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MODIFICADORESMETABÓLICOSENELCERDOIBÉRICO:METABOLISMOENÓRGANOS,TEJIDOS
YENELANIMALCOMPLETO
METABOLICMODIFIERSINTHEIBERIANPIG:ORGAN,TISSUEANDWHOLEBODYMETABOLISM
MARÍA LUZ ROJAS CANO
TESISDOCTORAL
PROGRAMADEDOCTORADOINTERUNIVERSITARIO“BIOLOGÍAAGRARIAYACUICULTURA”
GRANADA, 2015
Universidad de Granada Facultad de Ciencias
Departamento de Fisiología Vegetal
Estación Experimental del ZaidínDepartamento de Fisiología y
Bioquímica de la Nutrición Animal
Consejo Superior de
Investigaciones Científicas
Editor: Universidad de Granada. Tesis Doctorales Autora: María Luz Rojas CanoISBN: 978-84-9163-603-8 URI: http://hdl.handle.net/10481/48563
La realización de la presente Tesis Doctoral se ha llevado a cabo gracias a la concesión de una beca de
Formación de Personal Investigador del Ministerio de Ciencia y Tecnología (Ref. BES-2010-030095). El
trabajo que se expone forma parte del proyecto: “Modificadores Metabólicos en el cerdo Ibérico: órganos,
tejidos y animal completo” (Ref. AGL2009-08916) financiado por el Ministerio de Ciencia e Innovación.
La dirección de esta Memoria de Tesis Doctoral la han llevado a cabo los Dres. Ignacio Fernández-
Fígares Ibáñez y Manuel Lachica López, del Departamento de Fisiología y Bioquímica de la Nutrición
Animal, de la Estación Experimental del Zaidín (Granada), del Consejo Superior de Investigaciones
Científicas.
Los resultados preliminares de los ensayos que recoge la presente Tesis Doctoral han sido presentados
en los siguientes congresos:
Portal-drained viscera heat production in pigs fed betaine and conjugated linoleic acid (CLA)
supplemented diets. M.L. Rojas-Cano, M. Lachica, L. Lara, A. Haro and I. Fernández-Fígares. 2013. 4th
International Symposium on Energy and Protein Metabolism and Nutrition in Sustainable Animal
Production. Sacramento, California, USA.
Efectos de la betaína y el CLA sobre el flujo sanguíneo portal de cerdos Ibéricos en crecimiento. Rojas-
Cano, M.L., Lachica, M., Lara, L., Haro, A. y Fernández-Fígares, I. 2013. Aida, XV Jornadas sobre
Producción Animal, Tomo I, 144-146. Comunicación oral.
Efecto de la betaína y el ácido linoleico conjugado sobre los diversos cortes y tejidos de la canal de
cerdos Ibéricos. Análisis alométricos. Rojas-Cano, M.L., Lara, L., Lachica, M y Fernández-Fígares, I. 2009.
Aida, XIII Jornadas sobre Producción Animal, Tomo I, 256-258. Comunicación oral.
Así mismo, forman parte de las siguientes publicaciones:
Influencia de la betaína y el ácido linoleico conjugado en el desarrollo de los cortes de cerdos Ibéricos.
Rojas-Cano, M.L., Lara, L., Lachica, M. y Fernández-Fígares, 2013. Eurocarne, 221: 44-51.
Influence of betaine and conjugated linoleic acid on development of carcass cuts of Iberian pigs growing
from 20 to 50 kg body weight. M.L. Rojas-Cano, L. Lara, M. Lachica, J.F. Aguilera, I. Fernández-Fígares.
2011. Meat Science 8, 525–530. ISSN 0309-1740.
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ÍNDICE DE CONTENIDOS
ÍNDICE DE TABLAS .......................................................................................................................................... 7
ÍNDICE DE FIGURAS ....................................................................................................................................... 9
CAPÍTULO 1: JUSTIFICACIÓN, OBJETIVOS Y PLANTEAMIENTO EXPERIMENTAL ................................................... 11
1.1. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA ............................................................................................................ 17
CAPÍTULO 2: REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA ......................................................................................................... 21
2.1. MODIFICADORES METABÓLICOS ....................................................................................................... 23
2.1.1. ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO ................................................................................................ 23
2.1.1.1. ESTRUCTURA, ORIGEN Y FUENTES DE CLA .................................................................. 23
2.1.1.2. EFECTOS BIOLÓGICOS DEL CLA ................................................................................... 28
2.1.1.2.1. CLA COMO ALIMENTO FUNCIONAL ................................................................ 28
2.1.1.2.2. COMPOSICIÓN, CONCENTRACIÓN Y DOSIS ...................................................... 31
2.1.1.2.3. EFECTO DEL CLA SOBRE PESO Y COMPOSICIÓN CORPORAL ............................ 31
2.1.1.2.4. CLA Y SU EFECTO SOBRE LA GRASA INTRAMUSCULAR Y EL PERFIL DE
ÁCIDOS GRASOS ........................................................................................... 34
2.1.1.2.5. CLA Y SU EFECTO SOBRE LA SALUD ............................................................... 36
2.1.1.2.5.1. ANTICANCERÍGENO ...................................................................... 36
2.1.1.2.5.2. RESISTENCIA A LA INSULINA/ANTIDIABÉTICO .................................. 38
2.1.1.2.5.3. ANTIA-TERATOGÉNICO .................................................................. 39
2.1.1.2.5.4. INMUNOMODULADOR .................................................................... 41
2.1.1.2.5.5. HIPOCOLESTEROLÉMICO .............................................................. 42
2.1.1.2.5.6. SALUD ÓSEA ................................................................................ 43
2.1.1.3. MECANISMOS DE ACCIÓN DEL CLA .............................................................................. 45
2.1.2. BETAÍNA ............................................................................................................................... 46
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2.1.2.1. ESTRUCTURA .............................................................................................................. 46
2.1.2.2. INGESTIÓN Y ABSORCIÓN ............................................................................................. 48
2.1.2.3. DOSIS ......................................................................................................................... 49
2.1.2.4. FUENTES DE BETAÍNA .................................................................................................. 49
2.1.2.5. FUNCIONES FISIOLÓGICAS Y NUTRICIONALES ................................................................ 51
2.1.2.5.1. BETAÍNA COMO SUSTANCIA OSMÓTICA ACTIVA ................................................ 51
2.1.2.5.1.1. INFLUENCIA EN EL DESARROLLO DEL TRACTO
GASTROINTESTINAL Y EN LA DIGESTIBILIDAD DE NUTRIENTES ......... 52
2.1.2.5.1.2. INFLUENCIA EN EL TEJIDO MUSCULAR ............................................ 54
2.1.2.5.2. BETAÍNA COMO DONADOR DE GRUPOS METILO ............................................... 55
2.1.2.6. EFECTOS DE LA SUPLEMENTACIÓN CON BETAÍNA .......................................................... 58
2.1.2.6.1. COMPOSICIÓN CORPORAL Y CALIDAD DE LA CANAL ......................................... 58
2.1.2.6.2. ENERGÍA Y UTILIZACIÓN DEL NITRÓGENO ........................................................ 60
2.1.2.6.3. SENSIBILIDAD A LA INSULINA Y REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA ............ 61
2.1.2.7. FACTORES QUE AFECTAN LA EFICACIA DE LA BETAÍNA ................................................... 63
2.2. CERDO IBÉRICO .............................................................................................................................. 64
2.2.1. DEFINICIÓN, ORIGEN, DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA Y SITUACIÓN ACTUAL .................................... 64
2.2.2. PERFIL METABÓLICO ............................................................................................................... 70
2.2.2.1. METABOLISMO PROTEICO ............................................................................................ 70
2.2.2.2. CAPACIDAD DIGESTIVA ................................................................................................. 74
2.2.2.3. PERFIL ENZIMÁTICO Y HORMONAL ................................................................................ 76
2.2.2.4. DEPOSICIÓN DE TEJIDO GRASO .................................................................................... 78
2.2.3. TEJIDOS ESPLÁCNICOS ........................................................................................................... 79
2.2.3.1. VISCERAS QUE DRENAN AL SISTEMA PORTA (VDP) ....................................................... 80
2.2.3.2. MEDIDA DEL FLUJO DE METABOLITOS DE LAS VDP: MÉTODO DE FICK .............................. 82
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2.2.3.2.1. OXÍGENO ..................................................................................................... 87
2.2.3.2.2. ALBÚMINA .................................................................................................... 89
2.2.3.2.3. AMONIO ....................................................................................................... 90
2.2.3.2.4. COLESTEROL ............................................................................................... 91
2.2.3.2.5. CREATININA ................................................................................................. 93
2.2.3.2.6. GLUCOSA .................................................................................................... 94
2.2.3.2.7. LACTATO ..................................................................................................... 95
2.2.3.2.8. TRIGLICÉRIDOS ............................................................................................ 96
2.2.3.2.9. UREA ........................................................................................................... 97
2.2.4. DESARROLLO CORPORAL EN EL CERDO IBÉRICO ..................................................................... 98
2.3. REFERENCIAS BIBLIGRÁFICAS ........................................................................................................ 102
CAPÍTULO 3. METODOLOGÍA ...................................................................................................................... 153
3.1. PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES .............................................................................................. 155
3.1.1. ESTUDIO DEL DESARROLLO DE LOS CORTES DE LA CANAL DEL CERDO IBÉRICO EN
CRECIMIENTO ......................................................................................................................... 155
3.1.1.1. ANIMALES Y DIETAS ................................................................................................... 155
3.1.1.2. SACRIFICIO Y DISECCIÓN ........................................................................................... 158
3.1.1.3. TÉCNICA DE DISECCIÓN ............................................................................................. 159
3.1.1.4. ANÁLISIS FÍSICO-QUÍMICO .......................................................................................... 160
3.1.1.5. CONTENIDO EN MATERIA SECA .................................................................................. 160
3.1.1.6. DETERMINACIÓN DEL EXTRACTO ETÉREO .................................................................. 160
3.1.1.7. ESTUDIO ALOMÉTRICO .............................................................................................. 161
3.1.2. ESTUDIO DE LA PRODUCCIÓN DE CALOR DE LAS VDP ............................................................ 162
3.1.2.1. ANIMALES Y DIETAS ................................................................................................... 162
3.1.2.2. PROCEDIMIENTO QUIRÚRGICO ................................................................................... 164
‐ 4 ‐
3.1.2.3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL ................................................................................ 164
3.1.2.4. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE ÁCIDO PARA-AMINOHIPÚRICO EN
PLASMA ................................................................................................................... 165
3.1.2.5. DETERMINACIÓN DEL FLUJO SANGUÍNEO .................................................................... 165
3.1.2.6. DETERMINACIÓN DE CONSUMO LA CONCENTRACIÓN DE O2 EN SANGRE ........................ 166
3.1.2.7. DETERMINACIÓN DE CONSUMO DE O2 Y PRODUCCIÓN DE CALOR DE LAS VDP ................ 167
3.1.3. DETERMINACIÓN DEL FLUJO NETO PORTAL DE LOS DISTINTOS METABOLITOS ............................ 167
3.1.3.1. DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA ................................................................................... 168
3.1.3.2. DETERMINACIÓN DE AMONIO ...................................................................................... 168
3.1.3.3. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL .............................................................................. 169
3.1.3.4. DETERMINACIÓN DE CREATININA ................................................................................ 170
3.1.3.5. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA ................................................................................... 171
3.1.3.6. DETERMINACIÓN DE LACTATO .................................................................................... 171
3.1.3.7. DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS ........................................................................... 172
3.1.3.8. DETERMINACIÓN DE UREA .......................................................................................... 173
3.1.3.9. DETERMINACIÓN DEL FLUJO NETO PORTAL DE LOS DISTINTOS METABOLITOS ................. 174
3.3. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ....................................................................................................... 174
CAPÍTULO 4: PRUEBAS EXPERIMENTALES ................................................................................................... 179
4.1. MANUSCRITO 1. INFLUENCE OF BETAINE AND CONJUGATED LINOLEIC ACID ON DEVELOPMENT OF
CARCASS CUTS OF IBERIAN PIGS GROWING FROM 20 TO 50 KG BODY WEIGHT ................................... 181
4.2. MANUSCRITO 2. PORTAL-DRAINED VISCERA HEAT PRODUCTION IN IBERIAN PIGS FED BETAINE
AND CONJUGATED LINOLEIC ACID SUPPLEMENTED DIETS .................................................................. 203
4.3. MANUSCRITO 3. INFLUENCE OF BETAINE AND CONJUGATED LINOLEIC ACID ON PORTAL-DRAINED
VISCERA FLUX OF METABOLITES IN GROWING IBERIAN PIGS ............................................................ 225
CAPÍTULO 5: DISCUSIÓN GENERAL ............................................................................................................. 235
‐ 5 ‐
5.1. INFLUENCIA DE LA BETAÍNA Y EL ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO EN EL DESARROLLO DE LOS
CORTES DE LA CANAL DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO DESDE 20 A 50 KG DE PV. ................... 237
5.1.1. RENDIMIENTO DE LOS CORTES PRINCIPALES DE LA CANAL DE CERDOS IBÉRICOS EN
CRECIMIENTO (20-50 KG DE PV) ALIMENTADOS CON DIETAS SUPLEMENTADAS O NO, CON
CLA Y/O BETAÍNA. ................................................................................................................... 238
5.1.2. RENDIMIENTO DE LOS DOS QUE CONFORMAN LAS PIEZAS NOBLES JAMÓN Y PALETA
PERFLADOS DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO (20-50 KG DE PV) ALIMENTADOS CON
DIETAS SUPLEMENTADAS O NO, CON CLA Y/O BETAÍNA. ............................................................ 242
5.1.3. CRECIMIENTO ALOMÉTRICO DE LOS CORTES PRINCIPALES DE CERDOS IBÉRICOS EN
CRECIMIENTO (20-50 KG DE PV) ALIMENTADOS CON DIETAS SUPLEMENTADAS O NO, CON
CLA Y/O BETAÍNA. ................................................................................................................... 244
5.1.4. CRECIMIENTO ALOMÉTRICO DE LOS DIFERENTES TEJIDOS QUE CONFORMAN LAS PIEZAS
NOBLES JAMÓN Y PALETA PERFILADOS DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO (25-50 KG
DE PV) ALIMENTADOS CON DIETAS SUPLEMENTADAS O NO, CON CLA Y/O BETAÍNA. ................... 247
5.2. EFECTO DEL CLA Y LA BETAÍNA SOBRE LA PRODUCCIÓN DE CALOR DE LAS VISCERAS QUE
DRENAN AL SISTEMA PORTA DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO (30 KG DE PV) .......................... 248
5.3. EFECTO DEL CLA Y LA BETAÍNA SOBRE EL FLUJO NETO PORTAL DE METABOLITOS EN EL CERDO
IBÉRICO EN CRECIMIENTO (30 KG DE PV) ......................................................................................... 253
5.4. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA ........................................................................................................... 258
CAPÍTULO 6: CONCLUSIONES/CONCLUSIONS ............................................................................................... 273
6.1. CONCLUSIONES ............................................................................................................................. 275
6.2. CONCLUSIONS ............................................................................................................................... 277
CAPÍTULO 7: RESUMEN/SUMMARY ............................................................................................................. 279
7.1. RESUMEN .................................................................................................................................. 281
7.2. SUMMARY .................................................................................................................................. 287
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ÍNDICE DE TABLAS
CAPÍTULO 2 Tabla 2.1: Contenido de CLA en los distintos alimentos ........................................................ 27 Tabla 2.2: Contenido de Betaína en ingredientes para piensos. .............................................. 50 CAPÍTULO 3 Tabla 3.1. Ingredientes y composición química de las dietas experimentales. ....................... 157 Tabla 3.2. Ingredientes y composición química de las dietas experimentales. ....................... 163 CAPÍTULO 4 Manuscrito 1
Table 1. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on yield (g) of different cuts of the left carcass of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW. ........................ 193
Table 2. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on dissected
components (g) of trimmed shoulder and ham of the left carcass side of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW. .................................................................................................. 193
Table 3. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on allometric
coefficients (b) of different cuts of the left carcass of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW. ................................................................................................................................ 194
Table 4. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on the coefficient
of allometric growth (b) relating weights of dissected components of shoulder to shoulder weight of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW. ................................................ 196
Table 5. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on the coefficient
of allometric growth (b) relating weights of dissected components of ham to ham weight of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW. ............................................................... 196
Manuscrito 2
Table 1. Composition (g/kg) and chemical analysis of a diet (control) supplemented either with betaine (0.5%), conjugated linoleic acid (CLA, 1%), or betaine + CLA . ................ 222
Table 2. Pre and postprandial blood traits and portal-drained viscera (PDV) heat
production of Iberian pigs (n=4/diet) fed with a diet (control) supplemented either with betaine (0.5%), conjugated Linoleic acid (CLA, 1%), or betaine + CLA . ................................ 223
Manuscrito 3
Table 1. Mean arterial and portal plasma concentrations, and net portal-drained
viscera (PDV) flux of glucose, lactate, albumin, creatinine, NH3, urea, triglycerides (TG) and cholesterol of Iberian pigs (n = 4/diet) fed with a diet (control) supplemented either with betaine (0.5%), conjugated linoleic acid (CLA, 1%), or betaine + CLA. ........................................................................................................................ 234
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ÍNDICE DE FIGURAS
CAPÍTULO 2 Figura 2.1: Estructura del ácido linoleico y de los isómeros CLA cis-9,trans-11 y trans-
10,cis-12 ........................................................................................................................... 24 Figura 2.2: Vías de hidrogenización del ácido linoleico en el rumen y en los tejidos ........................ 25 Figura 2.3: Estructura Química de la betaína .................................................................................... 47 Figura 2.4: Vías metabólicas del catabolismo de la betaína ............................................................. 48 Figura 2.5: Metabolismo del grupo metilo ......................................................................................... 55 Figura 2.6: Estirpes y líneas de cerdo Ibérico en España ................................................................. 65 Figura 2.7: Mapa de distribución del porcino Ibérico en España ....................................................... 67 Figura 2.8: Distribución geográfica de la población de cerdo Ibérico en España en
miles de animales. .......................................................................................................... 67 Figura 2.9: Censo del ganado porcino Ibérico en la Unión Europea ................................................. 69 Figura 2.10: Composición de la ganancia de peso del cerdo Ibérico en distintas fases
de su ciclo reproductivo, comparado con una raza convencional. .................................. 71 Figura 2.11: Leptina y la regulación del balance energético ............................................................. 77 Figura 2.12: Vísceras que drenan al Sistema Porta ......................................................................... 80 Figura 2.13: Vena Porta ................................................................................................................... 81 Figura 2.14: Muestreo sanguíneo en un cerdo Ibérico según el método de la
diferencia arterio-venosa ................................................................................................ 83 Figura 2.15: Infusión de ácido para-aminohipúrico ........................................................................... 84 Figura 2.16: Representación gráfica de la ecuación alométrica ..................................................... 101 CAPÍTULO 3 Figura 3.1: Despiece de la media canal izquierda de Cerdo Ibérico ............................................... 159 Figura 3.2: Método enzimático para la determinación de amonio ................................................... 168 Figura 3.3: Método enzimático colesterol oxidasa/peroxidasa ........................................................ 169 Figura 3.4: Método colorimétrico-cinético para la determinación de creatinina basado
en la reacción de Jaffé .................................................................................................... 170 Figura 3.5: Método enzimático glucosa oxidasa/peroxidasa ........................................................... 171
‐ 10 ‐
Figura 3.6: Método enzimático para cuantificar L-Lactato ............................................................... 172 Figura 3.7: Método enzimático glicerol fosfato oxidasa/peroxidasa ................................................ 172 Figura 3.3: Método enzimático ureasa/glutamato deshidrogenasa ................................................. 173 CAPÍTULO 4
Manuscrito 2 Figura 1: Pre- and postprandial portal blood flow (PBF), arterio-portal O2 concentration
difference, portal-drained viscera (PDV) O2 consumption, and PDV heat production of Iberian growing pigs fed control, betaine, CLA or betaine + CLA diets ........................................... 224
‐ 11 ‐
CAPITULO1
JUSTIFICACIÓN, OBJETIVOS Y
PLANTEAMIENTO EXPERIMENTAL
‐ 13 ‐
El cerdo Ibérico presenta una serie de características especiales que lo hacen único en su
especie. Difiere considerablemente de las razas modernas por su limitada capacidad de crecimiento y un
marcado perfil lipogénico, que se puede definir como un reducido potencial para la deposición de proteína
y una elevada capacidad de deposición de tejido graso (Barea y col., 2007). La explotación de esta raza
porcina no va encaminada a la obtención de un gran rendimiento cárnico para atender la demanda
masiva del mercado, sino a la obtención de productos de alta calidad que ha propiciado que sea un caso
casi único de persistencia de sistemas de producción extensivos dentro de la porcinocultura en países
desarrollados, que no sólo no son agresivos con el medio sino que colaboran decisivamente en el
mantenimiento de ecosistemas naturales como la dehesa (López-Bote y col., 2010).
El grupo de investigación dentro del cual se desarrolla el presente trabajo de Tesis Doctoral, ha
dedicado en las últimas décadas parte de su actividad científica a la caracterización metabólica y
fisiológica del cerdo Ibérico en distintas fases de su ciclo productivo, colaborando de este modo a que la
explotación de esta raza porcina se lleve a cabo con los criterios adecuados de sostenibilidad ambiental y
económica, y respetando en todo momento el bienestar del animal. Desde el año 2002, parte de estas
investigaciones se han centrado en el estudio de estrategias productivas que permitan controlar la
partición de nutrientes en el organismo utilizando modificadores metabólicos como herramienta. Estos
modificadores metabólicos son el ácido linoleico conjugado, más conocido con el acrónimo de sus siglas
en inglés CLA (conjugated linoleic acid) y la betaína.
En los estudios realizados en nuestro grupo de investigación, se ha observado que el uso conjunto
de betaína y CLA tiene un efecto sinérgico sobre el crecimiento y composición corporal del cerdo Ibérico,
obteniendo canales más ricas en proteína y con un menor contenido en grasa. Son múltiples los
parámetros que definen la calidad de la carne de cerdo, pero son las cantidades absolutas y proporciones
relativas en las que el tejido magro y graso se depositan lo que determina el valor económico del animal
(Vílchez, 2004). La grasa constituye en gran medida un índice de calidad, incluyendo el contenido en
grasa intramuscular o de infiltración, que otorga las propiedades organolépticas que tanto se valoran en
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los productos derivados del cerdo Ibérico. El engrasamiento determina también una medida de la
rentabilidad ya que resulta muy ineficiente. Es por esto que las estrategias productivas deben mantener
criterios de calidad elevados (grasa intramuscular) que sean compatibles con una alta eficiencia
productiva (bajo engrasamiento). Estudios previos revelaron una alteración en la composición del perfil de
ácidos grasos de la grasa intramuscular, entre otros depósitos grasos estudiados (grasa subcutánea,
grasa perirrenal, grasa intramuscular en músculos semitendinosus y biceps femoris) de cerdos Ibéricos
alimentados con dietas enriquecidas con CLA y betaína (Fernández-Fígares y col., 2008). Igualmente se
observó una modificación en el perfil hormonal sanguíneo, que junto con los efectos anteriormente
mencionados, ponen de manifiesto una clara alteración del metabolismo lipídico del animal.
El flujo de nutrientes ingeridos por el animal que llegan a los tejidos periféricos de gran interés
económico y productivo (músculo, glándula mamaria y útero) se realiza a través de la sangre y la linfa.
Considerando la ruta vascular, este flujo de nutrientes debe pasar antes por las vísceras que drenan al
sistema porta (VDP; tracto gastrointestinal, páncreas, bazo) y el hígado que, por su posición anatómica y
funcionamiento metabólico, controlan su distribución al resto del organismo. El mayor peso relativo de
estas vísceras en la raza Ibérica y su elevada tasa metabólica, puede comprometer el suministro de
nutrientes que llega a los tejidos periféricos, pudiendo ser la razón de la menor eficiencia en la utilización
de la energía metabolizable de esta raza autóctona. Otro aspecto interesante para tener en cuenta y que
podría aportar mayor conocimiento sobre las peculiaridades de la raza Ibérica, es el flujo de metabolitos a
través de las VDP y cómo se ve afectado por la adición a la dieta de CLA y betaína. Este estudio,
además, puede ser de gran interés para descartar la existencia de posibles efectos negativos
relacionados con la adición de estos modificadores a nivel fisiológico y metabólico. Esto es posible
basándonos en que los niveles en sangre de los metabolitos analizados son indicadores del estado
fisiológico del organismo, indicadores clave para el diagnostico clínico de alteraciones en la función de
órganos como hígado, riñón o incluso cerebro (niveles de lactato, creatinina o amonio, por ejemplo), e
incluso reveladores del riesgo de padecer enfermedades o trastornos metabólicos como diabetes tipo II,
diabetes Mellitus, acidosis láctica o enfermedades cariovasculares (glucosa, colesterol, triglicéridos, urea,
etc). En el caso del cerdo, además, por sus semejanzas metabólicas con el ser humano, se usa como
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modelo experimental para el estudio del estrés oxidativo asociado a la aterogénesis, así como para el
experimento de dietas y fármacos hipolipemiantes (Martínez y col., 1998; Fernández-Robredo y col.,
2005; Heaps y col., 2005; Martins y col., 2005; Dyson y col., 2006).
Parece necesario, por tanto, el estudio del metabolismo energético y proteico de las VPD, el flujo
de metabolitos a través de las mismas, e indiscutiblemente, cómo afecta la adición a la dieta de estos
modificadores metabólicos, ya sea de manera individual o conjunta. Y es que la modulación del
metabolismo energético y proteico mediante el uso de estos modificadores metabólicos, CLA y betaína,
presenta aún grandes incógnitas en cuanto a los posibles efectos sobre diversos aspectos metabólicos y
fisiológicos en el cerdo Ibérico, y sus mecanismos de acción.
Son pocos los estudios realizados sobre el efecto que el CLA y la betaína, pueden tener sobre
razas no mejoradas, como es el caso del cerdo Ibérico. Este estudio se ha llevado a cabo con la hipótesis
de que los efectos beneficiosos ya observados previamente con el uso de estos modificadores del
metabolismo, podrían ser mayores en esta raza, al tratarse de un genotipo obeso, que en razas de
genotipos mejorados. Además, es interesante el enriquecimiento de los productos derivados del cerdo
Ibérico con CLA, debido a los beneficios que su incorporación a la dieta puede producir para la salud del
consumidor, relacionándose así, estos productos con una alimentación saludable. Adicionalmente, se
puede considerar el cerdo Ibérico, por su características fisiológicas y metabólicas, como un buen modelo
para el estudio de la obesidad en humanos, enfermedad bautizada por la OMS como la “epidemia del
siglo XXI”. La obesidad constituye en la actualidad un problema grave en diversos países desarrollados,
que afecta a un alto porcentaje de la población, y que se va extendiendo alarmantemente a niños y
adolescentes. Los cambios ocurridos en los últimos 30 años, en cuanto a la modificación de hábitos
alimenticios y los cambios en la producción alimentaria, hacen que estemos consumiendo un 80% menos
de CLA en nuestra alimentación actual. Se ha documentado una correlación inversa entre la ingesta de
grasa procedente de la leche y la presencia de obesidad abdominal en hombres adultos, lo que podría ser
una evidencia indirecta del posible efecto metabólico del CLA (Smedman y col., 2003). Dentro de los
países cuyo consumo se ha establecido, Australia presenta los valores más altos de ingesta de CLA (1,5-
1,8 g/día), en tanto que Alemania muestra los valores más bajos (0,5 g/día) (Fritsche y Steinhart, 1998).
‐ 16 ‐
Considerando que para alcanzar los efectos beneficiosos atribuidos al consumo de CLA se requiere de
cantidades mayores de las que aportan los alimentos naturales, algunos investigadores se han arriesgado
a establecer como necesario un consumo de al menos 3,4 g/día. Por tanto, se precisa adicionar,
suplementar o incrementar el contenido de este ácido graso en los diversos alimentos, para alcanzar los
beneficios atribuidos al consumo de CLA. La suplementación en la dieta es actualmente una de las
estrategias más utilizadas, lo que reduce la necesidad de ingerir grandes cantidades de grasa animal
para alcanzar su ingesta recomendada (Barr y col., 2003). Algunos de los resultados obtenidos a lo largo
del desarrollo del presente trabajo de Tesis Doctoral podrían extrapolarse a la nutrición e incrementar el
conocimiento sobre sus efectos en la salud.
Por todo lo expuesto anteriormente se han planteado tres objetivos generales en esta Tesis
Doctoral:
1. Evaluar cómo afecta la adición de CLA y/o betaína a la dieta de cerdos Ibéricos sobre el
crecimiento y desarrollo de los distintos cortes de la canal y los principales tejidos que conforman las
piezas nobles, jamón y paleta.
2. Determinar si estos modificadores metabólicos añadidos a la dieta tienen efecto sobre la
producción de calor de las VDP de cerdos Ibéricos en crecimiento, que pueda explicar en parte, las
diferencias previamente observadas en el crecimiento de animales alimentados con dietas
suplementadas con CLA y/o betaína.
3. Estudiar el efecto que la adición a la dieta de CLA y/o betaína ejerce sobre el flujo de los
siguientes metabolitos a través de las VDP de cerdos Ibéricos en crecimiento: albúmina, amonio,
colesterol, creatinina, glucosa, lactato, triglicéridos y urea.
Para abordar los objetivos de la presente tesis se diseñaron tres experimentos, todos ellos in vivo.
El primer experimento realizado nos permitió abordar el primer objetivo. Consistió en un estudio
alométrico para medir la velocidad relativa de crecimiento de los distintos cortes de la canal y los tejidos
que conforman las piezas nobles, jamón y paleta, y cómo afectaba a dicho parámetro la adición a la dieta
de CLA y/o betaína. Este experimento se recogió en el manuscrito 1 (capítulo 4). El segundo experimento
‐ 17 ‐
realizado nos permitió desarrollar el objetivo número 2 y 3. El propósito del objetivo 2 es poder determinar
el efecto del CLA y la betaína en la producción de calor de las VDP. Para ello se implantaron 3 catéteres
permanentes: en arteria carótida, vena porta e ileal, a través de los cuales se pudo realizar la extracción
de sangre, y su posterior análisis en laboratorio. Este experimento se recoge en el manuscrito 2.
Finalmente, el objetivo número 3 se desarrolló mediante la realización de diversas técnicas para el
análisis y cuantificación de los distintos metabolitos anteriormente mencionados, en las muestras de
sangre obtenidas durante el experimento número 2. Este experimento se recoge en el manuscrito 3 del
capítulo 4.
Estos experimentos se realizaron en cerdos Ibéricos en fase de crecimiento, que comprende de 15
a 50 kg de peso vivo (PV; 2-5 meses), debido a que las diferencias en tamaño relativo de las VDP entre el
genotipo Ibérico y el genotipo de razas mejoradas, son más marcadas en esta fase productiva del animal.
Se ha observado además, que el efecto de los modificadores metabólicos, más concretamente el CLA,
sobre la composición corporal en animales de mayor peso no son tan marcados como los observados en
animales de menor peso (Bhattacharya y col., 2006). Por otro lado, este posible efecto de los
modificadores metabólico sobre el crecimiento y desarrollo del animal, debería reflejarse en la
conformación del mismo, por tanto, se recomienda que la administración de estos modificadores
metabólicos sea en fases tempranas del animal.
1.1. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
Barr, S.I. 2003. Increased dairy product or calcium intake: is body weight or composition affected in
humans?. Journal Nutrition 133, 245-248.
Barea, R., Nieto, R. y Aguilera, J.F. 2007. Effects of the dietary protein content and the feeding level on
protein and energy metabolism in Iberian pigs growing from 50 to 100 kg body weight. Animal 1, 357-
365.
Bhattacharya, A., Banu, J., Rahman, M., Causey, J. y Fernandes, G. 2006. Biological effects of
‐ 18 ‐
conjugated linoleic acids in health and disease. Journal of Nutritional Biochemistry 17, 789–810.
Dyson, M.C., Alloosh, M., Vuchetich, J.P., Mokelke, E.A. y Sturek, M. 2006. Components of metabolic
syndrome and coronary artery disease in female Ossabaw swine fed excess atherogenic diet.
Comparative Medicine 56, 35-45.
Fernández-Fígares, I., Rodríguez-López, J.M., González-Valero, L., Nieto, R., Lachica, M. y Aguilera, J.F.
2008. Effect of conjugated linoleic acid, betaine or both on fatty acid composition of growing Iberian
gilts. Joint Annual Meeting of American Dairy Science Association and American Society of Animal
Science. Indianapolis, Indiana, USA. Journal of Animal Science 86, 37.
Fernandez-Robredo, P., Moya, D., Rodriguez, J.A. y Garcia-Layana, A. 2005. Vitamins C and E reduce
retinal oxidative stress and nitric oxide metabolites and prevent ultrastructural alterations in porcine
hypercholesterolemia. Investigative Ophthalmology & Visual Science 46, 1140-1146.
Fritsche, J. y Steinhart, H. 1998. Amounts of conjugated linoleic acid (CLA) in German foods and
evaluation of daily intake. Z. Lebensm Unters Forsch 206, 77-82.
Heaps, C.L., Tharp, D.L. y Bowles, D.K. 2005. Hypercholesterolemia abolishes voltage-dependent K+
channel contribution to adenosine-mediated relaxation in porcine coronary arterioles. American
Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology 288, 568- 576.
Lopez Bote, C., Fructuoso, G. y Mateos, G.G. 2010. Sistemas de producción porcina y calidad de la
carne. El cerdo ibérico Avances en nutrición y alimentación animal. XVI Curso de especialización
FEDNA.
Martínez Caro, D., Garcia, I., Merino, J., Gil, M.J., Martínez, A., Grau, A. y Alegría, E. 1998. Factores de
crecimiento para células musculares lisas vasculares en la hipercolesterolemia experimental. Anales
del Sistema Sanitario de Navarra 21, 3-7.
Martins, J.M., Riottot, M., de Abreu, M.C., Viegas-Crespo, A.M., Lanca, M.J., Almeida, J.A., Freire, J.B. y
Bento, O.P. 2005. Cholesterol-lowering effects of dietary blue lupin (Lupinus angustifolius L.) in intact
‐ 19 ‐
and ileorectal anastomosed pigs. Journal of Lipid Research 46, 1539-1547.
Smedman, A., Basu, S. y Vessby, B. 2003. CLA and body weight regulation in humans. Lipids 38, 133-
137.
Vilchez Campillos, M.A. 2004. Efectos observados en el rendimiento productivo y composición tisular del
cerdo Ibérico en crecimiento subsiguientes a cambios en la ingestión diaria de energía y proteína.
Trabajo profesional fin de carrera, Universidad de Córdoba.
‐ 21 ‐
CAPITULO2
REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
‐ 23 ‐
2.1. MODIFICADORES METABÓLICOS
Los modificadores metabólicos son un grupo de compuestos que altera su fisiología y el
metabolismo del animal de un modo específico para mejorar la eficiencia productiva de carne, leche y, en
determinados casos, el rendimiento y composición de productos derivados del animal. El que su uso se
haya extendido durante las últimas décadas, evidencia del valor económico que representan para los
productores, unido al hecho de no tener un impacto negativo sobre el bienestar animal o la calidad y
seguridad del animal y sus productos (Beermann y col., 2005).
2.1.1. ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO
2.1.1.1. ESTRUCTURA, ORIGEN Y FUENTES DE CLA
El ácido linoleico conjugado (CLA) es un término colectivo que se utiliza para describir un conjunto
de isómeros posicionales y geométricos del ácido linoleico (ácido 9-cis, 12-cis-octodecadienoico; 18:2n-
6), ácido graso insaturado de 18 átomos de carbono con un doble enlace en la posición 9 y otro en la
posición 12 en conFiguración Cis. Existen diferencias entre el ácido linoleico y los CLA tanto en la
geometría de los dobles enlaces como en su posición. Los dobles enlaces presentes en el CLA son de
tipo conjugado (enlaces situados a una distancia de dos carbonos, de modo que haya cuatro carbonos
consecutivos que participen en dobles enlaces) y en distintas posiciones: 8-10, 9-11, 10-12 y 11-13, con
todas las combinaciones posibles de conFiguración (cis y trans). Aunque hay 28 isómeros diferentes
(Bhattacharya y col., 2006) de CLA, es el isómero cis-9,trans-11 el que se encuentra de forma natural en
los alimentos, siendo más del 90% del CLA ingerido a través de la dieta (Fritsche y col., 1999). La
complejidad estructural del CLA hace difícil identificar los isómeros concretos con actividad biólogica,
probablemente sean varios compuestos responsables, aunque las investigaciones señalan que las
formas cis-9,trans-11 y trans-10,cis-12 (Figura 2.1) son las más abundantes en la naturaleza y las que
‐ 24 ‐
presentan mayor actividad biológica, y constituyen alrededor del 80% del total de isómeros del CLA
presentes del forma natural en carne de rumiantes (Pariza y col., 2001). Estos isómeros pueden ser
sintetizados químicamente a partir del ácido linoleico o de fuentes ricas en éste ácido graso (aceite de
girasol, maíz o soja) por isomerización en agua alcalina e isomerización en propilen glicol (Christie y col.,
1997; Sehat y col., 1998). Son precisamente estos isómeros los más utilizados en los experimentos de
CLA llevados a cabo, y se ha comprobado que no existen diferencias entre las formas naturales y
sintéticas.
Figura 2.1: Estructura del ácido linoleico conjugado y de los isómeros CLA cis-9,trans-11 y trans-10,cis-12 (Modificada de Bauman y col., 1999)
Los primeros estudios científicos acerca del CLA fueron realizados en la década de los 70 después
de descubrir en carne de ganado vacuno una sustancia con efecto antimutagénico (Pariza y col., 1979).
Se demostró que un derivado parcial purificado de este extracto tenía la capacidad de prevenir los
tumores inducidos en ratón con 7-12 dimetil-benzoantraceno (Pariza y col., 1979). En estudios posteriores
se confirmó la actividad anticarcinogénica del CLA en modelos in vivo e in vitro (Pariza y Hargraves.,
‐ 25 ‐
1985; Ha y col., 1990; Ip y col., 1991). Posteriormente, se ha demostrado que el CLA también está
presente en otros alimentos como leche, productos lácteos, leche humana y tejido adiposo humano (Chin
y col., 1992; Joo y col., 2002).
Figura 2.2: Vías de hidrogenación del ácido linoleico conjugado en el rumen y los tejidos
(Griinari y Bauman, 1999)
El CLA se encuentra de forma natural en los tejidos corporales, principalmente en el tejido
adiposo, y/o secreciones (como la leche) rumiantes. Sin embargo, la proporción de CLA en la
alimentación de estos animales es baja, por lo que estos animales tienen la capacidad de transformar el
ácido linoleico en los isómeros de CLA. Como aparece representado en la Figura 2.2, el ácido linoleico es
trasnformado en CLA tras la isomerización bacteriana y/o la biohidrogenación (Griinari y Bauman, 1999)
‐ 26 ‐
llevada a cabo por la bacteria del rumen Butyrivibrio fibrisolvens. Un estudio reciente ha demostrado que
la síntesis endógena es responsable de más del 91% del cis-9,trans-11 presente en la grasa de la leche
de rumiantes (Kay y col., 2004). Aunque existe una estrecha relación entre la función del rumen y el
contenido de CLA en la leche y en los lípidos de los tejidos, se ha visto que sólo una pequeña cantidad se
absorbe en el rumen e intestino delgado. Se descubrió que de forma endógena la delta-9 desaturasa era
capaz de desaturar el ácido trans-vacenico y formar cis-9,trans-11-C18:2 (Bauman y col., 1999; Griinari y
col., 2000; Corl y col., 2001). Esta desaturación es la principal fuente de CLA en los lípidos de la leche y
de la carne (Knight y col., 2003). En la especie humana la principal fuente de CLA se debe a su ingestión
a través de la carne, la leche y sus derivados (Salminen y col., 1998; Adlof y col., 2000).
Aunque como se ha mencionado anteriormente, la principal fuente de CLA son los productos
derivados de rumiantes, el contenido de CLA está condicionado por las características fisiológicas y
genéticas propias de cada animal, el tipo de alimentación y factores tecnológicos relacionados con los
procesos de elaboración y conservación de los alimentos (Carnero, 2011). Los productos procedentes de
leche de oveja y/o cabra poseen mayor contenido de CLA que aquellos que proceden de leche de vaca.
El pavo es la fuente más importante de CLA entre los animales no rumiantes. Se han visto además,
cantidades de CLA en tejidos de animales menos comunes para el consumo humano, como la carne de
visón, búfalo y cebú. La concentración de CLA más alta (38 mg/g de grasa) se ha encontrado en el tejido
adiposo de los canguros (Schmid y col., 2006). En animales acuáticos, cerdos y aceites vegetales
también se ha encontrado CLA pero en pequeñas cantidades si se compara con los productos derivados
de los rumiantes. Alimentos procesados que derivan de productos lácteos de rumiantes son otra fuente
de CLA (Fristsche y col., 1999). Asimismo los quesos almacenados constituyen una fuente de CLA. Ha y
col. (1989) propusieron un posible mecanismo de formación de CLA: los radicales libres de oxidación del
ácido linoleico y linolénico durante el procesado pueden permitir la formación de CLA a través de la
protonación de estos radicales. La Tabla 2.1 muestra de forma resumida los alimentos que presentan un
contenido significativo de CLA.
‐ 27 ‐
En los humanos también se ha observado la presencia de CLA, en la leche y en el plasma
sanguíneo (Jahreis y col., 1999). En la leche, el isómero más frecuente es el cis-9,trans-11 cuyos niveles
fluctúan (0,15-0,22%; Jensen y col., 1998). Otro isómero observado en la leche humana es el trans-7,cis-
9, aunque en concentraciones iguales o inferiores a 0,03% de los lípidos totales. En el suero sanguíneo
humano el isómero cis-9,trans-11 llega a constituir hasta el 0,4-0,5% del total de los lípidos circulantes
(Salminen y col., 1998). De cualquier forma, los niveles de CLA determinados en humanos pueden ser
muy variables, ya que depende de la cantidad y tipo de carne que se consume, del tipo de alimentación
que reciben los animales de los que derivan estos productos cárnicos, de los hábitos de consumo
individuales y de la composición total de la dieta (Ackman y col., 1981).
Tabla 2.1. Contenido de CLA en los distintos alimentos (Modificada de Chin y col., 1992).
Alimento Total CLA
(mg/g de grasa) Alimento
Total CLA (mg/g de grasa)
Carne Aceites vegetales
Ternera 2,9 Girasol 0,4
Oveja 5,6 Maíz 0,2
Cerdo 0,6 Oliva 0,2
Pollo 0,9 Productos lácteos
Pavo 2,5 Leche homogeneizada 5,5
Conejo 1,1 Mantequilla 4,7
Animales acuáticos Yogurt natural 4,8
Salmón 0,3 Helado 3,6
Trucha 0,5 Queso de Burgos 6,7
Gambas 0,6 Queso Mozzarela 4,9
‐ 28 ‐
2.1.1.2. EFECTOS BIOLÓGICOS DEL CLA
2.1.1.2.1. CLA COMO ALIMENTO FUNCIONAL
Los alimentos funcionales son aquellos que proporcionan determinados efectos fisiológicos -no
nutricionales- potencialmente beneficiosos que pueden mejorar la salud de los consumidores y reducir el
riesgo de contraer enfermedades. Se caracterizan por presentarse en forma de alimento convencional
(lácteo, derivado de cereales, cárnico, etc.) y no como medicamento. Son, como su propio nombre indica,
alimentos que forman parte de una dieta o un modelo alimentario (Pascal, 1996). El reconocimiento del
CLA como componente funcional de los alimentos se produjo, como ya se ha comentado anteriormente,
de forma accidental, cuando se descubrieron sus propiedades antimutagénicas en la carne cocida de
bovinos (Pariza, 1999).
Resulta difícil cuantificar la ingesta de CLA ya que no se dispone de suficientes datos sobre el
contenido de los isómeros en los alimentos. Además, conviene ser precavido al establecer
recomendaciones genéricas en el consumo de cualquier nutriente, debido a la gran variedad de
situaciones en los consumidores. Así, se estima que el consumo de CLA en una dieta mixta promedio
occidental es muy variable, dependiendo de los hábitos de consumo de cada país, así como del
porcentaje de CLA aportado por las carnes de animales rumiantes. No obstante, se estima que el
consumo de CLA oscila entre 0,3-1,5 g/persona y día (Parodi, 1994). Algunos estudios han puesto de
manifiesto que dicho consumo sería superior en el hombre (0,212 g/día) respecto al registrado en la mujer
(0,151 g/día), dependiendo también del balance entre el consumo de productos de origen animal y
vegetal. Como se ha mencionado en el capítulo anterior, Australia es el país, dentro de aquellos en los
que se ha establecido el consumo de CLA, que presenta los valores más altos (1,5-1,8 g/día), mientras
que los países germanos, donde la carne consumida proviene principalmente del cerdo, muestran los
valores más bajos (0,5 g/día) (Fritsche y Steinhart, 1998). En Estados Unidos el consumo promedio es de
0,9-1,2 g/día (Hunter y Applewhite, 1986). No existen datos sobre el consumo de CLA en América Latina,
aunque se puede presumir que en países con alta tradición de consumo de carne bovina (como es el
‐ 29 ‐
caso de Argentina, Brasil y Uruguay) la ingesta promedio de CLA debería ser alta (sobre 1 g/día). En
Chile, Perú y Ecuador, ocurriría todo lo contrario, ya que la ingesta de carne está representada
principalmente por el consumo de aves (pollo, mayoritariamente), y por su tipo de alimentación
(principalmente de origen vegetal) no tendrían un aporte significativo de CLA. Schimd y col. (2006)
estimaron que la media total de CLA ingerido de fuentes naturales de CLA, se encuentra entre 95 y 440
mg, debido a diferencias entre países, hábitos alimenticios y diferente valor del CLA en los alimentos.
Ip y col., (1994) demostraron que utilizando bajas concentraciones de CLA se podía disminuir el
número de tumores mamarios en ratas. Para una rata de unos 350 g de PV el consumo diario preventivo
de CLA sería del orden de 0,015 g y, por tanto, una extrapolación directa a un ser humano de 70 kg
implicaría un consumo de 3 g/día de CLA. Sin embargo, y para calcular una ingestión equivalente de CLA
en el ser humano, sería probablemente más apropiado expresar estos datos utilizando el peso metabólico
(PV0,75). El consumo diario de CLA sería, de acuerdo con este cálculo, 0,8 g de CLA para ejercer un
efecto anticancerígeno en una persona de unos 70 kg de PV (Watkins y Li, 2003). Existen más autores
que se han arriesgado a establecer consumos teóricos recomendables de CLA para la especie humana,
sugiriendo 95 mg diarios como cantidad suficiente para mostrar efectos positivos en la reducción de
cáncer de pecho en mujeres. Sin embargo, Ritzenthaler y col. (2001) también basándose en resultados
con experimentos en animales, establecieron 440 mg/día para las mujeres para prevenir el cáncer de
mama. Para conseguir un efecto antilipogénico y lipolítico, Ip y col. (1994) y Pariza y col. (2001)
establecieron como dosis 15-20 g/día. Por tanto, podemos considerar que la ingesta diaria de CLA con
alimentos convencionales es insuficiente para que los potenciales efectos observados contra el cáncer,
ateroesclerosis y obesidad sean notables (Watkins y Li, 2003). Parece necesario establecer una cantidad
mínima efectiva de CLA que debería ser consumido diariamente por el ser humano para obtener un
efecto beneficioso sobre la salud.
Con el objetivo de aumentar el contenido de CLA en alimentos habituales, la suplementación de la
dieta del ganado vacuno lechero ha sido una de las estrategias más utilizadas. Consistía en aportar
pastos de tipo fresco suplementados con aceites vegetales ricos en ácido linoleico. Con esto se ha
logrado que la cantidad de CLA en la leche aumentara de forma significativa de 3 a 90-100 mg/g de
‐ 30 ‐
lípidos. Los investigadores han dejado claro que otros factores afectan de forma importante el contenido
de CLA en los rumiantes como son por ejemplo la suplementación o no de antibióticos, la actividad de la
enzima delta-9 desaturasa en el tejido mamario la cantidad de microbios del rumen del animal. Esta leche
con un mayor nivel de CLA, pueden ser utilizada además en la producción de variados derivados lácteos,
como quesos o yogurt. Resulta interesante destacar que las propiedades organolépticas de estos
derivados no se han visto modificadas, ni en consecuencia, tampoco la aceptabilidad por parte del
consumidor. Además, no se ha observado deterioro nutricional, ya que el aporte adicional de CLA no
afecta la oxidación del alimento natural.
También se ha aumentado el aporte de CLA en aves, en especial en pollos y también en pavos,
aunque la finalidad ha sido la de aumentar la vida media útil del animal en condiciones de conservación
en frío. En pollos se ha observado que la adición extra de CLA aumentaba la actividad de enzimas que
protegían del estrés oxidativo biológico como lo es el aumento de la actividad de las enzimas superóxido
dismutasa y glutatión peroxidasa del animal. Además, se ha observado que el CLA disminuyó la cantidad
de grasa abdominal del animal y aumentó el tejido magro del mismo. Adicionalmente en pollos
suplementados con CLA, este ácido graso se pudo incorporar al huevo en forma proporcional al
suplementado en la dieta del pollo, en especial en la yema del huevo donde se observó un aumento
significativo del CLA. Al igual que ocurre con la leche con altos niveles de CLA y sus derivados, las
características organolépticas no se vieron afectadas y, lo que es más interesante, aumentó el tiempo que
se pudo conservan refrigerados. Por otra parte, cuando las piezas de pavo eran irradiadas con un tipo de
radiación gamma para impedir la proliferación microbiológica, éstas normalmente aumentaron su
oxidación, pero cuando los pavos fueron suplementados con CLA, esta oxidación inducida por la
irradiación disminuyó significativamente, lo que permitió un mayor tiempo de conservación.
En Canadá y Estados Unidos se ha suplementado con CLA exitosamente carne de vaca y cerdos
con el objetivo de mejorar la eficiencia de alimento y al mismo tiempo, conseguir mayores niveles de CLA
para el consumo humano. En especial en Canadá se observó que es posible aumentar los isómeros cis-
9,trans-11 y trans-10,cis-12 de 3 a 14 mg/g de lípidos, de manera que el consumo corriente de carne
aporta 80 mg de CLA en una porción regular de 80 g de carne. El CLA se acumula principalmente en el
‐ 31 ‐
tejido adiposo y en el tejido graso intramuscular. Los estudios organolépticos no han mostrado diferencias
significativas en sabor, color y aroma de estos alimentos respecto a los no suplementados. Así, en cerdos
se ha observado que además de aumentar significativamente la cantidad de CLA, en sus productos
disminuye la cantidad de grasa subcutánea y aumenta de tejido magro, y es en este último dónde el CLA
se incorpora mayoritariamente. Todo esto supone un valor añadido a la carne de cerdo desde un punto
de vista comercial.
2.1.1.2.2. COMPOSICIÓN, CONCENTRACIÓN Y DOSIS
Los efectos del CLA dependen de la composición de la preparación y del contenido de los
isómeros principales cis-9,trans-11 y trans-10,cis-12. La diversidad e incluso las discrepancias en los
resultados obtenidos en los distintios estudios experimentales realizados pueden deberse en gran medida
a la diferente utilización de isómeros y dosis de CLA en ellos.
Las principales dosis utilizadas están entre 0,125 y 5% de la ración. La relación dosis-respuesta es
importante porque muchos estudios han encontrado un incremento de respuesta según se incrementa la
dosis de CLA (Delany y col., 1999; Ostrowska y col., 1999).
2.1.1.2.3. EFECTO DEL CLA SOBRE PESO Y COMPOSICIÓN CORPORAL
Probablemente uno de los efectos más estudiados del CLA ha sido el que este modificador
metabólico tiene sobre el peso y la composición corporal, que ha incrementado su interés en la especie
humana con el objetivo de controlar la obesidad. Este efecto ha sido estudiado en una gran variedad de
modelos animales, entre los que se encuentran ratón, rata, hámster y cerdo (Park y col., 1997; Deckere y
col., 1999; Ostrowska y col., 1999; Yamasaki y col., 2003; Bissonauth y col., 2006; Park y Pariza, 2007;
Ruth y col., 2008). Park y col. (1997) demostraron por primera vez que la adición de 0,5% de CLA (cis-
9,trans-11 y trans-10,cis-12; 50:50) en la dieta de ratones causaba disminución de la grasa corporal y
‐ 32 ‐
aumento de la masa muscular, sin modificar el peso corporal. La mayoría de los estudios que no
mostraban efectos sobre el peso corporal habían utilizado bajo contenido de CLA (≤ 0,5% en la dieta) o
bajas concentraciones del isómero trans-10,cis-12 (Wang y Jones, 2004). Estudios posteriores
confirmaron los resultados referentes a la grasa y masa muscular corporal, y se observó además, la
existencia de una pérdida de peso (West y col., 1998; Terpstra y col., 2002; Bhattacharya y col., 2006).
En un estudio realizado por West y col. (1998) en ratones alimentados con dietas de distinto contenido en
grasa (15 y 45% de la energía de la ración) y suplementadas con 1 o 2% de CLA, se observó una
disminución de la ingestión de energía y del depósito de grasa, además de una disminución significativa
del peso de los animales tras seis semanas de tratamiento. Estudios posteriores in vitro e in vivo,
mostraron que el isómero trans-10,cis-12 es el responsable de la reducción de grasa corporal (Pariza y
col., 2001; Park y Pariza 2007). Es en este modelo animal, el ratón, en el que se muestran los mayores
efectos observados del CLA.
Sin embargo, en cerdos, los resultados obtenidos son contradictorios, ya que ha podido
observarse incremento, disminución e incluso ausencia del efecto sobre la masa muscular, la grasa y el
peso corporal (O´Quinn y col., 2000; Thiel-Cooper y col., 2001; Wiegand y col., 2001; Ostrowska y col.,
2005; Martín y col., 2007; Larsen y col., 2009). Estas discrepancias pueden deberse probablemente, a las
diferencias en edades, pesos y genotipos de los animales entre los distintos experimentos que aparcen
en la literatura. Existen trabajos realizados en lechones (Bee, 2000b; Demaree y col., 2002 Smith y col.,
2002; King y col., 2004; Corino y col., 2009), cerdos en fase de crecimiento (Fernández -Fígares y col.,
2008, 2012; Rojas-Cano y col., 2011) cerdos de cebo (Thiel-Cooper y col., 2001; Joo y col., 2002;
Tischendorf y col., 2002; Larsen y col., 2009; Martín y col., 2007) y reproductores (Bee, 2000a; Rossi y
col., 2004). La mayoría de los trabajos consultados se han llevado a cabo en cerdos de genotipo magro,
sin embargo, los estudios realizados por nuestro grupo de investigación (Fernández-Fígares y col., 2008,
2012; Rojas-Cano y col., 2011) se han realizado, además, con animales de genotipo obeso como el cerdo
Ibérico.
Desde el año 2000 se han publicado más de 30 trabajos diseñados específicamente para valorar
la eficacia del CLA sobre la composición y el peso corporal en humanos (Plourde y col., 2008; Jutzeler,
‐ 33 ‐
2011), sobre todo asociados a estudios de sobrepeso y obesidad. En algún caso los participantes tenían
síndrome metabólico o eran diabéticos (Risérus y col., 2002; Norris y col., 2009), y sólo uno de los
estudios se realizó en niños (Racine y col., 2010). Los trabajos realizados con personas que presentan
sobrepeso u obesidad demostraron que la ingestión diaria de 3,4 g de CLA produce una disminución de la
masa grasa total sin afectar otros parámetros metabólicos, como el recuento eritrocitario o la cantidad de
masa magra. En los diversos experimentos clínicos que se han llevado a cabo, la cantidad de CLA
ingerida varía desde 0,7 a 6,8 g/día (Sneddon y col., 2008). Aunque los resultados no son tan
contundentes como en animales, la mayoría demuestran que el CLA no modifica el peso corporal ni el
índice de masa corporal (IMC), si bien, tiende a reducir la grasa corporal (Wahle y col., 2004;
Bhattacharya y col., 2006; Park y Pariza., 2007). Además, en la mayoría de los estudios en los que se
observó un efecto del CLA, concretamente el isómero trans-10,cis-12, dirigidos a disminuir el tejido
adiposo o a incrementar el tejido magro, los participantes estaban incluidos en un programa de
entrenamiento o realizaban una cantidad considerable de ejercicio (Blankson y col., 2000; Mougios y col.,
2001). De este modo, el ejercicio podría aumentar el efecto del CLA sobre la disminución de tejido graso
y/o el aumento de tejido magro. En la Tabla 2.1 se recoge los efectos principales causados por ambos
isómeros de CLA, cis-9,trans11 y trans-10,cis-12 sobre el peso y la composición corporal.
Estas diferencias observadas entre animales y humanos, pueden atribuirse entre otros factores, a
la baja dosis de CLA utilizada en los últimos. La dosis habitual en ratón es de 0,5% (peso/peso), lo que
correspondería en humanos a 56 g CLA/día/70 kg que son incluso menores que las empleadas en ratón
(Malpuech-Brugére y col., 2004). Otro factor influyente podría ser las diferencias metabólicas entre
especies (ratón, cerdos y humanos). El ratón presenta una elevada tasa de conversión lipídica, de ahí
que el CLA sea más efectivo en esta especie.
Algunos de los mecanismos sugeridos que podrían estar implicados en la reducción de grasa
corporal por el CLA son el incremento del gasto energético, incremento de la oxidación lipídica,
disminución del tamaño de adipocitos e inhibición de las enzimas involucradas en el metabolismo lipídico
y en la lipidogénesis (Wang y Jones, 2004; Bhattacharya y col., 2006; Park y Pariza, 2007).
‐ 34 ‐
2.1.1.2.4. CLA Y SU EFECTO SOBRE LA GRASA INTRAMUSCULAR Y EL PERFIL DE ÁCIDOS
GRASOS
La grasa intramuscular es un indicador de la calidad de la carne puesto que proporciona sabor,
consistencia, aroma y jugosidad a la misma (Fernández y col., 1999). Son varios los factores que influyen
en el engrasamiento de los animales como por ejemplo la raza o tipo genético, la edad y la alimentación.
La mayor parte de los trabajos coinciden en señalar que el nivel de grasa intramuscular o grasa de
veteado, ejerce un efecto positivo sobre las características organolépticas de la carne de cerdo (Devol y
col., 1988; Fernández y col., 1999; Mourot y Hermier, 2001). Existe un grado de correlación evidente entre
la cantidad de grasa intramuscular y diferentes parámetros de la calidad de la carne de cerdo, como son
la terneza, la jugosidad, el sabor y la palatabilidad.
Durante las últimas décadas, la industria porcina se ha encaminado a producir canales con alto
contenido en tejido magro y bajo contenido en tejido adiposo. Ya que el tejido adiposo es menos eficiente
que el magro, y su desarrollo es más tardío, el momento óptimo de sacrificio se ha situado a edades
tempranas, en el punto en el que la acumulación magra es máxima, pero antes de que se alcance un
engrasamiento excesivo. Pero dado que el contenido en grasa intramuscular se encuentra muy
relacionado con el engrasamiento total de la canal (Kouba y col., 1999), estas tendencias de los últimos
años en producción porcina han provocado una disminución del contenido de grasa intramuscular hasta
niveles por debajo del mínimo deseable. En la bibliografía se encuentran indicaciones que señalan que
para mantener los atributos de calidad es preciso que la carne contenga al menos un 2% de grasa
intramuscular (Bejerholm-Barton Gade, 1986). Devol y col. (1988) sugieren que un 2.5-3.0% de veteado
en la carne es un nivel mínimo para mantener unas características de terneza y jugosidad aceptables.
Pero no debemos olvidar que nuestras costumbres gastronómicas y la tradición en el procesado de la
carne hacen que en nuestra área de producción se prefieran carnes con un contenido claramente
superior, especialmente en carnes destinadas a la elaboración de derivados cárnicos. Recientes estudios
basados en paneles sensoriales, han demostrado que para el consumidor el porcentaje ideal de grasa
intramuscular en el Longissimus dorsi del cerdo sería de un 3% (Fernández y col., 1999; Mourot y
‐ 35 ‐
Hermier, 2001). La cantidad de grasa aun cobra más importancia en el caso concreto del jamón, producto
que goza de gran tradición e importancia en nuestro país, y que es importante que posea una cantidad
importante de grasa de infiltración. Además, por su condición de animal monogástrico, la producción
endógena de CLA es muy reducida (0,01-0,02% del total de ácidos grasos). La concentración de CLA en
grasa intramuscular oscila entre 0,6 y 2,8%, siendo muy superior a la concentración presente en la grasa
subcutánea (Joo y col., 2002).
Otro aspecto importante del CLA para destacar por el gran interés en producción animal es el
efecto del CLA en la saturación de la grasa y, por tanto, en la calidad de la carne. Algunos investigadores
han encontrado un aumento en el contenido de grasa intramuscular al incorporar CLA en el pienso
(Dugan y col., 1999; Wiegand y col., 2001; Joo y col., 2002; Wiegan y col., 2002), en cambio otros grupos
no han observado efecto alguno (Tischendorf y col., 2002).
Se ha demostrado experimentalmente que el CLA produce una marcada saturación de la grasa
(Thiel-Couper y col., 2001; Joo y col., 2002; Wiengand y col., 2002) debido al efecto que ejerce sobre la
actividad de la enzima -9-desaturasa (Lee y col., 1998), enzima responsable de la instauración de los
ácidos grasos producidos endógenamente, trasformando el ácido esteárico (C18:0) en oleico (C18:1). El
CLA actúa inhibiendo la actividad de esta enzima provocando una extensiva acumulación de ácidos
grasos saturados. Esta acumulación de ácidos grasos saturados puede no ser positiva para los intereses
del consumidor, debido a que las recomendaciones de la Organización Mundial de la Salud (OMS) con
respecto al consumo de grasas saturadas es que debería ser controlado y reducido, no siendo superior al
10% de la ingesta de grasas diaria por su asociación con hipercolesterolemia y problemas cardíacos
(MacRae y col., 2004). No obstante, este aumento en el grado de saturación de la grasa por las dietas
con CLA puede dar solución a problemas que se presentan en la manipulación industrial, apariencia y
estabilidad oxidativa de la carne de porcino (Joo y col., 2002; Wiegand y col., 2002) reduciendo así las
pérdidas económicas debidas a la peor calidad de la carne. La consistencia de la grasa depende
fundamentalmente de la proporción de triglicéridos que se encuentran en forma líquida o sólida a una
determinada temperatura, es decir, del número de instauraciones de las cadenas de ácidos grasos que
constituyen los triglicéridos. Cuando la proporción de ácidos grasos poliinsaturados es mayor, los
‐ 36 ‐
triglicéridos pueden permanecer líquidos a temperaturas de refrigeración e incluso de congelación y lo
ideal es que la grasa esté sólida a la temperatura de refrigeración, que es a la que normalmente se
conserva y manipula la carne fresca. De esta manera se facilita el picado, fileteado y transformación de
los productos. Una baja consistencia de la grasa provoca una oxidación excesiva con aparición de olores,
sabores anómalos y coloraciones amarillentas e incluso anaranjadas. Además, se produce una
ralentización en el proceso de secado porque la grasa fluida impide la migración de agua en el interior de
las piezas (Girard y col., 1989), problema muy frecuente en el sector del cerdo Ibérico y que conlleva un
encarecimiento del proceso.
2.1.1.2.5. CLA Y SU EFECTO SOBRE LA SALUD
Desde que Pariza y col. descubrieran el efecto antimutagénico del CLA en 1979, se han realizado
numerosos estudios tanto en animales como en seres humanos voluntarios para determinar las
propiedades fisiológicas del CLA. En la mayoría de ellos se han utilizado una mezcla de los dos isómeros
del CLA a los que se les atribuye mayor actividad biológica, cis-9,trans-11 y trans-10,cis-12. Se considera
que algunos efectos son específicos de un isómero determinado, mientras que otros se deben al efecto
sinérgicos de ambos. A continuación se describen los distintos efectos que el CLA parece ejercer sobre la
salud.
2.1.1.2.5.1. ANTICANCERÍGENO
Es probablemente uno de los efectos del CLA mejor documentado y que está respaldado por
estudios realizados en seres humanos. Posee capacidad anticancerígena tanto in vivo como in vitro, ya
que tiene la capacidad de modular las diferentes fases de la carcinogénesis conocidas como iniciación,
promoción y metástasis. Estas propiedades anticancerígenas del CLA se identificaron en la fase de
iniciación de un carcinoma cutáneo, en la cual se producía una alteración genética en un grupo de células
del tejido diana (Ha y col., 1987). Los estudios en cultivos celulares y en animales de experimentación
‐ 37 ‐
demuestran que el suplemento dietético con una mezcla isomérica de CLA 50:50 de cis-9,trans-11 y
trans-10,cis-12 (0,05 – 1%) durante o después de la fase de iniciación, inhibe el desarrollo de tumores de
glándula mamaria, piel y colon. El grado de efectividad de CLA en la prevención del proceso de
carcinogénesis está condicionado por la duración de dicho suplemento (Ip y col., 1991; Liew y col., 1995;
Futakuchi y col., 2002; Kelley y col., 2007).
Dentro de los diferentes tipos de cáncer existentes, parece ser más evidente su efecto sobre el
cáncer mamario. El primer estudio se llevó a cabo en mujeres finlandesas postmenopáusicas y demostró
una correlación negativa entre el consumo de CLA, proveniente de la leche y el queso de consumo
habitual en esta población, y el desarrollo de cáncer mamario (Aro y col., 2000). Sin embargo, en una
cohorte de mujeres postmenopáusicas en Holanda, se observó una débil asociación positiva entre la
ingesta de CLA (ingesta media de 0,2 g/día) y la incidencia de cáncer de mama (Voorrips y col., 2002).
Por otra parte, en una población de pacientes francesas con tumores de mama, no se encontró una
asociación significativa con los niveles de CLA en tejido adiposo mamario en relación con los controles, ni
tampoco con el riesgo de desarrollo posterior de metástasis, pero el intervalo de variación en las
concentraciones de CLA era estrecho (Chajes y col., 2002, 2003). Aunque este efecto anticancerígeno
del CLA también ha sido demostrado in vitro utilizando líneas celulares humanas de glándula mamaria,
cólon, próstata y estómago (Palombo y col., 2002; Tanmahasamut y col., 2004; De la Torre y col., 2005;
Beppu y col., 2006), estudios posteriores no han encontrado relación entre la ingesta de CLA y el riesgo
de padecer cáncer de mama (McCann y col., 2004; Haro y col., 2006). No es posible extraer conclusiones
definitivas acerca del papel del CLA como agente preventivo del cáncer a partir de los datos obtenidos en
estudios epidemiológicos. Es posible que las ingestas sean bajas y las diferencias entre ellas en las
distintas poblaciones insuficientes para establecer claramente una relación. Estudios realizados por
Pariza y col. (1999) demuestran que el isómero cis-9,trans-11 es el más activo como agente
anticancerígeno, no obstante, existen evidencias de una interacción sinérgica entre ambos isómeros cis-
9,trans-11 y trans-10,cis-12, en la inhibición de la carcinogénesis (Ip y col., 2000).
No se conoce aún el mecanismo de los efectos inhibidorios que ejerce el CLA sobre el cáncer,
pero las investigaciones apuntan a que podría estar relacionado con:
‐ 38 ‐
La regulación del ciclo celular mediante la inhibición de la replicación celular.
El incremento de la muerte celular mediante necrosis o apoptosis.
La alteración del metabolismo lipídico y su acción a nivel de la expresión de ciertos tipos
de mRNA que codifican para receptores de membrana involucrados en la transducción de
señales.
La traducción de receptores activados por proliferadores peroxisomales (PPARs)
(Sébédio y col., 1999).
2.1.1.2.5.2. RESISTENCIA A LA INSULINA / ANTIDIABÉTICO
Actualmente, la diabetes es una enfermedad que está en aumento y en la mayoría de los casos,
se trata de diabetes tipo 2, lo cual se caracteriza por su resistencia a la insulina (Aminot-Cilchrist y
Anderson, 2004). La obesidad es el principal factor de riesgo de padecer diabetes tipo 2; es posible que
las propiedades antidiabéticas observadas en el CLA sean consecuencia de los efectos beneficiosos del
mismo sobre el peso y grasa corporal. El primer estudio que muestra un efecto antidiabético de CLA se
llevó a cabo en ratas diabéticas Zucker suplementadas durante 2 semanas con una mezcla 50:50 de cis-
9,trans-11 y trans-10,cis-12 de CLA al 1,5%. Este estudio mostró una reducción significativa de la
concentración plasmática de insulina, triglicéridos, glucosa en ayunas y leptina (Belury, 2002a).
En otros estudios llevados a cabo en ratones que fueron alimentados con dietas suplementadas
con CLA, se observó que habían desarrollado resistencia leve a la insulina (DeLany y col., 1999;
Tsuboyama-Kasaoka y col., 2000) que puede estar relacionado con un cambio hacia una mayor
utilización de los ácidos grasos como combustible. El efecto antidiabético del CLA se ha confirmado
posteriormente, en otras especies de animales diabéticos (Ryder y col., 2001; Evans y col., 2002). No
obstante, estudios realizados en cerdos y ratones sanos, han puesto de manifiesto que el suplemento con
CLA incrementa la concentración plasmática de insulina y glucosa en ayunas (Belury, 2002a; Vermuri y
col., 2007).
‐ 39 ‐
Los efectos adversos del CLA, particularmente la resistencia a la insulina, han sido demostrados
también en humanos por autores como Larsen y col. (2003) y Riserus y col. (2002, 2004). Estos últimos
demostraron que tras el aporte de 3,4 g/día del isómero trans-10,cis-12 de CLA a obesos, la sensibilidad
a la insulina disminuyó y aumentó la concentración de glucosa en sangre en condiciones de ayuno. De
ahí que los efectos adversos sean atribuidos exclusivamente a este isómero. Posteriormente se ha
sugerido que los efectos adversos del isómero trans-10,cis-12 sólo se evidencian en individuos obesos,
pero no son importantes en personas sanas (Noone y col., 2002; Tricon y col., 2004b; 2005).
Asimismo, existen estudios en humanos que no muestran efectos de CLA sobre esta enfermedad,
como el realizado por Raff y col. (2008) o Pariza y col. (2001). Estos últimos, tras un experimento
realizado en 71 pacientes obesos durante 6 meses, no observaron cambios en la insulina plasmática y
niveles de glucosa en el grupo que recibió suplementos de CLA (3 g/día) en comparación con controles
que recibieron un aceite vegetal como placebo.
Los efectos sobre la resistencia a la insulina y la homeostasis de la glucosa observados en el CLA
son variados y dependen de la especie y del isómero utilizado (Kelley y Erickson, 2003).
El mecanismo propuesto mediante el cual el CLA ejerce efectos antidiabéticos fue a través de la
unión al receptor nuclear PPARγ. Éste regula la sensibilidad de la insulina activando la transcripción de
los genes involucrados en la señalización de la insulina, el consumo de glucosa y ácidos grasos, y en el
almacenamiento de los mismos (Brown y McIntosh, 2003; Moloney y col., 2007; Zhou y col., 2008).
2.1.1.2.5.3. ANTI-ATERATOGÉNICO
El efecto del CLA sobre la aterosclerosis presenta discrepancias entre animales y humanos. Estas
discrepancias pueden atribuirse a variaciones en el modelo experimental utilizado, especie, dosis de CLA,
duración de la suplementación, así como en la metodología usada para medir el grado de lesión en el
vaso sanguíneo.
‐ 40 ‐
Son principalmente tres los modelos animales en los que se ha estudiado el efecto del CLA en el
desarrollo de placas de ateroma y sobre el perfil lipídico: conejo, hámster y ratón. El conejo dejó de
utilizarse por ser poco adecuado como modelo de estudio, aún así los experimentos realizados en esta
especie muestran que el suplemento con una mezcla de isómeros cis-9,trans-11 y trans-11,cis-12, 50:50
reduce la deposición lipídica en la arteria aorta, además de revertir lesiones ya existentes (Lee y col.,
1994; Kritchevsky y col., 2000). La mayoría de los autores están de acuerdo en que hay un efecto
beneficioso del CLA sobre el perfil lipídico siendo el isómero responsable el trans-10,cis-12 (Evans y col.,
2002). Stachowska y col. (2010) demostraron recientemente que solo el isómero trans-10,cis-12 del CLA
desencadena la deslipidación de los macrófagos (disminución de la concentración de triglicéridos).
Aunque son pocos los estudios realizados en humanos para evaluar los efectos del CLA sobre la
salud cardiovascular son también contradictorios y difíciles de interpretar. Benito y col. (2001) no
observaron cambio alguno en los lípidos plasmáticos o en los niveles de lipoproteínas tras la ingesta de
3,9 g de CLA/día (11,4% de isómero cis-9,trans-11 y 14,7% de isómero trans-10,cis-12). Del mismo
modo, Smedman y Vessby (2001) demostraron que la ingesta de 4,2 g CLA /día durante 12 semanas no
afectó las concentraciones de lípidos o lipoproteínas séricas. Petridou y col. (2003) no observaron ningún
efecto sobre los niveles de triglicéridos, colesterol total y cHDL (colesterol unido a lipoproteínas de alta
densidad) en un estudio realizado durante 45 días en mujeres jóvenes sedentarias no obesas que
ingirieron 2,1 g de CLA/día. Sin embargo, en experimentos en los que el CLA se utilizó en un rango
comprendido entre 0,7-6,8 g/día, se comprobó que la dosis de 0,7 g/día disminuye el colesterol, los
triglicéridos y el colesterol en forma de lipoproteínas de alta densidad (HDL) en plasma, mientras que la
dosis de 6,8 g/día de CLA no modifica su concentración plasmática (Blankson y col., 2000; Mougios y
col., 2001; Smedman y Vessby, 2001; McLeod y col., 2004). Un estudio reciente ha puesto de manifiesto
que los isómeros cis-9,trans-11 y trans-10,cis-12 de CLA tienen un efecto opuesto sobre el perfil lipídico
en sujetos con peso normal. El suplemento con el isómero trans-10,cis-12 produce un aumento del
cociente entre cLDL + cHDL (colesterol unido a lipoproteínas de baja y alta densidad) y cHDL y, por tanto,
podría ejercer efectos adversos sobre los factores de riesgo cardiovascular. En cambio el suplemento con
el isómero cis-9,trans-11 disminuye tanto el colesterol total como el de cLDL, de ahí a que se le atribuyen
‐ 41 ‐
efectos beneficiosos (Tricon y col., 2004a; Haro y col., 2006).
Los mecanismos propuestos a través de los cuales el CLA podría actuar son diversos. El principal
se centra en el papel de CLA como ligando de PPAR. PPARα es un miembro de esta familia de
receptores nucleares que se expresa en hígado y modula el metabolismo lipídico. Algunos estudios
sugieren que el isómero cis-9,trans-11 posee mayor afinidad por el PPARα que el trans10,cis12; sin
embargo, existen otros estudios que demuestran que la acción de CLA es independiente de PPAR
(Peters y col., 2001; McLeod y col., 2004).
2.1.1.2.5.4. INMUNOMODULADOR
La habilidad del CLA para modificar la respuesta inmune al influir en la producción de factores
solubles y mediadores de la respuesta inflamatoria ha sido demostrada mediante numerosos estudios
llevados a cabo tanto en modelos animales (ratón, rata, cerdo, conejo y perro) como en humanos (Kelly
2001; Bhattacharya y col., 2006). El CLA parece ejercer un estímulo en la función humoral incrementando
la síntesis de IgA, IgG e IgM en los linfocitos del bazo de manera dosis-dependiente, y reduciendo la
función macrófaga al disminuir la síntesis de mediadores inflamatorios y/o enzimas inflamatorias (O’Shea
y col., 2004). El CLA también reduce los niveles de IgE (así como de PGE2 y IL-12), que desempeña un
papel crucial en las reacciones alérgicas de tipo I (Sugano y col., 1998). El primer estudio que llevaron a
cabo Wong y col. (1997) en ratones Balb/c machos de 8 semanas de edad que recibieron un suplemento
en la dieta de 0,1, 0,3 y 0,9% de una mezcla isomérica 50:50 de CLA durante 3 o 6 semanas. Este
estudio mostró que las dosis más altas incrementaron la proliferación esplénica frente a
phytohemagglutinin (PHA), además de incrementar la producción de interleucina-2; sin embargo, el CLA
no modificó la capacidad citotóxica. Estudios similares han demostrado, en una relación dosis
dependiente, que el CLA aumenta el nivel de linfocitos en el bazo de ratones y la secreción de IgG e IgM
por parte de estas células (Hayek y col., 1999). Ramírez-Santana y col. (2011) observó una mejora de la
síntesis de anticuerpos y una reducción de la capacidad proliferativa de esplenocitos en ratas alimentadas
con una dieta suplementada con el isómero cis-9,trans-en las primeras etapas de la vida.
‐ 42 ‐
Bontempo y col. (2004) estudiaron los efectos del CLA sobre las variables inmunológicas en
cerdas lactantes y su progenie y encontraron un incremento de la IgG en el calostro. Bassaganya-Riera y
col. (2001) realizaron estudios que se centraban en los efectos del CLA sobre las subpoblaciones
linfocitarias en cerdos y vieron un aumento de linfocitos (Tc) y células NK en sangre, independientemente
de la mezcla isomérica utilizada y el tiempo de suplementación. Otros estudios realizados en cerdos con
enfermedad inflamatoria intestinal mostraba que el suplemento con CLA (mezcla de los isómeros 50:50)
disminuía el daño inflamatorio en las mucosas y disminuye la expresión de citocinas proinflamatorias,
aumentando la concentración de diversas interleucinas en colon. También aumentaba la expresión de
PPAR-γ siendo más efectivo el isómero trans-10,cis12 que el cis-9,trans-11 (Bassaganya-Riera, 2001;
Hontecillas y col., 2002; Bassaganya y Hontecillas, 2006). Yamasaki y col. (2003) también encontraron
que el isómero trans-10,cis-12 es responsable del efecto del CLA sobre la producción de
inmunoglobulina. En los cerdos, la suplementación de CLA tuvo poco efecto en la función inmunológica y
las variables químicas medidas en sangre (Wiegand y col., 2011).
Es difícil atribuir propiedades específicas a cada uno de los isómeros de CLA, cis-9,trans-11 y
trans-10,cis-12. Como apuntaron Pariza y col. (1985), es muy probable que puedan también actuar de
forma sinérgica. No se dispone aún de suficiente información relativa al efecto particular de cada isómero
sobre el sistema inmunitario porque la mayoría de los estudios y experimentos clínicos llevados a cabo
han utilizado mezclas 50:50 de ambos.
El mecanismo exacto de acción de CLA sobre el sistema inmune no está claro, no obstante, no
hay duda de que existe un efecto sobre la respuesta innata y adaptativa.
2.1.1.2.5.5. HIPOCOLESTEROLÉMICO
Los diversos estudios realizados han permitido evidenciar la capacidad del CLA para disminuir los
niveles plasmáticos de colesterol, observando resultados muy similares a los que se obtienen con el uso
de ácidos grasos de la serie omega-3 (Nicolasi y col., 1997).
‐ 43 ‐
Se han llevado a cabo tanto estudios en modelos animales como experimentos clínicos en
humanos. En hámsters alimentados con dietas que aportan de 0,06 a 1,1% de CLA, con un aporte
además de 1,1% de ácido linoleico, se produce una disminución progresiva en relación a la dosis de CLA
y del colesterol-LDL pero no del colesterol-HDL. El hámster ha sido muy utilizado por su similitud con el
ser humano, aunque en los últimos años el modelo de ratón ha sido el más utilizado por su tendencia y
susceptibilidad a la formación de placas ateroscleróticas en estado avanzado (Mitchell y McLeod, 2008).
También el conejo ha sido utilizado como modelo experimental para el estudio del efecto del CLA sobre
sistema cardiovascular. Se ha visto que la adición de tan solo 0,5 g/día de CLA a una dieta semisintética
que aportaba 14% de grasa, producía una disminución significativa del colesterol-LDL y de los triglicéridos
plasmáticos, produciendo al mismo tiempo una disminución de la relación colesterol-LDL/colesterol-HDL y
de la acumulación de placas ateroscleróticas en los grandes vasos (Lee y col., 1994).
En humanos los resultados son contradictorios y difíciles de interpretar. Un experimento clínico
realizado recientemente en personas con peso normal puso de manifiesto que los isómeros cis-9,trans-11
y trans-10,cis-12 tienen un efecto opuesto sobre el perfil lipídico. Se vio que el isómero trans-10,cis-12
podría ejercer efectos adversos sobre el aparato cardiovascular, sin embargo, el isómero cis-9,trans-11
parece disminuir el colesterol en sangre y tendría, por tanto, un efecto beneficioso (Tricon y col., 2004,
Haro y col., 2006).
2.1.1.2.5.6. SALUD ÓSEA
El interés del efecto que el CLA pudiera ejercer sobre el tejido óseo radica en el hecho de que
podría asociarse con una pérdida en la masa ósea (Avenell y col., 1994; Ricci y col., 1998). Aunque no se
han encontrado pruebas convincentes de que el suplemento de CLA provoque dicha reducción de masa
ósea.
Se han realizado estudios en cultivos celulares, modelos animales y experimentos clínicos en
humanos. Los estudios in vitro han demostrado que el CLA no es citotóxico ni provoca apoptosis celular
‐ 44 ‐
en los osteoblastos, involucrados principalmente en la formación de hueso (Cusak y col., 2005). Estos
experimentos han puesto de manifiesto que la adición de CLA puede aumentar la velocidad de absorción
de calcio en las células y reducir la osteoclastogénesis (Jewell y col., 2003). En modelos animales se ha
observado un aumento de la masa ósea en rata y ratón (Kelly y col., 2003, 2004). Los estudios realizados
en animales complementan los estudios realizados in vitro en relación al aumento de la absorción de
calcio, lo que sugiere que éste puede ser uno de los mecanismos por los que el CLA aumenta la masa
ósea.
En seres humanos se han llevado a cabo experimentos clínicos para dilucidar los efectos del CLA
sobre el tejido óseo. El primer estudio se realizó en atletas masculinos en los que el suplemento de CLA
no provocó cambios significativos en los marcadores de renovación ósea y masa ósea (Kreider y col.,
2002). Resultados parecidos se obtuvieron en un estudio más reciente realizado en hombres sanos, en
los que la suplementación con CLA no modificó significativamente los marcadores del metabolismo óseo
(Doyle y col., 2005). En mujeres postmenopáusicas se observó una relación positiva entre el consumo de
CLA y los valores de densidad de masa ósea (Brownbill y col., 2005). La utilización del CLA podría servir
como terapia de reemplazo hormonal para tratar o prevenir la pérdida de masa ósea postmenopaúsica,
aunque son necesarios más estudios clínicos.
El mecanismo por el cual CLA actúa sobre el hueso es todavía un misterio. Con base en las
evidencias directas e indirectas disponibles sobre los efectos de CLA en el tejido óseo se pueden plantear
los siguientes mecanismos de acción:
Disminuión de la osteoclastogénesis (Rahman y col, datos no publicados).
Disminuión de los niveles de PGE2, lo que influye en los IGFs y IGFBPs y la formación de
hueso (Li y col., 1999).
Modificación de la reabsorción ósea PGE2-dependiente en presencia de PUFA (Pruzanski
y col., 1998; Suda y col., 1998).
Regulación de los niveles de leptina y a su vez reducir la resorción ósea, aumentando la
formación de hueso (Thomas y col., 2002; Theoleyre y col., 2004).
‐ 45 ‐
Reducción de las citocinas proinflamatorias (TNF-a, IL-1 e IL-6) disminuyendo así la
resorción ósea (Pacifici y col., 1989; Girasole y col., 1992).
2.1.1.3. MECANISMOS DE ACCIÓN DEL CLA
Hasta el momento se han planteado dos teorías mecanísticas a través de las cuales puede actuar
el CLA:
Supresión de eicosanoides a nivel del retículo endoplásmico (PPARγ-independiente)
Esta teoría involucra dos vías enzimáticas. Por una parte, la vía de síntesis de aminoácidos y por
otra, la conversión de aminoácidos a eicosanoides. La introducción de CLA a la dieta suprime la vía
biosintética de aminoácidos, ya que compite por las mismas enzimas utilizadas en la síntesis de
aminoácidos, como delta-6-desaturasa, elongasa y delta-5-desaturasa. Además, el CLA reduce la
producción de eicosanoides inhibiendo directamente las enzimas COX y LOX que se ubican en la
membrana del retículo endoplásmico (Banni y col., 2001).
Activación del PPARγ a nivel nuclear (PPARγ-dependiente)
El CLA es un activador de PPARγ. La regulación transcripcional mediada por PPARγ es un
proceso que implica: unión con el ligando, dimerización con el receptor retinoide-X-α, modificación de la
composición de co-represores y co-activadores y, finalmente, modulación de la expresión génica
(Bassaganya-Riera y col., 2002). Existen dos isoformas del PPARγ, la PPARγ1 y la PPARγ2 que difieren
entre ellas por 84 nucleótidos. PPARγ1 se expresa en linfocitos T y B, monocitos, células dendríticas y
epiteliales. La activación de este receptor nuclear disminuye la expresión de citocinas proinflamatorias ya
que antagoniza las actividades de NF-κB, c-Jun NH2 terminal quinasa (JNK) y la quinasa p38. Además,
inhibe la activación de macrófagos mediante el antagonismo de STAT-1 y NF-κB (Desreumaux y col.,
‐ 46 ‐
2001). Estudios in vitro han demostrado que CLA es capaz de activar PPARγ. Por otra parte, en cerdos
alimentados con una dieta rica en CLA se ha mostrado un incremento en la producción de PPARγ
(Bassaganya-Riera y col., 2002; Hontecillas y col., 2002).
2.1.2. BETAÍNA
2.1.2.1. ESTRUCTURA
La betaína o trimetilglicina es un compuesto zwitterión –compuesto químico eléctricamente neutro
pero que tiene cargas formales positivas y negativas en diferentes átomos de su estructura- derivado
aminoacídico de la glicina, presente en la mayoría de los organismos vivos. Es un subproducto natural de
la remolacha azucarera (Robinson y Jones, 1986) que se extrae a partir de la melaza (Craig, 2004).
Además de ser muy abundante en la remolacha azucarera, se encuentra en elevadas concentraciones en
otros alimentos tales como el salvado de trigo (1.330 mg/100g), germen de trigo (1.241 mg/100g),
espinaca (600 mg/100g), remolachas (250 mg/100g) y pan de trigo (200 mg/100g), aunque los valores
exactos varían según las fuentes y métodos de cocción (Zeisel y col., 2003). También está presente en
bacterias (Le Rudulier y col., 1984), en organismos marinos (Clarke y col., 1994) e incluso en vertebrados
superiores (Law y Burg, 1991).
Por su estructura química (Figura 2.3), la betaína cumple un doble papel en la fisiología del animal.
Por otra parte como donante de grupos metilo en la transmetilación de la homocisteína y por otra como
osmolito en el mantenimiento de un balance electrolítico estable dentro de las células mejorando el
balance de agua (Klasing y col., 2002). De esta forma mejora la eficacia de la osmorregulación, pudiendo
aumentar la energía disponible para el crecimiento (Moeckel y col., 2002). El potencial ergogénico de la
betaína fue propuesto por primera vez por Borsook y col. (1952) después de que pacientes con
poliomelitis experimentaran mejorías de fuerza y resistencia general tras tomar suplementos de betaína-
guanadinoacetato. En caballos que realizan ejercicio hasta la fatiga (Warren y col. 1999) se observaron
mejoras en hidratación y en el metabolismo del lactato. Posteriormente, estudios realizados en humanos
‐ 47 ‐
han mostrado mejoras en el metabolismo anaeróbico (Armstrong y col., 2008), lo que ha dado lugar a
varios estudios para investigar el efecto ergogénico de la betaína sobre fuerza.
Figura 2.3: Estructura química de la betaína (Danisco Animal Nutrition)
Debido a su papel como donador de grupos metilo y su función como aminoácido, la betaína
interviene en el metabolismo proteico y energético. En nutrición animal, la betaína se conoce como
“modificador de la canal” por su efecto lipotrópico y promotor del crecimiento. Ha sido ampliamente
empleada en piensos para mejorar el rendimiento de la carne magra en cerdos y pollos (Eklund y col.,
2005), lo que ha llevado a algunos investigadores a estudiar este potencial de la betaína para mejorar la
composición corporal en humanos. A pesar de los estudios realizados, los resultados son aún limitados y
contradictorios, así que son necesarios más experimentos y ensayos clínicos que permitan identificar los
efectos de la betaína sobre el rendimiento y la composición corporal, en primer lugar, y en segundo lugar
el potencial fisiológico y los mecanismos de acción que expliquen los resultados obtenidos.
‐ 48 ‐
2.1.2.2. INGESTIÓN Y ABSORCIÓN
En humanos adultos la media ingerida de betaína está entre 100–400 mg/día (Cho y col., 2006).
La betaína ingerida con los alimentos presenta una biodisponibilidad similar a la que se ingiere a través
de suplementos dietéticos, aunque esta última se absorbe con mayor rapidez que la primera,
aproximadamente un 33% más rápido (Lever y Slow, 2010). La betaína es filtrada en el riñón y
reabsorbida a la circulación, una vez aquí puede ser catabolizada vía transmetilación o ser captada y
almacenada en los tejidos como osmolito orgánico (Lever y col., 2004).
El catabolismo de la betaína se produce en la mitocondria renal y hepática. Tras una serie de
reacciones, ocurre la transmetilación de la homocisteína a metionina vía betaina-homocisteína S-
metiltransferasa con subsiguiente generación de di-metilglicina (Williams y Schalinske, 2007). Mediante
esta vía catabólica se conserva la metionina para la síntesis de proteína, se lleva a cabo la
desintoxicación de homocisteína y se suple del donador de grupos metilo universal, S-adenilmetionina
(Figura 2.4).
Figura 2.4: Ruta metabólica del catabolismo de la betaína. Orn (orntina), Arg (arginina), GAA
(guanidinoacetato), Gly (glicina), SAM (S-adenosilmetionina), PE (fosfatidiletanolamida), PC
‐ 49 ‐
(fosfatidilcolina), SAH (S-adenosilhomocisteína), DMG (dimetilglicina), Ser (serina), DAG (diacilglicerol).
Adaptado de Cholewa y col., 2014.
En reposo, las concentraciones de betaína en plasma son más elevadas en el hombre que en la
mujer, encontrándose entre 20 y 70 mmol/l, y es principalmente eliminada vía metablólica (Lever y col.,
1994; Lever y Slow, 2010; Schwahn y col., 2003). Su excreción urinaria que es mínima y no se
correlaciona con las concentraciones plasmáticas (Lever y col., 1994). Una parte substancial de betaína
puede perderse a través del sudor (Craig y col., 2010). Los niveles de betaína plasmática aumentan en
relación a la dosis ingerida (Atkinson y col., 2009)
2.1.2.3. DOSIS
Los efectos clínicos y ergógenicos de la betaína han sido investigados en dosis que van desde los
500 a los 20.000 mg/día (Schwab y col., 2002; Craig, 2004; Atkinson y col., 2008; Abdelmalek y col.,
2009; Bloomer y col., 2011). Algunos investigadores sugieren que 2.5–5 g/día es suficiente para
conseguir un aumento en los niveles de betaína en plasma (Schwab y col., 2002; Bloomer y col., 2011), y
con 2.5 g se puede observar un efecto positivo en el rendimiento (Armstrong y col., 2008; Hoffman y col.,
2009; Lee y col., 2010; Apicella y col., 2013; Pryor y col., 2012; Cholewa y col., 2013).
Basándose en resultados hematológicos en ratas, Hayes y col. (2003) estableció que un
suplemento diario de betaína en la dieta con una relación de proteína/betaína 15:1 (aproximadamente 12
g/día) se puede considerar un rango seguro para el consumo humano.
2.1.2.4. FUENTES DE BETAÍNA
La betaína es producida por las plantas y bacterias para de hacer frente a estrés debido a
salinidad y temperatura (Kuznetsov y Shevyakova, 1997; Xing y Rajashekar, 2001). La Tabla 2.2 recoge
‐ 50 ‐
el contenido en betaína de algunos de los ingredientes más utilizados en la elaboración de piensos
empleados en producción animal.
La remolacha azucarera contiene niveles excepcionalmente elevados de betaína que se acumula
en un subproducto del procesado de la misma, la melaza condesada soluble. Se encuentra en cantidades
considerables en el trigo y su salvado (Westberg, 1951) y el trigo. Además, la betaína está disponible
como aditivo para piensos y se presenta en forma purificada. Las formas más popular en las que se
Tabla 2.2. CONTENIDO DE BETAÍNA EN INGREDIENTES PARA PIENSOS (MODIFICADA DE Eklund y col., 2003)
Ingrediente Betaína (mg/kg)
Referencia bibliográfica
Melaza soluble condensada 116000 Eklund y col. (Resultados sin publicar)
Trigo 1400 Virtanen citado por Kidd y col. (1997)
3960 Chendrimada y col. (2002)
Guisante 160 Steinmetzer (1972)
Harina de cacahuete 2520 Chendrimada y col. (2002)
Salvado de trigo 2675 Westberg (1951)
Harina de trigo 2675 Westberg (1951)
4980 Chendrimada y col. (2002)
Harina de alfalfa 3175-3850 Westberg (1951)
1770 Chendrimada y col. (2002)
Harina de pescado 400 Virtanen citado por Kidd y col. (1997)
1180 Chendrimada y col. (2002)
Avena 590 Virtanen citado por Kidd y col. (1997)
Cebada 730 Virtanen citado por Kidd y col. (1997)
Harina de colza Indetectable Virtanen citado por Kidd y col. (1997)
Maíz Indetectable Westberg (1951)
Harina de gluten de maíz Indetectable Chendrimada y col. (2002)
Harina de sésamo Indetectable Chendrimada y col. (2002)
Harina de soja Indetectable Virtanen citado por Kidd y col. (1997)
Indetectable Chendrimada y col. (2002)
‐ 51 ‐
presenta son anhídrido de betaína, betaína monofosfato y clorhidrato de betaína; es importante tener en
cuenta las propiedades químicas de cada una de estas formas y sus posibles efectos en la alimentación
animal. El clorhidrato de betaína presenta baja solubilidad en agua (UE-Safety Data Sheet, 1999a, b, c)
comparada con las otras dos formas, reduciendo de esta manera la capacidad osmolítica de la betaína.
Sin embargo, provoca una disminución del pH del estómago lo que potencialmente mejora la
digestibilidad de nutrientes de un modo diferente de la de betaína. Ya que estas formas purificadas de
betaína se originan de la extracción de la melaza, ésta también se sugiere como fuente de betaína, sin
embargo, ésta muestra un alto contenido en minerales que puede interferir con la capacidad osmolítica de
la betaína (Eklund y col., 2005).
2.1.2.5. FUNCIONES FISIOLÓGICAS Y NUTRICIONALES
2.1.2.5.1. BETAÍNA COMO SUSTANCIA OSMÓTICA ACTIVA
Los osmolitos son sustancias especialmente importantes en situaciones de deshidratación puesto
que ayudan a minimizar las pérdidas de agua en contra de un gradiente osmótico persistente (Klasing y
col., 2002). En vertebrados, la betaína ejerce un efecto osmoprotector al acumularse en orgánulos
celulares así como en células expuestas a estrés iónico y osmótico, sustituyendo a los iones inorgánicos
y protegiendo enzimas y membranas celulares de la inactivación por estos iones (Petronini y col., 1992).
La acumulación de betaína está estimulada por la hiperosmolaridad externa presente en las células
renales (Bagnasco y col., 1986; Nakanishi y col., 1990; Moeckel y Lien, 1997) y macrófagos (Warskulat y
col., 1995; Zhang y col., 1996). También actúa como osmolito orgánico en embriones (Dawson y Baltz,
1997) y células del hibridoma en ratón (Oyaas y col., 1995), en las células del epitelio sinoidal (Weik y
col., 1998; Wettstein y col., 1998), en las células estrelladas del hígado de ratas (Peters-Regehr y col.,
1999) y en fibroblastos de embrión de polluelos (Tramacere y col., 1984; Petronini y col., 1992).
Es sabido que los cambios en el volumen de agua en células afecta la actividad de las mismas, así
que mantener la homeostasis en el contenido en agua celular es un factor importante especialmente en
‐ 52 ‐
aquellas células expuestas a diferentes presiones osmóticas. Haussinger (1998) observó que un ligero
cambio en el volumen de las células del hígado lleva a un estado más anabólico, mientras que con una
pérdida de agua puede ocurrir lo contrario. Un ejemplo es el de las células endoteliales, que por estar
sometidas a un medio hiperosmótico, experimentan una interrupción en la proliferación celular y
fenómenos de apoptosis (Alfieri y col., 2002). Se ha demostrado que la betaína promueve la proliferación
celular y ejerce efectos anti-apoptóticos en un medio hiperosmótico (Alfieri y col., 2002) al mismo tiempo
que reduce el gasto energético de las bombas de iones (Moeckel y col., 2002). Este ahorro energético
podría ir dirigido a promover la proliferación celular.
Las células intestinales son otro caso de células expuestas a variaciones osmóticas ya que el
contenido luminal del intestino es hiperosmótico en relación al plasma sanguíneo (Mongin, 1976).
Además, los procesos de digestión y absorción de nutrientes necesitan de mecanismos de protección
osmolítica para el correcto intercambio de agua, y pequeños solutos como iones, nutrientes,
macromoléculas, etc. Por ser la betaína un osmolito orgánico importante en el control de la presión
osmótica en el interior de las células epiteliales intestinales (Hochachaka y Somero, 1984) es posible que
facilite el mantenimiento del balance de agua y el volumen celular intestinal y, de este modo, la secreción
de enzimas digestivas. Además, la betaína estimula la proliferación celular en el tejido intestinal, lo que
podría ampliar el epitelio que constituye la pared intestinal y proporcionar una mayor superficie para la
absorción de nutrientes. Estos efectos parecen ser más pronunciados en aquellos animales expuestos a
trastornos osmóticos tales como la coccidiosis.
2.1.2.5.1.1. INFLUENCIA EN EL DESARROLLO DEL TRACTO GASTROINTESTINAL Y EN LA
DIGESTIBILIDAD DE NUTRIENTES
Diferentes estudios realizados ponen de manifiesto el papel que desempeña la betaína en el
crecimiento y desarrollo de la función intestinal al aumentar la capacidad de retención de agua de las
células intestinales (Kettumen y col., 2001a), promoviendo cambios en la estructura del epitelio intestinal
en pollos (Remus y Quarles, 2000) y en cerdos (Siljander-Rasi y col., 2003) mejorando su fortaleza.
‐ 53 ‐
Además, la capacidad osmolítica de la betaína puede tener un efecto positivo sobre la digestibilidad de
los nutrientes por la estrecha relación existente entre el proceso de digestión, absorción y el estado del
epitelio intestinal (Eklund y col., 2005).
Estudios realizados en cerdos por Wiegand y Kirchgessner (1981) muestran que la betaína es
altamente digestible, concretamente la betaína de melazas solubles condensadas que es completamente
absorbida en el tracto gastrointestinal, y tres cuartas partes de la betaína absorbida es retenida. Se
desconoce aún si la digestibilidad y la absorción de la betaína dependen de la fuente de procedencia y de
su nivel en la dieta. No obstante, según Kettumen y col. (2001b) la absorción intestinal de betaína
procedente de trigo es más baja si la comparamos con la absorción de su forma purificada. Cromwell y
col. (1999) comprobaron que su adición a dietas ricas en betaína, causó efectos positivos sobre el
crecimiento de cerdos en fase de acabado. Luego existen diferencias de disponibilidad entre la betaína
purificada y la de origen natural. Por otro lado, existen evidencias de que la tasa de absorción de la
betaína es dosis-dependiente, reduciendo la actividad de las células musculares son elevadas dosis de
betaína. Puchala y col. (1998) comprobaron que una infusión con bajo nivel de betaína se asociaba con
una elevada capacidad de absorción intestinal, como sugería la mayor actividad observada en las células
del músculo intestinal; mientras que la infusión de elevados niveles de betaína disminuía la actividad de
las células musculares del intestino, lo que podría disminuir la capacidad de absorción a nivel del
duodeno.
Estas propiedades osmolíticas de la betaína favorecen el crecimiento celular intestinal así como la
supervivencia y mejora de la actividad celular. Por tanto, la betaína puede influir potencialmente en la
digestibilidad de los nutrientes. Esta afirmación se pone de manifiesto en estudios llevados a cabo en
cerdos destetados, en los que la adición a la dieta de betaína mejoró en un 4.2% la digestibilidad total de
materia seca y un 6.4% la digestibilidad de proteína bruta (Xu y Yu, 2000). Asimismo, aumentó la
actividad celular intestinal como indica el aumento de la actividad de enzimas proteolíticas en un 52%. Se
ha observado también un aumento en la digestibilidad de la grasa en cerdos (Overland y col., 1999;
Eklund y col., datos no publicados), que podría atribuirse a un aumento en la secreción biliar (Overland y
col., 1999). Es más, las sales biliares conjugadas requeridas para la digestión de la grasa están
‐ 54 ‐
constituidas principalmente por glicina (Souffrant, 1991). Debido a que la captación de betaína es en parte
un co-transporte dependiente de Na+ (Kettunen y col., 2001b) se han observado cambios en el transporte
de iones a través del epitelio intestinal en cerdos alimentados con dietas suplementadas con betaína
(Kettunen y col., 2001a), que puede tener un efecto positivo en la absorción de minerales en cerdos
destetados. En rumiantes, la supplementación con betaína mejora la fermentación microbiana de la
fracción de fibra nuetro-detergente, lo que se refleja en un aumento en la producción ruminal de ácidos
grasos volátiles (Wiedmeier y col., 1992).
2.1.2.5.1.2. INFLUENCIA EN EL TEJIDO MUSCULAR
Se ha demostrado que la betaína se acumula en las células del tejido muscular de cerdos
(Matthews y col., 2001c) alterando la capacidad de retención de agua de este tejido, lo que podría
aumentar el peso corporal y de la canal (Esteve-García y Mack, 2000), pudiendo afectar a la calidad de la
carne.
Estudios realizados sugieren la existencia de una relación estrecha entre la suplementación de
betaína en la dieta y el pH de la carne de cerdos (Matthews y col., 2001c). Tras el sacrificio, existe una
bajada de los niveles de pH inducidos por una acumulación de ácido láctico. La suplementación de
betaína en la dieta retrasa esta caída de pH causando una reducción en la acumulación de ácido láctico
que afecta la calidad de la carne. El retraso en la bajada de los niveles de pH resulta en una reducción de
la desnaturalización de proteínas que, a su vez, disminuye la pérdida de agua en la carne. Por otro lado,
la betaína puede afectar el pH de la carne a través de su efecto promotor del contenido de creatina
muscular (Zhan y Xu, 1999). La creatina fosfato se almacena en el interior de las células musculares, lo
que da lugar a una mayor capacidad de amortiguación de cambios de pH y por tanto un retraso
postmorten en la caída del mismo, como ya se ha mencionado, debido a la acumulación de ácido láctico
(Pettigrew y Esnaola, 2001).
‐ 55 ‐
El efecto de la betaína como osmolito, no se centra exclusivamente en el tracto gastrointestinal o
el músculo. La betaína también compensa el estrés osmótico causado por electrolitos y urea en las
células del riñón de conejos (Yancey y Burg, 1989). Asimismo, protege las células del hígado de la
apoptosis inducida por los ácidos biliares (Graf y col., 2002).
2.1.2.5.2. BETAÍNA COMO DONADOR DE GRUPOS METILO
La betaína se origina comúnmente a partir de la oxidación de colina y está provista de tres grupos
metilo. Vía S-Adenosilmetionina puede participar en reacciones de transmetilación para la síntesis de
numerosas sustancias como son la creatina, fosfatidilcolina, carnitina, adrenalina, metil purinas y amino
ácidos metilados (Kidd y col., 1997). En la Figura 2.5 se puede apreciar una visión general del
metabolismo del grupo metilo.
Figura 2.5: Metabolismo del grupo metilo. CH3 (grupo metilo), SAM (S-adenosilmetionina), BHMT
(betaína-homocisteína metiltransferasa), THF (tetrahidrofolato), CH2O (grupo formaldehído). Adapatada
de Eklund y col., 2005.
‐ 56 ‐
La transferencia de un grupo metilo resulta en la transformación de betaína a dimetilglicina que
aún contiene dos grupos metilo. Estos grupos metilo se pueden separar mediante la oxidación en forma
de fragmentos de un carbono (C1). Durante esta reacción la dimetilglicina es degradada a sarcosina y por
último a glicina. Los fragmentos de un carbono provenientes de la dimetilglicina o de otras fuentes como
el ácido fórmico o grupos carboxilo de otros ácidos orgánicos, son utilizados para sintetizar grupos metilo
de novo por la vía tetrahidrofolato. Estos fragmentos de un carbono se unen a la molécula de
tetrahidrofolato y son transferidos a la homocisteína mediante la encima tetrahidrofolato-metiltrasferasa.
La función de la betaína como donador de grupos metilo es imprescindible para la conversión de
homocisteína en metionina (Garrow, 1996; Olthof y Verhoef, 2005).
El principal papel de la metionina en el ciclo de transmetilación es el de transferir grupos metilos de
diferente origen a moléculas receptoras. Sin embargo, la metionina es requerida también para la síntesis
de proteínas al ser un amino ácido esencial y un precursor de la cisteína. Del mismo modo, la colina,
precursor de la betaína, es requerida para un gran número de funciones fisiológicas como en la síntesis
de membrana o la formación de acetilcolina. Además, la oxidación de la colina se puede considerar un
paso limitante en la velocidad de síntesis de betaína ya que, como observaron Siljander-Rasi y col.
(2003), la adición de colina a la dieta en cerdos no es tan eficiente como la de betaína.
El papel que desempeña la betaína como donante de grupos metilo, puede ser útil para sustituir
funcionalmente parte de la colina y la metionina adicionadas a la dieta. Ambas son utilizadas como
aditivos para piensos en ganadería, por lo tanto, existe un interés económico en la reducción de la adición
de colina y metionina a la dieta mediante su sustitución por betaína. De este modo, se podría cubrir el
requerimiento de grupos metilo por parte del animal y, además, mejorar la disponibilidad de colina y
metionina.
En general se acepta que las dietas para rumiantes suministran bajos niveles de donadores de
grupos metilo porque la colina (Neill y col., 1979; Dawson y col., 1981) y betaína (Mitchell y col., 1979)
presentes en la dieta son degradados por los microorganismos del rumen. Estudios en ovejas (Xue y
Snoswell, 1985a; Snoswell y Xue, 1987) muestran que los grupos metilo lábiles, como los suministrados
‐ 57 ‐
por la molécula de betaína, no parecen ser un requerimiento básico para la mejora del rendimiento debido
a la actividad observada en la enzima betaina-homocisteína-metiltransferasa (BHMT) que cataliza el
transporte de grupos metilo desde la betaína a la homocisteína. No obstante, otros autores como
Fernández y col. (1998) han observado que la adición de betaína en la dieta para corderos causa una
mejora positiva en el rendimiento del animal.
En cerdos (Emmert y col., 1998; Wang y col., 2000b) y aves de corral (Xu y Zhan, 1998; Wang
2000) se ha demostrado que tras la administración de suplementos de betaína la actividad de la enzima
BHMT aumentaba significativamente, lo que indica que estas especies sí tienen un requisito específico de
grupos metilo. En cerdos (Emmert y col., 1998) se observan niveles más altos de BHMT en comparación
con otras especies (Sidransky y Farber, 1960) lo que podría indicar que la especie porcina es altamente
dependiente de grupos metilo lábiles, como los proporcionados a través de la suplementación con
betaína. Con todo, la betaína no puede aparentemente sustituir a la colina y la metionina en las dietas
destinadas a cerdos (Alaviuhkola y Suomi, 1990; Matthews y col., 2001a), mientras que en aves de corral
(Sakomura y col., 1996) sí parece posible.
Diferentes estudios llevados a cabo en pollos de engorde revelan que es posible la sustitución de
la metionina suplementaria de la dieta por betaína (Pesti y col., 1979; Virtanen y Rosi, 1999). Florou-
Paneri y col. (1997), sugieren que es posible reemplazar solamente una parte de la metionina por betaína
(30-80%). Sin embargo, otros autores (Schutte y col., 1997; McDevitt y col., 2000) indican que la betaína
no puede sustituir a la metionina adicionada en la dieta. Puede ser que la medida en que la metionina
puede ser sustituida por la betanía dependa también del contenido en cisteína de la dieta. Firman y
Remus (1999) observaron que existía un efecto sinérgico entre cisteína y betaína con mejoras en la
conversión del alimento de polluelos de engorde cuando ambos aditivos se empleaban de forma
combinada en la dieta.
En el caso de la colina, Lowry y col. (1987) estimaron que un 25% de la misma se puede
suministrar como betaína cuando se trata de aves de corral. Incluso se observó que la betaína puede ser
‐ 58 ‐
más eficiente en la metilación de la homocisteína y la creatinina que la propia colina no sólo en pollos de
engorde (Stekol y col., 1953) sino también en cerdos (Siljander-Rasi y col., 2003).
2.1.2.6. EFECTOS DE LA SUPLEMENTACIÓN CON BETAÍNA
2.1.2.6.1. COMPOSICIÓN CORPORAL Y CALIDAD DE LA CANAL
La metionina y la cisteína son aminoácidos esenciales para la síntesis de proteína. En estudios
realizados en pequeños rumiantes (Puchala y col., 1995), terneros (Puchala y col., 1998) y aves de corral
(García y col., 2000) se observó un aumento en la concentración plasmática de estos aminoácidos
sulfurados tras la suplementación con betaína en la dieta suministrada. Consecuentemente, esta mejora
de la disponibilidad de aminoácidos sulfurados por la adición de betaína a la dieta puede tener un efecto
positivo sobre el crecimiento (McDevitt y col., 2000). Sólo en terneros se registró, además, un aumento de
la concentración de glicina en plasma, que reveló una completa desmetilación de la betaína
incrementando la disponibilidad de grupos metilo que son requeridos para las distintas funciones
metabólicas. Del mismo modo, la adición de betaína a dietas con un adecuado contenido en grupos
metilo, mejoró la ganancia de peso en aves de corral (Virtanen y Rosi, 1995; Wang, 2000) y en cerdos
(Wang y Xu, 1999; Feng y Xu, 2001). Si bien, otros autores (Schutte y col., 1997; Fernández-Fígares y
col., 2002) no encontraron mejora en el rendimiento del animal.
Por otro lado, resultados obtenidos por diferentes autores revelan cambios en la composición
corporal por la adición de betaína a la dieta de aves de corral (Esteve-García y Mack, 2000; Zou y Lu,
2002; Xing y col., 2011), cerdos (Fernández-Fígares y col., 2002; Huang y col., 2007; Rojas-Cano y col.,
2011) y corderos (Fernández y col., 2000) dirigidos hacia un aumento en el tejido magro y disminución en
el tejido graso. Se ha demostrado que la betaína ejerce un efecto más marcado sobre el crecimiento
muscular bajo condiciones de estrés nutricional y metabólico (Fernández-Fígares y col., 2002). En cerdos
estos cambios se han visto claramente reflejados en la composición de la canal, es ésta la razón de que
la betaína se denomine con frecuencia “modificador de la canal”. La disminución del contenido en grasa
‐ 59 ‐
de la canal se manifiesta por una reducción en el espesor del tocino dorsal (Cadogan y col., 1993;
Matthews y col., 2001c) y un aumento en el tejido magro que se puede atribuir a un aumento en la
longitud de la canal (Matthews y col., 2001a; Rojas-Cano y col., 2011)
Con el propósito de evaluar los efectos del uso de suplementos de betaína sobre la composición
corporal y el gasto energético en humanos, se han llevado a cabo experimentos clínicos en hombres
jóvenes (Del Favero y col., 2011), pacientes obesos y sujetos sedentarios sin anormalidades en hígado,
riñón o tiroides con una restricción calórica de 500 kcal/d (Schwab y col., 2002). La suplementación con
betaína en la dieta no mejoró la composición corporal en ninguna de las situaciones planteadas.
La ingestión de betaína puede modificar y mejorar la composición corporal a través de la
estimulación de la secreción de hormona del crecimiento (GH) y aumentando la señalización del receptor
de insulina y de IGF-1. Además, la betaína puede directamente aumentar la secreción de IGF-1 en el
hepatocito (Lee y col., 2006). Dado que la GH señaliza directamente la lipolisis en el adipocito (Dietz y
Schwartz, 1991), que la betaína induce su secreción y que, como consecuencia, aumenta la síntesis de
proteína mediada por la IGF-1, éste podría ser el mecanismo a través del cual la betaína podría mejorar la
composición corporal (Cholewa, 2013).
Algunos autores atribuyen a la capacidad de la betaína como donador de grupos metilo, el efecto
que ésta ejerce sobre la composición corporal. De este modo provee de grupos metilo para la formación
de trimetil-lisina necesaria para la biosíntesis de carnitina (Borum y Broquist, 1977). Distintos autores
(Wang y col., 2000; Feng y Xu, 2001; Zhan y col., 2006) han observado un aumento de carnitina
intramuscular tras la suplementación con betaína, lo que sugiere un aumento en la carnitina
palmitoiltransferasa I requerida para el transporte de ácidos grasos a través de la membrana mitocondrial,
orgánulo en el que tiene lugar la β-oxidación de los mismos (Stryer, 1988). Sin embargo, Huang y col.
(2009) obtuvieron una disminución de la expresión génica y de la actividad de esta enzima tras la
suplementación con betaína a cerdos de acabado.
Otro mecanismo de acción a través del cual la betaína disminuye el contenido en tejido adiposo
puede ser la disminución en la síntesis de triglicéridos. La lipoproteína lipasa (LPL) ha sido identificada
‐ 60 ‐
como la enzima limitante en el catabolismo de quilomicrones y lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL;
very low-density lipoprotein), además incrementa el tejido adiposo con ácidos grasos libres (Bonen y col.,
2006). En pollos de engorde alimentados con una dieta suplementada con betaína durante 66 días, se
observó una disminución de la expresión de ARNm de la proteína de unión al ácido graso adiposo (A-
FABP), de LPL y de la enzima ácidograso sintasa (FAS; Xing y col., 2011). Además, la betaína disminuyó
además el porcentaje y cambió el patrón de metilación del promotor CpG (regiones donde existe una gran
concentración de pares de citosina y guanina enlazados por fosfatos). Todos estos resultados sugieren
que la betaína puede mejorar la composición corporal mediante una reducción en el proceso de
lipogénesis.
La acetil-CoA carboxilasa (ACC) es un importante regulador de la síntesis de ácidos grasos y la
enzima limitante de la lipogénesis (Scott y col., 1981). Huang y col. (2008) observaron una reducción de la
actividad de ACC y FAS, y de en la expresión del ARNm de FAS en cerdos de engorde alimentados con
dietas suplementadas con betaína durante 42 días. Por lo tanto, la administración de suplementos de
betaína puede mejorar la capacidad de las células adiposas para extraer, captar y sintetizar triglicéridos a
partir de FFA. En seres humanos también existe una relación entre la metilación de CpG, la expresión del
gen de LPL y la diferenciación de la célula adiposa (Noer y col., 2006), no obstante, esta hipótesis aún no
se ha demostrado por lo que se requieren más trabajos de investigación.
2.1.2.6.2. ENERGÍA Y UTILIZACIÓN DEL NITRÓGENO
Añadir betaína a la dieta ha producido mejoras en el índice de conversión del alimento desde un
2.8% en gallinas ponedoras (Zou y Lu, 2002) hasta un 7.9% en cerdos (Xu y col., 1999a, c). Una
explicación podría ser una utilización más eficiente de la proteína de la dieta para la deposición de tejido
magro. Esto se ve apoyado por una reducción de los niveles de N-urea en sangre de hasta un 47% en
cerdos (Xu y col., 1999a), un aumento en la retención de N y una reducción en los requerimientos de
energía metabolizable (Eklund y col., 2005). Los niveles de N-urea en sangre están correlacionados con
la tasa de renovación proteica. Según Coma y col. (1995), la retención de N se maximiza cuando la
‐ 61 ‐
producción de urea es reducida al mínimo. Estos resultados sugieren que la suplementación con betaína
podría reducir la tasa de renovación proteica, lo que resultaría en una mayor retención de N que a su vez
tendría un efecto positivo sobre el contenido en tejido magro de la canal. Tanto en novillos (Loest y col.,
1999) como en cerdos (Webel, 1994), la adición de betaína a la dieta aumentó la retención de N. Una
menor tasa de renovación de las proteínas supuso una menor excreción urinaria de N en cerdos (Yu y Xu,
2000). Teniendo en cuenta que los procesos de descomposición y síntesis que conlleva la renovación de
proteína corporal y la excreción de N, suponen un gasto extra de energía de mantenimiento del animal, la
betaína puede reducir las necesidades energéticas para el mantenimiento del animal, como observaron
Campbell y col. (1997) y Schrama y col. (2003) en cerdos alimentados con dietas suplementadas con
betaína.
Se encontró una reducción en el peso de las vísceras de aves de corral y cerdos (Esteve-García y
col., 2000; Fernández-Fígares y col., 2002) al ser alimentados con dietas enriquecidas con betaína. Dado
que estos órganos están asociados con una elevada tasa de renovación proteica (Blaxter, 1989), la
reducción en la energía requerida para el mantenimiento está justificada. Aunque estas mejoras en la
disponibilidad de energía también pueden explicarse por las propiedades osmolíticas de la betaína ya
descritas en este capítulo.
2.1.2.6.3. SENSIBILIDAD A LA INSULINA Y REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA
La administración de betaína en ratones con una obesidad inducida a través de la alimentación,
provocó mayor sensibilidad a la insulina (Kathirvel y col., 2010) y un aumento en las vías de señalización
de la insulina en adipocitos aislados (Wang y col., 2010). Como se ha mencionado anteriormente la
betaína reduce la retención de grasa en animales, sin embargo, este efecto no se ha observado en
experimentos clínicos realizados en humanos (Schwab y col., 2002) alimentados con una dieta
hipocalórica (- 500 kCal/día) y suplementada con 6 g de betaína/día. Puede que la reducción calórica del
25% enmascarara los posibles efectos de la betaína sobre el gasto energénico. Otros estudios realizados
para evaluar los efectos de la suplementación con betaína sobre el rendimiento de ejercicio en humanos
‐ 62 ‐
también muestran la ausencia de efectos sobre el gasto energético o la composición corporal (Hoffman y
col., 2011; Trepanowski y col., 2011). Llama la atención la correlación inversa observada entre las
concentraciones plasmáticas de betaína y el índice de masa corporal (IMC) en varios experimentos
clínicos llevados a cabo, uno de ellos en 531 pacientes con síndrome coronario agudo (Lever y col., 2011)
y otro en 7.074 individuos (Konstantinova y col., 2008). En este último, las concentraciones plasmáticas
de betaína se relacionaban inversamente, además, con la grasa corporal. Sin embargo, las
concentraciones de colina en plasma se asociaron positivamente a estos dos parámetros evaluados.
Como ya se mencionó en apartados anteriores, la betaína es precursor de S-adenosilmetionina, el
más importante y necesario donador de grupos metilo, que interviene en reacciones bioquímicas que
incluyen la metilación de ADN e histonas, importante para el control epigenético de la expresión génica.
Esto se debe a la modificación de marcadores epigenéticos (Niculescu y col., 2006; Ziesel, 2009;
Mehedint y col., 2010), como la betaína y su presursor la colina, que podrían influenciar el metabolismo
energético y la sensibilidad a la insulina.
Existen estudios que sugieren que una dieta alta en betaína (u otros donadores de grupos metilo
como colina o metil-folato) pueden alterar la metilación de zonas diferencialmente metiladas (DMR) y
citosinas ricas en regiones CpG en el ADN (Cooney y col., 2002; Waterland y col., 2003). Hay evidencias
científicas que sugieren que una alteración de la regulación epigenética de la expresión genética juega un
papel en el desarrollo de diabetes tipo II (Gilber y Liu, 2012; Intine y Sarras, 2012).
Otro caso es el del gen pancreático duodenal homeobox 1 (PDX-1), importante para el desarrollo
de los islotes pancreáticos y que tiene múltiples sitios CpG, regiones promotoras y potenciadoras que
están hipermetiladas en aquellos pacientes con diabetes tipo II en comparación con los no diabéticos.
Esta hipermetilación se asoció con una reducción de la expresión génica (Yang y col., 2012).
En otro estudio en el que se utilizó células de los islotes pancreáticos de pacientes con Diabetes
tipo Mellitus, la expresión de PGC-1α (codificado por el gen PPARGC1A o coactivador alfa del receptor
activador de la proliferación de peroxisomas gamma) se redujo un 90% y el promotor del gen PPARGC1A
fue hipermetilado (dos veces) en aquellos islotes procedentes de pacientes diabéticos frente a los no
‐ 63 ‐
diabéticos. Esta hipermetilación se correlacionó con una reducción en la secreción de insulina en estos
pacientes (Ling y col., 2008).
2.1.2.7. FACTORES QUE AFECTAN LA EFICACIA DE LA BETAÍNA
Algunos autores (Haydon y col., 1995; Matthews y col., 1998; García y col., 2000; Lawrence y col.,
2002) destacan la discrepancia encontrada en los efectos que la betaína ejerce sobre distintos
parámetros evaluados, tales como el crecimiento, rendimiento, composición de la canal en relación al
contenido en proteína y grasa, etc.
Un factor importante que influye en los agentes lipotrópicos, como es la betaína, es el grado inicial
de obesidad del individuo/animal. Los efectos deberían ser más evidentes en animales más grasos
(García y col., 2000). En un estudio realizado en cerdos machos castrados, que se asocian con una
mayor capacidad para la deposición de grasa que las cerdas jóvenes, se observó una reducción en el
contenido del tocino dorsal de 18.1%, mientras que en cerdas jóvenes la reducción de este depósito
graso fue solo del 10,8% (Wang y Xu, 1999). Según muestra el estudio realizado por Lawrence y col.
(2002), la suplementación de betaína en la dieta disminuyó el espesor del tocino dorsal sólo en cerdos
machos castrados. Por el contrario, la adición de betaína mejoró el índice de conversión del alimento en
cerdas jóvenes y no en machos castrados (Cera y Schinckel, 1995). Esto puede deberse al hecho de que
los cerdos machos castrados muestran en general una tasa de renovación proteica reducida en
comparación con la observada en cerdas jóvenes, por lo tanto, la betaína no es tan eficiente en la mejora
de la ganancia de tejido magro en aquéllos (Eklund y col., 2005).
Estudios realizados (Xu y col., 1999a, c; Yu y col., 2001) muestran que la ganancia media diaria y
el índice de conversión del alimento es mayor en cerdos en crecimiento o en fase de acabado que en
lechones destetados. Por esta razón, la betaína podría ser más eficiente en animales de mayor edad.
Schrama y col. (2003) entre otros autores (Matthews y col., 1998, 2001b; Zou y col., 2002), ha
demostrado que la respuesta metabólica a la suplementación con betaína puede depender del tiempo.
‐ 64 ‐
Las condiciones ambientales tales como el estrés que supone para los animales el modo en que
son alojados puede influir en el efecto de la suplementación con betaína, así, Kitt y col. (1999) observaron
una tendencia a mejorar el peso de la paleta de cerdos acinados alimentados con dietas enriquecidas con
betaína. Sin embargo, Matthews y col. (2001) obtuvieron una reducción en pérdida de agua en la carne
de cerdos alojados sin acinamiento, mientras que esta pérdida aumentó en cerdos acinados. En cerdos
normalmente alojados, los niveles de N-urea presente en suero eran reducidos, mientras que en cerdos
acinados y alimentados con dietas enriquecidas con betaína los valores de N-urea en suero eran
elevados.
Ya sean factores ambientales como el estrés u otros factores inherentes al propio animal como
son la edad, sexo y genotipo, parecen ser la respuesta a las discrepancias observadas,
modulando/regulando en cierto modo el modo de acción de la betaína.
2.2. CERDO IBÉRICO
2.2.1. DEFINICIÓN, ORIGEN, DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA Y SITUACIÓN ACTUAL
Según la definición de la Asociación Española de Criadores de Ganado Porcino Selecto Ibérico
Puro y Tronco Ibérico (AECERIBER), se emplea la denominación de cerdo Ibérico para hacer referencia a
una “agrupación racial” autóctona del sudoeste de la Península Ibérica (Extremadura, Andalucía y el
Alentejo portugués, principalmente) derivada de un cerdo común arcaico mediterráneo.
Aunque los zootecnistas mantienen que las razas porcinas actuales tienen su origen
principalmente en tres de los cuatro troncos porcinos primitivos admitidos (Figura 2.6), estudios
filogenéticos recientes (Larson, 2005) realizados con ADN mitocondrial, sugieren que el origen de las
razas actuales de cerdo está en un jabalí primitivo asiático. Éste se habría extinguido desde su zona de
origen a Eurasia, dividiéndose en dos poblaciones primitivas: suidos asiáticos y suidos europeos. De los
europeos habrían derivado los cerdos célticos y los cerdos mediterráneos y de estos últimos se originaría
el cerdo Ibérico.
‐ 65 ‐
Esta agrupación racial se distingue por unas características morfológicas comunes que lo hacen
único en su especie (Clemente y col., 2006) como son su perfil subcóncavo, una conFiguración del hueso
del lagrimal intermedio y unas proporciones cefálicas también intermedias entre los cerdos asiáticos y
célticos actuales (Laguna Sanz, 1998); además de un conjunto de características funcionales y
fisiológicas que describiremos con más profundidad en los próximos apartados: elevada rusticidad,
marcado carácter adipogénico, alto nivel de veteado en los músculos y baja susceptibilidad al estrés. A
pesar de compartir estas características comunes existe una heterogeneidad interna que estructura esta
agrupación en una serie de estirpes y líneas basadas principalmente en el color de la capa o piel (Figura
2.6).
Tipo de variedad Estirpe o línea Color de la capa o
piel Origen
NEGRA11
Entrepelado Negro Valle de los
Pedroches (Córdoba)
Lampiño
del Guadiana
Negro pizarra
Vega del Río del Guadiana (Badajoz)
De la Serena Comarca de la Serena (Badajoz)
COLORADAS2 2
Retinto Extermeño
Valdesequera
Rojo muy oscuro Extremadura Villalón
Silvela
Censyra
Rubio Cano campiñés
Cano sobre piel negra Sur de Andalucía Dorado gaditano
Manchado de Jabugo Piel negra con capa
manchada y rojo sobre cano
Sierra de Huelva
Torbiscal De rojo a retinto Raza de nueva creación en Toledo
Figura 2.6. Estirpes y líneas de cerdo Ibérico en España (MAPA, 2007)
1 Estirpe Entrepelado, como ejemplo de variedad de capa negra. 2 Estirpe Manchado de Jabugo, como ejemplo de variedad de capa colorada
‐ 66 ‐
Destacar la estirpe Silvela, de la variedad Retinta Extremeña, por ser la línea a la que pertenecen
los animales experimentales utilizados en este trabajo de Tesis Doctoral, procedentes todos ellos de la
empresa Sánchez Romero Carvajal, Jabugo, S.A. (Granada de Riotinto, Huelva).
Como se ha mencionado anteriormente, la raza Ibérica presenta un carácter rústico que es una
consecuencia de la adaptación al bosque mediterráneo autóctono: la dehesa. En ella deben soportar
periodos de escasez de alimento y condiciones climatológicas adversas. Como resultado, este animal
está dotado de la capacidad para conseguir un óptimo aprovechamiento de los recursos naturales que
ofrece la dehesa. Desde un punto de vista productivo, esta rusticidad presenta una serie de
inconvenientes como son bajos índices de transformación del alimento, mala conformación cárnica, baja
prolificidad y bajo índice de crecimiento, entre otros. Por esta razón, y para mitigar estos bajos índices
productivos, el cerdo Ibérico se ha cruzado con otras razas porcinas principalmente con la raza Duroc.
La distribución geográfica del cerdo Ibérico acredita una singular asociación biótica de interacción
con el ecosistema de la dehesa (Laguna Sánz, 1998), ecosistema surgido de la acción moduladora del
hombre y de la explotación ganadera sobre el antiguo bosque mediterráneo. Se caracteriza por la
presencia de numerosas especies herbáceas y arbustivas, junto a varias especies arbóreas del género
Quercus (Quercus rotundifolia, Quercus ilex o encina, Quercus suber o alcornoque y Quercus lusitanicus
o quejigo, principalmente).
Según la información proporcionada por la Subdirección General de Estadística del Ministerio de
Agricultura, Alimentación y Medio Ambiente (MAGRAMA, 2014), el censo porcino cuenta con un total de
25.412.346 animales en España, de los cuales el 2.175.022 corresponden a la raza Ibérica. El 97% se
reparte entre las comunidades autónomas de Castilla y León, Andalucía y Extremadura (con 655.160,
542.785 y 919.246 cabezas, respectivamente. Figura 2.7).
‐ 67 ‐
Figura 2.7: Mapa de distribución del porcino Ibérico (MAGRAMA, mayo 2014)
Por provincias, el 37,4% se concentra en la provincia de Badajoz (813.732 animales). El censo
Ibérico nacional se distribuye en Segovia (105.298 animales) y Salamanca (421.633 animales) con el 4,8
y 19%, respectivamente, mientras que en Andalucía el mayor número de animales se distribuye en las
provincias de Huelva, Sevilla y Córdoba, que poseen un 6, 6,8 y 7%, respectivamente, del porcino Ibérico
nacional (Figura 2.8).
Figura 2.8: Distribución geográfica de la población de cerdo Ibérico, en miles de animales
(MAGRAMA, mayo 2014)
‐ 68 ‐
La evolución del censo porcino Ibérico en nuestro país ha sido muy desigual en los últimos 60
años. Esta agrupación racial llegó a ser la más importante dentro de la actividad ganadera española,
constituyendo el 40% del total del censo porcino (García-Valverde, 2007); desde entonces ha sufrido dos
crisis importantes. La primera de ellas, en la década de los 70, fue debida a una serie de factores
socioeconómicos y sanitarios que casi llevan a la desaparición total de la raza Ibérica, y aunque no fue
así, provocó la pérdida considerable de variabilidad genética y la desaparición de varias estirpes. La
última crisis que ha sufrido este sector parece estar relacionada con la situación de crisis global en la que
nos encontramos, y derivó en una caída del censo porcino Ibérico del 20%.
El aumento de la producción de cerdos ibéricos, tanto en régimen extensivo (Ibérico tradicional “de
bellota”, terminado en montanera) como en condiciones intensivas (Ibérico “de cebo”, engordado hasta
alcanzar el peso comercial adecuado a base de pienso), alcanzó su máximo en 2007 dando lugar a una
situación de sobreoferta y desequilibrio del mercado que ocasionó una disminución de los precios. La
caída afectó en mayor medida a los productos de mayor calidad, que son los derivados del cerdo Ibérico
de bellota.
En general, los últimos datos registrados apuntan a un aumento del censo total de cerdos Ibéricos
con respecto a las cifras de años anteriores. Superando así los datos de efectivos registrados desde
2010, año en el que se evidencia el primer descenso importante en el sector Ibérico después de varios
años de crecimiento continuo. Aunque desde noviembre de 2013 se asiste a una nueva recuperación en
este sector alcanzando cifras históricas con un aumento del censo, no solo global, sino también de las
cerdas reproductoras de un 11,3 y 12,4%, respectivamente, según las estadísticas del MAGRAMA de
2014 con respecto a las cifras de 2010.
En España existen dos sistemas de producción, con dos tipos genéticos claramente diferenciados:
cerdo Ibérico y cerdo blanco. En ambos casos es muy importante la calidad, si bien es cierto que la
producción de cerdo Ibérico se ha orientado a la obtención de productos de alta calidad con el
aprovechamiento de los recursos de la dehesa, principalmente la bellota, y sacrificando a los animales
‐ 69 ‐
con pesos elevados (140-160 kg) obteniéndose, por tanto, un mayor contenido de grasa intramuscular
rica en ácido oleico (Buxadé y Daza, 2001). De modo que es básico ofertar productos bien diferenciados
que permita mantener la competitividad para la comercialización de los mismos. Según los datos
registrados en 2014, España con un 18% ocupa el segundo lugar en la Unión Europea en el censo total
de ganado porcino, siendo superada exclusivamente por Alemania que representa el 19,1% (Figura 2.9).
Figura 2.9: Censo del ganado porcino en la Unión Europea (MAGRAMA, mayo 2014)
A nivel mundial, España es la cuarta potencia productora (después de China, EEUU y Alemania).
En cuanto al ganado porcino sacrificado anualmente en la Unión Europea en 2014, se estima en torno a
249.516.000 cabezas con un peso canal total de 22.250.000 toneladas, lo que supone un incremento del
1,2% respecto a la producción del año 2013. Mientras las importaciones comunitarias de carne porcina
durante el año 2014 se incrementaron en un 4,3% respecto al año 2013, las exportaciones durante el año
2014 fueron inferiores a las de 2013 del orden de un 5% (datos provisionales; MAGRAMA, 2014). Los
mercados asiáticos han sustituido a Rusia como principales destinatarios, dirigiéndose las exportaciones
comunitarias en 2014 a China (24,2%), Hong Kong (13,8%), Japón (10,4%), Corea del Sur (7,3%) y
Filipinas (6,7%) principalmente. Todos estos datos son un reflejo de la importancia del sector porcino en
‐ 70 ‐
nuestro país y, más concretamente, del sector Ibérico por el gran reconocimiento de la calidad que sus
productos tienen a nivel internacional.
2.2.2. PERFIL METABÓLICO
El perfil metabólico del cerdo Ibérico difiere en gran medida del que presentan las razas porcinas
mejoradas o convencionales, altamente seleccionadas para alcanzar elevados ritmos de crecimiento y de
deposición de proteína (Nieto y col., 2002; Barea y col., 2007; García-Valverde, y col., 2007). En general,
el cerdo Ibérico se caracteriza por tener un marcado perfil lipogénico y un ritmo de crecimiento lento.
Desde hace varias décadas, y debido a la carencia de información disponible sobre las
necesidades nutricionales del cerdo Ibérico, el grupo de investigación del Departamento de Fisiología y
Bioquímica de la Nutrición Animal ha dedicado parte importante de su actividad científica a la
caracterización de este animal en términos de metabolismo energético y proteico, así como de la base
fisiológica que explique las singularidades de esta raza. Los diversos trabajos publicados por este grupo
de investigación (Lachica y col., 2000; Nieto y col., 2002, 2003; Rivera-Ferre y col., 2005, 2006; Barea y
col., 2006, 2007; Fernández-Fígares y col., 2007; García-Valverde y col., 2008; Rodríguez-López y col.,
2010; Conde-Aguilera y col., 2011; Aguinaga y col., 2011; Aguilera y Nieto, 2012; González-Valero y col.,
2012; González-Valero y col., 2015), en las distintas etapas de crecimiento del cerdo Ibérico, han
permitido generar una base científica en torno a los aspectos metabólicos y establecer recomendaciones
en cuanto a ingesta de energía y nutrientes en las distintas fases de su ciclo productivo.
2.2.2.1. METABOLISMO PROTEICO
La deposición proteica en el genotipo Ibérico presenta un valor considerablemente menor en
comparación con el de las razas convencionales o mejoradas. Así se pone de manifiesto en la Figura
2.10, que recoge los resultados obtenidos en experimentos de alimentación y sacrificios comparados
‐ 71 ‐
realizados por el grupo de investigación en distintas fases productivas del cerdo Ibérico: crecimiento
(Nieto y col., 2002), crecimiento-cebo (Barea y col., 2007) y acabado (García-Valverde y col., 2008)
comparadas todas ellas con un experimento realizado por Quiniou y col. (1996) en cerdos de raza
mejorada (Large-White).
Figura 2.10: Composición de la ganancia de peso del cerdo Ibérico en distintas fases de su ciclo
reproductivo, comparado con una raza convencional (Aguilera y Nieto, 2012)
Diferentes autores (Campbell y col., 1984; 1985; Kyriazakis y Emmans, 1992) han llegado a la
conclusión de que en el cerdo Ibérico en crecimiento, el proceso de deposición proteica parece ser
dependiente del aporte de proteína cuando dicho aporte es inferior al óptimo por unidad de energía
suministrada. Dicha relación ha sido descrita mediante una función lineal que alcanza un punto a partir
del cual la formación de proteína corporal depende fundamentalmente de la ingesta energética.
Otro objeto de estudio de numerosas investigaciones ha sido el efecto del contenido proteico de la
dieta, así como el nivel de alimentación sobre distintos parámetros que definen la calidad de la canal, o
sobre el peso de los tejidos viscerales del cerdo Ibérico. Rivera-Ferre y col. (2006) llevaron a cabo un
‐ 72 ‐
estudio en cerdas de raza Ibérica frente a cerdas Landrace con un PV de aproximadamente 25 kg
alimentadas con dos dietas cuyo contenido en proteína (formulada según el concepto de proteína ideal)
difería, siendo de 120 y 160 g/kg de MS para la raza Ibérica y Landrace, respectivamente. Empleando
técnicas de balance de nitrógeno, se observó que al ofrecer a las cerdas Ibéricas una ración con un
contenido en proteína que excedía sus necesidades, la retención de nitrógeno era significativamente
menor, lo que lleva a una pérdida importante de la eficacia metabólica. Para conseguir una máxima
deposición proteica en el cerdo Ibérico en fase de crecimiento (15-50 kg de PV) se han de emplear dietas
con un contenido en proteína bruta de 129 g/kg de MS (Nieto y col., 2002). Aún en estas condiciones, la
retención diaria de proteína fue de 74 g, muy inferior a la observada en animales de razas mejoradas, que
pueden llegar a alcanzar en fase de crecimiento unos valores medios superiores a 170 g/día.
Para cerdos Ibéricos en fase de crecimiento-cebo (50-100 kg de PV) se observó que aumentaba la
retención de proteína, alcanzando de máxima 71 g/día al disminuir a 95 g/kg de MS su contenido en la
dieta (Barea y col., 2007). Valores igualmente inferiores que los obtenidos con razas mejoradas, que
pueden alcanzar hasta 148 g/día de deposición proteica (Campbell y col., 1991). García-Valverde y col.
(2008) realizó un estudio para conocer la tasa de deposición de tejido magro en cerdos Ibéricos en fase
de acabado (100-150 kg de PV). Los valores máximos registrados fueron de 84 g/día frente a los 148
g/día observados en cerdos castrados Large-White×Landrace de 100 a 160 kg de PV (Galassi y col.,
2004).
Esta baja capacidad para la deposición de proteína presente en la raza Ibérica alcanzó valores
mínimos en animales entre 9 y 25 kg de PV, en los que el valor máximo fue de 60 g/día. Sin embargo, en
cerdos de la raza Large-White de 20 kg de PV la máxima deposición proteica alcanzada era de 110 g/día
(Noblet y col., 1981).
Todo lo expuesto anteriormente revela la importancia de establecer las recomendaciones
correctas sobre la necesidad de ingesta de proteína en las distintas fases del ciclo productivo del cerdo
Ibérico, ya que un exceso en su suministro repercute negativamente en el animal a diferentes niveles no
solo en el crecimiento del animal en general sino también en la formación de tejido magro y la eficiencia
‐ 73 ‐
de utilización de la proteína dietética. Se produce, además un mayor e innecesario gasto en la
elaboración de la dieta, así como una mayor contaminación ambiental que se podría evitar (Aguilera y
Nieto, 2012).
Retomando el concepto de proteína ideal, Rivera-Ferre y col. (2006) estudiaron el efecto que el
aporte de dietas deficitarias en lisina frente a dietas equilibradas podría tener sobre el proceso de
deposición proteica en hembras de la raza Ibérica y Landrace. Esta situación es comparable a la
alimentación exclusiva con bellota que presenta el cerdo Ibérico en montanera que aporta solamente un
37% de la lisina disponible en la proteína ideal (ARC, 1981; BSAS, 2003) según Nieto y col. (2002). La
relación síntesis/deposición proteica para el organismo completo se mantuvo constante (5,4 g de proteína
sintetizada por g de proteína depositada) al margen de la raza o el nivel de proteína de la dieta y con una
alimentación equilibrada. En ambos genotipos, la dieta deficiente en lisina condujo a un aumento en la
relación síntesis/deposición proteica, lo que se tradujo en una menor eficiencia en la deposición de
proteína. Por otro lado, las dietas equilibradas suministradas en este estudio, pusieron de manifiesto que
la menor capacidad de deposición de proteína de la raza Ibérica en comparación con Landrace se debió
tanto a una menor síntesis (5,84 vs. 8,00 g N/kg0,75 y día, respectivamente) como a una menor
degradación proteica (4,71 vs. 6,47 g N/kg0,75 y día, respectivamente) a nivel del organismo completo.
También se han realizado estudios (Rivera-Ferre y col., 2005) de la tasa de síntesis proteica en
determinados músculos (Longissimus dorsi, Bíceps femoris y Semimembranosus) de cerdas Ibéricas y
Landrace empleando técnicas isotópicas. Curiosamente este parámetro fue entre 25-30% superior en las
cerdas de raza Ibérica frente a las Landrace, lo que podría deberse a diferencias en el tipo de fibra
muscular. Serra y col. (1998) encontraron una mayor cantidad y diámetro de fibras tipo I (consideradas de
contracción lenta y metabolismo oxidativo), y menor cantidad y diámetro de fibras tipo IIB (de contracción
rápida y metabolismo glucolítico no oxidativo) en cerdos Ibéricos que en Landrace de más de 100 kg PV
empleando técnicas de tinción metabólica en el músculo Longissimus lumborum. El tipo de fibra muscular
depende del tipo de miosina que la constituye, y la expresión génica de un tipo u otro depende en gran
medida de la función y localización anatómica del músculo esquelético en el cerdo (Gunawan y col.,
2007). La mayor cantidad de fibras tipo I que ha sido detectada en la raza Ibérica ha sido igualmente
‐ 74 ‐
descrita en otras razas salvajes o no mejoradas en comparación a razas domésticas (Karlsson y col.,
1999).
Sin embargo, y a pesar de la mayor tasa de síntesis proteica muscular anteriormente citada, el
cerdo Ibérico desarrolla músculos de menor tamaño que el Landrace respecto al PV total (entre 20-32%)
debido a una también elevada tasa de degradación proteica muscular (6,04 y 3,94% para Ibérico y
Landrace, respectivamente; Rivera-Ferre y col., 2005).
Esta elevada tasa de renovación proteica presente en los músculos de la raza porcina Ibérica
conduce a una baja deposición de proteína (g/día) y, como consecuencia, a menor masa de proteína
corporal lo que hace que este animal sea más ineficiente en la utilización de la proteína y energía de la
dieta en comparación con razas porcinas mejoradas o convencionales. Parece razonable, por tanto, que
el cerdo Ibérico reciba una alimentación proteica diferenciada respecto a la ya establecida para otros
genotipos porcinos mejorados.
2.2.2.2. CAPACIDAD DIGESTIVA
Definida como la máxima cantidad de alimento consumida por el animal al que se permite el libre
acceso en solitario a la dieta durante dos periodos de 60 minutos al día, la ingesta voluntaria de alimento
es otra característica que diferencia a la raza Ibérica de las razas convencionales o mejoradas. La
selección genética realizada para lograr un mayor potencial de formación de tejido magro ha derivado en
una pérdida de la capacidad de ingestión (ARC, 1981; van Lunen y col., 1996).
En el estudio realizado por Rivera-Ferre y col. (2006) con cerdas Ibéricas y cerdas Landrace de 25
kg de PV obtuvieron que la capacidad de ingesta era aproximadamente 9% mayor en la raza Ibérica. Esta
mayor capacidad de ingesta está también presente en cerdos Ibéricos en otras fases de su ciclo
productivo, como observaron Nieto y col. (2001) en animales comprendidos entre 20 y 85 kg de PV. Para
cerdos comprendidos entre 88 y 108 kg de PV, se obtuvieron tasas de ingestión mayores en Ibérico frente
a Landrace (3,5 y 2,7 kg/día, respectivamente; Morales y col., 2002). Pese a la mayor capacidad de
‐ 75 ‐
ingesta del cerdo Ibérico observada por Morales y col. (2002), no llegaron a encontrar diferencias
significativas en cuanto a la ganancia de peso diaria. Sin embargo, estudios similares realizados por otros
autores sí describen una diferencia en este parámetro, siendo menor en cerdos Ibéricos frente a cerdos
de raza mejoradas desde los 15 a los 115 (Barea y col., 2011) y desde los 19 a los 27 kg de PV (Rivera-
Ferre y col., 2005).
Contrariamente a lo que sucede con respecto a la ingesta, en la raza Ibérica la digestibilidad de
nutrientes es significativamente menor que en razas mejoradas, como revelan las observaciones de
Morales y col. (2002). En el trabajo ya mencionado de Rivera-Ferre y col. (2006), la digestibilidad de la
MS, PB y energía fue ligera aunque significativamente menor en la raza Ibérica respecto a la raza
Landrace (2,4, 4,1 y 2,5%, respectivamente).
Rivera-Ferre y col. (2005) encontraron además un mayor tamaño relativo en la mayoría de las
vísceras en la raza Ibérica respecto a la Landrace. La diferencia entre razas alcanzó el 21% al comparar
el tracto gastrointestinal completo, destacando el mayor tamaño relativo del estómago, intestino grueso e
hígado. La gran actividad metabólica de estos tejidos conduce a pensar que el animal ha de invertir una
mayor cantidad de la energía ingerida en los procesos de mantenimiento con la consiguiente pérdida de
eficiencia energética. Sin embargo, en el estudio de Barea y col. (2010) en el que también se compararon
los tamaños relativos de los órganos viscerales en cerdos Ibéricos y Landrace-Large White en distintas
fases productivas, se observó que dichas diferencias desaparecían en animales de aproximadamente 115
kg PV. Estos resultados sugieren que estas diferencias desaparecen conforme el animal aumenta su PV
y se limitan a los animales más jóvenes. Estos resultados podrían explicarse gracias a las observaciones
de Laplace y col. (1970), quienes encontraron la existencia de una relación alometrica negativa entre el
aumento del peso de los tejidos viscerales y el peso del animal a partir de los 40 kg de PV.
Por otro lado, la menor relación ganancia/ingesta de alimento es otra de las características del
cerdo Ibérico, encontrándose a su vez un mayor contenido energético corporal y una menor digestibilidad
en comparación con razas mejoradas (Morales y col., 2002). Estos resultados estarían de acuerdo con un
estudio comparativo reciente (Barea y col., 2011) entre la raza Ibérica y una raza mejorada
‐ 76 ‐
(Landrace×Large White) en el que se determinaron diferencias estructurales en el intestino delgado con
mayor grosor total de la Tunica muscularis y menor de la Tunica mucosa del duodeno y del íleon de los
cerdos cruzados de 50 kg PV; además de una mayor profundidad de las criptas duodenales e ileales,
longitud de villi, relación villi/cripta y grosor total del íleon que los harían más eficientes digestivamente
que los cerdos Ibéricos.
2.2.2.3. PERFIL ENZIMÁTICO Y HORMONAL
Morales y col. (2002) establecieron una relación entre la menor tasa de conversión de alimento
encontrada en la raza Ibérica con el mayor depósito de grasa dorsal, el contenido de lípidos
intramusculares y la actividad de enzimas lipogénicas (enzima málica y glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa, principalmente). Asimismo, se ha descrito una mayor actividad de enzimas pancreáticas
(lipasa, tripsina, quimotripsina y amilasa) e intestinales (maltasa y sacarasa) en lechones Ibéricos
Alentejanos en comparación con lechones Large-White de 49 días de edad (Freire y col., 1998). Según
estos autores, la mayor actividad de estas enzimas pancreáticas e intestinales supondría un mayor
potencial digestivo de grasas saturadas y componentes fibrosos de la dieta, lo que podría indicar una
adaptación enzimática más temprana del tracto digestivo y mejor aptitud para un destete más temprano
que en razas mejoradas. Este mayor contenido en grasa podría explicar el hecho de que la entrada en la
pubertad observada en las hembras de Ibérico es más temprana en comparación con las hembras del
cruce Large White×Landrace, aunque el peso medio alcanzado en el momento del comienzo de la
pubertad fue mayor en el caso de las segundas (González-Añover, 2010).
La diferencia entre Ibérico y Landrace con respecto a la ingesta voluntaria de alimento y la
deposición de grasa podría deberse a diferencias intrínsecas del sistema endocrino, por ejemplo, en la
secreción de leptina o proteína OB (Figura 2.11). Esta hormona es producida principalmente por los
adipocitos y, a través de sus receptores en el hipotálamo, actúa disminuyendo el apetito y por ende la
ingesta, actuando a nivel del sistema nervioso central. Fernández-Fígares y col. (2007) en un estudio
comparativo entre cerdos Ibéricos y Landrace de aproximadamente 20 kg PV, encontraron diferencias en
‐ 77 ‐
el perfil de distintos metabolitos y hormonas en suero, obteniendo una mayor cantidad de glucosa y
creatinina para la raza Landrace; y de leptina, insulina y factor de crecimiento insulínico tipo I (IGF-I) para
la raza Ibérica. Es probable que el genotipo Ibérico presente un mecanismo de resistencia tisular a la
leptina (Morales y col., 2002) puesto que a pesar de encontrar concentraciones mayores de esta
hormona, la capacidad de ingesta del cerdo Ibérico es mayor que si se compara con cerdos de razas
mejoradas. De hecho, está demostrado que en el cerdo Ibérico existen polimorfismos genéticos del
receptor de leptina (Óvilo y col., 2005; Muñoz y col., 2009) localizado en el cromosoma 6 del genoma
(Pérez-Montarelo y col., 2012), muy relacionados con los niveles de ingesta, la ganancia media diaria y el
porcentaje de tejido magro en la canal (Van der Lenden y col., 2005). No sólo se ha relacionado a la
leptina con el comienzo de la pubertad en las cerdas Ibéricas (Barb y col., 2001; Barb y Kraeling, 2004)
sino también con su menor prolificidad (Gonzalez-Añover y col., 2011). La obesidad y la resistencia a la
leptina están directamente relacionadas con alteraciones en la función ovárica (Pasquali y Gambineri,
2006; Pasquali y col., 2007) y también con problemas en la implantación del cigoto e inicio de la gestación
aumentando la propensión a la infertilidad (Metwally y col., 2008).
Figura 2.11: Leptina y la regulación del balance energético (www.nature.com)
‐ 78 ‐
Estos hallazgos explicarían los niveles de ingesta más elevados del cerdo Ibérico respecto a razas
mejoradas y su enorme potencial para la deposición de grasa, ya que las alteraciones en la transducción
de la señal del receptor impiden generar las señales hipotalámicas de saciedad (Vela, 2006).
2.2.2.4. DEPOSICIÓN DE TEJIDO GRASO
Como se ha mencionado al comienzo de este capítulo, una de las características importantes que
define al cerdo Ibérico y que lo diferencia de las razas mejoradas es su marcado perfil lipogénico que es a
su vez uno de los factores más influyentes para determinar la calidad de sus productos (López-Bote,
1998). En el cerdo Ibérico el tejido graso puede llegar a representar el 55% del peso de su canal (Mayoral
y col., 1999). El depósito graso de la canal del cerdo es el resultado del balance entre la deposición
directa de los ácidos grasos procedentes del alimento y la síntesis endógena de los mismos. Además,
existen diferencias entre localizaciones anatómicas de forma que hay áreas donde se deposita
fundamentalmente la grasa proveniente del alimento (como el área del cuello) y otras en las que la
síntesis endógena adquiere más relevancia como es el caso de la grasa subcutánea (Mourot y col., 1995;
1996). En general, la grasa se distribuye en distintos depósitos adiposos en la canal (subcutáneo,
visceral, intermuscular e intramuscular). La relación entre estos tejidos así como las características de la
grasa, especialmente la grasa intramuscular, es lo que define la calidad de la carne y son determinantes
para la obtención de productos de alta calidad sensorial.
La grasa intramuscular se puede apreciar en el músculo en forma de vetas que se entreveran con
el tejido magro (de ahí la denominación de veteado). El contenido total de grasa intramuscular contribuye
a la calidad de los productos cárnicos, tanto en aspectos sensoriales como la apariencia visual (veteado),
la textura (dureza y jugosidad) y sobre el aroma (Tejeda y col., 2002), como en aspectos nutricionales.
Además, juega un papel decisivo en la tecnología del procesado de los productos derivados cárnicos
(Ruiz y López-Bote, 2002; Ventanas y col., 2005). Es un parámetro de tal influencia en términos de
calidad que está incluido como criterio de selección en AECERIBER.
‐ 79 ‐
El contenido de grasa intramuscular en cerdo Ibérico ha sido descrito por numerosos autores, la
mayoría de ellos en animales sacrificados a pesos elevados (160 kg de PV) obteniendo valores del 8%
(Serra y col., 1998; Ventanas y col., 2006), 10% en cerdos Ibéricos de bellota (Fernández y col., 2003;
García-Casco y col., 2008) y 13% en cerdos Ibéricos en montanera (López-Bote, 1998). Sin embargo, en
cerdos de razas mejoradas sacrificados al mismo peso (Corino y col., 2002, 2008) se hallaron valores en
torno 3-4% y hasta del 1,5% en razas precoces (Serra y col., 1998; Muriel y col., 2004). En todos los
estudios el sacrificio del animal se llevó a cabo a pesos elevados, y es que se ha comprobado que la
grasa intramuscular es el último depósito en formarse y que la cantidad presente en la canal aumenta con
la edad.
La raza e incluso la estirpe y la edad, son dos de los factores que influyen en el contenido de grasa
intramuscular. Asimismo, el tipo de músculo, el sexo, el estado hormonal, las condiciones de producción y
alimentación, y el propio genotipo determinan no sólo la cantidad sino también la composición de los
depósitos grasos de la canal en general y en especial de la grasa intramuscular.
2.2.3. TEJIDOS ESPLÁCNICOS
Como se ha señalado en apartados anteriores de este capítulo, varios estudios realizados han
puesto de manifiesto el mayor peso relativo en los cerdos Ibéricos de las visceras (estómago, intestino
grueso e hígado) en comparación con razas mejoradas (Rivera-Ferre y col., 2005; Aguinaga y col., 2010).
Si consideramos la ruta vascular que siguen los nutrientes ingeridos por el animal, el tracto
gastrointestinal y el hígado por su posición anatómica y funcionamiento metabólico, controlan la
distribución de nutrientes al resto del organismo. Este fenómeno es de una gran importancia a nivel de
eficiencia pues la utilización de energía por los tejidos periféricos de interés económico/productivo
(músculo, glándula mamaria y útero) depende, en parte, de la partición de la energía suministrada a los
distintos compartimentos del organismo.
Sin embargo, no existen aún suficientes trabajos que estudien en profundidad, y menos aún en la
raza Ibérica, las posibles repercusiones metabólicas por el mayor peso relativo de estos tejidos que unido
‐ 80 ‐
a su elevada tasa metabólica, podrían tener un serio impacto en el metabolismo energético del animal;
teniendo en cuenta además, que el interés productivo de los tejidos esplácnicos es escaso o
prácticamente nulo.
2.2.3.1. VISCERAS QUE DRENAN AL SISTEMA PORTA (VDP)
Las VDP (estómago, tracto intestinal, páncreas y bazo; Figura 2.12), además de asimilar los
nutrientes, funcionan como una barrera física e inmunológica, y como órgano endocrino segregando
hormonas que proporcionan las señales necesarias para el metabolismo y el crecimiento. El sistema
nervioso entérico les permite funcionar de forma autónoma o interactuar con el sistema nervioso central.
Toda la sangre procedente de las VDP confluye en la vena porta. El sistema porta es la principal ruta de
transporte de los nutrientes absorbidos en el tracto gastrointestinal hacia los ya mencionados tejidos
periféricos de interés económico/productivo, a excepción de los AG de cadena larga que se transportan
por vía linfática y llegan a la circulación general por el conducto torácico (Yen y Killefer, 1987).
Figura 2.12: Vísceras que drenan al sistema porta (González-Valero, 2015)
‐ 81 ‐
La vena porta se forma por la afluencia de las venas mesentérica superior, mesentérica inferior y
esplénica. La vena mesentérica superior drena la sangre del intestino delgado, parte del intestino grueso
y estómago. La vena mesentérica inferior recibe la sangre de parte del colon y la vena esplénica drena la
sangre del bazo y recibe tributarias procedentes del estómago, páncreas y parte del colon. Antes de que
la vena porta entre en el hígado se une a ella la vena cística procedente de la vesícula. Al mismo tiempo
que recibe sangre desoxigenada a través del sistema portal, el hígado recibe a su vez sangre oxigenada
de la circulación sistémica que llega a través de la arteria hepática.
La porta es una vena que como si de una arteria se tratase, se ramifica y se capilariza en el hígado
(Figura 2.13). La sangre abandona el hígado a través de la vena hepática que drena en la vena cava
inferior (Cortez-Hernández y col., 2009).
Figura 2.13: Vena porta (WordPress.com)
El conjunto de las VDP representan en el cerdo el 4-6% del PV pero su contribución a la
renovación proteica del organismo completo y gasto energético es superior al 35%. Este
‐ 82 ‐
desproporcionado impacto de las VDP en el metabolismo en relación a su masa puede atribuirse a su alta
tasa fraccional de síntesis proteica y consumo de O2 (Stoll y Burrin, 2006), especialmente por parte del
intestino delgado. El 75% de la energía requerida por las VDP proviene de la oxidación de la glucosa,
glutamina y glutamato, siendo este último el principal contribuyente en la generación de energía oxidativa
de la mucosa (Stoll y col., 1999).
2.2.3.2. MEDIDA DEL METABOLISMO DE LAS VDP: MÉTODO DE FICK
El método de Fick o de diferencia arterio-venosa posibilita el estudio in vivo del metabolismo de un
órgano o tejido mediante la medición de la diferencia de concentración en los nutrientes o metabolitos que
entran y salen del mismo (Irtun y col., 2001). La medición de esta diferencia se realiza mediante la
instalación quirúrgica de catéteres en los vasos sanguíneos que entran (vía aferente) y salen (vía
eferente) del órgano en cuestión.
Este método, descrito por Fick en 1870, se basa en que si la concentración arterial y venosa de
una sustancia X es constante, el flujo sanguíneo es constante y la captación (o liberación) de X es
constante, entonces, la entrada de X a un tejido u órgano (determinado como el flujo multiplicado por la
concentración arterial) es igual a la salida de X de ese tejido u órgano (flujo multiplicado por la
concentración venosa) más el metabolismo del tejido u órgano de la sustancia X (donde el término del
metabolismo del tejido es positivo si hay una captación y negativo si hay una liberación de la sustancia).
Aplicando este principio podemos calcular el flujo neto de nutrientes o el consumo de O2 de las
VDP multiplicando, durante un período de tiempo determinado, la diferencia de concentración arterio-
venosa a través de estos tejidos por el flujo sanguíneo (Huntington y Reynolds, 1987). De esta manera, el
flujo neto de un nutriente (a excepción de los AG de cadena larga que se transportan vía linfática)
absorbido y que estará disponible para el animal puede ser determinado a partir de los procesos
combinados de captación y liberación del nutriente por un tejido (Figura 2.14). Un flujo neto positivo indica
‐ 83 ‐
en general síntesis o producción, mientras que un flujo neto negativo indica catabolismo o consumo de un
nutriente (Prior y Gross, 1995) según la siguiente ecuación:
Captaciónoliberacióndeunmetabolito S
Donde C representa la concentración de ese metabolito en la arteria (Ca) o en la vena (Cv) que
entra y sale, respectivamente, del órgano o tejido estudiado, y FS corresponde al flujo sanguíneo a través
de ese órgano o tejido.
Figura 2.14: Muestreo sanguíneo en un cerdo Ibérico según el método de la diferencia arterio-venosa (Departamento de Fisiología y Bioquímica de la Nutrición Animal, CSIC, Granada, España)
Sin embargo, tanto el metabolismo de un órgano o tejido (cambios en la captación o liberación de
una sustancia) como el propio flujo sanguíneo varían según múltiples factores, tanto internos como
externos. Zierler (1961) aplicó el principio de Fick en sistemas no estables, llegando a la conclusión de
que era necesario tomar varias veces la diferencia arterio-venosa a lo largo del tiempo para poder
conocer con precisión el metabolismo de un tejido u órgano. Existen además, una serie de puntos
esencialmente claves en el método, como son: la colocación adecuada del catéter, que es uno de los
principales problemas de esta técnica (Defronzo, 1987); que la muestra venosa constituya una buena
representación de toda la sangre que salga del tejido u órgano; y que no haya contaminación con sangre
‐ 84 ‐
de venas procedentes de otros tejidos u órganos que no sean del objeto de estudio (Irtun y col., 2001). La
cuantificación de la absorción de un nutriente usando este método presenta un coeficiente de variación
mayor que, por ejemplo, la implantación de cánulas ileales; sin embargo, es una herramienta necesaria
para estudios de dinámica de absorción tras la ingestión de la dieta (Bach Knudsen y col., 2006). Otros
inconvenientes de la técnica para conseguir resultados aceptables son las complicaciones durante los
procedimientos quirúrgicos, los cuidados post-operatorios, el adecuado mantenimiento de los catéteres y,
principalmente, la correcta medición del flujo sanguíneo.
Resulta imprescindible determinar el flujo sanguíneo que atraviesa el tejido u órgano en estudio
(Ten have y col., 1996). El método más empleado actualmente es la dilución en el torrente sanguíneo del
ácido para-aminohipúrico (PAH), siendo utilizado en la mayoría de trabajos publicados para la medición
del flujo sanguíneo portal (FSP) y/o hepático (Figura 2.15).
Figura 2.15. Infusión de ácido para-aminohipúrico (Departamento de Fisiología y Bioquímica de la Nutrición Animal, CSIC, Granada, España).
Para la determinación del flujo portal, el PAH es infundido normalmente a través de la vena
mesentérica o la vena ileal (ambas drenan a la porta) con una concentración dependiente del tamaño del
‐ 85 ‐
animal. Para aquellos animales con un PV igual o inferior a 250 kg la concentración de PAH oscila entre
el 7 y el 10% (peso/volumen) con una tasa de infusión de 1 ml/minuto, mientras que si son animales más
pesados (como el caso de vacas lecheras) requiere un 10% (peso/volumen) con una tasa mayor (2
ml/minuto) para alcanzar una concentración adecuada en sangre (Huntington y col., 1989). Según
Ortigues y col. (1994) la dosis adecuada de PAH sería de 12 mg/kg PV y hora, posterior a una dosis
inicial de 3,75 mg de PAH/kg PV. Huntington y col. (1989) infundían una primera dosis de PAH igual a 15
veces la tasa de infusión de mantenimiento por minuto, consiguiendo finalmente concentraciones de PAH
en sangre arterial en torno a 20 mg/l. La recogida de muestras sanguíneas (1 ml por muestra) comenzaba
entre 20 y 45 minutos después de la dosis inicial de PAH, dando tiempo así a la estabilización de su
concentración en sangre. Yen y Killefer (1987) observaron que en cerdos el riñón era capaz de limpiar y
establecer un equilibrio de PAH en el cuerpo (tal y como indicaron anteriormente Perry y Parker, 1981) y,
por tanto, era una técnica aplicable también para estos animales, además de para ovejas o perros (Katz y
Bergman, 1969).
Aún así, la medición del flujo con PAH presenta algunos inconvenientes como el descrito por
Reynolds y Huntington (1988) en bovinos, al sugerir que las variaciones en la medida del flujo sanguíneo
de las VDP eran debidas a una inadecuada mezcla del PAH en la sangre como resultado de la corta
longitud de la vena porta y de las turbulencias creadas por la convergencia de las venas gastroesplénica
y mesentérica. Otras fuentes de error pueden ser la mala elección del lugar de infusión o de colocación
de los catéteres, lo que puede provocar una gran variabilidad en la medición del flujo sanguíneo (Isserty y
Ortigues, 1994). Además, este método presenta limitaciones si se quieren detectar flujos pulsátiles o
cambios en el flujo sanguíneo que ocurran en segundos o minutos (Eisemann y col., 1987). Debido a
esto, hay autores que introducen ciertos cambios para lograr una medida más exacta del flujo sanguíneo.
Una de estas mejoras es la infusión del PAH a través de varios puntos y de forma simultánea para una
mejor mezcla del marcador disminuyendo así las posibles variaciones en la medición del flujo sanguíneo,
como las descritas por Reynolds y Huntington (1988), ocasionadas por una incompleta mezcla de la
sangre procedente de la vena gastroesplénica y mesentérica (Hecker, 1974). Estos lugares de infusión
varían según los autores. Hay descritas infusiones de PAH empleando dos ramas distintas de la vena
‐ 86 ‐
mesentérica (van der Meulen y col., 1997), dos ramas de la aorta abdominal (Eisemann y col., 1987), la
vena del bazo y la aorta abdominal (Ten have y col., 1996; Bruins y col., 2000) o una vena mesénterica y
una ruminal (Ortigues y col., 1994). La infusión múltiple del PAH está especialmente aconsejada en
estudios que precisen la medición del flujo sanguíneo a través del hígado (Ortigues y col., 1994). Ushioda
y col. (1982) recomiendan además la inclusión del corazón, siempre que sea posible, entre el lugar de
infusión y el de muestreo para que tenga lugar una buena mezcla del indicador en la sangre.
Se ha demostrado que en ovejas una fracción del PAH es metabolizada a nivel hepático
convirtiéndolo en PAH acetilado (Katz y Bergman, 1969). Más tarde, Isserty y col. (1998) demostraron que
realmente existe una subestimación de la concentración del PAH de la sangre procedente de la vena
hepática, estimándose en un 13% del PAH infundido en ovinos y, en consecuencia, una sobreestimación
del flujo sanguíneo a nivel del hígado y en particular de la arteria hepática. Para corregir esto, los
mencionados autores recomendaban realizar una etapa de desacetilación en ácido clorhídrico a 90ºC
durante 60 minutos previa al análisis del PAH. En cambio, Goestsch y col. (1994) no incluían esta etapa a
la hora de determinar la concentración del PAH en un estudio de absorción de nutrientes y consumo de
O2 llevado a cabo en ovejas. Según estos autores, los errores potenciales derivados de la subestimación
en la concentración del PAH parecen ser muy pequeños, puesto que la relación flujo sanguíneo
arterial/venoso que obtuvieron en el hígado fue similar a la de otros estudios que sí incluían la etapa de
desacetilación. En un trabajo reciente realizado en el Instituto Nacional de Investigación Agronómica de
Francia (INRA), se hace hincapié en la realización de esta etapa de desacetilación cuando se determine
PAH en plasma de vacuno y, además, en la necesidad de preparar los patrones de PAH en una matriz de
plasma del propio animal (Rodríguez-López y col., 2014). En nuestro laboratorio, se ha comprobado que
es necesario igualmente cuando se determina el PAH en plasma de cerdo preparar los patrones en
plasma o suero de cerdo para evitar una subestimación del flujo sanguíneo (Fernández-Fígares,
comunicación personal). En cerdos son pocos los trabajos que incluyen esta etapa de desacetilación (Ten
have y col., 1996; Bruins y col., 2000), no existiendo ninguno que refleje la necesidad de llevarla a cabo.
Uno de los factores que es necesario tener en cuenta es el nivel de ingesta, además de la
composición de la dieta, puesto que influyen en el tiempo inicial de aparición del nutriente objeto de
‐ 87 ‐
estudio en la vena porta (Rérat y col., 1984). Por ejemplo, en cerdos se ha comprobado que las
diferencias porto-arteriales sólo desaparecen transcurridas entre 20 y 22 horas tras la ingestión de
cebada y trigo, respectivamente (Rérat, 1981). Si no existe un tiempo suficiente de ayuno previo a la
ingestión pueden quedar restos de alimento en el intestino grueso. La llegada de nuevo alimento a un
tubo digestivo aún no vaciado del todo podría no provocar la hiperemia tan marcada que se produce tras
un ayuno más prolongado (Rérat y Vaissade, 1993) lo que conllevaría a errores al considerar tales niveles
como basales. Un periodo de ayuno prolongado antes del experimento tampoco es aconsejable porque
se puede inducir un aumento en la velocidad del vaciado gástrico al suministrar la dieta experimental
(Rérat y col., 1984). También hay que considerar la postura del animal durante el muestreo puesto que el
flujo sanguíneo parece ser dependiente del comportamiento del animal, lo que podría alterar los estudios
de cuantificación de absorción de nutrientes (Ellis y col., 1995). Por ello es aconsejable que los animales
estén habituados al contacto humano antes de comenzar con las extracciones sanguíneas para que
mantengan durante todo el experimento un comportamiento relajado, lo que se reflejará en la calidad de
los resultados. Además, para evitar posibles errores por pequeñas variaciones entre la vena y la arteria
en la dilución del PAH infundido es necesario realizar el muestreo de forma simultánea en ambas.
2.2.3.2.1. OXÍGENO
Determinar el consumo de O2 por las VDP permite evaluar los costes de absorción de nutrientes
en relación a la raza, el estado productivo, la dieta o el consumo de O2 total por el animal (Huntington y
Tyrrell, 1985). De lo mencionado se desprende que el consumo de O2 y el gasto energético (o producción
de calor) son equivalentes desde el punto de vista de la bioenergética ya que el equivalente energético
del O2 es prácticamente constante (20,4 kJ/l)
Son numerosos los trabajos realizados, principalmente en rumiantes, que ponen de manifiesto la
importante contribución de las VDP y el hígado al gasto energético del organismo completo en relación a
su masa. Las observaciones de Huntington y Reynolds (1987) en bovino indicaron que las VDP eran
responsables del 18 al 25% del consumo de O2 total del animal, mientras que su contribución al peso
‐ 88 ‐
corporal era del 8 al 10%. El consumo de O2 por parte del hígado fue aún mayor que el registrado por las
VDP cuando su contribución al peso corporal era tan sólo del 1 al 2%. En corderos, los tejidos
esplácnicos representaron el 52% del consumo de O2 total, del cual del 18 al 29% correspondió a las VDP
y el 25% al hígado, cuando su contribución al peso corporal fue aproximadamente del 7 y 2%,
respectivamente (Burrin y col., 1989).
En cerdo la bibliografía disponible es escasa y la gran mayoría de los trabajos han sido realizados
en cerdos de razas mejoradas. Yen y col. (1989) y Yen (1997) indicaron que las VDP eran responsables
del 25% del consumo de O2 cuando sus masas representaban sólo el 5% del total. Webster (1981)
observó que los órganos del sistema digestivo tenían una tasa de renovación proteica considerablemente
mayor que otros componentes corporales. De hecho, se ha comprobado que tanto en cerdos (Simon y
col., 1982) como en ganado bovino (Lobley y col., 1980) la síntesis proteica del tracto gastrointestinal,
hígado, páncreas y riñones con respecto a la total fue superior (35-40%) a la del músculo esquelético (24-
28%). El tracto gastrointestinal tiene una rápida tasa tanto de síntesis como de degradación proteica,
estimándose la deposición proteica neta en menos del 2% (Sainz y col., 1986; Early y col., 1990).
Webster y col. (1978) sugirieron una estrecha relación entre la síntesis proteica corporal total y la pérdida
de calor en ratas congénitamente obesas y magras. Esto puede deberse en parte a que los tejidos
esplácnicos (junto al sistema nervioso, el corazón y los riñones) reciben más aporte sanguíneo que el
músculo, el tejido adiposo o la piel (Ferrell, 1988). Se puede concluir, como hicieron Koong y col. (1983),
que la producción de calor de estos órganos tan activos metabólicamente constituye una porción
importante de la total.
Los órganos y tejidos satisfacen sus necesidades de O2 alterando las relaciones entre el flujo
sanguíneo, el suministro de O2 y su extracción (Edelstone y Holzman, 1981). Aunque el modo en que
estos factores se interrelacionan es inherente a cada órgano y tejido y depende también del estado
fisiológico, de manera general, el incremento en el consumo de O2 por las VDP se produce como
consecuencia de un flujo sanguíneo mayor en respuesta a un aumento de la ingesta energética (Lomax y
Baird, 1983). De este modo, el flujo sanguíneo intestinal está sujeto a mecanismos reguladores tanto
intrínsecos como extrínsecos, aumentando pronunciadamente la irrigación sanguínea tras la alimentación
‐ 89 ‐
durante el proceso de la digestión. Los mecanismos intrínsecos involucrados en este proceso son el
reflejo local a la presencia de contenido luminal, la liberación de hormonas gastrointestinales vasoactivas
(gastrina, secretina y/o colecistoquinina) y el incremento del metabolismo intestinal (Granger y col., 1980).
En cambio, el control neural extrínseco estaría gobernado principalmente por el sistema nervioso
simpático, cuya actividad reduce la resistencia vascular de las arterias y arteriolas (las venas tienen una
menor inervación simpática). Esta resistencia vascular a través del intestino determina el flujo
mesentérico y, por tanto, el flujo venoso portal (Takala, 1996).
Puesto que en la raza Ibérica la importancia metabólica de las VDP en el organismo y su
contribución al peso total es mayor que el de las razas magras o mejoradas, se hace imprescindible
conocer el impacto de las mismas en la producción de calor total del animal, para un mejor conocimiento
del metabolismo de esta raza autóctona. Actualmente la información existente en bibliografía acerca de la
contribución de las VDP al gasto energético total del cerdo Ibérico corresponde a los resultados
generados por nuestro grupo de investigación.
2.2.3.2.2. ALBÚMINA
La albúmina es la proteína que se encuentra en mayor proporción en el plasma sanguíneo, siendo
la principal proteína de la sangre. El resto de proteínas se agrupan bajo el nombre de globulinas.
Sintetizada en los ribosomas adheridos a la pared del retículo endoplasmático rugoso de los hepatocitos,
la albúmina sérica es la principal proteína de exportación hepática ya que representa del 12 al 18% de la
proteína total sintetizada en los hepatocitos de rata y bovinos (Peavy y col., 1978; Strang y col., 1998).
Juega un papel fundamental en numerosas funciones metabólicas y fisiológicas (Rothschild y col., 1988).
Así, contribuye al mantenimiento de la presión oncótica del plasma (Guyton, 1981), actúa como
transportador no específico (Dollery, 1983; Rothschild y col., 1972) para muchos componentes (hormonas
tiroideas y hormonas liposolubles, ácidos grasos libres, bilirrubina no conjugada, y muchos fármacos y
drogas) y es una fuente endógena de aminoácidos. Aunque también participa en otras funciones como en
‐ 90 ‐
el control del pH, protección del medio interno de sustancias tóxicas (Brossard y col., 1988) o en la
regulación de líquidos extracelulares (efecto Donan).
La albúmina es fundamental para el mantenimiento de la presión oncótica, necesaria para la
distribución correcta de los líquidos corporales entre el compartimento intravascular y el extravascular
localizado entre los tejidos. La albúmina tiene carga eléctrica negativa al igual que la membrana basal del
glomérulo renal, lo que impide la filtración glomerular de la albúmina a la orina (Pocock y Richards, 2005).
En el llamado síndrome nefrótico esta propiedad es menor y se pierde gran cantidad de albúmina a través
de la orina.
Los cambios en los niveles séricos de albúmina pueden originar una hiperalbuminemia y una
hipoalbuminemia. Esta última puede producirse como resultado de diversos factores: enfermedades
hepáticas (Keyser, 1987); absorción reducida de aminoácidos debida a síndromes de malabsorción o
malnutrición (Taville, 1972); aumento del catabolismo como consecuencia de inflamación o daño tisular;
distribución alterada entre el espacio intravascular y extravascular causada por permeabilidad capilar
aumentada, sobrehidratación o ascitis; pérdidas anormales debidas a enfermedades renales (Jensen y
col., 1983; Keyser, 1987) (síndrome nefrótico, diabetes mellitus, glomerulonefritis crónica o el lupus
eritematoso sistémico), enfermedades del tubo digestivo (colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn) o
alteraciones de la piel (dermatitis exfoliativa, quemadas extensas); ausencia congénita de albúmina o
analbuminemia; funciona como anticoagulante y antioxidante; y por último, el descenso en los niveles de
albumina en suero puede ser debidos a una situación de estrés agudo por una disminución de su síntesis
en el hígado, por esta razón se le conoce también como “adaptador metabólico al estrés” (Schreiber y
Howlett, 1983).
2.2.3.2.3. AMONIO
El amonio es un producto tóxico del metabolismo nitrogenado. El amonio plasmático proviene
principalmente de la absorción intestinal del amonio formado en el tubo digestivo por degradación
bacteriana de las proteínas de la dieta y de la urea presente en el intestino y que llega al hígado por
‐ 91 ‐
circulación portal; o de la síntesis hepática, cuya síntesis se inicia con el catabolismo de los aminoácidos
(Lehninger, 1993). Una vez en el hígado se convierte en urea a través de reacciones enzimáticas y de
este modo se elimina del organismo. La retirada del amonio proveniente del tracto gastrointestinal
(Huizenga y col., 1996) se realiza de forma que las concentraciones de amonio periféricas sean
suficientes para la síntesis de bases de ácidos nucleicos pero inferiores a las que resultarían tóxicas para
el sistema nervioso central (Summerskill y Wolpert, 1970; Balistreri y Shaw, 1987).
Las enfermedades que comprometen la eliminación del amonio son las causantes de la
hiperamoniemia y en consecuencia de la intoxicación por amonio del organismo. El amonio es un
compuesto altamente neurotóxico y su acumulación en sangre y secundariamente en el sistema nervioso
central es responsable del desarrollo de la encefalopatía hepática y en último extremo del coma hepático.
Un exceso de amonio en plasma sanguíneo puede ser una señal de la existencia de patologías como un
daño hepático grave. El exceso que llega al torrente sanguíneo sistémico puede conseguir pasar al
cerebro a través de la barrera hematoencefálica dando lugar a un complejo conjunto de cambios que
afectan la transmisión nerviosa. Tanto es así que se ha relacionado con la enfermedad de Alzheimer.
2.2.3.2.4. COLESTEROL
El colesterol es un lípido esteoideo de alto peso molecular con carácter anfipático, componente
estructural esencial de las membranas, las capas de mielina del sistema nervioso central y de la capa
externa de las lipoproteínas plasmáticas. Está presente en los tejidos y en el plasma, ya sea como
colesterol libre o esterificado, esto es, combinado con un ácido graso de cadena larga como colesteril
éster. Se sintetiza en el retículo endoplásmatico y en el citosol de prácticamente todas las células del
organismo a partir del acetil-Coenzima A, y es el precursor de todos los esteroides en el organismo,
incluso corticosteroides, hormonas sexuales, ácidos biliares y vitamina D. Otra parte importante del
colesterol existente en el organismo tiene su origen en la dieta.
‐ 92 ‐
Aunque la biosíntesis de novo tiene lugar en casi todas las células, esta capacidad es mayor en el
hígado (el órgano más importante en la homeostasis del metabolismo del colesterol) en el intestino
delgado, la corteza suprarrenal y los tejidos reproductores. El hígado juega un papel importante en la
regulación de la concentración de colesterol en el plasma además de ser el único órgano capaz de
trasformar al colesterol en ácidos biliares, cuantitativamente la vía más importante de excreción de este
compuesto. Por ser insoluble en agua, las lipoproteínas plasmáticas constituyen el vehículo mediante el
cual se transporta el colesterol (Tavella, 1993; Barter, 1994; Fruchart y Sézille, 1981; Ángel y Ángel, 1997;
Swenson y Reece, 1999). Las lipoproteínas son macromoléculas que incluyen un núcleo de lípidos
hidrófobos (triglicéridos, ésteres de colesterol) y una zona superficial hidrofílica (fosfolípidos, colesterol no
esterificado y apoproteínas) (Kaneko, 1989; Fruchart y Reece, 1999; Coppo, 2001). Las lipoproteínas de
muy baja densidad (VLDL) o baja densidad (LDL) transportan el colesterol a diversos tejidos incluyendo
paredes vasculares, mientras que las lipoproteínas de alta densidad (HDL) son el vehículo principal para
el transporte del exceso de colesterol desde la periferia al hígado en donde se puede excretar a través de
la bilis, directamente en forma de colesterol o tras su conversión en áidos biliares.
El cerdo, junto al ser humano, monos, conejos, cobayos, hamsters y otros animales silvestres
enmarcan en el patrón LDL, caracterizándose porque el exceso de colesterol dietario provoca la elevación
plasmática de LDL y su colesterol asociado (C-LDL), por lo cual asumen mayor riesgo aterogénico
(Bauer, 1997; Coppo, 1989). Cerdos sometidos a dietas ricas en colesterol elevan el C-LDL el colesterol
total del plasma, aumentando moderadamente el C-HDL y muy escasamente los triglicéridos (Fernández-
Robredo y col., 2005).
El volumen de colesterol circulante depende de su absorción intestinal, la síntesis endógena, la
captación tisular, el estado del metabolismo lipoproteico y la excreción biliar. En definitiva, el nivel de
colesterol dependerá de los alimentos ingeridos y la capacidad de absorción de los receptores
específicos. Esta concentración de colesterol en sangre está determinada por factores tanto hereditarios
como dietéticos. Un aumento de la presencia de colesterol en sangre por encima de los niveles
considerados normales (hipercolesterolemina) se asocia con un riesgo progresivamente creciente de
ateroesclerosis y enfermedad de las arterias coronarias. Además, niveles altos de colesterol en plasma
‐ 93 ‐
puede ser indicador de disfunción hepática porque la destrucción de las células hepáticas trae como
consecuencia una disminución en la actividad metabólica del hígado reduciendo más la degradación del
colesterol que la síntesis, por lo que los niveles en sangre aumentan. En el hipotiroidismo los niveles de
colesterol aumentan porque la carencia de hormonas tiroideas reduce la actividad metabólica de
la célula hepática así como de las células de otras partes del organismo. También aumentan los niveles
de colesterol en situaciones de diabetes Mellitus, en nefrosis y puede presentarse un ligero incremento en
caso de infarto de miocardio.
En el cerdo la hipercolesterolemia es capaz de bloquear los canales de potasio voltaje-
dependientes, una de cuyas acciones es coadyuvar el efecto miorelajante vascular de la adenosina en las
arteriolas coronarias (Heaps y col., 2005). Al igual que en seres humanos, la absorción intestinal de
colesterol puede ser minimizada en el cerdo por fitosteroles dietarios que reducen la solubilización micelar
del colesterol (Martins y col., 2005).
2.2.3.2.5. CREATININA
La creatinina es compuesto orgánico resultante del metabolismo muscular que se produce a partir
de la degradación de la creatina, molécula de gran importancia por ser la principal fuente de energía en
los músculos. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en creatinina cada día. En
animales jóvenes de crecimiento se encuentra en mayores cantidades. La creatinina es una substancia
muy difusible, segregada por los músculos en cantidades proporcionales a su masa (Rassin y Bhatia,
1992) y distribuida de manera uniforme en el agua corporal.
La creatinina es transportada a través del torrente sanguíneo hasta los riñones donde es filtrada
por los glomérulos y excretada por la orina. Los niveles séricos de creatinina casi no son afectados por la
creatinina exógena de los alimentos, por la edad, el sexo, el ejercicio o la dieta. Por lo tanto, los niveles
elevados solamente se presentan cuando se altera la función renal. Por esta razón la determinación en
suero de creatinina endógena constituye un parámetro importante para el diagnóstico de diversas
‐ 94 ‐
afecciones renales. Niveles anormales de creatinina en plasma son un indicativo muy fiable de la
existencia un fallo renal bien sea por un aumento en los niveles de creatinina (por una disminución en la
tasa de filtración glomerular) o bien por una disminución (que podría deberse a una pérdida de masa
muscular). Según observaron Harita y col. (2009) una disminución de los niveles de creatinina en plasma
también puede ser indicativa de un aumento en el riesgo de padecer diabetes tipo II
2.2.3.2.6. GLUCOSA
La glucosa además de ser la principal fuente de carbono y energía del organismo (Jiang y Carlson,
1997), puede ejercer efectos reguladores de tipo “hormonal”, participando en el crecimiento, metabolismo
y desarrollo celular (Rolland y col., 2001). Se encuentra libre en la sangre es distribuida a los tejidos
dónde es oxidada como fuente energética en el interior de las células. El hígado es el principal órgano
regulador de la homeostasis glucídica, de tal forma que puede liberar la glucosa a la circulación
sanguínea o bien captarla y almacenarla. Este equilibrio entre uso y síntesis de glucosa está controlado
sutilmente por una serie de factores, entre los que destacan: las concentraciones de substratos y
productos de las distintas vías metabólicas, así como el medio hormonal y nutricional del organismo (Hue,
2001). Normalmente los niveles de glucosa en sangre aumentan ligeramente después de la ingesta de
alimento, lo que estimula la producción de insulina en las células β del páncreas y su liberación al torrente
sanguíneo facilitando la captación de glucosa en las células de los tejidos periféricos. Durante este
período postprandial, el hígado almacena la glucosa en forma de glucógeno, lo que requiere su
conversión previa en compuestos de 3 carbonos (lactato, piruvato,…) (Katz y McGarry, 1984; Newgard y
col., 1984; Radziuk y Pye, 2001). Puede también, eventualmente, convertir la glucosa en ácidos grasos
por la vía de la lipogénesis de novo (Hellerstein y col., 1996). En el período de ayuno, el hígado produce
glucosa para mantener la glucemia (Hellerstein y col., 1997) y su almacenamiento en los tejidos
extrahepáticos, especialmente, en aquéllos que usan la glucosa como único sustrato oxidativo (glóbulos
rojos, retina,…).
‐ 95 ‐
La determinación de los niveles glucosa en sangre es útil para el conocimiento del estado
nutricional y metabólico del organismo, y para el diagnóstico de posibles desordenes del metabolismo de
los carbohidratos (diabetes mellitus, hipoglucemia neonatal idiopática y el carcinoma de los islotes de
Langerhans pancreáticos).
Una deficiencia de insulina o una disminución de su actividad ocasionan un aumento de la glucosa
en sangre, sin embargo, una baja disponibilidad tisular de la misma. Se encuentran concentraciones
elevadas de glucosa en suero o plasma en casos de diabetes y en otras condiciones o síndromes
(hipertiroidismo, cáncer de páncreas, pancreatitis, y en situaciones de estrés). Por otro lado, una
disminución de la concentración de glucosa (hipoglucemia) puede darse como respuesta al ayuno, pero
también en situaciones de fallo renal o hepático.
2.2.3.2.7. LACTATO
El principal destino del lactato en el organismo es su combustión completa a CO2 y H2O, o su
conversión en glucosa mediante el proceso de gluconeogénesis. Se ha demostrado que el lactato puede
ser utilizado como fuente de energía por las células de distintos órganos periféricos como la retina (Poitry-
Yamate, 1995), en neuronas en el cerebro adulto (Larrabee, 1995; Schurr y col., 1999), siendo las células
gliales las responsables de transformar glucosa en lactato para ser utilizado por las neuronas; y en
general por cualquier tejido en condiciones fisiológicas normales (Brooks, 1987; Haljamae, 1987). Su
consumo puede ser preferencial incluso frente a la glucosa en determinadas condiciones (Pellerin y
Magistretti, 1994). La importancia del lactato en el metabolismo cerebral parace ser más importante aún
en etapas tempranas del desarrollo. Es bien conocido que la tasa de transporte y el metabolismo
oxidativo de la glucosa es muy bajo en el cerebro en desarrollo (período posnatal), y éste aumenta con la
madurez del sistema nervioso central (Dwyer y col., 2002; Vannucci y Simpson, 2003). El lactato parece
tener un papel importante durante el período postnatal, tanto como fuente de energía, como sustrato
primario para la biosíntesis de intermediarios metabólicos (Medina, 1985), siendo este hecho consistente
con la alta concentración de grasas en la leche materna (Vannucci y Simpson, 2003).
‐ 96 ‐
En condiciones metabólicas normales y durante el ejercicio, el lactato está en continua síntesis a
partir de piruvato vía lactato deshidrogenasa (LDH). Pero una disminución en la disponibilidad de oxígeno
incrementa la producción de lactato a la vez que disminuye su utilización. Esta última también se puede
producir por enfermedades hepáticas, consumo de etanol y fármacos. Una sobreproducción de lactato
infrautilización de lactato o ambas a la vez, puede dar lugar a unos niveles sanguíneos elevados y
desencadenar una acidosis láctica.
En cerdos, el nivel de lactato en sangre es un parámetro muy utilizado para medir el nivel de
estrés al que está sometido el animal en su manejo, trasporte, sacrificio e incluso la posición social del
animal dentro del grupo. Se ha relacionado los niveles de lactato encontrados en el torrente sanguíneo
con la calidad de la carne de manera que el incremento del lactato en plasma, junto con otros parámetros
como la temperatura del músculo y la tasa de la glucólisis post mortem, se han asociado con una
disminución de la calidad de la canal cerdo (Becerril-Herrera y col., 2009).
2.2.3.2.8. TRIGLICÉRIDOS
Los AG pueden sufrir esterificación con glicerol para producir triglicéridos que son transportados
como lipoproteínas a través de la sangre para ser depositados en otros tejidos, como el tejido adiposo o
muscular, funcionando como almacenes de energía (Go y col., 2013), o convertirse en cuerpos cetónicos
vía β-oxidación. Cuando el suministro de glucosa en la dieta es superior a su demanda, parte de la misma
puede ser destinada a la síntesis de ácidos grasos (lipogénesis de novo). La síntesis de triglicéridos tiene
lugar en el tejido adiposo y en el hígado, pero es más importante la síntesis que se da en el hígado
cuando se trata de cerdos jóvenes aunque su magnitud decrece con la edad en favor del tejido adiposo
(Fenton y col., 1985; Gondret y col., 2001).
La concentración de lípidos en sangre es un parámetro muy utilizado por ser un importante
indicador del estado metabólico y nutricional del organismo, así como de trastornos alimentarios y/o
posibles enfermedades. En el caso del cerdo el lipidograma asume además otra dimensión dado que por
sus semejanzas metabólicas con el ser humano es ampliamente utilizado como modelo experimental para
‐ 97 ‐
el estudio del estrés oxidativo asociado a la aterogénesis, así como para el experimento de dietas y
fármacos hipolipemiantes (Martins y col., 1998; Fernández-Robredo, y col., 2005; Heaps y col., 2005;
Dyson y col., 2006). Los triglicéridos séricos aumentan en la etapa post-prandial pero también en el ayuno
prolongado y en la caquexia por agotamiento de reservas; se elevan asimismo en la gestación, lactancia,
hipotiroidismo, ictericia obstructiva, ciertas intoxicaciones y en la fase nefrótica de la glomerulonefritis
crónica. Por el contrario, disminuyen en trastornos carenciales y consuntivos, malabsorción e
hipertiroidismo (Kaneko, 1989; Ángel y Ángel, 1997; Coppo, 2001).
2.2.3.2.9. UREA
Durante el crecimiento, la conversión del N del alimento (aminoácidos) en proteína animal es un
proceso relativamente ineficiente en todos los mamíferos, con una fracción sustancial de N eliminada
como urea. Hay distintas funciones de la ureogénesis incluyendo la retirada del exceso de N aminoacídico
para las necesidades anabólicas del animal (Meijer y col., 1990), la regulación del equilibrio ácido-base
(Atkinson y Bourke, 1984) y la retirada del amonio proveniente del tracto gastrointestinal (Huizenga y col.,
1996) de forma que las concentraciones de amonio periféricas sean suficientes para la síntesis de bases
de ácidos nucleicos pero por debajo de aquéllas tóxicas para el sistema nervioso central (Summerskill y
Wolpert, 1970; Balistreri y Shaw, 1987).
Este compuesto orgánico, la urea, es producido en los hepatocitos periportales del hígado (Morris,
2002) aunque hay evidencias de un bajo nivel de actividad del ciclo de la urea también en los enterocitos
(Wu, 1995). El amonio retirado de la vena porta por el hígado entra en el ciclo de la urea condensándose
con el CO2 mitocondrial para formar carbamoil fosfato, reacción catalizada por la carbamoil fosfato
sintetasa (Meijer y col., 1990). El amonio proporciona un solo átomo de N y el segundo lo suministra el
aspartato citoplásmico. El donante de N al aspartato es probablemente el glutamato (involucrado en
numerosas reacciones de transaminación) o la glutamina.
Aunque muchos metabolitos podrían contribuir a la síntesis de urea, en la práctica sólo los
aminoácidos se absorben en cantidad suficiente como para aportar el N adicional. Interesa al organismo
‐ 98 ‐
el mantenimiento de niveles bajos de amonio (no tóxicos) pero no la retirada completa del mismo ya que
el amonio también es precursor del glutamato, y de otros aminoácidos, siendo esencial en los sistemas
redox mitocondriales. La retirada del amonio tiene un impacto en la bioenergética hepática e incluso se
plantea la posibilidad de que suponga una penalización en la ganancia de proteína del animal al
requerirse N aminoacídico extra para la síntesis de urea (Lobley y col., 1995).
La determinación de este metabolito en el torrente sanguíneo es de gran utilidad para conocer la
existencia de trastornos renales. Una concentración elevada de urea en sangre puede ser consecuencia
de la ingesta de una dieta hiperproteica, un aumento del catabolismo proteico o una ligera deshidratación.
Asimismo, un aumento de los niveles en sangre de urea puede deberse a trastornos renales como
la insuficiencia renal crónica y aguda, por obstrucción de las vías urinarias, destrucción de proteínas como
en estados de fiebre, toxicidad o sepsis extensa. Sin embargo, el descenso en los niveles de urea son
raros, teóricamente pueden presentarse en asociación con graves enfermedades hepáticas o malnutrición
de proteínas.
2.2.4. DESARROLLO CORPORAL EN EL CERDO IBÉRICO
El crecimiento es un proceso complejo y altamente integrado que Hammond (1932) definió como
el aumento de peso del animal hasta que alcanza el tamaño adulto. Brody (1945) lo describió como la
producción de nuevas unidades bioquímicas a través de la síntesis metabólica y biológica. Mientras que
el desarrollo, sin embargo, conlleva cambios de forma y la adquisición de nuevas funciones. Según
Hammond es la modificación de la conformación corporal del animal, en tanto que sus funciones y
facultades alcanzan la plenitud”.
En producción animal los cambios cualitativos y cuantitativos que tienen lugar en la composición
corporal durante el crecimiento del animal son de gran interés. Del mismo modo, el conocimiento de la
composición de la canal del animal en crecimiento y el desarrollo de la misma son claves para mejorar la
eficiencia del sistema de producción y aumentar su rendimiento (Landgraf y col., 2006).
‐ 99 ‐
A lo largo del tiempo diferentes autores (Huxley, 1932; Hammond, 1932; Brody, 1945; Pomeroy,
1955; Kouba y col., 1999; De Lange y col., 2003) han propuesto modelos matemáticos que permiten
medir el crecimiento y desarrollo del animal con el objetivo de predecir la evolución de la composición del
cuerpo del animal o de su canal; optimizar el aporte nutricional durante el crecimiento; establecer el peso
óptimo de sacrificio; proporcionar parámetros que permitan la descripción de un modelo de predicción del
crecimiento y de la composición de la canal que se pueda utilizar para mejorar la eficiencia de todo el
sistema de producción. Autores como Seebeck (1968) y Berg y col. (1978) en ganado vacuno, y Elsey y
col. (1964), Cole y col. (1976), Evans y Kempster (1979) Swatland (1982), Davies (1983), Fortin y col.
(1987) y Gu y col. (1992) en ganado porcino, han demostrado que la función alométrica describe
adecuadamente los cambios en la composición durante todo el período de crecimiento del animal, dados
los altos coeficientes de correlación múltiple obtenidos mediante este modelo.
Este modelo matemático simple (ecuación alométrica) descrito por Huxley (1932) ha sido aplicado
de forma generalizada para detectar y medir el crecimiento relativo de dos componentes corporales,
siendo uno de ellos el peso del organismo completo, total corporal o total de referencia y el otro una
fracción de éste (región, órgano, tejido o componente).
La alometría se define como el estudio del crecimiento relativo de cambios en la proporción con
incrementos de tamaño. Las proporciones relativas de los órganos de los animales no permanecen
invariables, si no que los diferentes órganos y tejidos crecen de forma diferente a lo largo de la vida del
animal hasta alcanzar su estado adulto. El crecimiento de un componente determinado suele estar
regulado por la actividad de otras regiones. De acuerdo con Hammond (1932) los gradientes de
crecimiento van desde el cráneo hacia la parte posterior del animal, y desde el final de las extremidades
hacia arriba para confluir en las vértebras lumbares. Hueso y músculo se desarrollan en primer lugar.
Después su ritmo de crecimiento se reduce mientras aumenta el de deposición de tejido graso (Davies,
1974; Shields y col., 1983; Tess y col., 1986; Gu y col., 1992). En el cerdo la formación de tejido magro
alcanza su máximo entre 60 y 90 kg de PV y a partir de este peso declina a un ritmo constante. Sin
embargo, esta pauta de crecimiento puede diferir entre genotipos, especialmente entre razas
convencionales y magras (Doornenbal, 1971). Hueso, tejido nervioso y músculo crecen de modo
‐ 100 ‐
estrechamente relacionado y esta interdependencia puede ser definida matemáticamente. Las diferencias
en el crecimiento de los diferentes tejidos, causadas por factores ligados al sexo o al genotipo son
cuantitativamente poco importantes. El tejido adiposo es mucho más sensible a alteraciones nutricionales,
y también al genotipo, al sexo o al ambiente.
Los cambios físicos y de composición química que suceden en el organismo no dependen solo del
genotipo y del estado endocrino, sino también de factores relacionados con la historia nutricional del
animal, la composición nutritiva de la dieta, el plano de ingestión y el medio ambiente. Describir estos
cambios y establecer relaciones entre los diferentes componentes constituye una materia de gran interés
en producción animal.
Como hemos visto anteriormente, el modelo matemático más utilizado que relacionan estos
cambios es el planteado por Huxley (1932):
Y = a Xb
Esta ecuación se linealiza en su forma logarítmica (Figura 2.16)
log Y = log a + b log X
En donde Y es el peso de un órgano, tejido o región anatómica; X es el peso del cuerpo, tejido
total o región anatómica con la cual se compara el crecimiento de la característica Y; a es una constante
denominada coeficiente fraccional, carente de significado biológico; y b es una constante denominada
coeficiente alométrico o razón de crecimiento relativo de los componentes.
El coeficiente alométrico b es la pendiente de la ecuación lineal. Su significado se ve más
claramente al derivar la ecuación logarítmica. El coeficiente alométrico, por consiguiente, se podría definir
como la relación entre la velocidad relativa de crecimiento de una parte del animal respecto a la del
cuerpo u otra parte del mismo, y permite el desarrollo relativo de un órgano, tejido o región del cuerpo (De
Pedro, 1987).
‐ 101 ‐
Si b = 1, ambos componentes crecen a la misma velocidad.
Si b < 1, el componente representado en el eje Y (órgano, región, tejido o componente) crece más
lentamente que el componente en el eje X (peso del cuerpo, tejido total, región anatómica, etc.).
Si b > 1, el componente del eje Y está creciendo más rápidamente que el componente X.
El valor del coeficiente alométrico b no es siempre constante a lo largo de la vida del animal,
pudiendo ser afectado por diferentes parámetros externos (temperatura, nutrición, estado sanitario, etc.).
El cálculo del coeficiente alométrico permite establecer relaciones entre diferentes parámetros,
tales como distribución de tejidos, niveles de alimentación, características de la dieta, estado nutritivo,
diferencia entre genotipos, sexo, etc. Describir los cambios que tienen lugar durante el crecimiento y
desarrollo del animal, y establecer relaciones entre los diferentes componentes constituye una materia de
gran interés en producción animal.
Figura 2.16: Representación gráfica de la Ecuación alométrica (Huxley, 1932)
‐ 102 ‐
2.3. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
AECERIBER, Asociación española de criadores de ganado porcino selecto Ibérico puro y tronco Ibérico.
2007. Manual de Cerdo Ibérico. 2ª Edición.
Aguilera Sánchez, J.F. y Nieto Liñán, R. M. 2012. Nutrición proteica del cerdo ibérico. Recomendaciones.
Avances en tecnología porcina 9, 34-44.
Aguinaga, M.A., Gómez-Carballar, F., Nieto, R. y Aguilera, J.F. 2011. Production and composition of
Iberian sow's milk and use of milk nutrients by the suckling Iberian piglet. Animal 5, 1390-1397.
Ángel, G. y Ángel, M. 1997. Interpretación Clínica del Laboratorio, 5º ed., Panamericana, Bogotá, 664 p.
ARC, Agricultural Research Council. 1981. The nutrient requirements of pigs. Slough: Commonwealth
Agricultural Bureau.
Abdelmalek, M.F., Sanderson, S.O., Angulo, P., Soldevila-Pico, C., Liu, C., Peter, J., Keach, J., Cave, M.,
Chen, T. y McClain, C.J. 2009. Betaine for nonalcoholic fatty liver disease: results of a randomized
placebocontrolled trial. Hepatology 50, 1818–1826.
Ackman, R.G., Eaton, C.A., Sipos, J.C. y Crewe, N.F. 1981. Origin of cis-9, trans-11 and trans-9, trans 11-
octadecadienoic acid in the depot fat of primates fed a diet rich in lard and corn oil and implications
for the human diet. Canadian Institute of Food Science and Technology Journal 14, 103-107.
Adlof, R.O., Duval, S. y Emken, E.A. 2000. Biosynthesis of conjugated linoleic acid in humans. Lipids 35,
131-135.
Alaviuhkola, T. y Suomi, K. 1990. Effect of betaine supplementation of low methionine diet for growing
pigs. Annales Agriculturae Fenniae 29, 127–129.
Alfieri, R.R., Cavazzoni, A., Petronini, P.G., Bonelli, M.A., Caccamo, A.E., Borghetti, A.F. y Wheeler, K.P.
2002. Compatible osmolytes modulate the responses of porcine endothelial cells to hypertonicity and
protect them from apoptosis. Journal of Physiology 540, 499–508.
‐ 103 ‐
Aminot-Gilchrist, D.V. y Anderson, H.D. 2004. Insulin resistance-associated cardiovascular disease:
potential benefits of conjugated linoleic acid. American Journal of Clinical Nutrition 79, 1159-1163.
Apicella, J.M., Lee, E.C., Bailey, B.L. Saenz, C., Anderson, J., Craig, S., Stuart, C., Kraemer, W., Volek, J.
y Maresh, C. 2013. Betaine supplementation enhances anabolic endocrine and Akt signaling in
response to acute bouts of exercise. European Journal of Applied Physiology 113, 793-802.
Armstrong, L.E., Casa, D.J., Roti, M.W., Lee, E.C., Craig, S.A., Sutherland, J.W., Fiala, K.A. y Maresh,
C.M. 2008. Influence of betaine consumption on strenuous running and sprinting in a hot
environment. The Journal of Strength & Conditionation Research 22, 851-860.
Aro, A., Mannisto, S., Salminen, I., Ovaskainen, M.L., Kataja, V. y Uusitupa, M. 2000. Inverse association
between dietary and serum conjugated linoleic acid and risk of breast cancer in postmenopausal
women. Nutrition and Cancer 38, 151-157.
Atkinson, W., Elmslie, J., Lever, M., Chambers, S.T. y George, P.M. 2008. Dietary and supplementary
betaine: acute effects on plasma betaine and homocysteine concentrations under standard and
postmethionine load conditions in healthy male subjects. American Journal of Clinical Nutrition 87,
577-585.
Atkinson, W., Slow, S., Elmslie, J., Lever, M., Chambers, S.T., y George, P.M. 2009. Dietary and
supplementary betaine: effects on betaine and homocysteine concentrations in males. Nutrition,
Metabolism & Cardiovascular Diseases 19, 767-773.
Atkinson, D.E. y Bourke, E. 1984. The role of ureagenesis in pH homeostasis. Trends in Biochemical
Sciences 9, 297-300.
Avenell, A., Richmond, P.R., Lean, M.E. y Reid, D.M. 1994. Bone loss associated with a high fibre weight
reduction diet in postmenopausal women. European Journal of Clinical Nutrition 48, 561–566.
‐ 104 ‐
Bach Knudsen, K.E., Lærke, H.N., Steenfeldt, S., Hedemann, M.S. y Jørgensen, H. 2006. In vivo methods
to study the digestion of starch in pigs and poultry. Animal Feed Science and Technology 130, 114-
135.
Bagnasco, S., Balaban, R., Fales, H.M., Yang, Y.M. y Burg, M. 1986. Predominant osmotically active
organic solutes in rat and rabbit renal medullas. Journal of Biological Chemistry 261, 5872-5877.
Balistreri, W.F. y Shaw, L.M. 1987. Liver function. Fundamentals of Clinical Biochemistry. NW Tietz 3,
729-761.
Banni, S., Carta, G., Angioni, E., Murru, E., Scanu, P., Melis, M.P., Bauman, D.E., Fischer, S.M. y Ip, C.
2001. Distribution of conjugated linoleic acid and metabolites in different lipid fractions in the rat liver.
Journal of Lipid Research 42, 1056-1061.
Barb, C.R. y Kraeling, R.R. 2004. Role of leptin in the regulation of gonadotropin secretion in farm animals.
Animal Reproduction Science 82, 155-167.
Barb, C.R., Kraeling, R.R. y Rampacek, G.B. 2002. Metabolic regulation of the neuroendocrine axis in
pigs. Reproduction Supplement 59, 203-217.
Barea, R., Nieto, R., Lara, L., García, M.A., Vílchez, M.A. y Aguilera, J.F. 2006. Effects of dietary protein
content and feeding level on carcass characteristics and organ weights of Iberian pigs growing
between 50 and 100 kg live weight. Animal Science 82, 405-413.
Barea, R., Dubois, S., Gilbert, H., Sellier, P., Van Milgen, J. y Noblet, J. 2010. Energy utilization in pigs
selected for high and low residual feed intake. Journal of Animal Science 88, 2062-2072.
Barea, R., Nieto, R. y Aguilera, J.F. 2007. Effects of the dietary protein content and the feeding level on
protein and energy metabolism in Iberian pigs growing from 50 to 100 kg body weight. Animal 1, 357-
365.
‐ 105 ‐
Barea, R., Nieto, R., Vitari, F., Domeneghini, C. y Aguilera, J.F. 2011. Effects of pig genotype Iberian v.
Landrace×Large White) on nutrient digestibility, relative organ weight and small intestine structure at
two stages of growth. Animal 5, 547-557.
Barter, P.J. 1994. High density lipoproteins and plasma cholesterol transport. Acta Bioquímica Clínica
Latinoamerica 28, 359-378.
Bassaganya-Riera, J. y Hontecillas, R. 2006. CLA and n-3 PUFA differentially modulate clinical activity
and colonic PPAR-responsive gene expression in a pig model of experimental IBD. Clinical Nutrition
25, 454-465.
Bassaganya-Riera, J., Hontecillas, R. y Beitz, D.C. 2002. Colonic anti-inflamamatory mechanism of
conjugated linoleic acid. Clinical Nutrition 21, 451-459.
Bassaganya-Riera, J., Hontecillas-Magarzo, R., Bregendahl, K., Wannemuehler, M.J. y Zimmerman, D.R.
2001. Effects of dietary conjugated linoleic acid in nursery pigs of dirty and clean environments on
growth, empty body composition, and immune competence. Journal of Animal Science 79, 714-721.
Bauer, J.E. 1997. Metabolismo comparado de lípidos y lipoproteínas. Pet´s Ciencia 13, 362-376.
Bauman, D.E., Baumgard, L.H., Corl, B.A. y Griinari, J.M. 1999. Biosynthesis of conjugated linoleic acid in
ruminants. In Proceedings of the American Society of Animal Science. http://
www.asas.org/jas/symposia/proceedings/0937.pdf
Becerril-Herrera, M., Mota-Rojas, D. Guerrero-Legarreta, I., Schunemann de Aluja, A., Lemus-Flores, C.,
González-Lozano, M., Ramírez-Necoechea, R y Alonso-Spilsbury, M. 2009. Aspectos relevantes del
bienestar del cerdo en tránstio. Veterinaria México 40, 315-329.
Bee, G. 2000a. Dietary conjugated linoleic acids alter adipose tissue and milk lipids of pregnant and
lactating sows. Journal of Nutrition 130, 2292-2298.
‐ 106 ‐
Bee, G., 2000b. Dietary conjugated linoleic acid consumption during pregnancy and lactation influences
growth and tissue composition in weaned pigs. Journal of Nutrition 130, 2981-2989.
Beermann, D.H. y Dunshea, F.R. 2005. Animal agriculture's future through biotechnology. Metabolic
modifiers for use in animal production. Council for agricultural science and technology 30, 1-12.
Bejerholm, C. y Barton-Gade, P.A. 1986. Effect of intramuscular fat level of eating quality of pig meat.
Proceedings of the 32nd European meeting of meat research Workers. Ghent, Belgium, 387-391.
Belury, M.A. 2002. Inhibition of carcinogenesis by conjugated linoleic acid: potential mechanisms of action.
Journal of Nutrition 132, 2995–2998.
Benito, P., Nelson, G.J., Kelley, D.S., Bartolini, G., Schmidt, P.C. y Simon, V. 2001. The effect of
conjugated linoleic acid on plasma lipoproteins and tissue fatty acid composition in humans. Lipids
36, 229-236.
Beppu, F., Hosokawa, M., Tanaka, L., Kohno, H., Tanaka, T. y Miyashita, K. 2006. Potent inhibitory effect
of trans9, trans 11 isomer of conjugated linoleic acid on growth of human colon cancer cells. Journal
of Nutritional Biochemistry 17, 830-836.
Berg R.T., Andersen B.B. y Liboriussen T., 1978. Growth of bovine tissues. 1. Genetic influences on
growth patterns of muscle, fat and bone in young bulls. Animal Production 26, 245-258.
Bhattacharya, A., Banu, J., Rahman, M., Causey, J. y Fernandes, G. 2006. Biological effects of
conjugated linoleic acid in health and disease. Journal of Nutrition and Biochemistry 17, 789-810.
Bissonauth, V., Chouinard, Y, Marin, J., Leblanc, N., Richard, D. y Jacques, H. 2006. The effects of
t10,c12 CLA isomer compared with c9,t11 CLA isomer on lipid metabolism and body composition in
hamsters. Journals of Nutrition and Biochemistry 17, 597-603.
‐ 107 ‐
Blankson, H., Stakkestad, J.A., Fagertun, H., Thom, E., Wadstein, J. y Gudmundsen, O. 2000. Conjugated
linoleic acid reduces body fat mass in overweight and obese humans. Journal of Nutrition 130, 2943–
2948.
Blaxter, K. 1989. The minimal metabolism. In Energy Metabolism in Animals and Man. Cambridge, MA:
Cambridge University Press, 120-145.
Bloomer, R.J., Farney, T.M. y Trepanowski, J.F. 2011. Effect of betaine supplementation on plasma
nitrate/nitrite in exercisetrained men. Journal of the International Society of Sports Nutrition 8, 1–7.
Bonen, A., Tandon, N.N., Glatz, J.F. J J F P Luiken, J.J.F.P. y Heigenhauser, G.J.F. 2006. The fatty acid
transporter FAT/CD36 is upregulated in subcutaneous and visceral adipose tissues in human obesity
and type 2 diabetes. International Journal of Obesity 30, 877-883.
Bontempo, V., Sciannimanico, D., Pastorelli, G., Rossi, R., Rosi, F. y Corino, C. 2004. Dietary conjugated
linoleic acid positively affects immunologic variables in lactating sow and piglets. Journal of
Nutrition 134, 817-824.
Borum, P.R. y Broquist, H.P. 1977. Purification of S-adenosylmethionine: epsilon-N-L-lysine
methyltransferase. The first enzyme in carnitine biosynthesis. Journal of Biological Chemistry 252,
5651–5655
Brody S., 1945. Bio-energetics and growth: with special referente to the efficiency complex in domestic
animals. Reinhold Plub. Corp., New York.
Brooks, G.A. 1987. Lactate production under fully aerobic conditions: the lactate shuttle during rest and
exercise. Federation Proceedings 45, 2924–2929.
Brossard, Y. y col. 1988. Estudio de a function de enlace bilirrubina-albúmina de dos preparaciones de
albúmina humana. Archives Francaises de Pediatrie 45, 91.
‐ 108 ‐
Brown, M.J. y McIntosh, M.K. 2003. Conjugated Linoleic Acid in Humans: Regulation of Adiposity and
Insulin Sensitivity. Journal of Nutrition 133, 3041-3046.
Brownbill, R.A., Petrosian, M. y Ilich, J.Z. 2005. Association between dietary conjugated linoleic acid and
bone mineral density in postmenopausal women. The Journal of the American College and Nutrition
24, 177-181.
Bruins, M.J., Soeters, P.B. y Deutz, N.E. 2000. Endotoxemia affects organ protein metabolism differently
during prolonged feeding in pigs. Journal of Nutrition 130, 3003-3013.
BSAS, British Society of Animal Science. 2003. Nutrient requirement standards for pigs. BSAS, Penicuik,
United Kingdom.
Burrin, D.G., Ferrell, C.L., Eisemann, J.H., Britton, R.A. y Nienaber, J.A. 1989. Effect of level of nutrition on
splanchnic blood flow and oxygen consumption in sheep. British Journal of Nutrition 62, 23-34.
Buxadé, C. y Daza, A. 2001. Porcino Ibérico: Aspectos claves. Ediciones Mundiprensa. Madrid. España.
Cadogan, D.J., Campbell, R.G., Harrison, D. y Edwards, A.C. 1993. The effects of betaine on the growth
performance and carcass characteristics of female pigs. In E.S. Batterham (Ed.), Manipulating Pig
Production IV (pp. 219). Attwood, Victoria, Australia: Autralasian Pigs Science Association.
Campbell, R.G., Morley, W.C. y Zabaras-Krick, B. 1997. The effects of betaine on protein and energy
metabolism in pigs. In Manipulating Pig Production VI, p. 243 [PD Cranwell, editor]. Werribee,
Australia: Australian Pig Science Association.
Campbell, R.G., Johnson, R.J., Taverner, M.R. y King, R.H. 1991. Interrelationships between exogenous
porcine somatotropin (PST) administration and dietary protein and energy intake on protein
deposition capacity and energy metabolism of pigs. Journal of Animal Science 69, 1522-1531.
Cera, K.R. y Schinckel, A.P. 1995. Carcass and performance responses to feeding betaine in pigs. Journal
of Animal Science 73, 82.
‐ 109 ‐
Chajes V., Lavillonniere F., Ferrari P., Jourdan M.L., Pinault M., Maillard V., Sebedio J.L. y Bougnoux P.
2002. Conjugated linoleic acid content in breast adipose tissue is not associated with the relative risk
of breast cancer in a population of French patients. Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention
11, 672-673.
Chajes V., Lavillonniere F., Maillard V., Giraudeau B., Jourdan M.L., Sebedio J.L. y Bougnoux P. 2003.
Conjugated linoleic acid content in breast adipose tissue of breast cancer patients and the risk of
metastasis. Nutrition and Cancer 45, 17-23.
Chendrimada, T.P., Garcia, N.M., Pesti, G.M., Davis, A.J. y Bakalli, R.I. 2002. Determination of the betaine
content of feed ingredients using high-performance liquid chromatography. Journal of the Science of
Food and Agriculture 82, 1556-1563.
Chin, S.F., Liu, W., Storkson, J.M., Ha, Y.L. y Pariza, M.W. 1992. Dietary sources of conjugated dienoic
derivatives of linoleic acid, a newly recognized class of anticarcinogénesis. Journal of Food
Composition and Analysis 5, 185-197.
Cho, E., Zeisel, S.H., Jacques, P., Selhub, J., Dougherty, L., Colditz, G.A. y Willett, W.C. 2006. Dietary
choline and betaine assessed by food-frequency questionnaire in relation to plasma total
homocysteine concentration in the Framingham Offspring Study. American Journal of Clinic Nutrition
83, 905–911.
Cholewa, J.M., Wyszczelska-Rokiel, M., Glowacki, R., Jakubowski, H., Matthews, T., Woods, R., Stuart,
A.S.C. y Paolone, V. 2013. Effects of betaine on body composition, performance, and homocysteine
thiolactone. Journal of the International Society of Sports Nutrition 10, 39-51.
Christie, W.W., Dobson, G. y Gunstone, F.D. 1997. Isomers of commercial samples of conjugated linoleic
acid Journal of the American Oil Chemists' Society 74, 1231.
Clarke, W.C., Virtanen, E., Blackburn, J. y Higgs, D. 1994. Effects of a dietary betaína/amino acid additive
on growth and seawater adaptation in yearling Chinook salmon. Aquaculture 121, 137-145.
‐ 110 ‐
Clemente, I., Membrillo, A., Azor, P., Dorado, G., Rodero, A. y Molina, A. 2006. Algunas consideraciones
sobre las diferentes clasificaciones del tronco porcino ibérico: una propuesta integradora. Sólo Cerdo
Ibérico 16, 7-18.
Cole, D.J.A., White, M.R., Hardy, B. y Carrm J.R. 1976. Tissue growth in the pig. Animal Production 26,
245-258.
Coma, J., Carrion, D. y Zimmerman, D.R. 1995. Use of plasma urea nitrogen as a rapid response criterion
to determine the lysine requirement of pigs. Journal of Animal Science 73, 82.
Conde-Aguilera, J.A., Aguinaga, M.A., Lara, L., Aguilera, J.F. y Nieto, R. 2011. Carcass traits and organ
weights of 10-25-kg body weight Iberian pigs fed diets with different protein-to-energy ratio. Animal
Feed Science and Technology 164, 116-124.
Cooney, C.A., Dave, A.A. y Wolff, G.L. 2002. Maternal methyl supplements in mice affect epigenetic
variation and DNA methylation of offspring. Journal of Nutrition 132, 2393–2400.
Coppo, J.A. 2001. Fisiología Comparada del Medio Interno, Dunken, Buenos Aires, 297.
Cordero, G. 2010. Utilización de ácido linoleico conjugado en alimentación porcina. Tesis Doctoral.
Universidad Complutense de Madrid.
Corino, C., Pastorelli, G., Rosi, F., Bontempo, V. y Rossi, R. 2009. Effect of dietary conjugated linoleic acid
supplementation in sows on performance and immunoglobulin concentration in piglets. Journal of
Animal Science 87, 2299-2305.
Corino, C., Musella, M., Pastorelli, G., Rossi, R., Paolone, K., Costanza, L., Manchisi, A. y Maiorano, G.
2008. Influences of dietary conjugated linoleic acid (CLA) and total lysine content on growth, carcass
characteristics and meat quality of heavy pigs. Meat Science 79, 307-316.
Corino, C., Magni, S., Pagliarini, E., Rossi, R., Pastorelli, G. y Chiesa, L.M. 2002. Effects of dietary fats on
meat quality and sensoty characteristics of heavy pig loins. Meat Science 60, 1-8.
‐ 111 ‐
Corl, B.A., Baumgard, L.H., Dwyer, D.A., Griinari, J.M., Phillips, B.S. y Bauman, D.E. 2001. The role of D9-
desaturase in the production of cis-9, trans-11 CLA. The Journal of Nutritional Biochemistry 12, 622-
630.
Cortez-Hernández, C.A., Maldonado-Garza, H.J., Bosques-Padilla, F.J., Garza-Lara, C.I., Gutiérrez-
Sánchez, J.B. y Elizondo-Riojas, G. 2009. Importancia del gradiente de presión venosa hepática en
pacientes con cirrosis hepática. Medicina Universitaria 11, 260-266.
Craig, S.A.S. 2004. Betaine in human nutrition. American Journal of Clinical Nutrition 80, 539–549.
Craig, S.S, Craig, S.A., Ganio, M.S., Maresh, C.M., Greg, H., da Costa, K. y Zeisel, S.H. 2010. The
betaine content of sweat from adolescent females. Journal of the International Society of Sports
Nutrition 7, 3.
Cromwell, G.L., Lindemann, M.D., Randolph, J.R., Monegue, H.J., Laurent, K.M. y Parker, J.R. 1999.
Efficacy of betaine as a carcass modifier in finishing pigs fed normal and reduced energy diets.
Journal of Animal Science 77, 179.
Cusack S, Jewell C. y Cashman KD. 2005. The effect of conjugated linoleic acid on the viability and
metabolism of human osteoblast-like cells. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 72, 29– 39.
Davies A.S., 1983. Growth and development of pigs: a reanalysis of the effects of nutrition on body
composition. Journal of Agriculture Science, Cambridge 89, 257-266.
Dawson, K.M. y Baltz, J.M. 1997. Organic osmolytes and embryos: substrates of the Gly and beta
transport systems protect mouse zygote against the effects of raised osmolarity. Biology of
Reproduction 56, 1550–1558.
Dawson, R.M., Grime, D.W. y Lindsay, D.B. 1981. On the insensitivity of sheep to the almost complete
microbial destruction of dietary choline before alimentary-tract absorption. Biochemical Journal 196,
499–504.
‐ 112 ‐
De Deckere, E.A., van Amelsvoort, J.M., McNeill, G.P. y Jones, P. 1999. Effects of conjugated linoleico
acid (CLA) isomers on lípid o levels and peroxisome proliferation in the hamster. British Journal of
Nutrition 82, 309-317.
Defronzo, R.A. 1987. Use of the splanchnic/hepatic balance technique in the study of glucose metabolism.
Baillière's Clinical Endocrinology and Metabolism 1, 837-862.
De Lange, C.F. M., Morel, P.C. H. y Birkett, S.H. 2003. Modeling chemical and physical body composition
of the growing pig. Journal of Animal Science 81, 159-165.
Delany, J.P., Blohm, F., Truett, A.A., Scimeca, J.A. y West, D.B. 1999. Conjugated linoleic acid rapidly
reduces body fat content in mice withouth affecting energy intake. American Journal of Physiology
276, 1172-1179.
De la Torre, A., Debiton, E., Juaneda, P., Durand, D., Chardigny, J.M., Barthomeuf, C., Bauchart, D.
y Gruffat D. 2006. Beef conjugated linolic acid isomers reduce human cáncer cell growth even when
associated with other beef fatty acids. British Journal of Nutrition 95, 346-352.
Del Favero, S., Roschel, H., Artioli, G., Ugrinowitsch, C., Tricoli, V., Costa, A., Barroso, R., Negrelli, A.L.,
Otaduy, M.C., da Costa, L.C., Lancha-Junior, A.H. y Gualano, B. 2011. Creatine but not betaine
supplementation increases muscle phosphorylcreatine content and strength performance. Amino
Acids 42, 2299–2305.
Demaree, S.R., Gilbert, C.D., Mesmann, H.J. y Simth, S.B. 2002. Conjugated linoleic acid differentially
modifies fatty acid composition in subcellular fractions of muscle and adipose tissue but not adiposity
of postweaning pigs. Journal of Nutrition 132, 2372-2379.
De Pedro, E. 1987. Estudio de los factores sexo y peso de sacrificio sobre características de la canal de
cerdo ibérico. Tesis Doctoral. Universidad Córdoba.
‐ 113 ‐
Desreumaux, P., Dubuquoy, L. y Nutten, S. 2001. Attenuation of colon inflammation through activators of
the retinoid X receptor (RXR/peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARgamma)
hererodimer. A basis for new therapeutic strategies. Journal of Experimental Medicine 193, 827-838.
Devol, D.L., Mckeith, F.K., Bechtel, P.J., Novakofski, J., Shanks, R.D. y Carr, T.R. 1988. Variation in
composition and palatability traits and relationships between muscle characteristics and palatability in
a random sample of pork carcasses. Journal of Animal Science 66, 385-395.
Dietz, J. y Schwartz, J. 1991. Growth hormone alters lipolysis and hormone-sensitive lipase activity in 3T3-
F442A adipocytes. Metabolism 40, 800-806.
Dollery, C.T. 18983. Farmacología Clínica. En: Fisiopatología. Principios Biológicos de la Enfermedad,
L.L.A. Smith y S. Thier (eds) Editorial Médica Panamericana, S.A., Buenos Aires, 1417-1475.
Doornenbal, H. 1971. Growth, development and chemical composition of the pig. I. Lean tissue and
protein. Growth 35, 281-295.
Doyle, L., Jewell, C., Mullen, A., Nugent, A.P., Roche, H.M. y Cashman, K.D. 2005. Effect of dietary
supplementation with conjugated linoleic acid on markers of calcium and bone metabolism in healthy
adult men. European Journal of Clinical Nutrition 59, 432-440.
Dwyer, D.S., Vannucci, S.J. y Simpson, I.A. 2002. Expression, regulation and functional role of glucose
transporters (GLUTs) in brain. International Review of Neurobiology 51, 159–188.
Dyson, M.C., Alloosh, M., Vuchetich, J.P., Mokelke, E.A. y Sturek, M. 2006. Components of metabolic
syndrome and coronary artery disease in female Ossabaw swine fed excess atherogenic diet.
Comparative Medicine 56, 35-45.
Early, R.J., McBride, B.W. y Ball, R.O. 1990. Growth and metabolism in somatotropin-treated steers: III.
Protein synthesis and tissue energy expenditures. Journal of Animal Science 68, 4153-4166.
‐ 114 ‐
Edelstone, D.I. y Holzman, I.R. 1981. Oxygen consumption by the gastrointestinal tract and liver in
conscious newborn lambs. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology
240, 297-304.
Eisemann, J.H., Huntington, G.B. y Ferrell, C.L. 1987. Blood flow to hindquarters of steers measured by
transit time ultrasound and indicator dilution. Journal of Dairy Science 70, 1385-1390.
Eklund, M., Bauer, E., Wamatu, J. y Mosenthin, R. 2005. Potential nutritional and physiological functions
of betaine in livestock. Nutrition Research Reviews 18, 31-48.
Ellis, P.R., Roberts, F.G., Low, A.G. y Morgan, L.M. 1995. The effect of high-molecular-weight guar gum
on net apparent glucose absorption and net apparent insulin and gastric inhibitory polypeptide
production in the growing pig: relationship to rheological changes in jejunal digesta. British Journal of
Nutrition 74, 539-556.
Elsey F.W., McDonald I. y Fowler V.R., 1964. The effect of plane of nutrition on the carcass of pigs and
lambs when variations in fat content are excluded. Animal Production 6, 141-154.
Emmert, J.L., Webel, D.M., Biehl, R.R., Griffiths, M.A., Garrow, L.S., Garrow, T.A. y Baker, D.H. 1998.
Hepatic and renal betainehomocysteine methyltransferase activity in pigs as affected by dietary
intakes of sulfur amino acids, choline, and betaine. Journal of Animal Science 76, 606-610.
Esteve-Garcia, E. y Mack, S. 2000. The effect of dl-methionine and betaine on growth performance and
carcass characteristics in broilers. Animal Feed Science and Technology 87, 85-93.
EU-Safety Data Sheet. 1999a. Product Name: Betaine Hydrochloride.
http://www.aminoactives.com/pdf/eumsds/BetaineHydrochloride.pdf
EU-Safety Data Sheet. 1999b. Product Name: Betaine.
http://www.aminoactives.com/pdf/eumsds/BetaineAnhydrous.pdf
‐ 115 ‐
EU-Safety Data Sheet. 1999c. Product Name: Betaine Monohydrate.
http://www.aminoactives.com/pdf/eumsds/BetaineMonohydrate.pdf
Evans, M., Brown, J. y McIntosh, M. 2002. Isomer-specific effects of conjugated linoleic acid (CLA) on
adiposity and lipid metabolism. Journal of Nutrition and Biochemistry 13, 508.
Evans D.G. y Kempster A.J., 1979. The effects of genotype, sex and feeding regimen on pig carcass
development. 1. Primary components, tissues and joints. Journal of Agriculture Science, Cambridge
93, 339-347.
Feng, J. y Xu, Z.R. 2001. Effect of betaine on muscle, liver and serum amino acid composition in finishing
swine. Journal of Zhejiang University Agriculture and Life Sciences 27, 107-110.
Fernández, A., De Pedro, E., Núñez, N., Silió, L., García-Casco, J. y Rodríguez, C. 2003. Genetic
parameters for meat and fat quality and carcass composition traits in Iberian pigs. Meat Science 64,
405-410.
Fernández, C., Gallego, L. y López-Bote, C.J. 1998. Effect of betaine on fat content in growing lambs.
Animal Feed Science and Technology 73, 329–338.
Fernández, X., Monin, G., Talmant, A., Mourot, J. y Lebret, B. 1999. Influence of intramuscular fat content
on the quality of pig meat. Composition of the lipid fraction and sensory characteristics of m.
Longissimus lumborum. Meat Science 53, 59-65.
Fernández-Fígares, I., Lachica, M., Martín, A., Nieto, R., González-Valero, L., Rodríguez-López, J.M. y
Aguilera, J.F., 2012. Impact of dietary betaine and conjugated linoleic acid on insulin sensitivity,
protein and fat metabolism of obese pigs. Animal 6, 1058-1067.
Fernández-Fígares, I., Conde-Aguilera, J.A., Nieto, R., Lachica, M. y Aguilera, J.F. 2008. Synergistic
effects of betaine and conjugated linoleic acid on the growth and carcass composition of growing
Iberian pigs. Journal of Animal Science 86, 102-111.
‐ 116 ‐
Fernández-Fígares, I., Lachica, M., Nieto, R., Rivera-Ferre, M.G. y Aguilera, J.F. 2007. Serum profile of
metabolites and hormones in obese (Iberian) and lean (Landrace) growing gilts fed balanced or
lysine deficient diets. Livestock Science 110, 73-81.
Fernández-Fígares I, Wray-Cahen D, Steele NC, Campbell RG, Hall DD, Virtanen E, y Caperna, T.J.
2002. Effect of dietary betaine on nutrient utilization and partitioning in the young growing feed-
restricted pig. Journal of Animal Science 80, 421-428.
Fernández-Robredo, P., Moya, D., Rodríguez, J.A. y García-Layana, A. 2005. Vitamins C and E reduce
retinal oxidative stress and nitric oxide metabolites and prevent ultrastructural alterations in porcine
hypercholesterolemia. Investigation Ophthalmology Visual Science 46, 1140-1146.
Ferrell, C.L. 1988. Contribution of visceral organs to animal energy expenditures. Journal of Animal
Science, 66 Supplement, 3, 23-34.
Fenton, J.P., Roehrig, K.L., Mahan, D.C. y Corley, J.R. 1985. Effect of swine weaning age on body fat and
lipogenic activity in liver and adipose tissue. Journal of Animal Science 60, 190-199.
Fick, A. 1870. Ueber die Messung des Blutquantums in den Herzventrikeln. Verhandlungen der
Physikalisch-Medicinischen Gesellschaft in Würzburg 2, 16-17.
Firman, J.D. y Remus, J.C. 1999. Relationship between cystine and betaine in low methionine diets.
Poultry Science 78, 135.
Florou-Paneri, P., Kufidis, D.C., Vassilopoulos, V.N. y Spais, A.V. 1997. Performance of broiler chicks fed
on low choline and methionine diets supplemented with betaine. Epitheorese Zootehnikes Epistemes
24, 103-111.
Fortin A., Wood J.D. y Whelehan O.P., 1987. Breed and sex effects on the development and proportions
of muscle, fat and bone in pigs. Journal of Agriculture Science, Cambridge 108, 39-45.
‐ 117 ‐
Freire, J.P.B., Peiniau, J., Cunha, L.F., Almeida, J.A.A. y Aumaitre, A. 1998. Comparative effects of dietary
fat and fibre in Alentejano and Large White piglets: digestibility, digestive enzymes and metabolic
data. Livestock Production Science 53, 37-47.
Fritsche, J.R.R. y Steinhart, H. 1999. Formation, contents, and estimation of daily intake of conjugated
linoleic acid isomers and trans-fatty acids in foods. Advances in Conjugated Linoleic Acid Research
1, 378-96.
Fruchart, J.C. y Sézille, G. 1981. Lípidos y lipoproteínas. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 15, 97-
159.
Futakuchi, M., Cheng, J.L., Kimoto, N., Cho, Y.M., Iwata, T., Kasai, M., Tokudome, S. y Shirai, T. 2002.
Inhibition of conjugated fatty acids derived from safflower of perilla oil of induction and development
of mammary tumor in rats induced by 2-amino-1methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine (PhIP).
Cancer Letters 178, 131-139.
Galassi, G., Crovetto, G. M., Rapetti, L. y Tamburini, A. 2004. Energy and nitrogen balance in heavy pigs
fed different fibre sources. Livestock Production Science 85, 253-262.
Garcia, M.N., Pesti, G.M. y Bakalli, R.I. 2000. Influence of dietary protein level on the broiler chicken’s
response to methionine and betaine supplements. Poultry Science 79, 1478-1484.
García-Casco, J., Fernández, A., de Pedro, E., Rodríguez, C. y Silió, L. 2008. Moderado antagonismo
genético entre rendimiento en piezas nobles y contenido en grasa intramuscular en cerdos Ibéricos.
ITEA 104 (2) 169-174
García-Valverde, R., Barea, R., Lara, L., Nieto, R. y Aguilera, J. F. 2008. The effects of feeding level upon
protein and fat deposition in Iberian heavy pigs. Livestock Science 114, 263-273.
García-Valverde, R. 2007. Determinación de la contribución relativa de bellota y hierba a la ingesta
energética y proteica global del cerdo Ibérico en montanera. Estudio de la interacción de dichos
recursos desde los puntos de vista digestivo y metabólico. Tesis Doctoral. Universidad de Córdoba.
‐ 118 ‐
Garrow, T.A. 1996. Purification, kinetic properties, and cDNA cloning of mammalian betainehomocysteine
methyltransferase. The Journal of Biological Chemistry 271, 22831-22838.
Gilbert, E.R. y Liu, D. 2012. Epigenetics: the missing link to understanding beta-cell dysfunction in the
pathogenesis of type 2 diabetes. Epigenetics 7, 841-852.
Girard, J.P., Buscarles C., Berdagué J.L. y Ramihone M. 1989. Fleischwirtsch, 69, 255. Girasole, G.,
Jilka, R.L., Passeri, G., et al. 1992. 17 beta-estradiol inhibits interleukin-6 production by bone
marrow-derived stromal cells and osteoblasts in vitro: a potential mechanism for the antiosteoporotic
effect of estrogens. Journal of Clinical Investigation 89, 883-891.
Goestsch, A.L., Ferrell, C.L. y Freetly, H.C. 1994. Effects of different supplements on splanchnic oxygen
consumption and net fluxes of nutrients in sheep consuming bromegrass Bromus inermis hay ad
libitum. British Journal of Nutrition 72, 701-712.
González Añover, P., Encinas, T., Gomez Izquierdo, E., Sanz, E., Letelier, C. A., Torres Rovira, L. y
Gonzalez Bulnes, A. 2010. Advanced onset of puberty in gilts of Thrifty genotype (Iberian Pig).
Reproduction in Domestic Animals 45, 1003-1007.
González-Valero, L., Rodríguez-López, J.M., Lachica, M. y Fernández-Fígares, I., 2015. Contribution of
portal-drained viscera to heat production in Iberian gilts fed a low protein diet: comparison to
Landrace. Journal of Science and Food Agriculture (in press).
González-Valero, L., Rofríguez-López, J., Lachica, M. y Fernández-Fígares, I. 2012. Differences in portal
appearance of lysine and methionine in Iberian and Landrace pigs. Journal of Animal Science 90,
110-112.
Gondret, F., Ferré, P. y Dugail, I. 2001. ADD-1/SREBP-1 is a major determinant of tissue differential
lipogenic capacity in mammalian and avian species. Journal of Lipid Research 42, 106-113.
Graf, D., Kurz, A.K., Reinehr, R., Fischer, R., Kircheis, G. y Haussinger, D. 2002. Prevention of bile acid-
induced apoptosis by betaine in rat liver. Hepatology 36, 829-839.
‐ 119 ‐
Granger, D.N., Richardson, P.D.I., Kvietys, P.R. y Mortillaro, N.A. 1980. Intestinal blood flow.
Gastroenterology 78, 837-863.
Griinari, J.M., Corl, B.A., Lacy, S.H., Chouinard, P.Y., Nurmela, K.V. y Bauman, D.E. 2000. Conjugated
linoleic acid is synthesize dendogenously in lactating dairy cows by D9.desaturase. Journal of
Nutrition 130, 2285-2291.
Gu, Y., Schinckel, A.P. y Martin, T.G. 1992. Growth, development and carcass composition in five
genotypes of swine. Journal of Animal Science 70, 1719-1729.
Gunawan, A.M., Park, S.K., Pleitner, J.M., Feliciano, L., Grant, A.L. y Gerrard, D.E. 2007. Contractile
protein content reflects myosin heavy-chain isoform gene expression. Journal of Animal Science 85,
1247-1256.
Guyton, A.C. 1981. Capillary dynamics and exchange of fluid between the blood and interstitial fluid. In:
Textbook of Medical Physiology. Guyton, A.C. (eds) W.B. Saunders Company, 358-369.
Ha, Y.L., Grimm, N.K. y Pariza, M.W. 1989. Newly recognized anticarcinogenic fatty acids: Identification
and quantification in natural and processed cheeses. Journal of Agriculture and Food Chemistry 37,
75-81.
Ha, Y.L., Storkson, J. y Pariza, M.W. 1990. Inhibition of benzo(a)pyrene-induced mouse for estomach
neoplasia by conjugated dienoic derivates of linoleic acid. Cancer Research 50, 1097-1101.
Haljamae, H. 1987. Lactate metabolism. Intensive Care World 4, 118–121.
Hammond, J. 1932. Pigs for pork and pigs for bacon. p. 15. Royal Agricultural Society, Inglaterra.
Harita, N., Hayashi, T., Sato, K.K., Nakamura, Y., Yoneda, T., Endo, G. y Kambe, H. 2009. Lower serum
creatinine is a new risk factor of type 2 diabetes: the Kansai healthcare study. Diabetes Care 32,
424-426.
‐ 120 ‐
Haro, A.M., Artacho, R. y Cabrera-Vique, C. 2006. Linoleic Conjugated Acid: current interest in human
nutrition. Medicina Clínica (Barc) 127, 508-515.
Haussinger, D. 1998. Osmoregulation of liver cell function: signalling, osmolytes and cell heterogeneity.
Contributions to Nephrology 123, 185-204.
Haydon, K.D., Campbell, R.G. y Prince, T.J. 1995. Effect of dietary betaine additions and amino:calorie
ratio on performance and carcass traits of finishing pigs. Journal of Animal Science 73, 83.
Hayek, M.G., Han, S.N., Wu, D., Watkins, B.A., Meydani, M., Dorsey, J.L., Smith, D.E. y Meydani, S.N.
1999. Dietary conjugated linoleic acid influences the immune response of young and old
C57BL/6NCrlBR mice. Journal of Nutrition 129, 32-38.
Hayes, K.C., Pronczuk, A., Cook, M.W. y Robbins, M.C. 2003. Betaine in sub-acute and sub-chronic rat
studies. Food Chemical Toxicoly 4, 1685-1700.
Heaps, C.L., Tharp, D.L. y Bowles, D.K. 2005. Hypercholesterolemia abolishes voltage-dependent K+
channel contribution to adenosine-mediated relaxation in porcine coronary arterioles. American
Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology 288, 568-576.
Hecker, J.F. 1974. Experimental surgery on small ruminants. Butterworths and Co., London.
Hellerstein, M.K., Neese, R.A., Letscher, A., Linfoot, P. y Turner, S. 1997. Hepatic glucose-6-phosphatase
flux and glucose phosphorylation, cycling, irreversible disposal, and net balance in vivo in rats.
Measurement using the secreted glucuronate technique. Metabolism 46, 1390-1398.
Hellerstein, M.K., Schwarz, J.M. y Neese, R.A. 1996. Regulation of hepatic de novo lipogenesis in
humans. Annual Review of Nutrition 16, 523-557.
Hochachka, P.W. y Somero, G.N. 1984. Biochemical Adaptation. Princeton, NJ: Princeton University
Press.
‐ 121 ‐
Hoffman, J.R., Ratamess, N.A., Kang, J., Rashti, S.L. y Faigenbaum, A.D. 2009. Effect of betaine
supplementation on power performance and fatigue. Journal of the International Society of Sports
Nutrition 6, 7.
Hoffman, J.R., Ratamess, N.A., Kang, J., Gonzalez, A.M., Beller, N.A. y Craig, S.A. 2011. Effect of 15
days of betaine ingestion on concentric and eccentric force outputs during isokinetic exercise. The
Journal of Strength & Conditioning Research 25, 2235–2241.
Hontecillas, R., Wannemeulher, M.J., Zimmerman, D.R., Hutto, D.L., Wilson, J.H., Ahn, D.U. y
Bassaganya-Riera, J. 2002. Nutritional regulation of porcine bacterial-induced colitis by conjugated
linoleic acid. Journal of Nutrition 132, 2019-2027.
Huang, Q.C., Han, X.Y., Xu, Z.R., Yang, X.Y., Chen, T. y Zheng, X.T. 2009. Betaine suppresses carnitine
palmitoyltransferase I in skeletal muscle but not in liver of finishing pigs. Livestock Science 126, 130-
135.
Huang, Q., Xu, Z., Han, X. y Li, W. 2008. Effect of dietary betaine supplementation on lipogenic enzyme
activities and fatty acid synthase mRNA expression in finishing pigs. Animal Feed Science and
Technology 140, 365–375.
Huang, Q.C., Xu, Z.R., Han, X.Y. y Li, W.F. 2007. Effect of betaine on growth hormone pulsatile secretion
and serum metabolites in finishing pigs. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition 91, 85–
90.
Hue, L. 2001. Regulation of gluconeogenesis in liver. Handbook of Physiology. Oxford University Press.
Volume II: The endocrine páncreas and regulation of metabolism: 649-657.
Hunter, J. y Applewhite, T.H. 1986. Isomeric fatty acids in the US diet: levels and health perspectives. The
American Journal of Clinical Nutrition 44, 707-717.
Huntington, G.B. y Reynolds, C.K. 1987. Oxygen consumption and metabolite flux of bovine portal-drained
viscera and liver. Journal of Nutrition 117, 1167-1173.
‐ 122 ‐
Huntington, G.B., Reynolds, C.K. y Stroud, B H. 1989. Techniques for measuring blood flow in splanchnic
tissues of cattle. Journal of Dairy Science 72, 1583-1595.
Huntington, G.B. y Tyrrell, H.F. 1985. Oxygen consumption by portal-drained viscera of cattle: comparison
of analytical methods and relationship to whole body oxygen consumption. Journal of Dairy Science
68, 2727-2731.
Huxley, J.S. 1932. Problems of relative growth. 1st ed, pag. 4-37. Methnen, Londres.
Intine, R.V. y Sarras, M.P. Jr. 2012. Metabolic memory and chronic diabetes complications: potential role
for epigenetic mechanisms. Current Diabetes Reports 12, 551–559.
Ip, C., Ip, M.M., Loftus, T., Shoemaker, S. y Shea-Eaton, W. 2000. Cancer Epidemiology, Biomarkers and
Prevention 9, 689-696.
Ip, C., Chin, S.F. y Scimeca, J.A., 1991. Mammary cancer prevention by conjugated linoleic acid. Cancer
Research 50, 1097-1101.
Ip, C., Singh, M., Thompson, H.J. y Scimeca, J.A. 1994. Conjugated linoleic-acid suppresses mammary
carcinogenesis and proliferative activity of the mammary-gland in the rat. Cancer Research 54, 1212-
1215.
Irtun, Ø., Martini, W. Z., Ozkan, O. y Wolfe, R. R. 2001. Caval backflow: A potential problem during blood
sampling from the hepatic vein. Metabolism 50, 189-193.
Isserty, A. y Ortigues, I. 1994. Méthodes d'exploitation de données concernant les débits sanguins
mesurés au niveau des viscères et du train-arrière chez la brebis. Reproduction Nutrition
Development 34, 399-413.
Isserty, A., Ortigues, I. y Remond, D. 1998. Mesure des débits splanchniques par dilution de marqueur:
comparaison de quatre méthodes de dosage de l'acide para-amino-hippurique. Reproduction
Nutrition Development 38, 93-106.
‐ 123 ‐
Jahreis, G., Fritsche, J., Mockel, P., Schone, F., Moller, U. y Steinhart, H. 1999. The potential
anticarcinogenic conjugated linoleic acid, cis-9,trans-11 C18:2, in milk of different species: cow, goat.
ewe, sow, mare, woman. Nutrition Research 19, 1541-1549.
Jensen, R.G., Lammi-Keep, C.J., Hill, D.H., Kind, A.J. y Henderson, B.A. 1998. The anticarcinogenic
conjugated fatty acid, 9c,11t-18:2, in human milk: Conformation of its presence. Journal of Human
Lactation 14, 23-27.
Jensen, T.G., Englert, D.M. y Dudrick, S.J. 1983. Serum albumin. In: Nutritional Assessment. A manual of
practitioners. Jensen, T.G., Englert, D.M. y Dudrick, S.J. (ed) Appelton-Century-Croft/Norwalk,
Connecticut, pp. 170-175.
Jewell, C. y Cashman, K.D. 2003. The effect of conjugated linoleic acid and medium-chain fatty acids on
transepithelial calcium transport in human intestinal-like Caco-2 cells. British Journal of Nutrition 89,
639-647.
Jiang, R. y Carlson, M. 1997. The Snf1 protein kinase and its activating subunit, Snf4, interact with distinct
domains of the Sip1/Sip2/Gal83 component in the kinase comp lex. Mollecular and Cellular Biology
17, 2099–2106.
Joo, S.T., Lee, J.I., Ha, Y.L. y Park, G.B. 2002. Effects of dietary conjugated linoleic acid on fatty acid
composition, lipid oxidation, color and water-holding capacity of pork loin. Journal of Animal Science
80, 108-112.
Jutzeler van Wijlen, R.P. 2011. Long-term conjugated linoleic acid supplementation in humans - effects on
body composition and safety (review). European Journal of Lipid Science and Technology 113, 1077-
1094.
Kaneko, J.J. 1989. Clinical Biochemistry of Domestic Animals, 4th ed., Academic Press, San Diego, p.
832.
‐ 124 ‐
Karlsson, A. H., Klont, R. E. y Fernandez, X. 1999. Skeletal muscle fibres as factors for pork quality.
Livestock Production Science 60, 255-269.
Kathirvel, E., Morgan, K., Nandgiri, G., Sandoval, B.C., Caudill, M.A., Bottiglieri, T., French, S.W. y
Morgan, T.R. 2010. Betaine improves nonalcoholic fatty liver and associated hepatic insulin
resistance: a potential mechanism for hepatoprotection by betaine. The American Journal of
Physiology - Gastrointestinal and Liver Physiology 299, 1068–1077.
Katz, J. y McGarry, J.D. 1984. The glucose paradox. Is glucose a substrate for liver metabolism? Journal
of Clinical Investigation 74, 1901-1909.
Kay, J.K., Mackle, T.R., Auldist, M.J., Thomson, N.A. y Bauman, D.E. 2004. Endogenous synthesis of cis-
9, trans-11 conjugated linoleic acid in dairy cows fed fresh pasture. Journal of Dairy Science 87, 369-
378.
Katz, M. L. y Bergman, E. N. 1969. Simultaneous measurements of hepatic and portal venous blood flow
in the sheep and dog. American Journal of Physiology-Legacy Content 216, 946-952.
Kelley, D.S., Simon, V.A., Taylor, P.C., Taylor, P.C., Rudolph, I.L., Benito, P., Nelson, G.J., Mackey, B.E. y
Erickson KL. 2001. Dietary supplementation with conjugated linoleic acid increased its concentration
in human peripheral blood mononuclear cells, but did not alter their function. Lipids 36, 669–674.
Kelley N.S., Hubbard N.E. y Erickson K.L. 2007. Conjugated linoleic acid isomers and cancer. Journal of
Nutrition 137, 2599-2607.
Kelly, O. y Cashman, K.D. 2004. The effect of conjugated linoleic acid on calcium absorption and bone
metabolism and composition in adult ovariectomised rats. Prostaglandins Leukotrienes Essential
Fatty Acids 71, 295-301.
Kelly, O., Cusack, S., Jewell, C. y Cashman, K.D. 2003. The effect of polyunsaturated fatty acids,
including conjugated linoleic acid, on calcium absorption and bone metabolism and composition in
young growing rats. British Journal of Nutrition 90, 743–50.
‐ 125 ‐
Kettunen, H., Peuranen, S. y Tiihonen, K. 2001a. Betaine aids in the osmoregulation of duodenal
epithelium of broiler chicks, and affects the movement of water across the small intestinal epithelium
in vitro. Comparative Biochemistry and Physiology 129, 595–603.
Kettunen, H., Peuranen, S., Tiihonen, K. y Saarinen, M. 2001b. Intestinal uptake of betaine in vitro and the
distribution of methyl groups from betaine, choline, and methionine in the body of broiler chicks.
Comparative Biochemistry and Physiology 128, 269–278.
Kettunen, H., Tiihonen, K., Peuranen, S., Saarinen, M.T. y Remus, J.C. 2001c. Dietary betaine
accumulates in the liver and intestinal tissue and stabilizes the intestinal epithelial structure in healthy
and coccidia-infected broiler chicks. Comparative Biochemistry and Physiology 130, 759–769.
Keyser, J.W. 1987. Human plasma proteins: their investigation in pathological conditions. John Wiley &
Sons Inc.
Kidd, M.T., Ferket, P.R. y Garlich, J.D.1997. Nutritional and osmoregulatory functions of betaine. World’s
Poultry Science Journal 53, 125–139.
King, D.A., Behrends, J.M., Jenschke, B.E., Rhoades, R.D. y Smith, S.B. 2004. Positional distribution
metabolism in the mouse. American Journal of Physiology 44, 667- 672.
Kitt, S.J., Miller, P.S., Lewis, A.J. y Chen, H.Y. 1999. Effects of betaine and pen space allocation on
growth performance, plasma urea concentration and carcass characteristics of growing and finishing
barrows. Journal of Animal Science 77, 53.
Klasing, K.C., Adler, K.L., Resum, J.C. y Calvert, C.C. 2002. Dietary betaína increases intraepithelial
lymphocytes in the duodenum of coccidian-infected chicks and increases functional properties of
phagocytes. Journal of Nutrition 132, 2274-2282.
Knight, T.W., Knowles, S. y Death, A.F. 2003. Factors affecting the variation in fatty acid concentrations in
lean beef from grass-fed cattle in New Zealand and the implications for human health. New Zealand
Journal of Agriculture Research 46, 83-95.
‐ 126 ‐
Konstantinova, S.V., Tell, G.S., Vollset, S.E., Nygard, O., Bleie, O. y Ueland, P.M. 2008. Divergent
associations of plasma choline and betaine with components of metabolic syndrome in middle age
and elderly men and women. Journal of Nutrition 138, 914–920.
Koong, L.J., Nienaber, J.A. y Mersmann, H.J. 1983. Effects of plane of nutrition on organ size and fasting
heat production in genetically obese and lean pigs. Journal of Nutrition 113, 1626-1631.
Kouba, M., Bonneau, M. y Noblet, J. 1999. Relative development of subcutaneous, intermuscular, and
kidney fat in growing pigs with different body compositions. Journal of Animal Science 77, 822-629.
Kreider, R.B., Ferreira, M.P., Greenwood, M., Wilson, M. y Almada, A.L. 2002. Effects of conjugated
linoleic acid supplementation during resistance training on body composition, bone density, strength,
and selected hematological markers. The Journal of Strength & Conditioning Research 16, 325–334.
Kritchevsky, D., Tepper, S.A., Wright, S., Tso, P. y Czarnecki, S.K. 2000. Influence of conjugated linoleic
acid (CLA) on establishment and progression of atherosclerosis in rabbits.The Journal of the
American College of Nutrition 19, 472-477.
Kuznetsov, V.V. y Shevyakova, N.I.1997. Stress response of tobacco cells to high temperature and
salinity. Proline accumulation and phosphorylation of polypeptides. Physiologia Plantarum 100, 320–
326.
Kyriazakis, I. y Whittemore, C.T. 2006. Pig meat and carcass quality. In: Whittemore’s science and a
practice of pig production. 3 rd (ed). Blackwell publishing. 45-46.
Laguna Sánz, E. 1998. El cerdo ibérico en el próximo milenio. Madrid: Ediciones Mundi‐Prensa.
Lachica, M. y Aguilera, J.F. 2000. Estimation of energy costs of locomotion in Iberian pigs (Sus
mediterraneous). British of Journal of Nutrition 83, 35-51.
Laplace, J.P. 1970. Mensuration, in vivo et postmortem, et croissance de l’intestin grêle chez le porc,
Annales de Zootechnie 19, 465-469.
‐ 127 ‐
Larrabee, M.G. 1995. Lactate metabolism and its effects on glucose metabolism in an excised neural
tissue. Journal of Neurochemistry 64, 1734−1741.
Larsen, S.T., Wiegand, B.R., Parrish, F.C., Jr., Swan, J.E. y Sparks, J.C. 2009. Dietary conjugated linoleic
acid changes belly and bacon quality from pigs fed varied lipid sources. Journal of Animal Science
87, 285-295.
Larsen, T., Toubro, S. y Astrup, A. 2003. Efficacy and safety of dietary supplements containing CLA for
the treatment of obesity: evidence from animal and human studies. Journal of Lipid Research 44,
2234-2241.
Larson, G., Dobney, K., Albarella, U., Fang, M., Matisoo-Smith, E., Robins, J. y Cooper, A. 2005.
Worldwide phylogeography of wild boar reveals multiple centers of pig domestication.
Science 307, 1618-1621.
Law, R.O. y Burg, M.B. 1991. The role of organic osmolytes in the regulation of mammalian cell volume. In
Advances of Comparative and Environmental Physiology 9, 189–225
Lawrence, B.V., Schinckel, A.P., Adeola, O. y Cera, K. 2002. Impact of betaine on pig finishing
performance and carcass composition. Journal of Animal Science 80, 475–482.
Lee, E.C., Maresh, C.M., Kraemer, W.J., Yamamoto, L.M., Hatfield, D.L., Bailey, B.L., Armstrong, L.E.,
Volek, J.S., McDermott, B.P. y Craig SA.. 2010. Ergogenic effects of betaine supplementation on
strength and power performance. Journal of the International Society of Sports Nutrition 7, 27.
Lee, M.S., Kim, M.S., Park, S.Y. y Kang, C.W. 2006. Effects of betaine on ethanol-stimulated secretion of
IGF-I and IGFBP-1 in rat primary hepatocytes: involvement of p42/44 MAPK activation. World
Journal of Gastroenterology 12, 1718–1722.
Lee, K.N., Kritchevsky, D. y Pariza, M.W. 1994. Conjugated linoleic acid and atherosclerosis in rabbits.
Atherosclerosis 108, 19–25.
‐ 128 ‐
Lehninger, Nelson, Cox. 1993. Principios de Bioquímica. Segunda Edición. Ediciones Omega.
Le Rudulier, D., Ström, A.R., Dandekar, A.M., Smith, L.T. y Valentine, R.C. 1984. Molecular biology of
osmoregulation. Science 224, 1064-1068.
Lever, M. y Slow, S. 2010. The clinical significance of betaine, an osmolyte with a key role in methyl group
metabolism. Clinical Biochemistry 43, 732–744.
Lever, M., Sizeland, P.C, Bason, L.M., Hayman, C.M. y Chambers, S.T. 1994. Glycine betaine and proline
betaine in human blood and urine. Biochimica et Biophysica Acta 1200, 259-264
Lever, M., Sizeland, P.C., Frampton, C.M. y Chambers, S.T. 2004. Short and long-term variation of
plasma glycine betaine concentrations in humans. Clinical Biochemistry 37, 184-90.
Lever, M., George, P.M., Atkinson, W., Molyneux, S.L., Elmslie, J.L., Slow, S., Richards, A.M. y
Chambers, S.T. 2011. Plasma lipids and betaine are related in an acute coronary syndrome cohort.
PLoS ONE 6, 21666.
Li, Y., Seifert, M.F., Ney, D.M., Grahn, M., Grant, A. L., Allen, K. G. y Watkins, B. A. 1999. Dietary
conjugated linoleic acids alter serum IGF-I and IGF binding protein concentrations and reduce bone
formation in rats fed (n-6) or (n-3) fatty acids. Journal of Bone Mineral Research 14, 1153–1162.
Liew, C., Schut, H.A.J., Chin, S.F., Pariza, M.W. y Dashwood, R.H. 1995. Protection of conjugated linoleic
acids against 2-amino-3-methylimidazo[4,5f] quinoline-induced colon carcinogenesis in the F344 rat:
A study of inhibitory mechanisms. Carcinogenesis 16, 3037–3043.
Ling, C., Del Guerra, S., Lupi, R., Ronn, T., Granhall, C., Luthman, H., Masiello, P., Marchetti, P., Groop,
L. y Del Prato, S. 2008. Epigenetic regulation of PPARGC1A in human type 2 diabetic islets and
effect on insulin secretion. Diabetología 51, 615–622.
Lobley, G.E., Milne, V., Lovie, J.M., Reeds, P.J. y Pennie, K. 1980. Whole body and tissue
protein synthesis in cattle. British Journal of Nutrition 43, 491-502.
‐ 129 ‐
Löest, C.A., Titgemeyer, E.C. y Greenwood, R.H. 1999. Role of methionine as a methyl group donor in
cattle. Manhattan, KA: Agricultural Experimental Station, Kansas State University. In Cattlemen’s
Day, Report of Progress 831, 114–116.
Lomax, M.A. y Baird, G.D. 1983. Blood flow and nutrient exchange across the liver and gut of the
dairy cow. British Journal of Nutrition 49, 481-496.
Lowry, K.R., Izquierdo, Q.A. y Baker, D.H. 1987. Efficacy of betaine relative to choline as a dietary methyl
donor. Poultry Science 66, 135.
Malpuech-Brugère, C., Verboeket-Van de Venne, W.P.H.G., Mensink, R.P., Arnal, M.A., Morio, B.,
Brandolini, M., Saebo, A.S., Lassel, T.S., Chardigny, J.M., Sébédio, J.L. y Beaufrère, B. 2004.
Effects of two conjugated linoleic Acid isomers on body fat mass in overweight humans. Obesity
Research 12, 591-598.
Martín, D., Antequera, T., González, E., López-Bote, C.J. y Ruíz, J. 2007. Changes in the Fatty Acid
Profile of the Subcutaneous Fat of Swine throughout Fattening As Affected by Dietary Conjugated
Linoleic Acid and Monounsaturated Fatty Acids. Journal of Agriculture and Food Chemistry 55,
10820-10826.
Martins, J.M., Riottot, M., de Abreu, M.C., Viegas-Crespo, A.M., Lanca, M.J., Almeida, J.A., Freire, J.B. y
Bento, O.P. 2005. Cholesterol-lowering effects of dietary blue lupin (Lupinus angustifolius L.) in intact
and ileorectal anastomosed pigs. Journal of Lipid Research 46, 1539-1547.
Matthews, J.O., Southern, L.L. y Bidner, T.D. 2001a. Estimation of the total sulfur amino acid requirement
and the effect of betaine in diets deficient in total sulfur amino acids for the weanling pig. Journal of
Animal Science 79, 1557–1565.
Matthews, J.O., Southern, L.L., Bidner, T.D. y Persica, M.A. 2001b. Effects of betaine, pen space, and
slaughter handling method on growth performance, carcass traits, and pork quality of finishing
barrows. Journal of Animal Science 79, 967–974.
‐ 130 ‐
Matthews, J.O., Southern, L.L., Higbie, A.D., Persica, M.A. y Bidner, T.D. 2001c. Effects of betaine on
growth, carcass characteristics, pork quality, and plasma metabolites of finishing pigs. Journal of
Animal Science 79, 722–728.
Matthews, J.O., Southern, L.L., Pontif, J.E., Higbie, A.D. y Bidner, T.D. 1998. Interactive effects of betaine,
crude protein, and net energy in finishing pigs. Journal of Animal Science 76, 2444–2455.
Mayoral, A.I., Dorado, M., Guillén, M.T., Robina, A., Vivo, J.M., Vázquez, C. y Ruiz, J. 1999.
Development of meat and carcass quality characteristics in Iberian pigs reared outdoors.
Meat Science 51, 1-10.
McCann S.E., Ip C., Ip M.M., McGuire M.K., Muti P., Edge S.B., Trevisan M. y Freudenheim J.L. 2004.
Dietary intake of conjugated linoleic acids and risk of premenopausal and postmenopausal breast
cancer, Western New York Exposures and Breast Cancer Study (WEB study). Cancer Epidemiology,
Biomarkers & Prevention 13, 1480-1484.
McDevitt, R.M., Mack, S. y Wallis, I.R. 2000. Can betaine partially replace or enhance the effect of
methionine by improving broiler growth and carcase characteristics? British Poultry Science 41, 473–
480.
McLeod, R.S., LeBlanc, A.M., Langille, M.A., Mitchell, P.L. y Currie, D.L. 2004. Conjugated linoleic acids,
atherosclerosis, and hepatic very-low-density lipoprotein metabolism. American Journal of Clinical
Nutrition 79, 1169-1174.
Medina, J.M. 1985. The role of lactate as an energy substrate for the brain during the early neonatal
period. Biology of the Neonate 48, 237–244.
Mehedint, M.G., Craciunescu, C.N. y Zeisel, S.H. 2010. Maternal dietary choline deficiency alters
angiogenesis in fetal mouse hippocampus. Proceedings of the National Academy of Sciences of the
United States of America 107, 12834–12839.
‐ 131 ‐
Meijer, A.J., Lamers, W.H. y Chamuleau, R.A. 1990. Nitrogen metabolism and ornithine cycle function.
Physiological Reviews 70, 701-748.
Metwally, M., Ledger, W.L. y Li, T.C. 2008. Reproductive endocrinology and clinical aspects of
obesity in women. Annals of the New York Academy of Sciences 1127, 140-146.
Mitchell, A.D., Chappell, A. y Knox, K.L. 1979. Metabolism of betaine in the ruminant. Journal of Animal
Science 49, 764–774.
Mitchell, P.L. y Mcleod, R.S., 2008. Conjugated linoleic acid and atherosclerosis: studies in animal models.
Biochemistry and Cellular Biology 86, 293-301.
Moeckel, G.W. y Lien, Y.H. 1997. Distribution of de novo synthetized betaine in rat kidney: role of renal
synthesis of medullary betaine accumulation. American Journal of Physiology 272, 94–99.
Moeckel, G.W., Shadman, R., Fogel, J.M. y Sadrzadeh, S.M.H. 2002. Organic osmolytes betaína, sorbitol
and inositol are potent inhibitors of erythrocyte membrane ATPases. Life Sciences 71, 2413-2424.
Moloney, F., Toomey, S., Noone, E., Nugent, A., Allan, B., Loscher, C.E. y Roche, H.M. 2007. Antidiabetic
effects of cis-9, trans-11-conjugated linoleic acid may be mediated via anti-inflammatory effects in
white adipose tissue. Diabetes 56, 574–582.
Mongin, P. 1976. Ionic constituents and osmolality of the small intestinal fluids of the laying hen. British
Poultry Science 17, 383–392.
Morales, J., Pérez, J.F., Baucells, M.D., Mourot, J. y Gasa, J. 2002. Comparative digestibility and
lipogenic activity in Landrace and Iberian finishing pigs fed ad libitum corn-and corn-
sorghum-acorn-based diets. Livestock Production Science 77, 195-205.
Morris Jr, S.M. 2002. Regulation of enzymes of the urea cycle and arginine metabolism. Annual
Review of Nutrition 22, 87-105.
‐ 132 ‐
Mougios, V., Matsakas, A., Petridou, A., Ring, S., Sagredos, A. y Melissopoulou, A. 2001. Effect of
supplementation with conjugated linoleic acid on human serum lipids and body fat. The Journal of
Nutritional Biochemistry 12, 585–594.
Mourot, J. y Hermier, D. 2001. Lipids in monogastric animal meat. Reproduction Nutrition Development 41,
109-118.
Mourot, J., Kouba, M. y Bonneau, M. 1996. Comparative study of in vitro lipogenesis in various
adipose tissues in the growing Meishan pig: comparison with the Large White pig (Sus
domesticus). Comparative Biochemistry and Physiology 115, 383-388.
Mourot, J., Kouba, M. y Peiniau, P. 1995. Comparative study of in vitro lipogenesis in various
adipose tissues in the growing domestic pig (Sus domesticus). Comparative Biochemistry
and Physiology 111, 379-384.
Muñoz, G., Ovilo, C., Silió, L., Tomás, A., Noguera, J.L. y Rodríguez, M.C. 2009. Single-and joint-
population analyses of two experimental pig crosses to confirm quantitative trait loci on Sus
scrofa chromosome 6 and leptin receptor effects on fatness and growth traits. Journal of
Animal Science 87, 459-468.
Muriel, E. Ruíz, J., Ventanas, J., Petrón, M. J. y Antequera, T. 2004. Meat quality characteristics
in different lines of Iberian pigs. Meat Science 67, 299-307.
Nakanishi, T.R., Turner, J. y Burg, M.B. 1990. Osmoregulation of betaine transport in mammalian
medullary cells. American Journal of Physiology 258, 1061-1067.
Neill, A.R., Grime, D.W., Snoswell, A.M., Northrop, A.J., Lindsay, D.B. y Dawson, R.M. 1979. The low
availability of dietary choline for the nutrition of the sheep. Biochemical Journal 180, 559–565.
‐ 133 ‐
Newgard, C.B., Moore, S.V., Foster, D.W. y McGarry, J.D. 1984. Efficient hepatic glycogen synthesis in
refeeding rats requires continued carbon flow through the gluconeogenic pathway. Journal of
Biological Chemistry 259, 6958-6963.
Nicolosi, R.J., Rogers, E.J., Kritchevsky, D., Scimeca, J.A. y Huth, P.J. 1997. Dietary conjugated linoleic
acid reduces plasma lipoproteins and early aortic atherosclerosis in hypercholesterolemic hamsters.
Artery 22, 266– 277.
Niculescu, M.D., Craciunescu, C.N. y Zeisel, S.H. 2006. Dietary choline deficiency alters global and
genespecific DNA methylation in the developing hippocampus of mouse fetal brains. The FASEB
Journal 20, 43–49.
Nieto, R., Lara, L., García, M.A., Gómez, F., Zalvide, M., Cruz, M., Pariente, J.M., Moreno, A., y Aguilera
J.F. 2001. Evaluation o fan integrated feeding system in the Iberiam pig. Study of food consumption
and productive parameters. Sólo Cerdo Ibérico 6, 57-69.
Nieto, R., Miranda, A., García, M.A. y Aguilera, J.F. 2002. The effect of dietary protein content
and feeding level on the rate of protein deposition and energy utilization in growing Iberian
pigs from 15 to 50 kg body weight. British Journal of Nutrition 88, 39-49.
Noblet, J., Etienne, M. y Dourmad, J.Y. 1998. Energetic efficiency of milk production. The
lactating sow, 113.
Norris, L.E., Collene, A.L., Asp, M.L., Hsu, J.C., Liu, L.F., Richardson, J.R., Li, D.M., Bell, D., Osei, K.,
Jackson, R.D. y Belury, M.A. 2009. Comparison of dietary conjugated linoleic acid with safflower oil
on body composition in obese postmenopausal women with type 2 diabetes mellitus. American
Journal of Clinical Nutrition 90, 468-476.
Olthof, M.R. y Verhoef, P. 2005. Effects of betaine intake on plasma homocysteine concentrations and
consequences for health. Current Drug Metabolism 6, 15–22.
‐ 134 ‐
O'Quinn, P.R., Nelseen J.L., Unruh J.A., Goodband R.D., Woodworth J.C. y Tokach, M.D. 2000a. Effects
of feeding modified tall oil and supplemental potassium and magnesium on growth performance,
carcass characteristics, and meat quality of growing-finishing pigs. Canadian Journal of Animal
Science 80, 443-449.
Ortigues, I., Durand, D. y Lefaivre, J. 1994. Use of para-amino hippuric acid to measure blood
flows through portal-drained-viscera, liver and hindquarters in sheep. Journal of Agricultural
Science 122, 299-308.
O’Shea, M., Bassaganya-Riera, J. y Mohede, I.C.M. 2004. Immunomodulatory properties of conjugated
linoleic acid. American Journal of Clinical Nutrition 79, 1199-206.
Ostrowska, E., Cross, R.F., Warner, R.D., Muralitharan, M., Bauman, D.E. y Dunshea, F.R. 2005. Dietary
conjugated linoleic acid improves carcass leanness without altering meat quality in the growing pig.
Australian Journal of Experimental Agriculture 45, 691-697.
Ostrowska, E., Muralitharan, M., Cross, R.F., Bauman, D.E. y Dunshea, F.R. 1999. Dietary conjugated
linoleic acid increase lean tissue and decrease fat deposition in growing pigs. Journal of Nutrition
129, 2037-2043.
Øverland, M., K.-A. Rørvik, y A. Skrede. 1999. Effect of trimethylamine oxide and betaine in swine diets on
growth performance, carcass characteristics, nutrient digestibility, and sensory quality of pork.
Journal of Animal Science 77, 2143–2153.
Óvilo, C., Fernández, A., Noguera, J. L., Barragán, C., Letón, R., Rodríguez, C. y Toro, M. 2005.
Fine mapping of porcine chromosome 6 QTL and LEPR effects on body composition in
multiple generations of an Iberian by Landrace intercross. Genetical Research 85, 57-67.
Oyaas, K., Ellingsen, T.E., Dyrset, N. y Levine, D.W. 1995. Transport of osmoprotective compounds in
hybridoma cells exposed to hyperosmotic stress. Cytotechnology 17, 143–151.
‐ 135 ‐
Pacifici R, Rifas L, McCracken R, Vered, I., McMurtry, C., Avioli, L.V. y Peck, W.A. 1989. Ovarian steroid
treatment blocks a postmenopausal increase in blood monocyte interleukin 1 release. Proceedings of
the National Academy of Sciences of the United States of America 86, 2398–2402.
Palombo, J.D., Ganguly, A., Bistrian, B.R. y Menard, M.P. 2002. The antiproliferative effects of biologically
active isomers of conjugated linoleic acid in human colorrectal and prostatic cancer cells. Cancer
Letters 177, 163-172.
Pariza, M.W., Park, Y. y Cook, M.E. 1999. Conjugated linoleic acid and the control of cancer and obesitiy.
Toxicology Science 52, 107-110.
Pariza, M.W., Park, Y. y Cook, M.E. 2001. The biologically active isomers of conjugated linoleic acid.
Progress in Lipid Research 40, 283-298.
Pariza, M.W. y Hargraves, W.A. 1985. A beef-derived mutagenesis modulator inhibits initiation of mouse
empidermal tumors by 7,12 dymethylbenz(a)anthracene. Carcinogénesis 6, 591-593.
Park, Y, Albright, K.J, Liu, W., Storkson, J.M., Cook, M.E. y Pariza, M.W. 1997. Effect of conjugated
linoleic acid on body composition in mice. Lipids 32, 853-858.
Pariza, M.W., Azor, S.H., Chu, F.S. y Lund, D.B. 1979. Effect of temperature and time on mutagen
formation in pan-fried hamburguer. Cancer Letters 7, 63-66.
Park, Y. y Pariza, M.W. 2007. Mechanisms of body fat modulation by conjugated linoleic acid (CLA). Food
Research Int. 40, 311-323.
Parodi, P.W. 1994. Conjugated linoleic acid content: An anticarcinogenic fatty acid present in milk fat.
Australian Journal of Dairy Technology 49, 93-97.
Pascal, G. 1996. Functional foods in the European Union. Nutrition Reviews 54, 29-32.
Pasquali, R. y Gambineri, A. 2006. Metabolic effects of obesity on reproduction. Reproductive
Biomedicine Online 12, 542-551.
‐ 136 ‐
Pasquali, R., Patton, L. y Gambineri, A. 2007. Obesity and infertility. Current Opinion in
Endocrinology, Diabetes and Obesity 14, 482-487.
Peavy, D. E., Taylor, J. M. y Jefferson, L. S. 1978. Correlation of albumin production rates and albumin
mRNA levels in livers of normal, diabetic, and insulin-treated diabetic rats. Proceedings of the
National Academy of Sciences 75, 5879-5883.
Pellerin, L. y Magistretti, P.J. 1994. Glutamate uptake into astrocytes stimulates aerobic glycolysis: a
mechanism coupling neuronal activity to glucose utilization. Proceedings of the National Academy of
Science of the USA 91, 10625−10629.
Pérez-Montarelo, D., Fernández, A., Folch, J. M., Pena, R. N., Óvilo, C., Rodríguez, C., Silió, L. y
Fernández, A. I. 2012. Joint effects of porcine leptin and leptin receptor polymorphisms on
productivity and quality traits. Animal Genetics 43, 805-809.
Perry, M. A. y Parker, J. E. 1981. Indicator dilution measurements of splanchnic blood flow. In
Measurement of blood flow applications to the splanchnic circulation. Granger, D. N.,
Bulklay, G. B. (Eds.). Williams and Wilkins, Baltimore. 161-176.
Peters, J.M., Park, Y., Gonzalez, F.J y Pariza, M.W. 2001. Influence of conjugated linoleic acid on body
composition and target gene expression in peroxisome proliferator-activated receptor α-null mice.
Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular and Cell Biology of Lipids 1533, 233–242
Peters-Regehr, T., Bode, J.G., Kubitz, R. y Haussinger, D. 1999. Organic osmolyte transport in quiescent
and activated rat hepatic stellate cells (Ito cells). Hepatology 29, 173–180.
Petridou, A., Mougios, V. y Sagredos, A. 2003. Supplementation with CLA: isomer incorporation into
serum lipids and effect on body fat of women. Lipids 38, 805-811.
Petronini, P.G., De Angelis, E.M., Borghetti, P. y Borghetti, A.F. 1992. Modulation by betaine of cellular
response to osmotic stress. Journal of Biochemistry 282, 69–73.
‐ 137 ‐
Pettigrew, J.E. y Esnaola, M.A. 2001. Swine nutrition and pork quality: a review. Journal of Animal Science
79, 316-342.
Plourde M., Jew S., Cunnane S.C. y Jones P.J.H. 2008. Conjugated linoleic acids: why the discrepancy
between animal and human studies? Nutrition Reviews 66, 415-421.
Pocock, G. y Richards, C.D. 2005. El riñón y la regulación del medio interno. Fisiología humana: La base
de la Medicina. Elsevier España.
Poitry-Yamate, C.L., Poitry, S. y Tsacopoulos, M. 1995. Lactate released by Muller glial cells is
metabolized by photoreceptors from mammalian retina. Journal of Neuroscience 15, 5179−5191.
Pomeroy R.W., 1955. Live-weight growth. En Progress in the Physiology of Farm Animals. Ed. J.
Hammond, Butterworth. London 2, 395-429.
Prior, R. L. y Gross, K. L. 1995. Dietary arginine deficiency and gut ammonium infusion alter flux
of urea cycle intermediates across the portal-drained viscera of pigs. Journal of Nutrition
125, 251-263.
Pesti, G.M., Harper, A.E. y Sunde, M.L. 1979. Sulfur amino acid and methyl donor status of corn-soy diets
for starting broiler chicks and turkey poults. Poultry Science 58, 1541–1547.
Pruzanski, W., Stefanski, E., Vadas, P., Kennedy, B.P. y van den Bosch, H. 1998. Regulation of the
cellular expression of secretory and cytosolic phospholipases A2, and cyclooxygenase-2 by peptide
growth factors. Biochimica et Biophysica Acta 1403, 47– 56.
Pryor, J.L., Craig, S.A. y Swensen, T. 2012. Effect of betaine supplementation on cycling sprint
performance. Journal of the International Society of Sports Nutrition 9, 12.
Puchala, R., Zabielski, R., Lesniewska, P., Gralak, V., Kiela, P. y Barej, W. 1998. Influence of duodenal
infusion of betaine or choline on blood metabolites and duodenal electrical activity in Friesian calves.
Journal of Agricultural Science 131, 321–327.
‐ 138 ‐
Puchala, R.T., Sahlu, M.J., Herselman, J.J. y Davis, S.P. 1995. Influence of betaine on blood metabolites
of alpine and angora kids. Small Ruminant Research 18, 137–143.
Quiniou, N., Dourmad, J.Y. y Noblet, J. 1996. Effect of energy intake on the performance of
different types of pig from 45 to 100 kg body weight. 1. Protein and lipid deposition. Animal
Science 63, 277-288.
Racine N.M., Watras A.C., Carrel A.L., Allen D.B., McVean J.J., Clark R.R., O’Brien A.R., O’Shea M.,
Scott C.E. y Schoeller D.A. 2010. Effect of conjugated linoleic acid on body fat accretion in
overweight or obese children. American Journal of Clinical Nutrition 91, 1157-1164.
Radziuk, J. y Pye, S. 2001. Hepatic glucose uptake, gluconeogenesis and the regulation of glycogen synthesis.
Diabetes Metabolism Research and Reviews 17, 250-272.
Raff, M., Tholstrup, T., Straarup, E.M., Lund, P., Basu, S. y Bruun, J.M. 2008. An oil mixture with trans-10,
cis-12 conjugated linoleic acid increases markers of inflammation and in vivo lipid peroxidation
compared with cis-9, trans-11 conjugated linoleic acid in postmenopausal women. Journal of
Nutrition 138, 1445-1451.
Ramirez-Santana, C., Castellote, C., Castell, M., Molto-Puigmarti, C., Rivero, M., Perez-Cano, F.J. y
Franch, A. 2011. Enhancement of antibody synthesis in rats by feeding cis-9, trans-11 conjugated
linoleic acid during early life. Journal of Nutrition and Biochemistry 22, 495-501.
Rassi, D.K. y Bhatia, J. 1992. Evaluation of protein status in humans. In: Nissen, S. (Ed.), Modern
Methods in Protein Nutrition and Metabolism. Academics Press, San Diego, CA, 145.
Remus, J.C. y Quarles, C.L. 2000. The effect of betaine on lesion scores and tensile strength of coccidia-
challenged broilers. Poultry Science 79, 118.
Rérat, A. 1981. Chronologie et bilans de l’absorption des sucres réducteurs et de l’azote a-aminé
chez le porc selon la nature des aliments. Bulletin de l ´Academie Nationale de Medecine
165, 1131-1137.
‐ 139 ‐
Rérat, A. y Vaissade, P. 1993. Relations entre la prise alimentaire et la consommation d'oxygène
des organes drainés par la veine porte chez le porc éveillé. Reproduction Nutrition
Development 33, 235-251.
Rérat, A., Vaissade, P. y Vaugelade, P. 1984. Absorption kinetics of some carbohydrates in
conscious pigs. British Journal of Nutrition 51, 517-529.
Reynolds, C.K. y Huntington, G.B. 1988. Partition of portal-drained visceral net flux in beef steers.
British Journal of Nutrition 60, 539-551.
Ricci, T.A., Chowdhury, H.A., Heymsfield, S.B., Stahl, T., Pierson, Jr. R.N. y Shapses, S.A. 1998. Calcium
supplementation suppresses bone turnover during weight reduction in postmenopausal women.
Journal of Bone Mineral Research 13, 1045–1050.
Rivera-Ferre, M. G., Aguilera, J. F. y Nieto, R. 2005. Muscle fractional protein synthesis is higher
in Iberian than in Landrace growing pigs fed adequate or lysine-deficient diets. Journal of
Nutrition 135, 469-478.
Rivera-Ferre, M. G., Aguilera, J. F. y Nieto, R. 2006. Differences in whole-body protein turnover
between Iberian and Landrace pigs fed adequate or lysine-deficient diets. Journal of Animal
Science 84, 3346-3355.
Risérus U., Brismar K., Arner P. y Vessby B. 2002a. Treatment with dietary trans10cis12 conjugated
linoleic acid causes isomer-specific insulin resistance in obese men with the metabolic syndrome.
Diabetes Care 25, 1516-1521.
Ritzenthaler, K.L., McGuire, M.K., Falen, R., Shultz, T. D., Dasgupta, N. y McGuire, M.A. 2001. Estimation
of conjugated linoleic acid intake by written dietary assessment methodologies underestimates actual
intake evaluated by food duplicate methodology. Journal of Nutrition 131, 1548-155.
‐ 140 ‐
Robinson, S.P. y Jones, G.P. 1986. Accumulation of glycine betaine in chloroplasts provides osmótica
adjustment during salt stress. Australian Journal of Plant Physiology 13, 659-668.
Rodríguez-López, J.M., Cantalapiedra-Hijar, G., Durand, D., Isserty-Thomas, A. y Ortigues-Marty,
I. 2014. Influence of the para-aminohippuric acid analysis method on the net hepatic flux of
nutrients in lactating cows. Journal of Animal Science 92, 1074-1082.
Rodríguez-López, J. M., González-Valero, L., Lachica, M. y Fernández-Fígares, I. 2010. Heat production
of portal drain viscera (PDV) relative to the total in Iberian vs. Landrace gilts. 7th International
Symposium on Mediterranean pig. Córdoba, Spain.
Rojas-Cano, M.L., Lara, L., Lachica, M., Aguilera, J.F. y Fernández-Fígares, I., 2011. Influence of betaine
and conjugated linoleic acid on development of carcass cuts of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg
body weight. Meat Science 88, 525-530.
Rolland, F., Winderickx, J. y Thevelein, J.M. 2001. Glucose-sensing mechanisms in eukaryotic cells.
Trends Biochemistry Science 26, 310-317.
Rossi, R., Pastorelli, G., Bontempo, V., y Corino, C. 2004. Effects of Dietary Conjugated Linoleic Acid
(CLA) on Immunoglobulin Concentration in Sow Colostrum and Piglet Serum Veterinary Research
Communications, Supplement 28, 241-244.
Rothschild, M.A., Oratz, M. y Schreiber, S.S. 1988. Serum albumin. Hepatology 82, 385-401.
Rothschild, M.A., Oratz, M. y Schreiber, S.S. 1972. Albumin synthesis. 1. New England Journal of
Medicine 286, 748-757.
Ruiz, J. y López-Bote, C. 2002. Improvement of dry-cured hams quality by lipid modification
throgh dietary means. Advances in the Quality of Meat and Meat Products. Research
Singpost, Trivandrum, Kerala, India, 255-271.
‐ 141 ‐
Ruth, M.R., Taylor, C.G., Zahradka, P. y Song, X.M. 2001. Isomer-specific antidiabetic properties
fo conjugated linoleic acid. Improved glucose tolerance, skeletal muscle insulin action, and
UCP-2 gene expression. Diabetes 50, 1149-1157.
Sainz, R.D., Calvert, C.C. y Baldwin, R.L. 1986. Relationships among dietary protein, feed intake
and tissue protein turnover in lactating rats. Journal of Nutrition 116, 1820-1829.
Sakomura, N.K., Kimura, M.E., Junqueira, O.M. y Silva, R. 1996. Utilization of betaine in broiler rations.
Ars Veterinaria 12, 86–94.
Salminen, I., Mutanen, M., Jauhiainen, M. y Aro, A. 1998. Dietary trans fatty acids increase conjugated
linoleic acid levels in human serum. The Journal of Nutritional Biochemistry 9, 93-98.
Schmid, A., Collomb, M., Sieber, R. y Bee, G. 2006. Conjugated linoleic acid in meat and meat products: A
review. Meat Science 73, 29-41.
Schreiber, G. y Howlett, G. Synthesis and secretion of acute phase proteins. 1983. In: Plasma Protein
Secretion by the Liver. H. Glaumann. T. Peters, Jr. and C. Redman (eds) Academic Press, London
and New York, 423-449.
Schurr, A., Miller, J.J., Payne, R.S. Y Rigor, B.M. 1999. An increase in lactate output by brain tissue
serves to meet the energy needs of glutamate-activated neurons. Journal of Neuroscience, 19
34−39.
Schutte, J.B., De Jong, J., Smink, W. y Pack, M. 1997. Replacement value of betaine for DL-methionine in
male broiler chicks. Poultry Science 76, 321–325.
Schwab, U., Torronen, A., Toppinen, L., Alfthan, G., Saarinen, M., Aro, A. y Uusitupa, M. 2002. Betaine
supplementation decreases plasma homocysteine concentrations but does not affect body weight,
body composition, or resting energy expenditure in human subjects. American Journal of Clinical
Nutrition 76, 961–967.
‐ 142 ‐
Schwahn, B.C., Hafner, D., Hohlfeld, T., Balkenhol, N., Laryea, M.D. y Wendel, U. 2003. Pharmacokinetics
of oral betaine in healthy subjects and patients with homocystinuria. British Journal of Clinical
Pharmacology 55, 6–13.
Scott, R.A., Cornelius, S.G. y Mersmann, H.J. 1981. Effects of age on lipogenesis and lipolysis in lean and
obese swine. Journal of Animal Science 52, 505–511
Sébédio, J.L., Gnaedig, S. y Chardigny, J.M. 1999. Recent Advances in Conjugated Linoleic Acid
Research. Current Opinion in Clinical Nutrition & Metabolic Care 2, 499-506.
Seebeck, R.M., 1968. Developmental studies of body composition. Animal Breeding Abstracts 36, 167-
181.
Sehat, N., Kramer, J.K.G., Mossoba, M.M., Yurawecz, M.P., Roach, J.A.G., Eulitz, K., Morehouse, K.M. y
Ku, Y. 1998. Identification of conjugated linoleic acid isomers in cheese by gas chromatography,
silver ion high performance liquid chromatography and mass spectral reconstructed ion profiles.
Comparison of chromatographic elution sequences. Lipids 33, 963-971.
Seiler, N. 2002. Ammonia and Alzheimer´s disease. Neurochemistry International 41, 189-207.
Serra, X., Gil, F., Pérez-Enciso, M., Oliver, M. A., Vázquez, J.M., Gispert, M. y Noguera, J.L.
1998. A comparison of carcass, meat quality and histochemical characteristics of Iberian
(Guadyerbas line) and Landrace pigs. Livestock Production Science 56, 215-223.
Shields, R.G., Mahan, D.C. Jr. y Graham, P.L.1983. Changes in swine body composition from birth to 145
kg. Journal of Animal Science 57, 43-54.
Sidransky, H. y Farber, E. 1960. Liver choline oxidase in man and in several species of animals. Archives
of Biochemistry and Biophysics 87, 129–133.
‐ 143 ‐
Siljander-Rasi, H., Peuranen, S., Tiihonen, K., Virtanen, E., Kettunen, H., Alaviuhkola, T. y Simmins, P.H.
2003. Effect of equi-molar dietary betaine and choline addition on performance, carcass quality and
physiological parameters of pigs. Animal Science 76, 55–62.
Simon, O., Bergner, H., Münchmeyer, R., Zebrowska, T. 1982. Studies on the range of tissue
protein synthesis in pigs: the effect of thyroid hormones. British Journal of Nutrition 48, 571-
582.
Smedman, A. y Vessby, B. 2001. Conjugated linoleic acid supplementation in humans--metabolic effects.
Lipids 36, 773-781.
Smith, S.B., Hively, T.S., Cortese, G.M., Han, J.J., Chung, K.Y., Casteñada, P., Gilbert, C.D., Adams, V.L.
y Mersmann, H.J. 2002. Conjugated linoleic acid depresses the Δ9 desaturase index and stearoyl
coenzyme A desaturase enzyme activity in porcine subcutaneous adipose tissue. Journal of Animal
Science 80, 2110-2115.
Sneddon, A.A., Tsofliou, F., Fyfe, C.L., Matheson, I., Jackson, D.M., Horgan, G., Winzell, M.S., Wahle,
K.W., Ahren, B. y Williams, L.M. 2008. Effect of a conjugated linoleic acid and omega -3 fatty acid
mixture on body composition and adiponectin. Obesity 16, 1019-1024.
Souffrant, W.B. 1991. Endogenous nitrogen losses during digestión in pigs [MWA Versteegen, J Huisman
and LA den Hartog, editors]. Wageningen, The Netherlands: EAAP. In Proceedings of the 5th
International Symposium on Digestive Physiology in Pigs 54, 147–166
Snoswell, A.M. y Xue, G.P. 1987. Methyl group metabolism in sheep. Comparative Biochemistry and
Physiology 88, 383–394.
Stachowska, E., Baskiewicz, M., Marchlewicz, M., Czupryńska, K., Kaczmarczyk, M., Wiszniewska, B.,
Machaliński, B. y Chlubek, D. 2010. Conjugated linoleic acids regulate triacylglycerol and cholesterol
concentrations in macrophages/foam cells by the modulation of CD36 expression. Acta Biochimimica
Polonica 57, 379-384.
‐ 144 ‐
Steinmetzer, W.1972. Contribution to the biochemistry and use of the beet constituent betaine. Zucker 25,
48–57.
Stekol, J.A., Hsu, P.T., Weiss, S. y Smith, P. 1953. Labile methyl group and its synthesis de novo in
relation to growth of chicks. Biological Chemistry 203, 763–773.
Stoll, B. y Burrin, D. G. 2006. Measuring splanchnic amino acid metabolism in vivo using stable
isotopic tracers. Journal of Animal Science 84, 60-72.
Stoll, B., Burrin, D. G., Henry, J. F., Jahoor, F. y Reeds, P. J. 1999. Dietary and systemic
phenylalanine utilization for mucosal and hepatic constitutive protein synthesis in pigs.
American Journal of Physiology 276, 49-57.
Strang, B.D., Bertics, S.J., Grummer, R.R. y Armentano, L.E. 1998. Relationship of triglyceride
accumulation to insulin clearance and hormonal responsiveness in bovine hepatocytes. Journal of
Dairy Science 81, 740-747.
Stryer, L.1988. Biosynthesis of amino acids and hemeNew York: WH Freeman and Company. In
Biochemistry, 3rded, 575–626.
Suda, M., Tanaka, K., Yasoda, A., Natsui, K., Sakuma, Y., Tanaka, I., Ushikubi, F., Narumiya, S. y Nakao,
K. 1998. Prostaglandin E2 (PGE2) autoamplifies its production through EP1 subtype of PGE receptor
in mouse osteoblastic MC3T3-E1 cells. Calcified Tissue International 62, 327–331.
Sugano, M., Akahoshi, A., Koba, K., Tanaka, K., Okumura, T., Matsuyama, H., Goto, Y., Miyazaki,
T., Murao, K., Yamasaki, M., Nonaka, M. y Yamada, K. 2001. Dietary manipulations of body fat-
reducing potential of conjugated linoleic acid in rats. Bioscience Biotechnology and Biochemistry 65,
2535-2541.
Summerskill, W.H. y Wolpert, E. 1970. Ammonia metabolism in the gut. American Journal of Clinical
Nutrition 23, 633-639.
‐ 145 ‐
Swatland H.J. 1982. Histology of allometric growth in hindlimb muscles of pigs. Journal of Agriculture
Science, Cambridge 98, 629-632.
Swenson, M.J. y Reece, W.O. 1999. Fisiología de los Animales Domésticos, Uteha, México, 925 p.
Takala, J. 1996. Determinants of splanchnic blood flow. British Journal of Anaesthesia 77, 50-58.
Tanmahasamut, P., Liu, J., Hendry, L.B. y Sidell, N. 2004. Conjugated linolic acid blocks estrogen
signaling in human breast cancer cells. Journal of Nutrition 134, 674-680.
Tavella M. 1993. Partículas lipoproteicas. Concepto, aislamiento e implicancias Acta Bioqímica Clinica
Latinoamerican 27, 75-85.
Taville, T.S. 1972. Progress report: The synthesis and degradation of liver produced proteins. Gut
13, 225.
Tejeda, J. F. García, C., Muriel, E., y Antequera, T. 2002. Muscle lipid composition of Iberian pig
meat as related to genetic line. Rome (Italy), August. In: 48th international congress of Meat
Science and Technology. Vol. II, p. 734.
Ten Have, G.A., Bost, M.C., Suyk-Wierts, J.C., van den Bogaard, A.E. y Deutz, N.E. 1996.
Simultaneous measurement of metabolic flux in portally-drained viscera, liver, spleen, kidney
and hindquarter in the conscious pig. Laboratory Animals 30, 347-358.
Terpstra, A., A. Beynen, H. Everts, E. Kocsis, M. Katan, y L. Zock. 2002. The decrease in body fat in mice
fed conjugated linoleic acid is due to increased energy expenditure and energy loss in the excretia.
Journal of Nutrition 132, 940-945.
Tess, M.W., Dickerson, G.E., Nienaber, J.A. y Ferrell, C.L. 1986. Growth, development and body
composition in three genetic stocks of swine. Journal of Animal Science 62, 969-979.
‐ 146 ‐
Theoleyre, S.W.Y., Tat, S.K., Fortun, Y., Redini, F. y Heymann, D. 2004. The molecular triad
OPG/RANK/RANKL: involvement in the orchestration of pathophysiological bone remodeling.
Cytokine & Growth Factor Reviews 15, 457-475.
Thiel-Cooper, R.L., Parrish, F.C. Jr., Sparks, J.C., Wiegand, B.R. y Ewan, R.C. 2001. Conjugated linoleic
acid changes swine performance and carcass composition. Journal of Animal Science 79, 1821-
1828.
Thomas, T. y Burguera, B. 2002. Is leptin the link between fat and bone mass? Journal of Bone Mineral
Research 17,1563– 1569.
Tischendorf, F., Schone, F., Kirchheim, U. y Jahreis, G. 2002. Influence of a conjugated linoleic acid
mixture on growth, organ weights, carcass traits and meat quality in growing pigs. Journal of Animal
Physiology and Animal Nutrition 86, 117-128.
Tramacere, M., Petronini, P.G., Severini, A. y Borghetti, A.F. 1984. Osmoregulation of amino acid activity
in cultured fibroblasts. Experimental Cell Research 151, 70–79.
Trepanowski, J.F., Farney, T.M., McCarthy, C.G., Schilling, B.K., Craig, S.A. y Bloomer, R.J. 2011. The
effects of chronic betaine supplementation on exercise performance, skeletal muscle oxygen
saturation and associated biochemical parameters in resistance trained men. The Journal of Strength
& Conditioning Research 25, 3461–3471.
Tricon, S., Burdge, G.C., Williams, C.M., Calder, P.C. y Yaqoob, P. 2005. The effects of conjugated
linoleic acid on human health-related outcomes. Proceedings of the Nutrition Society 64, 171-182.
Tricon, S., Burdge, G.C., Kew, S., Banerjee, T., Russell, J.J., Grimble, R.F., Williams, C.M., Calder, P.C. y
Yaqoob, P. 2004a. Effects of cis-9, trans-11 and trans-10,cis-12 conjugated linoleic acid on immune
cell function in healthy humans. American Journal of Clinical Nutrition 80, 1626–1633
‐ 147 ‐
Tricon, S., Burdge, G.C., Kew, S., Banerjee, T., Russell, J.J., Jones, E.L., Grimble, R.F., Williams, C.M.,
Yaqoob, P. y Calder, P.C. 2004b. Opposing effects of cis-9,trans-11 and trans-10,cis-12 conjugated
linoleic acid on blood lipids in healthy humans. American Journal of Clinical Nutrition 80, 614–620.
Tsuboyama-Kasaoka, N., Takahashi, M., Tanemura, K., Kim, H.J., Tange, T., Okuyama, H., Kasai, M.,
Ikemoto, S. y Ezaki, O. 2000. Conjugated linoleic acid supplementation reduces adipose tissue by
apoptosis and develops lipodystrophy in mice. Diabetes 49, 1534–42
Ushioda, E., Nuwayhid, B., Tabsh, K., Erkkola, R., Brinkman, C. R. y Assali, N. S. 1982. Mixing
problems in using indicators for measuring regional blood flow. American Journal of
Obstetrics and Gynecology, 142, 74-82.
Van der Lenden, T., Te Pas M. F., Veerkamp, R. F. y Liefers, S. C. 2005. Leptin gene
polymorphisms and their phenotypic associations. Vitamins & Hormones 71, 373-404.
Van der Meulen, J., Bakker, G. C. M., Bakker, J. G. M., de Visser, H., Jongbloed, A. W. y Everts, H. 1997.
Effect of resistant starch on net portal-drained viscera flux of glucose, volatile fatty acids, urea and
ammonia in growing pigs. Journal of Animal Science 75, 2697-2704.
van Lunen, T.A. y Cole, D.J. 1996. Energy-amino acid interactions in modern pig genotypes. In
Recent advances in animal nutrition. Garnsworthy, P. C., Wiseman, J., Haresign, W. (Eds.).
Nottingham University Press. 233-261.
Vannucci, S.J. y Simpson, I.A. 2003. Developmental switch in brain nutrient transporter expression in the
rat. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 285, 1127–1134.
Vela, M.E.F.V. 2006. Señalización de la leptina. Revista de Educación Bioquímica 25, 50-54.
Vemuri, M., Kelley, D.S., Mackey, B.E., Rasooly, R. y Bartolini, G. 2007. Docosahexaenoic Acid (DHA)
But Not Eicosapentaenoic Acid (EPA) Prevents Trans-10, Cis-12 Conjugated Linoleic Acid (CLA)-
Induced Insulin Resistance in Mice. Metabolic Syndrome and Related Disorders 5, 315-22.
‐ 148 ‐
Ventanas, S., Estévez, M., Tejeda, J.F. y Ruiz, J. 2006. Protein and lipid oxidation in Longissimus
dorsi and dry cured loin from Iberian pigs as affected by crossbreeding and diet. Meat
Science 72, 647-655.
Ventanas, S., Ventanas, J., Ruiz, J. y Estévez, M. 2005. Iberian pigs for the development of high-
quality cured products. Agricultural and Food Chemistry. Trivandrum, Kerala, India: 27-53.
Virtanen, E. y Rosi, L. 1995. Effects of betaine on methionine requirement of broilers under various
environmental conditions. Sydney, NSW, Australia: University of Sydney. In Proceedings of the
Australian Poultry Science Symposium, 88–92.
Voorrips, L.E., Brants, H.A.M., Kardinaal, A.F.M., Hiddink, G.J., Van den Brandt, P.A. y Goldbohm R.A.
2002. Intake of conjugated linoleic acid, fat, and other fatty acids in relation to postmenopausal
breast cancer: The Netherlands Cohort Study on Diet and Cancer. American Journal of Clinical
Nutrition 76, 873-882.
Wang YZ y Xu ZR. 1999. Effect of feeding betaína on weigth gain and carcass trait of barrows and gilts
and approach to mechanism. Journal of Zhejiang Agricultural University 25, 281-285.
Wang, Y.Z. 2000. Effect of betaine on growth performance and carcass traits of meat ducks. Journal of
Zhejiang University Agricultural and Life Sciences 26, 347–352.
Wang, Y.Z., Xu, Z.R. y Chen, M.L. 2000a. Effect of betaine on carcass fat metabolism of meat duck.
Chinese Journal of Veterinary Science 20, 409–413.
Wang, Y.Z., Xu, Z.R. y Feng, J. 2000b. Study on the effect of betaine on meat quality and the mechanism
in finishing pigs. Scientia Agricultura Sinica 33, 94–99.
Wang, Z., Yao, T., Pini, M., Zhou, Z., Fantuzzi, G. y Song, Z. 2010. Betaine improved adipose tissue
function in mice fed a high-fat diet: a mechanism for hepatoprotective effect of betaine in
nonalcoholic fatty
‐ 149 ‐
liver disease. The American Journal of Physiology - Gastrointestinal and Liver Physiology 298, 634–642.
Warskulat, U., Wettstein, M. y Häussinger, D. 1995. Betaine is an osmolyte in RAW264.7 mouse
macrophages. FEBS Letters 377, 47–50.
Waterland, R.A. y Jirtle, R.L. 2003. Transposable elements: targets for early nutritional effects on
epigenetic gene regulation. Molecular Cellular Biology 23, 5293–5300.
Webster, A.J. 1981. The energetic efficiency of metabolism. Proceedings of the Nutrition Society,
40, 121-128.
Webster, A.J., Lobley, G., Reeds, P.J. y Pullar, J.D. 1978. Protein mass, protein synthesis and
heat loss in the Zucker rat. The Proceedings of the Nutrition Society 37, 21-21.
Weik, C., Warskulat, U., Bode, J., Peters-Regehr, T. y Häussinger, D. 1998. Comparable organic
osmolytes in rat liver endothelial cells. Hepatology 27, 787–793.
Westberg, J.K. 1951. Betaine in the Nutrition of Chickens and Turkeys. Chicago, IL: International Minerals
and Chemical Corporation.
Wettstein, M., Weik, C., Holneicher, C. y Häussinger, D. 1998. Betaine as an osmolyte in rat liver:
metabolism and cell-to-cell interactions. Hepatology 27, 787–793.
Wiegand, B.R., Pompeu, D., Thiel-Cooper, R.L., Cunnick, J.E. y Parrish, F.C. Jr. 2011. Immune response
and blood chemistry of pigs fed conjugated linoleic acid. Journal of Animal Science 89, 1588-1594.
Weigand, E. y Kirchgessner, W. 1981. Betaine and glutamine acid contribution to nitrogen digestion and
balance during feeding of vinasse to growing pigs. Archives of Animal Nutrition 31, 335–343.
Wiedmeier, R.D., Tanner, B.H., Bair, J.R., Shenton, H.T., Arambel, M.J. y Walters, J.L. 1992. Effects of a
new molasses by-product, concentrated separator by-product, on nutrient digestibility and ruminal
fermentation in cattle. Journal of Animal Science 70, 1936–1940.
‐ 150 ‐
Williams, K.T. y Schalinske, K.L. 2007. New insights into the regulation of methyl group and homocysteine
metabolism. Journal of Nutrition 137, 311–314.
Wahle, K.W., Heys, S.D. y Rotondo, D. 2004. Conjugated linoleic acids: are they beneficial or detrimental
to health? Progress in Lipid Research 43, 553-587.
Wang, Y.W. y Jones, P.J.H. 2004. Conjugated linoleic acid and obesity control: efficacy and mechanisms.
International Journal of Obesity 28, 941-955.
Watkins, B.A., Feng, S.L., Strom, A.K., DeVitt, A.A., Yu, LG. y Li, Y. 2003. Conjugated linoleic acids alter
the fatty acid composition and physical properties of egg yolk and albumen. Journal of Agricultural
and Food Chemistry 51, 6870-6876.
West, D.B., Delany, J.P., Camet, P.M., Blohm, F., Truett, A. y Scimeca, J. 1998. Effects of conjugated
linoleic acid on body fat and energy metabolism in the mouse. American Journal of Physiology 275,
667- 672
Wiegand, B.R., J.C. Sparks, F.C. Parrish, Jr. y D.R. Zimmermand. 2002. Duration of feeding conjugated
linoleic acid influences growth performance, carcass traits, and meat quality of finishing barrows.
Journal of Animal Science 80, 637-643.
Wiegand, B.R., Parrish, F.C., Swan, J.E., Larsen, S.T. y Baas, T.J. 2001. Conjugated linoleic acid
improves feed efficiency, decreases subcutaneous fat, and improves certain aspects of meat quality
in stress- genotype pigs. Journal of Animal Science 79, 2187-2195.
Wong, M.W., B.P. Chew, T.S. Wong, H.L. Hosick, T.D. Boylston, y T.D. Shultz. 1997. Effects of dietary
conjugated linoleic acid on lymphocyte function and growth of mammary tumors in mice. Anticancer
Research 17, 987–994.
Wu, G. 1995. Urea synthesis in enterocytes of developing pigs. Biochemical Journal 312, 717-723.
‐ 151 ‐
Xing, W.B. y Rajashekar, C.B. 2001. Glycine betaine involvement in freezing tolerance and water stress in
Arabidopsis thaliana. Environmental and Experimental Botany 46, 21–28.
Xu, Z.R., Wang, M.Q. y Huai, M.Y. 1999a. Approach of the mechanism of growth-promoting effect of
betaine on swine. Chinese Journal of Veterinary Science 19, 399–403.
Xu, Z.R., Yu, D.Y. y Wang, Y.Z. 1999b. The effects of betaine on weanling piglets and its mechanism.
Journal of Zhejiang Agricultural University 25, 543–546.
Xu, Z.R., Yu, D.Y., Wang, Y.Z. y Zhou, L.X. 1999c. Effect of betaine on growth and digestive function of
weaning piglets. Acta Agriculturae Zhejiangensis 11, 4.
Xu, Z.R. y Zhan, X.A. 1998. Effects of betaine on methionine and adipose metabolism in broiler chicks.
Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica 29, 212–219.
Xue, G.P. y Snoswell, A.M. 1985a. Comparative studies on the methionine synthesis in sheep and rat
tissues. Comparative Biochemistry and Physiology 80, 489–494.
Yamasaki, M., Chujo, H., Hirao, A., y col. 2003. Inmuglobulin and cytokine production from spleen
lymphocites is modulated in C57BL/6J mice by dietary cis-9, trans-11 and trans-10, cis-12
conjugated linoleic acid. Journal of Nutrition 133, 784-788.
Yancey, P.H. y Burg, M.B. 1989. Distribution of major organic osmolytes in rabbit kidneys in diuresis and
antidiuresis. American Journal of Physiology 257, 602-607.
Yang, B.T., Dayeh, T.A., Volkov, P.A., Kirkpatrick, C.L., Malmgren, S., Jing, X., Renström, E., Wollheim,
C.B., Nitert, M.D. Ling, C. 2012. Increased DNA methylation and decreased expression of PDX-1 in
pancreatic islets from patients with type 2 diabetes. Molecular Endocrinology 26, 1203–1212.
Yen, J.T. 1997. Oxygen consumption and energy flux of porcine splanchnic tissues. In
Proceedings of the 7th International Symposium on Digestive Physiology in Pigs. Laplace, J.
P., Fevrier, C., Barbeau, A. (Eds.). EAAP Publication, INRA, St-Gilles. 88, 260-269.
‐ 152 ‐
Yen, J.T. y Killefer, J. 1987. A method for chronically quantifying net absorption of nutrients and
gut metabolites into hepatic portal vein in conscious swine. Journal of Animal Science 64,
923-934.
Yen, J.T., Nienaber, J.A., Hill, D.A. y Pond, W.G. 1989. Oxygen consumption by portal vein-
drained organs and by whole animal in conscious growing swine. Experimental Biology and
Medicine 190, 393-398.
Yu, D.Y., Feng, J. y Xu, Z.R. 2001. Effects of betaine on fat and protein metabolism in different stages of
swine. Chinese Journal of Veterinary Science 21, 200–203.
Yu, D.Y. y Xu, Z.R. 2000. Effects of methyl-donor on the performances and mechanisms of growth-
promoting hormone in piglets. Chinese Journal of Animal Science 36, 8–10.
Zeisel, S.H., Mar, M-H, Howe, J.C. y Holden, J.M. 2003. Concentrations of choline-containing compounds
and betaine in common foods. Journal of Nutrition 133, 1302–1307.
Zeisel, S.H. 2009. Importance of methyl donors during reproduction. American Journal of Clinical Nutrition
89, 673-677.
Zhang, F., Warskulat, U., Wettstein, M. y Häussinger, D. 1996. Identification of betaine as an osmolyte in
rat liver macrophages (Kupffer cells). Gastroenterology 110, 1543–1552.
Zhou, J. 2008. Effect of dietary conjugated linoleic acid (CLA) on abdominal fat deposition in yellow-
feather broiler chickens and its possible mechanism. Asian-Australasian Journal of Animal
Science 21, 1760–1765.
Zierler, K. L. 1961. Theory of the use of arteriovenous concentration differences for measuring metabolism
in steady and non-steady states. Journal of Clinical Investigation 40, 2111-2125.
Zou, X.T., Xu, Z.R. y Wang, Y.Z. 2002. Effects of methylamino acids on growth performance of swine in
different stages. Journal of Zhejiang University Agriculture and Life Sciences 28, 551–555
‐ 153 ‐
CAPITULO3
METOLOLOGÍA
‐ 155 ‐
Los diferentes estudios que componen la presente Tesis Doctoral se llevaron a cabo en las
instalaciones y laboratorios del Departamento de Fisiología y Bioquímica de la Nutrición Animal de la
Estación Experimental del Zaidín (CSIC). Para el manejo y cuidado de los animales se siguieron en todo
momento las directrices de la Unión Europea (No. 86/609/EEC). Los protocolos experimentales usados en
los experimentos fueron aprobados por el Comité de Bioética del Consejo Superior de Investigaciones
Científicas (CSIC).
Para conocer los posibles efectos que los modificadores metabólicos, betaína y ácido linoleico
conjugado tienen sobre cerdos Ibéricos en crecimiento se llevaron a cabo 3 experimentos que serán
detalladamente descritos en este capítulo.
3.1. PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES
3.1.1. ESTUDIO DEL DESARROLLO DE LOS CORTES Y TEJIDOS DE LA CANAL DEL CERDO
IBÉRICO EN CRECIMIENTO
3.1.1.1. ANIMALES Y DIETAS
El experimento se llevó a cabo en 25 cerdas ibéricas puras de la estirpe Silvela proporcionadas
por Sánchez Romero Carvajal (Jabugo S.A., Sevilla, España) de aproximadamente 15 kg de PV. Los
‐ 156 ‐
animales fueron alojados en grupo, con libre acceso al agua y alimentados ad libitum con una dieta basal
hasta alcanzar los 20 kg de PV, momento en el que comenzó el experimento.
En la primera fase del experimento un grupo de 5 cerdas fueron sacrificadas para la obtención de
sus canales, posterior despiece y disección únicamente de las piezas nobles con el objetivo de establecer
los puntos iniciales en las ecuaciones alométricas. Los 20 animales restantes se alojaron individualmente
en parques de 2 m2 a una temperatura constante (20 ± 1,5 ºC) y fueron asignados aleatoriamente a cada
uno de los cuatro tratamientos experimentales con 5 animales por tratamiento. Los tratamientos
consistieron en la incorporación a la dieta basal, utilizada como tratamiento control, de 0,5% de betaína
(Betafin S1, crystalline, 96% pureza; Danisco, Copenhague, Dinamarca), 1% de CLA (el 60% de los
isómeros de CLA era la mitad cis-9, trans-11 y la mitad trans-10, cis-12 en forma de ácidos grasos libres;
BASF, Ludwigshafen, Alemania) o 0,5% de betaína + 1% CLA a expensas de aceite de girasol (para CLA)
y almidón de maíz (para betaína). Las dietas eran isonergéticas e isoproteicas y elaboradas con cebada
molida y harina de soja (12,0% de proteína bruta, 0,81% de lisina, y 14,8 MJ energía metabolizable
(EM)/kg de materia seca (MS)). La concentración de proteína bruta se determinó de manera que se
ajustase a la menor capacidad de deposición de proteína de la raza Ibérica, previamente determinada por
Nieto y col. (2002), y el resto de nutrientes se ajustaron o excedían las necesidades dadas por el Nacional
Research Council (NRC, 1998). El nivel de alimentación utilizado fue del 95% ad libitum calculado en
función del PV, siguiendo una regresión lineal descrita por Nieto y col. (2001) para el cerdo Ibérico. Los
animales se alimentaban una vez al día (09:00 horas) y el agua se suministró ad libitum. La ración se les
ajustaba semanalmente en función del PV. La determinación de la composición de las dietas (Tabla 3.1)
se realizó según la metodología descrita por la AOAC (1990).
‐ 157 ‐
1 Contiene por Kg de dieta: retinol, 3,38 mg retinil acetato; colecalciferol, 56,3 µg DL-α-tocoferol, 2,52 mg como DL-α-tocoferol; menadiona, 1.5 mg menadiona bisulfato sódico; tiamina, 0,15 mg; riboflavina, 3 mg; piridoxina, 0,15 mg; cianocobalamina, 15 µg; ácido fólico, 15 µg; ácido nicotínico, 22,5 mg; ácido D-pantoténico, 15 mg pantotenato cálcico; Mn, 15 mg MnSO4. 4H2O; Fe, 75 mg FeSO4.7H2O; Zn, 120 mg ZnO; I, 450 µg KI; Cu, 60 mg CnSO4.5H2O; Co, 300 µg CoSO4.7H2O. 2 L-Lys-HCL contiene 78.8% L-Lys;
L-Thr y L-His, añadido como base libre, 98,5% and 100% L-Thr y L-His, respectivamente. 3 Determinado. 4 Valores estimados (FEDNA, 2003) 5 BHT Butil-hidroxitolueno: usado como agente antioxidante.
Tabla 3.1. INGREDIENTES Y COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.
Ingredientes,% Dietas
Control Betaína CLA CLA + Bet
Cebada molida 90 90 90 90
Torta de soja 2 2 2 2
NaCl 0,5 0,5 0,5 0,5
Premezcla vitamínico-mineral
0,3 0,3 0,3 0,3
CO3Ca 1,1 1,1 1,1 1,1
PO4HCa 1,2 1,2 1,2 1,2
L-Lys-HCL2 0,51 0,51 0,51 0,51
L-Thr2 0,1 0,1 0,1 0,1
L-His2 0,015 0,015 0,015 0,015
Almidón de maíz 3,265 2,765 3,265 2,765
Aceite de girasol 1 1 - -
BHT5 0,0125 0,0125 0,0125 0,0125
Ácido linoleico conjugado
- - 1 1
Betaína - 0,5 - 0,5
Análisis químico,%
PB (N x 6,25)3 11,6 11,7 11,6 11,5
Lys4 0,81 0,81 0,81 0,81
Lípidos totales3 2,83 2,83 2,83 2,83
Calcio4 0,77 0,77 0,77 0,77
Fósforo4 0,55 0,55 0,55 0,55
EB, KJ/g MS3 18,51 18,47 18,41 18,50
EM, KJ/g MS3 15,1 14,8 14,7 14,4
‐ 158 ‐
3.1.1.2. SACRIFICIO Y DISECCIÓN
Al alcanzar los animales el peso estimado para el final del experimento (51,1 ± 0,85 Kg de PV) y
tras 24 horas de ayuno, fueron pesados y sacrificados previo aturdimiento mediante electronarcosis. Una
vez desangrado y eviscerado el animal, la canal con la cabeza se llevó a una cámara frigorífica para su
oreado durante 24 horas. Transcurrido este tiempo se llevó a cabo la separación de la cabeza por la
articulación atlanto-occipital; de las patas y manos, a nivel de la articulación carpo-metacarpiana y tarso-
metatarsiana, respectivamente; y del rabo. Se dividió longitudinalmente la canal en dos mitades por el
punto medio del raquis. Obtenido así el peso individual de cabeza, patas, manos y rabo que, junto con la
semicanal derecha, se almacenaron a – 20 ºC en bolsas de plástico para evitar su deshidratación, hasta
proceder a su análisis físico-químico.
Posteriormente se realizó sobre la semicanal izquierda el despiece que se indica a continuación
(De Pedro, 1987; Dobao y col., 1987; Vílchez, 2004):
En primer lugar (Figura 3.1) se separaron y pesaron la grasa de riñonada, el solomillo, costillas y
espinazo para efectuar seguidamente dos cortes perpendiculares a la línea dorsal, uno a la altura de la 5ª
costilla y otro a la altura de la rótula del jamón, que dividieran a la canal en tres partes. En la parte
delantera, se separaron la cabezada de magro y la paleta sin recortar con el tocino delantero incluido,
mientras que el jamón, también sin recortar, constituyó toda la parte posterior. En lo que restaba de la
media canal, una vez separado el lomo limpio de grasa, se realizó un corte siguiendo la línea dejada por
el lomo obteniéndose así el tocino dorsal y la faldilla o panceta.
Así se obtuvieron los pesos de grasa de riñonada, solomillo, costillar, espinazo, cabezada de
magro, tocino dorsal, lomo, panceta, jamón sin perfilar y paleta sin perfilar.
El jamón y la paleta fueron recortados posteriormente, ciñendo el recorte al perfil de ambas
extremidades, obteniéndose el peso de ambas piezas perfiladas. Las piezas perfiladas de jamón y paleta
se guardaron a -20 ºC para su posterior disección.
‐ 159 ‐
Figura 3.1: Despiece de la media canal izquierda de cerdo Ibérico
3.1.1.3. TÉCNICA DE DISECCIÓN
La disección se realizó únicamente en las piezas nobles, jamón y paleta una vez perfilados, tras
su descongelación durante 24 horas en cámara frigorífica a 4 ± 1 ºC. El procedimiento se llevó a cabo en
sala refrigerada a 10 ± 1 ºC con el objetivo de minimizar las pérdidas de humedad. El proceso consistió
en la separación a cuchillo de los distintos tejidos que conforman la pieza, obteniendo así el peso
individual de piel, grasa subcutánea, grasa intermuscular, magro y hueso. Cada componente fue
almacenado a – 20 ºC en bolsas de plástico para evitar su deshidratación.
En el tejido magro obtenido de la disección del jamón y la paleta perfilados, tras ser picado y
liofilizado, se realizaron las técnicas analíticas que se describen a continuación.
‐ 160 ‐
3.1.1.4. ANÁLISIS FÍSICO-QUÍMICO
Los distintos análisis se realizaron sobre muestras homogeneizadas y liofilizadas. Para lo cual se
descongelaron los componentes objeto del análisis, se cortaron en trozos pequeños con un cuchillo
eléctrico (Bosch, PFZ 700 PE, Suiza) y se picaron en una picadora de cuchillas (Talleres Cato S.A.,
Sabadell). Una vez homogeneizadas se tomaron muestras alícuotas por duplicado, una de ellas fue
almacenada a – 20 ºC y la otra fue liofilizada (liofilizador Virtis Genesis mod. SQ25EL) y molida.
Determinándose la pérdida de agua tras la liofilización y molienda.
3.1.1.5. CONTENIDO EN MATERIA SECA
Debido a que el método de liofilización no extrae por completo la humedad, las muestras
previamente liofilizadas fueron desecadas en estufa a 103 ± 1 ºC (AOAC, 1990). Para ello se pesaron
aproximadamente 2 g de muestra liofilizada, aproximadamente, en una balanza de precisión (AB204
Mettler Toledo, Suecia) utilizando un pesasustancias de vidrio. Éstos se desecaban previamente en una
estufa a 100 ºC y se dejanban enfriar en un desecador. Las muestras se mantenían en la estufa a 103 ºC
durante 24 h, a continuación se dejanban enfriar nuevamente en un desecador y se pesaban en la misma
balanza de precisión. La sustancia seca se determinó a partir de la pérdida de peso que sufría la muestra
tras la desecación.
3.1.1.6. DETERMINACIÓN DEL EXTRACTO ETÉREO
Esta técnica permite conocer la cantidad de grasa intramuscular presente en el jamón y la paleta
que no se puede obtener mediante disección. Se empleó para ello un equipo Soxhlet (PRECIS-BAT S-
148 · 200) que utiliza un sistema de extracción cíclica de los componentes solubles en una mezcla de
cloroformo-metanol 2:1. El extracto etéreo contiene los ésteres de los ácidos grasos con el glicerol, los
fosfolípidos, las lecitinas, los esteroles, las ceras y los ácidos grasos libres.
‐ 161 ‐
Se pesaron aproximadamente 2 g de muestra liofilizada en una balanza de precisión, se colocaron
en un cartucho de papel de filtro y se introdujeron en el recipiente extractor con cloroformo metanol 2:1.
Tras un tiempo de maceración de 22 h, se volvía a añadir mezcla de cloroformo metanol 2:1 para que
comenzara la extracción que duraba 5 h a 80ºC. De este modo la muestra es sometida de manera
constante a la acción del solvente. Se retira el matraz que contiene la grasa extraída durante el proceso y
se llevaba a una estufa donde permanecieran 24 h a 60ºC. Se llevan a un desecador y se pesan los
matraces en la misma balanza.
3.1.1.7. ESTUDIO ALOMÉTRICO
Para conocer el posible efecto que la adición a la dieta de ácido linoleico conjugado y betaína
tienen sobre el crecimiento y el desarrollo de los cortes y tejidos anteriormente mencionados resultado de
los procedimientos de despiece y disección, se utilizó el modelo matemático propuesto por Huxley en
1932. Este modelo matemático conocido como ecuación alométrica, ha sido aplicado de forma
generalizada en porcino (Elsey y col., 1964, Cole y col, 1976, Evans y Kempster, 1979, Swatland, 1982,
Davies, 1983, Fortin y col., 1987) para medir el crecimiento relativo de dos componentes corporales;
siendo uno de ellos el organismo completo, total corporal o total de referencia y el otro una fracción de
éste, ya sea región, órgano, tejido o componente. De este modo se puede conocer la evolución de la
composición de animal o de su canal. La ecuación alométrica descrita por Huxley, como ya se ha
mencionado en el capítulo anterior, es la siguiente:
El análisis alométrico del desarrollo de los diferentes cortes de la canal y tejidos diseccionados de
jamón y paleta se llevó a cabo mediante el cálculo de la regresión lineal de la ecuación linealizada en su
forma logarítmica:
‐ 162 ‐
log log log
Donde Y es el peso de un órgano, tejido o región anatómica; X es el peso del cuerpo, tejido total o
región anatómica con la cual se compara el crecimiento de la característica Y; a es una constante
denominada coeficiente fraccional, carente de significado biológico; y b es la constante denominada
coeficiente alométrico o razón de crecimiento relativo de los componentes, que es la pendiente de la
ecuación lineal.
3.1.2. ESTUDIO DE LA PRODUCCIÓN DE CALOR DE LAS VÍSCERAS QUE DRENAN AL SISTEMA
PORTA
3.1.2.1. ANIMALES Y DIETAS
Para este experimento se utilizaron dieciséis machos castrados de la estirpe Silvela,
proporcionadas por Sánchez Romero Carvajal (Jabugo S.A., Sevilla, España), con un peso aproximado
de 19 kg de PV. Los animales fueron alojados en parques individuales bajo condiciones de temperatura
constante (21 ± 1,5ºC), y asignados al azar a cada uno de los cuatro tratamientos experimentales con 4
animales por tratamiento. Éstos consistieron en la incorporación a la dieta basal, que fue utilizada como
tratamiento control, de 0,5% de betaína (Betafin S1, crystalline, 96% pureza; Danisco, Copenhague,
Dinamarca), 1% de CLA (el 60% de los isómeros de CLA era la mitad cis-9, trans-11 y la mitad trans-10,
cis-12 en forma de ácidos grasos libres; BASF, Ludwigshafen, Alemania) o 0,5% de betaína + 1% CLA a
expensas de aceite de girasol (para CLA) y almidón de maíz (para betaína). Las dietas fueron elaboradas
con cebada molida y harina de soja (15,1% de proteína bruta, 0,10% de lisina, y 14,6 MJ energía
metabolizable (EM)/Kg de materia seca (MS)). Los animales tuvieron un periodo de adaptación a la dieta
de 7 días antes de la cirugía, y se alimentaban dos veces al día (a las 9:00 y 15:00 horas) siendo el nivel
de alimentación 70% ad libitum, calculado en función del PV, siguiendo una regresión lineal descrita por
Nieto y col. (2001) para el cerdo Ibérico. La determinación de la composición de las dietas (Tabla 3.2) se
‐ 163 ‐
realizó según la metodología descrita por la AOAC (2000) para materia seca (no. 934.01) y cenizas (no.
942.05). El contenido en nitrógeno se determinó por el procedimiento Dumas usando para ello un equipo
LECO Truspec CN (LECO Corporation, St. Joseph, MI, EEUU). La proteína bruta se calculó multiplicando
el nitrógeno total obtenido por el factor 6,25. El contenido en energía total de las dietas experimentales se
midió utilizando para ello una bomba calorimétrica (PARR 1356; Biometa, IL, EEUU).
aContiene por kg: retinol, 9836 UI; colecalciferol, 2253 UI; D-α-tocoferol, 2,52 UI; menadiona bisulfato, 1,5 mg; tiamina 0.15 mg riboflavina, 3 mg; piridoxina, 0,15 mg; cianocobalamina, 15 μg; ácido fólico, 15 μg; ácido nicotínico, 22,5 mg; pantotenato cálcico, 15 mg; ; Mn, 15 mg MnSO4. 4H2O; Fe, 75 mg FeSO4.7H2O; Zn, 120 mg ZnO; I, 450 µg KI; Cu, 60 mg CnSO4.5H2O; Co, 300 µg CoSO4.7H2O
Tabla 3.2. INGREDIENTES Y COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.
Ingredientes, g/kg Dietas
Control Betaína CLA CLA + Bet
Cebada molida 840 840 840 840
Torta de soja 80 80 80 80
Betaína - 5 - 5
Almidón de maíz 32,8 27,8 32,8 27,8
Ácido linoleico conjugado
- - 10 10
Aceite de girasol 10 10 - -
CO3Ca 11 11 11 11
PO4HCa 12 12 12 12
NaCl 5 5 5 5
L-Lys-HCL 4 4 4 4
L-Thr 1 1 1 1
BHT 0,125 0,125 0,125 0,125
Premezcla vitamínico-mineral
3 3 3 3
Análisis químico, g/kg
Materia Seca 901 905 905 906
Proteína bruta 4,95 5,16 5,10 5,44
Cenizas (%) 884 923 905 948
Energía (MJ/kg) 16,3 16,6 16,5 16,5
‐ 164 ‐
3.1.2.2. PROCEDIMIENTO QUIRÚRGICO
Cuando los animales alcanzaron los 30 kg de PV aproximadamente, fueron implantados
quirúrgicamente con 3 catéteres: en la vena porta, la vena ileal y la arteria carótida. El proceso quirúrgico,
así como el diseño, construcción, mantenimiento de los catéteres y cuidado de los animales tras la
intervención quirúrgica es ampliamente descrito por Rodríguez-López y col. (2013). En esta fase del
experimento es importante el contacto cercano con los animales para que se habitúen a ser manipulados,
lo que reduce el estrés que el muestreo pueda ocasionarles. Esto, además, es importante para obtener
una medida correcta del flujo sanguíneo y del resto de parámetros que de él dependen. Se realizaron dos
cirugías al día, después los animales tenían libre acceso al agua y el alimento ofrecido correspondía al
30, 60 y 100% de la ración diaria en los días 1, 2 y 3 tras la cirugía, respectivamente.
3.1.2.3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
El experimento comenzó cuando los animales se recuperaron completamente de la cirugía (de 8 a
10 días). 45 minutos antes del primer muestreo, se infundió en el animal una dosis de 15 ml de ácido
para-aminohipúrico (PAH; 2% p/v; P-1422 Sigma-Aldrich Química S.A., Madrid, España), según describe
Yen y Killefer (1987), a través del catéter instalado en la vena ileal, y se prosiguió con una infusión
continua de 0,8 ml/min que duró todo el periodo de muestreo (6 horas) usando para ello una bomba de
infusión (Harvard Pump 33; Harvard Apparatus, Holliston, MA, EE.UU.). Utilizando jeringas heparinizadas
de 4,5 ml (Monovette VetMed LH; Sarstedt, Nümbrecht, Alemania) se tomaron dos muestras de sangre
de forma anaeróbica, de la arteria carótida y de la vena porta simultáneamente, 5 minutos y 0.5, 1, 1.5, 2,
2.5, 3, 3.5, 4, 5 y 6 horas después de la ingestión de 1200 g de la dieta correspondiente de muestreo.
Inmediatamente a la extracción de sangre se midió la saturación de oxígeno en sangre y el contenido de
hemoglobina utilizando un hemoxímetro (OSM 3 Hemoximeter; Radiometer Corporation, Copenhague,
Dinamarca). El plasma obtenido tras la centrifugación de la muestra (4 ºC, 1145 g durante 30 minutos;
Centrifuge 5810R. Eppendorf AG. 22331. Hamburgo, Alemania) se almacenó a – 20 ºC hasta ser
‐ 165 ‐
analizado para la determinación de la concentración de ácido PAH (Smith y col., 1945) mediante la
técnica gravimétrica descrita por Lobley y col. (1995).
3.1.2.4. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE ÁCIDO PAH EN PLASMA
El ácido PAH contenido en las muestras de plasma se determinó siguiendo una versión
modificada por Lobley (1995) del método descrito por Smith y col. (1945). En este método, basado a su
vez en la técnica fotocolorimétrica de Bratton y Marshal (1939) para la cuantificación de sulfonamidas, las
muestras de plasma (0,25 g) se desproteinizaron con 10 volúmenes de ácido tricloroacético (12% p/v). A
continuación se centrifugaron a 1308 g y 25°C durante 10 minutos (Eppendorf 5810R, Hamburgo,
Alemania). Del sobrenadante, se tomo una alícuota (1 g) y se colocó en un tubo de precipitado al que se
añadieron cada 3 minutos de manera sucesiva 125 µl de los siguientes reactivos: nitrito de sodio (0.1%
p/v), sulfato de amonio (0.5% p/v) y N-(1-naftil) dihidrocloruro de etilendiamina (0.1% p/v). En la versión
modificada de Lobley (1995), todas estas operaciones descritas se llevan a cabo de forma gravimétrica
utilizando una balanza de precisión (referencia). El grupo amino libre del PAH reacciona con el nitrito de
sodio en medio ácido dando lugar a la formación de sales de diazonio. El exceso de nitrito de sodio es
destruido por el sulfamato de amonio para evitar la formación de compuestos nitrosos. La sal de diazonio
es altamente reactiva y forma un complejo coloreado en presencia de N-(1-naftil) dihidrocloruro de
etilendiamina en medio ácido. Treinta minutos después de la última adición de reactivo, las
concentraciones se determinaron mediante la medida de la absorbancia a 540 nm (CECIL CE 2041
spectrophotometer 2000 series, CECIL Instruments, Cambridge, Inglaterra). Se realizaron los análisis por
duplicado.
3.1.2.5. DETERMINACIÓN DEL FLUJO SANGUÍNEO
Una vez determinada la concentración de ácido PAH en el plasma obtenido tras la centrifugación
de la sangre arterial y venosa, se calculaló el flujo sanguíneo VDP la siguiente ecuación:
‐ 166 ‐
í / ⁄ ⁄
⁄
Donde Vinf es la tasa con que se infunde el ácido PAH, Cinf la concentración del ácido PAH en la
solución infundida y [PAH]v y [PAH]a es la concentración de ácido PAH en la sangre venosa y arterial,
respectivamente (Huntington y col.,1990).
3.1.2.6. DETERMINACIÓN DE CONSUMO LA CONCENTRACIÓN DE O2 EN SANGRE
Para determinar la concentración de O2 (mM) en sangre arterial y portal se aplicó la ecuación de
Huntington y col. (1990):
ó ⁄ ó % 1,33 ⁄
100 22,4 ⁄
Donde Hb es la concentración de hemoglobina en sangre, y los valores 1,33 y 22,4 son constantes
que indican la cantidad de O2 (ml) presente por gramo de hemoglobina y mmol de O2, respectivamente.
La saturación de O2 y la concentración de hemoglobina se midieron inmediatamente tras la
extracción simultánea de sangre portal y arterial, utilizando un hemoxímetro (OSM 3 Hemoximeter;
Radiometer Corporation, Copenhague, Dinamarca), como aparece descrito en el procedimiento
experimental.
‐ 167 ‐
3.1.2.7. DETERMINACIÓN DE CONSUMO DE O2 Y PRODUCCIÓN DE CALOR DE LAS VDP
Para determinar la producción de calor de las VDP se utilizó el valor de 20,4 kJ/l como equivalente
energético del O2 (Rérat y Vaissade, 1993). Con la intención de extrapolar los datos obtenidos y
compararlos con cualquier especie animal, la producción de calor de las VDP se expresó en función del
peso metabólico del animal.
El consumo de O2 (mol/minuto) se determinó empleando la siguiente ecuación:
Donde [O2] es la concentración de O2 (mmol/l) determinada en la sangre extraída tanto de la
arteria carótida ([O2]A) como de la vena porta ([O2]V) y FSP es el flujo sanguíneo portal (l/minuto)
determinado mediante el análisis del contenido de PAH (Katz y Bergman, 1969).
3.1.3. DETERMINACIÓN DEL FLUJO NETO PORTAL DE DISTINTOS METABOLITOS
Se determinaron los siguientes metabolitos: albúmina, amonio, colesterol, creatinina, glucosa,
lactato, triglicéridos y urea. La concentración plasmática de cada metabolito se obtuvo mediante kits
comerciales de ByoSystems S.A. (Barcelona, España) en todas ellas salvo para amonio y lactato que se
determinaron mediante kits comerciales (Biochemical Enterprise; BEN, Milán, Italia). El analizador
automático para bioquímica sanguínea utilizado fue el modelo BA 400 (BioSystems S.A., Barcelona,
España). Se describe a continuación el fundamento de la técnica empleada en cada una de las distintas
determinaciones.
‐ 168 ‐
3.1.3.1. DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
Para la determinación cuantitativa de albúmina en plasma se siguió el método de Doumas y col.
(1971) utilizando Verde de Bromocresol (BCG). Este procedimiento mostró mayor sensibilidad y menor
susceptibilidad a sustancias de interferencia.
La albúmina se combina con el BCG a pH ligeramente ácido produciéndose un cambio de color del
indicador de amarillo verdoso a verde azulado proporcional a la concentración de albúmina presente en la
muestra ensayada. La intensidad del color formado es medida en el espectrofotómetro a 620 nm. Se
utilizó el kit comercial Albúmina de ByoSystems S.A. (Barcelona, España).
3.1.3.2. DETERMINACIÓN DE AMONIO
La técnica empleada en la determinación de amonio plasmático es un método enzimático-UV
basada en el introducido por Mondzac y col. en 1965, siendo el más empleado en la actualidad. Como se
observa en la Figura 3.2, el amonio plasmático reacciona con una molécula de α-cetoglutarato para dar
lugar a la formación de L-glutamato en presencia de la enzima glutamato deshidrogenasa (GLDH) y una
molécula de nicotinamida adenina dinucleótido fosfato (NADPH) que será oxidada a NADP+ durante la
reacción.
Figura 3.2: Método enzimático para la determinación de amonio (Mondzac, 1965)
‐ 169 ‐
La cantidad de NADPH oxidado medido a 340 nm es proporcional a la concentración de amonio
presente en la muestra ensayada. Se utilizó el kit comercial Ammonia Quantitative UV assay on plasma.
Biochemical Enterprise; BEN (Milán, Italia).
3.1.3.3. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL
Se utilizó el método de Allain y col. (1974), que modificaron el método original (Flegg y Richmond,
1973) combinando colesterol oxidasa y colesterol estereasa (Figura 3.3). Esta última enzima hidroliza los
ésteres de colesterol para dar lugar a colesterol libre y ácidos grasos. Tanto el colesterol libre originado
como el colesterol esterificado presente en la muestra se oxidan en presencia de la enzima colesterol
oxidasa para dar coleten-4-3-cetona y peróxido de hidrógeno. En presencia de la enzima preroxidasa se
origina un compuesto coloreado, la quinonaimina roja.
Figura 3.3: Método enzimático colesterol oxidasa/peroxidasa (Allain y col., 1974)
La intensidad de color orginado es proporcional a la cantidad de colesterol presente en la muestra
ensayada, y puede ser cuantificado por espectrofotometría (500 ± 20 nm). Se utilizó el kit comercial
Colesterol oxidasa/peroxidasa de ByoSystems S.A. (Barcelona, España).
.
‐ 170 ‐
3.1.3.4. DETERMINACIÓN DE CREATININA
El método empleado se basa en la reacción de Jaffé (1886). La creatinina reacciona con el ácido
pícrico en medio alcalino formando un complejo de color rojo a una longitud de onda entre 510- 520 nm
(Figura 3.4). El inconveniente de este método es que la creatinina no es la única que reacciona
disminuyendo la especificidad. Existen interferentes positivos, entre ellos las proteínas, glucosa,
acetoacetato, ácido ascórbico y ácido úrico; e interferentes negativos siendo más importante es la
bilirrubina. Frente a muestras con un nivel de bilirrubina elevada, el valor de creatinina se ven disminuido
porque la bilirrubina en el medio alcalino se oxida a biliverdina formando un compuesto incoloro que
disminuye el color de la reacción.
Figura 3.4: Método colorimétricocinético para la determinación de creatinina basado en la reacción de
Jaffé (1986).
Para minimizar las interferencias positivas basándose en el hecho de que este tipo de
interferencias presentan distinta velocidad de reacción se efectuaron dos lecturas, una lectura rápida para
descartar interferentes de reacción rápida y una segunda lectura realizada antes de que actúen los
interferentes de reacción lenta; la diferencia entre estos dos tiempos de lectura fue directamente
proporcional a la concentración de creatinina presente en la muestra ensayada. Se utilizó el kit comercial
Creatinina picrato alcalino de ByoSystems S.A. (Barcelona, España).
‐ 171 ‐
3.1.3.5. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA
El contenido en glucosa de la muestra se cuantificó por el método enzimático-colorimétrico de la
glucosa oxidasa peroxidasa (GOD-POD) descrito por Trinder (1969). El método GOD-POD consiste en
una serie de reacciones (Figura 3.5) en las que la glucosa oxidasa cataliza la oxidación de la β-D-glucosa
a ácido D-glucónico con formación de H2O2. Éste es utilizado por la enzima peroxidasa para oxidar la
ampirona y el fenol, dando lugar a una quinoneimina coloreada que posteriormente se mide en
espectrofotómetro a 505 nm.
Figura 3.5: Método enzimático glucosa oxidasa/peroxidasa (Trinder, 1969).
La intensidad de color será proporcional a la concentración de glucosa presente en la muestra
ensayada. Se utilizó el kit comercial Glucosa oxidasa/peroxidasa de ByoSystems S.A. (Barcelona,
España).
3.1.3.6. DETERMINACIÓN DE LACTATO
La cuantificación de lactato en plasma fue determinado siguiendo el método descrito por Brandt y
col. (1980) que se basa en dos reacciones químicas (Figura 3.6) en las que el compuesto lactato o L-
lactato es oxidado a piruvato por la enzima lactato oxidasa (LOD). El peróxido de hidrógeno resultante es
utilizado por una enzima peroxidasa (POD) que induce la unión de un donador de hidrógeno y un agente
copulante para formar un cromógeno.
‐ 172 ‐
Figura 3.6: Método enzimático para cuantificar L-Lactato (Brant y col., 1980).
La concentración se determina espectrofotométricamente (550 nm). La concentración del
compuesto cromógeno es directamente proporcional a la concentración de lactato en la muestra
ensayada. Se utilizó el kit comercial L-Lactate Trinder Liquid. Biochemical Enterprise; BEN (Milán, Italia).
3.1.3.7. DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
El método empleado para determinar el contenido de triglicéridos en plasma fue descrito por
Bucolo y col. (1973) y modificado posteriormente por Fossati y col. (1982).
Figura 3.7: Método enzimático glicerol fosfato oxidasa/peroxidasa (Fossati y col., 1982).
‐ 173 ‐
El glicerol liberado de los triglicéridos tras la hidrólisis llevada a cabo por la lipoproteína lipasa es
transformado por la enzima glicerol quinasa en glicerol-3 fosfato. Éste es oxidado en una reacción
catalizada por la enzima glicerol-3 fosfato oxidasa (GPO) en fosfato dihidroxiacetona y peróxido de
hidrógeno. En presencia de la enzima peroxidasa (POD), el peróxido de hidrógeno oxida el cromógeno
ESPT (4-aminofenazona/N-etilmetil anilina propano-sulfonato sódico) para formar quinonimina púrpura
cuya intensidad de color, medida espectrofotométricamente a 550 nm, es proporcional a la concentración
de triglicéridos en la muestra ensayada (Figura 3.7). Su utilizó el kit comercial Glicerol fosfato
oxidasa/peroxidasa de ByoSystems S.A. (Barcelona, España).
3.1.3.8. DETERMINACIÓN DE UREA
Se utilizó el método de Talke y Schubert (1965). Es un método enzimático para la determinación
de la azoemia (nivel de urea en sangre) basado en la acción de la ureasa y la glutamato deshidrogenasa
(GLDH). En este método (Figura 3.8) se basan la mayoría de las técnicas utilizadas actualmente para la
cuantificación de urea en sangre y orina. La ureasa cataliza la hidrólisis de la urea de la muestra en
amoníaco (NH3) y anhídrido carbónico (CO2). El amoníaco formado se incorpora al α-cetoglutarato por
acción de la enzima glutamato deshidrogenasa (GLDH) con oxidación paralela de NADH a NAD+.
Figura 3.8: Método enzimático ureasa/glutamato deshidrogenasa (Talke y Schubert, 1965).
La concentración de urea se determina cinéticamente a 340 nm a través de la disminución de la
absorbancia resultante de la oxidación del NADH a NAD+, proporcional a la concentración de urea
‐ 174 ‐
presente en la muestra ensayada. Se utilizó el kit comercial ureasa/glutamato deshidrogenasa de
ByoSystems S.A. Barcelona, España).
3.1.3.9. DETERMINACIÓN DEL FLUJO NETO PORTAL DE LOS DISTINTOS METABOLITOS
Para la determinación del flujo portal de los distintos metabolitos analizados en plasma
(mg/minuto) se empleó la siguiente ecuación:
Donde C representa la concentración de metabolitos (mg/ml) en la arteria (Ca) o en la vena (Cv)
que entra y sale, respectivamente, de las VDP, y FS corresponde al flujo sanguíneo portal (ml/minuto).
3.3 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Allain, C.C., Poon, L.S., Chan, C.S.G., Richmond, W. y Fu, P.C. 1974. Enzymatic determination of total
serum cholesterol. Clinical Chemistry 20, 470-475.
AOAC, Association of Official Analytical Chemists. 2000. Official Methods of Analysis. 17th Ed. Arlington,
VA, USA.
AOAC. 1990. Official Methods of Analysis. 15th ed. Association of Official Analysis Chemists, Arlington,
V.A.
Bucolo, G. y David, H. 1973. Quantitative determination of serum triglycerides by use of enzymes. Clinical
Chemistry 19, 476-482.
Brandt, R.B., Siegel, S.A., Waters, M.G. y Bloch, M.H. 1980. Spectrophotometric assay for D (-) lactate in
‐ 175 ‐
plasma. Analytical Biochemistry 102, 39-46.
Cole, D.J.A., White, M.R., Hardy, B., y Carr, J.R. 1976. Tissue growth in the pig. Animal Production 22,
341−350.
Davies A.S., 1983. Growth and development of pigs: a reanalysis of the effects of nutrition on body
composition. The Journal of Agricultural Science of Cambridge 89, 257-266.
De Pedro, E. 1987. Estudio de los factores sexo y peso de sacrificio sobre características de la canal de
cerdo ibérico. Tesis Doctoral. Universidad Córdoba.
Doumas, B.T., Watson, W.A. y Biggs, H.G. 1971. Albumin standards and the measurement of serum
albumin with bromocresol green. Clinical Chimica Acta 31, 87-96.
Evans, M., Brown, J. y McIntosh, M. 2002. Isomer-specific effects of conjugated linoleic acid (CLA) on
adiposity and lipid metabolism. Journal of Nutrition and Biochemistry 13, 508.
Evans D.G. y Kempster A.J., 1979. The effects of genotype, sex and feeding regimen on pig carcass
development. 1. Primary components, tissues and joints. The Journal of Agricultural Science of
Cambridge 93, 339-347.
Elsey F.W., McDonald I. y Fowler V.R., 1964. The effect of plane of nutrition on the carcass of pigs and
lambs when variations in fat content are excluded. Animal Production 6, 141-154.
Flegg, H.M. 1973. An investigation of the determination of serum cholesterol by an enzymatic method,
Annals Clinical Biochemistry 10, 79-84.
Fortin A., Wood J.D. y Whelehan O.P. 1987. Breed and sex effects on the development and proportions of
muscle, fat and bone in pigs. The Journal of Agricultural Science of Cambridge 108, 39-45.
Fossati, P. y Prencipe, L. 1982. Serum triglycerides determined colorimetrically with an enzyme that
produces hydrogen peroxide. Clinical Chemistry 28, 2077-2080.
‐ 176 ‐
Gómez-Lechón, M.J., Donato, M.T. y Castell, J.V. 1997. Use of cultured hepatocytes to investigate drug
metabolism and toxicity. Toxicol In Vitro 10, 63-70.
Huntington, G.B., Eisemann, J.H. y Whitt, J.M. 1990. Portal blood flow in beef steers: comparison of
techniques and relation to hepatic blood flow, cardiac output and oxygen uptake. Journal of Animal
Science 68, 1666-1673.
Huxley, J.S. 1932. Problems of relative growth. 1st ed, pag. 4-37. Methnen, Londres.
Jaffe, M. 1886. Uber den niederschlag, welchen pikrinsaure in normalen hrn erzeugt und uber eine neue
reaccion des kreatinins. Physiology, Chemistry and Physics 10, 391-400.
Katz, M.L. y Bergman, E.N. 1969. Simultaneous measurements of hepatic and portal venous blood flow in
the sheep and dog. American Journal of Physiology 216, 946-952.
Livak, K.J. y Schmittgen, T.D. 2001. Analysis of relative gene expression data using realtime quantitative
PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods 25, 402-408.
Lobley, G.E., Connell, A., Lomax, M.A., Brown, D.S., Milne, E., Calder, A.G. y Farningham, D.A.H., 1995.
Hepatic detoxification of ammonia in the ovine liver; possible consequences for amino acid
catabolism. British Journal of Nutrition 73, 667-685.
Marshall, E.K. Jr. 1913. A new method for the determination of urea in blood. Journal of Biological
Chemistry 15, 487-494.
Mondzac, A., Ehrlich, G.E. y Seegmiller, J.E. 1965. An enzymatic determination of ammonia in biological
fluids. Journal of Laboratory and Clinical Medicine 66, 526–533.
Nieto, R., Lara, L., García, M.A., Gómez, F., Zalvide, M., Cruz, M., Pariente, J.M., Moreno, A., y Aguilera
J.F. 2001. Evaluation o fan integrated feeding system in the Iberiam pig. Study of food consumption
and productive parameters. Sólo Cerdo Ibérico 6, 57-69.
Nieto, R., Miranda, A., García, M.A. y Aguilera, J.F. 2002. The effect of dietary protein content and feeding
‐ 177 ‐
level on the rate of protein deposition and energy utilization in growing Iberian pigs from 15 to 50 kg
body weight. British Journal of Nutrition 88, 39-49.
NRC. 1998. Nutrient Requeriments of Swine. 10th ed. Natl. Acad. Press, Washington, DC.
Noone, E.J., Roch, H.M., Nugent, A.P. y Gibney, M.J. 2002. The effect of dietary supplementation using
isomeric blends of conjugated linoleic acid on lipid metabolism in healthy human subjects. British
Journal of Nutrition 88, 243–51.
Richmond, W. 1973. Preparation and Properties of a Cholesterol Oxidase from Nocardia sp. and Its
Application to the Enzymatic Assay of Total Cholesterol in Serum. Clinical Chemistry 19, 1350-1356.
Riserus, U., Kerstin, B., Arner, P. y Vessby, B. 2002. Treatment with dietary trans 10 cis 12 conjugated
linoleic acid causes isomer-specific insulin resistance in obese men with metabolic syndrome.
Diabetes Care 25, 1516–1521.
Rodríguez-López, J.M., Lachica, M., González-Valero, L. y Fernández-Figares, I. 2013. Approaches for
quantifying gastrointestinal nutrient absorption and metabolism in a native and a modern pig breed.
Journal of Agricultural Science 151, 434-443.
Ryder, J.W., Portocarrero, C.P. y Song, X.M., 2001. Isomer-specific antidiabetic properties of conjugated
linoleic acid. Diabetes 50, 1149–1157.
Smith, H.W., Finkelstein, N., Aliminosa, L., Crawford, B. y Graber, M., 1945. The renal clearances of
substituted hippuric acid derivatives and other aromatic acids in dogs and man. Journal Clinical
Investigation. 24, 388-404.
Swatland H.J. 1982. Histology of allometric growth in hindlimb muscles of pigs. The Journal of Agricultural
Science of Cambridge 98, 629-632.
Talke, H. y Schubert, G.E. 1965. Enzymatische harnstoffbestimmung in blut und serm im optischen test
nach Warburb. Klinische Wochenschrift 43, 174-175.
‐ 178 ‐
Trinder, P. 1969. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen
acceptor. Annals Clinical Biochemistry 6, 24-27.
Yen, J.T. y Killefer, J. 1987. A method for chronically quantifying net absorption of nutrients and gut
metabolites into hepatic portal vein in conscious swine. Journal of Animal Science 64, 923-934.
‐ 179 ‐
CAPITULO4
PRUEBAS EXPERIMENTALES
‐ 181 ‐
4.1. MANUSCRITO 1
INFLUENCE OF BETAINE AND CONJUGATED LINOLEIC ACID ON DEVELOPMENT OF CARCASS
CUTS OF IBERIAN PIGS GROWING FROM 20 TO 50 KG BODY WEIGHT
‐ 183 ‐
A b s t r a c t
Twenty Iberian gilts (20 kg body weight, BW) were fed diets containing no betaine or
conjugated linoleic acid (CLA) (Control), 0.5% betaine, 1% CLA, or 0.5% betaine + 1% CLA.
Additionally, 5 pigs were killed at 20 kg BW for the initial points of the allometric equations. At 50
kg BW, left semicarcasses were cut into primal cuts, hams and shoulders trimmed and
dissected. CLA alone did not affect any analyzed parameter. Betaine increased (23 and 21%,
respectively) the yield of shoulder butt and spine and decreased allometric growth coefficient
of belly and backfat, compared to Control diet. Tenderloins and trimmed hams of pigs fed CLA
+ betaine diet developed later and were heavier (22 and 5%, respectively) than Control
pigs. Also, leaf fat developed earlier and had lighter weight (32%). Furthermore, pigs fed CLA
+ betaine diet had heavier lean (5%) and fat free lean (6%) of shoulders compared to Control
pigs.
1. Introduction
Feed additives have been investigated for their properties in promoting feed efficiency
and improving carcass composition, especially through decreasing fat deposition. Betaine and
conjugated linoleic acid (CLA) are two natural metabolic modifiers that may be used in swine
production.
Betaine is an amino acid (trimethyl-glycine) present in most organisms and is an
obligatory intermediate in the catabolism of choline. Although addition of betaine in swine
diets has increased during the last decade, experimental results for growth and carcass
performance have not been consistent. Studies in finishing pigs have demonstrated decreases
in some indicators of body fat (Lawrence, Schinckel, Adeola, & Cera, 2002), with a potential
reduction in feed intake (Matthews, Southern, Higbie, Persica, & Bidner, 2001) under some
conditions. In contrast, other studies in finishing pigs have reported either minimal effects or
‐ 184 ‐
no effect of betaine on growth, feed intake, or body fat (Matthews, Southern, Pontif, Higbie, &
Bidner,1998; Øverland, Rørvik, & Skrede, 1999). Furthermore, young growing pigs restrictively
fed betaine diets had enhanced protein deposition at the expense of carcass fat (Fernández-
Fígares et al., 2002).
CLA consists of a group of geometric and positional isomers of linoleic acid that causes
significant changes in body composition, including decreased fat deposition, increased whole-
body protein and increased carcass water (Park et al., 1997) in laboratory animals. These
properties together with its effect on meat quality have made CLA of special interest in animal
production. Some researchers have found an increase in intramuscular fat from pigs fed diets
supplemented with CLA (Dugan et al., 1999; Joo, Lee, Ha, & Park, 2002; Wiegand, Parrish, Swan,
Larsen, & Baas, 2001; Wiegand, Sparks, Parrish, & Zimmermand, 2002), although others have
observed no effect (Tischendorf, Schöne, Kirchheim, & Jahreis, 2002). As a result, there is a
considerable interest for including CLA in pig feed to improve lean production efficiency and pork
quality and to provide value-added healthful meat products for human consumption (Thiel-
Cooper, Parrish, Sparks, Wiegand, & Ewan, 2001).
Most of the studies investigating the effects of betaine or CLA were made with pigs of
modern genotypes in the finishing phase. There are few studies on the effect of CLA or betaine
on unimproved breeds, such as the Iberian pig, whose metabolic profile differs greatly from
conventional or lean genotypes. In a recent study, a synergistic effect of betaine and CLA on
growth and carcass composition of young growing Iberian pigs was found (Fernández-Fígares,
Conde-Aguilera, Nieto, Lachica, & Aguilera, 2008), with no effect of betaine or CLA alone.
The aim of the present study was to evaluate the effects of CLA and betaine on growth
and development on different carcass cuts and the dissected components of ham and shoulder
of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg body weight, using allometric equations. We
hypothesized that the beneficial effects of these growth promoters would be more patent in
Iberian than in modern pig genotypes.
‐ 185 ‐
2. Materials and methods
2.1. Animals and diets
A total of 25 purebred Iberian (Silvela strain) gilts 15 kg BW were used in the study. The
animals were cared for in accordance with European Union guidelines (No. 86/609/EEC) and
the experimental protocol was reviewed and approved by the Bioethical Committee of the
Spanish National Research Council (CSIC), Spain. Before the beginning of the growth trial, all
pigs were group-housed and given ad libitum access to the Control diet from 16 to 20 kg BW. Five
pigs were killed at the beginning of the experiment to obtain the initial points for the allometric
equations. The remaining 20 animals were individually housed in pens (2 m2) located in a
controlled environment room (20 ± 1.5 °C) and randomly assigned to each of four
experimental treatments (5 pigs per treatment). Treatments consisted of a basal diet (Control)
supplemented or not with 0.5% betaine (Betafin S1, crystalline, 96% purity, Danisco,
Copenhagen, Denmark), 1% CLA (60% CLA isomers, half cis-9, trans-11 and half trans-10, cis-12
in FFA form, BASF, Ludwigshafen, Germany), or 0.5% betaine + 1% CLA, at the expense of
cornstarch (for betaine) and sunflower oil (for CLA). The Control diet was barley and soybean
meal based and contained 12.0% CP, 0.81% Lys, and 14.8 MJ ME/kg DM, as described in detail by
Fernández-Fígares et al. (2008). Pigs were fed at 95% of ad libitum intake, calculated as a
function of BW following the linear regression model described by Nieto et al. (2001) for Iberian
pigs. Animals were fed once daily (09.00), and the daily feed was adjusted weekly to
accommodate their requirement according to individual BW. Water was provided freely.
2.2. Slaughter and dissection
After approximately 24 h of fasting, pigs were stunned by electrical shock and
exsanguinated. The slaughter weight was 51.1 ± 0.85 kg BW. Immediately after slaughter, the
‐ 186 ‐
eviscerated carcass with head, feet, and tail was weighed and chilled. Standard carcass
measurements were recorded and reported elsewhere (Fernández-Fígares et al., 2008). The
head and feet were then removed by cuts at the occipitoatlas and at the carpus-metacarpal and
tarsus-metatarsal joints, respectively. The carcass was divided longitudinally by sawing through
the median plane and the left side of each carcass was weighed and frozen in polyethylene bags
at -20 °C until cutting and dissection of the carcass. The left sides of thawed carcasses were
cut into primal cuts: tenderloin, shoulder butt, loin, spine, spareribs, backfat, belly, leaf fat,
shoulder and ham, according to the methodology of De Pedro (1987) with small modifications as
described by Vílchez-Campillos (2004). Hams and shoulders from left carcasses were trimmed
and subsequently dissected into lean, subcutaneous fat, intermuscular fat, bone, skin, and trim
as described by De Pedro (1987). The intramuscular fat from trimmed hams and shoulders was
obtained by soxhlet extraction from dissected lean tissue.
2.3. Chemical analysis
Intramuscular fat from ham and shoulder was determined on dissected lean tissue
homogenized with a mincer and freeze-dried. Chloroform/methanol (2:1, v/v) was used as the
solvent mixture for Soxhlet (PRECIS-BAT-148 S • 200) extraction.
2.4. Statistical analysis
Cuts and dissected components yield data were analyzed by one-way ANOVA using the
GLM procedure of SAS (SAS, 2004) considering the pig as the experimental unit. Final weight of
pig was included as a covariate in the analyses of cuts of the carcass, and the weight of cut was
included as a covariate in the analysis of dissected components from shoulder and ham. When
differences among the treatments were significant (P<0.05) as determined by the F test in the
ANOVA, means were separated using least significant differences (Steel & Torrie, 1981).
‐ 187 ‐
The mathematical model of Huxley (1932) was used to describe the allometric or
differential growth, i.e. development of structures and changing proportions of body
constituents in the experimental animals:
Y = aXb
where Y is the weight of carcass component, X is the weight of carcass or empty body
weight, a is the intercept and b is the allometric growth coefficient relating the growth of Y to
that of X. If b = 1, isometric growth is assumed (both components grow at the same rate), if b>1,
there is positive allometry (Y component grows faster than X) and if b<1, there is negative
allometry (Y component grows more slowly than X).
Allometric analyses of the development of different cuts of the carcass and of dissected
components of shoulder and ham were conducted by calculating linear regressions of log
transformed cut weights on log transformed carcass weight, using the REG procedure of SAS
(SAS, 2004).
log Y = log a + b log X
R2 and RSD were used to evaluate the goodness of fit of the allometric model. Student´s t-
test was used to compare growth coefficients with predesignated constants or to compare two
growth coefficients.
3. Results and discussion
3.1. Weight of primal carcass cuts and dissected components of ham and shoulder
Table 1 shows the effects of dietary betaine and/or CLA on the performance of the primal
carcass cuts of Iberian pigs. Pigs fed with CLA + betaine had significantly (P<0.05) greater
tenderloins (22%) and trimmed hams (5%) while heavier shoulder butts were observed in
betaine fed pigs compared to Control pigs (23%). Similarly to our results, no significant
differences were found in ham yield of pigs fed betaine diets (Matthews et al., 2001).
‐ 188 ‐
Furthermore, hams of finishing pigs fed 1% CLA were significantly heavier (P<0.05) than control
pigs (Thiel-Cooper et al., 2001).
No effect of betaine or CLA (P>0.05) on loins was found in our experiment. Similar results
have been reported in growing-finishing (Thiel-Cooper et al., 2001) and heavy pigs (Corino,
Magni, Pastorelli, Rossi, & Mourot, 2003). We had previously described increased carcass lean
and protein deposition in Iberian gilts (Fernández-Fígares et al., 2008) fed CLA + betaine diets
with no significant effect of CLA or betaine alone. The present results extend the study of the
effects of CLA and betaine in Iberian pigs from carcass to individual cuts level.
Regarding cuts where bone is predominant, spine of pigs fed betaine diet was
significantly heavier than Control pigs (P<0.05; 21%) while no differences for CLA (P>0.05) or CLA
+ betaine (P=0.07) were found. In accordance to our results, increased carcass length
(Matthews et al., 1998, 2001) in finishing pigs fed betaine diets has been reported while CLA
supplementation did not affect it (Eggert, Belury, Kempa-Steczko, Mills, & Schinckel, 2001).
Concerning cuts where fat is predominant, significantly smaller amount of leaf fat was
found in pigs fed with CLA + betaine compared to Control (P<0.05; 32%) while no differences
(P>0.05) among Control and other treatments were found for backfat and belly. Similarly, other
authors (Lauridsen, Mu, & Henckel, 2005; Suksombat, Lounglawan, & Yowa, 2008) found no
effect of feeding CLA on backfat thickness of finishing pigs. On the other hand, dietary betaine
(Cadogan, Campbell, Harrison, & Edwards, 1993; Matthews et al., 2001) and CLA (Thiel-
Cooper et al., 2001; Tischendorf et al., 2002) decreased different estimates of fat content in
the carcass of finishing modern crossbred pigs. It is noteworthy to point out that relative
development of fat depots may differ according to anatomical location (Kouba & Bonneau,
2009).
An essential requirement in studies on growth and development is a precise
determination of body composition during the growth period. Manual dissection of the carcass
into lean, fat and bone has been established as a reference for a long time. The weight of the
‐ 189 ‐
different tissues in trimmed ham and shoulder of Iberian pigs fed Control diet or diet
supplemented with betaine, CLA or both can be seen in Table 2. No significant effects (P>0.05)
were observed in dissected ham tissues of Iberian pigs. Nevertheless we observed a trend
towards decreased bone content (7%; P=0.08) in hams of animals fed CLA + betaine diet
compared to Control pigs. On the other hand, increased lean (5%; P<0.05) and fat free lean (6%;
P<0.05) were found in shoulders of pigs fed CLA + betaine diet compared to Control pigs. In
agreement with the lack of effect of CLA, no alteration of lean or bone of upper and lower
shoulders and ham was found in finishing crossbred pigs fed CLA supplemented diet (Dugan,
Aalhus, Schaefer, & Kramer, 1997). Furthermore, 1–2% CLA supplementation did not affect
intramuscular fat content of longissimus dorsi in pigs (Bee, 2001; Eggert et al., 2001; Joo et al.,
2002; O'Quinn et al., 2000). However, Wiegand et al. (2001) found increases in firmness,
marbling and colour in pork meat supplemented with CLA.
Several factors have driven research investigating the control of fat and lean deposition in
livestock. Feed additives have been investigated for their properties in promoting feed
efficiency and improving carcass composition, especially through decreasing fat deposition. We
have proved that betaine and CLA interact positively as growth promoters and carcass
modifiers in Iberian pigs (Fernández-Fígares et al., 2008), but to our knowledge, no available
information exists on their effect on yield of carcass cuts and on dissected components of ham and
shoulder or their allometric growth coefficients. An expected greater effect of betaine and CLA
in the Iberian pigs than in conventional pigs was based on their greater adiposity and slower
growth rate (Nieto, Miranda, García, & Aguilera, 2002).
3.2. Allometric growth
Relative growth rates of primal cuts of Iberian pigs in relation to the weight of left
semicarcass as affected by dietary supplementation of betaine and CLA are presented in
Table 3 as allometric coefficients. Growth and development of lean and fat have been
extensively studied during the last five decades, because these traits are highly associated
‐ 190 ‐
with economic benefits (Gu, Schinckel, & Martin, 1992). Different growth rates for muscle,
bone, and fat during development have been reported (McMeenkan, 1940a,b,c). Bone and
muscle develop first, then rate of growth of these tissues slow down and the rate of fat
deposition increases in pigs of different sex and genotype (De Pedro, 1987; Evans & Kempster,
1979; Gu et al., 1992; Shields, Mahan, & Graham, 1983; Tess, Dickerson, Nienaber, & Ferrell,
1986; Vílchez-Campillos, 2004). To our knowledge, this is the first report on the effects of
betaine or CLA on growth coefficients of pigs. Of all body fractions, the lowest growth coefficient
was estimated for bones, indicating that this fraction is the earliest maturing tissue and thus
decreased as proportion of carcass side weight during growth (Fortin, Wood, & Whelehan,
1987). For growth of bones, Davis (1974), Cole, White, Hardy, and Carr (1976), Fortin et al.
(1987) estimated allometric b values from 0.63 to 0.92 in relation to the carcass side weight. In
the present study, allometric growth coefficient of pieces with higher bone content, spine, was
of similar magnitude. Compar- ison among the absolute values of allometric coefficients must
be made with some caution since they are affected by differing experimental conditions
(mainly feeding plane, age at the start and end of the trial, and duration of developmental
range).
Diet influenced tissue growth (Table 3). A significant increase (P<0.05) of allometric
coefficient for spine of pigs fed betaine diet compared to Control pigs was found (0.89 vs. 0.75),
suggesting that betaine caused a late maturing of this piece, which is in accordance with the
significant increase in spine yield already mentioned (Table 1). Other authors have also
reported that betaine may increase carcass length (Matthews et al., 1998, 2001) in finishing
pigs. Allometric coefficients for lean growth rate in the literature (Cole et al., 1976; Davis, 1974;
Fortin et al., 1987) ranged from 0.75 to 1·06 and for fat growth rate from 1.16 to 1.65. In the
present study pieces with higher content of lean tissue (tenderloin and loin) presented
allometric coefficients closed to 1 (P>0.05), indicating that these pieces develop at the same
speed than the whole carcass. Allometric coefficient in tenderloin, the leanest cut, was
significantly (P<0.05) higher in animals fed diet supplemented with CLA + betaine compared
‐ 191 ‐
to the Control diet (1.05 vs. 0.90). The late developing of tenderloin is in accordance with its
already mentioned higher yield (Table 1). Leaf fat, backfat and belly, with a predominance of
fat, presented late maturing and higher rate of development than the whole carcass. Furthermore,
pigs fed CLA + betaine diet had significantly lower (P<0.05) allometric coefficient of leaf fat
compared to Control (1.40 vs. 1.66), indicating slower growth, which is in accordance with
the decrease on estimated fat content of carcass gain in Iberian pigs fed CLA + betaine diet
(Fernández-Fígares et al., 2008). Regarding betaine, the belly of pigs fed betaine diet developed
earlier (P<0.05) and backfat had the same trend (P=0.09) compared to Control pigs. Similarly,
dietary betaine addition decreased backfat thickness of pigs (Fernández-Fígares et al., 2002;
Matthews et al., 2001). However, in other studies, betaine effects on backfat thickness were
negligible (Fernández-Fígares et al., 2008; Øverland et al., 1999). Shoulder, trimmed or not,
showed allometric coefficients close to 1 (P>0.05) in all treatments while ham, trimmed or not,
presented allometric coefficients less than one (P<0.05), indicating slower growth than the rest
of the carcass. Addition of CLA + betaine increased allometric coefficient (P<0.05) compared to
Control in trimmed ham, which is in accordance with the higher yield for trimmed ham of CLA +
betaine fed pigs (Table 1).
No effect (P>0.05) of betaine or CLA individually was observed on the rate of development of
dissected components of shoulder and ham (Tables 4 and 5). Nevertheless, we observed a trend to
an increase in allometric coefficients of lean tissue in shoulder (P=0.06) and ham (P=0.10)
when animals fed with CLA + betaine diet were compared to pigs fed the Control diet. The use of
CLA supplementation on pig diets has produced controversial results regarding fat and
protein deposition, although some of this variation may be due to the measurements taken to
approximate carcass composition. Additionally, the effects of CLA on carcass composition
appears to be dependent on pig age so that the effect is more pronounced in pigs that are in
the final stages of finishing. Some reports have indicated that betaine has no effect on carcass
fat or protein content in finishing pigs (Matthews et al., 1998; Øverland et al., 1999; Siljander-
Rasi et al., 2003). Nevertheless, Fernández-Fígares et al. (2002) reported a trend toward a
‐ 192 ‐
linear decrease in carcass fat content in growing pigs fed increasing levels of betaine, although
feed restriction was greater than in the current experiment. The effects of betaine on carcass
protein and fat deposition in pigs are not conclusive either, although it seems that the effects of
betaine are more patent under conditions of feed restriction (Fernández-Fígares et al., 2002).
Several potential mechanisms of action of CLA and betaine have been proposed.
CLA has been described to decrease body weight in animals reducing fat deposition and also
affecting lipid and protein content (Wang & Jones, 2004). Mechanisms of action suggested for CLA
reduction of body fat are increasing energy expenditure, modulating adipocyte metabolism, modulating
adipokines and cytokines and increasing fatty acid β-oxidation (Park & Pariza, 2007). On the other hand,
the basic metabolic roles of betaine are methyl donor and osmoprotectant (for review, see Kidd, Ferket, &
Garlich, 1997). When incorporated into pig diets, betaine has been reported to improve growth
performance by reducing the maintenance energy requirement of the animal, perhaps by reducing the
need for ion pumping involved with maintaining intracellular osmolarity (Schrama, Heet- kamp, Simmins, &
Gerrits, 2003). The possible mechanisms of actions involved when betaine and CLA are together are not
known and warrant further study.
In conclusion, CLA alone did not affect any of the parameters evaluated. However, addition of CLA
+ betaine to the diet of the Iberian pig during the early stages of growth may be of interest when yield of
lean cuts is a goal. As only five pigs per treatment were used, further research is needed to confirm these
results.
‐ 193 ‐
Table 1. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on yield (g) of different cuts of the left carcass of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW.
a,b Values within the same row with different superscripts differ at P<0.05. *SEM: Standard error of the mean
Table 2. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on dissected components (g) of trimmed shoulder and ham of the left carcass side of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW.
*Analyzed by Soxhlet extraction of lean tissue from shoulder or ham. ** Obtained by difference between lean tissue and intramuscular fat. a,b Values within the same row with different superscripts differ at P< 0.05. ¶SEM: Standard error of the mean.
DIETS Control Betaine CLA CLA + bet SEM Tenderloin 91a 103ab 104ab 111b 3.5
Shoulder butt 713a 876b 577a 815ab 29 Loin 639 638 645 666 20 Spine 824a 1001b 848ab 985ab 30 Sheet ribbed 1061 1072 1141 1138 27 Backfat 874ab 772a 960b 847ab 25 Belly 2610 2409 2660 2589 46 Leaf fat 430a 356ab 353ab 293b 20 Shoulder
Initial 4206ab 4329a 4000ab 3892b 60 Trimmed 2989 2026 2976 2910 55
Ham Initial 4950ab 4842a 5110b 5060b 34
Trimmed 4008a 4053ab 4163ab 4203b 33
DIETS Control Betaine CLA CLA + bet SEM¶
Component Shoulder
Rind 189 197 188 190 3.9 Bone 382 382 364 373 4.8 Lean 1257a 1271ab 1243a 1319b 11 Subcutaneous fat 775 789 810 749 16 Intermuscular fat 215 180 213 187 8.4 Intramuscular fat* 110 111 109 98 3.3 Lean (fat-free)** 1147a 1160a 1134a 1220b 10
Ham Rind 197 211 191 203 4.3 Bone 498 489 471 463 6.6 Lean 1982 2013 2013 2049 16 Subcutaneous fat 925 872 924 913 19 Intermuscular fat 253ab 270a 256ab 227b 6.2 Intramuscular fat* 129 127 132 127 3.9 Lean (fat-free)** 1853 1886 1881 1922 15
‐ 194 ‐
Table 3. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on allometric coefficients (b) o f different cuts of the left carcass of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW.
b ± Sb* R2* RSD*
Tenderloin Control 0.90a 0.104 0.926 0.211
Betaine 1.01ab 0.062 0.978 0.125
CLA 1.02ab 0.060 0.979 0.121
CLA + betaine 1.05b 0.059 0.982 0.120
Shoulder butt Control 0.93ab 0.094 0.942 0.191
Betaine 1.08a 0.079 0.969 0.159
CLA 0.78b 0.120 0.877 0.241
CLA + betaine 1.03a 0.050 0.986 0.103
Loin Control 0.91 0.085 0.950 0.172 Betaine 0.93 0.061 0.975 0.122 CLA 0.94 0.047 0.985 0.094 CLA + betaine 0.95 0.031 0.994 0.062
Spine Control 0.75a 0.048 0.975 0.098
Betaine 0.89b 0.071 0.963 0.142
CLA 0.77ab 0.073 0.949 0.147
CLA + betaine 0.87ab 0.050 0.981 0.102
Sheet ribbed Control 0.97 0.069 0.970 0.140 Betaine 0.98 0.049 0.985 0.099 CLA 1.02 0.074 0.970 0.149 CLA + betaine 1.03 0.046 0.988 0.093
Backfat Control 1.28ab 0.049 0.991 0.100
Betaine 1.18a 0.080 0.973 0.161
CLA 1.34b 0.043 0.994 0.086
CLA + betaine 1.25ab 0.059 0.987 0.121
Belly Control 1.18a 0.040 0.993 0.081
Betaine 1.12b 0.028 0.993 0.081
CLA 1.19a 0.019 0.998 0.038
CLA + betaine 1.17ab 0.029 0.996 0.060
Leaf fat Control 1.66a 0.106 0.976 0.215
Betaine 1.53ab 0.094 0.978 0.189
CLA 1.50ab 0.151 0.942 0.305
CLA + betaine 1.40b 0.089 0.976 0.182
continuous→
‐ 195 ‐
continuation Table 3
b ± Sb* R2* RSD*
Shoulder Untrimmed
Control 1.01ab 0.038 0.992 0.077
Betaine 1.03a 0.024 0.997 0.048
CLA 0.98b 0.020 0.998 0.039
CLA + betaine 0.96b 0.018 0.998 0.037
Trimmed Control 0.95 0.033 0.993 0.067 Betaine 0.96 0.032 0.993 0.065 CLA 0.94 0.035 0.992 0.071 CLA + betaine 0.93 0.027 0.995 0.055
Ham Untrimmed
Control 0.95ab 0.013 0.999 0.025
Betaine 0.93a 0.016 0.998 0.032
CLA 0.97b 0.015 0.998 0.031
CLA + betaine 0.96b 0.014 0.999 0.030
Trimmed Control 0.93a 0.013 0.999 0.027
Betaine 0.94ab 0.018 0.998 0.037
CLA 0.96ab 0.015 0.998 0.030
CLA + betaine 0.96b 0.016 0.998 0.034
a,b Values within the same column with different superscripts differ at P<0.05.
*Sb Standard error of b; R2 Coefficient of determination; RSD: Residual standard deviation
‐ 196 ‐
Table 4. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on the coefficient of allometric growth (b) relating weights of dissected components of shoulder to shoulder weight of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg BW.
b ± Sb* R2* RSD*
Shoulder
Skin
Control 0.59 0.038 0.975 0.069
Betaine 0.63 0.056 0.954 0.104
CLA 0.58 0.045 0.966 0.082
CLA + betaine 0.59 0.064 0.934 0.117 Bone
Control 0.63 0.011 0.998 0.020 Betaine 0.63 0.031 0.986 0.056 CLA 0.59 0.022 0.992 0.039 CLA + betaine 0.61 0.037 0.979 0.067
Lean Control 0.83 0.017 0.997 0.031 Betaine 0.84 0.018 0.997 0.034 CLA 0.83 0.022 0.996 0.040 CLA + betaine 0.87 0.017 0.998 0.031
Fat Control 1.94 0.104 0.983 0.189 Betaine 1.91 0.108 0.981 0.199 CLA 1.96 0.113 0.980 0.206 CLA + betaine 1.90 0.108 0.981 0.198
*Sb Standard error of b; R2 Coefficient of determination; RSD: Residual standard deviation.
Table 5. Effect of dietary supplementation with betaine and/or CLA on the coefficient of allometric growth (b) relating weights of dissected components of ham to ham weight.
b ± Sb* R2* RSD* Ham
Skin Control 0.60 0.0451 0.967 0.0813 Betaine 0.65 0.0440 0.973 0.0795 CLA 0.59 0.0385 0.975 0.0712 CLA + betaine 0.64 0.0664 0.940 0.1253
Bone Control 0.59 0.0183 0.994 0.0330 Betaine 0.58 0.0229 0.991 0.0414 CLA 0.55 0.043 0.965 0.0801 CLA + betaine 0.54 0.0231 0.990 0.0437
Lean Control 0.86 0.0191 0.997 0.0345 Betaine 0.87 0.0110 0.999 0.0198 CLA 0.87 0.0189 0.997 0.0351 CLA + betaine 0.89 0.0191 0.997 0.0361
Fat Control 2.11 0.1026 0.986 0.1849 Betaine 2.09 0.1001 0.986 0.1808 CLA 2.10 0.1093 0.984 0.2024 CLA + betaine 2.05 0.1076 0.984 0.2032
*Sb Standard error of b; R2 Coefficient of determination; RSD: Residual standard deviation.
‐ 197 ‐
Acknowledgements
This study was supported by grant AGL2009-08916 from Spanish Ministry of Science and
Innovation.
References
Bee, G. (2001). Dietary conjugated linoleic acids affect tissue lipid composition but not de novo
lipogenesis in finishing pigs. Animal Research, 50, 383−399.
Cadogan, D. J., Campbell, R. G., Harrison, D., & Edwards, A. C. (1993). The effects of betaine on the
growth performance and carcass characteristics of female pigs. In E. S. Batterham (Ed.),
Manipulating Pig Production IV (pp. 219). Attwood, Victoria, Australia: Autralasian Pigs Science
Association.
Cole, D. J. A., White, M. R., Hardy, B., & Carr, J. R. (1976). Tissue growth in the pig. Animal Production,
22, 341−350.
Corino, C., Magni, S., Pastorelli, G., Rossi, R., & Mourot, J. (2003). Effect of conjugated linoleic acid on
meat quality, lipid metabolism, and sensory characteristics of dry- cured hams from heavy pigs.
Journal of Animal Science, 81, 2219−2229.
Davis, A. S. (1974). A comparison of tissue development in Pietrain and Large White pigs from birth to 64
kg live weight 2. Growth changes in muscle distribution. Animal Production, 19, 377−387.
De Pedro, E. J. (1987). Estudio de los factores sexo y peso de sacrificio sobre características de la canal
de cerdo ibérico. (Effect of sex and slaughter weight on the carcass characteristics of the Iberian
pig). PhD Thesis. University of Córdoba. Spain.
‐ 198 ‐
Dugan, M. E. R., Aalhus, J. L., Schaefer, A. L., & Kramer, J. K. G. (1997). The effect of conjugated linoleic
acid on fat to lean repartitioning and feed conversion in pigs. Canadian Journal of Animal Science,
77, 723−725.
Dugan, M. E. R., Mossoba, M. M., Kramer, J. K. G., Yurawecz, M. P., Sehat, N., Roach, J. A. G., et al.
(1999). Impact of novel methodologies on the analysis of conjugated linoleic acid (CLA). Implications
of CLA feeding studies. Lipid-Fett, 101, 244−248.
Eggert, J. M., Belury, M. A., Kempa-Steczko, A., Mills, S. E., & Schinckel, A. P. (2001). Effects of
conjugated linoleic acid on the belly firmness and fatty acid composition of genetically lean pigs.
Journal of Animal Science, 79, 2866−2872.
Evans, D. G., & Kempster, A. J. (1979). The effects of phenotype, sex and feeding regimen on pig carcass
development. 1. Primary components, tissues and joints. Journal. Agricultural Science Cambridge,
93, 339−347.
Fernández-Fígares, I., Conde-Aguilera, J. A., Nieto, R., Lachica, M., & Aguilera, J. F. (2008). Synergistic
effects of betaine and conjugated linoleic acid on the growth and carcass composition of growing
Iberian pigs. Journal of Animal Science, 86, 102−111.
Fernández-Fígares, I., Wray-Cahen, D., Steele, N. C., Campbell, R. G., Hall, D. D., Virtanen, the young
growing feed-restricted pig. Journal of Animal Science, 80, 421−428. Fortin, A., Wood, J. D., &
Whelehan, O. P. (1987). Breed and sex effects on the development and proportions of muscle, fat
and bone in pigs. Journal Agricultural Science Cambridge, 108, 39−45.
Gu, Y., Schinckel, A. P., & Martin, T. G. (1992). Growth, development and carcass composition in five
genotypes of swine. Journal of Animal Science, 70, 1719−1729.
Huxley, J. S. (1932). Problems of relative growth. (1st ed.). Londres: Methnen.
‐ 199 ‐
Joo, S. T., Lee, J. I., Ha, Y. L., & Park, G. B. (2002). Effects of dietary conjugated linoleic acid on fatty acid
composition, lipid oxidation, color, and water-holding capacity of pork loin. Journal of Animal Science,
80, 108−112.
Kidd, M. T., Ferket, P. R., & Garlich, J. D. (1997). Nutritional and osmoregulatory functions of betaine.
World's Poultry Science Journal, 53, 125−139.
Kouba, M., & Bonneau, M. (2009). Compared development of intermuscular and subcutaneous fat in
carcass and primal cuts of growing pigs from 30 to 140 kg body weight. Meat Science, 81, 270−274.
Lauridsen, C., Mu, H., & Henckel, P. (2005). Influence of dietary conjugated linoleic acid (CLA) and age at
slaughtering on performance, slaughter- and meat quality, lipoproteins, and tissue deposition of CLA
in barrows. Meat Science, 69, 393−399.
Lawrence, B. V., Schinckel, A. P., Adeola, O., & Cera, K. (2002). Impact of betaine on pig finishing
performance and carcass composition. Journal of Animal Science, 80, 475−482.
Matthews, J. O., Southern, L. L., Higbie, A. D., Persica, M. A., & Bidner, T. D. (2001). Effects of betaine on
growth, carcass characteristics, pork quality, and plasma metabolites in finishing pigs. Journal of
Animal Science, 79, 722−728.
Matthews, J. O., Southern, L. L., Pontif, J. E., Higbie, A. D., & Bidner, T. D. (1998). Interactive effects of
betaine, crude protein, and net energy in finishing pigs. Journal of Animal Science, 76, 2444−2455.
McMeenkan, C. P. (1940a). Growth and development in the pigs, with special reference to carcass quality
characters. I. Age changes in growth and development. Journal of Animal Science, 30, 276−343.
McMeenkan, C. P. (1940b). Growth and development in the pigs, with special reference to carcass quality
characters. II. The influence of the plane of nutrition on growth and development. Journal of Animal
Science, 30, 387−436.
McMeenkan, C. P. (1940c). Growth and development in the pigs, with special reference to carcass quality
characters. III. The influence of the plane of nutrition on the form and composition of the bacon.
‐ 200 ‐
Journal of Animal Science, 30, 511−569.
Nieto, R., Lara, L., García, M. A., Gómez, F., Zalvide, M., Cruz, M., et al. (2001). Evaluation o fan
integrated feeding system in the Iberian pig. Study of food consumption and productive parameters.
Sólo Cerdo Ibérico, 6, 57−69.
Nieto, R., Miranda, A., García, M. A., & Aguilera, J. F. (2002). The effect of dietary protein content and
feeding level on the rate of protein deposition and energy utilization in growing Iberian pigs from 15 to
50 kg body weight. The British Journal of Nutrition, 88, 39−49.
O'Quinn, P. R., Nelsen, J. L., Goodband, R. D., Knabe, D. A., Woodworth, J. C., Tokach, M. D., et al.
(2000). Nutritional value of a genetically improved high-lysine, high-oil corn for young pigs. Journal of
Animal Science, 78, 2144−2149.
Øverland, M., Rørvik, K. A., & Skrede, A. (1999). Effect of trimethylamine oxide and betaine in swine diets
on growth performance, carcass characteristics, nutrient digestibility, and sensory quality of pork.
Journal of Animal Science, 77, 2143−2153.
Park, Y., & Pariza, M. W. (2007). Mechanisms of body fat modulation by conjugated linoleic acid (CLA).
Food Research International, 40, 311−323.
Park, Y., Pariza, M. W., Albright, K. J., Lui, W., Storkson, J. M., & Cook, M. E. (1997). Effect of conjugated
linoleic acid on body composition in mice. Lipids, 32, 853−858.
SAS (2004). SAS/STAT User' guide, Version 9.1.2. Cary, NC, USA: SAS Institute Inc. Schrama, J. W.,
Heetkamp, M. J., Simmins, P. H., & Gerrits, W. J. (2003). Dietary betaine supplementation affects
energy metabolism of pigs. Journal of Animal Science, 81, 1202−1209.
Shields, R. G., Mahan, D. C., Jr., & Graham, P. L. (1983). Changes in swine body composition from birth
to 145 kg. Journal of Animal Science, 57, 43−54.
Siljander-Rasi, H., Peuranen, S., Tiihonen, K., Virtanen, E., Kettunen, H., Alaviuhkola, T., et al. (2003).
‐ 201 ‐
Effect of equi-molar dietary betaine and choline addition on performance, carcass quality and
physiological parameters of pigs. Animal Science, 76, 55−62.
Steel, R. G. D., & Torrie, J. H. (1981). Principles and procedures of statistics: A biometrical approach. (2nd
ed.). New York: McGraw-Hill International Book Company.
Suksombat, W., Lounglawan, P., & Yowa, C. (2008). Effects of conjugated linoleic acid supplementation
on performances, carcass quality and fatty acid compo- sition in meat of finishing pigs. Suranaree
Journal of Science and Technology, 15, 249−260.
Tess, M. W., Dickerson, G. E., Nienaber, J. A., & Ferrell, C. L. (1986). Growth, development and body
composition in three genetic stocks of swine. Journal of Animal Science, 62, 968−979.
Thiel-Cooper, R. L., Parrish, J. R. F. C., Sparks, J. C., Wiegand, B. R., & Ewan, R. C. (2001). Conjugated
linoleic acid changes swine performance and carcass composition. Journal of Animal Science, 79,
1821−1828.
Tischendorf, F., Schöne, F., Kirchheim, U., & Jahreis, G. (2002). Influence of a conjugated linoleic acid
mixture on growth, organ weights, carcass traits and meat quality in growing pigs. Journal of Animal
Physiology and Animal Nutrition, 86, 117−128.
Vílchez-Campillos, M. A. (2004). Efectos observados en el rendimiento productivo y composición tisular
del cerdo Ibérico en crecimiento subsiguientes a cambios en la ingestión diaria de energía y proteína
[Growth performance and tissue composition of growing Iberian pigs fed graded levels of protein and
energy]. Trabajo profesional fin de carrera. Spain: University of Córdoba.
Wang, Y., & Jones, P. J. (2004). Dietary conjugated linoleic acid and body composition. The American
Journal of Clinical Nutrition, 79, 1153S−1158S.
Wiegand, B. R., Parrish, F. C., Jr., Swan, J. E., Larsen, S. T., & Baas, T. J. (2001). Conjugated linoleic
acid improves feed efficiency, decreases subcutaneous fat, and improves certain aspects of meat
quality in stress-genotype pigs. Journal of Animal Science, 798, 2187−2195.
‐ 202 ‐
Wiegand, B. R., Sparks, J. C., Parrish, F. C., Jr., & Zimmermand, D. R. (2002). Duration of feeding
conjugated linoleic acid influences growth performance, carcass traits, and meat quality of finishing
barrows. Journal of Animal Science, 80, 637−643.
‐ 203 ‐
4.2. MANUSCRITO 2
PORTAL-DRAINED VISCERA HEAT PRODUCTION IN IBERIAN PIGS FED BETAINE AND
CONJUGATED LINOLEIC ACID SUPPLEMENTED DIETS
‐ 205 ‐
Abstract
Betaine and conjugated linoleic acid (CLA) may alter growth and body composition in pigs although
their mode of function is not well understood. Portal-drained viscera (PDV) have a disproportionate
influence with respect to their masses influencing the productivity of more profitable tissues. The objective
of this study was to determine if the use of betaine and CLA in the diet affects PDV heat production.
Sixteen Iberian growing barrows (19 kg body weight (BW)) were randomly assigned to four experimental
treatments (4 pigs/treatment): a basal diet (control; barley and soybean meal based (101 g crude protein
(CP)/kg dry matter (DM) and 14.7 MJ metabolizable energy (ME)/kg DM)) supplemented or not with 0.5%
betaine, 1% CLA or 0.5% betaine + 1% CLA. Three catheters were placed in each pig: in carotid artery
and portal vein for blood sampling, and in ileal vein for para-aminohippuric acid (PAH) infusion to measure
portal blood flow (PBF). Blood samples were anaerobically taken simultaneously from carotid artery and
portal vein 5 min before and 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 5 and 6 h after feeding 1200 g of diet, into
heparinized tubes for instantaneous measurement of O2 concentration and saturation of haemoglobin. The
rest of blood was centrifuged, haematocrit determined, and plasma stored until PAH analysis. No
differences (P>0.4) in any preprandial parameter was found between diets. However, all postprandial
parameters were affected (P≤0.004) by diet. Postprandial PBF was greater (19.0%, P=0.004) for control
compared to the other three diets. Arterio-portal O2 concentration difference was 12.1% lower (P=0.001)
for the betaine + CLA diet compared to the other three. The lowest (P<0.0001) value for postprandial PDV
O2 consumption corresponded to betaine + CLA followed by betaine, CLA and control diet (32.7, 25.4 and
17.7%, respectively, with respect to the latter). Postprandial PDV heat production value was greater
(26.4%, P<0.0001) for control with respect to the other three diets corresponding the minimum value to
betaine + CLA (34.1% lower than the control). Supplementation with betaine and/or CLA reduced the PBF,
O2 consumption and, therefore, PDV heat production with respect to the control diet. This effect was more
pronounced when betaine and CLA were supplemented together probably increasing the energy
availability for the rest of body tissues.
Keywords: betaine, CLA, energy, heat production, pig, portal-drained viscera
‐ 206 ‐
Abbreviations: BW, body weight; CLA, conjugated linoleic acid; CP, crude protein; DM, dry matter; ME,
metabolizable energy; PAH, para-aminohippuric acid; PBF, portal blood flow; PDV, portal-drained viscera.
1. Introduction
Betaine and conjugated linoleic acid (CLA) have the potential to alter growth and body composition in
swine although their mode of function is not well understood. It was demonstrated that betaine could
decrease fat deposition and increase carcass lean in pigs (Matthews et al., 2001; Fernández-Fígares et
al., 2002). CLA refers to a mixture of positional and geometric conjugated isomers of linoleic acid.
Although the results were not consistent, there is an interest in using CLA as feed additive to pigs because
of its potential to increase average daily gain (Thiel-Cooper et al., 2001), feed efficiency, protein accretion
(Ostrowska et al., 1999), and to decrease body fat (Dugan et al., 1997; Thiel-Cooper et al., 2001). Most of
the studies about the effects of betaine or CLA were performed with finishing lean pigs and a greater effect
of betaine was found under restricted metabolizable energy (ME) intake (Suster et al., 2004). The effect of
CLA on back fat depth was more pronounced in fatter pigs (Dunshea et al., 2005). Few studies were made
on non-improved genotypes. In growing Iberian pigs betaine or CLA alone did not produce significant
changes in the growth performance and body composition of growing pigs, but the addition of both
suggested a synergistic action affecting growth, carcass protein deposition (Fernández-Fígares et al.,
2008), and yield of lean cuts (Rojas-Cano et al., 2011). Biochemical and hormone profiles may partially
explain the nutrient partitioning effect and increased lean deposition in pigs fed beatine + CLA diets
(Fernández-Fígares et al., 2012).
It was demonstrated that Iberian pigs have a lower protein deposition and growth rate than improved
breeds (Nieto et al., 2002; Barea et al., 2007). However, the factors that limit growth in Iberian pigs remain
unknown.
Portal-drained viscera (PDV) in terms of whole-body metabolism, have a disproportionate influence
with respect to their masses and this fact may affect the productivity of more economically interesting
peripheral tissues reducing their nutrient availability. PDV studies in pigs are scarce compared to
ruminants. Yen et al. (1989) reported that 0.25 of total O2 consumption was done by PDV in pigs while
‐ 207 ‐
their masses represented 0.05 of the body weight (BW). Similarly, Stoll and Burrin (2006) obtained that
PDV accounted for 0.20 to 0.35 of whole-body protein turnover and energy expenditure but represented
from 0.04 to 0.06 of BW. There are very few data in the literature regarding PDV O2 consumption in native
breeds: one survey in Meishan (Yen et al., 2004) and two in Iberian pigs (Rodríguez-López et al., 2010;
González-Valero et al., 2015).
The objective of this study was to determine if the use of the metabolic modifiers betaine and CLA in
the diet of Iberian pigs affects PDV heat production which may partially explain differences in growth
obtained in previous studies.
2. Materials and Methods
2.1. Animals and diets
The experimental protocol was reviewed and approved by the Bioethical Committee of the Spanish
Council for Scientific Research (CSIC), Spain.
The experiment was performed with sixteen Iberian (Silvela strain) growing barrows (Sus scrofa
mediterraneus; 19 ± 0.28 kg BW) supplied by Sánchez Romero Carvajal (Jabugo S.A., Sevilla, Spain).
The animals were allocated in a controlled environment room (21 ± 1.5ºC) in individual pens and randomly
assigned to one of four experimental treatments (4 pigs/treatment): a basal diet (control) supplemented or
not with 0.5% betaine (Betafin S1, crystalline, 96% purity; Danisco, Copenhagen, Denmark), 1% CLA
(60% CLA isomers, half cis-9, trans-11 and half trans-10, cis-12 in FFA form; BASF, Ludwigshafen,
Germany), or 0.5% betaine + 1% CLA, at the expense of cornstarch and sunflower oil for betaine and
CLA, respectively. The barley and soybean meal based control diet contained 101 g crude protein (CP)/kg
dry matter (DM), 4 g L-lysine/kg DM, and 14.7 MJ ME/kg DM. One week before surgery, pigs were fed
twice/d (09:00 and 15:00 h) at 70% of ad libitum calculated as a function of BW (Nieto et al., 2001) which
represented 2.4 × ME for maintenance (444 kJ/kg0.75 BW/d; NRC, 1998). Composition and chemical
analysis of the diet (Table 1) was performed by standard procedures according to AOAC (2000) for DM
‐ 208 ‐
(no. 934.01) and ash (no. 942.05). The N content was determined according to the Dumas procedure
using a LECO Truspec CN determinator (LECO Corporation, St. Joseph, MI, USA) and CP was calculated
as total N × 6.25. The gross energy content was determined using an isoperibolic bomb calorimeter
(PARR 1356; Biometa, IL, USA).
2.2. Surgery procedure
At 30 kg BW pigs were fasted and water removed 24 h before the installation of chronic indwelling
catheters in portal vein, ileal vein and carotid artery. Two surgeries per d were performed. Feed was
offered at 0.3, 0.6 and 1 of the daily ration in d 1, 2 and 3 post-surgery, respectively, with free access to
water. Detailed description of the catheters design, construction and maintenance, surgical procedure and
post-surgery care of pigs was published elsewhere (Rodríguez-López et al., 2013).
2.3. Experimental schedule and measurements
Pigs were adapted to close contact with the staff involved with sampling to reduce stress to a
minimum.
First trial began when pigs were completely recovered from surgery and stitches were removed. Two
pigs were used each d for the measurements so that all the pigs had the same recovery time. A 15 ml
pulse dose of para-aminohippuric acid (PAH; 2% w/v; Sigma-Aldrich Química S.A., Madrid, Spain) was
administered according to Yen and Killefer (1987) into ileal vein 45 min prior the first blood sampling,
followed by a continuous infusion of 0.8 ml/min using a syringe pump (Model 33, Harvard Apparatus Inc.,
Holliston, MA, USA) until the end of the sampling period. Apyrogenic filters (MILLEX GP, Syringe Driven
Filters Unit, 0.22 µm; Millipore, Carringtwohill, Ireland) were fitted to infusion syringes. Two blood samples
per sampling site using 2 and 4.5 mL (Blood Gas-Monovette for blood traits and Monovette VetMed for
haematocrit and PAH analysis, respectively; Sarstedt, Nümbrecht, Germany) heparinized tubes were
taken anaerobically, simultaneously from carotid artery and portal vein 5 min before, and every 30 min for
‐ 209 ‐
4 h and hourly until 6 h after feeding 1200 g of diet. Blood O2 and total haemoglobin were measured
immediately with a hemoximeter (OSM 3 Hemoximeter, Radiometer Corporation, Copenhagen, Denmark).
Plasma was obtained by centrifugation (4ºC and 1145 × g for 30 min; Centrifuge 5810R, Eppendorf AG
22331, Hamburg, Germany) and stored at -20ºC until PAH analysis using the gravimetric approach
(Lobley et al., 1995). Haematocrit was determined using a microcentrifuge (11500 × g for 5 min; Biocen,
Orto-Alresa, Ajalvir, Madrid, Spain).
PBF was determined by the indicator dilution method using portal vein haematocrit and plasma PAH
concentrations as described by Katz and Bergman (1969).
Blood O2 concentration was calculated as described by Huntington et al. (1990). PBF and PDV O2
consumption rate were calculated according to the Fick principle of arterio-venous concentration
difference and flow rate (Zierler, 1961). PDV heat production was calculated by multiplying PBF by
difference in O2 concentration between carotid artery and portal vein, with an energy equivalent for O2
consumption of 20.4 kJ/L (Rérat and Vaissade, 1993).
2.4. Statistical analyses
The experimental unit was the pig. Measurements were made sequentially over time in the same
experimental unit. Preprandial data were subjected to one way ANOVA analysis using the PROC GLM
(SAS Institute, 2002) to stablish the effect of the diet on the parameter analyzed. Postprandial data were
subjected to multivariate ANOVA analysis using the PROC MIXED (SAS Institute, 2002) for repeated
measures. The fixed effects in the model were the diet, sampling time and their interaction. To select the
covariance structure that best fits the model of repeated measures, the information criteria (provided by
PROC MIXED (SAS Institute, 2002)) “Akaike Information Criteria (AIC), the finite-sample corrected Akaike
Information Criteria (AICC) and the Schwarz's Bayesian Information Criteria (BIC)” were used. Significant
differences among treatments were assessed using Tukey’s multiple-range test. The differences were
considered significant when P<0.05.
‐ 210 ‐
3. Results
Pre and postprandial blood traits and PDV heat production of Iberian pigs fed with the experimental
diets are displayed in Table 2. Fig. 1 shows postprandial blood traits and preprandial PBF.
Haematocrit and haemoglobin concentration were lower (P<0.0001) in pigs fed CLA and betaine +
CLA compared to control and betaine diets. Haematocrit was 3.0 and 6.2% lower for CLA and betaine +
CLA, respectively, than for the other two diets (31.6% as average).
Although no differences (P>0.4) in preprandial parameters were found, all reported postprandial
parameters were affected (P≤0.004) by diet.
PBF was higher (19.0%, P=0.004) for control compared to diets supplemented with betaine and/or
CLA (1033 ml/min as average) with the lowest value for betaine + CLA diet (21.2% lower than control).
Arterio-portal O2 concentration difference was lower (12.1%, P=0.001) in pigs fed betaine + CLA
compared to the other three diets (1.99 mmol/L as average).
PDV O2 consumption was greater (P<0.0001) for control diet compared to betaine, CLA and betaine
+ CLA; corresponding the lowest value (P<0.0001) to betaine + CLA diet followed by betaine and CLA
(32.7, 25.4 and 17.7%, respectively, lower than control diet).
Postprandial PDV heat production value was greater (26.4%, P<0.0001) for control diet with respect
to the other three diets (3.74 kJ/kg0.75 BW/h as average) corresponding the minimum value to betaine +
CLA (34.1% lower than the control diet).
4. Discussion
A literature survey would show that in most studies dealing with PDV heat production the whole daily
ration was offered to the animal and subsequently it was measured over a relatively short period of time
‐ 211 ‐
which considerably increased PBF and nutrient fluxes compared to a steady intake. In two previous
studies (Rodríguez-López et al., 2010; González-Valero et al., 2015) we decided to feed the Iberian pigs
an amount of feed proportional to the measurement period (0.25 of the daily ration was offered to the gilts
for a 6 h measurement period) which allowed to simulate the real situation of Iberian pigs that spend the
whole day grazing to cover their nutritional requirements. Similarly, van der Meulen et al. (1997) measured
nutrient flux across the PDV in growing pigs offering the daily ration in two equal portions and sampled for
12 h after the first portion. However, the present study was designed to simulate Iberian pigs reared
following the intensive system, so the whole daily ration was offered previous to measurements.
Haematocrit was lower for betaine + CLA diet compared to the other three. Anderson et al. (1969) in
pigs pointed out that haematocrit value was variable. Nonetheless, in previous studies also with Iberian pig
similar values than in the present study were found, ranging from 30 to 31% (Rodriguez-López et al.,
2010, 2013; González-Valero et al., 2015). Haematocrit value was higher in Iberian than in improved
breeds (Rodriguez-López et al., 2010, 2013; González-Valero et al., 2015) although some authors
reported similar values in modern breeds than reported herein (Yen et al., 1991; Ten have et al., 1996).
Preprandial PBF was no statistically different between diets although postprandial PBF was greater
for control than for the other three diets, corresponding the lowest value to betaine + CLA diet. When the
results obtained in the present study were compared with studies with like conditions, preprandial PBF
value was similar (Yen et al., 2004) or in the lower range of data for modern breeds in the literature (Yen
and Killefer, 1987; Hooda el al., 2009), and in the same range of data obtained with Iberian pigs
(Rodriguez-López et al., 2010; González-Valero et al., 2015). In previous studies with Iberian pigs
postprandial PBF was much lower (Rodriguez-López et al., 2010, 2013; González-Valero et al., 2015)
than in the present study because the amount of feed intake was also lower (0.25 of total daily ration); but
in the present study it was into the range of values when comparing with modern breeds under similar
experimental conditions (Yen et al., 2004; Hooda el al., 2009). Differences observed in the literature could
be due to the experimental conditions or to the amount of feed intake so caution is needed when
comparing data within the literature (Simoes Nunes and Malmlof, 1992; Ellis et al., 1995). It is noteworthy
the importance of keeping the experimental conditions as constant as possible when measuring PBF (Ten
‐ 212 ‐
have et al., 1996). Similar to other studies (Fara, 1984; Yen and Killefer, 1987; Rérat and Vaissade, 1993;
González-Valero et al., 2015), a postprandial hyperemia occurred and it was lasted the whole testing
period, although it could be affected by the amount of feed offered before sampling (Granger et al., 1980;
Fara, 1984; Jensen et al., 1995).
The larger haematocrit and haemoglobin concentration in Iberian compared to modern breeds could
partially compensate for the lower preprandial PBF. The Iberian pig is adapted for grazing in open range
and to physical exercise, which could explain the higher haematocrit and haemoglobin content compared
to modern breeds. Greater haemoglobin content increases the efficiency of O2 use and, thereafter,
decreases PBF. Similarly, Rodríguez-López et al. (2010) and González-Valero et al. (2015) reported lower
PDV O2 consumption in Iberian than in Landrace pigs (1.5 vs. 1.9 and 1.35 vs. 1.82 mmol/min,
respectively).
Arterio-portal O2 concentration difference was lower for the betaine + CLA compared to the other
three diets. It was within the range of values reported in the literature (Yen et al., 1989, 2004; Yen and
Nienaber, 1992, 1993) and greater than the value obtained by González-Valero et al. (2015) in Iberian
pigs fed 0.25 of the daily ration before the sampling period.
As expected, PDV O2 consumption was increased by feeding (Yen et al., 1989, 2004; Yen and
Nienaber, 1992; González-Valero, 2015) with the lowest value for betaine + CLA diet followed by betaine,
CLA and control. The pattern of O2 consumption by the PDV in the present study was similar to previous
studies using modern (Yen et al., 1989, 2004; Yen and Nienaber, 1992) or Iberian (González-Valero,
2015) breeds.
Preprandial PDV heat production was in the lower range of values obtained previously by González-
Valero et al. (2015) for Iberian and Landrace pigs (2.68 and 2.58 kJ/kg BW/h, respectively). Postprandial
PDV heat production value was greater for control compared to the other three diets, corresponding the
minimum value to betaine + CLA. Fernández-Fígares et al. (2012) in Iberian pigs reported that CLA, and
especially betaine + CLA, induced changes in biochemical parameters and hormones that may partially
explain a nutrient partitioning effect in young pigs. They found an increase in serum triacylglycerol
‐ 213 ‐
indicating that CLA and betaine + CLA could reduce adipose tissue triacylglycerol synthesis from
preformed fatty acids, and a decreased in serum growth hormone and serum urea in pigs fed betaine and
betaine + CLA diets suggesting a more efficient nitrogen utilization. Likewise, others have found increased
plasma triacylglycerol in modern pigs fed CLA (Stangl et al., 1999; Ostrowska et al., 2002) or betaine
(Martins et al., 2010); and decreased serum urea in finishing pigs (Matthews et al., 1998; Huang et al.,
2007) fed betaine. On the contrary, Martins et al. (2010) in Alentejano (Iberian pig raised in Portugal)
finishing pigs reported no effect of betaine on plasma urea. Regarding CLA, supplementation of the diet
for eight days did not alter plasma urea of finishing modern pigs (Ostrowska et al., 2002) which was
consistent with the results obtained by Fernández-Fígares et al. (2012).
In Iberian pigs Fernández-Fígares et al. (2008) obtained that betaine or CLA alone did not affect
growth performance althouhg betaine + CLA increased average daily gain, and gain and protein
deposition relative to ME intake compared with control pigs; additionally, carcass protein tended to
increase and carcass fat content to decrease. It is worth mentioning that Rojas-Cano et al. (2011) in an
allometric study in growing Iberian pigs obtained a positive effect on yield of lean cuts with the addition of
betaine + CLA to the diet.
With respect to betaine addition in swine diets, most studies have not demonstrated improved growth
performance in pigs fed a variety of experimental diets, either restricted or providing ad libitum access
(Matthews et al., 1998; Overland et al., 1999; Fernández-Fígares et al., 2002). Others (Siljander-Rasi et
al., 2003) have shown a slight improvement in finishing pigs restrictively fed diets with low levels of
betaine. It was also suggested that the effects of betaine on fat and protein accretion may be mediated
more through allocation of amino acids among lean growth, visceral growth, and metabolic breakdown
than by lipid metabolism per se (Virtanen and Campbell, 1994). Furthermore, Wray-Cahen et al. (2004)
established both in vivo and in vitro that betaine does not have an effect on long-chain fatty acid oxidation
in pigs. When incorporated into pig diets, betaine improved growth performance by reducing the
maintenance energy needs of the animal, maybe decreasing the ion pumping activity involved in
maintaining intracellular osmolarity (Schrama et al., 2003).
‐ 214 ‐
With the exception of one study (Thiel-Cooper et al., 2001), no effect of CLA on average daily gain of
pigs was shown. However, small improvements in gain/feed were described (Ostrowska et al., 1999; Thiel-
Cooper et al., 2001; Wiegand et al., 2001). CLA reduced carcass fat in pigs with thick subcutaneous fat
(Ostrowska et al., 1999; O’Quinn et al., 2000; Thiel-Cooper et al., 2001) at 100 kg of BW and in gilts
compared with barrows (Tischendorf et al., 2002). It should be noted that in earlier steps of pig growth,
CLA did not produce a significant effect on carcass fat content (Fernández-Fígares et al., 2008). Thus, it
was found no effect of CLA on the growth performance of weanling (Weber et al., 2001) and growing pigs
(Ramsay et al., 2001) may be as a consequence of the more efficient growth rate of young pigs compared
with finishing pigs. These facts are in concordance with the lower O2 consumption of betaine, CLA and
betaine + CLA diets compared with control diet indicating that betaine and CLA may have an impact at
PDV level reducing energy and nutrient requirement of PDV, with the consequent increase in the portion
of absorbed energy and nutrients to be utilized for growth of muscle and other non PDV tissues, which
probably accounts for some of the improvement in the rate of weight gain in growing pigs fed betaine +
CLA supplemented diets (Fernández-Fígares et al., 2008).
González-Valero et al. (2015) obtained lower PDV heat production and higher total heat production
for Iberian compared to Landrace pigs. Protein is less efficient from an energetic point of view than lipid
synthesis (van Milgen and Noblet, 2003). The high muscle protein turnover and degradation rate of Iberian
pigs compared to Landrace (Rivera-Ferre et al., 2005), would imply an elevated energetic cost reflected in
total heat production and might explain their low partial efficiency of ME for protein deposition (Nieto et al.,
2002). Therefore any reduction of PDV heat production would enhance the available energy for the rest of
body tissues with the subsequent improvement of efficiency for ME use.
5. Conclusions
Supplementation of the diet with betaine and/or CLA reduced PBF, O2 consumption and, therefore,
PDV heat production with respect to a control diet. This effect was more pronounced when betaine and
CLA were supplemented together possibly increasing the energy availability for the rest of body tissues.
‐ 215 ‐
Acknowledgments
This study was financed by grant AGL2009-08916. Ministry of Science and Innovation.
References
Anderson, D.M., McDonald, I., Elsley, F.W.H., 1969. The estimation of plasma and red cell volumes in
pigs. J. Agric. Sci. 73, 501-505.
Association of Official Analytical Chemists (AOAC), 2000. Official Methods of Analysis, 17th Ed.
Association of Official Analytical Chemists. Arlington, VA, USA.
Barea, R., Nieto, R., Aguilera, J.F., 2007. Effects of the dietary protein content and the feeding level on
protein and energy metabolism in Iberian pigs growing from 50 to 100 kg body weight. Animal 1, 357-
365.
Dugan, M.E.R., Aalhus, J.L., Schaefer, A.L., Kramer, J.K.G., 1997. The effect of conjugated linoleic acid
on fat to lean repartitioning and feed conversion in pigs. Can. J. Anim. Sci. 77, 723-725.
Dunshea, F.R., D’Souza, D.N., Pethick, D.W., Harper, G.S., Warner, R.D., 2005. Effects of dietary factors
and other metabolic modifiers on quality and nutritional value of meat. Meat Sci. 71, 8-38.
Ellis, P.R., Roberts, F.G., Low, A.G., Morgan, L.M., 1995. The effect of high molecular-weight guar gum on
net apparent glucose absorption and net apparent insulin and gastric inhibitory polypeptide
production in growing pig: Relationship to rheological changes in jejunal digesta. Brit. J. Nutr. 74,
539-556.
Fara, J.W., 1984. Postprandial mesenteric hyperemia, in: Shepherd, A.P., Granger, D.N. (Eds.),
Physiology of the Intestinal Circulation. Raven Press, New York, pp. 99-106.
Fernández-Fígares, I., Wray-Cahen, D., Steele, N.C., Campbell, R.G., Hall, D.D., Virtanen, E., Caperna,
T.J., 2002. Effect of dietary betaine on energy utilization and partitioning in the young growing feed
‐ 216 ‐
restricted pig. J. Anim. Sci. 80, 421-428.
Fernández-Fígares, I., Conde-Aguilera, J.A., Nieto, R., Lachica, M., Aguilera, J.F., 2008. Synergistic
effects of betaine and conjugated linoleic acid on growth and carcass composition of growing Iberian
pigs. J. Anim. Sci. 86, 102-111.
Fernández-Fígares, I., Lachica, M., Martín, A., Nieto, R., González-Valero, L., Rodríguez-López, J.M.,
Aguilera, J.F., 2012. Impact of dietary betaine and conjugated linoleic acid on insulin sensitivity,
protein and fat metabolism of obese pigs. Animal 6, 1058-1067.
González-Valero, L., Rodríguez-López, J.M., Lachica, M., Fernández-Fígares, I., 2015. Contribution of
portal-drained viscera to heat production in Iberian gilts fed a low protein diet: comparison to
Landrace. J. Sci. Food Agric. (in press).
Granger, D.N., Richardson, P.D.I., Kvietys, P.R., Mortillaro, N.A., 1980. Intestinal blood flow.
Gastroenterology 78, 837-863.
Huang, Q.C., Xu, Z.R., Han, X.Y., Li, W.F., 2007. Effect of betaine on growth hormone pulsatile secretion
and serum metabolites in finishing pigs. J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. 91, 85-90.
Huntington, G.B., Eisemann, J.H., Whitt, J.M., 1990. Portal blood flow in beef steers: comparison of
techniques and relation to hepatic blood flow, cardiac output and oxygen uptake. J. Anim. Sci. 68,
1666-1673.
Jensen, M.D., Johnson, C.M., Cryer, P.E., Murray, M.J., 1995. Thermogenesis after a mixed meal: role of
leg and splanchnic tissues in men and women. Am. J. Physiol-Endoc. M. 268, E433-E438.
Katz, M.L., Bergman, E.N., 1969. Simultaneous measurements of hepatic and portal venous blood flow in
the sheep and dog. Am. J. Physiol. 216, 946-952.
Lobley, G.E., Connell, A., Lomax, M.A., Brown, D.S., Milne, E., Calder, A.G., Farningham, D.A.H., 1995.
Hepatic detoxification of ammonia in the ovine liver; possible consequences for amino acid
‐ 217 ‐
catabolism. Br. J. Nutr. 73, 667-685.
Martins, J.M., Neves, J.A., Freitas, A., Tirapicos, J.L., 2010. Betaine supplementation affects the
cholesterol but not the lipid profile of pigs. Eur. J. Lipid Sci. Technol. 112, 295-303.
Matthews, J.O., Southern, L.L., Pontif, J.E., Higbie, A.D., Bidner, T.D., 1998. Interactive effects of betaine,
crude protein, and net energy in finishing pigs. J. Anim. Sci. 76, 2444-2455.
Matthews, J.O., Southern, L.L., Higbie, A.D., Persica, M.A., Bidner, T.D., 2001. Effects of betaine on
growth, carcass characteristics, pork quality, and plasma metabolites of finishing pigs. J. Anim. Sci.
79, 722-728.
National Research Council (NRC), 1998. Nutrient Requirements of Swine. National Academy Press,
Washington, D.C.
Nieto, R., Lara, L., García, M.A., Gómez, F., Zalvide, M., Cruz, M., Pariente, J.M., Moreno, A., Aguilera,
J.F., 2001. Evaluation of an integrated feeding system in the Iberian pig. Study of food consumption
and productive parameters. Sólo Cerdo Ibérico 6, 57-69.
Nieto, R., Miranda, A., García, M.A., Aguilera, J.F., 2002. The effect of dietary protein content and feeding
level on the rate of protein deposition and energy utilization in growing Iberian pigs from 15 to 50 kg
body weight. Brit. J. Nutr. 88, 39-49.
O’Quinn, P.R., Nelssen, J.L., Goodband, R.D., Unruh, J.A., Woodworth, J.C., Smith, J.S., Tokach, M.D.,
2000. Effects of modified tall oil versus a commercial source of conjugated linoleic acid and
increasing levels of modified tall oil on growth performance and carcass characteristics of growing-
finishing pigs. J. Anim. Sci. 789, 2359-2368.
Ostrowska, E., Muralitharan, M., Cross, R.F., Baumann, D.E., Dunshea, F.R., 1999. Dietary conjugated
linoleic acids increase lean tissue and decrease fat deposition in growing pigs. J. Nutr. 129, 2037-
2042.
‐ 218 ‐
Ostrowska, E., Cross, R.F., Muralitharan, M., Bauman, D.E., Dunshea, F.R., 2002. Effects of dietary fat
and conjugated linoleic acid on plasma metabolite concentrations and metabolic responses to
homeostatic signals in pigs. Br. J. Nutr. 88, 625-634.
Overland, M., Rorvik, K.A., Skrede, A., 1999. Effect of trimethylamine oxide and betaine in swine diets on
growth performance, carcass characteristics, nutrient digestibility, and sensory quality of pork. J.
Anim. Sci. 77, 2143-2153.
Ramsay, T.G., Evock-Clover, C.M., Steele, N.C., Azain, M.J., 2001. Dietary conjugated linoleic acid alters
fatty acid composition of pig skeletal muscle and fat. J. Anim. Sci. 798, 2152-2161.
Rérat, A., Vaissade, P., 1993. Relations entre la prise alimentaire et la consommation d'oxygène des
organes drainés par la veine porte chez le porc éveillé. Reprod. Nutr. Dev. 33, 235-251.
Rivera-Ferre, M.G., Aguilera, J.F., Nieto, R., 2005. Muscle fractional protein synthesis is higher in Iberian
than in Landrace growing pigs fed adequate or lysine-deficient diets. J. Nutr. 135, 469-478.
Rodríguez-López, J.M., Lachica, M., González-Valero, L., Fernández-Fígares, I., 2010. Energy
expenditure of splanchnic tissues in Iberian and Landrace growing gilts. Livest. Sci. 133, 61-63.
Rodríguez-López, J.M., Lachica, M., González-Valero, L., Fernández-Fígares, I., 2013. Approaches for
quantifying gastrointestinal nutrient absorption and metabolism in a native and a modern pig breed.
J. Agric. Sci. 151, 434-443.
Rojas-Cano, M.L., Lara, L., Lachica, M., Aguilera, J.F., Fernández-Fígares, I., 2011. Influence of betaine
and conjugated linoleic acid on development of carcass cuts of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg
body weight. Meat Sci. 88, 525-530.
Schrama, J.W., Heetkamp, M.J., Simmins, P.H., Gerrits, W.J., 2003. Dietary betaine supplementation
affects energy metabolism of pigs. J. Anim. Sci. 81, 1202-1209.
Siljander-Rasi, H., Peuranen, S., Tiihonen, K., Virtanen, E., Kettunen, H., Alaviuhkola, T., Simmins, P.H.,
‐ 219 ‐
2003. Effect of equimolar dietary betaine and choline addition on performance, carcass quality and
physiological parameters of pigs. Anim. Sci. 76, 55-62.
Simoes Nunes, C., Malmlof, K., 1992. Effects of guar gum and cellulose on glucose absorption, hormonal
release and hepatic metabolism in the pig. Brit. J. Nutr. 68, 693-700.
Stangl, G.I., Muller, H., Kirchgessner, M., 1999. Conjugated linoleum acid effects on circulating hormones,
metabolites and lipoproteins, and its proportion in fasting serum and erythrocyte membranes of
swine. Eur. J. Nutr. 38, 271-277.
Statistical Analysis System (SAS Institute), 2002. SAS User’s Guide: Statistics. SAS Institute Inc., Cary,
NC, USA.
Stoll, B., Burrin, D.G., 2006. Measuring splanchnic amino acid metabolism in vivo using stable isotopic
tracers. J. Anim. Sci. 84, 60-72.
Suster, D., Leury, B.J., King, R.H., Mottram, M., Dunshea, F.R., 2004. Interrelationships between porcine
somatotropin (pST), betaine and energy level on body composition and tissue distribution of finisher
boars. Aust. J. Agr. Res. 55, 983-990.
Ten have, G.A.M., Bost, M.C.F., Suyk-Wierts, J.C.A.W., van den Bogaard, A.E.J.M., Deutz, N.E.P., 1996.
Simultaneous measurement of metabolic flux in portally-drained viscera, liver, spleen, kidney and
hindquarter in the conscious pig. Lab. Anim. 30, 347-358.
Thiel-Cooper, R.L., Parrish, J.R.F.C., Sparks, J.C., Wiegand, B.R., Ewan, R.C., 2001. Conjugated linoleic
acid changes swine performance and carcass composition. J. Anim. Sci. 79, 1821-1828.
Tischendorf, F., Schöne, F., Kirchheim, U., Jahreis G., 2002. Influence of a conjugated linoleic acid
mixture on growth, organ weights, carcass traits and meat quality in growing pigs. J. Anim. Physiol.
Anim. Nutr. (Berl.) 86, 117-128.
van der Meulen, J., Bakker, G.C.M., Bakker, J.G.M., de Visser, H., Jongbloed, A.W., Everts, H., 1997.
‐ 220 ‐
Effect of resistant starch on net portal-drained viscera flux of glucose, volatile fatty acids, urea, and
ammonia in growing pigs. J. Anim. Sci. 75, 2697-2704.
van Milgen, J., Noblet, J., 2003. Partitioning of energy intake to heat, protein, and fat in growing pigs. J.
Anim. Sci. 81, E86-E93.
Virtanen, E., Campbell, R.G., 1994. Reduction of backfat thickness through betaine supplementation of
diets for fattening pigs, in: Handb. Tierische Veredlung 19. Verlag H. Kamlage, Osnabruek,
Germany, pp. 145-150.
Weber, T.E., Schinckel, A.P., Houseknecht, K.L., Richert, B.T., 2001. Evaluation of conjugated linoleic
acid and dietary antibiotics as growth promotants in weanling pigs. J. Anim. Sci. 79, 2542-2549.
Wiegand, B.R., Parrish, F.C., Swan, J.E., Larsen, S.T., Baas, T.J., 2001. Conjugated linoleic acid
improves feed efficiency, decreases subcutaneous fat, and improves certain aspects of meat quality
in stress-genotype pigs. J. Anim. Sci. 798, 2187-2195.
Wray-Cahen, D., Fernández-Fígares, I., Virtanen, E., Steele, N.C., Caperna, T.J., 2004. Betaine improves
growth, but does not induce whole body or hepatic palmitate oxidation in swine (Sus scrofa
domestica). Comp. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. 137, 131-140.
Yen, J.T., Killefer, J., 1987. A method for chronically quantifying net absorption of nutrients and gut
metabolites into hepatic portal vein in conscious swine. J. Anim. Sci. 64, 923-934.
Yen, J.T., Nienaber, J.A., Hill, D.A., Pond, W.G., 1989. Oxygen consumption by portal vein-drained organs
and by whole animal in conscious growing swine. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 190, 393-398.
Yen, J.T., Nienaber, J.A., Hill, D.A., Pond, W.G., 1991. Potential contribution of absorbed volatile fatty
acids to whole-animal energy requirement in conscious swine. J. Anim. Sci. 69, 2001-2012.
Yen, J.T., Nienaber, J.A., 1992. Influence of carbadox on fasting oxygen consumption by portal vein-
drained organs and by the whole animal in growing pigs. J. Anim. Sci. 70, 478-483.
‐ 221 ‐
Yen, J.T., Nienaber, J.A., 1993. Effects of high-copper feeding on portal ammonia absorption and on
oxygen consumption by portal vein-drained organs and by the whole animal in growing pigs. J. Anim.
Sci. 71, 2157-2163.
Yen, J.T., Varel, V.H., Nienaber, J.A., 2004. Metabolic and microbial responses in western crossbred and
Meishan growing pigs fed a high-fiber diet. J. Anim. Sci. 82, 1740-1755.
Zierler, K.L., 1961. Theory of the use of arteriovenous concentration differences for measuring metabolism
in steady and non-steady states. J. Clin. Invest. 40, 2111-2125.
‐ 222 ‐
Table 1 Composition (g/kg) and chemical analysis of a diet (control) supplemented either with betaine (0.5%), conjugated linoleic acid (CLA, 1%), or betaine + CLA. Control Betaine CLA Betaine + CLA Barley grain 840 840 840 840 Soybean meal 80 80 80 80 Betaine - 5 - 5 Cornstarch 32.8 27.8 32.8 27.8 CLA - - 10 10 Sunflower oil 10 10 - - Calcium carbonate 11 11 11 11 Calcium phosphate 12 12 12 12 Sodium chloride 5 5 5 5 L-Lysine 4 4 4 4 Threonine 1 1 1 1 Butylated hydroxytoluene 0.125 0.125 0.125 0.125 Vitamin-mineral premixa 3 3 3 3 Chemical analysis
Dry matter 901 905 905 906 Ash 49.5 51.6 51.0 54.4 Crude protein 88.4 92.3 90.5 94.8 Gross energy (MJ/kg) 16.3 16.6 16.5 16.5
a Provided per kg of complete diet: 9836 IU of vitamin A as retinyl acetate; 2253
IU of vitamin D3 as cholecalciferol; 2.52 IU of vitamin E as DL-α-tocopheryl acetate; 1.5 mg of menadione sodium bisulfite; 0.15 mg of thiamine; 3 mg of riboflavin; 0.15 mg of pyridoxine; 15 µg of cyanocobalamin; 15 µg of folic acid; 22.5 mg of nicotinic acid; 15 mg of D-pantothenic acid as calcium pantothenate; 15 mg of Mn as MnSO4 × 4H2O; 75 mg of Fe as FeSO4 × 7H2O; 120 mg of Zn as ZnO; 450 µg of I as KI; 60 mg of Cu as CuSO4 × 5H2O; and 300 µg of Co as CoSO4 × 7H2O.
‐ 223 ‐
Table 2 Pre and postprandial blood traits and portal-drained viscera (PD
V) heat production of Iberian pigs (n=4/diet) fed with a diet (control)
supplemented either w
ith betaine (0.5%), conjugated linoleic acid (C
LA, 1%), or betaine + C
LA.
P value
Control
Betaine C
LA Betaine + C
LA Pooled SE
a
Diet
Time
Diet × Tim
e H
aematocrit (%
) 31.5
x 31.6
x 30.6
y 29.6
z 0.26
<0.0001
0.002 0.751
Haem
oglobin (mm
ol/L) 6.36
x 6.38
x 6.16
y 5.97
z 0.053
<0.0001
0.002 0.768
PBFb (m
l/min)
Preprandial c
822 636
849 632
135.3
0.547
Postprandial d
1276x
1016y
1077y
1006y
57.5
0.004 0.542
0.993 [O
2 ]arterial - [O2 ]portal
(mm
ol/L)
Preprandial c 1.49
1.53 1.49
1.87 0.221
0.563
Postprandial d 2.05
x 1.95
x 1.97
x 1.75
y 0.053
0.001
0.659 0.999
PDV O
2 consumption
(mm
ol/min)
Preprandial c 1.20
0.91 1.26
1.09 0.168
0.498
Postprandial d 2.60
x 1.94
yz 2.14
y 1.75
z 0.119
<0.0001
0.378 0.996
PDV heat production
(kJ/kg0.75 BW
/h)
Preprandial c 2.34
1.88 2.29
2.06 0.361
0.787
Postprandial d 5.08
x 4.00
y 3.87
y 3.35
y 0.255
<0.0001
0.567 0.999
xyz For the comparisons m
ade, values within a row
with unlike superscript letter w
ere significantly different (P<0.05). a Standard error. b PBF, portal blood flow
. c Values are m
ean of one preprandial measurem
ent (5 min before feeding).
d Values are mean for ten postprandial m
easurements (0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 5 and 6 h after feeding).
‐ 224 ‐
Figure 1. From top to bottom: pre- and postprandial portal blood flow (PBF), arterio-portal O2 concentration difference, portal-drained viscera (PDV) O2 consumption, and PDV heat production of Iberian growing pigs fed control (), betaine (▲), CLA (■) or betaine + CLA diets (●). Values are means for 4 pigs. D=diet, T=time, and D × T=diet × time interaction. Error bars indicate standard error.
‐ 225 ‐
4.3. MANUSCRITO 3
INFLUENCE OF BETAINE AND CONJUGATED LINOLEIC ACID ON PORTAL-DRAINED VISCERA
FLUX OF METABOLITES IN GROWING IBERIAN PIGS
.
‐ 226 ‐
‐ 227 ‐
ABSTRACT
Betaine and conjugated linoleic acid (CLA) alter growth and nutrient partitioning in pigs, and they
have a synergistic effect. However, the mechanism of action remains unclear. Differences in net portal-
drained viscera (PDV) flux of metabolites might partially explain it. Sixteen 30 kg BW Iberian barrows were
randomly assigned to 4 diets (control, supplemented or not with 0.5% betaine, 1% CLA or 0.5% betaine +
1% CLA) and surgically fitted with 3 chronic indwelling catheters: in portal vein, ileal vein and carotid
artery. When pigs were recovered from surgery, a pulse dose of para-aminohippuric acid (PAH) was
infused into the ileal vein followed by a continuous infusion of 0.8 mL/min. Blood samples were taken
simultaneously from carotid artery and portal vein every 30 min for 4 h and hourly until 6 h after feeding
1,200 g of the diet, centrifuged and plasma stored at -20ºC. Portal blood flow was determined by the PAH
dilution method and net flux of metabolites according to the Fick principle. Net PDV flux (mmol/h) of
lactate, albumin, creatinine, urea, triglycerides (TG) and cholesterol were no different (P > 0.05) between
diets. Compared to control, net PDV flux of glucose decreased (P < 0.001) when pigs were fed betaine,
CLA and betaine + CLA (37, 31 and 51%, respectively); and net PDV flux of NH3 decreased (P < 0.01)
when pigs fed betaine and betaine + CLA (29 and 40%, respectively). In conclusion, differences in net
PDV flux of metabolites could explain metabolism divergences in pigs fed betaine or CLA diets.
Key words: betaine, CLA, flux of metabolites, pig, portal-drained viscera
1. INTRODUCTION
Several studies have shown the existence of numerous dissimilarities in metabolic activity between
Iberian and modern pigs. Iberian have a lower protein deposition and growth rate than improved breeds
(Nieto et al., 2002). However, the factors that limit growth remain unknown. They may be mediated by
differences in metabolism and nutrient partitioning between fat and protein accretion among pig breeds.
Portal-drained viscera (PDV) plays an essential role in nutrients distribution to peripheral tissues and may
compromise its availability to the periphery. Betaine and conjugated linoleic acid (CLA) have the potential
‐ 228 ‐
to alter growth and body composition in swine although their mode of function is not well understood. As
mentioned by Fernández-Fígares et al. (2008), betaine can decrease fat deposition and increase carcass
lean in pigs; whereas CLA has potential to increase ADG, feed efficiency, protein accretion, and to
decrease body fat. Most of the studies about the effects of betaine or CLA were performed with finishing
lean pigs. In growing Iberian pigs betaine or CLA alone did not produce significant changes but the
addition of both suggested a synergistic action affecting growth, carcass protein deposition (Fernández-
Fígares et al., 2008), biochemical and hormone profiles (Fernández-Fígares et al., 2012), and yield of lean
cuts (Rojas-Cano et al., 2011). The objective of this study was to determine if the use of betaine and CLA
in the diet of Iberian pigs affects net PDV flux of metabolites which may partially explain differences in
growth obtained in previous studies.
2. MATERIALS AND METHODS
The experimental protocol was approved by the Bioethical Committee of the Spanish Council for
Scientific Research (CSIC), Spain. Sixteen Iberian growing barrows (19 kg BW) were allocated in a
controlled environment room (21 ± 1.5ºC) in individual pens and randomly assigned to one of 4
experimental treatments (4 pigs/treatment): a basal diet (control) supplemented or not with 0.5% betaine,
1% CLA, or 0.5% betaine + 1% CLA, at the expense of cornstarch and sunflower oil for betaine and CLA,
respectively. The barley and soybean meal based diets contained 101 g CP/kg DM, 4 g L-Lys/kg DM, and
14.7 MJ ME/kg DM. One week before surgery, pigs were fed twice/d (0900 and 1500 h) at 2.4 × ME for
maintenance (444 kJ/kg0.75 BW per d; NRC, 1998). At 30 kg BW pigs were fitted with chronic indwelling
catheters in portal and ileal veins, and carotid artery as previously described (Rodriguez-Lopez et al.,
2013). When pigs were completely recovered from surgery a 15 mL pulse dose of para-aminohippuric acid
(PAH; 2% wt/vol; Sigma-Aldrich Química S.A., Madrid, Spain) was administered into ileal vein 45 min prior
the first blood sampling, followed by a continuous infusion of 0.8 mL/min until the end of the sampling
period. One blood sample (4.5 mL) was taken simultaneously from carotid artery and portal vein every 30
min for 4 h and hourly until 6 h after feeding 1,200 g of diet. Blood was centrifuged for hematocrit and
‐ 229 ‐
plasma harvested and stored at -20°C until analysis for PAH, glucose, lactate, albumin, creatinine, NH3,
urea, triglycerides (TG) and cholesterol. Portal blood flow was estimated using PAH as the indicator and
the hematocrit. Net PDV flux of metabolite was calculated by multiplying the porto-arterial plasma
concentration difference of the metabolite by the portal plasma flow rate. The experimental unit was the
pig. Repeated measures analyses were carried out using the mixed procedure of SAS (SAS Inst. Inc.,
Cary, NC). The main effects in the model were the diet, sampling time and their interaction. Tukey’s
multiple-range test was used. The differences were significant when P < 0.05.
3. RESULTS AND DISCUSSION
Portal blood flow rate was greatest (P < 0.01) for control diet vs. betaine, CLA and betaine + CLA
(1,276 vs. 1,016, 1,077 and 1,006 mL/min, respectively).
Both artery and portal concentrations of albumin, creatinine, urea, TG and cholesterol within each
diet were similar, and no differences (P > 0.05) in net PDV flux between diets was found. Concentration of
creatinine was lower (P < 0.001) for CLA and betaine + CLA diets compared with control, and net PDV flux
was numerically around half than control diet. Similarly, Iberian pigs fed diets supplemented with both
metabolic modifiers had reduced serum creatinine (Fernández-Fígares et al., 2012). Concentration of TG
was greater (P < 0.001) for CLA diet, in line with increased circulating TG in pigs previously reported
(Fernández-Fígares et al., 2012) indicating reduced uptake of preformed fatty acids reducing fat accretion
via decreased lipid synthesis from performed fatty acids. No difference (P > 0.05) in net PDV flux of TG
was found, though. Concentration of cholesterol was greater (P < 0.001) for betaine + CLA diet. In a study
by Fernández-Fígares et al. (2012), supplementation with both metabolic modifiers increased serum
cholesterol comparing with control pigs. Controversial data appear in literature. Net PDV flux of cholesterol
was close to zero and no differences (P > 0.05) between diets were found.
Concentration of glucose, lactate and, mainly, NH3 in artery and porta within each diet was dissimilar.
Lower glucose was found for betaine + CLA diet both in artery (P < 0.10) and porta (P < 0.01) compared to
control. Net PDV flux of glucose was greatest (P < 0.001) for control diet, the lowest value was for betaine
‐ 230 ‐
+ CLA. This suggests that betaine and CLA increased the glucose metabolized by the gastrointestinal wall
or that part of glucose is fermented in the small intestine. This is in concordance with the lowest numerical
concentration of lactate found in both arterial and portal betaine + CLA diet although no differences (P >
0.05) were found in net PDV flux of lactate. Both artery and porta lactate were greater (P < 0.01) in CLA
diet indicating that its use may increase the fermentation of carbohydrates by the hindgut microflora or
derive from glucose oxidation in the gut (Vaugelade et al., 1994). In agreement, CLA decreased
gluconeogenesis from lactate, pyruvate and alanine in primary culture of porcine hepatocytes (Conde-
Aguilera et al., 2012). For all diets, NH3 concentration in porta was higher than in artery because it is
produced by the intestinal microflora and the intestinal wall from glutamine (Rérat and Buraczewska,
1986) and converted into urea by the liver. NH3 was numerically lower in both artery and porta CLA diet,
this is in agreement with findings by Ostrowska et al. (1999) where CLA increased protein accretion rate in
pigs. Lower (P < 0.001) concentration of urea was found concomitantly greater (P < 0.001) albumin which
may indicate an increase in export protein synthesis by the liver in CLA diet. In the aforementioned study
by Fernández-Fígares et al. (2012), supplementation with both metabolic modifiers reduced urea
concentration compared with control pigs. The small difference in urea concentration between portal and
arterial blood probably because such a small difference in concentration is difficult to detect (Malmlöf and
Simoes Nunes, 1992). Net PDV flux of NH3 for betaine + CLA diet almost halved the net PDV flux for
control because the portal blood flow was 21% lower (P < 0.01) than control. The reduced net PDV flux of
NH3 indicates that NH3 present in the gastrointestinal tract was used for de novo synthesis of bacterial
protein instead of being absorbed, if all of the NH3 in the lumen of the large intestine is used for de novo
synthesis of bacterial protein, the net PDV flux of NH3 is related to metabolism in the intestinal wall (van
der Meulen et al., 1997). Net PDV flux of NH3 for control diet was almost twice that of diet betaine + CLA,
suggesting that about one-half of the net PDV flux may be caused by the intestinal microflora and the
other half by the intestine wall. Mosenthin et al. (1992) suggested that NH3 is the preferred N source of
bacteria in pigs. The relative use by the PDV of individual AA from the diet and arterial inputs widely
varies, and dietary AA are the preferred fuel over dietary glucose (Stoll and Burrin, 2006). In vivo and in
the fed state, there is a metabolically significant glutamate deamination in the mucosa and probably other
AA are catabolized in first pass by the mucosa (Stoll et al., 1999). Net portal flux of glucose (P < 0.001)
‐ 231 ‐
and NH3 (P < 0.01) was greater for control diet indicating gluconeogenesis from AA increasing NH3
production, which adds extra NH3 load for the liver to detoxify. A decreased in net PDV flux of NH3 may
implicate that less glutamate and other AA are catabolized in first pass by the intestinal mucosa, so more
AA are available for productive tissues. Unfortunately, we have not determined net PDV flux of AA in this
study.
In conclusion, the use of betaine and CLA in the diet of Iberian pigs affects net PDV flux of glucose
and NH3 which may partially explain differences in growth obtained previously.
LITERATURE CITED
Conde-Aguilera, J. A., M. Lachica, R. Nieto, and I. Fernández-Fígares. 2012. Metabolic regulation of fatty
acid esterification and effects of CLA on glucose homeostasis in pig hepatocytes. Animal 6:254-261.
Fernández-Fígares, I., J. A. Conde-Aguilera, R. Nieto, M. Lachica, and J. F. Aguilera. 2008. Synergistic
effects of betaine and conjugated linoleic acid on growth and carcass composition of growing Iberian
pigs. J. Anim. Sci. 86:102-111.
Fernández-Fígares, I., M. Lachica, A. Martín, R. Nieto, L. González-Valero, J. M. Rodríguez-López, J. F.
Aguilera. 2012. Impact of dietary betaine and conjugated linoleic acid on insulin sensitivity, protein
and fat metabolism of obese pigs. Animal 6:1058-1067.
Malmlöf, K., and C. Simoes Nunes. 1992. The effect of intravenous urea infusions on portal and arterial
plasma ammonia and urea enrichment of jejunal and colonic infusions. Scand. J. Gastroenterol.
27:620-624.
Mosenthin, R., W. C. Sauer, H. Henkel, F. Ahrens, and C. F. M. de Lange. 1992. Tracer studies of urea
kinetics in growing pigs: 2. The effect of starch infusion at the distal ileum on urea recycling and
bacterial nitrogen excretion. J. Anim. Sci. 70:3467-3472.
‐ 232 ‐
Nieto, R., A. Miranda, M. A. García, and J. F. Aguilera. 2002. The effect of dietary protein content and
feeding level on the rate of protein deposition and energy utilization in growing Iberian pigs from 15 to
50 kg body weight. Brit. J. Nutr. 88:39-49.
NRC. 1998. Nutrient requirements of swine. 10th ed. Natl. Acad. Press, Washington, D.C.
Ostrowska, E., M. Muralitharan, R. F. Cross, D. E. Baumann, and F. R. Dunshea. 1999. Dietary
conjugated linoleic acids increase lean tissue and decrease fat deposition in growing pigs. J. Nutr.
129:2037-2042.
Rérat, A., and L. Buraczewska. 1986. Postprandial quantitative kinetics of urea and ammonia nitrogen
exchanges between the digestive tract and the portal blood in conscious pigs receiving a diet with
and without ammonia. Arch. Anim. Nutr. 36:252-269.
Rodríguez-López, J. M., M. Lachica, L. González-Valero, and I. Fernández-Fígares. 2013. Approaches for
quantifying gastrointestinal nutrient absorption and metabolism in a native and a modern pig breed.
J. Agric. Sci. 151:434-443.
Rojas-Cano, M. L., L. Lara, M. Lachica, J. F. Aguilera, and I. Fernández-Fígares. 2011. Influence of
betaine and conjugated linoleic acid on development of carcass cuts of Iberian pigs growing from 20
to 50 kg body weight. Meat Sci. 88:525-530.
Stoll, B., and D. G. Burrin. 2006. Measuring splanchnic amino acid metabolism in vivo using stable
isotopic tracers. J. Anim. Sci. 84(E. Suppl.):E60-E72.
Stoll, B., D. G. Burrin, J. Henry, H. Yu, F. Jahoor, and P. J. Reeds. 1999. Substrate oxidation by the portal
drained viscera of fed piglets. Am. J. Physiol. 277:E168-E175.
van der Meulen, J., G. C. M. Bakker, J. G. M. Bakker, H. de Visser, A. W. Jongbloed, and H. Everts. 1997.
Effect of resistant starch on net portal-drained viscera flux of glucose, volatile fatty acids, urea, and
ammonia in growing pigs. J. Anim. Sci. 75:2697-2704.
‐ 233 ‐
Vaugelade, P., L. Posho, B. Darcy-Vrillon, F. Bernard, M. T. Morel, and P. H. Duée. 1994. Intestinal
oxygen uptake and glucose metabolism during nutrient absorption in the pig. Proc. Soc. Exp. Biol.
Med. 207:309-316.
‐ 234 ‐
Table 1. Mean arterial and portal plasma concentrations, and net portal-drained viscera (PDV) flux of glucose, lactate, albumin, creatinine, NH3, urea, triglycerides (TG) and cholesterol of Iberian pigs (n = 4/diet) fed with a diet (control) supplemented either with betaine (0.5%), conjugated linoleic acid (CLA, 1%), or betaine + CLA1
P-value2 Control Betaine CLA Betaine +
CLA SEM Diet Time Diet ×
Time Artery, mmol/L
Glucose 5.72 5.76 6.13 5.62 0.070 † NS Lactate 1.66a 1.62a 2.40b 1.58a 0.075 † NS Albumin 0.539a 0.551a 0.584b 0.537a 0.0044 NS NS Creatinine 0.063a 0.059ab 0.054bc 0.054c 0.0006 NS NS NH3 0.185ab 0.209b 0.155a 0.208b 0.0047 NS NS Urea 3.17a 2.10b 1.39c 2.32b 0.054 NS NS TG 0.224a 0.253a 0.365b 0.286a 0.0149 NS NS Cholesterol 1.97ab 1.77a 2.12b 2.46c 0.028 NS NS
Portal vein, mmol/L Glucose 8.74a 8.21ab 8.48a 7.47b 0.114 NS Lactate 1.93a 1.92a 2.61b 1.83a 0.077 NS Albumin 0.519a 0.552b 0.585c 0.538ab 0.0043 NS NS Creatinine 0.068a 0.063ab 0.057b 0.058b 0.0009 NS NS NH3 0.328ab 0.346a 0.284b 0.321ab 0.0068 NS Urea 3.06a 2.15b 1.44c 2.31b 0.058 NS NS TG 0.236a 0.275a 0.379b 0.292a 0.0097 NS Cholesterol 1.99ab 1.77a 2.06b 2.48c 0.031 NS NS
Net PDV flux, mmol/h Glucose 230a 145b 158b 112b 7.2 NS Lactate 21.2 18.2 12.4 13.4 3.14 NS NS Albumin -1.24 0.11 0.03 0.03 0.358 NS NS NS Creatinine 0.409 0.184 0.179 0.173 0.0555 NS NS NS NH3 11.4a 8.1b 8.3ab 6.8b 0.43 NS Urea -6.94 3.46 1.41 -3.51 2.647 NS NS NS TG 1.20 1.36 0.84 0.10 0.501 NS NS NS Cholesterol 1.23 -0.72 -3.93 -0.12 1.444 NS NS NS
1Values are mean for ten measurements (0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 5 and 6 h after feeding). 2NS = not significant; †P < 0.10; P < 0.05; P < 0.01; P < 0.001. a,b,cValues within a row with unlike superscript letter were significantly different (P < 0.05).
‐ 235 ‐
CAPITULO5
DISCUSIÓN GENERAL
‐ 237 ‐
El presente trabajo de Tesis Doctoral forma parte de un proyecto de investigación que es la
continuación natural del programa experimental que viene realizando este grupo de investigación desde
el año 1997, y que tiene como objetivo principal el conocimiento científico, en términos de nutrición, del
cerdo Ibérico y su caracterización fisiológica y metabólica. Desde el año 2002 parte de la actividad
científica realizada se ha centrado en el estudio del efecto que el uso de ácido linoleico conjugado o CLA
y betaína pudieran tener sobre el crecimiento y metabolismo del cerdo Ibérico con la intención de
contribuir, no sólo al conocimiento de las necesidades clave para su nutrición equilibrada, sino también a
la elaboración de estrategias nutricionales dirigidas a mejorar caracteres productivos de la raza Ibérica.
5.1 INFLUENCIA DE LA BETAÍNA Y EL ÁCIDO LINOLEICO CONJUGADO EN EL DESARROLLO DE
LOS CORTES DE LA CANAL DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO DESDE 20 A 50 KG DE
PV.
Son escasos los trabajos que abordan los efectos que los cambios en la nutrición ejercen sobre las
pautas de desarrollo, ritmos de crecimiento, composición tisular, distribución de los distintos tejidos, etc.
en cerdos de genotipos obesos (Bonneau y col., 1990; Kyriazakis y col., 1994; Quiniou y Noblet, 1995;
Kouba y col., 1999; Franci y Pugliese, 2007) y específicamente en el cerdo Ibérico (De Pedro, 1987;
Aparicio Macarro, 1988; Mayoral y col., 1999; Vílchez, 2004). Este grupo de investigación ha realizado y
publicado recientemente una serie de experimentos en los que se estudia la respuesta del cerdo Ibérico
(10 – 150 Kg de PV) a cambios en la relación proteína/energía de la dieta (Nieto y col., 2012), así como el
efecto que el plano de alimentación y la concentración de proteína de la dieta ejercen sobre el crecimiento
‐ 238 ‐
de distintos componentes corporales y sobre la calidad de la canal (Nieto y col., 2014). El este estudio,
que reúne el trabajo realizado durante los últimos años, tiene como objetivo final evidenciar las
importantes diferencias existentes en el crecimiento de los distintos componentes corporales del cerdo
Ibérico y su composición química, que no se ajustan a los modelos de crecimiento publicados para razas
magras y de genotipos convencionales. Finalmente, se ha llevado a cabo la creación de modelos de
crecimiento específicos para esta raza, lo que permite estimar el crecimiento relativo de los distintos
componentes corporales, definir cambios en los requerimientos energéticos y proteicos y estimar la
deposición proteica y lipídica que tiene lugar a partir de los nutrientes y energía suministrados.
El diseño del estudio experimental incluido en el presente trabajo de Tesis Doctoral permitió
conocer la respuesta del cerdo Ibérico en fase de crecimiento (25 – 50 Kg de PV), en términos
productivos y de composición tisular, al añadir a la dieta los modificadores del metabolismo CLA y
betaína, con el objetivo final de obtener el mejor desarrollo del organismo para que al alcanzar el peso de
entrada en montanera muestre una óptima conformación tanto ósea como muscular. Como ya manifestó
De Pedro (1987) la producción de los cortes principales, particularmente las piezas nobles, es una
característica importante a la hora de valorar la calidad de la canal que desde hace varias décadas se ha
utilizado como indicador de su calidad en numerosos estudios científicos (Varney y col., 1962; Carr y col.,
1978; Martin y col., 1980; Landgraf y col., 2006; Heyer y col., 2007). Así la cantidad absoluta y
proporciones relativas en que tejido magro y tejido graso se depositan, junto a características sensoriales
y al perfil de ácidos grasos del tejido lipídico determinan el valor económico del animal.
5.1.1. RENDIMIENTO DE LOS CORTES PRINCIPALES DE LA CANAL DE CERDOS IBÉRICOS EN
CRECIMIENTO (25-50 KG DE PV) ALIMENTADOS CON DIETAS SUPLEMENTADAS O NO,
CON CLA Y/O BETAÍNA.
Uno de los objetivos de este experimento fue el estudio del efecto de la adición de CLA, betaína o
ambos modificadores, sobre el rendimiento de cada uno de los cortes principales que conforman la canal
de cerdos Ibéricos en fase de crecimiento y sacrificados a 50 Kg de PV.
‐ 239 ‐
En el cerdo Ibérico los distintos cortes de la canal se agrupan en óseos, magros y grasos según el
tipo de tejido predominante en cada uno de ellos (Dobao y col., 1985). En los cortes constituidos
principalmente por tejido óseo (espinazo y costillar) la adición a la dieta de CLA no originó diferencias
significativas en el rendimiento de estos cortes al igual que obtuvieron otros autores (Eggert y col., 2001)
en cerdas de genotipo mejorado (75-120 Kg de PV). Sin embargo, la adición a la dieta de betaína dio
lugar a un un aumento significativo en el rendimiento del espinazo, lo que podría indicar un mayor
desarrollo del componente óseo y por tanto de la longitud de la canal, originando animales más largos.
Estos resultados están en concordancia con lo observado por Matthews y col. (1998; 2001a) en cerdos de
acabado alimentados con dietas enriquecidas con betaína.
En los cortes en los que predominó el componente magro (solomillo, cabezada de magro y lomo)
no se observó ningún efecto significativo de la adición de CLA o betaína por separado al igual que
observaron otros autores como Thiel-Cooper y col. (2001) en cerdos en fase de crecimiento-cebo, o
Corino y col. (2003) en cerdos pesados. Sin embargo, se apreció una tendencia hacia un aumento del
rendimiento de estos cortes en animales alimentados con dietas adicionadas con CLA y betaína
simultáneamente. Tendencia que se hace significativa en el solomillo, cuyo rendimiento se vió
incrementado en un 22% con respecto al grupo control. En los estudios realizados previamente en este
grupo de investigación sobre el uso de CLA y betaína en el cerdo Ibérico, Fernández-Fígares y col. (2008)
encontraron la existencia de un efecto sinérgico de ambos modificadores metabólicos sobre la deposición
de tejido magro en la canal, que podría estar en concordancia con este aumento significativo observado
en el rendimiento del solomillo en animales alimentados con dietas suplementadas con ambos
modificadores metabólicos. Se observó además, un aumento del 23% en el rendimiento de la cabezada
de magro resultado de la adición a la dieta de betaína. García y col. (2000) observaron que tras la ingesta
de una dieta adicionada con betaína, tenía lugar un aumento en plasma de aminoácidos azufrados
(concretamente metionina y cisteína) que son requeridos esencialmente para la síntesis proteica. De este
modo se ha demostrado que la adición a la dieta de betaína aumenta la formación de tejido magro (Wang
y Xu, 1999; Feng y Yu, 2001) en distintas fases productivas del cerdo, concretamente entre un 4 y 8% en
cerdos en fase de crecimiento (Yu y col., 2001). Estos efectos son atribuibles al papel que la betaína
‐ 240 ‐
desempeña como donador de grupos metilo. Además, y como demostraron Matthews y col. (2001b), la
betaína se acumula en las células musculares pudiendo causar debido a su capacidad osmolítica
alteraciones en la capacidad de retención de agua del tejido muscular, lo que podría incrementar el peso
de los cortes de la canal con mayor componente magro, y en última instancia el peso total del animal
(Esteve-García y Mack, 2000). No obstante, un aumento en el contenido en agua corporal también puede
ser debido a un aumento en la relación magro/grasa del cuerpo (Eklund y col, 2005). Por otro lado,
Moeckel y col. (2002) deduce de sus observaciones que la capacidad observada en la betaína para
mejorar la eficacia de la osmorregulación en las células del organismo puede hacer que quede más
energía disponible para el crecimiento, mejorando así su eficiencia. Contrariamente a estas
observaciones, otros autores (Smith y col., 1994; Webel y col., 1995; Øverland y col., 1999; van Lunen y
Simmins, 2000) no encontraron efectos significativos sobre la eficacia de crecimiento debido a la adición
de betaína a la dieta.
La adición a la dieta de CLA o betaína por separado no tuvo un efecto significativo sobre el
rendimiento de los cortes principales con mayor componente graso: tocino dorsal, panceta y grasa de
riñonada. En este mismo sentido Lauridsen y col. (2005) y Suksombat y col. (2008) no encontraron
diferencias significativas en el espesor del tocino dorsal de cerdos de acabado alimentados con dietas
suplementadas con CLA. No obstante, otros autores comprobaron que la inclusión en la dieta de CLA
(Thiel-Cooper y col., 2001; Tischendorf y col., 2002) o betaína (Cadogan y col., 1993; Matthews y col.,
2001a) disminuyó notablemente la magnitud de diferentes parámetros empleados en la estimación del
contenido graso de la canal de cerdos magros cruzados en fase de acabado. En el presente experimento,
la adición conjunta de CLA y betaína disminuyó significativamente el rendimiento de la grasa de riñonada
en un 32%, sin efecto significativo para los demás cortes principales de mayor contenido graso (panceta y
tocino dorsal). El hecho de que las dietas adicionadas con betaína o CLA no presentaran diferencias
significativas con respecto a la dieta control y sí con la adicionada con ambos modificadores metabólicos
indica la existencia de un efecto aditivo entre ambos para este parámetro. Parece interesante señalar que
el desarrollo relativo de los depósitos grasos de la canal puede variar de acuerdo a la localización
anatómica de los mismos (Kouba y Bonneau, 2009).
‐ 241 ‐
De los cortes principales de la canal, la paleta y el jamón son clasificados como cortes o piezas
nobles. De los tres tejidos principales que componen estas piezas (e igualmente la canal) son el muscular
y el graso los que más atención han recibido por parte de los investigadores, el tejido muscular por ser el
más importante económicamente (Berg y Butterfield, 1979; Kempster y col., 1982) y el graso porque un
exceso del mismo, principalmente de grasa subcutánea, puede llevar a una depreciación del valor de la
canal. Aunque la forma más exacta de conocer la composición de la canal sea la disección total de la
misma, la dificultad que este proceso entraña hace que a menudo se recurra a la disección de alguno de
los cortes principales. Diversos autores (Smith y Carpenter, 1973; Cole y col., 1976; Evans y Kempster,
1979; Demoulin y col., 1983) señalan al jamón como un buen indicador de la cantidad de magro existente
en la canal debido a que guarda mayor relación entre su composición tisular y la de la canal completa.
Vílchez (2004) concede más importancia al análisis de la pieza sin perfilar. La diferencia entre la pieza sin
perfilar y la perfilada son los llamados recortes, que presentan una distribución tisular marcadamente
diferente al resto de la pieza, fundamentalmente grasa de cobertura.
En el jamón sin perfilar no existieron diferencias significativas entre tratamientos en cuanto al
rendimiento, mientras que en el jamón perfilado la adición a la dieta de CLA y betaína conjuntamente
disminuyó su rendimiento en un 5%. La inclusión en la dieta de betaína por sí sola no tuvo ningún efecto
sobre el rendimiento del jamón. Al igual que en nuestras observaciones, Matthews y col. (2001b) no
obtuvieron diferencias significativas en el rendimiento del jamón por la inclusión de betaína en la dieta de
cerdos de acabado. Asimismo, la adición a la dieta de 1% de CLA no afectó al rendimiento del jamón en
concordancia con las observaciones de Thiel-Cooper y col. (2001) en cerdos de acabado. Sin embargo,
llama la atención que en el rendimiento de los recortes del jamón sí se encontrara una disminución
significativa debida a la adición de betaína a la dieta. Teniendo en cuenta que el mayor componente de
los recortes es tejido graso de cobertura, es posible que la disminución en el rendimiento encontrada se
deba a una disminución en la formación del tejido graso por la acción de la betaína adicionada a la dieta.
Algunos autores defienden que la capacidad de la betaína para modificar la composición de la canal
radica en el papel que desempeña como donador de grupos metilo. Como ya se mencionó anteriormente,
la betaína aumenta la disponibilidad de metionina y cisteína para la síntesis proteica (Wallis, 1999) lo que
‐ 242 ‐
conllevaría una menor disponibilidad de aminoácidos destinados a un proceso de desaminación y síntesis
de tejido graso. Por otro lado, se ha demostrado en distintas especies, entre ellas el cerdo (Yu y col.,
2001), que la suplementación de betaína en la dieta aumenta la síntesis de carnitina en hígado y
músculo, requerida en el trasporte de ácidos grasos a través de la membrana de la mitocondria para su
oxidación (Stryer, 1988). Owen y col. (1996) encontraron que el aumento de carnitina en la dieta reduce el
contenido lipídico en el hígado y en la canal de cerdos destetados.
Con respecto al rendimiento de la paleta, en la pieza sin perfilar es menor (P=0,079) en animales
alimentados con dietas adicionadas con CLA y betaína. Sin embargo, en la pieza perfilada no se
encontraron diferencias significativas por la adición de estos modificadores metabólicos a la dieta. En este
caso en los recortes presentaron una menor cantidad de tejido graso y la piel. Se ha demostrado y
descrito en diversos estudios la capacidad del CLA y la betaína para modificar la composición de la canal,
entre otros procedimientos, reduciendo la deposición de grasa. Cabe pensar que esta tendencia
observada en la pieza sin perfilar pudiera deberse, dada la composición de los recortes, al efecto
sinérgico que se ha observado entre CLA y betaína en estudios anteriores, y que se pone de manifiesto
nuevamente en los resultados del presente trabajo.
5.1.2. RENDIMIENTO DE LOS DIFERENTES TEJIDOS QUE CONFORMAN LAS PIEZAS NOBLES
JAMÓN Y PALETA PERFILADOS DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO (25-50 KG DE
PV) ALIMENTADOS CON DIETAS SUPLEMENTADAS O NO, CON CLA Y/O BETAÍNA.
Una vez realizada la disección de las piezas nobles perfiladas y la determinación química de la
grasa intramuscular en el tejido magro de la pieza, se llevó a cabo el estudio del rendimiento de cada
tejido: piel, magro, óseo y graso. Para el tejido graso se hizo distinción de los diferentes depósitos grasos
que se pueden localizar en ambas piezas nobles: grasa subcutánea, grasa intermuscular e intramuscular.
La inclusión en la dieta de CLA y/o betaína no provocó variaciones significativas en las
contribuciones relativas de la mayoría de los tejidos del jamón perfilado. No obstante, encontramos una
‐ 243 ‐
tendencia (P=0.08) hacia una disminución del 7% en el tejido óseo del jamón perfilado de animales
alimentados con dietas suplementadas con CLA + betaína. Es bien conocida la importancia de los lípidos
y más concretamente, los ácidos grasos poliinsaturados de las series n-3 y n-6, y el CLA sobre el
metabolismo óseo. La resorción y la formación ósea están estrechamente coordinadas a escala local por
linfocitos, factores de crecimiento y prostaglandinas. Éstas últimas, concretamente la prostaglandina E2
(PGE2) ejerce una gran influencia sobre el equilibrio entre formación y resorción, de tal manera que un
aumento de los niveles de PGE2 en los osteoblastos puede inhibir su actividad aumentando la resorción
(Watkins y col., 2001). Contrariamente a nuestros resultados, y según manifestaron López Bote y col.
(2004), la presencia de CLA provoca el descenso de los niveles de prostaglandina E2 (PGE2)
promoviendo así la formación ósea. Asimismo, Thiel-Cooper y col. (2001) observaron un incremento en
masa ósea en cerdos alimentados con un 0,5 ó 1% en comparación con cerdos control sin CLA en su
dieta o alimentados con 0,12 ó 0,25% de CLA. Estos mismos efectos del CLA se han encontrado en
animales de otras especies alimentados con dietas suplementadas con CLA, como en ratones (Park y
col., 1999) y peces (Berge y col., 2004), demostrando un efecto positivo del CLA sobre los procesos de
mineralización ósea.
Con respecto a la paleta perfilada, la adición conjunta de CLA y betaína a la dieta dio lugar a un
aumento del magro y del magro libre de grasa del 5 y 6%, respectivamente. Estos resultados están en
concordancia con que el efecto de los modificadores metabólicos, betaína (Moeckel y col., 2002;
Fernández-Fígares y col., 2002) y CLA (Dugan y col., 1997; Ostrowska y col., 1999) va encaminado hacia
un aumento de la deposición de tejido magro.
Si bien existen autores que no encontraron efectos significativos por la adición a la dieta de CLA,
autores como Wiegand y col. (2001b) obtuvieron un aumento significativo de la firmeza, el veteado y el
color en la carne de cerdo alimentados con dietas suplementadas con CLA. Dugan y col. (1997) no
observaron efecto alguno en el rendimiento del tejido magro o tejido óseo en paleta y jamón en cerdos de
acabado por la adición a la dieta de CLA. En este mismo sentido, otros autores (O'Quinn y col., 2000;
Bee, 2001; Eggert y col., 2001; Joo y col., 2002) encontraron que la inclusión en la dieta de 1-2% de CLA
no afectó al contenido en grasa intramuscular del músculo longissimus dorsi en cerdos.
‐ 244 ‐
En general, son varios los factores que en las últimas décadas han impulsado la investigación
hacia el estudio del control de la deposición de grasa y magro en ganado. Los aditivos para piensos han
sido ampliamente investigados por sus propiedades en incrementar la eficiencia alimentaria y la mejora
de composición de la canal, especialmente a través de la disminución de la deposición de grasa. Este
grupo de investigación ha demostrado en sus últimos estudios que la betaína y el CLA interactúan
positivamente como promotores del crecimiento y modificadores de la canal en cerdos Ibéricos
(Fernández-Fígares y col., 2008), pero hasta donde sabemos, no existe información disponible en su
posible efecto sobre el rendimiento de los cortes de la canal y de los componentes diseccionados de
jamón y paleta, o sobre sus coeficientes de crecimiento alométrico. En teoría, cabría esperar un mayor
efecto de la adición de betaína y CLA en cerdos Ibéricos que en razas convencionales basándonos en la
mayor adiposidad y menor tasa de crecimiento de esta raza porcina (Nieto y col., 2002).
5.1.3. CRECIMIENTO ALOMÉTRICO DE LOS CORTES PRINCIPALES DE LA CANAL DE CERDOS
IBÉRICOS EN CRECIMIENTO (25-50 KG DE PV) ALIMENTADOS CON DIETAS
SUPLEMENTADAS O NO, CON CLA Y/O BETAÍNA.
Entendemos por alometría el estudio de los cambios de dimensión relativa de las partes corporales
correlacionados con los cambios en el tamaño total. Las proporciones relativas de los órganos de los
animales no permanecen invariables, sino que los diferentes órganos y tejidos crecen de forma diferente
a la largo de la vida del animal hasta alcanzar su estado adulto (Vílchez, 2004).
En el cerdo Ibérico (Dobao y col., 1985) el gradiente de crecimiento es centrípeto que, como
describió Hammond (1932), consiste en una onda de crecimiento que va desde el cráneo hacia la parte
posterior del animal y desde el final de las extremidades hacia arriba, para confluir en las vértebras
lumbares. La región lumbar alcanza su crecimiento máximo durante el periodo postnatal, seguida por la
pelvis, tórax y cuello, mientras que la cabeza y las extremidades crecen menos (Hafez, 1972).
‐ 245 ‐
Como ya observara De Pedro (1987) en el cerdo Ibérico, los ritmos de crecimiento de tejido óseo,
muscular y graso difieren de otros genotipos, particularmente de razas magras o mejoradas. Aún así, el
primer tejido en desarrollarse es el tejido óseo, seguido del tejido muscular, después su ritmo de
crecimiento se reduce y aumenta el desarrollo del tejido graso. Estas pautas de crecimiento son comunes
en razas porcinas convencionales y mejoradas (De Pedro, 1987; Evans y Kempster, 1979; Shields y col.,
1983; Tess, y col., 1986; Gu y col., 1992; Vílchez, 2004). En el cerdo Ibérico (De Pedro, 1987; Vílchez,
2004) es interesante destacar las diferencias en el desarrollo de los distintos depósitos grasos, siendo la
grasa intramuscular el más precoz en su deposición si se compara con el de la grasa intermuscular. La
grasa subcutánea y la grasa de riñonada son los depósitos grasos que presentan un desarrollo más
tardío. Mientras que factores ligados al sexo del animal o su genotipo son cuantitativamente poco
importantes en el desarrollo del tejido óseo o muscular, el tejido adiposo sin embargo, es mucho más
sensible a alteraciones nutricionales, así como al genotipo, sexo y ambiente (Vílchez, 2004).
El crecimiento y el desarrollo del tejido muscular y graso han sido extensamente estudiados
durante las últimas décadas por el beneficio económico altamente asociado (Gu y col., 1992). Un mejor
conocimiento de estos procesos de crecimiento es de gran importancia para mejorar la calidad y el
aprovechamiento de los productos derivados del cerdo en general, y de la raza Ibérica en particular, para
reducir en la medida de lo posible la proporción de recursos empleados y lograr así una producción
óptima. El estudio que se ha llevado a cabo nos permite conocer el efecto que la adición a la dieta de
CLA y/o betaína puede ejercer sobre el desarrollo de los distintos cortes y tejidos de la canal de cerdos
Ibéricos en crecimiento a través del estudio de sus coeficientes alométricos.
Nuestros resultados reflejaron que las piezas de mayor contenido óseo (costillar y espinazo)
presentaron los coeficientes alométricos más bajos (significativamente inferiores a 1) indicando que este
tejido tiene un desarrollo más temprano en relación al peso de la canal, en concordancia con los
observado por otros autores (Davis, 1974; Cole y col., 1976; Fortin y col., 1987) que estimaron el valor del
coeficiente alométrico para el tejido óseo entre 0,63 y 0,92. En el presente estudio, la adición a la dieta de
betaína aumentó significativamente el valor del coeficiente alométrico para el espinazo, sugiriendo que la
beatína causaba un retraso en la maduración de esta pieza, lo que concuerda con el mayor rendimiento
‐ 246 ‐
obtenido anteriormente mencionado. Autores como Matthews y col. (1998, 2001b) encontraron
igualmente un aumento en la longitud de la carcasa en cerdos de acabado alimentados con dietas
suplementadas con betaína.
Los valores del coeficiente alométrico para el tejido magro coinciden con los encontrados en la
literatura (Davis, 1974; Cole y col., 1976; Fortin y col., 1987) comprendidos entre 0,75 y 1,06. En el
presente estudio, los cortes de la canal con alto contenido en tejido magro (cabezada de magro, solomillo
y lomo) presentaron coeficientes alométricos con valores cercanos a la unidad, indicando que estas
piezas se desarrollan a la misma velocidad que lo hace la canal completa. En el cerdo, la formación de
tejido magro alcanza su máximo entre 60 y 90 Kg de PV, y a partir de este peso declina a un ritmo
constante. Si bien, y como ya se comentó al principio de este capítulo, esta pauta de crecimiento puede
diferir entre genotipos (Doornenbal, 1971). Así, autores como De Pedro (1987) o Vílchez (2004) sugieren
que el tejido muscular alcanza su máximo desarrollo en el cerdo Ibérico en torno a los 50 Kg de PV lo que
coincide con los datos obtenidos en el presente estudio. Por otro lado, la adición a la dieta de CLA +
betaína aumentó los valores de “b” en el solomillo (el más magro de los cortes) lo que sugiere un
desarrollo tardío de esta pieza que está en consonancia con el mayor rendimiento anteriormente
mencionado.
Tal y como sugieren diversos autores (Davis, 1974; Cole y col., 1976; Evans y Kempster, 1979; De
Pedro, 1987; Fortin y col., 1987), el valor de “b” obtenido para el tejido graso estuvo comprendido entre
1,16 y 1,65 lo que indica que este tejido presenta su máximo desarrollo en etapas finales del crecimiento
del animal. Así, grasa de riñonada, panceta y tocino dorsal, todos ellos cortes con predominio de
componente graso, presentaron una maduración tardía y una elevada tasa de desarrollo si se compara
con la canal completa. La adición a la dieta de CLA + betaína disminuyó significativamente el valor del
coeficiente alométrico de la grasa de riñonada, al igual que observaron Fernández-Fígares y col. (2008)
en referencia al contenido graso en la canal de cerdos Ibéricos en crecimiento alimentados con dietas
suplementadas con CLA + betaína. Por otro lado, la betaína adicionada individualmente a la dieta
diminuyó el valor de “b”, lo que indica un desarrollo más temprano de esta pieza. La misma tendencia se
observó para el tocino dorsal. Estos resultados coinciden con las observaciones previas de otros autores
‐ 247 ‐
(Cadogan y col., 1993; Haydon y col., 1995; Lawrence y col., 1995; Smith y col., 1995; Wang y Xu, 1999;
Matthews y col., 2001b; Fernández-Fígares y col., 2002) quiénes encontraron una disminución en el
grosor del tocino dorsal. Sin embargo, en otros estudios realizados (Øverland y col., 1999; Fernández-
Fígares y col., 2008) no se encontró efecto alguno de la betaína sobre este parámetro.
La paleta (perfilada o no) mostró valores de “b” próximos a la unidad, sin que la adición a la dieta
de CLA y/o betaína causara un efecto significativo en el coeficiente alométrico. El jamón, sin embargo,
presentó un valor del coeficiente alométrico menor a la unidad, lo que sugiere un crecimiento más lento
en comparación al resto de la canal. La adición a la dieta de CLA + betaína aumentó el valor de “b” para
el jamón perfilado, lo que concuerda con el incremento en el rendimiento de este corte previamente
mencionado.
5.1.4. CRECIMIENTO ALOMÉTRICO DE LOS DIFERENTES TEJIDOS QUE CONFORMAN LAS
PIEZAS NOBLES JAMÓN Y PALETA PERFILADOS DE CERDOS IBÉRICOS EN
CRECIMIENTO (25-50 KG DE PV) ALIMENTADOS CON DIETAS SUPLEMENTADAS O NO,
CON CLA Y/O BETAÍNA.
Cabe destacar la ausencia de efecto significativo en los coeficientes alométricos de los distintos
tejidos de ambas piezas perfiladas por la adición de betaína y/o CLA a la dieta. No obstante, se apreció
una tendencia hacia el aumento del valor de los coeficientes alométricos en el tejido muscular de paleta
(P=0,06) y jamón (P=0,10) de aquellos animales alimentados con CLA + betaína.
El uso del CLA en dietas destinadas a la alimentación de cerdos ha generado controversia en
cuanto a la deposición de grasa y proteína. Puede que parte de la variación en los resultados se deba al
propio procedimiento de medida para la determinación de la composición de la canal. Asimismo, la edad
del animal parece ser un condicionante en los efectos del CLA sobre la composición de la canal, siendo
más pronunciado en cerdos que se encuentran en fases finales de su ciclo productivo.
‐ 248 ‐
Diversos autores (Matthews y col., 1998; Øverland y col., 1999; Siljander-Rasi y col., 2003) no
obtuvieron efecto sobre el contenido de grasa o proteína en la canal por la adición de betaína a la dieta
en cerdos de acabado. Sin embargo, Fernández-Fígares y col. (2002) encontraron una tendencia hacia
una disminución lineal en el contenido de grasa en la canal de cerdos en crecimiento alimentados con
dietas adicionadas con niveles crecientes de betaína. Es preciso mencionar que el nivel de alimentación
fue más restringido que el que se estableció para el presente trabajo. A pesar de que los efectos de la
betaína sobre la deposición de grasa y proteína en la canal de cerdos no son claramente concluyentes,
parecen ser más evidentes bajo condiciones de restricción en el plano de alimentación (Fernández-
Fígares y col., 2002).
5.2. EFECTO DEL CLA Y LA BETAÍNA SOBRE LA PRODUCCIÓN DE CALOR DE LAS VÍSCERAS
QUE DRENAN AL SISTEMA PORTA DE CERDOS IBÉRICOS EN CRECIMIENTO (30 KG DE PV)
Con el objetivo de determinar si las diferencias observadas previamente en cerdos Ibéricos en fase
de crecimiento alimentados con dietas adicionadas con CLA y betaína se deben a un efecto sobre el
metabolismo de las PDV, se midió el consumo de O2 y la producción de calor (gasto energético) de las
mismas.
La mayoría de los estudios encontrados en la literatura consultada que determinan la producción
de calor de VDP, ofrecieron la ración completa al animal y seguidamente realizaron las mediciones
durante un periodo relativamente corto de tiempo que incrementó considerablemente el flujo sanguíneo
portal y el flujo de nutrientes en comparación con un consumo constante. En dos estudios previos
(Rodríguez-López y col., 2010; González-Valero y col., 2015) realizados por este grupo de investigación,
se decidió ofrecer al animal una cantidad de alimento proporcional al periodo de medida, el 0,25 de la
ración diaria para las 6 horas de duración del muestreo (0,25 x 24h), simulando así la situación real del
cerdo Ibérico en montanera dónde dedica muchas horas del día al pastoreo para cubrir sus necesidades
nutricionales. Por otro lado y de este modo, la producción de calor de las VDP puede ser extrapolada a 24
horas sin incurrir en la sobreestimación de este parámetro debido al incremento en la producción de calor
‐ 249 ‐
que se produce al ofrecer la ración completa al inicio del periodo de muestreo. De forma similar, Van der
Meulen y col. (1997) llevaron a cabo la medida del flujo de nutrientes a través de las VDP en cerdos en
crecimiento ofreciendo la ración diaria en dos porciones iguales, realizando el muestreo durante las 12
horas siguientes a la primera porción de alimento. Sin embargo, en el diseño experimental del presente
trabajo se decidió ofrecer al animal la ración diaria completa antes de comenzar el periodo de muestreo
de 6 horas de duración con la intención de simular las condiciones del cerdo Ibérico criado siguiendo un
sistema intensivo. Además, en este experimento, y del mismo modo que en los estudios previos
anteriormente mencionados (Rodríguez-López y col., 2010; González-Valero y col., 2015) se restringió la
ingesta alimentaria en función del peso vivo (Nieto y col., 2001).
A pesar de que el valor del hematocrito es muy variable en cerdos (Anderson y col., 1969), los
valores encontrados en el presente experimento fueron mayores en animales alimentados con dietas
suplementadas con CLA + betaína. En los estudios previos realizados (Rodríguez-López y col., 2010,
2013; González-Valero y col., 2015) con cerdos Ibéricos, se obtuvieron valores similares a los obtenidos
en este estudio (30-32%). El valor del hematocrito fue mayor en cerdo Ibérico comparado con razas
mejoradas (Rodríguez-López y col., 2010, 2013; González-Valero y col., 2015). No obstante, otros
autores (Yen y col., 1991; Ten have y col., 1996) encontraron resultados similares a los resultados
obtenidos en el presente estudio pero en razas mejoras.
El FSP preprandial no se vio alterado por la inclusión en la dieta de CLA y/o betaína, sin embargo,
el FSP postprandial fue significativamente mayor en los cerdos del grupo control en comparación con los
cerdos alimentados con el resto de dietas, correspondiendo el valor más bajo a la dieta suplementada con
CLA + betaína. Al comparar los resultados obtenidos en el presente estudio con los obtenidos por otros
autores (Yen y col., 2004) en condiciones similares, los valores de FSP preprandial fueron similares o
inferiores a los encontrados en la literatura para razas (Yen y Killefer, 1987; Hooda y col., 2009), y en el
mismo rango de datos obtenidos para cerdo Ibérico (Rodríguez-López y col., 2010; González-Valero y
col., 2015). En los estudios previos realizados con cerdos Ibéricos, los valores de FSP postprandial fueron
muchos más bajos (Rodríguez-López y col., 2010, 2013; González-Valero y col., 2015) que los obtenidos
en el presente estudio, debido posiblemente a la cantidad de alimento ingerido que, como ya se ha
‐ 250 ‐
mencionado anteriormente, fue considerablemente menor (25% de la ración diaria). Como observaron
diversos autores (Lomax y Baird, 1983; Huntington, 1984; Lapierre y col., 2000), el nivel de ingesta
energética tiene un efecto en el flujo sanguíneo de las VDP. Además del nivel de ingesta, las diferencias
observadas con respecto a la literatura podrían deberse a las condiciones experimentales, es por esto
que es necesario ser cautelosos al comparar los resultados obtenidos con los que aparecen en la
literatura (Simoes Nunes y Malmlof, 1992; Ellis y col., 1995). Por tanto, se hace preciso destacar la gran
importancia de mantener las condiciones experimentales lo más constantes posibles (Ten have y col.,
1996) durante el muestreo, así como que los animales estén habituados al contacto y la manipulación por
parte del operador. En concordancia con otros estudios (Fara, 1984; Yen y Killefer, 1987; Rérat y
Vaissade, 1993; González-Valero y col., 2015), se produjo una hiperemia postprandial y se prolongó
hasta el final del muestreo, aunque pudo verse afectada por la cantidad de alimento ofrecido antes del
muestreo (Granger y col., 1980; Fara, 1984; Jensen y col., 1995).
La mayor proporción de hematocrito y hemoglobina encontrada en la raza Ibérica comparada con
razas mejoradas podría compensar en parte el bajo FSP preprandial presente en esta raza. El cerdo
Ibérico, además de presentar un menor grado de domesticación, está adaptado al pastoreo en campo
abierto, lo que derivó en un perfil atlético apto para el ejercicio físico. Esto favorece la acumulación de
pigmentos hemínicos (pigmentos con el grupo hemo en su estructura) como adaptación fisiológica para
conseguir un mayor metabolismo oxidativo (Galián, 2007), mejorando así la eficiencia en el uso del O2 y
reduciendo, en consecuencia, el flujo sanguíneo portal. A su vez, esto concuerda con la mayor cantidad y
diámetro de las fibras musculares tipo I (oxidativas) detectadas en el músculo Longissimus lumborum de
cerdos Ibéricos, en comparación con cerdos Landrace (Serra y col., 1998). Del mismo modo, Rodríguez-
López y col. (2010) y González-Valero y col. (2015) observaron un menor consumo de O2 por parte de
VDP en cerdos de raza Ibérica que en cerdos Landrace (1,5 vs. 1,9 y 1,35 vs 1,82 mmol/min,
respectivamente). En el presente estudio, la diferencia de concentración de O2 arterio-portal fue menor en
animales alimentados con dietas suplementadas con CLA + betaína. Los resultados estuvieron dentro del
rango de valores encontrados en la literatura (Yen y col., 1989, 2004; Yen y Nienaber, 1992, 1993) y, sin
‐ 251 ‐
embargo, mayor que el valor obtenido por González-Valero y col. (2015) en cerdos Ibéricos alimentados
con el 25% de la ración diaria antes de que comenzara el periodo de muestreo.
Como se esperaba, el consumo de O2 por parte de las VDP aumentó tras la ingestión de la dieta
(Yen y col., 1989, 2004; Yen y Nienaber, 1992; González-Valero y col., 2015) siendo menor este aumento
para el tratamiento CLA + betaína, seguido del tratamiento con betaína, CLA y por último el tratamiento
control. En el presente estudio, el patrón de consumo de O2 de las VDP fue similar a estudios previos
realizados en cerdos de razas modernas (Yen y col., 1989, 2004; Yen y Nienaber, 1992) en la raza
Ibérica (González-Valero y col., 2015).
En general, la producción de calor preprandial de las VDP estuvo por debajo del rango de valores
obtenidos previamente por González-Valero y col. (2015) para cerdo Ibérico y Landrace (2,68 y 2,58 kJ/kg
PV/h, respectivamente). El valor de producción de calor postprandial de las VDP fue mayor con la ingesta
de la dieta control en comparación con las otras tres dietas utilizadas, correspondiendo el valor más bajo
a la dieta suplementada con CLA + betaína.
Fernández-Fígares y col. (2012) encontraron que la adición a la dieta de CLA, y especialmente de
CLA + betaína, inducía cambios en los parámetros bioquímicos y hormonales de cerdos Ibéricos en
crecimiento, pudiendo explicar en parte el efecto de estos modificadores metabólicos sobre la partición de
nutrientes en el organismo. Encontraron un aumento de triacilglicerol en suero, lo que indica que el CLA y
el CLA + betaína podrían reducir la síntesis de triacilglicerol en el tejido adiposo a partir de ácidos grasos.
Asimismo, disminuyó la hormona de crecimiento y la urea en suero de cerdos Ibéricos alimentados con
dietas suplementadas con betaína y CLA + betaína, que sugiere una mayor eficiencia en la utilización del
nitrógeno. Del mismo modo, otros autores encontraron un aumento de triacilglicerol en plasma de cerdos
de raza mejorada alimentados con dietas adicionadas con CLA (Stangl y col., 1999; Ostrowska y col.,
2002) o betaína (Martins y col., 2010). La suplementación de betaína disminuyó los niveles de urea en el
suero de cerdos de acabado (Matthews y col., 1998; Huang y col., 2007). Por el contrario, autores como
Martins y col. (2010) no encontraron efecto alguno de la betaína sobre los niveles de urea en el plasma
de cerdos de acabado pertenecientes a la estirpe Alentejano (cerdo de raza Ibérica criado en Portugal).
‐ 252 ‐
Con respecto al CLA, la suplementación a la dieta durante 8 días no alteró significativamente los niveles
de urea en el plasma de cerdos de acabado de raza moderna (Ostrowska y col., 2002), lo que concuerda
con los resultados obtenidos por Fernández-Fígares y col. (2012).
En cerdo Ibérico, Fernández-Fígares y col. (2008) obtuvieron que la inclusión a la dieta de betaína
o CLA de forma individual no afectó significativamente a la eficiencia en el crecimiento, mientras que la
adición conjunta de estos modificadores metabólicos aumentó la ganancia media diaria, así como la
ganancia y deposición de proteína en relación a la ingesta de EM en comparación con los animales del
grupo control. Además, encontraron una tendencia hacia un aumento de la proteína y una disminución en
el contenido en grasa en la canal. Con respecto a la inclusión de betaína en dietas para cerdos, la
mayoría de los estudios no muestran mejoras en la eficiencia de crecimiento en cerdos alimentados con
una variedad de dietas experimentales, bien sea ofrecidas ad libitum (Matthews y col., 1998; Overland y
col., 1999; Fernández-Fígares y col., 2002) o con algún nivel de restricción. Otros autores como Siljander-
Rasi y col. (2003) encontraron una leve mejoría en cerdos de acabado alimentados restrictivamente con
dietas suplementadas con bajos niveles de betaína. Se ha sugerido también, que el efecto de la betaína
sobre la acumulación de grasa y proteína podría estar mediado más por la distribución de aminoácidos
entre el crecimiento de tejido magro, crecimiento visceral y la descomposición metabólica, que por el
metabolismo lipídico per se (Virtanen y Campbell, 1994). Además, Wray-Cahen y col. (2004)
establecieron tanto in vivo como in vitro que la betaína no tenía efecto alguno sobre la oxidación de los
ácidos grasos de cadena larga en cerdos. Cuando la betaína es incorporada a la dieta para cerdos,
mejora la eficacia de crecimiento reduciendo las necesidades en la energía de mantenimiento,
posiblemente disminuyendo la actividad de la bomba de iones encargadas del mantenimiento de la
osmolaridad intracelular (Schrama y col., 2003).
A excepción de un estudio (Thiel-Cooper y col., 2001), la inclusión del CLA en la dieta no afectó la
ganancia media diaria. No obstante, diferentes autores (Ostrowska y col., 1999; Thiel-Cooper y col., 2001;
Wiegand y col., 2001) encontraron pequeñas mejoras en la relación ganancia/ingesta de alimento. El CLA
redujo la grasa de la canal en cerdos con un grosor elevado de grasa subcutánea (Ostrowska y col.,
1999; O’Quinn y col., 2000; Thiel-Cooper y col., 2001) de 100 kg de PV, siendo el efecto más marcado en
‐ 253 ‐
hembras que en machos castrados (Tischendorf y col., 2002). Cabe destacar que en fases tempranas del
ciclo productivo del cerdo, el CLA no produjo un efecto significativo sobre el contenido en grasa de la
canal (Fernández-Fígares y col., 2008). Del mismo modo, Weber y col. (2001) no encontraron efectos del
CLA sobre la eficacia de crecimiento durante la fase de destete, al igual que Ramsay y col. (2001) en
cerdos en fase de crecimiento, probablemente como consecuencia de la elevada eficiencia de
crecimiento que tiene lugar en cerdos jóvenes comparado con cerdos en fase de acabado. Estos
resultados concuerdan con el bajo consumo de O2 observado en animales alimentados con dietas
suplementadas con CLA + betaína, betaína o CLA comparado con el grupo alimentado con la dieta
control. Este hecho puede tener un impacto sobre las VDP, reduciendo los requerimientos de energía y
nutrientes de estos tejidos viscerales, con el consecuente aumento en la porción de energía y nutrientes
que pueden ser destinados al crecimiento de tejido muscular y otros tejidos distintos de las VDP.
González-Valero y col. (2015) obtuvieron bajos niveles de producción de calor de las VDP y, comparando
entre razas, la producción de calor total fue mayor en cerdos Ibéricos que en cerdos Landrace. Desde un
punto de vista energético, la síntesis de proteína es menos eficiente que la síntesis de lípidos (van Milgen
y Noblet, 2003). La elevada tasa de renovación y degradación de proteína muscular del cerdo Ibérico
comparado con el cerdo Landrace (Riverra-Ferre y col., 2005) implicaría un elevado coste energético
reflejado en la producción de calor total, que podría explicar la eficiencia parcialmente baja de la EM para
la deposición proteica (Nieto y col., 2002). Por tanto, cualquier reducción de la producción de calor de las
VDP podría aumentar la energía disponible para el resto de tejidos corporales con la consecuente mejora
en la eficiencia de utilización de la EM.
5.3. EFECTO DEL CLA Y LA BETAÍNA SOBRE EL FLUJO NETO PORTAL DE METABOLITOS EN EL
CERDO IBÉRICO EN CRECIMIENTO (30 KG DE PV)
Como se ha mencionado en diversas ocasiones a lo largo de este trabajo de Tesis Doctoral, CLA y
betaína tienen la capacidad de alterar el crecimiento y la composición corporal de cerdos, aunque el
modo en qué estos modificadores metabólicos actúan está aún por determinar. Como se observó en
estudios previos (Fernández-Fígares y col., 2008, 2012) la betaína o CLA añadidos individualmente a la
‐ 254 ‐
dieta no produjeron cambios significativo en cerdos Ibéricos en crecimiento; sin embargo, la adición
conjunta de ambos sugiere la existencia de una relación sinérgica que modifica de forma significativa el
crecimiento, la deposición de proteína en la canal (Fernández-Fígares y col., 2008) y los perfiles
hormonales y bioquímicos (Fernández-Fígares y col., 2012). Asimismo, resultados expuestos
anteriormente en el presente trabajo de Tesis Doctoral ponen de manifiesto la existencia de un efecto
sinérgico del CLA y la betaína sobre el rendimiento y el desarrollo de determinados cortes de la canal de
cerdos Ibéricos en fase de crecimiento. Con el objetivo de conocer el modo en que CLA y betaína
modifican el crecimiento y composición corporal de cerdos Ibéricos en crecimiento, se estimó el flujo neto
de diferentes metabolitos.
La concentración arterial y portal de albúmina, creatinina, urea, triglicéridos y colesterol, así como
su aparición neta portal (resultado de multiplicar la diferencia de concentración plasmática de los
metabolitos en porta y arteria por el flujo FSP) fue similar en cada una de las dietas y no se encontraron
diferencias. Del mismo modo, la adición a la dieta de CLA y/o betaína no provocó diferencias en el FNP
de estos metabolitos.
Aunque el flujo neto de albúmina a través de las VDP fue similar entre tratamientos, se observó
una mayor concentración portal de albúmina en animales alimentados con dietas suplementadas con
CLA, sugiriendo un aumento en la síntesis de proteínas exportadas por el hígado.
A pesar de no existir diferencias significativas entre tratamientos, la concentración de creatinina
fue menor en las dietas adicionadas con CLA y CLA + betaína, siendo su flujo neto a través de las VDP
aproximadamente la mitad del observado en la dieta control. Resultados similares obtuvieron Fernández-
Fígares y col. (2012), en los que la adición conjunta de CLA y betaína disminuyeron los niveles de
creatinina en cerdos Ibéricos.
La concentración de triglicéridos, tanto arterial como portal, fue mayor en cerdos alimentados con
dietas suplementadas con CLA, en concordancia con el aumento de los triglicéridos circulantes
encontrado en razas mejoradas por autores como Stangl y col. (1999) y Ostrowska y col. (2002) y en
cerdo Ibérico por Fernández-Figares y col. (2012). Estos resultados sugieren una disminución en la
‐ 255 ‐
absorción de ácidos grasos preformados, reduciendo la acumulación de grasa lo que conduce quizá a
una disminución de la síntesis de lípidos a partir de ácidos grasos preformados. Aunque la betaína, sin
embargo, no causó variaciones significativas en los niveles de triglicéridos en plasma, Martins y col.
(2010) encontraron un aumento significativo en los niveles de triglicéridos de plasma de cerdo Ibérico. El
flujo neto de triglicéridos a través de las VDP no se vio alterado por la inclusión en la dieta de CLA y/o
betaína.
La concentración de colesterol fue mayor en cerdos alimentados con dietas adicionadas con CLA
+ betaína. Otros autores (Stangl y col., 1999; Fernández-Fígares y col., 2012) observaron un aumento en
los niveles de colesterol en suero por la suplementación de CLA en la dieta de cerdos, aunque otros
autores no encontraron efectos significativos (Tischendorf y col., 2002). En relación a los efectos de la
adición de betaína sobre la concentración de colesterol, aunque existe una controversia en los datos
hallados en la literatura, diversos autores (Matthews y col., 1998; 2001b; Urbanczyk y col., 2000; Martins
y col., 2010) observaron un aumento en los niveles de colesterol en plasma en cerdos alimentados con
dietas suplementadas con 0,1-0,2% de betaína. El flujo neto de colesterol a través de las VDP fue
próximo a cero y no se encontraron diferencias significativas por la adición de CLA y/o betaína. El
aumento en los niveles de colesterol tras el consumo de betaína sugiere que este modificador del
metabolismo conduce a una dislipidemia debida más concretamente a una hipercolesterolemia (Martins y
col., 2010). Por la relación existente entre elevados niveles de colesterol en plasma y el riesgo de padecer
una enfermedad coronaria, existe una indudable necesidad de profundizar en el estudio de los efectos de
la betaína sobre el metabolismo lipídico.
La concentración de lactato en plasma, tanto arterial como portal, aumentó con la adición a la dieta
de CLA. El lactato es uno de los productos finales de la fermentación microbiana en el estómago y el
intestino delgado (Argenzio y Southworth, 1974). Sin embargo, el lactato no es sólo un producto final de la
fermentación es además un producto derivado del metabolismo de la glutamina (Rérat y Corring, 1991) y
de la glucosa (Giusi-Perier y col., 1989) que tiene lugar en la pared del intestino. Es además un
importante precursor en el proceso de gluconeogénesis y una importante fuente de energía. El aumento
en la concentración portal de lactato puede derivar por tanto, de la fermentación de carbohidratos por la
‐ 256 ‐
microflora del intestino distal, o de la oxidación intestinal de la glucosa (Vaugelade y col., 1994) y la
glutamina (Windmueller y Spaeth, 1980). Mientras que el aumento de los niveles de lactato en plasma
arterial por la adición de CLA a la dieta puede ser debido a una reducción en el uso por parte de los
tejidos periféricos o a un aumento en la formación en el tejido muscular. Aunque en el presente trabajo no
se determinó el flujo neto portal de glutamina, la concentración de glucosa sí lo fue, encontrándose una
disminución en la concentración portal y arterial en cerdos alimentados con CLA + betaína. Estos
resultados concuerdan con los obtenidos en estudios in vitro por Pérez-Matute y col. (2007) en adipocitos
de rata, en los que el CLA incrementó la proporción de glucosa metabolizada a lactato. Conde-Aguilera y
col. (2012) encontraron una disminución en la gluconeogénesis a partir de lactato, piruvato y alanina en
cultivo primario de hepatocitos de cerdo Ibérico adicionado con CLA. Es posible que una mayor porción
de la glucosa intestinal sea oxidada a lactato o CO2 en cerdos alimentados con CLA + betaína durante el
proceso de absorción, teniendo en cuenta que todas las dietas contienen la misma cantidad de
carbohidratos. En cerdos, tres cuartas partes de la energía requerida por las VDP se obtiene de la
oxidación de glucosa, glutamato y glutamina (Stoll y col., 1999). En el presente estudio no se observaron
diferencias en la concentración arterial de glucosa entre tratamientos, en concordancia con los resultados
obtenidos por otros autores en cerdos en crecimiento (Fernández-Fígares y col., 2012), acabado
(Ostrowska y col., 2002) o cerdas lactantes (Bontempo y col., 2004) alimentadas con dietas adicionadas
con CLA. La inclusión en la dieta de betaína, CLA y CLA + betaína, disminuyó el flujo neto de glucosa a
través de las VDP, lo que podría indicar un aumento en el metabolismo de la glucosa en la pared
gastrointestinal o en el proceso de fermentación de la glucosa en el intestino delgado, que podría implicar
una disminución de la cantidad de glucosa disponible para el hígado y los tejidos periféricos. Fernández-
Fígares y col. (2012) sugieren que un aumento en la captación de glucosa por parte del hígado y el tejido
muscular podría llevar a un aumento del proceso de lipogénesis a partir de la glucosa en exceso,
aumentando así la formación de tejido adiposo.
La concentración de amonio portal fue mayor que la concentración arterial ya que el amonio es
producido por la microflora intestinal o a partir de la glutamina en la pared del intestino (Rérat y
Buraczewska, 1986), y finalmente convertido en urea por el hígado. La inclusión en la dieta de CLA y/o
‐ 257 ‐
betaína no causó efectos significativos en la concentración arterial o portal de amonio. Sin embargo, la
adición a la dieta de betaína y CLA + betaína sí disminuyó significativamente el flujo neto de amonio a
través de las VDP. Estos resultados podrían indicar que el amonio presente en el tracto gastrointestinal
fue, o bien usado para síntesis de novo de la proteína bacteriana en lugar de ser absorbido o, si es que
todo el amonio presente en el lumen del intestino grueso es utilizado para la síntesis de novo de la
proteína bacteriana, metabolizado en la pared intestinal. Mosenthin y col. (1992) sugirieron que el amonio
es la fuente de N de preferencia para las bacterias intestinales en cerdos. El uso relativo por las VDP de
aminoácidos individuales procedentes de la dieta y/o arteriales varían ampliamente, y los aminoácidos de
la dieta son el combustible preferente sobre la glucosa que proviene de la dieta (Stoll y Burrin, 2006).
Según el estado de alimentación (fed-state) hay un desaminación significativa del glutamato en la mucosa
y probablemente otros aminoácidos son catabolizados hasta el primer paso por la mucosa intestinal (Stoll
y col., 1999). Una disminución en el flujo de amonio puede implicar que menos glutamato y otros
aminoácidos son catabolizados por la mucosa intestinal en esta primera fase, de manera que más
aminoácidos están disponibles para los tejidos productivos. Lamentablemente, la determinación del flujo
neto de aminoácidos a través de las VDP no fue objetivo del presente estudio. Por otro lado, el mayor
FNP de amonio observado en los animales del grupo control implicaría un incremento adicional a la carga
de amonio que debe ser degradada por el hígado en su función de desintoxicación.
Aunque no se encontraron diferencias significativas en el flujo neto de urea a través de las VDP,
betaína y/o CLA disminuyeron la concentración, tanto portal como arterial de urea en plasma. Esta
disminución en la concentración de urea en plasma podría disminuir la toxicidad derivada de niveles
elevados en plasma, evitando así el riesgo de sufrir hiperamonemia (Balistreri y Shaw, 1987). Por otro
lado, y en términos de productividad, este proceso de desintoxicación por parte del hígado supone un
gasto energético. Según las observaciones de Eiseman y Nienaber (1990) en novillos, 7,1% del consumo
de O2 del hígado es destinado a la síntesis de urea y 1,4% del animal completo (McBride y Kelly, 1990).
La menor concentración de amonio y de urea con CLA y betaína en la dieta podría suponer una
disminución del proceso de síntesis de urea y, por tanto, un incremento en la energía disponible para
otros tejidos de interés económico. En los cerdos alimentados con la dieta control y la dieta CLA + betaína
‐ 258 ‐
se observó una diferencia porto-arterial levemente negativa en la concentración de urea, lo que pone de
manifiesto la existencia de una transferencia de urea desde la circulación a las VDP, concretamente al
tracto gastrointestinal. La transferencia de N de la urea al tracto gastrointestinal fue menor que el N del
amonio absorbido en los cerdos alimentados con la dieta control y CLA + betaína. Las alteraciones de la
concentración de urea en plasma pueden depender del contenido en fibra (Malmlöf, 1987), el contenido
en almidón fermentable (Mosenthin y col., 1992) o la razón entre la proteína presente en la dieta y el
contenido en energía (Van der Meulen y col., 1997). En el presente estudio todos los cerdos recibieron la
misma cantidad de fibra y almidón, y las dietas fueron formuladas de manera que la razón entre proteína
y energía fue la misma en los distintos tratamientos. Coma y col. (1995) encontraron que la retención de
N y la concentración de N en la urea era reflejo el uno del otro, de manera que la concentración del N en
la urea es menor conforme el N retenido es mayor. En un estudio previo, Fernández-Fígares y col. (2012)
obtuvieron en cerdos alimentado con las dietas que contenían betaína y CLA + betaína presentaron
menor concentración de urea en suero. Además, en los cerdos alimentados con dietas adicionadas con
CLA + betaína se observó un incremento en la proteína de la canal, la deposición magra y la deposición
de proteína en relación con la ingesta de EM (Fernández-Figares y col., 2008) que podría indicar una
utilización más eficiente N.
5.4. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
Anderson, D.M., McDonald, I. y Elsley, F.W.H. 1969. The estimation of plasma and red cell volumes in
pigs. Journal of Agriculture Science 73, 501-505.
Aparicio Macarro, J.B. 1992. La montanera y el cerdo Ibérico. En: El cerdo Ibérico, la naturaleza y la
dehesa. Simposio de cerdo Ibérico, pág. 169-188. Madrid: Ministerio de Agricultura, Pesca y
Alimentación.
Argenzio, R. A. y Southworth, M. 1974. Sites of organic acid production and absorption in the
gastrointestinal tract of the pig. Journal of Physiology 228, 454-460.
‐ 259 ‐
Balistreri, W. G., y. Shaw, L. M. 1987. Liver function. In: N. W.Tietz (Ed.) Fundamentals of Clinical
Chemistry (3rd Ed.). p729. W. B. Saunders, Philadelphia, PA.
Bee, G. 2001. Dietary conjugated linoleic acids affect tissue lipid composition but not de novo lipogenesis
in finishing pigs. Animal Research 50, 383−399.
Berg, R.T. y Butterfield, R.M. 1979. Nuevos conceptos sobre desarrollo de ganado vacuno. Ed. Acribia.
Zaragoza, España, 220.
Berge, G.M., Ruyter, B. y Åsgard, T. 2004. Conjugated linoleic acid in diets for juvenile Atlantic salmon
(Salmon salar); effects on fish performance, proximate composition, fatty acid and mineral content.
Aquaculture 237, 365-380.
Bonneau, M., Mourot, J., Noblet, J., Lefaucher, L. y Bidanel, J.P. 1990. Tissue development in Meishan
pigs: muscle and fat development and metabolism and growth regulation by somatotropic hormone.
En: Symposium sur le Porc Chinois, pág. 203-213 (M. Molenat y C. Legault, ed.). Jouy-en-Josas,
Francia: INRA.
Bontempo, V., Sciannimanico, D., Pastorelli, G., Rossi, R., Rosi, F. y Corino, C. 2004. Dietary conjugated
linoleic acid positively affects immunologic variables in lactating sow and piglets. Journal of
Nutrition 134, 817-824.
Cadogan, D. J., Campbell, R. G., Harrison, D., y Edwards, A. C. 1993. The effects of betaine on the
growth performance and carcass characteristics of female pigs. In E. S. Batterham (Ed.),
Manipulating Pig Production IV (pp. 219). Attwood, Victoria, Australia: Autralasian Pigs Science
Association.
Carr, T.R., Walters, L.E. y Whiteman, J.V. 1978. Carcass composition changes in growing and finishing
swine. Journal of Animal Science 47, 615-621.
Cole, D.J.A., White, M.R., Hardy, B. y Carr, J.R. 1976. Tissue growth in the pig. Animal Production 22,
341-350.
‐ 260 ‐
Coma, J., Carrion, D. y Zimmerman, D.R. 1995. Use of plasma urea nitrogen as a rapid response criterion
to determine the lysine requirement of pigs. Journal of Animal Science 73, 82.
Corino, C., Magni, S., Pastorelli, G., Rossi, R., y Mourot, J. 2003. Effect of conjugated linoleic acid on
meat quality, lipid metabolism, and sensory characteristics of drycured hams from heavy pigs.
Journal of Animal Science 81, 2219−2229.
Davis, A.S 1974. A comparison of tissue development in Pietrain and Large White pigs from birth fo 64 kg
live weigth. Growth changes in carcass composition. Animal Production 19, 367-376.
De Pedro, E. 1987. Estudio de los factores sexo y peso de sacrificio sobre características de la canal de
cerdo ibérico. Tesis doctoral. Universidad Córdoba.
Desmoulin, B., Girard, J.P., Bonneau, M. y Frouin, A. 1983. Aptitudes a l’emploi des viands porcines
suivant le type sexual, le systéme d’alimentation et le poids d’abattage. Journées Research Porcine
15, 177-192.
Dobao, M.T, Poza, M.L., Rodrigañez, J. y Silio, L. 1985. Diferencias en la composición de la canal de tres
estirpes de cerdo Ibérico. Anales del INIA. Serie Ganadera 22, 99-112.
Doornenbal, H. 1971. Growth, development and chemical composition of the pig. I. Lean tissue and
protein. Growth 35, 281-295.
Dugan, M. E. R., Aalhus, J. L., Schaefer, A. L., y Kramer, J. K. G. 1997. The effect of conjugated linoleic
acid on fat to lean repartitioning and feed conversion in pigs. Canadian Journal of Animal Science 77,
723−725.
Eggert, J. M., Belury, M. A., Kempa-Steczko, A., Mills, S. E., y Schinckel, A. P. 2001. Effects of conjugated
linoleic acid on the belly firmness and fatty acid composition of genetically lean pigs. Journal of
Animal Science 79, 2866−2872.
‐ 261 ‐
Eisemann, J. H., y Nienaber, J. A. 1990. Tissue and whole-body oxygen uptake in fed and fasted steers.
British Journal of Nutrition 64, 399.
Eklund, M., Bauer, E., Wamatu, J. y Mosenthin, R. 2005. Potential nutritional and physiological functions
of betaine in livestock. Nutrition Research Reviews 18, 31–48.
Ellis, P. R., Roberts, F. G., Low, A. G. y Morgan, L. M. 1995. The effect of highmolecular-weight guar gum
on net apparent glucose absorption and net apparent insulin and gastric inhibitory polypeptide
production in the growing pig: relationship to rheological changes in jejunal digesta. British Journal of
Nutrition 74, 539-556.
Esteve-Garcia, E. y Mack, S. 2000. The effect of DL-methionine and betaine on growth performance and
carcass characteristics in broilers. Animal Feed Science and Technology 87, 85–93.
Evans, D.G. y Kempster, A.J. 1979. The effects of genotype, sex and feeding regimen on pig carcass
development. 1. Primary components, tissues and joints. Journal of Agriculture Science, Cambridge
93, 339-347.
Fara, J.W., 1984. Postprandial mesenteric hyperemia, in: Shepherd, A.P., Granger, D.N. (Eds.),
Physiology of the Intestinal Circulation. Raven Press, New York, 99-106.
Feng, J. y Yu, D.Y. 2001. Effect of betaine on growth performance and methyl transfer function in finisher
pigs. Chinese Journal of Animal Science 37, 8–10.
Fernández-Fígares, I., Lachica, M., Martín, A., Nieto, R., González-Valero, L., Rodríguez-López, J.M. y
Aguilera, J.F., 2012. Impact of dietary betaine and conjugated linoleic acid on insulin sensitivity,
protein and fat metabolism of obese pigs. Animal 6, 1058-1067.
Fernández-Fígares, I., J.A. Conde-Aguilera, R. Nieto, M. Lachica y J.F.Aguilera. 2008. Synergistic effects
of betaine and conjugated linoleic acid on the growth and carcass compositon of growging Iberian
pigs. Journal of Animal Science 86, 102-111.
‐ 262 ‐
Fernández-Fígares I, Wray-Cahen D, Steele NC, Campbell RG, Hall DD, Virtanen E, y Caperna, T.J.
2002. Effect of dietary betaine on nutrient utilization and partitioning in the young growing feed-
restricted pig. Journal of Animal Science 80, 421-428.
Fortin A., 1982. Carcass composition of Yorkshire barrows and gilts slaughtered between 85 and 112kg.
body weight. Cannadian Journal of Animal Science 62, 69-76.
Fortin A., Wood J.D. y Whelehan O.P., 1987. Breed and sex effects on the development and proportions
of muscle, fat and bone in pigs. Journal of Animal Science, Cambridge 108, 39-45.
Franci, O. y Pugliese, C. 2007. Italian autochthonous pigs: progress report and research
perspectives. Italian Journal of Animal Science 6, 663-671.
Galián Jiménez, M. 2007. Características de la canal y calidad de la carne, composición mineral y lipídica
del cerdo Chato Murciano y su cruce con Ibérico. Efecto del sistema de manejo. Tesis Doctoral.
Universidad de Murcia, España.
Garcia, M.N., Pesti, G.M. y Bakalli, R.I. 2000. Influence of dietary protein level on the broiler chicken’s
response to methionine and betaine supplements. Poultry Science 79, 1478–1484.
González-Valero, L., Rodríguez-López, J.M., Lachica, M. y Fernández-Fígares, I., 2015. Contribution of
portal-drained viscera to heat production in Iberian gilts fed a low protein diet: comparison to
Landrace. Journal of Science and Food Agriculture (in press).
Granger, H. J., Richardson, P. D. I., Kvietys, P. R. y Mortillaro, N. A. 1980. Intestinal blood flow.
Gastroenterology 78, 837-863.
Giusi-Perier, A., Fiszlewicz, M. y Rérat, A. 1989. Influence of diet composition on intestinal volatile fatty
acid and nutrient absorption in unapesthetized pigs. Journal of Animal Science 67, 386-402.
Gu, Y., Schinckel, A.P. y Martin, T.G. 1992. Growth, development and carcass composition in five
genotypes of swine. Journal of Animal Science 70, 1719-1729.
‐ 263 ‐
Hafez, E.S.E. 1972. En Desarrollo y Nutrición Animal. (Ed. Acribia) Zaragoza. España
Hammond, J. 1932. Pigs for pork and pigs for bacon. p. 15. Royal Agricultural Society, Inglaterra.
Haydon, K.D., R.G. Campbell, y T.J. Prince. 1995. Effects of dietary betaína additions and amino:calorie
ratio on performance and carcass traits of finishing pigs. Journal of Animal Science 73, 83.
Heyer, A. y Lebret, B. 2007. Compesatory growth in pigs: Effects on growth performance,
composition of weight gain at carcass and muscle levels, and meat quality. Journal of Animal
Science 85, 769-778.
Hooda, S., Matte, J.J., Wilkinson, C.W. y Zijlstra, R.T., 2009. Technical note: an improved surgical model
for the long-term studies of kinetics and quantification of nutrient absorption in swine. Journal of
Animal Science 87, 2013-2019.
Huang, Q.C., Xu, Z.R., Han, X.Y. y Li, W.F., 2007. Effect of betaine on growth hormone pulsatile secretion
and serum metabolites in finishing pigs. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition 91, 85-90.
Huntington, G. 1984. Relationship of portal blood flow to metabolizable energy intake of cattle. Canadian
Journal of Animal Science 64, 16-17.
Huntington, G.B., Eisemann, J.H. y Whitt, J.M., 1990. Portal blood flow in beef steers: comparison of
techniques and relation to hepatic blood flow, cardiac output and oxygen uptake. Journal of Animal
Science 68, 1666-1673.
Huxley, J.S. 1932. Problems of relative growth. Methnen, Londres.1st ed, 4-37.
Jensen, M.D., Johnson, C.M., Cryer, P.E. y Murray, M.J., 1995. Thermogenesis after a mixed meal: role of
leg and splanchnic tissues in men and women. The American Journal of Physiology Endocrinology
and Metabolism 268, 433-438.
‐ 264 ‐
Joo, S. T., Lee, J. I., Ha, Y. L., y Park, G. B. 2002. Effects of dietary conjugated linoleic acid on fatty acid
composition, lipid oxidation, color, and water-holding capacity of pork loin. Journal of Animal Science
80, 108−112.
Kempster, T., A. Cuthbertson y G. Harrington. 1982. Carcase evaluation. In Livestock Breeding,
Production and Marketing. Mackays of Chatham, Kent. Gran Bretaña.
Kouba, M. Bonneau, M. y Noblet, J. 1999. Relative development of subcutaneous, intermuscular,
and kidney fat in growing pigs with different body compositions. Journal of Animal Science
77, 622-629.
Kyriazakis, I., Dotas, D. y Emmans, G.C. 1994. The effects of breed on the relationship between feed
composition and the efficiency of protein utilization in pigs. British Journal of Nutrition 71, 849-859.
Landgraf, S., Susenbeth, A., Knap, P.W., Looft, H., Plastow, G.S., Kalm, E y Roehe, R. 2006.
Development of carcass cuts, organs, body tissues and chemical body composition during growth of
pigs. Animal Science 82, 889-899.
Lapierre, H., Bernier, J. F., Dubreuil, P., Reynolds, C. K., Farmer, C., Ouellet, D. R. y Lobley, G. E. 2000.
The effect of feed intake level on splanchnic metabolism in growing beef steers. Journal of Animal
Science 78, 1084-1099.
Lauridsen, C., Mu, H., y Henckel, P. 2005. Influence of dietary conjugated linoleic acid (CLA) and age at
slaughtering on performance, slaughter and meat quality, lipoproteins, and tissue deposition of CLA
in barrows. Meat Science 69, 393−399.
Lawrence, B.V., A.P. Schinckel, O. Adeola, y K. Cera. 1995. Performance of pigs fed betaína from 60 to
110 Kg body weight. Journal of Animal Science 73, 195 (Abstr.).
Lomax, M. A. y Baird, G. D. 1983. Blood flow and nutrient exchange across the liver and gut of the dairy
cow. Effects of lactation and fasting. British Journal of Nutrition 49, 481-496.
‐ 265 ‐
López Bote, C.J. Rey A.I. Ortiz L. y Menoyo D. 2004 Cambios en el perfil de ácidos grasos en productos
animales en relación con la alimentación animal y humana. Importancia del ácido linoleico
conjugado. Monogástricos. XX CURSO DE ESPECIALIZACIÓN FEDNA.
Malmlöf, K. 1987. Porto-arterial plasma concentration difference of urea and ammonia-nitrogen in growing
pigs given high-fibre and low-fibre diets. British Journal of Nutrition 57, 439−446.
Martin, A.H., Sather, A.P., Fredeen, H.T. y Jolly, R.W. 1980. Alternative market weights for swine. II.
Carcass composition and meat quality. Journal of Animal Science 50, 699-705.
Martins, J.M., Neves, J.A., Freitas, A. y Tirapicos, J.L. 2010. Betaine supplementation affects the
cholesterol but not the lipid profile of pigs. European Journal of Lipid Science and Technology 112,
295-303.
Matthews, J.O., Southern, L.L. y Bidner, T.D. 2001a. Estimation of the total sulfur amino acid requirement
and the effect of betaine in diets deficient in total sulfur amino acids for the weanling pig. Journal of
Animal Science 79, 1557–1565.
Matthews, J.O., Southern, L.L., Higbie, A.D., Persica, M.A. y Bidner, T.D. 2001b. Effects of betaína on
growth, carcass characteristics, pork quality, and plasma metabolites in finishing pigs. Journal of
Animal Science 79, 722-728.
Matthews, J. O., Southern, L. L., Pontif, J. E., Higbie, A. D., y Bidner, T. D. 1998. Interactive effects of
betaine, crude protein, and net energy in finishing pigs. Journal of Animal Science, 76, 2444−2455.
Mayoral, A.I., Dorado, M., Guillén, M.T., Robina, A., Vivo, J.M., Vazquez, C. y Ruiz, J. 1999. Development
of meat and carcass quality characteristics in Iberian pigs reared outdoors. Meat Science 52, 315-
324.
McBride, B. W., y Kelly, J. M. 1990. Energy cost of absorption and metabolism in the ruminant
gastrointestinal tract and liver: A review. Journal of Animal Science 68, 2997.
‐ 266 ‐
Moeckel, G.W., Shadman, R., Fogel, J.M. y Sadrzadeh, S.M.H. 2002. Organic osmolytes betaína, sorbitol
and inositol are potent inhibitors of erythrocyte membrane ATPases. Life Sciences 71, 2413-2424.
Mosenthin, R., W. C. Sauer, y C.F.M. de Lange. 1992. Tracer studies of urea kinetics in growing pigs: 1.
The effect of intravenous infusion of urea on urea recycling and the site of urea secretion into the
gastrointestinal tract. Journal of Animal Science 70, 3458−3466.
Nieto, R., Lara, L., Barea, R., García-Valverde, R., Aguinaga, M. A., Conde-Aguilera, J. A. y Aguilera, J. F.
2014. Growth of body components and carcass composition of Iberian pigs of 10 to 150 kg body
weight as affected by the level of feeding and dietary protein concentration. Journal of Animal
Science 91, 4197- 4207.
Nieto, R., Lara, L., Barea, R., García-Valverde, R., Aguinaga, M. A., Conde-Aguilera, J. A. y Aguilera, J. F.
2012. Response analysis of the Iberian pig growing from birth to 150 kg body weight to changes in
protein and energy supply. Journal of Animal Science 90, 3809-3820.
Nieto, R., Miranda, A., García, M.A. y Aguilera, J.F. 2002. The effect of dietary protein content
and feeding level on the rate of protein deposition and energy utilization in growing Iberian
pigs from 15 to 50 kg body weight. British Journal of Nutrition 88, 39-49.
Nieto, R., Lara, L., García, M.A., Gómez, F., Zalvide, M., Cruz, M., Pariente, J.M., Moreno, A. y Aguilera,
J.F., 2001. Evaluation of an integrated feeding system in the Iberian pig. Study of food consumption
and productive parameters. Sólo Cerdo Ibérico 6, 57-69.
O'Quinn, P.R., Nelsen, J.L., Goodband, R.D., Knabe, D.A., Woodworth, J.C. y Tokach, M.D. 2000.
Nutritional value of a genetically improved high-lysine, high-oil corn for young pigs. Journal of Animal
Science 78, 2144−2149.
Ostrowska, E., Muralitharan, M., Cross, R.F., Bauman, D.E. y Dunshea, F.R. 1999. Dietary conjugated
linoleic acids increase lean tissue and decrease fat deposition in growing pigs. Journal of Nutrition
129, 2037-2042.
‐ 267 ‐
Øverland, M., Rørvik, K.-A. y Skrede, A.. 1999. Effect of trimethylamine oxide and betaine in swine diets
on growth performance, carcass characteristics, nutrient digestibility, and sensory quality of pork.
Journal of Animal Science 77, 2143–2153.
Owen, K., Nelssen, J., Goodband, R., Weeden, T. y Blum, S. 1996. Effect of L-carnitine and soyabean oil
on growth performance and body composition of early weaned pigs. Journal of Animal Science 74,
1612–1619.
Park, Y., Storkson, J.M., Albright, K.J., Liu, W. y Pariza, M.W. 1999. Evidence that de trans-10,cis-12
isomer of conjugated linoleic acid induces body composition changes in mice. Lipids 34, 235-241.
Pérez-Matute, P., Pérez-Echarri, N., Martínez, J.A., Marti, A. y Moreno-Aliaga, M.J. 2007.
Eicosapentaenoic acid actions on adiposity and insulin resistance in control and high-fat-fed rats: role
of apoptosis, adiponectin and tumour necrosis factor-alpha. British Journal of Nutrition 97, 389–398.
Quinnou, N. y Noblet, J. 1995. Prediction of tisular body composition from protein and lipid deposition in
growing pigs. Journal of Animal Science 73, 1576-1585.
Ramsay, T.G., Evock-Clover, C.M., Steele, N.C. y Azain, M.J. 2001. Dietary conjugated linoleic acid alters
fatty acid composition of pig skeletal muscle and fat. Journal of Animal Science 798, 2152-2161.
Rérat, A., y L. Buraczewska. 1986. Postprandial quantitative kinetics of urea and ammonia nitrogen
exchanges between the digestive tract and the portal blood in conscious pigs receiving a diet with
and without ammonia. Archives of Animal Nutrition 36, 252−269
Rérat, A. y Corring, T. 1991. Animal factors affecting protein digestion and absorption. In Digestive
Physiology in Pigs, 5-34
Rérat, A. y Vaissade, P. 1993. Relations entre la prise alimentaire et la consommation d'oxygène des
organes drainés par la veine porte chez le porc éveillé. Reproduction Nutrition Development 33, 235-
251.
‐ 268 ‐
Rivera-Ferre, M. G., Aguilera, J. F. y Nieto, R. 2005. Muscle fractional protein synthesis is higher
in Iberian than in Landrace growing pigs fed adequate or lysine-deficient diets. Journal of
Nutrition 135, 469-478.
Rodríguez-López, J.M., Lachica, M., González-Valero, L. y Fernández-Fígares, I., 2013. Approaches for
quantifying gastrointestinal nutrient absorption and metabolism in a native and a modern pig breed.
Journal of Animal Science 151, 434-443.
Rodríguez-López, J.M., Lachica, M., González-Valero, L. y Fernández-Fígares, I., 2010. Energy
expenditure of splanchnic tissues in Iberian and Landrace growing gilts. Livestock Science 133, 61-
63.
Schrama, J.W., Heetkamp, M.J., Simmins, P.H. y Gerrits, W.J. 2003. Dietary betaine supplementation
affects energy metabolism of pigs. Journal of Animal Science 81, 1202-1209.
Serra, X., Gil, F., Pérez-Enciso, M., Oliver, M. A., Vázquez, J. M., Gispert, M., Díaz, I., Moreno, F., Latorre,
R. y Noguera, J. L. 1998. A comparison of carcass, meat quality and histochemical characteristics of
Iberian (Guadyerbas line) and Landrace pigs. Livestock Production Science 56, 215-223.
Shields, R.G., Mahan, D.C. Jr. y Graham, P.L.1983. Changes in swine body composition from birth to 145
kg. Journal of Animal Science 57, 43-54
Siljander-Rasi, H., Peuranen, S., Tiihonen, K., Virtanen, E., Kettunen, H., Alaviuhkola, T. y Simmins, P.H.
2003. Effect of equi-molar dietary betaine and choline addition on performance, carcass quality and
physiological parameters of pigs. Animal Science 76, 55–62.
Simoes Nunes, C., y K. Malmlof. 1992. Effects of guar gum and cellulose on glucose absorption, hormonal
release and hepatic metabolism in the pig. British Journal of Nutrition 68, 693-700.
Smith, G.C. y Carpenter, Z.L. 1973. Evaluation of factors associated with the composition of pork
carcasses. Journal of Animal Science 36, 493-499.
‐ 269 ‐
Smith, II, J.W., Nelssen, J.L., Goodband, R.D., Tokach, M.D., Richert, B.T., Owen, K.Q., Bergstrom, J.R. y
S.A. Blum. 1995. The effects of supplementing growing-finishing swine diets with betaína and (or)
choline on growth and carcass characteristics. Journal of Animal Science 73, 83 (Abstr.).
Smith, J.W., II, K.Q. Owen, J.L. Nelssen, R.D. Goodband, M.D. Tokach, K.G. Friesen, T.L. Lohrmann, and
S.A. Blum. 1994. The effects of dietary carnitina, betaína and chromium nicotionate supplementation
on growth and carcass characteristics in growing-finishing pigs. Journal of Animal Science 72, 274
(Abstr.).
Stangl, G.I., Muller, H. y Kirchgessner, M. 1999. Conjugated linoleum acid effects on circulating hormones,
metabolites and lipoproteins, and its proportion in fasting serum and erythrocyte membranes of
swine. European Journal of Nutrition 38, 271-277.
Stoll, B., y Burrin, D.G. 2006. Measuring splanchnic amino acid metabolism in vivo using 180 stable
isotopic tracers. Journal of Animal Science 84, 60-72.
Stoll, B., D. G. Burrin, J. Henry, H. Yu, F. Jahoor, y P. J. Reeds. 1999. Substrate oxidation 182 by the
portal drained viscera of fed piglets. American Journal of Physiology 277, 168-175.
Stryer, L. 1988. Biosynthesis of amino acids and heme. In Biochemistry, 3rd ed., pp. 575–626. New York:
WH Freeman and Company.
Suksombat, W., Lounglawan, P., y Yowa, C. 2008. Effects of conjugated linoleic acid supplementation on
performances, carcass quality and fatty acid composition in meat of finishing pigs. Suranaree Journal
of Science and Technology 15, 249−260.
Ten have, G.A.M., Bost, M.C.F., Suyk-Wierts, J.C.A.W., van den Bogaard, A.E.J.M. y Deutz, N.E.P., 1996.
Simultaneous measurement of metabolic flux in portally-drained viscera, liver, spleen, kidney and
hindquarter in the conscious pig. Laboratoy Animal 30, 347-358.
Tess, M.W., Dickerson, G.E., Nienaber, J.A. y Ferrell, C.L. 1986. Growth, development and body
composition in three genetic stocks of swine. Journal of Animal Science 62, 969-979.
‐ 270 ‐
Thiel-Cooper, R. L., Parrish, J. R. F. C., Sparks, J. C., Wiegand, B. R., y Ewan, R. C. 2001. Conjugated
linoleic acid changes swine performance and carcass composition. Journal of Animal Science 79,
1821−1828.
Tischendorf, F., Schöne, F., Kirchheim, U., y Jahreis, G. 2002. Influence of a conjugated linoleic acid
mixture on growth, organ weights, carcass traits and meat quality in growing pigs. Journal of Animal
Physiology and Animal Nutrition 86, 117−128.
Urbanczyk, J, Hanczakowska, E. y Swiatkiewycz, M. 2000. The efficiency of betaine and organic
chromium compounds according to fattening pig genotype. Biuletyn Naukowy Przemyslu Paszowego
39, 53–64.
van der Meulen, J., Bakker, G.C.M., Bakker, 430 J.G.M., de Visser, H., Jongbloed, A.W. y Everts, H.,
1997. Effect of resistant starch on net portal-drained viscera flux of glucose, volatile fatty acids, urea,
and ammonia in growing pigs. Journal of Animal Science 75, 2697-2704.
van Lunen, T.A. y Simmins, P.H. 2000. Dietary enzyme and betaine supplementation for young pigs.
Canadian Journal of Animal Science 80, 755–756.
Varney, W.Y., Kemp, J.D., Phillips, C.D. y Barnhart, C.E. 1962. Relative Cut-Out Percentages and Values
of Light and Heavy Weight Hogs. Journal of Animal Science 21, 593-596.
Vaugelade, P., L. Posho, B. Darcy-Vrillon, F. Bernard, M. T. Morel, and P. H. Duée. 1994. Intestinal
oxygen uptake and glucose metabolism during nutrient absorption in the pig. Proceedings of the
Society for Experimental Biology and Medicine 207, 309-316.
Vílchez-Campillos, M. A. 2004. Efectos observados en el rendimiento productivo y composición tisular del
cerdo Ibérico en crecimiento subsiguientes a cambios en la ingestión diaria de energía y proteína
[Growth performance and tissue composition of growing Iberian pigs fed graded levels of protein and
energy]. Trabajo profesional fin de carrera. Spain: University of Córdoba.
‐ 271 ‐
Virtanen, E. y Campbell, R.G. 1994. Reduction of backfat thickness through betaine supplementation of
diets for fattening pigs, in: Handb. Tierische Veredlung 19. Verlag H. Kamlage, Osnabruek,
Germany, 145-150.
Wallis, I.R. 1999. Dietary supplements of methionine increase breast meat yield and decrease abdominal
fat in growing broiler chickens. Australian Journal of Experimental Agriculture 39, 131–141.
Wang, Y.Z. y Xu, Z.R. 1999. Effect of feeding betaína on weigth gain and carcass trait of barrows and gilts
and approach to mechanism. Journal of Zhejiang Agricultural University 25, 281-285.
Webel, D.M., McKeith, F.K. y Easter, R.A. 1995. The effects of betaine supplementation on growth
performance and carcass characteristics in finishing pigs. Journal of Animal Science 73, 82.
Weber, T.E., Schinckel, A.P., Houseknecht, K.L. y Richert, B.T. 2001. Evaluation of conjugated linoleic
acid and dietary antibiotics as growth promotants in weanling pigs. Journal of Animal Science 79,
2542-2549.
Wiegand, B. R., Parrish, F. C., Jr., Swan, J. E., Larsen, S. T., y Baas, T. J. 2001. Conjugated linoleic acid
improves feed efficiency, decreases subcutaneous fat, and improves certain aspects of meat quality
in stress-genotype pigs. Journal of Animal Science 798, 2187−2195.
Windmueller, H.G. y Spaeth, A.E. 1980. Respiratory fuels and nitrogen metabolism in vivo in small
intestine of fed rats. Quantitative importance of glutamine, glutamate, and aspartate. Journal of
Biology and Chemistry 10, 107-12.
Wray-Cahen, D., Fernández-Fígares, I., Virtanen, E., Steele, N.C. y Caperna, T.J., 2004. Betaine
improves growth, but does not induce whole body or hepatic palmitate oxidation in swine (Sus scrofa
domestica). Comparative Biochemistry and Physiology - Part A: Molecular & Integrative Physiology
137, 131-140.
Yen, J.T. y Killefer, J., 1987. A method for chronically quantifying net absorption of nutrients and gut
metabolites into hepatic portal vein in conscious swine. Journal of Animal Science 64, 923-934.
‐ 272 ‐
Yen, J. T., Nienaber, J. A., Hill, D. A. y Pond, W. G. 1989. Oxygen consumption by portal vein-drained
organs and by whole animal in conscious growing swine. Proceedings of the Society for
Experimental Biology and Medicine 190, 393-398.
Yen, J.T., Varel, V.H. y Nienaber, J.A., 2004. Metabolic and microbial responses in western crossbred and
Meishan growing pigs fed a high-fiber diet. Journal of Animal Science 82, 1740-1755.
Yen, J. T. y Nienaber, J. A. 1993. Effects of high-copper feeding on portal ammonia absorption and on
oxygen consumption by portal vein-drained organs and by the whole animal in growing pigs. Journal
of Animal Science 71, 2157-2163.
Yen, J. T. y Nienaber, J. A. 1992. Influence of carbadox on fasting oxygen consumption by portal vein-
drained organs and by the whole animal in growing pigs. Journal of Animal Science 70, 478-483.
Yen, J.T., Nienaber, J.A., Hill, D.A. y Pond, W.G., 1991. Potential contribution of absorbed volatile fatty
acids to whole-animal energy requirement in conscious swine. Journal of Animal Science 69, 2001-
2012.
Yu, D.Y., Feng, J. y Xu, Z.R. 2001. Effects of betaine on fat and protein metabolism in different stages of
swine. Chines
‐ 273 ‐
CAPITULO6
CONCLUSIONES –CONCLUSIONS
‐ 275 ‐
6.1. CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos en esta Tesis Doctoral permiten establecer las siguientes conclusiones:
1.- La adición conjunta de CLA y betaína a la dieta de cerdos Ibéricos de 20 a 50 kg de PV retrasó el
desarrollo de solomillo y jamón perfilado, mejorando así el rendimiento de ambos cortes. Asimismo
retardó el desarrollo del tejido magro y tejido magro libre de grasa en la paleta perfilada, lo que
aumentó su rendimiento. Aceleró además, el desarrollo de cortes grasos como la grasa de riñonada,
disminuyendo su rendimiento con respecto a los animales del grupo control.
2.- La inclusión de betaína en la dieta retrasó el desarrollo e incrementó el rendimiento del espinazo,
dando lugar a un aumento en la longitud de la canal. Su adición a la dieta aumentó además el
rendimiento de la cabezada de magro. Por otro lado, aceleró el desarrollo de los componentes más
grasos de la canal, siendo significativo para la panceta, y disminuyó su rendimiento.
3.- En general, el CLA por sí solo no tuvo efecto sobre los parámetros corporales evaluados mientras que
la adición de CLA y betaína conjuntamente, sí modificó el rendimiento y desarrollo de ciertos cortes y
tejidos de la canal, lo que pone de manifiesto un efecto sinérgico entre ambos modificadores que
puede ser de interés para mejorar la conformación del cerdo previo a su entrada en montanera.
‐ 276 ‐
4.- La dieta suplementada con CLA y/o betaína con respecto a una dieta control, redujo el flujo sanguíneo
portal, el consumo de O2 y, por tanto, la producción de calor de las vísceras que drenan al sistema
porta de cerdos Ibéricos en fase de crecimiento. Este efecto fue más pronunciado cuando CLA y
betaína eran suministrados conjuntamente, pudiendo aumentar la energía disponible para el resto de
tejidos corporales con el consiguiente incremento en la eficiencia de utilización de la energía
metabolizable.
.5.- El uso de CLA y betaína en la dieta afectó el flujo neto portal de glucosa y de amonio, lo cual podría
explicar, al menos parcialmente, las diferencias obtenidas en crecimiento en el cerdo Ibérico con
respecto a razas mejoradas.
CONCLUSIÓN GENERAL
Los estudios que forman la presente Tesis Doctoral aportan información única acerca del efecto
que tiene la suplementación de la dieta con CLA y betaína tanto en el desarrollo corporal, como en el
metabolismo a nivel de las vísceras que drenan al sistema porta en la raza porcina Ibérica. Los resultados
obtenidos añaden información que permitirá explicar el efecto del CLA y la betaína sobre el crecimiento y
desarrollo, no sólo en el cerdo Ibérico sino también en otras razas o especies animales de interés
ganadero. Estos resultados podrían ser además, extrapolados al ser humano, dada las similitudes
fisiológicas y metabólicas entre ambas especies.
‐ 277 ‐
6.2. CONCLUSIONS
1. Addition of CLA + betaine to the diet of Iberian pigs growing from 20 to 50 kg of BW caused a
late maturing of tenderloin and trimmed ham, improving the yield of both cuts. Likewise, it also
retarded the development of lean and lean fat-free in trimmed shoulder, causing a higher rate
of development. Moreover, leaf fat presented a earliest maturing, decreasing the yield
compared with control group.
2. Inclusion of betaine to the diet caused a late maturing and a higher yield in spine, suggesting
that betaine may increase carcass length. As well, betaine increased yield shoulder butt.
Moreover, it accelerated the development of pieces of a higher content in fat, being
significantly in belly, decreasing the yield.
3. Generally, CLA alone did not affect of the body parameters evaluated, however, the addition
of CLA + betaine to the diet, altered the yield and development of certain cuts and tissues in
whole carcass, which reveal a sinergestic effect between both metabolic modifiers, that may
be interest to improve the pig conformation before starting “montanera” period.
‐ 278 ‐
4. Supplementation of the diet with betaine and/or CLA with respect to control diet reduced PBF,
O2 consumption and, therefore, PDV heat production. This effect was more pronounced when
betaine and CLA were supplemented together possibly increasing the energy availability for
the rest of body tissues, whit a consequently improvement efficiency of metabolizable energy
utilization.
5. In conclusion, the use of betaine and CLA in the diet of Iberian pigs affects net PDV
flux of glucose and NH3 which may partially explain differences in growth obtained
previously in Iberian pigs compared to improve breeds.
GENERAL CONCLUSION
In the present Thesis, supplementation of CLA and betaine has an effect on body development and
PDV metabolism in Iberian porcine breed. These results allow explain the effect of CLA and betaine in
growth and development in Iberian pigs but also in another breed and animal species livestock interest.
Moreover, these resut could also be extrapolated to humans, because of physiologic and metabolic
similarities between the two species.
‐ 279 ‐
CAPITULO7
RESUMEN –SUMMARY
‐ 281 ‐
7.1. RESUMEN
Existen importantes diferencias en actividad metabólica, utilización energética y capacidad de
deposición de proteína y grasa en el cerdo Ibérico con respecto a razas mejoradas. El cerdo Ibérico se
caracteriza por presentar un perfil lipogénico, baja capacidad de deposición de proteína y un ritmo de
crecimiento lento (Nieto y col., 2002; Barea y col., 2007). A estas diferencias deben contribuir
peculiaridades ligadas al genotipo, responsables de la actividad metabólica de los distintos tejidos y
órganos y, en particular, de los tejidos esplácnicos (tracto gastrointestinal, grasa mesentérica, páncreas,
bazo e hígado). Si consideramos la ruta vascular que siguen los nutrientes ingeridos por el animal, los
tejidos esplácnicos juegan un papel esencial en la distribución de nutrientes a los tejidos periféricos. En
términos de metabolismo global, estos tejidos viscerales tienen una influencia desproporcionada respecto
a sus masas y bajo ciertas circunstancias, sus elevadas tasas metabólicas pueden comprometer la
disponibilidad neta de nutrientes en los tejidos periféricos de interés económico. La betaína y el ácido
linoleico conjugado tienen la capacidad de alterar el crecimiento y la composición corporal en cerdos,
aunque aún hay mucho por conocer de su mecanismo de acción. La betaína puede disminuir la
deposición de grasa y aumentar el magro de la canal de cerdos, mientras que el CLA tiene el potencial de
aumentar la ganancia media diaria, la eficiencia de alimentación y la deposición de proteína; y disminuir la
grasa corporal (Fernández-Fígares y col., 2008). Se ha observado además, que la adición conjunta de
CLA y betaína a la dieta de cerdos Ibéricos en crecimiento tiene un efecto sinérgico sobre el crecimiento y
‐ 282 ‐
la deposición de proteína (Fernández-Fígares y col., 2008), así como en el perfil bioquímico y hormonal
(Fernández-Fígares y col., 2012).
El primer experimento de los tres que componen el presente trabajo de Tesis Doctoral,
tiene como objetivo evaluar el efecto que la adición a la dieta de CLA y betaína tiene sobre el
crecimiento y desarrollo de los principales cortes y tejidos de la canal de cerdos Ibéricos en
crecimiento (20-50 kg de PV), usando para ello la ecuación alométrica descrita por Huxley
(1932). Nuestra hipótesis inicial es que los efectos de estos modificadores metabólicos serían
más evidentes en el cerdo Ibérico frente a cerdos de razas mejoradas por ser una raza de
genotipo obeso. Para este experimento se utilizaron 25 cerdas Ibéricas de la estirpe Silvela. Al
alcanzar los animales los 20 kg de PV, un grupo inicial de 5 cerdas fue sacrificado para obtener
los puntos iniciales de las ecuaciones alométricas. A las 20 cerdas restantes se les asignó
aleatoriamente uno de los cuatro tratamientos experimentales. Éstos consistieron en la adición
0,5% de betaína, 1% de CLA o 0,5% de betaína + 1% de CLA a una dieta basal a expensas de
cebada molida y harina de soja (12,0% de proteína bruta, 0,81% de lisina y 14,8 MJ de EM/kg de
materia seca) que se utilizó como dieta control. El nivel de alimentación utilizado fue del 95% de
ad libitum. Cuando alcanzaron los 51,1 ± 0,85 kg de PV fueron sacrificados para la obtención de
la semicanal izquierda para, tras su despiece, obtener el peso de los cortes principales: grasa de
riñonada, panceta, tocino dorsal (cortes de componente graso), solomillo, lomo, cabezada de
magro (cortes de componente magro); espinazo, costillar (cortes de componente óseo); y jamón
y paleta sin perfilar (piezas nobles). En las piezas nobles una vez perfiladas, se llevó a cabo la
disección de los distintos tejidos que la conforman: piel, grasa (grasa subcutánea y grasa
intermuscular), magro y hueso. La grasa intramuscular se determinó mediante análisis químico
sobre el tejido magro de paleta y jamón. La adición individual de CLA no causó efectos
significativos en el rendimiento y desarrollo de los distintos cortes y tejidos analizados. Sin
embargo, la adición de betaína a la dieta aumentó el valor del coeficiente alométrico en el
‐ 283 ‐
espinazo, indicando un desarrollo más tardío de esta pieza que coincide con el incremento del
21% obtenido en su rendimiento. La adición de betaína a la dieta aumentó el rendimiento de la
cabezada de magro en un 23% y disminuyó el coeficiente alométrico de la panceta. La adición
conjunta de CLA y betaína a la dieta alteró el ritmo de desarrollo de diferentes cortes de la canal,
retrasando el desarrollo del solomillo y el jamón, que coincidió con el mayor rendimiento de estos
cortes (22 y 5%, respectivamente) en comparación con los cerdos del grupo control. El mismo
efecto se observó en el tejido magro de la paleta perfilada, incrementando su desarrollo en 5%, y
en el tejido magro libre de grasa en 6% en comparación con los animales del grupo control.
Además, CLA y betaína juntos aceleraron el desarrollo de cortes de mayor componente graso e
incrementaron su rendimiento, si bien este efecto fue solamente significativo en el caso de la
grasa de riñonada que disminuyó su rendimiento en 32% con respecto al grupo control. En
conclusión, aunque la adición a la dieta de CLA no tuvo efecto alguno, la adición a la dieta de
betaína puede dar lugar a cerdos Ibéricos con una mayor longitud de la canal. Parece existir
además un efecto sinérgico entre ambos modificadores metabólicos dirigido a un aumento de
deposición de tejido magro y una disminución en la deposición de tejido graso en la canal de
cerdos Ibéricos en crecimiento.
El segundo y tercer experimento del presente trabajo de Tesis Doctoral fue diseñado con
el objetivo de determinar si la suplementación de la dieta con CLA y/o betaína afectaba, por un
lado a la producción de calor de las VDP, y por otro lado al flujo de determinados metabolitos a
través de estos tejidos viscerales. Para ello 16 cerdos Ibéricos castrados de la estirpe Silvela (19
kg de PV) fueron asignados aleatoriamente a cada uno de los cuatro tratamientos, que
consistieron en la adición de 0,5% de betaína, 1% de CLA o 0,5% de betaína + 1% de CLA a una
dieta basal a expensas de cebada molida y harina de soja (10,1% de proteína bruta, 0,4% de
lisina y 14,7 MJ de EM/kg de materia seca). El plano de alimentación fue del 70% de ad libitum,
que representa el 2,4 x EM para el mantenimiento (444 kJ/kg 0,75 PV/d; NRC, 1998). Los
‐ 284 ‐
animales se sometieron a una intervención quirúrgica para la instalación de tres catéteres: en la
arteria carótida, y en venas porta e ileal. Después de la recuperación de la cirugía, con el fin de
medir el FSP se infundieron 15 ml de PAH (2% peso/volumen) a través del catéter ileal, seguido
de una infusión continua de 0,8 ml/minuto de PAH. Las muestras de sangre de vena porta y
arteria carótida fueron tomadas de forma simultánea -5 minutos, y 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 5 y
6 horas tras la ingestión de 1200 g de ración, usando para ellos tubos heparinizados para la
determinación inmediata de la concentración de O2 y la saturación de hemoglobina.
Inmediatamente después de la toma de muestra, la sangre se centrifugó para la determinación
del hematocrito y la obtención de plasma para la determinación de la concentración de PAH y de
metabolitos (albúmina, amonio, colesterol, creatinina, glucosa, lactato, triglicéridos y urea). La
concentración de O2 en sangre fue calculada según describeron Huntington y col. (1990).
Utilizando el principio de Fick de las diferencias arterio-venosas se calculó el flujo sanguíneo
portal, el consumo de O2 y el flujo de metabolitos de las VDP (Zierler, 1961).
Para el primero de estos dos experimentos, se determinó la producción de calor de las VDP,
multiplicando el FSP por la diferencia en la concentración de O2 hallada en la arteria carótida y la vena
portal con un equivalente energético de 20,4 kJ/L para el de O2 (Rérat y Vaissade, 1993). No se
encontraron diferencias significativas entre dietas en ninguno de los parámetros preprandiales. Sin
embargo, los parámetros postprandiales sí se vieron afectados por el tratamiento. El FSP fue mayor
(19%) en el grupo control con respecto al resto de tratamientos. La diferencia arterio-portal de la
concentración de O2 fue menor (12,1%) al añadir a la dieta CLA + betaína. Del mismo modo, la adición
conjunta de CLA y betaína disminuyó el consumo de O2 postprandial de las VDP seguido por la dieta
suplementada con betaína, CLA y por último el grupo control (32.7, 25.4 and 17.7%, respectivamente con
respecto al grupo control). La producción de calor postprandial de las VDP fue significativamente mayor
en el grupo control (26,4%) comparado con el resto de tratamientos, correspondiendo el menor valor al
tratamiento con CLA (34,1% más bajo que el grupo control). En conclusión, la suplementación con CLA
y/o betaína redujo significativamente el FSP, el consumo de O2 y la producción de calor por parte de las
‐ 285 ‐
VDP, siendo el efecto mucho más marcado cuando CLA y betaína se añaden a la dieta de forma
conjunta. Estos resultados sugieren que la adición de CLA y betaína a la dieta puede aumentar la de
energía disponible para el resto de tejidos corporales distintos de las VDP.
El mismo diseño experimental se utilizó para el tercero de los trabajos, pero con una
salvedad, y es que en este caso no se incluyó el muestreo realizado 5 minutos antes de ofrecer
los 1200 g de ración a los animales, es decir, no se tuvieron en cuenta los datos preprandiales
para el análisis de los resultados. El flujo neto portal (mmol/h) de la glucosa a través de las VDP
disminuyó significativamente en animales alimentados con dietas suplementadas con betaína,
CLA y CLA + betaína (37, 31 y 51%, respectivamente) con respecto a la dieta control. Asimismo,
el FNP de amonio disminuyó por la inclusión en la dieta de betaína y CLA + betaína (29 y 40%,
respectivamente) con respecto a la dieta control. En conclusión, las diferencias encontradas en
el flujo neto a través de las VDP de glucosa y amonio, podrían explicar las diferencias
observadas previamente en el metabolismo de cerdos Ibéricos alimentados con dietas
suplementadas con CLA y/o betaína.
Los estudios que forman la presente Tesis Doctoral aportan información única acerca del efecto
que tiene la inclusión en la dieta de CLA y betaína tanto en el desarrollo corporal, como en el
metabolismo a nivel de las vísceras que drenan al sistema porta en la raza porcina Ibérica. Los resultados
obtenidos podrían arrojar luz al efecto del CLA y la betaína sobre el crecimiento y desarrollo en el cerdo
Ibérico.
‐ 286 ‐
‐ 287 ‐
7.2. SUMMARY
There are important differences in terms of metabolic activity, energy utilization and capacity for
protein and lipid deposition when Iberian and modern pigs are compared. It has been reported that the
Iberian pigs have a lipogenic profile, lower protein deposition and growth rate compared to Landrace
(Nieto et al., 2002; Barea et al., 2007). However, the factors that determine these processes remain
unknown. The observed differences might be explained by genotypic differences related to the metabolic
activity of different tissues, particularly the splanchnic tissues (gastrointestinal tract, mesenteric/omental
fat, pancreas, spleen and liver). Considering the vascular route followed by ingested nutrients, the
splanchnic tissues play an essential role in nutrient distribution to peripheral tissues. In terms of whole-
body metabolism, visceral tissues have a disproportionate influence with respect to their masses and
under certain circumstances their high metabolic rate may compromise nutrient availability to the tissues of
economic interest. Betaine and conjugated linoleic acid (CLA) have the potential to alter growth and body
composition in swine although their mode of function is not well understood. Betaine can decrease fat
deposition and increase carcass lean in pigs; whereas CLA has potential to increase ADG, feed efficiency,
protein accretion, and to decrease body fat (Fernández-Fígares et al., 2008). It has been observed
betaine or CLA alone did not produce significant changes but the addition of both suggested a synergistic
action affecting growth, carcass protein deposition (Fernández-Fígares et al., 2008), biochemical and
‐ 288 ‐
hormone profiles (Fernández-Fígares et al., 2012), and yield of lean cuts (Rojas-Cano et al., 2011) in
growing Iberian pigs.
The objective of the first experiment was evaluating the effects of CLA and betaine on growth and
development on different carcass cuts and the dissected components of ham and shoulder of Iberian pigs
growing from 20 to 50 kg body weight, using allometric equations (Huxley, 1932). We hypothesized that
the beneficial effects of these growth promoters would be more patent in Iberian than in modern pig
genotypes. A total of 25 purebred Iberian (Silvela strain) gilts 15 kg BW were used in the study. When
animal got 20 kg BW, five pigs were killed at the beginning of the experiment to obtain the initial points for
the allometric equations. The remaining 20 animals were randomly assigned to each of four experimental
treatments (5 pigs per treatment). Treatments consisted of a basal diet (Control) supplemented or not with
0.5% betaine, 1% CLA, or 0.5% betaine+1% CLA, at the expense of cornstarch (for betaine) and
sunflower oil (for CLA). The Control diet was barley and soybean meal based and contained 12.0% CP,
0.81% Lys, and 14.8 MJ ME/kg DM. Pigs were fed at 95% of ad libitum intake. The slaughter weight was
51.1±0.85 kg BW. Immediately after slaughter, the left sides of thawed carcasses were cut into primal
cuts: backfat, belly, leaf fat (fat cuts); tenderloin, shoulder butt, loin (lean cuts); spine, spareribs, (bone
cuts); shoulder and ham. Hams and shoulders from left carcasses were trimmed and subsequently
dissected into skin, fat (subcutaneous and intermuscular fat), lean, bone. The intramuscular fat from
trimmed hams and shoulders was obtained by quimical extraction from dissected lean tissue. No effect of
CLA on the yield and development of the different cuts and dissected tissues was found in the present
experiment. However, addition of betaine increased the allometric coefficient value in the spine,
suggesting a later development of this cuts in concordance with the increase observed in the yield spine
(21%). The addition of betaine to the diet increased shoulder butt performance by 23% and decreased the
allometric coefficient belly. Inclusion of CLA and betaine to the diet altered the rate of development of
different cuts of the carcass, slowing the development of tenderloin and ham, which coincided with the
increased performance of these cuts (22 and 5%, respectively) compared with pigs in the control group.
The same effect was observed in lean tissue of the trimmed shoulder, increasing the development by 5%,
and the lean fat-free tissue by 6% compared to control animals. Furthermore, CLA and betaine together
‐ 289 ‐
accelerated the development of higher fatty component cuts and increased performance, although this
effect was only significant in the case of leaf fat performance decreased by 32% compared to the control
group. In conclusion, although the addition of CLA to the diet had no effect, the addition of betaine to the
diet may increases carcass length of growing Iberian pigs. It also appears to be a synergistic effect
between the two metabolic modifiers led to an increase in lean tissue deposition and a decrease in fat
deposition in the carcass of Iberian growing pigs.
The second and third experiments were designed with the aim to determine if the use of betaine
and CLA in the diet of Iberian pigs affects on the one hand PDV heat production, and on the other hand
net PDV flux of metabolites. The experiment was performed with sixteen Iberian (Silvela strain) growing
barrows (19kg BW) that were randomly assigned to one of four experimental treatments Treatments
consisted of a basal diet (Control) supplemented or not with 0.5% betaine, 1% CLA, or 0.5% betaine+1%
CLA, at the expense of cornstarch (for betaine) and sunflower oil (for CLA). The Control diet was barley
and soybean meal based and contained 101 g crude protein (CP)/kg dry matter (DM), 4 g L-lysine/kg DM,
and 14.7 MJ ME/kg DM. Pigs were fed at 70% of ad libitum calculated as a function of BW (Nieto et al.,
2001) which represented 2.4 × ME for maintenance (444 kJ/kg 0.75 BW/d; NRC, 1998). When animal get
30 kg BW, Three catheters were placed in each pig: in carotid artery and portal vein for blood sampling,
and in ileal vein. After surgery recovery, a priming dose of para-aminohippuric acid (PAH, 2% w/v) was
injected into the ileal vein 45 minutes prior to continuous infusion (0.8 ml/minute), for measuring portal vein
blood flow (PBF). The portal vein and carotid artery blood were sampled simultaneously -5 minutes, and
0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 5 and 6 hours after feeding the total daily ration (1200 g) using heparinized
tubes to immediately determination of O2 concentration and saturation of haemoglobin. The blood was
centrifuged, haematocrit determined, and plasma stored until analysis for PAH glucose, lactate, albumin,
creatinine, NH3, urea, triglycerides and cholesterol. Blood O2 concentration was calculated as described by
Huntington et al. (1990). PBF and PDV O2 consumption rate were calculated according to the Fick
principle of arterio-venous concentration difference and flow rate (Zierler, 1961).
For the first of these two experiments, the PDV heat production was determined by multiplying the
PBF by the difference in the concentration of O2 found in the carotid artery and the portal vein with an
‐ 290 ‐
equivalent energy of 20.4 kJ/L the O2 (Rérat and Vaissade, 1993). No significant differences between diets
in any of preprandial parameters were found. However, postprandial parameters were affected by the
treatment. The FBP was higher (19%) in the control group compared to other treatments. The goal
difference arteriovenous O2 concentration was lower (12.1%) by adding the betaine + CLA diet. Similarly,
addition of CLA and betaine decreased postprandial O2 consumption by the PDV followed by the diet
supplemented with betaine, CLA and finally the control group (32.7, 25.4 and 17.7%, respectively
compared to the control group). Postprandial PDV heat production was significantly higher in the control
group (26.4%) compared to the other treatments, the lowest value corresponding to treatment with CLA
(34.1% lower than the control group). In conclusion, CLA supplementation and/or betaine significantly
reduced the FBP, O2 consumption and PDV heat production, being much more pronounced effect when
CLA and betaine are added to the diet together. These results suggest that the addition of betaine and
CLA to the diet can increase the energy available for the rest of various body tissues PDV.
The same experimental design was used for the third experiment, but with an exception, no
preprandial data was had into account. The net portal flow (mmol/h) of glucose through the PDV
significantly decreased fed diets supplemented with betaine, betaine + CLA and CLA (37, 31 and 51%,
respectively) compared to control diet. Also, NH3 PNF decreased by inclusion in the diet of CLA + betaine
and betaine (29 and 40%, respectively) compared to the control diet. In conclusion, the differences in the
glucose and NH3 net flow through the PDV, may explain the differences in metabolism previously
observed in Iberian pigs fed diets supplemented with CLA and/or betaine.