8-910.
Dianas de los Fármacos Anti-tuberculosis de 1. a Línea
Enfermos de TB
DETECCIÓN DIAGNÓSTICOCONTROL DEL TRATAMIENTO
La Importancia de Conocer al Bacilo de la TB
