inmunologia -reacciones febriles

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Equipo no.11 Campos Vega Romana Medina Salgado Jenyffer Daniela Mendez Perez Grissell Zulema

Valdez Ortega Nicole

Esta

prueba representa un mtodo de laboratorio til para seguir la secuencia de ciertas infecciones con acceso febril, causadas por bacterias.

La reaccin de Widal es un mtodo serolgico usado comnmente en el diagnstico de las fiebres tifoideas, entrica y ondulante, la reaccin mide el ttulo del suero contra una suspensin de microorganismo conocidos La reaccin de Widal es un test basado en el principio de aglutinacin antgeno-anticuerpo, donde se determina la presencia de anticuerpos contra el antgeno O y H de la Salmonella typhi para el serodiagnstico de fiebre tifoidea, sin embargo debido a su falta de especificidad, debe ser interpretado en el contexto clnico del paciente.

Las aglutininas O y las H son las aparecidas en el suero como respuesta a la estimulacin creada por los antgenos (Ag) somticos O y flagelares H de la salmonella. El Ag Vi de superficie no suele emplearse en el diagnstico serolgico porque los Ac que produce tienden a desaparecer de la sangre inmediatamente despus de la mejora clnica. Las aglutininas O aparecen con precocidad, alcanzan ttulos bajos y desaparecen rpidamente; las H aparecen ms tarde, alcanzan ttulos elevados y se conservan ms tiempo, pudiendo demostrarse ttulos bajos durante ms de un ao. Los ttulos altos frente al Ag O significan infeccin en la fase aguda; los ttulos altos frente al Ag H corresponden a la fase de convalecencia.

Los falsos positivos de la reaccin de Widal tambin han sido descritos en procesos no infecciosos, como enfermedades autoinmunes (artritis reumatoide- lupus eritematoso sistmico) y hepatopatas crnicas. Tambin hay que considerar los falsos negativos como toda prueba de laboratorio, entre sus causas tenemos 1. Antibioticoterapia temprana, la cual, retrasa la aparicin de anticuerpos (descrito principalmente con cloranfenicol) 2. Utilizacin de corticosteroides 3. Medicin temprana de anticuerpos (primera semana) 4. Inmunodeficiencias adquiridas y congnitas. 5. Portadores crnicos de Salmonella typhi.

La

reaccin de Huddleson es un mtodo serolgico que detecta anticuerpos contra B. abortus, B. melitensis y B. Suis, agentes causales de la brucelosis; tambin conocida como fiebre de malta o fiebre ondulante por el cuadro febril caracterstico que se presenta. La prueba se basa en una reaccin inmunolgica entre los anticuerpos sricos y el antgeno correspondiente produciendo una reaccin de aglutinacin macroscpica.

Se

utiliza una suspensin Antgenos de B. abortus al 3-10% de grmenes en fenol, con verde brillante y cristal violeta para la busqueda de anticuerpos.

En las reacciones febriles se utiliza la reaccin de Weil-Felix, esta prueba en si no busca Rickettsias, se basa en la capacidad del suero del paciente infectado por Rickettsias para aglutinar ciertas cepas de Proteus (Reaccin cruzada) por lo que es poco sensible y especfica y siempre deber seguirse de pruebas confirmatorias (fijacin del complemento, hemaglutinacin indirecta, inmunofluorescencia directa e indirecta y otras). El periodo de incubacin es de aproximadamente 7 dias y varia de 2 a 14 das.

Suero

control negativo: Suero de conejo el cual no ha sido inmunizado contra ningn antgeno, por lo que no muestra ninguna aglutinacin con los antgenos en suspensin. Suero Control Positivo: Suero de conejo el cual ha sido inmunizado contra todos los antgenos febriles en una suspensin.

Puede efectuarse por medio de dos maneras.

Mtodo de aglutinacin rpida en placa.

1. Anotar el antgeno correspondiente en la placa de vidrio. 2. Depositar en cada cuadro 0.04ml de suero del paciente para cada uno de los antgenos que se vayan a utiliza. 3. A cada gota de suero aadir una gota de cada antgeno. 4. Mezclar con un aplicador limpio ( utilizar un aplicador para cada antgeno. 5. Agitar suavemente la placa por rotacin (120 r.p.m) durante 2 3 minutos. 6. Observar la aglutinacin con ayuda de una lmpara. Cuando hay reaccin positiva se repite la tcnica con diluciones las cuales se obtienen con el uso de las siguientes cantidades del suero en la siguiente forma.

Mtodo de aglutinacin en tubo. 1. Numerar siete tubos ( 13x75mm) del uno al seis y un testigo (T) para cada antgeno. 2. Adicionar 0.9 ml de solucin salina al primero y 0.5 ml a los restantates. 3. Agregar 0.1ml del suero problema al tubo uno. Mezclar y pasar 0.5 ml al tubo dos y as sucesivamente hasta el seis eliminando 0.5 ml de esta ltima dilucin. Obtenindose diluciones 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, 1/160 y 1/320. 4. Adicionar 0.3 ml de antgeno diluido previamente 1:20 con solucin salina en cada uno de los tubos.

5.

Agitar enrgicamente e incubar en bao mara en las siguientes condiciones. Antgeno/tiempo - Temperatura. Salmonella B 18 a 24 hrs. 48 a 50C Salmonella H 2hrs. 37C Paratificos A y B 2 hrs. 48 a 50C Brucella 48 hrs. 37C Proteux 0X-19 18 hrs. 37C 6.Tomar dos o tres tubos a la vez, agitarlos ligeramente frente una fuente de luz que ilumine las partculas claramente.

1.

Todos los sueros por probar debern estar totalmente claros y libres de contaminacin bacteriana. 2. No caliente el suero antes de probarlo. 3. Agite bien el antgeno antes de utilizarlo para asegurar una suspensin uniforme. 4. El antgeno se debe mantener en refrigeracin a 2 8C cuando no se utilice. 5. No congelar.

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