DETERMINACION DE LA CALIDAD DEL AGUA POR SU CONTENIDO BACTERIAL

DETERMINACION DE LA CALIDAD DEL AGUA POR SU CONTENIDO BACTERIAL

OBJETIVOSDeterminar la calidad del agua de determinados ambientes de la universidad en base a su contenido bacterias.Saber la cantidad de bacterias que se han formado en las condiciones favorables durante 24 horas de encubacin.

Verificar si el total de bacterias presente en el agua de los ambientes estudiados sobrepasa los lmites mximos permisiblesFUNDAMENTO TEORICO

La calidad del agua, es un estado de esta, caracterizado por su composicin fsico-qumica y biolgica. Este estado deber permitir su empleo sin causar dao, para lo cual deber reunir dos caractersticas:

1.- Estar exenta de sustancias y microorganismos que sean peligrosos para los consumidores.

2.- Estar exenta de sustancias que le comuniquen sensaciones sensoriales desagradables para el consumo (color, turbiedad, olor, sabor).

El criterio de potabilidad del agua depende fundamentalmente del uso al que se la destina (humano, industrial, agrcola, etc)

Agua potable es el agua, ya sea de superficie o subterrnea , tratada y el agua no tratada por no estar contaminada. La definicin de agua potable se ha ido adaptando al avance del conocimiento cientfico y a las nuevas tcnicas, en especial a las relacionadas con el anlisis de contaminantes.

La mala calidad del agua afecta a infinidad de actividades vitales , es un bien tan preciado que en la exposicin de la Carta Europea del Agua comienza con Sin agua no hay comida, no hay bebida, ni luz, ni calor, ni lluvia. Sin agua no hay vida posible

Hasta hace unas decenas de aos la calidad de un agua destinada a un abastecimiento se centraba principalmente en que el agua estuviera exenta de sabores, olores, no fuera muy dura y no contuviera bacterias patgenas, confindose en gran medida en que el poder autodepurador de los embalses o ros, y la proteccin de las zonas de captacin eran suficientes para lograr una aceptable calidad que se completara con un tratamiento simple de decantacin, filtracin y desinfeccin, as como hacer determinadas comprobaciones generalmente bacteriolgicas del agua en la red, ausencias de sabores y olores y presencia de ligeras concentraciones del desinfectante empleado.

Hoy da y ms an de cara al futuro, y como consecuencia de la polucin creciente y los mayores avances de la tcnica y la ciencia hay que considerar adems otros caracteres que inciden de forma perjudicial en la salud del consumidor (pesticidas, detergentes, subproductos de la desinfeccin y otras sustancias orgnicas e inorgnicas as como protozoos, virus, bacterias, etc).

La consideracin legal sobre la potabilidad de

un agua se apoya o se basa en fijar una serie de compuestos o sustancias y asociarlas con unos contenidos aceptables

ANLISIS BACTERIOLGICO DE AGUASEntre Las ETAS (,enfermedades transmitidas por alimentos,) se encuentran las transmitidas por el agua. Es entonces conveniente determinar la potabilidad desde el punto de vista bacteriolgico de este medio. Buscar grmenes como Salmonella, Shigella, trae inconvenientes, pues normalmente aparecen en escasa cantidad. Por otra parte su supervivencia en este medio desfavorable y la carencia de mtodos sencillos y rpidos, llevan a que su investigacin no sea satisfactoria, mxime cuando se hallen en nmero reducido.En vista de estos inconvenientes se ha buscado un mtodo mas seguro para establecer la calidad higinica de las aguas, mtodo que se basa en la investigacin de bacterias coliformes como indicadores de contaminacin fecal.El agua que contenga bacterias de ese grupo se considera potencialmente peligrosa, pues en cualquier momento puede llegar a vehiculizar bacterias patgenas, provenientes de portadores sanos, individuos enfermos o animales.Bacterias coliformes:

Son bacterias aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas, no esporuladas, que fermentan la lactosa con produccin de cido y gas.

SalmonellaEs probable que los concentrados de muestras necesiten ser enriquecidos previamente en agua de peptona amortiguada, para luego ser enriquecidos en caldo que contenga ya sea tetrationato, selenito, cloruro de magnesio o verde de malaquita. Estos, a su vez, pueden ser sometidos a subcultivo en medios como el verde brillante, sulfito de bismuto, agar de desoxicolata xilosa-lisina (DXL), citrato de desoxicolata o agar de MacConkey, examinndose luego las colonias sospechosas tanto bioqumica como serolgicamente. Entre las pruebas de depuracin bioqumica se deber incluir: agar triple de azcar y hierro, produccin de indol, decarbosilasa y actividad de -galactosidasa. En las pruebas serolgicas se incluir la aglutinacin con sueros polivalentes anti-o, anti-H y anti-Vi. Es imprescindible la eliminacin previa de cepas autoaglutinables. Cuando el anlisis se realiza para detectar las S. typhi , el medio de cultivo aconsejado es la selenita F. El procedimiento de los tubos mltiples se utilizar para calcular el nmero de Salmonella presentes en el agua.

ShigellaDebido a que las bacterias coliformes y la mayora de cepas de Proteus vulgaris son antagnicas a la Shigella, es aconsejable elegir medios enriquecidos selectivos que reduzcan al mnimo las acumulaciones de compuestos voltiles y de los subproductos obtenidos a partir de estos microorganismos antagnicos. Se puede usar caldo nutriente con un pH ajustado de 8,0 (es el nivel de pH que menos favorece el crecimiento de bacterias coliformes). Tambin es posible obtener un buen enriquecimiento de Shigella con un medio de cultivo autocitotxico con base en caldo de tripticasa de soja conteniendo 1 mmol/litro de 4-cloro- 2-ciclopentilfenil -D-galactopiranosida, 2,5 g/litro de lactosa y sustancia amortiguadora de citrato a un pH de 6,2. La incubacin debe hacerse durante 6-18 horas, a una temperatura de 35C. Estrense las culturas en agar DXL cuando hayan transcurrido 6 y 18 horas. Somtanse las colonias sospechosas a pruebas de seleccin bioqumica y confrmese las colonias sospechosas con antisueros de Shigella (sueros polivalentes y de tipo especfico).

Vibriones del clera y de otro tipoComo forma de enriquecimiento primario se utiliza principalmente el agua alcalina de peptona y el agua de taurocolato telurita de peptona, los subcultivos se harn utilizando como medios selectivos un agar de tiosulfato, citrato, bilis, sal y sucrosa o un agar de gelatina de taurocolato y telurito. Los cultivos que sean sospechosos se inocularn en agar de hierro Kligler. Despus de 18 horas de incubacin, los V. cholerae producen un caracterstico color amarillo, sin ninguna produccin de gas. Estos cultivos se depurarn despus para determinar la actividad de ureasa y oxidasa; las cepas que demuestren ser negativas respecto a rea y positivas en cuanto a oxidasa debern ser remitidas a un laboratorio de referencia para que se realicen otras pruebas bioqumicas y de agrupamiento serolgico.

Coli enteropatgenosEn este caso se utilizan las tcnicas para la deteccin de bacterias coliformes fecales en el agua. Las colonias se confirmarn como E. coli y si la evidencia epidemiolgica as lo garantiza, los subcultivos pueden ser remitidos a un laboratorio de referencia para agrupamiento serolgico y, en caso necesario, para realizar las pruebas que determinan la enterotoxigenicidad.

Yersinia enterocoliticaSe ha encontrado que el agar M-Endo es el medio de cultivo ms conveniente y de mltiple utilidad debido a las distintas caractersticas morfolgicas de las colonias cuando se incuban tanto a 25 como a 35C. Despus de transcurridas 72 horas de incubacin, las colonias aparecern bien definidas y con una coloracin roja oscura. Tambin da buenos resultados para el desarrollo bacteriano utilizar agar de MacConkey, siempre que la incubacin se haga a 25C. Todos los grupos aislados que resulten sospechosos debern ser depurados bioqumicamente a 25C y 35C utilizando ramnosa, rafinosa y melibiosa. Si existe evidencia epidemiolgica que lo garantice, debern enviarse los subcultivos a un laboratorio de referencia para formar los grupos serolgicos y efectuar las pruebas de susceptibilidad a los antibiticos.

Procedimiento Experimental:

1.- Preparar placas con medio agar: Tomamos las muestras

2.- Incubar las placas, por 48 horas a 20C o a 37C por 24 horas, y contar el numero de colonias en una placa dada, multiplicando por la recproca de la fraccin sembrada da el numero de bacterias por ml. Solamente las placas que contienen de 30 a 300 colonias deben considerarse como satisfactorias para el recuento de bacterias. En el caso que ninguna placa est dentro de estos lmites, se contar la placa que se aproxime ms al numero 30 o 300.Seleccionar dos placas correspondientes a una dilucin que contenga entre 30 y 300 colonias. Tomar la media aritmtica de los 2 recuentos y multiplicar por el factor de dilucin (recproco de la dilucin utilizada). Informar segn el caso, el resultado como nmero de microorganismos aerobios mesfilos por ml gramo . En la evaluacin de la potabilidad del agua ubicada en reservorios de almacenamiento domiciliario deber incluirse entre los parmetros microbiolgicos a controlar el recuento de bacterias mesfilas en agar (APC 24 hs. a 37 C); en el caso de que el recuento supere las 500 UFC/ml y se cumplan el resto de los parmetros indicados, slo se deber exigir la higienizacin del reservorio y un nuevo recuento.RESULTADOS:

GRUPO 1 ESTANQUE DE ARQUICTECTURAMUESTRAS1 ml604 COLONIASUFC/MT

169*1/101 = 1690

27*1/102=2700OBSERVACIONES:

Fecha 07 de abril 2015

Incubadora: 24 horas

Tamao colonias:

1 mm 1era.

2 mm 2da.4 a 5 mm 3era.

10^-1 ml169 COLONIAS

10^-2 ml27 COLONIAS

GRUPO 1 ESTANQUE DE ARQUICTECTURA

GRUPO 3- BAO DE GIMNASIOMUESTRAS1 ml4 COLONIASFecha: 07 de abril 2015

Incubadora: 50 Hrs

Tamao colonias:

0.5 , 0.1, 0.2 mm 1ero

0.5, 0.1, 0.2 mm 2do

10^-1 ml65 COLONIAS

GRUPO 3 BAO DEL GIMNASIO

GRUPO 5- BAO DE LA FIAMUESTRAS1 ml89 COLONIASUFC/MT

89*1 = 89

20*1/101 =200

9*1/102=900OBSERVACIONES:

13/04 Tiempo de conteo: 48 horas

Tamao colonias:

1 a 10 mm

10 ^-120 COLONIAS

10^-29 COLONIA

UFC = Unidad formadora de coloniasGRUPO 5 BAO DE LA FIA

CONCLUSIONES:Al agua natural, potable o de desecho; se le debe determinar:

El agua de los servicios higienicos de la FIA y Gimnasio contienes menos bacterias ya sea por el filtro que contiene los tanques de agua, lo cual el Estanque de Arquictectura se encunetra al aire libre, expuesto a bacterias del medio ambiente. El pH del agua, el cual indica la intensidad de acidez que pueda presentar.

La alcalinidad, la cual va a depender del pH del punto final utilizado en la determinacin.

Se observo que el Grupo 1 realizo un adecuado sembrado en las placas Petri obtuviendo un resultado favorable, lo cual no se obtuvo con los grupos 3 y 5.RECOMENDACIONES:

Hacer un anlisis ms frecuente a los tanques de agua de la Fia para saber la calidad del agua y poderla tratar, asi mismo en los diferentes ambientes de la UNI donde cuenten con tanques. Realizar la limpieza los estanques como el de Arquitectura, peridicamente ya que se encuentra expuesto a bacterias del medio ambiente. Realizar el laboratorio de forma ordenada y seguir los pasos para no tener datos incorrectos. Tener cuidado al momento de realizar la preparacin del cultivo ya que si no realizan un esterilizado correcto no se va tener un resultado conforme. Tener cuidado en el momento de tener en la incubadora las placas mas de 24 horas, lo cual en el grupo 3 y 5 se olvidaron y pasaron 50 horas no obteniendo los resultado requeridos.

ANEXOS

BIBLIOGRAFIA

http://html.rincondelvago.com/control-microbiologico-de-calidad.htmlhttp://www.slideshare.net/guest6e00ca1/microbiologa-del-agua#http://www.fortunecity.es/felices/andorra/51/calidad_del_agua.htmhttp://www.monografias.com/trabajos/mmbiologia/mmbiologia.shtml

Vaciar el Agar preparado a tres tubos de ensayo cada uno con 15 ml.

Llevar a autoclave

Preparar

muestras de 99 ml de Peptona

GRUPO 1

Estanque de Arquuictectura

GRUPO 3

Bao del gimnasio

GPO 5

Bao de la Fia

Echar el agar al Petri esterilizadoo

Echar la muestra de agua.

Echar 1 ml de muestra de agua a la solucin de Peptona para la muestra de 10^-2.

La primera 1ml de agua de muestra con 1ml de agar

La segunda es 0.1ml de muestra con 10^(-1) de agar.

La tercera 1ml de la dilucion con 10^(-2) de agar y Agua peptonada.