CROMATOGRAFÍA Y POTENCIÓMETRO

Andrea León

Juana Cuadrado

Sharo Maestre

Katherin Buelvas

¿QUÉ ES LA CROMATOGRAFÍA?

• es la técnica para separar componentes de una mezcla, y su posterior análisis basados en que las distintas sustancias que forman los componentes de una mezcla se dejan arrastrar a diferentes velocidades sobre un soporte. el soporte puede ser papel, un gas, otro líquido, etc.

¿PARA QUÉ SE UTILIZA LA CROMATOGRAFÍA?

Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.

Fases de la cromatografía

Fase móvil

Consiste en un liquido o gas que es arrastrado a través

de la fase estacionaria

Fase estacionaria

Consiste en un solido o un liquido fijado a un

solido por donde el cual pasa la fase móvil

¿POR QUÉ SE SEPARAN LOS COMPONENTES?

• Dejamos que se mueva la mezcla por un soporte y los componentes se separan por que se mueven a diferentes velocidades, debido a las diferentes fuerzas de adsorción que ejerce el soporte sobre cada elemento

TIPOS DE CROMATOGRAFÍA

Cromatografía

PlanaPapel

Capa fina

Columna

Intercambio iónico

Por exclusión molecular

Por afinidad

TIPOS DE CROMATOGRAFIA PLANA

EN PAPEL

EN CAPA FINA

es un proceso donde el absorbente o fase estacionaria lo constituye un papel de filtro y la fase móvil la constituye el disolvente. Una vez corrido el disolvente se retira el papel y se deja secar, se trata con un reactivo químico con el fin de poder revelar las manchas. La técnica es similar a la

cromatografía en papel, a excepción que en este caso el

análisis se realizará en una placa de plástic0, aluminio o vidrio

cubierta de una capa de sustancia absorbente como

alúmina o gel de sílice.

CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA la fase estacionaria la forma un sólido poroso, el cual queda soportado en el interior de una columna generalmente fabricada en plástico o vidrio.

La fase móvil se encuentra formada por la solución que lentamente va atravesando la fase estacionaria. La solución que sale al final de la columna se reemplaza constantemente por una nueva solución que se suministra desde un contenedor por la parte superior de la columna.

TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

Por intercambio iónico: Se trata de una cromatografía en columna que utiliza una fase estacionaria con sustancias con componentes con carga eléctrica. Se utiliza para separar compuestos cargados, incluyendo aminoácidos, péptidos y proteínas. La fase estacionaria es normalmente una resina de intercambio iónico que contiene grupos funcionales cargados que interaccionan con grupos cargados de signo opuesto del compuesto que se quiere retener. Puede ser:

• Intercambiador de iones cargado positivamente (intercambiador de aniones), que interacciona con aniones

• Intercambiador  de iones cargado negativamente (intercambiador  de cationes), que interacciona con cationes.

TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA• Por exclusión molecular:

la fase estacionaria es un material poroso, que retine a las moléculas en función de su tamaño. En ocasiones se denomina también cromatografía sobre geles o de permeabilidad en geles (GPC).

TIPOS DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

• Cromatografía de afinidad:La Cromatografía de Afinidad permite la separación de mezclas proteicas por su afinidad o capacidad de unión a un determinado ligando.

POTENCIÓMETRO

INTRODUCCIÓN El “pH” de una

sustancia refleja su grado de acidez o de

basicidad. La escala de pH se numera de cero

a 14.

El valor de pH indica si una solución es ácida (pH por debajo de 7), neutra (pH=7) o básica (pH por encima de 7).

¿QUE ES EL POTENCIÓMETRO?

• Los potenciómetros o pH metros, son instrumentos eléctricos que se utilizan para medir el pH de una disolución, por estar diseñados para determinar las concentraciones de iones hidronios que posea, lo que permite conocer con precisión su grado de acidez o basicidad.

• La determinación de pH consiste en medir el potencial que se desarrolla a través de una fina membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferente concentración de protones. En consecuencia se conoce muy bien la sensibilidad y la selectividad de las membranas de vidrio delante el pH.

COMO FUNCIONA1. Los electrodos tiene una punta en forma de bola que tiene pequeños poros por

los cuales son  sensibles los átomos de hidrogeno que se encuentran disueltos en la sustancia que queremos analizar.

2. El electrodo de vidrio es relativamente inmune a las interferencias del color, turbidez, material coloidal, cloro libre, oxidante y reductor.

3. La medida se afecta cuando la superficie de la membrana de vidrio está sucia con grasa o material orgánico insoluble en agua.

4. Los electrodos tienen que ser enjuagados con agua destilada entre muestras. No se tienen que secar con un trapo, porque se podrían cargar electrostáticamente.

5. Luego se deben colocar suavemente sobre un papel, sin pelusa, para quitar elexceso de agua.

6. Como los electrodos de vidrio de pH mesuran la concentración deH+ relativa a sus referencias, tienen que ser calibradosperiódicamente para asegurar la precisión. Por eso se utilizan buffers de calibraje 

TÉCNICA DE USO 1. Se procederá a medir el pH una vez calibrado el aparato

2. Llenar un vaso de precipitado con la muestra de agua hasta la marca de 50 ml. (aproximadamente).

3. Pulsar el botón ON/OFF para encender el aparato.

4. Sumergir el electrodo unos 2 cm en el vaso y mover suavemente.

5. Esperar a que la lectura del pH se estabilice.

6. Una vez estabilizada la lectura que aparece en la pantalla del aparato, podemos mantener la lectura en la pantalla apretando el botón HOLD/CON.

7. Anotar el valor que aparece en pantalla.

8. Para volver a realizar otra medición, pulsar otra vez HOLD/CON.

9. Lavar el electrodo con el frasco lavador, vertiendo el agua del lavado en un cristalizador.

10. Secar con un pañuelo de papel cuidadosamente.

11. Volver a realizar una nueva medida repitiendo los pasos desde el 4 al 10.