MSc. ITZELA DAVISIvestigadora Acuícola

Diagnóstico molecular Diagnóstico molecular ggde la de la Hepatopancreatitis Hepatopancreatitis Hepatopancreatitis Hepatopancreatitis Necrotizante (NHPNecrotizante (NHP--B) B) Necrotizante (NHPNecrotizante (NHP B) B) en camarones en camarones en camarones en camarones LitopenaeusLitopenaeus vannameivannameiLitopenaeusLitopenaeus vannameivannameien Panamáen Panamáen Panamá.en Panamá.

INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN

D t á id ió l Durante su rápida expansión, la camaronicultura en Panamá, ha estado muy afectada por las enfermedades, convirtiéndose éstas en el problema convirtiéndose éstas en el problema más grande de la industria, causando pérdidas millonarias pérdidas millonarias .

La mayoría de las enfermedades se hi i id t l últi dé d hicieron evidentes en la última década del siglo pasado, en donde una gran parte de estas fueron causadas por virus, más sin embargo las enfermedades de más sin embargo las enfermedades de origen bacteriano también han representado un riesgo para esta representado un riesgo para esta industria.

•• La responsabilidad que asumimos, como La responsabilidad que asumimos, como institución ligada a la industria camaronerainstitución ligada a la industria camaronerainstitución ligada a la industria camaronera.institución ligada a la industria camaronera.

•• La necesidad de conocer los problemas La necesidad de conocer los problemas •• La necesidad de conocer los problemas La necesidad de conocer los problemas patológicos como ente investigador que patológicos como ente investigador que somossomossomos.somos.

•• La prevención y control que debe haber La prevención y control que debe haber •• La prevención y control que debe haber La prevención y control que debe haber para combatir las enfermedades.para combatir las enfermedades.

¿QUÉ ES NHP¿QUÉ ES NHP--B?B?¿Q¿Q

NHPNHP--B: Es una Alphaproteobacteria gram B: Es una Alphaproteobacteria gram p p gp p gnegativa.negativa.Morfología: Pleomórfica; similar a las Morfología: Pleomórfica; similar a las ricketsiasricketsiasE t d t jid bl d d E t d t jid bl d d Encontrada en tejido blando de camarones Encontrada en tejido blando de camarones marinos.marinos.

Tejido saludable Tejido afectado

LESIONES CAUSADAS POR LA LESIONES CAUSADAS POR LA HEPATOPANCREÁTITIS NECROTIZANTE HEPATOPANCREÁTITIS NECROTIZANTE

(NHP(NHP--B) EN EL ÓRGANOB) EN EL ÓRGANO(NHP(NHP B) EN EL ÓRGANO B) EN EL ÓRGANO HEPATOPANCREÁTICO DEL CAMARÓNHEPATOPANCREÁTICO DEL CAMARÓN

ANTECEDENTESANTECEDENTESEn 1985, en Texas (USA) se observaron anomalías en En 1985, en Texas (USA) se observaron anomalías en poblaciones de camarones cultivados en estanques tales como poblaciones de camarones cultivados en estanques tales como p qp qlento crecimiento, flacidez notoria, reducción del consumo de lento crecimiento, flacidez notoria, reducción del consumo de alimento y reducción en las poblaciones (mortalidad), estudios alimento y reducción en las poblaciones (mortalidad), estudios

i í ii í irealizados revelaron que estas anomalías son consecuencia de realizados revelaron que estas anomalías son consecuencia de la enfermedad Hepatopancreatitis Necrotizante o Necrosis la enfermedad Hepatopancreatitis Necrotizante o Necrosis Hepatopancreática (NHP) la cual ha causado serias epizootias Hepatopancreática (NHP) la cual ha causado serias epizootias Hepatopancreática (NHP), la cual ha causado serias epizootias Hepatopancreática (NHP), la cual ha causado serias epizootias en países como Venezuela, Brasil, Ecuador, Panamá, Costa Rica en países como Venezuela, Brasil, Ecuador, Panamá, Costa Rica y otros, Boletín Nicovita 1996.y otros, Boletín Nicovita 1996.yy

IHHNV1990

SEPTICEMIABACTERIANA

STV1995BACTERIANA 1995

PRINCIPALES ENFERMEDADES ENFERMEDADES

EN LACAMARONICULTURA

EN PANAMÁ

WSSV1999

BP1988

NHPB19931993

- 1993 NHP, FINCAS CAMARONERAS EN PANAMÁ.

- DESCONOCIMIENTO SOBRE LA ENFERMEDAD.

Ó- EVENTOS PATOLÓGICOS ASOCIADOS CON VIBRIOSIS.

- MORTALIDADES NO CUANTIFICADAS.

Signos clínicos observadosSignos clínicos observados

OBJETIVOS GENERALESJ

Detectar la presencia de la Hepatopancreatitis Necrotizante (NHP-B) en

.

p p ( )camarones Litopenaeus vannamei en Panamá.

OBJETIVOS ESPECÍFICOSOBJETIVOS ESPECÍFICOS- Determinar la distribución de la

Hepatopancreatitis Necrotizante en fincascamaroneras de las Provincias de Herrera, Coclé, LosSSantos y Veraguas.

- Detectar la prevalencia de la Hepatopancreatitis- Detectar la prevalencia de la HepatopancreatitisNecrotizante en fincas del área de Coclé.

- Relacionar algunas de las variables presentes en los cultivos con la presencia de la enfermedad.

- Implementar el diagnóstico de esta enfermedad en la Unidad de PCR de la Estación Ing Enrique en la Unidad de PCR de la Estación Ing. Enrique Enseñat.

MATERIALES MATERIALES Y Y

MÉTODOSMÉTODOS

ESTUDIO DE DISTRIBUCIÓN

17 FINCAS

7 COCLÉ 2 LOS SANTOS 5 HERRERA7 COCLÉ 3 VERAGUAS 2 LOS SANTOS 5 HERRERA

PARA UN TOTAL DE 153 MUESTRAS

ESTUDIO DE PREVALENCIA

6 FINCAS

PROVINCIA DECOCLÉ

CMCPPF LRC CMS DPMPLG CMC

192 MUESTRAS

Corte de tejido y fijación en etanol al 95%.Corte de tejido y fijación en etanol al 95%.Corte de tejido y fijación en etanol al 95%.Corte de tejido y fijación en etanol al 95%.

La detección de la NHPLa detección de la NHP--B se realiza con B se realiza con técnicas de biología molecular que consisten técnicas de biología molecular que consisten en una reacción en cadena de la Polimerasa en una reacción en cadena de la Polimerasa en una reacción en cadena de la Polimerasa en una reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) , con el Kit IQ2000(PCR) , con el Kit IQ2000--NHPNHP--B, elaborado B, elaborado específicamente para este fin.específicamente para este fin.e pec c e e p e ee pec c e e p e e

RESULTADOS Y

DISCUSIÓNDISCUSIÓN

ESTUDIO DE DISTRIBUCIÓN

17 FINCAS

7 COCLÉ 3 VERAGUAS 2 LOS SANTOS 5 HERRERA7 COCLÉ 3 VERAGUAS 2 LOS SANTOS 5 HERRERA

2 POSITIVAS1 POSITIVA 1 POSITIVA2 POSITIVAS

ESTUDIO DE PREVALENCIA

6 FINCAS6 FINCAS

PROVINCIA DECOCLÉ

CMCPPF LRC CMS DPM4 POSITIVAS

PLG CMC3 POSITIVAS

192 muestras procesadas

PARA UN 4 % DE PREVALENCIA EN EL ÁREA ESTUDIADA

Positivosevero Positivo

levenegativo

ANÁLISIS E ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE INTERPRETACIÓN DE RESULTADOSRESULTADOS

- NINGUNA DE LAS VARIABLES ÍRELACIONADAS (TEMPERATURA, OXÍGENO,

PH, SALINIDAD Y DENSIDAD DE SIEMBRA) OS Ó C ÓDEMOSTRÓ UNA RELACIÓN DE

DEPENDENCIA SIGNIFICATIVA CON LA PRESENCIA DE LA ENFERMEDAD PRESENCIA DE LA ENFERMEDAD.

VALORES DE LA SALINIDAD AL MOMENTO DE LA TOMA DE MUESTRADE MUESTRA

CMS

POSITIVACMC

CMS

+

POSITIVA

POSITIVA

DPM

CA

S

Serie1+

LRCFIN

C

PPF

PLG

0 10 20 30 40 50 60 70

PPF

SALINIDAD (ppt)

A pesar de que no se encontró dependencia significativa entre la presencia de la necrosis y la salinidad, siendo la

b bilid d d d 0 418 i di l dprobabilidad de error de 0.418, indica que los dos casos positivos se dieron en salinidades que estaban con valores mayores de 43ppt es decir una con salinidad de 43-54ppt y

63la otra con valores de 55-63ppt.

Dependencia entre la necrosis y la salinidadDependencia entre la necrosis y la salinidadFrecuencia ‚Frecuencia ‚Porcentaje ‚31Porcentaje ‚31--42 ‚4342 ‚43--54 ‚5554 ‚55--65 ‚ Total65 ‚ Total

ƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒ ƒƒƒƒƒƒƒƒ ƒƒƒƒƒƒƒƒ ƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒƒ ƒƒƒƒƒƒƒƒ ƒƒƒƒƒƒƒƒ ƒƒƒƒƒƒƒƒ0 ‚ 9 ‚ 9 ‚ 4 ‚ 220 ‚ 9 ‚ 9 ‚ 4 ‚ 22

‚ 37.50 ‚ 37.50 ‚ 16.67 ‚ 91.67‚ 37.50 ‚ 37.50 ‚ 16.67 ‚ 91.67ƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆ

1 ‚ 0 ‚ 1 ‚ 1 ‚ 21 ‚ 0 ‚ 1 ‚ 1 ‚ 2‚ 0.00 ‚ 4.17 ‚ 4.17 ‚ 8.33‚ 0.00 ‚ 4.17 ‚ 4.17 ‚ 8.33

ƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆƒƒƒƒƒƒƒƒˆTotal 9 10 5 24Total 9 10 5 24

37.50 41.67 20.83 100.0037.50 41.67 20.83 100.00Grados de libertad = 2 ChiGrados de libertad = 2 Chi--calculada = 1.745 Prob.= 0.418calculada = 1.745 Prob.= 0.418

CONCLUSIONESCONCLUSIONESCONCLUSIONESCONCLUSIONES-- Estos estudios han demostrado que la Estos estudios han demostrado que la

f d d tá di t ib id l 4f d d tá di t ib id l 4enfermedad está distribuida por las 4 enfermedad está distribuida por las 4 provincias estudiadas.provincias estudiadas.

-- Existe una prevalencia de la enfermedad en Existe una prevalencia de la enfermedad en el área de Coclé.el área de Coclé.

-- Por los resultados obtenidos y la literatura Por los resultados obtenidos y la literatura consultada, podemos concluir que laconsultada, podemos concluir que laconsultada, podemos concluir que la consultada, podemos concluir que la enfermedad puede aparecer tanto en enfermedad puede aparecer tanto en salinidades bajas como en las altas pero quesalinidades bajas como en las altas pero quesalinidades bajas como en las altas, pero que salinidades bajas como en las altas, pero que posiblemente tiene preferencia por las altas. posiblemente tiene preferencia por las altas.