importancia del laboratorio de microbiología en las infecciones del tracto genital

67
Importancia del Laboratorio de M icrobiología en el diagnóstico de las infecciones del tracto genital. [email protected] @ dialogosdemicro dialogosdemicro 1 Carolina Macero 03/10/2015

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Page 1: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Importancia del Laboratorio de Microbiologiacutea en el diagnoacutestico de las infecciones del tracto genital

carolinamacerogmailcom

dialogosdemicro

dialogosdemicro

1

Carolina Macero

03102015

2

MICROBIOTA HABITUAL

bull gt50 producidas por flora endoacutegena

bull MO 2 roles proteccioacuten-infeccioacuten

bull Modificada significativamente seguacuten edad y cond fisioacutelogicas(estroacutegenos)

Flora del trato cervicovaginal Alicia Farinati y M Tilli Cap 5

3

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 54

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 55

Microbiota en el tiempo

LACTOBACILOSde la madre viacutea transplacentaria

colonizan la vagina de la bebeacute

durante la lactancia

ECN

ESTREPTOCOCOS

E COLI Y BGNF

VEILLONELA Y OTROS ANO2

pocos lactobacilos

El estroacutegeno producido durante la menarquia aumento

de glucoacutegeno proliferacioacuten de

LACTOBACILOS y secvag

DCGN similar morfoloacutegicamente a NgonorrhoeaeCuidado con Idx soacutelo con microscopiacutea

Puede confundirse con infeccioacuten si no se considera la etiologiacutea y se ignora fisiologiacutea Uso

indiscriminado ATM

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm6

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 2: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

2

MICROBIOTA HABITUAL

bull gt50 producidas por flora endoacutegena

bull MO 2 roles proteccioacuten-infeccioacuten

bull Modificada significativamente seguacuten edad y cond fisioacutelogicas(estroacutegenos)

Flora del trato cervicovaginal Alicia Farinati y M Tilli Cap 5

3

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 54

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 55

Microbiota en el tiempo

LACTOBACILOSde la madre viacutea transplacentaria

colonizan la vagina de la bebeacute

durante la lactancia

ECN

ESTREPTOCOCOS

E COLI Y BGNF

VEILLONELA Y OTROS ANO2

pocos lactobacilos

El estroacutegeno producido durante la menarquia aumento

de glucoacutegeno proliferacioacuten de

LACTOBACILOS y secvag

DCGN similar morfoloacutegicamente a NgonorrhoeaeCuidado con Idx soacutelo con microscopiacutea

Puede confundirse con infeccioacuten si no se considera la etiologiacutea y se ignora fisiologiacutea Uso

indiscriminado ATM

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm6

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 3: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

MICROBIOTA HABITUAL

bull gt50 producidas por flora endoacutegena

bull MO 2 roles proteccioacuten-infeccioacuten

bull Modificada significativamente seguacuten edad y cond fisioacutelogicas(estroacutegenos)

Flora del trato cervicovaginal Alicia Farinati y M Tilli Cap 5

3

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 54

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 55

Microbiota en el tiempo

LACTOBACILOSde la madre viacutea transplacentaria

colonizan la vagina de la bebeacute

durante la lactancia

ECN

ESTREPTOCOCOS

E COLI Y BGNF

VEILLONELA Y OTROS ANO2

pocos lactobacilos

El estroacutegeno producido durante la menarquia aumento

de glucoacutegeno proliferacioacuten de

LACTOBACILOS y secvag

DCGN similar morfoloacutegicamente a NgonorrhoeaeCuidado con Idx soacutelo con microscopiacutea

Puede confundirse con infeccioacuten si no se considera la etiologiacutea y se ignora fisiologiacutea Uso

indiscriminado ATM

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm6

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 4: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 54

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 55

Microbiota en el tiempo

LACTOBACILOSde la madre viacutea transplacentaria

colonizan la vagina de la bebeacute

durante la lactancia

ECN

ESTREPTOCOCOS

E COLI Y BGNF

VEILLONELA Y OTROS ANO2

pocos lactobacilos

El estroacutegeno producido durante la menarquia aumento

de glucoacutegeno proliferacioacuten de

LACTOBACILOS y secvag

DCGN similar morfoloacutegicamente a NgonorrhoeaeCuidado con Idx soacutelo con microscopiacutea

Puede confundirse con infeccioacuten si no se considera la etiologiacutea y se ignora fisiologiacutea Uso

indiscriminado ATM

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm6

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 5: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Flora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 55

Microbiota en el tiempo

LACTOBACILOSde la madre viacutea transplacentaria

colonizan la vagina de la bebeacute

durante la lactancia

ECN

ESTREPTOCOCOS

E COLI Y BGNF

VEILLONELA Y OTROS ANO2

pocos lactobacilos

El estroacutegeno producido durante la menarquia aumento

de glucoacutegeno proliferacioacuten de

LACTOBACILOS y secvag

DCGN similar morfoloacutegicamente a NgonorrhoeaeCuidado con Idx soacutelo con microscopiacutea

Puede confundirse con infeccioacuten si no se considera la etiologiacutea y se ignora fisiologiacutea Uso

indiscriminado ATM

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm6

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 6: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Microbiota en el tiempo

LACTOBACILOSde la madre viacutea transplacentaria

colonizan la vagina de la bebeacute

durante la lactancia

ECN

ESTREPTOCOCOS

E COLI Y BGNF

VEILLONELA Y OTROS ANO2

pocos lactobacilos

El estroacutegeno producido durante la menarquia aumento

de glucoacutegeno proliferacioacuten de

LACTOBACILOS y secvag

DCGN similar morfoloacutegicamente a NgonorrhoeaeCuidado con Idx soacutelo con microscopiacutea

Puede confundirse con infeccioacuten si no se considera la etiologiacutea y se ignora fisiologiacutea Uso

indiscriminado ATM

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm6

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 7: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

El nuacutemero de bacterias aisladas de la SV en mujeres feacutertiles

107 - 108 UFCg de fluido

Incrementan LACTOBACILOS

y Candidas en embarazadas

ANO2 son inhibidos

En la menopausia los lactobacilos

reemplazados por MYCOPLASMA

Ano2 y

G vaginalis

Actualizacioacuten sobre vaginosis bacteriana WMartiacutenez httpbvssldcurevistasginvol39_4_13gin12413htm

Microbiota en el tiempo

7

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 8: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Establecimiento y mantenimiento de MHV

8Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 9: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

MICROBIOTA EMBARAZADAS

bull Aumenta la colonizacioacuten con lactobacilos 97

bull Aumenta colonizacioacuten con levaduras 24

bull Especies de estreptococos aacutecido-tolerantes no variacutean casi

bull Ano2 son inhibidos incremento acidez y redox

DIAGNOacuteSTICO MICROBIOLOacuteGICO DE LA INFECCIOacuteN BACTERIANA ASOCIADAAL PARTO Y AL PUERPERIO 2015 Sociedad

Espantildeola de EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)SEIMC9

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 10: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

SGBbull Infeccioacuten neonatal precoz por S agalactiae (1-

2 de RN colonizados)

bull Existen 10 serotipos (Ia Ib II al IX) y cualquiera produce colonizacioacuten o infeccioacuten

bull Prevalente en la infecneonatal el serotipo III

bull Asociacioacuten entre un clon de SGB del serotipo III ST-17 y meningitis neonatal

Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)10

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 11: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

DX MICROBIOLOacuteGICO INDICACIOacuteN Y TIPO DE MUESTRAS PARA REALIZAR EL DESPISTAJE

bull La rentabilidad en la deteccioacuten es mayor si se realiza toma vaginal y rectal

bull Las muestras endocervicales perianales o perineales no son adecuadas

bull La muestra de orina sirve para detectar bacteriuria asintomaacutetica y en este caso ya no

seriacutea necesario realizar la toma vagino-rectal

11Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

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Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 12: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Caldo de ToddHewitt con colistina + aacutecido nalidiacutexico

-agar sangre

-CNA o en agar

cromogeacutenico

18- 24 h 35-37ordmC5 de CO2

18- 24 h 35-37ordmC

Si a las 24 h el cultivo es negativo

se reincubaraacuteotras 24 h antes

de dar el resultado

como negativoEl cultivo debe

hacerse cualitativo

DX MICROBIOLOacuteGICO PROCEDIMIENTO

D-test para confirmar la S a CC

Sem 35 - 37

Valor predictivo

negativo 88-96

12Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 13: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

La realizacioacuten de estas teacutecnicas se basa en la

deteccioacuten de colonizacioacuten intermitente o transitoria

Se ha demostrado que un 30-50 de las mujeres

detectadas como colonizadas en el parto no lo estaban en

el despistaje antenatal y un 25-40 de las que lo estaban

en el momento del parto no lo estaacuten

XpertTM GBS assay aporta resultados en 30-45 min

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

13Diagnoacutestico Microbioloacutegico De La Infeccioacuten Bacteriana Asociadaal Parto y Al Puerperio 2015 Sociedad Espantildeola de

EnfermedadesInfecciosas y Microbiologiacutea Cliacutenica (SEIMC)

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 14: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

bull MO endoacutegenos gt 90 de las mujeres

bull Lactobacillus spp Corynebacterium spp

Flora permanente

bull MO endoacutegenos aparecen en un momento del ciclo

bull U urealyticum se recupera en el 17 como flora permanente y en el 48 como transitoria

Flora transitoria

bull MO endoacutegenos que se recuperan ciacuteclicamente

bull Gvaginalis S grupo B

Flora intermitente

Flora

patoacutegena

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

bull MO exoacutegenos Ngonorrhoeae

CtrachomatisTreponema palidum

bull MO endoacutegenos que pueden desencadenar solos o

asociados alguna patologiacuteaC albicans G vaginalis

ANO2Mycoplasma sppFlora del trato

cervicovaginal Alicia Farinati

y M Tilli Cap 514

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 15: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Objetivo Inv la composicioacuten de la microbiota vaginal en las mujeres en edad reproductiva (mujeres sanas y mujeres con VB) con el fin de desarrollar criterios moleculares para el Dx VB

Control

Teacutecnicas moleculares

GV

CLASIFICACIOacuteN MICROBIOTA

15

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 16: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Intermedio VB

LGV

GV

G vaginalis Atopobium vaginae Eggerthella Prevotella BVAB2 y Megasphaera tipo 1 yLactobacillus fue altamente preciso para Dx de VB

16

L

Published online 2013 Apr 9 doi 101371journalpone0060670 PMCID PMC3621988 Composicioacuten de la microbiota vaginal en

mujeres en edad reproductiva - Sensible y especiacutefico Dxmolecular de la Vaginosis Bacteriana iquestEs posible EShipitsyna y col

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 17: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Vaginosis Bacteriana

bull Inf endoacutegena del TGInferior

bull Desequilibrio de la microbiota

bull Sin RI

bull Elevacioacuten del pH

bull Produccioacuten de aminas

bull 35 asintomaacuteticas

bull Causas multifactorial- fagos Lactobacillus spp

17

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 18: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

1 2 3 4

EVOLUCIOacuteN DE LA MICROBIOTA VAGINAL DURANTE LA VAGINOSIS BACTERIANA

LACTOB GV ANO2

18

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 19: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

bull DISMINUYEN

bull DISMINUYE H2O2

LACTOBGV

ANO2

Descarga

Aminas

(mal olor

phgt45)

Degeneraccel

Esquema de la fisiopatologiacutea de Vaginosis Bacteriana

19

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 20: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

IMPORTANTE

bull GV es flora habitual

bull No podemos diferenciar si esta causando o no VB

bull Soacutelo aplicando los criterios cliacutenicos yo

microb podemos realizar Dx de VB

Existe consenso en desincentivar el diagnoacutestico de VB a traveacutes de la deteccioacuten deG vaginalis mediante cultivo o PCR porque esta bacteria forma parte de la microbiota vaginal normal

20

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 21: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

21

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 22: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

100x

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUS

BGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+

5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+

1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+

0 = 4+ 0 = 1+

Evaluacioacuten del puntaje de Nugent y colInterpretacioacuten del Gram

22

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 23: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Ejemplo coloracioacuten de Gram (100x)

LACTOBACILLUS GARDNERELLAPREVOTELLA MOBILUNCUSBGP RECTOS CBG+- BG+- CURVOS

gt30 = 0+ gt30 = 4+ 0 = 0+5-30 = 1+ 5-30 = 3+ 1-4 = 1+1-4 = 2+ 1-4= 2+ gt5 = 2+0 = 4+ 0 = 1+ 23

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 24: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Exdirecto

40x

Gram

Nugent y col

Cultivo+atb

( no necesario

para VB)

Correccioacuten LanzafameCeacutelulas guiacutea antildeaden 2

ptos al valor de Nugenty col

4 a 6 (con correccioacuten de ceacutelulas guiacutea incluido) se procede a la lectura de otro extendido Si persiste el resultado intermedio se informaraacute aclarando la presencia o no de ceacutelulas guiacutea

Procedimiento Mx TGF

24

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 25: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

PROCEDIMIENTO DE SPIEGEL

Microbiota normal predominio morfotipolactobacilar con o sin presencia de cocobacilos Gramvariable

VB lt 5 bacterias del morfotipo lactobacilar conjuntamente con gt 5 bacterias de al menos dos de los siguientes morfotipos cocobacilos Gramvariable Gram negativos bacilos curvos Gramvariable bacilos Gram negativos fusiformes y cocaacuteceas Gram positivas

25

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 26: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

PROCEDIMIENTO DE ISONHAY

Clasificacioacuten de microbiota en 5 grados

I Microbiota normal LactobacilosII Microbiota intermedia disminuc Lactobacilos+ mezcla morfotiposIII Vaginosis bacteriana microbiota mixta con escasos LactobacilosIV Microbiota compuesta por cocaacuteceas Gram positivas0 ceacutelulas y ausencia de bacterias (Este grupo

corresponderiacutea a la vaginitis aeroacutebica)

26

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 27: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Rev meacuted Chile v139 n1 Santiago ene 2011 Comparacioacuten de los criterios de Nugent y Spiegel para el diagnoacutestico de

vaginosis bacteriana y anaacutelisis de los resultados discordantes por el meacutetodo de Ison y Hay Martiacutenez Ma y col

Estudio comparativo- Conclusioacuten

Los sistemas propuestos por Spiegel Nugent e

IsonHay son comparables para el diagnoacutestico de

VB

Recomendamos el sistema de IsonHay como

procedimiento general de evaluacioacuten de la

microbiota vaginal

Mejor discriminacioacuten de la microbiota vaginal

27

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 28: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Comparacioacuten de las teacutecnicas comunes de diagnoacutestico

Amsel Nugent Requerimientos Tiras reactivas

OHK Microscopio Especuloscopiacutea

Microscopio Personal altamente

entrenado

Ventajas Con 3 criterios cliacutenicos puede diagnosticarse (pH PA y flujo)

Alta sensibilidad Se puede realizar sin

especuloscopiacutea

Desventajas Dificultad de contar tiras reactivas e OHK

Uno de los criterios se pierde sin especuloscopiacutea (Flujo)

Demora diagnoacutestica Entrenamiento Tiempo

Tiras reactivas de pH a partir de 38 y de 02 a 02

Dra Alicia Farinati- Junio 2010

28

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 29: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Evaluado en forma paralela a la consulta meacutedica representa el maacutes alto valor predictivo (negativo y positivo) para evidenciar Vaginitis

Vaginosis TV y levaduras

MOacuteDULO DE APOYO A LA GUIA PRAacuteCTICA INTEGRAL (Cliacutenica-Laboratorio) DE DIAGNOacuteSTICO DE DISFUNCIOacuteN VAGINAL (VAGINOSIS-VAGINITIS)en la ATENCIOacuteN PRIMARIA de la MUJER EN EDAD FEacuteRTIL (Diciembre 2007)

VALOR DE LPMN indicador altamente confiable del desarrollo de un estado inflamatorio o no

EXAMEN DIRECTO - 40x

El mayor valor predictivo se logra con estudio microscoacutepico integral (Fresco Gram y Giemsa) del balance del contenido vaginal (BACOVA)

29

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 30: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

lt 10ge 10

LINEA DE CORTE DE EVALUACIOacuteN RI

40x Ex fresco-Giemsa

lt 5ge 5

100x Gram

El maacutes exacto gt1 leuco por CEP x cpo

Usar Giemsa 40x

Guiacutea praacutectica integral (cliacutenica-laboratorio) de diagnoacutestico de vaginosis-vaginitis en la atencioacuten primaria de la mujer en edad

feacutertilhttpsweriseupnetassets244104guia-practicapdf30

Leucocitos x cpoLeucocitos x cpo

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 31: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

GR

LEU

espermatozoides

CEP

artefactos

BACTERIAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)31

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 32: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

ProbablesLactobacilos

ProbablesLactobacilos

artefactos

NO SON CEL GUIacuteAS

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Ex fresco o directo(40x)32

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 33: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

CEL GUIacuteAS O CLAVES

Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

NO SON CEL GUIacuteAS

Ex fresco o directo(40x)33

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 34: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Ex fresco o directo(40x)Seattle STDHIV Prevention Training Center at the University of Washington

Pseudohifas

Blastoconidias

CEP

34

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 35: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Trichomonas

Referencia al tamantildeo Son moacuteviles

Trichomonas

Trichomonas

Blastoconidias

Ex fresco o directo(40x)35

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 36: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Vaginitis debida a SGB se la incluye dentro de eacutestas

Se observa en mujeres sinto y asintomaacuteticas con y sin RI

Tiende a la recurrencia como todas las infecciones

endoacutegenas

Vaginitis Aeroacutebica

Existen otras entidades cuya etiologiacutea no se conoce

VAGINITIS INFLAMATORIA DESCAMATIVA

Cursan con RI y ausencia de aislamiento de MO

tradicionales

36

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 37: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Abscesos polimicrobianos

Geacutermenes aislados en los abscesos de las glaacutendulas de Bartolino

Geacutermenes anaerobios Geacutermenes aerobios

Bacteroides spp

Clostridium perfringens

Peptostreptococos

Fusobacterium

Ecoli

Neisseria gonorrheae

S aureus

E faecalis

P aeruginosa

Chlamydia trachomatis

Patologiacutea infeccionsa vulvovaginal Bartolinitis BGoacutemez Octubre 2012

37

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 38: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

VAGINOSIS CITOLIacuteTICA

bull Lactobacilosis puede expresarse tambieacuten con los mismos siacutentomas y signos vulvovaginitismicoacutetica

bull Cultivo desarrollo de Lactobacilos Ausencia de MO patoacutegenos

bull Estudio de Gram Lactobacilos abundantes Ausencia o escasos leucocitos CEP ausentes

bull Muacuteltiples consultas por candidiasis vaginal con escasa o nula respuesta frente a la terapia antimicoacutetica

Rev Chil Obstet Ginecol 2010 75(3) 194 ndash 198 Casos Cliacutenicos Vaginosis Citoliacutetica

Un diagnoacutestico diferencial poco frecuente de Vulvovaginitis Micoacutetica a repeticioacuten P Ricci y col38

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 39: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

39

Diagn

oacutestico

diferen

cial

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 40: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

LOCALIZACIOacuteN MO PATOacuteGENOS

40Apuntes de LabVol IMicrobiota vaginalPatol Inf y estudio microb Dra AFarinati Britania

Vaginal

bull Candida spp

bull Tvaginalis

bull VB

bull S ldquoBrdquo

bull Haemophilusspp

Endocervical

bull Ngonorrhoeae

bull Ctrachomatis

bull Mycoplasmaspp

bull Ureoplasma

Localizacioacuten

Patoacute

genos d

efinid

os

o p

ote

ncia

les

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 41: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Dx Microbioloacutegico de Uretritis y Cervicitis

41

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 42: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Dx Microbioloacutegico Vulvovaginitis en nintildeas

42

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 43: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Dx Microbioloacutegico vulvovaginitis y vaginosis en adultas

43

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 44: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Candidiasis vaginal

CV AGUDAS O NO COMPLICADAS

bull Leve a moderada

bull Esporaacutedicabull Pseudohifasbull Hueacutesped sanobull Genalmente

Calbicans

CV COMPLICADAS

bull Mod a severa

bull Solo vemos blastoconidias

bull Recurrencia

bull Factores adversos

Candida no albicans

aprox 20 de CVC

44

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 45: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Infecciones asociadas a DIU

bull Pocas veces esteacuteril

bull En infeccioacuten SASBHEcoliNgonorrhoeae

bull Debe interpretarse por el meacutedico tte conjuntamente con Papanicolau y cliacutenica del paciente

bull Cultivo soacutelo en endometritis

45

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 46: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

ConsideracionesEs incorrecto evaluar VB por cultivo

46

De no recibir frotis para Gram reportar No fue posible evaluar VB Insistir con el personal meacutedico en su importancia

Realizar Ex directo con solsalina y reportar

leucocitos si hay o no Trichomonas y

estructuras fuacutengicas SIEMPRE

Usar caldo Todd para despistaje SrdquoBrdquo en 35-37 sem a

partir de las 2 mx (vaginales y rectales)

Mantener excelente comunicacioacuten con el tratante

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 47: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

47

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 48: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

PROSTATITIS

AGUDAS

bull Uropatoacutegenos

bull Pae y Saureus en ancianos o cat vesical post instrumentacioacuten

bull RaroNgonorCtrachUu Mico o Trichomonas

bull Dx Urocultivo

CROacuteNICAS

bull Escherichia coli

bull Proteus mirabilis

bull Klebsiella spp

bull Enterococos (puede ser contaminante habitual de uretra)

bull Pseudomonas aeruginosa

bull Corynebacterium spp (puede ser contaminante uretral)

bull Oligella spp

bull Acinetobacter spp

bull ECN (puede ser contaminante uretral)

bull Dx mx fraccionadas

48

Reto Diagnoacutestico Microbioloacutegico

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 49: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

49

La responsabilidad de clamiacutedeas o micoplasmas es

muy controvertida en PBC

C trachomatis es inculpada -por PCR- y no hay

garantiacuteas de su presencia exclusiva en uretra

donde es de frecuente localizacioacuten o bien si es

colonizante de proacutestata

En micoplasmas la contaminacioacuten uretral es

tambieacuten un inconveniente

Anderson y Weidner (WHO Consultation Paris

2005) mostraron que U urealyticum yo C

trachomatis en la prueba de 4 vasos no refleja la id

de MO causales de PBC

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 50: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

PATOacuteGENOS PROSTAacuteTICOS

Enterobacterias

Pseudomonas spp

Saureus

Enterococcus spp

ECN

Uurealyticum

C trachomatis

T vaginalis

G vaginalis

Candida spp

ANO2

Corynebacterium spp

Lactobacillus spp

Bacterias en biofilms

Virus

MO exigentes

Reconocidos

Probables

Posibles

Fcioacuten desconocida

No cultivables

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

50

Vol 2 Ndeg1 ndash Marzo 2011 La Gaceta De Infectologiacutea y Microbiologiacutea Cliacutenica Latinoamericana

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 51: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

IDx PBC Test de las 4 mxStamey y Meares agregado semen

bull MI 1er chorro orina (orina uretral 5-10 cc)

bull M2 Chorro del medio (orina vesical) No debe terminar de orinar

bull M3 Sec Prostaacutetica (por masaje prostaacutetico)

bull M4OPMP (orina prostaacutetica los primeros 5-10 ccluego del masaje)

bull M5 + Semen72h de abstinencia

retencioacuten urinaria gt=3h sin sec Uretral ni IU

51

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 52: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Test de las 4 mx Stamey y Meares con el agregado de semen

INTERPRETACIOacuteN

52

Si el conteo de colonias supera en M1 a los demaacutes se asume una probable uretritis si en el M2 (chorro medio) el conteo es igual o superior a M1 se sospecha cistitis yo pielonefritis y si se hallan bacterias en M3 y M4 en mayor cantidad respecto a M1 y M2 se asume PBC

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 53: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

53

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 54: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

MIC

RO

BIO

TA U

RET

RA

MA

SCU

LIN

A

54

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 55: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Espermocultivo

bull Abstinencia 3 diacuteas

bull Remitida dentro de la hora de su obtencioacuten a TA

bull Higiene agua y jaboacuten de manos y pene con retraccioacuten del prepucio- 3 veces

bull Recolectar el 1ordm chorro de orina ( 5-10 cc) y todo el semen en otro envase esteacuteril

bull Procesar de inmediato

bull Resultados semejantes que 4 Mx en 863 de pac

Sin orina 1er chorro no sirve

55

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 56: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

bull Estudio cualicuantitativo de la orina de la 1era porcioacuten y el semen

bull Para PBC es imprescindible cultivar liq Prostaacutetico yo orina post-masaje

bull 72 h de abstinencia y 3 h de retencioacuten miacuten

bull No debe existir sec uretral ni IU

bull Recoger el semen por masturbacioacuten- todo el vol

bull Enviar de inmediato sin refrigerar procesar antes 2h

bull Un resultado neg no descarta prostatitis

Meacutet Screening de Santoiani y col

Enf Infecc Microb Clin 00523(supl 4)47-56 Clasifetiologiacuteadx y tto de prostatitis Jimeacutenez-Cruz F y col

56

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 57: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

1er chorro sembrar 100 ul

(01 cc o asa 110) en AS

GCVCN Cled

Semen sembrar 100 ul ( 01 cc o

asa 110) en ASGCVCN Cled

Gram semen y sedimento

urinario

INTERPRETACIOacuteN

UFCml semen 10 veces mayor a

UFCml 1er chorro de

orina esPOSITIVO

ProcedimientoMeacutet Screening de Santoiani y col

BGN es uniformemente

aceptado

CGP cuando acompantildean BGN noSe recomienda nueva Mx y estudio fraccionado 57

Ejemplo1000 UFCml Ecoli en orina vs 10000 UFCml Ecoli en semen POSITIVO

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 58: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

EPIDIDIMITIS

lt 35 ANtildeOS

bullCtrachomatis

bull NGonorrhoeae

bullOtros agtes ETS

gt 35 antildeos

bullEColi

bullOtras enterob

bullPae

bullSAureus

bullECN

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

58

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 59: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

EPIDIDIMITIS

AGUDAS

bull Mx uacutetiles

bull SUretral

bull Uroc

bull Hemos

bull Ideal puncioacutenbx

CROacuteNICAS

bull 4mx fraccionadas

bull Si la proacutestata no estaacute comprometida

bull Soacutelo semen 10 veces +Opchorro

bull Ideal puncioacutenbx

Solo las 4mx permite localizar a las prostatitis

Consenso inf vias esermaacuteticas y glaacutendulas anexas en infertilidad SOC Arg Bact Cliacutenica httpliaciensucvveALSdocumentosPrimerConsensoInfeccionesEspematicaspdf

59

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 60: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Manifestaciones cliacutenicas de inf Gonocoacutecica

60

Revista Colombiana de Enfermeriacutea bull Volumen 5 Antildeo 5 Neisseria gonorrhoeae un patoacutegeno que impone grandes retosMZuacutentildeiga

1 Uretritis aguda

2 Epididimitis

3 Linfangitis peniana abscesos periuretrales prostatitis aguda

vesiculitis seminal infecciones de las glaacutendulas de Tyson y

Cowper estrechez y estenosis uretral

4 Endocervicitis

5 Proctitis

6 Infecciones de las glaacutendulas de Skene y Barthholin

7 Salpingitis

8 Faringitis

9 Conjuntivitis

10 Enfermedad peacutelvica inflamatoria

11 Perihepatitis aguda (siacutendrome de Fitz-HughCurtis)

12Artritis gonocoacutecica

13 Infeccioacuten gonocoacutecica diseminada

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

carolinamacerogmailcom 67

Page 61: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Ngonorrhoeae

61

Lo sitios de infeccioacuten maacutes frecuentes son la uretra y el

endocervix

La muestra puede tomarse de cervix y de uretra

Sembrar directamente la muestra en Tayer - Martin

En caso contrario debe conservarse en medio de

transporte por no maacutes de 12 horas

Gonococo es laacutebil al calor a la refrigeracioacuten y a

diversos antiseacutepticos sensible a la desecacioacuten y

resiste poco al aire (una o dos horas) por lo que debe

ser sembrado de inmediato en un medio adecuado

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

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Page 62: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

62

Gram del exudado uretral 95 sensibilidad y 100

especificidad

El 75-80 de las mujeres son asintomaacuteticas y el 10-15

de los hombres

En las mujeres la coloracioacuten de Gram de los hisopados

cervicales tiene una positividad del 50 (rango en la

literatura 20-70) de sensibilidad comparado con el

cultivo

Siempre debemos cultivar

Infeccioacuten por Ngonorrhoeae

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

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Page 63: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

63

El porcentaje de cepas con sensibilidad disminuida a

cefixima (definida como CMI gt 0125 gml) del uacuteltimo

Euro-GASP del 2011 es del 76 para el global de las

cepas europeas y del 15 para las espantildeolas

En los Estados Unidos los porcentajes no son tan

elevados pero constatan un incremento paulatino a lo

largo del tiempo

Capacidad de intercambio geneacutetico que tiene el geacutenero

Neisseria mediante mecanismos transferencia horizontal

( Neisserias comensales orofariacutegeas)

Enferm Infecc Microbiol Clin 201331(9)565ndash567

Ngonorrhoeae

Boletin Laboratorio Y Vigilancia Al Dia Instituto De Salud Puacuteblica De Chile- Departamento De Asuntos Cientiacuteficos Ndeg 12 24 De

Mayo 2012 HttpWwwIspchClSitesDefaultFilesDocumento201206Boletin20n12Pdf

Antimicrobial Resistance In Neisseria Gonorrhoeae John TapsallWorld Health Organization

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

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Page 64: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

64

Debemos estudiar cuali y cuantitativamente el

contenido microbiano de cada una de las fracciones

propuestas

Esto constituye la uacutenica manera de poder diferenciar

microbiota normal contaminantes y colonizantes de

verdaderos agentes etioloacutegicos

Consideraciones

El estudio miacutenimo corresponde al meacutetodo de

screening es decir orina 1er chorro + semen

Derivar cepas de Ngonorrhoeae con perfiles de R

inusuales

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

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Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

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Page 65: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

Multiplex ITS

Trichomonas vaginalis Mycoplasma hominis

Mycoplasma genitaliumUreaplasma urealyticumChlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae

BiopsiasHisopados(EndocervicalUretral Conjuntival) Liacutequido del Sacode Douglas primera orina de la mantildeana(completa) semen

Friacuteo (4ordmC)

PCR

Virus Papiloma Humano (VPH)

Hisopados(EndocervicalUretralConjuntival) Biopsias

Friacuteo (4ordmC)

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

65

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

66

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Page 66: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

bullXpert reg CT NG

Deteccioacuten de 90 minutos y la

diferenciacioacuten de Chlamydia trachomatis

(CT) y Neisseria gonorrhoeae (NG)

bullXpert reg GBS LB

Para el cribado antes del parto

DX MICROBIOLOacuteGICO PCR

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Page 67: Importancia del Laboratorio de Microbiología en las infecciones del tracto genital

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