DROGAS CON HETERÓSIDOS FLAVONOIDES

CASTILLO ALVAREZ J.1; ECHAIZ VELIZ M.2; GUERRA CABALLERO R.3; MAYHUIRE RIVERA M.4

(1, 2, 3, 4)UNMSM Facultad de Farmacia y Bioquímica. Escuela Académico Profesional de Farmacia y Bioquímica. Cátedra

de Farmacognosia. Lima – Perú.

RESUMEN

Los flavonoides son sintetizados a partir de una molécula de fenilalanina y 3 demalonil-CoA, a través de lo que se conoce como "vía biosintética de los flavonoides". Se realizó reacciones de caracterización para el análisis cualitativo tales como reacciones de coloración y cromatografía en cromatofolio .Todas las reacciones de caracterización para el análisis cualitativo resultaron positivas en los cuatro tipos de flavonoides analizados. Dando como resultado final presencia de hesperidósidos en muestra de naranja teniendo reacciones intensas y positivas, la presencia de rutinósido en muestra de ruda fue optimo con un Rf igual de la muestra problema que el estándar y se identificó antocianinas en muestra de maíz morado, obteniendo coloraciones óptimos.

Palabras clave: Flavonoides, hesperidósido, rutinósido, quercetinósido, antocianósido

ABSTRACT

Flavonoids are synthesized from a molecule of phenylalanine and 3-demalonil-CoA, through what is known as "via flavonoids biosynthesis". Reactions of characterization for the qualitative analysis such as chromatography and coloration reactions took place in cromatofolio.All reactions of characterization for the qualitative analysis were positive in all four types of flavonoids analyzed. Giving as result the presence of hesperidosidos in sample of Orange having intense and positive reactions, the presence of rutinoside in sample of ruda was optimal with an equal sign Rf problem than the standard and identified anthocyanins in purple corn sample, obtaining optimal colorations.

Key words: Flavonoids, hesperidosido, rutinoside, quercetinosido antocianosido

I. INTRODUCCION

Los flavonoides son compuestos, generalmente amarillos, que se encuentran en los jugos celulares y en los pétalos de las flores de algunas plantas en forma de glucósidos de diversos azúcares (glucosa, galactosa, ramnosa o una pentosa) y cuyos aglucones son derivados del núcleo fundamental de la fenilbenzopirona. La unión glucosídica del aglucon y el azúcar suele estar sobre grupos fenólicos situados en la posiciones 7 ó 3. 1

Estos compuestos son metabolitos secundarios de las plantas, cuyo papel fisiológico, en ellas, no se conoce bien. Muchos de ellos se hallan en la corteza de los árboles (roble, nogal, morera, etc.) y se han utilizado como colorantes naturales (p.ej. la quercetrina del roble). Otros tienen carácter vitamínico y aplicaciones terapéuticas.1

Figu

Los flavonoides se clasifican a partir de sus variaciones estructurales. Dentro del

grupo de los flavonoides propiamente dicho, los más destacables por su interés farmacológico son las flavonas, flavonoles, flavanonas y sus correspondientes heterósidos. Además, algunos isoflavonoides son importantes por su efecto estrogénico y el de los compuestos directamente relacionados con los flavonoides (compuestos que conservan el sistema C6-C3-C6 pero carecen del carbonilo en la posición 4) como son las antocianidinas, las catequinas y las leucoantocianidinas, destacan los antocianósidos.2

Las flavonas son compuestos derivados de la benzo-γ-pirona. Algunas drogas cuyo efecto terapéutico está relacionado a su contenido en flavonas son la tila (Tilia cordata) y la pasiflora (Passiflora incarnata), que entre otros principios activos contienen hesperidina. Las hojas del ginkgo (Ginkgo biloba) también contienen flavonas, además de otros flavonoides.2

Las hojas del ginkgo contienen flavonas (luteolina), dímeros de flavonas (ginkgetina e isoginkgetina), entre otros principios activos como proantocianidinas, sesquiterpenos y diterpenos. El ginkgo tiene principalmente antioxidante, tónico venoso, vasoprotector y antiagregante plaquetario. También mejora la circulación cerebral y carece de toxicidad, aunque en personas con hipersensibilidad pueden aparecer

Figura 1.Estructura general de flavonoides

dermatitis, cefaleas y trastornos digestivos.2

Los flavonoles más destacables son el rutinósido o rutina y la silimarina. El rutinósido es un ramnoglucósido de la quercetina (flavonol) y tiene acción venotónica, antiespasmódica, antihemorrágica y antirreumática. Forma parte de numerosas especialidades vasoprotectoras y venotónicas, y se puede obtener a partir de diferentes drogas como las hojas del trigo sarraceno (Fagopyrum esculentum), las flores de sófora (Sophora japónica) y de las hojas de algunas especies de eucalipto (Eucalyptus macrorrhyncha). La silimarina no es una única sustancia, sino una mezcla de flavanolignanos. Se encuentra en el fruto del cardo mariano (Silybum marianum). Cardo mariano (Silybum marianum) su principal principio activo es la silimarina constituida por flavolignanos isómeros: silibina, isosilibina, silibinina, silidianina y silicristina, siendo el primero el más activo. Además, contiene fitoesteroles, ácidos orgánicos, saponósidos y aceite esencial entre otros componentes. La silimarina tiene acción hepatoprotectora capaz de antagonizar los efectos tóxicos de ciertas sustancias que atacan a las células hepáticas, tales como la faloidina (sustancia toxica procedente de la Amanita phalloides), el alcohol etílico o el tetracloruro de carbono. También tiene efecto antioxidante, antirradicalar e inhibe la peroxidacion lipídica. A dosis

normales se considera que carece de toxicidad.2

Algunos de los compuestos del grupo de las flavanonas más importantes son el liquiritósido e isoliquiritósido, que se encuentran en las raíces y rizomas del regaliz (Glycyrrhiza glabra), y los denominados citroflavonoides, que proceden del pericarpo de diversos cítricos (Citrus sp.). En general, los citroflavonoides son subproductos de la industria de zumos de frutas, empleándose en especialidades vasoprotectoras. Algunos de los citroflavonoides más significativos son el hesperósido (hesperetín-7-hesperidósido), el neohesperidósido (hesperetín-7-neohesperidósido) y el naringósido (naringetín-7-neohesperidósi).

Algunos isoflavonoides son considerados como fitoestrógenos, ya que han mostrado tener un efecto estrogénico débil (aunque relativamente selectivo sobre los receptores β-estrogénicos) actuando como agonistas estrogénicos; de manera que, cuando las concentraciones son las suficientemente altas, pueden observarse niveles de bioactividad semejantes entre las isoflavonas y el estradiol. Por este motivo, el empleo de fitoestrógenos puede ser útil en el tratamiento de la sintomatología asociada al climaterio. Los más importantes son la genisteína (5, 7,4’-trihidroxi-isoflavona) y la daidzeína

(7,4’-dihidroxi-isoflavona), ambos procedentes de la semilla de soja.2

Los antocianósidos son heterósidos (también se denominan antocianinas) cuyos aglicones (antocianidinas o antocianidoles) derivan del ion flavilio (2-fenil benzopirilio). Son pigmentos que confieren las coloraciones rojas, azules y violetas, a numerosas flores, frutos, hojas y semillas. Los antocianósidos, al igual que otros flavonoides, tienen acción vitamínica P, disminuyendo la fragilidad capilar y aumentando su resistencia, por lo que tienen un efecto beneficioso sobre el sistema vascular capilar y venoso. Además los antocianósidos poseen actividad antioxidante, antiinflamatoria, antiagregante plaquetaria y presentan muy baja toxicidad.2

II. MATERIALES Y REACTIVOS

1.- MATERIALES

Materiales de vidrio

2.- REACTIVOS

Ácido sulfúrico concentrado H2SO4

Ácido clorhídrico concentrado HCL

Ácido Nítrico HNO3

Hidróxido de sodio NaOH 30% Reactivo de Wilson Shinoda Tricloruro férrico FeCl3

Acetato de Plomo Pb(CH3OO)2

III. METODOLOGÍA Reacciones de coloración Cromatografía en capa fina

IV. RESULTADOS

ANALISIS CUALITATIVO

A.-DETERMINACIÓN DE HESPERIDÓSIDO EN Citrus sinensis (Naranja)

Hesperidósido REACCIONES

REACCION POSITIVA

INTENSIDAD

H2SO4 CC Coloración naranja ++

Fig.2. Estructura básica de flavona y flavonol.

Fig.3. Estructura básica de flavanona y flavanonol.

Fig. 4. Estructura básica de los isoflavonoides.

HCl cc Pp blanco++

HNO3 Coloración pardo rojizo

+++

NaOH 30% Coloración amarillo naranja

+

B.- DETERMINACIÓN DE RUTINÓSIDO EN Ruda ruta (Ruda)

Para la identificación de flavonoides en la ruda, primero se realizó una extracción por decocción.

Rutinósido REACCIONES REACCION POSITIVA

INTENSIDAD

Wilson (ac. bórico + citrato

de Na)

Coloración verde -amarilla

+++

Shinoda coloración rosada +++

FeCl3

coloración verde +++

− No hay reacción

+ Poca reacción

++ Buena reacción

+++ Óptima reacción

Cromatografía del rutinósido

Sistema de solventes:Acet.Etilo:Metanol:Agua (100:13.5;10) La cromatografía salió perfecto con Rf de muestra problema igual al patrón Longitud de onda:366nm Rf=0.6 Para el ST y Mp

C.- QUERCETINÓSIDO EN Allium cepa (Cebolla)

QuercetinósidoREACCIONES REACCION

POSITIVA INTENSIDAD

Pb(CH3OO)2Pp Color amarillo +++

FeCl3

Verde en frioRojo oscuro en

caliente+++

IMÁGENES DE LOS REULTADOSCon el reactivo Pb(CH3OO)2 Con FeCl3

Formación de un precipitado amarillo

con tricloruro de fierro : coloración rojo oscuro

D.- DETERMINACIÓN DE ANTOCIANÓSIDO EN Zea maíz (Maíz morado)

Reacciones AntocianosidoH2SO4 NaOH

Extracto Acuoso

†† ††

Extracto Ácido

††† ††††

Extracto Alcohólico

†† †††

IMÁGENES DE LOS RESULTADOSCon el reactivo H2SO4 Con NaOH

V. DISCUSIONES Se realizó un análisis cualitativo para la identificación de heterósidos flavonoides. Para la determinación de Hesperidósido, se

analizó la droga de naranja con tres reacciones en medio ácido y una en medio básico. Tres reacciones de identificación dieron positivas y una nos dio un resultado negativo, por lo tanto se trata de hesperidina, solo que el reactivo de acido clorhídrico podría presentar impurezas.

Para la determinación de Rutina, se tuvo que preparar extracto de ruda, en donde las hojas frescas fueron estabilizadas por acción del alcohol hirviente que solubiliza los heterósidos. Esta purificación permite eliminar la clorofila cuya intensa coloración enmascara ciertas reacciones de caracterización, las dos primeras pruebas de Wilson y Shinoda, se pudieron observar muy bien. En la reacción de Wilson la florescencia observada es muy tenue, pero la cromatografía salió muy bien ya que el Rf de la muestra problema fue igual al patrón. La reacción del extracto de ruda con el reactivo de Wilson, presentó una coloración amarilla y cuando se llevó la muestra a la lámpara uv, se tornó color verde fluorescente. En el caso de la reacción de Shinoda, el extracto de ruda en contacto con ácido clorhídrico con virutas de magnesio metálico se genera hidrógeno, este último reduce al flavonoide(rutina), lo cual se reconoce por la coloración rosada. En cuanto a la reacción con el tricloruro de fierro, también la reacción fue positiva co un color intenso.

En la determinación del quercetinósido en la cebolla, las dos reacciones de identificación salieron muy notorias y positivas.

En la identificación de antocianinas, sabiendo que son más estables en un medio ácido que

en un medio neutro o alcalino. La muestra problema de antocianina obtenida de la coronta de maíz cambió a color rojo al agregar ácido sulfúrico concentrado; luego de agregar una base como el NaOH 30% cambió a color verdeazulado oscuro

VI. CONCLUSIONES

- Se identificó hesperidósidos en muestra de naranja teniendo reacciones intensas y positivas.

- S e identificó rutinósido en muestra de ruda con reacciones postitivas y un Rf correcto

- Se identificó quercetinósido en muestra de cebolla con dos reacciones muy notorias y positivas.

- Se encontró antocianinas en muestra de maiz morado, obteniendo coloraciones positivas y dentro del intervalo correcto.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1.- Yúfera, E.”Química Orgánica Básica y Aplicada”. Editorial Reverté. Tomo II. Barcelona.1995.

2.- López, T. Fitoterapia de los Flavonoides. “El Sevier”. Vol 21(4), pag. 108-113.2002.

3.- Arrilmi Gorriti; Bertha Jurado; Augusta Córdova. Manual de laboratorio de Farmacognosia I. Cátedra de Farnacognosia y Medicina Tradicional. Lima 2014.

PROTOCOLO Nº 8

DROGAS CON HETEROSIDOS FLAVONOIDES

RESULTADOS

I. ANALISIS CUALITATIVO

NOTA: negativo (-), positiva trazas (+), abundante (++).

HETEROSIDOS FLAVONOIDES MUESTRA REACCIÓN RESULTADOS

HESPERIDINA

H2SO4 cc naranja (++)HCl cc Precipitado blanco (++)HNO3 Rojo pardo (+++)

NaOH 30% Amarillo naranja (+)

RUTINA

RUDAWilson ++

Shinoda +++FeCl3 +++

APIOWilson --------

Shinoda +FeCl3 ++

QUERCETINA CEBOLLA Pb(CH3COO)2 +++FeCl3 Coloración amarilla (+)

ANTOCIANINA

MAIZ MORADO Extracto Acuoso

H2SO4 cc ++

NaOH 30% ++

MAIZ MORADO Extracto

Ácido

H2SO4 cc +++

NaOH 30% +++

MAIZMORADO Extracto

Alcohólico

H2SO4 cc ++

NaOH 30% +++

PROTOCOLO Nº 8