PEMANFAATAN NATA DE COCO SEBAGAI MEDIA GEL ELEKTROFORESIS PADA ZAT WARNA

REMAZOL

Laboratorium Instrumentasi Sains dan Analitik,

Oleh:

Lutfi Andre Yahya

1412 100 085

Dosen Pembimbing:

Dra. Ita Ulfin, M.Si

Dr.rer.nat. Fredy Kurniawan, M.Si

KIMIA ITS

PENDAHULUAN

P E M I S A H A N K O M P O N E N

b e r d a s a r k a n

T i n g k a t m i g r a s i n y a

D a l a m m e d i a y a n g

t e l a h d i be r i m e d a n

l i s t r i k Be r a t , Be n tu k d a n Uk u r a n

T i n g k a t m i g r a s i n y a

P e r b e d aan P e r b e d aan Mu a ta n

Gel

Poliakrilamida

Gel

Agarosa

Gel Pati

- Harga relatif mahal

-Sekali pakai

- Bentuk akrilamida

cukup berbahaya

- Mudah rusak karena

pemanasan

- Sekali Pakai

-Mudah rusak

--Sekali pakai

Gel

Poliakrilamida

Gel

Agarosa

Gel Pati

- Harga relatif mahal

-Sekali pakai

- Bentuk akrilamida

cukup berbahaya

- Mudah rusak karena

pemanasan

- Sekali Pakai

-Mudah rusak

--Sekali pakai Nata de Coco

•Berbentuk padat putih kenyal.

•Lebih kuat

•Bisa digunakan berulang kali

Remazol

Pewarna Prestaining

•Murah

•Mudah didapat

•Memiliki muatan

•Berukuran besar Buffer Fosfat

Remazol

Buffer Fosfat Rentang pH lebar dari asam sampai basa

Apakah Nata de coco dapat

d igunakan sebagai media ge l

elektroforesis ?

? Bagaimana kondis i opt imum

proses gel e lektroforesis?

Bagaimana hasi l pemisahan

gelat in dengan presta ining

remazol?

Mengetahui Nata de coco dapat

d igunakan sebagai media ge l

elektroforesis .

Mengetahui kondis i opt imum

proses gel e lektroforesis?

Mengetahui hasi l pemisahan

gelat in dengan presta ining

remazol?

Metodologi Penelitian

H 3 P O 4

N a H 2 P O 4

N a 2 H P O 4

N a 3 P O 4

N a O H

K O H

A q u a d e s t

G e l a t i n S a p i

G e l a t i n K o m e r s i a l

G e l a t i n K a p s u l

B a h a n p e m b u a t n a t a d e c o c o

L a r u t a n B u f f e r

A i r K e l a p a

G u l a

U r e a

A s a m C u k a

R e m a z o l R e d R B

R e m a z o l Y e l l o w F G

R e m a z o l B r i l l i a n t B l u e

R e m a z o l T u r q u o i s e B l u e

R e m a z o l V i o l e t 5 R

G e l a t i n u j i c o b a

S a m p e l p e w a r n a

R a n g k a i a n A l a t E l e k t r o f o r e s i s

P o w e r S u p p l y

C h a m b e r E l e k t r o f o r e s i s E l e k t r o d a b e s e r t a k a b e l

p e n g h u b u n g

S a r i n g a n , G e l a s U k u r 5 0 m L , P a n c i , H o t P l a t e ,

P e n g a d u k , K o t a k c e t a k a n N a t a , G u n t i n g , K a r e t ,

K e r t a s K o r a n , S e l o t i p , S e t r i k a .

N e r a c a

J a n g k a s o r o n g

M u l t i m e t e r

P e n g g a r i s

M i k r o s k o p

p H m e t e r

A l a t P e m b u a t a n N a t a d e C o c o

A l a t P e m b u a t a n L a r u t a n

G e l a s k i m i a

S p a t u l a

K a c a A r l o j i

L a b u u k u r

P i p e t V o l u m

P i p e t t e t e s

B o t o l s e m p r o t P r o p P i p e t ,

A l a t P e n g u k u r a n

2

1

3

Dipreparasi:

-dicuci dengan air panas

-direndam dengan air selama 3 hari

-diberi lubang tempat sampel

N a O H + H 3 P O 4 N a H 2 P O 4 + N a 2 H P O 4 K O H + H 3 P O 4

L a r u t a n B u f f e r F o s f a t p H 9

B u f f e r d i g u n a k a n d a l a m g e l e l e k t r o f o r e s i s

N a H 2 P O 4 N a 2 H P O 4 H 3 P O 4 N a 3 P O 4

p H 2 - 4

p H 5 - 9

p H 1 0 - 1 2

N a H 2 P O 4 N a 2 H P O 4

G e l a t i n R e m a z o l T u r q u o i s e

D i h i d r o l i s i s s e l a m a 1 j a m .

S a m p e l

D i g u n a k a n d a l a m s e l e l e k t r o f o r e s i s

Hasil dan Pembahasan

S e m a k i n t e b a l

N a t a d e c oc o

S e m a k i n b e r a t

s e l u l os a

0

0,5

1

1,5

2

2,5

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Ber

at S

elulo

sa (

gra

m)

Teb

al N

ata

(mm

)

Umur Nata (hari) Tebal Nata de Coco Berat Selulosa Nata de Coco

S e m a k i n t u a

u m u r n a t a

S e m a k i n k e c i l

p or i - p or i

U m u r 4 h a r i U m u r 7 h a r i

S e m a k i n T u a

U m u r N a t a d e c o c o

S e m a k i n p e n d e k

j a r a k m i g r a s i n y a

3 4 5 6 7 8

1,5

2,0

2,5

3,0

3,5

4,0

4,5

5,0

Jara

k M

igra

si (

cm)

umur nata (hari)

Red

Yellow

Brilliant

Turkish

Violet

> >

Ha s i l Re so lu s i

K O H + H 3 P O 4 N a H 2 P O 4 + N a 2 H P O 4 N a O H + H 3 P O 4

NaOH + H3PO4 KOH + H3PO4 Na2HPO4 + NaH2PO4

0

1

2

3

4

5

6

Jara

k M

igra

si (

cm)

Komponen Buffer

Red

Yellow

Brilliant

Turkish

Violet

NaOH+H3PO

4KOH+H

3PO

4Na

2HPO

4+NaH

2PO

4

> > > K o n d u k t i v i t a s Mo la r

K O H + H 3 P O 4

8 2 8 , 3 S. cm2mol-1

N a H 2 P O 4 + N a 2 H P O 4

2 2 3 , 1 8 S. cm2mol-1

N a O H + H 3 P O 4

8 0 5 , 0 3 S. cm2mol-1

0

10

20

30

40

50

60

70

NaOH +

H3PO4

KOH + H3PO4 Na2HPO4 +

NaH2PO4

Suhu (

C)

Komponen Buffer

0

0,02

0,04

0,06

0,08

0,1

0,12

0

1

2

3

4

5

6

7

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Kek

uat

an I

on

(M)

Jara

k M

igra

si (

cm)

pH

0

1

2

3

4

5

6

7

0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12

Jara

k M

igra

si (

cm)

Kekuatan Ion (M)

red violet brilliant turquoise yellow

S e m a k i n b e s a r

k u a t i on

S e m a k i n j a u h

J a r a k m i g r a s i

p H 2

- t i d a k b e r m i g r a s i

k e s e l u r u h a n

- B e n t u k p i t a

m e r u n c i n g

p H 7

- b e r m i g r a s i

k e s e l u r u h a n

p H 1 2

- b e r m i g r a s i

k e s e l u r u h a n

- b e n t u k p i t a m e l e b a r

0 , 7 c m ( 4 7 0 m L ) 1 c m ( 5 5 0 m L ) 1 , 5 c m ( 7 5 0 m L ) 2 c m ( 9 5 0 m L ) 2 , 5 c m ( 1 1 5 0 m L )

S e m a k i n t i n g g i

v o l u m e bu f f e r

S e m a k i n b u r u k

r e s o l u s i n y a

25

30

35

40

45

50

55

60

400 600 800 1000 1200

Suhu (

C)

Volume (mL)

S e m a k i n b a n y a k

v o l u m e

S e m a k i n t i n g g i

s u h u

70 80 90 100 110 120 130 140 150 160

2,0

2,5

3,0

3,5

4,0

4,5

5,0

5,5

Jara

k M

igra

si (

cm

)

Tegangan (V)

red

yellow

brilliant

turkish

violet

S e m a k i n t i n g g i

t e g a n g a n

S e m a k i n j a u h

J a r a k m i g r a s i

32

33

34

35

36

37

38

70 120 170

Suhu (

C)

Tegangan (V)

S e m a k i n t i n g g i

t e g a n g a n

S e m a k i n t i n g g i

s u h u

10 20 30 40 50

2

4

6

8

10

12

14

Jara

k M

igra

si

(cm

)

Waktu (menit)

Red

Yellow

Brilliant

Turkish

Violet

S e m a k i n l a m a

w a k t u

S e m a k i n j a u h j a r a k

m i g r a s i n y a

10 20 30 40 50

2

4

6

8

10

12

14

Jara

k M

igra

si

(cm

)

Waktu (menit)

Red

Yellow

Brilliant

Turkish

Violet

1 . R e m a z o l

R e d

2 . R e m a z o l

Y e l l o w

1,7774 nm3

1,9082 nm3

3 . R e m a z o l

V i o l e t

4 . R e m a z o l

T u r q u o i s e

5 . R e m a z o l

B r i l l i a n t

2,4684 nm3

2,7633 nm3

2,8911 nm3

25

30

35

40

45

50

55

60

65

0 10 20 30 40 50 60

Suhu (

C)

Waktu (menit)

S e m a k i n l a m a

w a k t u

S e m a k i n t i n g g i

s u h u

Kondisi Optimum yang didapatkan

1. Umur Nata de Coco 4 hari

2. Tegangan 150 V

3. Buffer terbuat dari garam-garamnya

4. pH buffer 7

5. Volume 470 mL

6. Remazol Turquoise Aplikasi Pemisahan Gelatin

Keterangan gambar :

1-2 Remazol Turquoise Blue-G;

3-4 Gelatin Kapsul;

5-6 Gelatin Sapi;

7-8 Gelatin Komersial.

Keterangan Gambar:

1 . Gelatin sapi murni,

2 . Gelatin babi murni,

6 . Kapsul sampel A,

Gelatin sapi Gelatin Kapsul

Perbedaan disebabkan karena :

1. Penggunaan Media Gel

2. Pewarnaan pada Gelatin

3. Reaksi Hidrolisis

4. Penambahan enzim pemotong

Kesimpulan

Kesimpulan

1. Nata de coco dapat digunakan sebagai media gel elektroforesis

2. Kondisi Optimum yang didapatkan :

-Umur Nata de coco 4 hari,

- buffer terbuat dari garam fosfat dengan pH 7

- tegangan 150 V

- lama waktu elektroforesis 30 menit

- volume buffer 470 mL / ketinggian 0,7 cm

3. Pemisahan gelatin meghasilkan 2 pita pemisahan 2 cm dan 3,6

cm

Terima Kasih