practica 4.docx

7/18/2019 practica 4.docx

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Universidad Autónoma Chapingo

Departamento de Irrigación

Fundamentos de Fitotecnia

PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOSEXTRACCIÓN, SEPARACIÓN E IDENTIFICACIÓN.

4° “A”

ING. MA. ESPERANA !R"# ES"RE$$A

E%uipo &'Navarro ()varo Manue)Girón M*nde+ Pedro

Paredes Roca Gustavo,-+%ue+ Arturo

Chapingo M*/ico 01 de Agosto &213.



Introducción

$os pigmentos son sustancias %ue a4sor4en )u+5 a)gunos a4sor4en )u+ de todas )as

)ongitudes de onda 6 por )o tanto parecen negros. !tros so)amente a4sor4en ciertas

)ongitudes de onda transmitiendo o re7)e8ando )as )ongitudes de onda %ue no a4sor4en. $a

c)oro7i)a e) pigmento %ue hace %ue )as ho8as se vean verdes a4sor4e )u+ en )as )ongitudesde onda de) vio)eta 6 de) a+u) 6 tam4i*n en e) ro8o. Dado %ue re7)e8a )a )u+ verde parece

verde. Por esa ra+ón es %ue )os c)orop)astos son de co)or verde.

En e) reino vegeta) e/isten principa)mente dos tipos 4-sicos de pigmentos 7otosint*ticos'

)as c)oro7i)as 6 )os carotenoides. $as c)oro7i)as est-n compuestas por una por7irina %ue

))eva incorporado un -tomo de magnesio en e) centro de) n9c)eo tetrapirró)ico. E) ión Mg&:

est- coordinado con )os cuatro -tomos de nitrógeno centra)es )o %ue hace de )a c)oro7i)a

un comp)e8o e/traordinariamente esta4)e. E/isten varios tipos de c)oro7i)as )as m-simportantes de )as cua)es son )a ;a; 6 )a ;4;. $a estructura de )as mo)*cu)as de c)oro<)a

tiene dos partes' un ani))o de por<rina %ue contiene magnesio 6 cu6a 7unción es a4sor4er

)u+ 6 una cadena hidró7o4a de <to) cu6a 7unción es mantener )a c)oro<)a integrada en )a

mem4rana 7otosint*tica. En cam4io )os carotenoides act9an como pigmentos accesorios

en e) proceso de )a 7otos=ntesis.

Sin em4argo )o %ue en rea)idad e/iste en )os c)orop)astos es una me+c)a de pigmentos

representados principa)mente por dos tipos de c)oro7i)a >c)oro7i)a a 6 c)oro7i)a 4? por @caroteno 6 por /anto7i)a. "odas estas sustancias presentan un grado di7erente de

so)u4i)idad )o cua) permite su separación cuando una so)ución de )a misma asciende por

capi)aridad por una tira de pape) poroso >pape) de 7i)tro? 6a %ue )as m-s so)u4)es se

desp)a+ar-n a ma6or ve)ocidad pues acompaar-n 7-ci)mente a) diso)vente a medida %ue

*ste va ascendiendo. De esta 7orma a) ca4o de cierto tiempo a )o )argo de) pape) de 7i)tro

se ir-n situando )os distintos pigmentos en 7orma de 4andas co)oreadas tanto m-s

desp)a+adas cuanto m-s so)u4)es sean )os pigmentos a %ue pertenecen 6 tanto m-s

anchas cuanto ma6or sea )a a4undancia de estos en )a me+c)a


http://slidepdf.com/reader/full/practica-4docx-5692691e19dc8 3/6Absorción de luz de Cloroflas a y b Estructura química de Cloroflas a y b

PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS

$os pigmentos son sustancias %ue a4sor4en )u+5 a)gunos a4sor4en )u+ de todas )as

)ongitudes de onda 6 por )o tanto parecen negros. $os m-s a4undantes son' )a c)oro7i)a a

)a c)oro7i)a 4 )os carotenos 6 )as /anto7i)as. Cada uno de e))os presenta distinta co)or 6

so)u4i)idad caracter=sticas %ue permite su separación.

$as clorofilas son una 7ami)ia de pigmentos de co)or verde %ue se encuentran en )as

ciano4acterias 6 en todos a%ue))os organismos %ue contienen c)orop)astos en sus c*)u)as

)o %ue inc)u6e a )as p)antas 6 a )os diversos grupos de protistas cr=tica en )a 7otos=ntesis

proceso %ue permite a )as p)antas a4sor4er energ=a a partir de )a )u+ so)ar.

$os carotenoides act9an como pigmentos accesorios en e) proceso de )a 7otos=ntesis.

E/isten dos tipos' )os carotenos 6 )as /anto7i)as. $os carotenos son hidrocar4uros

isoprenoides %ue no contienen o/=geno 7ormados por )argas mo)*cu)as con un sistema de

en)aces con8ugados a)ternantes do4)es 6 senci))os tienen co)or amari))oBanaran8ado. $as

/anto7i)as tienen una estructura mu6 simi)ar a )a de )os carotenos 6 su di7erencia estri4a en

)a incorporación de o/=geno en )os e/tremos de )a mo)*cu)a. Son de co)or amari))o.

E) siguiente )istado muestra un resumen de )os pigmentos 7otosint*ticos.

C)oro7i)a a' verde intenso >ma6or so)u4i)idad en diso)ventes org-nicos >no po)ares??. di<ere

de )a c)oro<)a 4 en %ue e) radica) de )a posición 0 de) grupo tetrapirró)ico es BC0 >meti)o?

en )ugar de BC! >grupo 7unciona) de )os a)deh=dos?. C)oro7i)a 4' verde amari))ento >ma6or so)u4i)idad en diso)ventes po)ares?

$as c)oro<)as c1 6 c& son caracter=sticas de un e/tenso 6 diverso c)ado de protistas %ue

coincide con e) super<)o Chromista 6 %ue inc)u6e grupos tan importantes como )as a)gas

pardas diatomeas /anto7=ceas haptó<tas 6 criptó<tas. $a c)oro<)a d só)o se ha conocido durante decenios por una o4servación ais)ada 6 no

repetida en un a)ga ro8a. $uego se ha encontrado en unas ciano4acterias %ue parece

especia)mente apta para e/p)otar )u+ ro8a cuando crece 4a8o ciertas ascidias. No de4e en

todo caso interpretarse de )a ta4)a %ue su presencia es una caracter=stica com9n de )as

a)gas ro8as. $a c)oro<)a 7 ha sido encontrada en ciano4acterias de estromato)itos de Austra)ia. Carotenos' amari))o anaran8ado >ma6or so)u4i)idad en diso)ventes org-nicos?. anto7i)as' amari))o >ma6or so)u4i)idad en diso)ventes po)ares?.



$as c)oro<)as tienen t=picamente dos tipos de a4sorción en e) espectro visi4)e uno en e)

entorno de )a )u+ a+u) >22B322 nm de )ongitud de onda? 6 otro en )a +ona ro8a de)

espectro >F22B22 nm?5 sin em4argo reHe8an )a parte media de) espectro )a m-s nutrida 6

correspondiente a) co)or verde >322BF22 nm?. Esta es )a ra+ón por )a %ue )as c)oro<)as

tienen co)or verde 6 se )o con<eren a )os organismos o a a%ue))os te8idos %ue tienen

c)orop)astos activos en sus c*)u)as as= como a )os paisa8es %ue 7orman.

Só)o una mo)*cu)a de c)oro<)a a en cada 7otosistema convierte propiamente )a energ=a

radiante >)u+? en energ=a %u=mica cuando reci4e un 7otón con energ=a su<ciente desde )as

mo)*cu)as de )a antena %ue se )a van pasando. 3G

$as t*cnicas para )a separación de estas sustancias se 4asan en )as di7erencias de

so)u4i)idad en a)gunos diso)ventes. Un m*todo mu6 senci))o 6 conocido es )a

cromatogra7=a. Esta t*cnica consiste en )a separación de sustancias presentes en una

me+c)a >pigmentos 6 diso)vente? uti)i+ando un tro+o de pape) de 7i)tro en 7unción de )a

a7inidad >so)u4i)idad? %ue presenten )os pigmentos por este diso)vente recorrer-n ma6or o

menor espacio en e) pape) >a ma6or o menor ve)ocidad? separ-ndose as= )os di7erentes

pigmentos.

Objti!o



E/traer )os pigmentos 7otosint*ticos mediante e) uso de so)ventes org-nicos 6 con )a

a6uda de )a cromatogra7=a en pape) separar e identi7icar dichos pigmentos por medio de)

co)or 6 e) c-)cu)o de) R7 en cada uno de e))os.

M"tri"#$, r"cti!o$ % &'todo$

MA"ERIA$ES REAC"I,!SMicro pipeta 13B02 m) de acetonaMortero 6 pisti)o m) de so)vente >122 partes de

4en+ina de petró)eo 6 &2 m) de acetonapura?

& tu4os de ensa6o grandes& tapones de hu)eJotePape) 7i)troo8as >materia) vegeta)?

,aso de precipitado de 122 m)Em4udoPape) 7i)tro"ira de pape) 7i)tro Khatman no. 1 de &/ &2 cm.

Cromatogra7=a de pigmentos.

(. Obtnción d# )tr"cto. Mo)er )as ho8as en e) mortero hasta e/traer )os pigmentos

de )as ho8as agreg-ndo)e pau)atinamente m) de acetona pura hasta conseguir e)e/tracto. Li)tre e) e/tracto >con pape) 7i)tro? 6 rec=4a)o en e) vaso de precipitado.

De8ar %ue se evapore )a acetona para %ue se concentre e) e/tracto.*. Obtnción d# cro&"to+r"&". Co)ocar un tu4o de ensa6o con e) so)vente >122&2

de 4en+ina de petró)eo 6 acetona pura respectivamente? dentro de) 4ote >se

necesita de oscuridad? )uego con )a micro pipeta co)ocar & a 0 gotas de) e/tracto

en )a )=nea inicia) >marcada con )-pi+? de )a tira de pape) 7i)tro ahora co)ocar)o dentro

de) tu4o de ensa6o %ue est- en e) 4ote esperar de 12 a 13 min.

. Obtnción d #o$ !"#or$ R-. Mar%ue con un )-pi+ )as distancias recorridas por )osso)ventes 6 )os pigmentos.

R$u#t"do$



$a re)ación entre )a distancia via8ada por un compuesto 6 )a de) so)vente se conoce como

va)or R7 >Arditti 6 Dunn1F?.

Rf =distancia (desdeelorigen )queviajó elcompuesto

distancia (desdeelorigen )queviajóel solvente

EOUIP! ( * / 0 1C"rotno

$

2"&"ri##o3

4.55 4.65 4.61 4.64 4.60 4.6 4.6*

C#oro-i#"

2"34.5* 4.64 4.50 4.64 4.50 4.6( 4.64

C#oro-i#"

2b3

4.1* 4.54 4.1( 4.54 4.1 4.56 4.5*

$a variación de )os R7 es de4ida a )a di7erencia de so)u4i)idad %ue e/iste en cada

pigmento )a di7erencia en e) peso mo)ecu)ar de cada una 6 su estructura %u=mica as=

como )as di7erentes capacidades de adsorción >adhesión?. Por )as caracter=sticas de) co)or

6 )os R7 se puede identi7icar de %u* pigmento se trata.

7ib#io+r"-8" con$u#t"d"

IEs5 Sotoma6or Sotoma6or 1F 8un. &2125 E) mundo vegeta) como recurso educativoQ5

consu)tado e) dia 2 de Septiem4re en

https'sites.goog)e.comsitep)antasensecunadria&oBesopigmentosB7otosinteticos

S. K. eff re6 1F. E !CCURRENCE !L C$!B R!P$$ C1 AND C& IN A$GAEourna) o7 Ph6coB )og6. ,o)umen 1& Issue 0 pages 0T03

Universidad Naciona) de Co)om4ia5 s75 $!S PIGMEN"!S L!"!SIN"E"IC!SQ5consu)tado e) dia 2 de septiem4re de &213 en e) siguiente )in'http'VVV.virtua).una).edu.cocursosciencias&222231)eccionescap2&2&W2.htm

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