prueba de paternidad 2016 ii.pptx

7/24/2019 PRUEBA DE PATERNIDAD 2016 II.pptx

1/23

PRUEBA

DEPATERNIDAD


2/23

DEFINICION

Una prueba de paternidad es aquella que tiene comoobjeto probar la paternidad esto es determinar elparentesco ascendente en primer !rado entre unindi"iduo # un $ombre %presunto padre&' (os m)todospara determinar esta relaci*n $an e"olucionado desdela simple con"i"encia con la madre la comparaci*n deras!os tipo de san!re AOB an+lisis de prote,nas #ant,!enos -(A' Actualmente la prueba id*nea es laprueba !en)tica bas+ndose en polimor.smo en

re!iones /TR' (a prueba de paternidad !en)tica sebasa en comparar el ADN nuclear de ambos' El ser$umano al tener reproducci*n se1ual $ereda un alelode la madre # otro del padre' Un $ijo debe tener paracada locus un alelo que pro"en!a del padre' Esta

comparaci*n se reali2a comparando entre 34536 locusdel !enoma del $ijo del presunto padre #


3/23

CARACTERI/TIC

A/A cada uno de los inte!rantes del !rupo se le toma una peque7a muestra desan!re o mucosa bucal para anali2ar su ADN de donde se obtiene el 8per.l!en)tico9 que es :nico para cada persona # se $ereda de la madre # del padre'Por tanto la prueba debe estudiar al $ijo a la madre # al supuesto padre a .n deidenti.car la mitad que el $ijo $ered* de la mam+ # poder saber si la otra mitadcoincide o no con la del padre en estudio'

Cuando coinciden el per.l !en)tico del $ijo # el padre se conclu#e que lapaternidad es positi"a con porcentajes superiores al 66'66; de se!uridad por lasaltas probabilidades de paternidad alcan2adas en la prueba de ADN' Cuando nocoinciden el per.l !en)tico del supuesto padre # del $ijo se e1clu#e lapaternidad< es decir se descarta al se7or como padre' En este :ltimo caso conla misma muestra de san!re se repite la prueba para con.rmar el proceso de

laboratorio'Debe tenerse en cuenta que el laboratorio tiene ri!urosas medidas de se!uridadpara que los nombres de las personas no sean conocidos por quienes reali2an laprueba'Antes de la toma de muestra usted podr+ $acer al pro=esional encar!ado laspre!untas que desee' Finalmente por e1i!encias de le# deber+ .rmar el

consentimiento para la prueba de ADN para paternidad # el resultado ser+entre!ado personalmente o en"iado por correo certi.cado'


4/23

>ARCADORE/

>O(ECU(ARE/

/e7aladores de di=erentes re!iones del !enoma' /e usan para el mapeo !en)tico como el primer paso

para encontrar la posici*n e identidad de un !en' Ampliamente utili2ados en estudios de !en)tica

$umana "e!etal animal # microbiana'

Permiten e"idenciar "ariaciones %polimor.smos& en lasecuencia del ADN entre dos indi"iduos modi.quenestas o no su =enotipo'


5/23


6/23

Espec,.camente lassecuencias o

marcadores empleadospara reali2ar una prueba de

ADN se caracteri2a portener repeticiones cortas

en t+ndem # sonampliamente conocidos porsus si!las en in!l)s como

/TRs %/$ort t+ndem

repeats& o micro sat)lites'Como su nombre lo dice

/TRs se componen desecuencias

cortas repetidas por

ejemplo? @ATA


7/23

/e $a su!erido el uso de 34 /TRs para identi.caci*n !en)tica$umana que constitu#en el CODI/ los cuales son su.cientes

para resol"er la ma#or,a de casos de paternidad'


8/23

PERFI( DE(ADN

El Per.l @en)tico o ADN esanali2ar el ADN con el .n dedetectar el tipo de secuencia enlos !enes para lo!rar la

identi.caci*n de caracter,sticasindi"iduales en una persona'

/e basa en !enerar millones decopias o ampli.car las secuencias

del !enoma que permitendi=erenciar indi"iduos en estecaso los marcadores /TRs'


9/23

OBTENCION DE( PERFI( DEADN

Esta t)cnica permite replicar alADN in "itro # se conoce comoPCR'

(a PCR se reali2a por ciclos de

temperatura suceden lossi!uientes pasos en casa ciclo?3& Desnaturali2aci*n por calor se

abren las cadenas de ADN& Alineamiento de secuencias

cortas conocidas como primersque delimitan las re!iones que se"an a replicar

4& E1tensi*n =orm+ndose cadenasnue"as de ADN por acci*n de la

Taq polimerasa


10/23

(AE(ECTROFORE/I/

T)cnica para separarmol)culas en una super.cie desoporte %!el& por acci*n de uncampo el)ctrico en base a la

car!a # el tama7o de lamol)cula< las m+s peque7ascorren m+s r+pido mientras lasm+s !randes se "anretrasando'

(a electro=oresis es unaprueba de ADN que se reali2ade dos =ormas?

Por !eles "erticales de

poliacrilamida t)cnica que $aca,do en desuso


11/23

(a si!uiente descripci*n se en=oca en el an+lisis de "arios/TRs simult+neamente %PCR m:ltiple1&

E1isten di=erentes its o sistemas !en)ticos que permitenampli.car $asta 3 marcadores 3 /TRs # un marcador se1ualllamado amelo!enina que de.ne el se1o de la muestra'


12/23

Este proceso se $ace atra")s de un tubo del

tama7o de un capilarrelleno de un pol,merodonde bajo el mismoprincipio de separaci*n porla car!a # tama7o de la

mol)cula los ampli.cadosse "an separando al aplicarcorriente el)ctrica'


13/23

Electro=ero!rama del per.l !en)tico de un indi"iduo'El tama7o en nucle*tidos %pb& # nombre del /TR semuestra en la parte superior de cada carril' Debajo decada pico se indican los alelos del indi"iduo' Para

amelo!enina %A& se obser"a solo un pico # una %mujer &'


14/23

RF(P%polimor.smo de lon!itud de =ra!mentos por restricci*n&

/on marcadores !en)ticos del ADN # se puedenencontrar en re!iones que codi.can prote,nas oe1ones en los intrones o en el ADN que separa un!en de otro'

/e re.ere a secuencias especi.cas de nucle*tidosen el ADN que son reconocidas # cortadas por laen2ima de restricci*n% tambi)n llamadasendonucleasas de restricci*n& # que "ar,an entreindi"iduos'


15/23

>ETODO(O@A

El ADN de un indi"iduo se e1trae # se puri.ca'

El ADN puri.cado puede ser ampli.cado usando la t)cnica molecularReacci*n en cadena de la polimerasa o PCR lue!o tratado conen2imas de restricci*n espec,.cas para producir =ra!mentos de ADN

de di=erentes lon!itudes' Estas en2imas de restricci*n $acen unproceso de di!esti*n restricti"a en el cual reconocen cortassecuencias espec,.cas en el ADN donde cortan =ormando =ra!mentosde distintas lon!itudes'

(os =ra!mentos de restricci*n se separan mediante electro=oresis en

!eles de a!arosa a tra")s del cual corren debido a un campo el)ctrico# su disociaci*n obedece a la masa o a la car!a el)ctrica de lasmuestras se!:n la t)cnica utili2ada'

Esto proporciona un patr*n de bandas que es :nico para un ADN en

particular debido a la di=erencia en las secuencias del ADN en losindi"iduos donde los sitios de restricci*n "ar,an'


16/23

(as bandas pueden ser trans=eridas por /out$ern Blot a unamembrana donde se $ibridan con una sonda que permitedeterminar la lon!itud # la separaci*n de los =ra!mentos'En este paso las cadenas de ADN tienen que ser

desnaturali2adas # estar en cadena sencilla para permitir la$ibridaci*n con las sondas'

(as endonucleasas de restricci*n cortan el ADN de cadenadoble en secuencias espec,.cas # cada en2ima reconoce un

sitio en particular' Un ejemplo es la EcoRI? corta solamentecuando encuentra la secuencia GH@AATTCH4G en la doble$)lice' /uponiendo que este sitio de restricci*n seencuentra en un cromosoma espec,.co lo "a a cortar=ormando dos =ra!mentos de ADN' /i una persona tieneuna mutaci*n en el sitio reconocido por la en2ima no "a apoder cortar # solo $abr+ un =ra!mento'


17/23

(a t)cnica RF(P se usa como marcadorpara identi.car?

@rupos particulares de personas con

ries!o a contraer ciertas en=ermedades!en)ticas

En !en)tica =orense En pruebas de paternidad

Otros campos'


18/23

INTERPRETACINDE RE/U(TADO/

Para determinar la paternidadentre un supuesto padre # un$ijo en disputa e1isten dosresultados posibles al comparar

sus per.les3&Jue para al menos dosmarcadores no e1ista nin!unacoincidencia entre losalelosK!enotipos del supuesto

padre e $ijo lo que se denominae1clusi*n # se descarta deinmediato la paternidad biol*!ica'& Jue s, coincida el padre con el$ijo al menos un alelo en todos los

marcadores anali2ados lo que sepuede interpretar como que el

Figura 10'Di=erencia en la interpretaci*n de un an+lisisde paternidad donde concuerda el supuesto

padre %/P& # el $ijo %-& respecto a unae1clusi*n de paternidad'


19/23

NDICE DE PATERNIDAD%IP& L PROBABI(IDAD DE

PATERNIDAD%M&

NDICE DE PATERNIDAD %IP& ? el supuesto padre %/P& es el

padre biol*!ico del $ijo L? el supuesto padre %/P& NO

es el padre biol*!ico # por lotanto es otro $ombre'

A este contraste se le conocecomo ,ndice de paternidad%IP& que indica cuantas "eceses m+s probable que el /P seael padre %& respecto a queno lo sea %L& # sueledescribirse como IP KL'


20/23

A$ora "amos a emplear las =*rmulas en

casos reales a partir de di=erentescombinaciones de !enotipos'Comen2aremos con un caso de un tr,odonde participan padre madre e hijo.


21/23

ENTAA/ L DE/ENTAA/

VENTAJAS DESVENTAJASEsta tcnica, permiti en !os a"os

1#$% & $', !a entrada de !a

(io!og)a mo!ecu!ar en e! campo de

identi*cacin humana.

Es de alto costo'

E! hecho de! gran po!imor*smo de

!os a!e!os, +ue hace rea!mente

mu di-)ci! +ue dos personas

tengan !os mismos a!e!os para un

!ocus determinado.

Di.cultad metodol*!ica por el uso desondas espec,.cas # sustancias

radioacti"as'

/tra entaja, +ue podr)a

conertirse en desentaja, es !adenominada resistencia a !a

contaminacin (io!gica.

/e requiere !randes cantidades de ADN

que tambi)n es necesario un ADN de altopeso molecular bien conser"ado # debuena calidad'

(a complejidad # el consumo de tiempo#a que un an+lisis con sondas puedenlle!ar a necesitar de a Q o 3 d,as'

En la prueba de paternidad esta t)cnicano es tan precisa ni e1acta'

RF(P %An+lisis de Fra!mentos deRestricci*n de (on!itud Polim*r.ca&

*


22/23

PCR %Reacci*n en Cadena de laPolimerasa&

VENTAJAS DESVENTAJASa posi(i!idad de estudiar indicios

mu pe+ue"os. 2 +ue esta tcnica se

(asa en amp!i*car arti*cia!mente un

-ragmento determinado de ADN.

/olo se puede producir partes del!enoma en donde se conoce por lomenos una m,nima secuencia de

S pb'

Se -aci!ita e! an3!isis de materia!esantiguos degradados. 2a +ue !os

-ragmentos de ADN +ue se estudian

tienen tama"os de 400 a '00 pares de

(ases, !o +ue !es con*ere esta(i!idad

resistencia a !a degradacin.

/e necesitan primers espec,.cosque sean complementarios al

=ra!mento que se desea sinteti2ar'

E! proceso es r3pido econmico. 2a

+ue a!gunos an3!isis se pueden

comp!etar en pocas horas.

(a polimeri2aci*n puede tenererrores al sinteti2ar el ADN'

Se puede amp!i*car ADN, de cua!+uier

organismo io o muerto.

(a contaminaci*n biol*!ica quepueda conducir a una imposibilidad

a la $ora de intentar interpretar losresultados'


23/23

PRUEBA DEPATERNIDAD

VENTAJAS DESVENTAJASEs simp!e, r3pida *a(!e.

/-rece un ##.#5 de

*a(i!idad en sus resu!tados.

(a des"entaja seria al utili2arsan!re para esta prueba #a que

solo o=rece un ; de .abilidad'Es ino-ensia, a +ue no se

re+uiere e6traccin de

sangre.

7uede !!earse a ca(o en

ni"os pe+ue"os o (e(s sinnecesidad de contar con

asistencia especia!i8ada.

Este tipo de toma de

muestra se rea!i8a con tota!

discrecin comodidad.

prueba de paternidad 2016 ii.pptx

Documents