FUNDAMENTOS DE BIOTECNOLOGA

SIA 3007815

FUNDAMENTOS DE MICROBIOLOGA

MICROBIOLOGA

Es la ciencia que estudia los microorganismos ya sea como clulas individuales o como asociaciones celulares.

Se centra en el estudio de la clula como tal (biologa celular)

MICROBIOLOGA Una clula microbiana aislada es, en general,

capaz de llevar a cabo sus procesos vitales: Asimilar nutrientes y metabolizarlos para tener

energa y crecer.

y reproduccin independientemente de otras clulas, de la misma o de diferente clase.

Excretar productos de desecho.

Reaccionar ante cambios en el ambiente.

Mquinas que realizan transformaciones qumicas.

TAXONOMA Jerarqua taxonmica clasificacin completa

hasta alcanzar el nivel taxonmico ms alto, el dominio. Los rdenes en divisiones, etc. Las familias en rdenes Gnero: Es una coleccin (grupo) de especies distintas que comparten unas propiedades pero difieren en otras, generalmente las menos importantes. Los gneros se agrupan en familias

Especie: Constituida por un grupo de microorganismos relacionados que tienen en comn un amplio nmero de caractersticas.

TAXONOMA Jerarqua taxonmica

Dominio: Es el nivel de

clasificacin

ms alto, agrupa a

las divisiones,

ordenes y familias

Fuente: http://wolfman.rucus.net/Essays/xphil2.jpg

TAXONOMA Nomenclatura

Se utiliza como mayor nivel la familia, y se reporta usualmente: El genero: En mayscula o la inicial La especie: En minscula y completa

Bacillus turigiensis B. subtilis

Se escriben en letra cursiva

Nomenclatura

ejemplos

Pseudomona fluorescens,

P. putida

Bacillus stearothermophilus

Bacillus acidocaldarius.

TAXONOMA

P. fluorescens. Fuente: http://cjhsbio.wikispaces.com/Pictures

TAXONOMA The International Code of Nomenclature of Bacteria

Colecciones de cultivos a nivel mundial

Ejemplo ATCC (American Type Culture Collection)

Los nuevos microorganismos aislados se reportan Cepa Tipo

Consulte la pgina web: www.atcc.org

Investigue el microorganismo apto para la realizacin de su proyecto.

En la prxima clase debe presentar de forma impresa la caracterizacin del microorganismo, proveniente de la pgina mencionada.

MTODOS EN MICROBIOLOGA

Fuente:http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/6-optico.php

Fuente:http://webs.uvigo.es/mmegias/6-tecnicas/6-optico.php

Fuente:http:http://fmvz.uat.edu.mx/aves/

MTODOS EN MICROBIOLOGA Son un conjunto de tcnicas que permiten:

- Determinar tamao, forma y estructura de clulas individuales.

- Aislar y cultivar microorganismos.

- Realizar una identificacin completa de los microorganismos.

- Conocer la diversidad metablica.

MTODOS EN MICROBIOLOGA Microscopa ptica y electrnica

Microscopa ptica:

campo claro

(lentes dispersin)

contrastes de fases medio y la clula

(ndice de refraccin)

campo oscuro - fluorescencia (clorofila o colorante)

Fuente:http://www.olympusmicro.com/primer/techniques/nearfield/images/nearfieldintrofigure1.jpg

MTODOS EN MICROBIOLOGA

Microscopa

ptica:

Alrededor de

1000x de

ampliacin

Fuente:http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02/56/cap304.htm

MTODOS EN MICROBIOLOGA Microscopa ptica Ejemplo Electrnica

http://nanolab.me.cmu.edu/projects/swimming/Fig1-final-version.jpg

Fuentes: http://www.emsdiasum.com/microscopy/products/sem/wet/images/examples.jpg

MTODOS EN MICROBIOLOGA Tcnicas en Microscopa ptica Suspensin de m.o.:

Montaje hmedo y gota pendiente

Pelculas o frotis, fijados y teidos Montaje hmedo y gota pendiente Se toma una pequea cantidad de suspensin de clulas y se soporta sobre una laminilla de vidrio (porta objetos) y se cubre con una laminilla mucho ms pequea y delgada (cubre objetos)

Fuente: http://tplaboratorioquimico.blogspot.com/2008/09/portaobjetos.html

MTODOS EN MICROBIOLOGA Tcnicas en Microscopa ptica

Suspensin de m.o.

Montaje hmedo y gota pendiente

Fuente: Medina, Victoria I. Fundamentos de biotecnologa. 2004. pp 157

MTODOS EN MICROBIOLOGA Tcnicas en Microscopa ptica

Pelculas o frotis, fijados y teidos

Se toma la suspensin de clulas, se dispone sobre el porta objetos y se seca.

luego se fija con calor y se tie apropiadamente

Fuente: http://www.iesberlanga.org/WEBBIOLOGIA/recurprac/TECNICAS/microscopia.html

MTODOS EN MICROBIOLOGA

Tcnicas en Microscopa ptica Tcnicas de tincin

Colorantes catinicos ( cidos nucleicos y polisacridos cidos) ej: Azul de metileno, cristal violeta y safranina

Se utilizan para mejorar contraste, para identificar estructuras (esporas, membrana, cpsulas, organelos entre otros)

Tincin simple: Un solo colorante

Tincin diferencial: Varios colorantes

MTODOS EN MICROBIOLOGA Tcnicas en Microscopa ptica

Tcnicas de tincin Tincin de Gram

Es la tincin ms importante, las bacterias se clasifican en dos grupos importantes:

- Bacterias Gram negativas (tien rosado o no tien)

- Bacterias Gram positivas (tien de color morado)

Tarea: Investigar sobre protocolo y funcin de tincin de Gram

MTODOS EN MICROBIOLOGA Ejemplos de tincin

Staphyloccocus aureus Fuente: http://velardehernandez.blogspot.com/2009/05/microorganismos.html

B. Melitensis. Fuente: http://velardehernandez.blogspot.com/2009/05/microorganismos.html

MTODOS EN MICROBIOLOGA

Mantenimiento y conservacin

cultivos puros

MTODOS EN MICROBIOLOGA

Mantenimiento y conservacin de cultivos puros

Los cultivos puros son aquellos que poseen un solo tipo de microorganismos.

Si crecen conjuntamente otro tipo de microorganismos a estos se les llama contaminantes y se dice que el cultivo est contaminado

MTODOS EN MICROBIOLOGA Mantenimiento y conservacin de cultivos puros

Cultivos puros

Cultivo contaminado

Fuente: http://apuntesdeinfecciosas.galeon.com/Page499.htm

MTODOS EN MICROBIOLOGA

Mantenimiento y conservacin de cultivos puros

Los cultivos se crecen en soluciones acuosas llamadas medios de cultivo.

Tambin los medios pueden ser slidos o semislidos (agar).

Se utilizan cajas de petri o tubos para realizar los cultivos.

Medios de cultivo. Fuente: http://permian.wordpress.com/2007/10/05/mis-primeras-vivencias-como-alumno-interno/

MTODOS EN MICROBIOLOGA Mantenimiento y conservacin de cultivos puros

Fuente http://whyfiles.org/coolimages/images/csi/bacteria_new.jpg

Informacin en internet http://www.microbiologyprocedure.com/microbiological-methods/pure-culture-methods.htm

ACTIVIDADES

Mencione la aplicacin de la microscopa en la realizacin de su proyecto.

Investigue en la pgina anteriormente mostrada, cul es el medio de cultivo del microorganismo que anteriormente eligi para la realizacin de su proyecto.

Cultivos puros Segn la microbiologa, es un cultivo de laboratorio que contiene una sola especie de microorganismos.

Un cultivo puro usualmente se obtiene de un cultivo mixto (que contiene varias especies).

Mediante una serie de mtodos que separan las clulas individuales de tal manera que cuando ellas se multiplican cada una formar una colonia distinta.

Cada colonia particular ser luego utilizada para establecer nuevos cultivos con la seguridad de que slo un tipo de microorganismo estar presente.

Cultivos puros Los cultivos puros pueden ser ms fcilmente separados si el medio de crecimiento (o medio de cultivo/reaccin) favorece el crecimiento de un microorganismo particular y al mismo tiempo excluye el crecimiento de otros.

Fuente: http://www.microclar.com/placapetri.php

Tcnicas de Cultivo Medio de cultivo: Es una solucin acuosa de nutrientes y sales que permiten el crecimiento de las clulas, tambin se le puede adicionar un agente solidificante (gelatina, agar)

Inculo: Es un volumen de una

suspensin inicial de clulas que se

desean cultivar.

Al evento de adicionar el inculo a un

caldo de cultivo se le llama inocular

y el momento en que se lleva a cabo este evento es el tiempo de inoculacin.

Tcnicas de Cultivo Incubacin: El tiempo de incubacin es el periodo que transcurre entre la inoculacin y el fin de la reaccin (crecimiento celular, produccin de un metabolito, etc).

Tambin se conoce como tiempo de fermentacin

Si la siembra se realiza sobre

agar apropiadamente se da lugar

a la formacin de colonias

(masas individuales de clulas

de un mismo tipo), son fcilmente

identificables en cajas de petri

Cultivo en placa por estras

Tcnicas de Siembra

Fuente: http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02/56/cap309.htm

Mtodo de vertido en placa

Fuente: http://aulavirtual.usal.es/aulavirtual/demos/microbiologia/unidades/documen/uni_02/56/cap309.htm

Cultivo de enriquecimiento

Cultivo de enriquecimiento. Fuente: Medina, Victoria I. 2004.pp 161

Cultivo por extensin en placa

Tcnicas de Siembra