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OBJETIVOS.

1. El alumno deberá demostrar la presencia y distribución de

los hongos.

2. Se analizara la morfología de los hongos que se han

obtenido de diversas fuentes.

3. Se realizara la identificación y clasificación de los hongos

aislados de los diferentes especímenes trabajados.

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Son heterótrofos

Pueden ser unicelulares y pluricelulares

Se alientan por

absorción

Reproducción sexual y

asexual

No son fotosintéticas

Tienen pared celular compuesta por quitina,

celulosa, glucanas y mananas

Son macroscópicos y microscópicos

Su unidad funcional es

la hifaSon organismos eucariontes

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CONDICIONES DE

CRECIMIENTO

Acidófilos siendo el pH 5.6 óptimo para la

mayoría

La mayoría crecen entre 0-55 con un

rango de 20-30 oportunistas y

patógenos 35-40

pH

Temperatura

Humedad

aw

Luz

Nutrientes

60%

CO2,glucosa, sacarosa y maltosa, sales de nitrógeno, iones inorgánicos,

agua

No es vital pero es importante en la esporulación

para algunos

Mayor 0.80 hongos

filamentosos y mayor 0.85

para levaduras

De acuerdo a su nutrición pueden dividirse en

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SAPROFITOS Toman sus nutrientes de la materia muerta o en

descomposición

PARASITOS Cuando se nutren de

materia viva

MICORRIZICOS

Viven en simbiosis con alguna especie vegetal (normalmente árboles), obteniendo ambos un beneficio mutuo.

DIMORFISMO FUNGICO:

Un hongo puede pasar de una forma micelial a levaduriforme reversiblemente, pueden ser:

A) Nutriente dependientes.

B) Temperatura y nutriente dependientes

6Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de diferentes fuentes Equipo: 3

HONGOS BIFÁSICOS

Se refiere aquellos hongos que presentan dos formas, una filamentosa y a diferencia de los hongos dimórficos , no presenta fase levaduriforme sino de otro tipo Por ejemplo:

Las esférulas de

Coccidioides immitis

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PLEOMORFISMO FÚNGICO:

Consiste en la transformación irreversible de una cepa por un exceso de carbohidratos, está tiende a cambiar dando un micelio blanco, algodonoso y estéril. Se puede presentar en cualquier hongo filamentoso , pero es propio de los dermatofitos.

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POLIMORFISMO

LESIONAL:Es la capacidad de un agente

etiológico de generar diferentes

cuadros clínicos Por ejemplo:

La tiña del cuerpo o de la

cabeza puede ser producida

por un solo hongo: M. canis.

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Género Suelo Aire Frutas

Rhizopus

Mucor

Alternaria

Botrytis

Fusarium

Pennicillium

Cladosporium

Aspergillus

Candida

Geotrichum

Trichoderma

Cephalosporium

Curvularia

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Rhizopus sp.Trichoderma sp

11

Aspergillus sp. Fusarium sp.

Penicillium sp.

Alternaria alternata Geotrichum candidum

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Se deben estudiar las características siguientes: Se observa si una colonia de hongos es filamentosa o levaduriforme. Forma y tamaño Color en la superficie o en el reverso. Difusión del pigmento. Coloración: blanca, rosada, gris ,anaranjada, verde, rojiza, negra. Textura: yesosa, glabra, terrosa, granulosa, vellosa, cérea, cremosa. Superficie: elevada o plana, levantamiento central. Aspecto: plegado, radiado, cerebriforme, crateriforme. Consistencia: dura, suave, firme, membranosa. Rapidez de crecimiento: por ejemplo las levaduras y los oportunistas

crecen en 24 a 48 h, y los dermatofitos en 5 a 10 días.

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Macroscópicamente crecen

entre 3-6 días a temperaturas

de 25º y 37º, C 7-10 días las

colonias están cubiertas con

un micelio aéreo blanco,

velloso. A medida que la

colonia madura se observa

una superficie cubierta de

esporas negras. El reverso

de la colonia presenta un

color claro o verdoso.

Aspecto: plano, polvoso,

aterciopelado seco.

Presenta micelios de crecimiento rápido

Anverso: tamaño ilimitado, ocupa todo el medio de cultivo, color verde con un halo blanquecino en la periferia, plana, polvosa, aterciopelada , rugosidades radiales.

Anverso: tamaño ilimitado, color blanco amarillento, vellosa húmeda

Reverso: no presenta pigmento.

•Micelio aéreo bien desarrollado, denso, algodonoso. Gris-blanco al

comienzo se forma pronto marrón oscuro a rojo púrpura. Bordes

enteros. El reverso es rojo púrpura a negro.

Alternaria spAnverso: tamañoilimitado, color negrocon tonalidades caféobscuro, plana,aterciopelada, seca yen ocasiones lo cubreun velo vellosoblanco.

Reverso: presentapigmento caféobscuro que difundeal medio

Anverso: tamaño

ilimitado, blanco en un

inicio, posteriormente

naranja, violeta-lila.

Aspecto: vellosa-secaReverso: presenta colornaranja o violeta difusibleal medio.

Anverso: tamañoilimitado, en uninicio es blanco (2-3días) después tomauna tonalidadblanco-grisáceo,velloso-algodonososeco.Reverso: nopresenta pigmento.

Mucor sp

Anverso: tamañoilimitado, cubriendo lasuperficie del agar conun crecimiento densocon , tiende a llenar lostubos y cajas petri.Color : en un inicio esblanco yposteriormente grisobscuro.

Reverso: pigmento nopresente, vellosos a-algodonoso seco

•Aspecto inconfundible:

vellosas, algodonosas,

pulverulentas.

•De vistosos y variados

colores

•Crecen radialmente de

modo progresivo

•Colonias de mayor tamaño

Anverso: tamaño ilimitado, crece de dos a cuatro cm, color blanco

amarillento-cremosa, convexa y plegada.

Reverso: no presenta pigmento

Nutrientes básicos en medio de cultivo

Materias nitrogenadas como peptona.

Azucares como glucosa o maltosa.

Un soporte solido como la gelosa.

pH ácido (5 a 6).

Vitaminas (impurezas de la peptona)

AGAR SABOURAUDComposición:*Peptona 10g*Glucosa 20g*Agar-Agar 20g*Agua destilada 1000ml pH 5.6 ± 0.2

AGAR PAPA DEXTROSA (PDA)Composición:*Pulpa de papa 250g*Glucosa 20g*Agar 20g*Agua destilada 1000ml pH final 5.6 +- 0.2.

USO:

Para cultivo, aislamiento y determinación del numero de hongos y levaduras.

USO:

Para cultivo de hongos

patógenos y no

patógenos,

particularmente

dermatofitos, levaduras y

m.o. acidúricos.

AGAR LITTMANComposición:

*Peptona, 10.0g

*Estreptomicina 15.0g

*Dextrosa, 10.0g

*Cristal Violeta 0.01g

*Agar 20.0g

AGAR BIGGY

*Sulfito de bismuto 8,0g

*Dextrosa 10,0g

*Extracto de levadura 1,0g

*Glicina 10,0g

*Agar 16,0g

*Citrato de Amonio y Bismuto 5,0g

pH 6.8 ± 0.2

USO:

Medio selectivo, que

suplementado con

estreptomicina, se

emplea para el

aislamiento primario y

cultivo de hongos,

especialmente

dermatofitos.

USO:

El Agar Biggy (por sus

siglas en inglés Bismuth-

Glucose-Glycine-Yeast) es

utilizado para el

aislamiento y

diferenciación de especies

de Candida. También es

conocido como Agar de

Nickerson.

Micosel agar

- Estreptomicina 0,5%

- Peptona de soya.

- Dextrosa.

- Cloranfenicol

- Agar agar

- Agua destilada

- Cicloheximida.

USOS: Selectivo para el aislamiento de hongos patógenos de muestrasque puedan tener alto contenido de flora bacteriana.

Aislamiento de Hongos del aire Aislamiento de hongos del aire

En una caja petri con agar

Saboraud y otra con agar Litman

Exponerlas abiertas a la

corriente de aire por 15 min.

Incubar a temperatura

ambiente

Realizar lectura, reportar

características macroscópicas

Aislamiento de hongos en suelo

*Diluciones

hasta alcanzar

10 -6

Fundir Saboraud y Littman

Pesar 0.5 g de tierra y agregar a

un tubo 4.5mL de la solución salina estéril

Dil 1:10

Añadir el contenido

25º -30º se añaden 2 gts de la mezcla de

antibióticos. Penicilina-

Streptomicina 1:1

De las diluciones del

paso ( * )

colocar 1 mL de las diluciones

en dos cajas con agar Saboraud y dos con Littman

Incubar a temperatura

ambiente

Realizar lectura, reportar

características macroscópicas

Aislamiento de Hongos del suelo

Diluciones realizadas para el aislamiento micológico del suelo

Aislamiento de hongos de verduras y frutos

Aislamiento de Hongo de verduras y

frutas

Colocar un poco de tejido de la verdura o fruta que contenga el

hongo

Pasarlos unos minutos por hipoclorito

Incubar a temperatura

ambiente

Sembrar en agar Saboraud y

Littman

No realizar si el hongo es de

aspecto polvosoRealizar lectura,

reportar características macroscópicas

En el centro de la caja

BIBLIOGRAFÍA:

Microbiologia general 2 Aislamiento de hongos de diferentes fuentes Equipo: 3 32

Bonifaz A. Micología médica básica. Edit. Méndez. 2a edición. México D.F.

1991.

Arenas, Roberto, Micología médica ilustrada, Edit. Interamericana McGraw-

Hill. 1°edición, 1993