determinación de proteínas en alimentos con el método de biuret conceptos previos

7/24/2019 Determinación de Proteínas en Alimentos Con El Método de Biuret Conceptos Previos

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DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS EN ALIMENTOS CON EL MÉTODO DE BIURETCONCEPTOS PREVIOS:

Métodos colorimétricos !r! l! d"t"rmi#!ci$# d" rot"%#!s& '&(& Método d"

Bi)r"t S" *!s! "# l! +orm!ci$# d" )# coml",o color"!do "#tr" "l C)(- . los/r)os N0 d" los "#l!c"s "t%dicos "# m"dio *1sico& 'C)(- s" !coml",!co# 2 N0& L! i#t"#sid!d d" color!ci$# "s dir"ct!m"#t" roorcio#!l ! l!c!#tid!d d" rot"%#!s 3"#l!c"s "t%dicos4 . l! r"!cci$# "s *!st!#t""s"c%5c!6 d" m!#"r! 7)" oc!s s)st!#ci!s i#t"r5"r"#& L! s"#si*ilid!d d"lmétodo "s m). *!,! . s$lo s" r"comi"#d! !r! l! c)!#ti5c!ci$# d"rot"%#!s "# r"!r!dos m). co#c"#tr!dos 3or ","mlo "# s)"ro4& '&8&Método d" Br!d+ord S" *!s! "# l! )#i$# d" )# color!#t"6 Com!ssi" Bl)" 9(;< 3t!m*ié# S"r=! Bl)"4 ! l!s rot"%#!s& El color!#t"6 "# sol)ci$# 1cid!6">ist" "# dos +orm!s )#! !?)l . otr! #!r!#,!& L!s rot"%#!s s" )#"# ! l!+orm! !?)l !r! +orm!r )# coml",o rot"%#!color!#t" co# )# co"5ci"#t"

d" ">ti#ci$# m!.or 7)" "l color!#t" li*r"& Est" método "s s"#si*l" 3'';@/46 siml"6 r1ido6 *!r!to . oc!s s)st!#ci!s i#t"r5"r"# "# s)d"t"rmi#!ci$#& E#tr" l!s s)st!#ci!s 7)" i#t"r5"r"# "st1#los d"t"r/"#t"s .l!s sol)cio#"s *1sic!s& '&2& Método d" BCA El 1cido *ici#co#%#ico6 s!l s$dic!6"s )# com)"sto c!!? d" +orm!r )# coml",o r)r! i#t"#so co# i#o#"sC)'- "# m"dio !lc!li#o& Est" r"!cti=o +orm! l! *!s" d" )# método !#!l%ticoc!!? d" mo#itori?!r "l i$# c)roso rod)cido "# )#! r"!cci$# "#tr" l!srot"%#!s co# C)(- "# m"dio !lc!li#o 3r"!cci$# d" Bi)r"t4& L! "st!*ilid!dd"l r"!cti=o . "l crom$+oro roorcio#! )# método !r! l! c)!#ti5c!ci$# d"rot"%#!s 7)" "s s"#cillo6 r1ido6 m). s"#si*l"6 . 7)" m)"str! )#! /r!#tol"r!#ci! ! com)"stos 7)" !+"ct!# ! otros métodos& O0

Prot"%#! - C)(- C)'-

C)'- - BCA coml",o

r)r! BCA C)'- '&;& O*,"ti=os Co# "st! r1ctic! s" r"t"#d" i#trod)cir!l !l)m#o "# los di+"r"#t"s métodos !r! l! c)!#ti5c!ci$# d" rot"%#!s: s)+)#d!m"#to6 s)s ="#t!,!s " i#co#="#i"#t"s& S" )tili?!r1# tr"s métodos3Bi)r"t6 Br!d+ord . BCA46 !r! c!d! )#o d" "llos s" r"!li?!r1 )#! c)r=!"st1#d!r6 s" d"t"rmi#!r1 "l co"5ci"#t" d" ">ti#ci$#6 "l r!#/o d"

s"#si*ilid!d6 . s" r"!li?!r1 l! c)!#ti5c!ci$# d" dos m)"str!s ro*l"m!s&

Métodos !r! l! d"t"rmi#!ci$# d" #itr$/"#o

C!r!ct"r%stic!s d" l!s rot"%#!s

INTRODUCCION El t"rmi#o rot"%#! +)" )tili?!do or rim"r! ="? or "l7)%mico !l"m1# 9"r!rd)s M)ld"r6 "# '86 tomo "st" #om*r" d"l =oc!*lo/ri"/o PROTERIOS6 7)" si/#i5c! rimordi!l #i="l rim!rio& L!s rot"%#!s so#

)# /r)o d" *iool%m"ros co#stit)idos d" !mi#o1cidos 7)" ">i*"# )#!!mli! /!m! d" "str)ct)r!s . +)#cio#"s& L!s rot"%#!s como )# /r)o d"



*iomoléc)l!s6 d"s"m"!# )#! /r!# =!ri"d!d d" +)#cio#"s6 !l/)#!s!rtici!# "# l! co#tr!cci$# m)sc)l!r . sir="# !r! d!r soort" "str)ct)r!l6otr!s tr!sort!# . !lm!c"#!# moléc)l!s "7)"!s& Los !#tic)"ros3moléc)l!s 7)" sir="# !r! como rot"cci$# i#m)#ol$/ic!4 so# rot"%#!s !li/)!l 7)" l!s "#?im!s 3c!t!li?!dor"s *iol$/icos4 . !l/)#!s ormo#!s& L!s

rot"%#!s )"d"# ll"=!r ! c!=o +)#cio#"s t!# di="rs!s or l! "#orm"osi*ilid!d d" com*i#!cio#"s "# l! comosici$# . s"c)"#ci! d"!mi#o1cidos& L!s rot"%#!s t!m*ié# s" cl!si5c!# s"/# s) comosici$#6 l!s7)" s" +orm!# solo d" r"sid)os d" !mi#o1cidos . #o ti"#"# otr!s*iomoléc)l!s so# PROTEÍNAS SIMPLESF #o tod!s l!s rot"%#!s so# sol)*l"s"# !/)!6 d" "co l!s rot"%#!s i#sol)*l"s so# "s"#ci!l"s !r! d!r soort" .m!#t"#"r l! i#t"/rid!d "str)ct)r!l d" l!s cél)l!s . or/!#ismos&DETERMINACION DE PROTEINAS I& OBGETIVOS: H D"t"rmi#!r "l #i="l d"rot"%#! 7)" os"" )# !lim"#to ! tr!=és d"l co#t"#ido d" #itr$/"#o& H El"st)di!#t" co#oc"r1 "l +)#d!m"#to d"l !#1lisis d" rot"%#!s or losmétodos: ,"ld!l . Sor"#s"#& H El "st)di!#t" s" +!mili!ri?!r1 co# los

"7)ios . "l roc"dimi"#to d"l !#1lisis d" rot"%#!s !r! los métodos d","ld!l . sor"#s"# & H El "st)di!#t"!r"#d"r1 ! r"!li?!r los c1lc)los"rti#"#t"s !r! l! d"t"rmi#!ci$# d" #itr$/"#o "# rot"%#!s& II&JUNDAMENTO TEORICO: El ro*l"m! 7)" r"r"s"#t! roorcio#!r rot"%#!s!d"c)!d!s ! l! o*l!ci$# d"l m)#do "s )# t!#to s"c)#d!rio "# "l ro*l"m!/"#"r!l d" !lim"#t!ci$# m)#di!l& Ad"m1s d" s) si/#i5c!do #)triti=o l!srot"%#!s ,)"/!# )# !"l imort!#t" "# l!s roi"d!d"s or/!#olétic!s d"los !lim"#tos& L!s rot"%#!s ","rc"# )#! i#K)"#ci! co#trol!dor! "# l!t">t)r! d" los !lim"#tos ro="#i"#t"s d" +)"#t"s !#im!l"s& El !#1lisis !r!l! d"t"rmi#!ci$# d" rot"%#!s6 ! "s!r d" #o "st!r i#cl)ido /"#"r!lm"#t"como +!ctor d" cl!si5c!ci$# "# los "st1#d!r"s d" /r!#os s" !c"t! como )#

+!ctor com"rci!l& L!s rot"%#!s ">ist"# "# los !lim"#tos "# com*i#!ci$#+%sic! o 7)%mic! co# c!r*oidr!tos o l%idos& L!s /l)corot"%#!s . l!sliorot"%#!s !+"ct!# l!s roi"d!d"s r"ol$/ic!s d" l!s sol)cio#"s!lim"#tici!s o os""# !lic!cio#"s téc#ic!s como "m)lsi5c!#t"scom"sti*l"s& El "#=","cimi"#to d" l! c!r#" "st1 r"l!cio#!do co# c!m*ios7)%micos "# l!s rot"%#!s& L!s rot"%#!s #!t)r!l"s )r!s os""# oco s!*or&D)r!#t" "l roc"so d" c!l"#t!mi"#to 3"*)llici$#6 !#i5c!ci$#6 !s!do4 l!sc!d"#!s l!t"r!l"s d" !mi#o1cidos s" d"/r!d!# o i#t"r!ct!# co# otroscomo#"#t"s d" los !lim"#tos 3","mlo6 l! lisi#! co# los !?c!r"sr"d)ctor"s4 !r! co#+"rir s!*or"s t%icos& El c!l"#t!mi"#to ">c"si=o )"d"6or otro l!do6 r"d)cir "l =!lor #)triti=o& El !#!list! d" !lim"#tos

com#m"#t" d"s"! s!*"r "l co#t"#ido rot"ico tot!l d" los !lim"#tos6!)#7)" dico co#t"#ido "sté co#+orm!do or )#! m"?cl! coml",! d"rot"%#!s& Act)!lm"#t" todos los métodos !r! d"t"rmi#!r "l co#t"#idorot"ico tot!l d" los !lim"#tos so# d"

#!t)r!l"?! "m%ric!& El !isl!mi"#to . "s!do dir"cto d" l! rot"%#!roorcio#!r%! )# método !*sol)to6 si# "m*!r/o6 dico método "s ll"=!do !c!*o s$lo ! ="c"s "# i#="sti/!cio#"s *io7)%mic!s "ro "s coml"t!m"#t"imr1ctico !r! "l !#1lisis d" !lim"#tos& M"todos MÉTODO MICRO GELDA0LL! m!t"ri! or/1#ic! "s di/"rid! or l! !cci$# d"l 0(SO2 co#c"#tr!do6co#=irtié#dos" "# CO( . 0(OF !d"m1s r"d)c" "l #itr$/"#o ! !mo#io6 "l c)!l

!s! ! s"r 5,!do or "l 1cido como s)l+!to d" !mo#io6 )#! s!l d" /r!#"st!*ilid!d& L! r"d)cci$# d"l m!t"ri!l #itro/"#!do !st! !mo#io6 s" d"*" !



7)" !rt" d"l 0(SO2 "s sim)lt1#"!m"#t" r"d)cido ! SO(6 7)" s" comort!como )# +)"rt" r"d)ctor& L! di/"sti$# d" l! m)"str! "s l! !rt" m!s di+%cild" l! d"t"rmi#!ci$#6 "st! s" !c"l"r! m"di!#t" l! !dici$# d" c!t!li?!dor"scomo "l m"rc)rio m"t1lico6 "l $>ido ro,o d" m"rc)rio 30/O46 "l s)l+!tocrico 3C)SO246 "l s"l"#io6 "l "rm!#/!#!to d" ot!sio 3mO 24 o )#!

m"?cl! d" "stos& El s)l+!to d" sodio o d" ot!sio s" !dicio#!# ! l! m"?cl!co# l! 5#!lid!d d" !)m"#t!r "l )#to d" "*)llici$# . dismi#)ir "#to#c"s "lti"mo d" di/"sti$#& C)!#do l! tot!lid!d d" l! m!t"ri! or/1#ic! ! sidodi/"rid!6 s" li*"r! "l !mo#%!co or d"scomosici$# d"l s)l+!to d" !mo#ioco# )# 1lc!li +)"rt" 3N!O04 . l)"/o s" s"!r! or d"stil!ci$# . r"col"cci$#"# )# =ol)m"# d" 1cido *$rico6 como *or!to d" !mo#io& El !mo#io s"d"t"rmi#! or tit)l!ci$# co# sol)ci$# =!lor!d! d" 0Cl <6' N "# r"s"#ci! d")# i#dic!dor mi>to com)"sto or )#! m"?cl! d" ro,o d" m"tilo6 "l c)!l "#m"dio 1cido s" r"s"#t! d" color mor!do . "# m"dio !lc!li#o d" color="rd"& R"s)m"# d" l!s r"!ccio#"s 7)%mic!s "# "l método Micro,"ld!l S"!cost)m*r! ! !c"r d"t"rmi#!cio#"s "# *l!#co !r! corr"/ir c)!l7)i"r

im)r"?! "# los r"!cti=os& El co#t"#ido rot"ico d" l! m)"str! s" c!lc)l!!lic!#do l! si/)i"#t" +$rm)l!: N 9 > N > <&<'2 > '<<M Do#d": V mLd" 0Cl /!st!dos "# l! tit)l!ci$#& N #orm!lid!d d" l! sol)ci$# d" 0Cl 3<6'N4& MP"so d" l! m)"str! "# /r!mos L)"/o d" c!lc)l!do "l orc"#t!," d"#itr$/"#o6 "s #"c"s!rio c!lc)l!r "l orc"#t!," d" rot"%#!s *!s1#dos" "#"st" =!lor . )tili?!#do "#to#c"s l! si/)i"#t" "c)!ci$#F PN> J Do#d":Norc"#t!," d" #itro/"#o JJACTOR: ALIMENTOS DE ORI9EN ANIMAL:NH&(; ALIMENTOS DE ORI9EN VE9ETAL: NH;&< LEC0E Q DERIVADOS:NH&8 III& MATERIALES Q METODOS: H MATERIALES: H M)"str!& H D"stil!dor&H I#ci#"r!do

H M!tr!? ,"ld!l& H m!tr!? Erl"#m"."r 3(;< ml4 H B)r"t! 5#!& H M!tr!c"s d"'<< . '<<< ml& H Pi"t!s d" '< ml& H Pro*"t!s d" (; ml& H REACTIVOS: HAcido s)l+rico & H M"?cl! c!t!li?!dor!: 8 /r d" o>ido d" tit!#io 3TiO(46 8/r d" s)l+!to crico 3C)SO24 . '<< /r d" s)l+!to d" ot!sio 3(SO24& HDisol)ci$# d" idr$>ido d" sodio !l ;<& H Disol)ci$# d" !cido clor%drico30Cl4 <&' moll& H I#dic!dor ro,o d" m"tilo& H METODO DE GELDA0LMODIJICADO: H Est" método co#st! d" 2 +!s"s: '& Di/"sti$# o !t!7)" d" l!m!t"ri! or/1#ic!& (& D"stil!ci$# d"l !mo#i!co& 8& Tit)l!ci$# d"l *or!to d"!mo#io& JASES DE DI9ESTIÓN: H P"s!r <&8 /r d" l! m)"str! s"c!& H A/r"/!r8 /r d"l! m"?cl! c!t!li?!dor! . (< ml d" 1cido s)l+rico co#c"#tr!do . )#!s"rl!s d" =idrio& H Coloc!r "l *!l$# "# osici$# i#cli#!d! so*r" )#! d" l!sor#ill!s d" di/"sti$# d"l m)lti ,"ld!l& H S" i#ici! co# )# c!l"#t!mi"#tos)!=" . m!#t"#"r "# "*)llici$#6 ! c!lor6 "l ti"mo #"c"s!rio !r! 7)" l!sol)ci$# s"! !mli! . t"#/! )# color li/"r!m"#t" !?)l& H JASE DE LADESTILACIÓN DEL AMONIACO: H T"rmi#!do l! di/"sti$# "#+ri!r "l *!l$# !t"m"r!t)r! !m*i"#t" 3t"#"r c)id!do4& H A/r"/!r co# c)id!do !/)!d"stil!d! 3!ro>im!d!m"#t" 2< ml4& H P!s!r ! )# *!l$# d" d"stil!ci$# .coml"t!r !st! ';<ml co# !/)! d"stil!d!6 l!=!r "l *!l$# ,"ld!l co# !/)!d"stil!d!& H S" !!d" '<ml d" disol)ci$# d" idr$>ido d" sodio !l 2<& HColoc!r "l *!l$# "# )#! d" l!s or#ill!s !r! d"stil!ci$# . co#"ct!rlo !l t)*oco#d"#s!dor corr"so#di"#t" m"di!#t" )# *)l*o d" s"/)rid!d d" =idrio6!,)st!r *i"# l!s )#io#"s& H Coloc!r "# )# Erl"#m"."r o B"!c"r d" 2<< ml6;< ml d" !cido *$rico !l 2 !r! r"t"#"r los /!s"s d" !mo#i!co . dos /ot!s



d"l i#dic!dor ro,o d" m"tilo& H L)"/o "l Erl"#m"."r o B"!c"r s" coloc! "# l!!rt" i#+"rior d"l t)*o co#d"#s!dor d" t!l m!#"r! 7)" "l ">tr"mo s""#c)"#tr" s)m"r/ido "# "l !cido *orico& H 0!c"r circ)l!r "l !/)! d" c!o or"l co#d"#s!dor d" ,"ld!l . com"#?!r l! d"stil!ci$# ! t"m"r!t)r!co#trol!d!& H Co#ti#)!r l! disol)ci$# !st! 7)" s" !.! "limi#!do "l

!mo#i!co6 comro*!r co# !"l d" tor#!sol o +"#ol+t!l"%#!& H R"tir!r "lErl"#m"."r l!=!#do co# )# oco d" !/)! d"stil!d! "l ">tr"mo d"l t)*o& HJASE DE TITULACION H Tit)l!r "l co#t"#ido d" Erl"#m"."r co# )#! sol)ci$#d" 1cido clor%drico 30Cl4 !l <&'N 3c!d!

ml d" "st! sol)ci$# "7)i=!l" ! '&2<< m/ d" Nitr$/"#o4 !st! 7)" =ir" d"color 3!m!rillo ! ro,o o ="rd" ! !?)l4 "sto d""#d" d"l i#dic!dor 7)" s"!dicio#!& E+"ct)!r los c1lc)los d" !c)"rdo ! l! m)"str! )tili?!d! . "l +!ctord" co#="rsi$# d" !c)"rdo ! l! m)"str!& H JACTOR DE CONVERSIÓN DENITRÓ9ENO EN ALIMENTOS H A="#!6 c"*!d! . c"#t"#o ;&8 H Arro? ;&; H

Tri/o6 !ri#! r"5#!d! ;&< H Tri/o6 /r!#o "#t"ro ;&8 H Alm"#dr!s ;&' HSo.! ;&' H L"c" . s)s rod)ctos &2< H Otros3c!r#"6 0)"=os6 m!%?4 &(; Elco#t"#ido orc"#t)!l d" rot"%#! P d" l! m)"str! s" c!lc)l!: P!*'&2<<JM H !: /!sto "# ml d" l! disol)ci$# d"l !cido clor%drico 3<&'moll46"# l! m)"str!& H *: /!sto "# ml d" l! sol)ci$# d" !cido clor%drico 3<&'moll46"# "l *l!#co& H J: +!ctor d" co#="rsi$# !r! c!lc)l!r "l co#t"#ido rot"ico& HM: "so "# /r!mos d" l! m)"str!& '&2<<m/ d" Nitr$/"#o or c!d! ml d"/!sto d" disol)ci$# =!lor!d! "# 1cido clor%drico& H MÉTODO VOLUMÉTRICODE SORENSEN POOL J)#d!m"#to: S" *!s! "# 7)" "l +orm!ld"ido =! !!ct)!r *lo7)"!#do los /r)os !mi#os6 d!#do como r"s)lt!do l! li*"r!ci$#d" los /r)os c!r*o>ilos co# "l co#si/)i"#t" !)m"#to d" l! !cid"?6 l! c)!l

s" =!lor! co# N!O0 !l <&'N& Proc"dimi"#to: H M"dir '< d" l"c" #")tr!li?!rco# 0Cl !l <&' N H A/r"/!r (< ml d" +orm!ld"ido #")tro 3#")tr!li?!do co#N!O0 <&'N46 s" !/r"/! "l +orm!ld"ido ! l! l"c" . d"s!!r"c" "l colorros!do& H Tit)l!r #)"=!m"#t" co# N!O0 !l <&' N C1lc)los: P9 > <&'< >; IV& CALCULOS Q RESULTADOS: H PORCENTAGE DE PROTEÍNAS POR ELMÉTODO GELDAGL DE 0ARINA: P 9 > N > <&<'2 > J > '<<M P(8 > <&<(> <&<'2 > '<<> ;&<<&8 P'(&(2 H PORCENTAGE DE PROTEÍNAS POR ELMÉTODO SORENSEN POOL& H D"t"rmi#!ci$# d" !cid"? d" l"c"

<&'2<&'

R!#/o d" !cid"? "# l! l"c"

AV > N > J > '<<M A8&2 > <&' > <&< > '<<(< A<&';( HD"t"rmi#!ci$# d" rot"%#! d" l! l"c": (&

8&2R!#/o d" rot"i#!s "# l! l"c"

V'(&2 ml P9 > <&'< > ; P(&2 > <&'< > ; P(&(< V(8&(ml P9 > <&'< > ; P8&( > <&'< > ; P8&<;22 V& DISCUSIONES:H P!r! l! d"t"rmi#!ci$# d" rot"%#!s "# l"c" or "l método d" Sor"#s"r6com!r!#do #)"stros r"s)lt!dos co# los d" 6 "# rim"r l)/!r co# "l V' #osd!mos c)"#t! d" 7)" "l d" rot"%#! o*t"#id! #o s" !s"m",! !l d" l!*i*lio/r!+%! or lo 7)" od"mos d!r#os c)"#t! d" 7)" l! l"c" +)"!d)lt"r!d! o !lt"r!d! or !l/# !/"#t"6 or lo 7)" r"!li?!mos #)"=!m"#t""l roc"so6 o*t)=imos )# V( co# "l 7)" dio como r"s)lt!do )# d" 8&<;22



7)" si "st1 d"#tro d"l r!#/o "sti)l!do "# & H Est" ro*l"m! d" los=olm"#"s lo !s)mimos or "l =ir!," "# l tit)l!ci$#6 7)" d""#d" d" l! =ist!d" l! "rso#! "#c!r/!d! d"l tr!*!,o& VI& CONCLUSIONES: H El método s"*!s! "# l! d"str)cci$# d" l! m!t"ri! or/1#ic! co# 1cido s)l+ricoco#c"#tr!do6 +orm1#dos" s)l+!to d" !mo#io 7)" "# ">c"so d" idr$>ido d"

sodio li*"r! !mo#%!co6 "l 7)" s" d"stil! r"ci*ié#dolo "#: !4 Acido s)l+ricodo#d" s" +orm! s)l+!to d" !mo#io . "l ">c"so d" 1cido "s =!lor!do co#idr$>ido d" sodio "# r"s"#ci! d" ro,o d" m"tilo6 o *4 Acido *$rico+orm1#dos" *or!to d" !mo#io "l 7)" s" =!lor! co# 1cido clor%drico& H Esimort!#t" "l !#1lisis d" rot"%#!s !r!: l! d"t"rmi#!ci$# d" l! !cti=id!d*iol$/ic! "# !lim"#tos ","mlos: "cti#!s!s d)r!#t" l! m!d)r!ci$# d"+r)tosF i#="sti/!ci$# so*r" roi"d!d"s +)#cio#!l"s& E,"mlos: /li!di#! ./l)t"#i#!s !r! l! "l!*or!ci$# d"l !#F !r! "l "ti7)"t!mi"#to #)tricio#!ld"l rod)cto 5#!l6 "tc& H E>ist" )#! /r!# #"c"sid!d d"l !#1lisis d" rot"%#!sco# "l 5# d" o*t"#"r "l co#t"#ido rot"ico tot!l6 comosici$# d"!mi#o1cidos co#t"#ido d" !l/)#! rot"%#! !rtic)l!r6 co#t"#ido rot"ico

d)r!#t" "l !isl!mi"#to . )ri5c!ci$# d" )#! rot"%#!6 #itr$/"#o #o rot"ico. =!lor #)triti=o r"l!cio#!dos co# )# !lim"#to "s"c%5co ! !#!li?!r& HCo#stit)."# +)"#t"s d" "rror "# d"l método d" ,"ld!l so#: l! i#cl)si$# d"#itr$/"#o #o rot"ico como !rt" d" l! rot"%#!F l! érdid! d" #itr$/"#od)r!#t" l! di/"sti$#6 l! di/"sti$# i#coml"t! d" l! m)"str!

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