1. El veneno de la tarantula Rose chilena (Grammostola spatulata) contiene una toxina que es una proteína globular que se parte en la membrana lipídica que ejerce su efecto. La secuencia de la proteína es: ECGKFMWKCKNSNDCCKDLVCSSRWKWCVLASPF. Para el estudio de secuenciación de aminoácidos se trató con los siguientes compuestos: ninhidrina, EDMAN, cloruro de dabsilo, bromuro de cinaogeno, carboxipeptidasa A, tripsina y quimotripsina. ¿Cuáles son los péptidos para cada tratamiento químico y enzimático?.

2. En el laboratorio experimental de bioquímica-biológicas los alumnos aislaron de un extracto homogeneo de baba de caracol un decapéptido al cual denominaron RTH-lire43, asimismo, evaluaron mediante un cultivo celular de HeLa que el peptido tiene actividad anticancerígena y antiproliferativa. Los alumnos de tercer semestre de bioquimica para poder registrar su péptido y patentarlo desarrollaron una secueciación de proteinas mediante tratamientos químicos y enzimáticos como a continuación se describen, ¿cuál es la secuencia del péptido con actividad específica que éllos aislaron?

a) Un ciclo de degradación de EDMAN del RTH-lire43 produce dos moles de PTH-Asp por mol de RTH-lire43.

b) El tratamiento de una solución de RTH-lire43 con 2-mercaptoetanol, seguido por la adición de tripsina, produce tres péptidos cuya composición es (Ala, Cis, Fen), (Arg, Asp) y (Asp, Cis, Gli, Met, Fen). El péptido intacto (Ala, Cis, Fen) produce PTH-Cis en el primer ciclo de degradación de EDMAN.

c) El tratamiento de un mol de RTH-lire43 con carboxipeptidasa, produce 2 moles de Fen.d) El tratamiento del pentapéptido intacto (Asp, Cis, Gli, Met, Fen) con BrCN produce dos

péptidos cuya composición es (homoserina lactona, Asp) y (Cis, Gli, Fen). El péptido (Cis, Gli, Fen) produce PTH-Gli en el primer ciclo de degradación de EDMAN.

3. Un péptido de 14 aminoácidos aislado de corazón de ovinos se somete a análisis con el fín de determinar su secuencia. Se obtuvieron los siguientes datos.

a) Residuo amino terminal: Valb) Residuo carboxi-terminal: Trec) Fragmentos procedentes de la hidrólisis con tripsina: (Asp-Tre), (Val-

Ser-Lis), (Fen-Gli-Tir-Arg), (Ala-His-Trp-Glu-Lis)d) Fragmentos procedentes de la hidrólisis con quimotripsina: (Gli-Tir),

(Arg-Ala-His-Trp), (Val-Ser-Lis-Fen), (Glu-Lis-Asp-Tre)

4. Un experimento del laboratorio de experimentación bioquímica-biológica se estaba tratando de purificar la acetilcolinesterasa de cerebro de rata por medio de diversas técnicas. Los alumnos reportaron sus datos en la siguiente tabla pero omitieron calcular algunos valores útiles.

Paso de purificación Proteina total (µmol)

Actividad total (µgmol/min)

Actividad especifica

Rendimiento Nivel de purificación

Homogenizado de tejido fresco. 104879 6098017 100 1Precipitación con (NH4)2SO4 60337 602340Concentración y díalisis 3221 35760Sephadex-G200 602 6980Cellex-P(Int. catiónionico) 585 5120Cromatografía de afinidad 236 2763

a) Completa la tabla agregando a la columna de actividad específica, el rendimiento obtenido y el nivel de purificación luego de cada paso de la purificación de los estudiantes. Desarrolla una discusión y conclusión de los resultados que se obtuvieron.