UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOSDecana de América, Universidad del Perú

Facultad de Farmacia y BioquímicaEscuela Académico Profesional de Farmacia y Bioquímica

Año Académico: Quinto año

Semestre Académico: 2015-I

Departamento Académico:

Asignatura: Toxicología y Química Legal

Práctica Nº :

Identificación de Insecticidas Órgano Fosforados, Órgano Clorados y Órgano Carbámicos.

Grupo: Jueves de 10 a.m. a 2 p.m.

Integrantes:

- Ayme Huamaní, José Miguel 11040003- Chambi Velasquez, Yoselin Milagros 11040057- Fernández Rebaza, Gustavo Adolfo 11040061- Quiñones Huayaney, Maria Eugenia 11040025- Tolentino Chavez, Jorge Luis 11040087

Docente: Dr. QF. Jesús Víctor Lizano Gutiérrez

INTRODUCCIÓN

En los últimos años se ha prestado especial atención a los procesos de contaminación de aguas

subterráneas, suelos y hasta alimentos comestibles ligados a la utilización de fertilizantes,

particularmente los nitratos, en las prácticas agrícolas. Además del uso indiscriminado de

plaguicidas.

La elevada toxicidad de la mayoría de los plaguicidas y de algunos de sus metabolitos aconseja

realizar estudios de esta problemática que puede tener graves efectos sobre los seres vivos. Las

dos características más importantes que controlan la migración de plaguicidas en aguas y suelos

son su movilidad y persistencia.

Los plaguicidas deben ser suficientemente móviles como para alcanzar su objetivo y

suficientemente persistentes como para eliminar el organismo específicamente atacado. Estas dos

cualidades no son deseables desde un punto de vista ambiental. Por ejemplo, el DDT tenía muy

baja movilidad pero alta persistencia. De ahí que no afectase a las aguas subterráneas pero que

tuviera alto potencial para alcanzar la cadena alimentaria a través de la atmósfera o por

migración en aguas superficiales.1

La FAO/OMS define el término plaguicida como “cualquier sustancia o mezcla de ellas utilizada

para prevenir o controlar plantas o animales indeseables e incluso aquellas otras destinadas a

utilizarse como regulador del crecimiento de la planta, defoliante o desecante”.

Desde el punto de vista de su estructura química tenemos dentro del grupo de los Insecticidas y

acaricidas a los órganoclorados como los derivados del 2,2-difeniletano (DDT, dicofol), los

organofosforados como el parathion, los organosulfurados, Carbamatos y otros.

Dentro de los cuales en la presente práctica analizaremos los insecticidas órganofosforados,

órganoclorados y órganocarbámicos a nivel de reacciones cualitativas y en comparación con

estándares.

PARTE EXPERIMENTAL

Objetivo

- Realizar el análisis químico toxicológico de identificación cualitativa de la muestra Residuo 3

que representa al grupo de plaguicidas órganofosforados, órganoclorados y órganocarbámicos.

Reactivos

Benceno

Acetona

Verde brillante en acetona 0,5%

Cloruro de Paladio 0,5% en HCl 5%

FeCl3 5% en Etanol

Ácido sulfosalicílico 1% en Etanol

Vapores de Bromo

p-acetilaminobenzoaldehido 1% en

Etanol

Difenilamina 0,2%

NaOH 10 %

Materiales

Muestra Residuo 3

Estándar Parathion

Estándar Carbaril

Estándar DDT

Tubos de ensayo

Pipetas pasteur

Pipetas de 5 mL

Cromatoplacas de silicagel G

Cuba cromatográfica

Equipos

Baño maría

1. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

Sensibilidad: 0.5 microgramos

Fundamento

Se basa en la distribución del analito entre el disolvente y una capa fina de adsorbente, que

generalmente es sílice o alúmina (óxido de aluminio) que se ha enlazado físicamente a una placa

plana de vidrio o plástico. Como técnica de separación, la CCF es mucho menos eficiente que la

GC o HPLC y, generalmente, se utiliza como técnica semicuantitativa, por lo que es menos

utilizada. 1 Es un mecanismo de adsorción y solubilidad de la muestra según su constante de

partición sobre la fase estacionaria y fase móvil respectivamente. 2, 3

Técnica operatoria

- Resuspendemos en etanol el residuo 3 (R3).

- Sembramos sobre las cromatoplacas.

- Sistema de solventes: Benceno: Acentona (6:1)

- Finalmente revelamos:

a) Plaguicidas fosforados:

-Reactivo verde brillante 0,5%

-Cloruro de paladio 0,5% en HCl 5%

- FeCl3 5%

b) Plaguicidas carbámicos

- Reactivo p-acetilaminobenzaldehido

c) Plaguicidas clorados

-Reactivo difenilamina al 0,2%

RESULTADOS:

I) PLAGUICIDAS FOSFORADOS:

Reactivo verde brillante 0,5%Método de detección específico para ácidos carboxílicos.

Resultado Reacción negativa

Cloruro de paladio 0,5% en HCl 5%

La principal aplicación del paladio es su uso como catalizador el cual actúa permitiendo una reacción de acoplamiento C-C. El primer paso consiste en la activación del enlace C-X por la inserción de paladio, seguido de la coordinación al doble enlace (al anillo en caso de arilos metálicos) y la formación del enlace C(sp2)-C(sp2) con la consiguiente salida del átomo de paladio.

Resultado Reacción negativa

FeCl3 5%

Vapores de bromo permite la bromación de compuestos enólicos y fenólicos

Se logra observar una coloración de va desde el amarillo hasta rojo.

El exceso de bromo se elimina con acido sulfosalicilico. El cloruro férrico permite la formación de quelatos

Resultado Reacción negativa. No se observa manchas blancas sobre fondo malva en numero

2.

II) PLAGUICIDAS CARBÁMICOS

A) Reactivo p-acetilaminobenzaldehidoReactivo de visualización que permite la identificación de sulfonamida.4

ResultadoReacción negativa

III) PLAGUICIDAS CLORADOS

A) Reactivo Difenilamina 0,2%

ResultadoReacción negativa

2. REACCIÓN RÁPIDA DE TOXICOLOGÍA DE URGENCIA

Fundamento

Los insecticidas contienen porciones de p-nitrofenol en su mezcla, el cual en medio básico

concentrado da una coloración AMARILLO PATITO. Esto debido a que la molécula original no

ionizada es incolora, pero el ion negativo correspondiente es coloreado. En disolución alcalina el

exceso de base separa al ion H+ de la molécula y la disolución se vuelve amarilla a causa del anión

liberado.

Técnica operatoria

a. Adicionar en la capsula de porcelana I Gta. MP (Orina)

b. Luego agregar 1mL NaOH 10%

c. Llevar a B.M. x 5minutos

Mecanismo de reacción

Resultado

Solo ligera coloración pero no se logró el AMARILLO PATITO. Rx. Negativa.

DISCUSIÓN

La muestra analizada indica ausencia de insecticidas órganoclorados, órganofosforados y

órganocarbámicos. Esto se comprueba en la cromatografía, al revelarlo con sus respectivos

reactivos y dar el mismo resultado negativo que el análisis cualitativo con hidróxido de sodio.

Las reacciones negativas obtenidas pueden deberse a una cantidad muy pequeña presente en la

muestra y la poca sensibilidad del método o simplemente ausencia de compuestos

órganosfosforados.1, 5,6

CONCLUSIONES

El residuo 3 no presenta insecticidas según la técnica cualitativa de cromatografía de capa

fina.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Hernández F., Beltrán J. Análisis de residuos de plaguicidas en aguas. Grupo de investigación de Medio ambiente y Recursos Naturales. Departamento de ciencias experimentales. Universidad Jaime I. 1995. 1: 321-355.

2. Guatelli, M. (2005) Toxicos organicos volatiles: Guía de Trabajos Prácticos – Cátedra de Toxicología y Química Legal – Facultad de Farmacia y Bioquímica. Universidad de Buenos Aires. 304 pp.

3. Douglas Skoog. Donald West. Introducción a la química analítica. Ed Reverté. Inglaterra; 2002: 250-255.

4. TLC Visualization Reagents. Recuperado el 10 de junio. Disponible en: http://lcso.epfl.ch/files/content/sites/lcso/files/load/TLC_Stains.pdf

5. Fernández R. Marcha toxicológica de urgencia.Argentina.2007.Disponible en:http://www.bvsde.paho.org/bvstox/e/fulltext/marcha_toxicologica.pdf

6. Pernícola Nilda. Técnicas rápidas para detección en zona de plaguicidas. Centro Panamericano de Ecología Humana y Salud. México.