EXTRACCIN

DE

ADN

Lic TM Arturo A. Rivas Crdenas

CIDOS NUCLEICOS

Los cidos nucleicos almacenan la informacin gentica de

los organismos vivos y son los

responsables de la transmisin

hereditaria.

Gran parte del desarrollo fsico de un organismo a lo largo de su vida

esta programado en estas

molculas.

Las protenas que elaboraran sus clulas y las funciones que

realizaran estn todas registradas en

esta cinta molecular.

Existen dos tipos: el ADN y el ARN.

EL ADN

Hay 2 cadenas helicoidales de

polinucletidos enrolladas

a lo largo de un eje

comn.

Estas cadenas permanecen unidas por

puentes de hidrogeno

entre los pares de bases.

Es una macromolcula muy larga , filamentosa y formada

por desoxirribonucletidos, cada uno de ellos compuesto por

una base nitrogenada, un azcar desoxirribosa y un grupo

fosfato.

EL ARN

El ARN tiene una sola hebra.

La pentosa de los nucletidos constituyentes es ribosa.

Sus cuatro bases son: A, G, C, U.

Es la molcula que dirige las etapas intermedias de la sntesis proteica.

TIPOS DE ARN ARNm: Acta como molde y transporta la

informacin para la sntesis protena.

ARNr: Recibe la informacin gentica. Traduce

las protenas. Se ubica en el ribosoma, organela

donde se sintetiza las protenas.

ARNt: transporta los aminocidos hacia

los ribosomas para la sntesis proteica.

EXTRACCIN DE CIDOS NUCLEICOS

HISTORIA

Dr Friedrich Miescher realiz la primera

extraccin de ADN.

Esperaba solucionar los principios fundamentales

de la vida, para determinar la composicin

qumica de las clulas.

Utiliz los leucocitos obtenidos de la pus

recogidos en vendajes quirrgicos y obtuvo

mediante sus pruebas precipitado crudo de

ADN.

1869

La extraccin y purificacin de cidos nucleicos constituye la 1era etapa de la

mayora de los estudios de BM as como de todas las tcnicas de

recombinacin de ADN .

Permiten obtener Ac. N. purificados a partir de diversas fuentes para utilizar

la PCR en estudios moleculares.

La calidad y pureza de los Ac. N. son 2 de los elementos mas importantes en

este tipo de anlisis .

Pueden ser aislados de cualquier material biolgico, tales como tejidos

vivos o conservados, clulas, partculas de virus u otras muestras.

En el pasado el proceso de extraccin y purificacin consume tiempo,

mano de obra y su rendimiento es limitado.

Actualmente existen muchos mtodos especializados que pueden ser

utilizados para extraer biomolculas puras.

Estos mtodos permiten un alto rendimiento de la muestra y la

velocidad, exactitud y fiabilidad de la prueba es mxima; y reduce la

contaminacin cruzada.

Es un proceso por el cual tomos, iones o molculas son atrapadas o retenidas en la superficie de un material.

ADSORCIN:

Es una sustancia que desorganiza la estructura tridimensional en macromolculas protenas, ADN o ARN se desnaturaliza.

AGENTE CAOTRPICO:

Es una sal de amonio cuaternario CTAB (BROMURO DE HEXADECILTRIMETILAMONIO):

Es la rotura de la membrana celular. LISIS CELULAR:

TERMINOLOGA

Es una denominacin utilizada para referirse a pequeas porciones de material aglomerado o comprimido. PELLET O PELET

Es un compuesto tensoactivo inico SDS O NADS (DODECILSULFATO SDICO O LAURILSULFATO SDICO)

Es un tubo de microcentrfuga de forma de un pequeo contenedor cilndrico de plstico, con un fondo cnico y una tapa unida al cuerpo del tubo para evitar su desprendimiento.

TUBOS EPENDORF

TERMINOLOGA

Procedencia

Calidad

Mtodos

Conservacin del DNA

Extraccin de DNA

Sangre entera (EDTA)

Plasma (EDTA) o suero

Clulas aisladas (Mononucleares, en cultivo)

Tejidos (Congelar en ntrgeno lquido lo ms rpido posible para evitar

la degradacin del RNA o DNA)

Lquidos biolgicos

Orina o exudado cervical (C. trachomatis o N. gonorrhorae)

Lquido amnitico para diagnstico prenatal

LCR

Lquido pleural para el diagnstico de metstasis cancerosas

o enfermedades linfoproliferativas

TIPOS DE MUESTRAS

Muestras de la pared bucal para obtener muestras de DNA

Mdula sea para dx de enf. Linfoproliferativas o la deteccin

de metstasis cancerosas.

Esputo para la deteccin de Mycobacterium tuberculosis

Pus estudio de bacterias

Tejidos parafinados o fijados.

Muestras de sangre en papel Guthrie

Sangre entera

Tejidos procesar rpidamente , si no sumergirlo 15- 20s en N lquido y

conservar a 70C hasta la extraccin de DNA. Si no tengo 70, lo corto en

pedacitos pequeos para asegurarme una rpida congelacin

Plasma o suero congelar a 70 o 20 en alcuotas

Orina estable para C. trachomatis y N. gonorreae por 4 das a 4C y 60

das si se congela

CONSERVACIN DE MUESTRAS

Exudado cervical - en medio de transporte se conserva igual que orina.

Bucal . En general estable a T ambiente, pero es conveniente realizar la

extraccin lo antes posible por las bacterias contaminantes

Lquido amnitico. Se procesa enseguida. Si no es posible, congelar el

pellet celular .

Mdula sea y lquido pleural. No debe congelarse (x hemo) se puede

refrigerar a 4C por < de 72 horas pero lo ideal es procesarla

enseguida

Esputo guardar a 2-8 C hasta ser procesada pero debe hacerse

dentro de las 24 horas de la recoleccin (decontaminacin y

concentracin) .

Pus, se puede refrigerar o congelar si no tiene hematies.

Tejido fijado . Especmen de ltimo recurso.

Extraccin vs Purificacin

Extraccin: sacar los componentes desde un compartimento celular.

Involucra:

Lisis de las clulas que contienen a los AN

Inactivacin de nucleasas

Clarificacin: separacin de los AN de los restos celulares (debris).

Purificacin: Separacin de AN:

De protenas solubles

De otros AN no deseados

De Lpidos, carbohidratos

De sales y otros compuestos orgnicos

EL DILEMA

Aplicaciones que involucran manipulacin de ADN necesitan el estado puro

Por qu purificar?

1. Nucleasas que se liberan al lisar las clulas degradan los cidos

nuclicos.

2. Interferentes que inhiben a las enzimas que se usan en ingeniera

gentica.

El desafo es separar los cidos nuclicos deseados desde una mezcla

compleja, manteniendo la integridad de los mismos

Contaminantes: Protenas, lpidos y carbohidratos, sales del medio, iones, etc.

Etapas bsicas de un procedimiento general para Extraccin y Purificacin de AN

Disgregacin o fragmentacin del tejido

Lisis celular

Clarificacin

Purificacin

Anlisis

Cualitativo: Anlisis electroforesis

Cuantitativo: Espectrofotometra UV

Durante todo el procedimiento se

debe usar soluciones y

material estril, adems

de guantes

Estas etapas deben ir

acompaadas de medidas o

agentes que inactiven nucleasas celulares

MTODOS

CONVENCIONALES

Tiocianato de guanidinio-

fenol-cloroformo

Extraccin alcalina

Mtodo de Extraccin

CTAB

Centrifugacin en gradiente de

bromuro de etidio-cloruro de cesio.

EXTRACCIN EN FASE SLIDA

Matrices de Slica

Partculas de vidrio

Tierra de Diatomeas

Perlas Magnticas

Material de intercambio

aninico

MTODOS DE EXTRACCIN DE

CIDOS NUCLEICOS

1. Mtodos de fragmentacin y lisis celular para la extraccin de ADN

El procedimiento ideal de lisis debe tener la fuerza necesaria para romper el

material de inicio (clulas o tejido) y la delicadeza requerida para preservar

las molculas de inters (ADN o ARN).

Mtodos fsicos

Homogenizacin mecnica,

Homogenizacin en solucin

Molienda manual en mortero

Bolitas de vidrio

Sonicacin

Mtodos qumicos

- Detergentes

Etapas en la extraccin de ADN

Mtodos enzimticos

Lysozima: rompe enlaces -1.4- entre N-acetil murmico y N-acetil

glucosamina de peptidoglicn de la pared celular de bacterias

Lyticasa: rompe enlaces -1.3 de glucano de levaduras

Proteasas: rompe enlaces peptdicos de prot. de pared y membrana

plasmtica e interacciones clula-clula.

Las sales caotrpicas ayudan a romper la estructura tridimensional de

macromolculas como las protenas o los cidos nucleicos consiguiendo su

desnaturalizacin.

La adicin de un detergente como el SDS es necesaria a menudo para

eliminar las membranas.

2. Degradacin de la fraccin proteica asociada al ADN.

Se consigue mediante la adicin de una proteasa.

La fraccin proteica puede precipitarse mejor con la ayuda de sales como

el acetato de amonio o el acetato sdico.

3. Purificacin.

Consta de 3 fases:

Precipitacin del ADN. El ADN es insoluble en alcohol, por lo que se

puede precipitar etanol fro o isopropanol y recuperar mediante una

centrifugacin. El alcohol del sobrenadante se llevar las sales aadidas

previamente.

Lavado del pellet. Se realiza con alcohol fro volviendo a centrifugarse

Recuperacin. El sedimento se puede resuspender en agua o tampn Tris

tras ser secado completamente.

La confirmacin de la presencia de ADN se lleva a cabo mediante

electroforesis en un gel de agarosa, posterior tincin con bromuro de etidio y

observacin con luz UV o directamente al espectrofotmetro mediante

espectro de absorcin de 200 a 350 nm.

El ADN purificado se puede cuantificar con un espectrofluormetro mediante

el uso de fluorforos especficos (Picogreen, Molecular Probes)

El paso 3 puede realizarse con la ayuda de minicolumnas equipadas con una

membrana de slica que retiene especficamente el ADN permitiendo el paso

de las molculas y sales que acompaan la reaccin de lisis.

Finalmente se lava con alcohol y se eluye el contenido

Inhibidor Origen

Sales biliares Heces

Polisacridos complejos Heces, material vegetal

Colgeno Tejidos

Grupo hemo Sangre

Melanina y eumelanina Pelo, piel

Mioglobina Tejido muscular

Proteinasas Leche

Iones de calcio Leche, huesos

Urea Orina

Hemoglobina, Lactoferrina Sangre

Inmunoglobina G (IgG) Sangre

EXTRACCIN DE CIDOS NUCLEICOS

POR MTODOS CONVENCIONALES

LOS PASOS GENERALES PARA LA

EXTRACCIN Y PURIFICACIN DE ADN

EXTRACCIN:

Lisis de las clulas que contienen a los AN

Inactivacin de nucleasas

Clarificacin: separacin de los AN de los restos

celulares

PURIFICACIN: De otros AN no deseados

De Lpidos, carbohidratos

De sales y otros compuestos orgnicos

El procedimiento ideal de lisis celular

debe tener la fuerza necesaria para

romper el material de inicio (clulas o

tejido) y la delicadez requerida para

preservar las molculas de inters (ADN

o ARN).

LISIS CELULAR

MTODOS DE FRAGMENTACIN Y LISIS PARA LA EXTRACCIN DE ACIDOS NUCLICOS

MTODOS MECNICOS

- MOLIENDA MANUAL EN MORTERO

- CONGELACIN/DESCONGELACIN

- ULTRASONIDO

MTODOS NO MECNICOS

- AGENTES QUMICOS

Detergentes: CTAB , SDS

ENZIMTICOS

- Proteasas:

lisozima

Gluconasas

peptidasas

- ARNasa

MTODOS

CONVENCIONALES

1.- EXTRACCIN CON TIOCIANATO DE

GUANIDINO FENOL CLOROFORMO

(MTODO DE CHOMCZYNSKI):

Fundamento del mtodo:

Extraccin de cidos nucleicos utilizando una solucin del agente

caotrpico de Tiocianato de Guanidino que genera lisis celular y

degradacin de protenas con la liberacin de los cidos nucleicos.

Posteriormente el uso de solventes orgnicos fenol- cloroformo que

permiten su separacin de restos de protenas, lpidos y la posterior

precipitacin de los cidos nuclicos usando etanol o isopropanol.

EXTRACCIN DE ADN CON SOLUCIN DE

CHONCZYNSKI

Muestra

PULVERIZAR EN

EL MORTERO

SOLUCIN DE TIOCIANATO DE

GUANIDINO A pH BSICO < 11

- LISIS DE MEM. CELULAR Y NUCLEAR

- DEGRADACIN DE PROTENAS E

INACTIVACIN DE ENDONUCLEASAS.

FASE SLIDA RESTOS DE ALTO PESO

MOLECULAR

FASE ACUOSA ADN , RESTOS DE

PROTENAS Y LIPIDOS

FENOL

CLOROFORMO ADN

SUSPENSIN

PROTENAS

Y LPIDOS

DISUELTOS

CENTRIFUGA

CENTRIFUGA

ALCOHOL

ETLICO PURO

ADN EN FORMA

DE FILAMENTOS

CENTRIFUGA

PELLET DE ADN

EXTRACCIN DE ARN CON SOLUCIN DE

CHONCZYNSKI

Homogenizado de

muestra pulveriza

previamente y

conservada en

nitrgeno lquido a

-196C SOLUCIN DE TIOCIANATO DE

GUANIDINO A pH REDUCIDO -

ACETATO DE SODIO FENOL -

CLOROFORMO

FASE ACUOSA ARN TOTAL

FASE ORGNICA

ADN, PROTENAS Y LIPIDOS DISUELTOS

CENTRIFUGACIN A

4C

ALCOHOL

ISOPROPLICO

PELLET DE ARN

TOTAL

FASE ACUOSA

ARN TOTAL

Se usa principalmente para extraccin

de ADN plasmdico de E. coli.

2.- EXTRACCIN DE ADN PLASMDICO POR LISIS

ALCALINA

Fundamento del mtodo:

Se basa en las diferencias en la

desnaturalizacin y renaturalizacin del

ADN plasmdico y el ADN

cromosmico al aplicar NaOH en

presencia de un detergente fuertemente

aninico como el Dodesilsulfato de

Sodio (SDS) y Acetato de potasio.

Detergente SDS

+ NaOH

-Lisis celular

-Desnaturaliza

Protenas ADN cromosmico ADN plasmdico

-ADN plasmdico

se mantiene en

solucin

-Precipitacin:

ADN cromosmico. protenas .

Acetato

de

potasio

CENTRIFUGAMOS

EXTRACCIN DE ADN PLASMDICO POR LISIS

ALCALINA

Crecimiento de Cultivo bacteriano

de E. coli

Cosecha de cultivo

bacteriano

pH FUERTEMENTE

ALCALINO DEL

MEDIO

pH NEUTRO DEL

MEDIO

- Elaborado por Murray y Thompson en 1980.

- Adecuado para extraer y purificar ADN de vegetales y especialmente

indicado para eliminar los polisacridos y los compuestos polifenlicos que

daaran al ADN.

3.- MTODO DE EXTRACCIN CTAB

Fundamento del mtodo:

Las clulas vegetales pueden lisarse con el detergente inico bromuro de cetiltrimetil

amonio (CTAB), que forma un complejo insoluble con los cidos nucleicos en medio

hiposalino. De ese modo, los polisacridos, los compuestos fenlicos y los dems

contaminantes permanecen en el sobrenadante y pueden eliminarse por lavado.

PASOS:

1.- Se debe moler la

muestra despus de

congelacin con

Nitrgeno lquido

2.- Suspender la

muestra en

solucin tampn

de extraccin, que

contiene EDTA,

Tris-HCl y CTAB.

4.- Incrementando la

concentracin salina

3.-Centrifugo, elimino

el sobrenadante y lavo.

5.-Aado etanol

y ARNasa

ADN

puro

EL CTAB CAPTURA LOS LPIDOS QUE INTEGRAN LA

MEMBRANA CELULAR Y NUCLEAR

EL CTAB EN MEDIO HIPOSALINO FORMA UN

COMPLEJO INSOLUBLE CON LOS CIDOS NUCLEICOS.

Superenrrolado: Covalentemente cerrado y muy empacado.

DNA circular. DNA que no se ha empacado.

4.- CENTRIFUGACIN EN GRADIENTE DE

BrEt - CsCl

- Tcnica usada para la Mini preparacin de

ADN plasmdico .

- Requiere de cultivo bacterial a gran escala.

- Separa ADN plasmdico superenrrollado

del ADN plasmdico circular que est en

estado relajado, concentrndolos por

centrifugacin en una gradiente de

Bromuro de Etidio Cloruro de Cesio

(BrEt CsCl.)

CENTRIFUGACIN EN GRADIENTE DE

BrEt - CsCl

Fundamento del mtodo:

El BrEt ingresa y se intercala en la cadena de ADN disminuyendo su

densidad, pero lo hace en mayor cantidad en el ADN plasmdico en

estado relajado que en el ADN plasmdico superenrrollado, pudindose

separar por centrifugacin en el gradiente de densidad de CsCl.

GRADIENTES DE CLORURO DE CESIO

+ BROMURO DE ETIDIO

EL ADN SE SEDIMENTA FORMANDO UNA

CAPA EN LA POSICIN DEL TUBO EN LA

CUAL LA DENSIDAD DE LA SOLUCIN DE

CsCl ES IGUAL A LA DEL ADN.

CENTRIFUGACIN EN GRADIENTE DE

BrEt - CsCl

CENTRIFUGACIN EN GRADIENTE DE

BrEt - CsCl

GRADIENTE DE DENSIDAD DE CsCl sin BrEt GRADIENTE DE DENSIDAD DE CsCl y BrEt

GRADIENTE DE CENTRIFUGACIN CON BrEt - CsCl

El proceso de

absorcin est

basado en los

siguientes principios

y mecanismos de exclusin por afinidad y

tamao.

La interaccin de los puentes de hidrgeno con una

matriz hidroflica bajo condiciones caotrpicas

Intercambio inico bajo condiciones acuosas por

medio de un intercambio aninico

EXTRACCIN DE CIDO NUCLEICO EN FASE SLIDA

Logra una purificacin rpida y eficiente comparada con los mtodos

convencionales.

Los sistemas de Fase Slida absorbern los cidos nucleicos en el proceso

de extraccin dependiendo del pH y contenido de sales del buffer.

PASOS PARA LA EXTRACCIN EN FASE SLIDA

1. se acondiciona la columna para la

absorcin de la muestra. Esto puede ser

hecho usando un tampn a un pH

definido

2. Luego, convierte la superficie o

grupos funcionales en el solido es decir

en una forma particular de qumica

3. El cido nucleico deseado se absorber a

la columna con la ayuda de un alto pH y

concentracin de sal de la solucin

enlazadora.

4. La muestra que fue degradada mediante el

uso de solucin amortiguadora se aplica a la

columna

5. Luego los cidos nucleicos se

eluyen con un tampn de mxima

salinidad

6. se precipita con isopropanol

para lavar y eliminar todos los

restos de impurezas

7. finalmente, se reconstituye el

ADN de elevada pureza en un

tampn de baja salinidad para su

posterior utilizacin o

almacenamiento

Gel de agarosa involucrado en el uso de sales caotrpicas facilitan el

enlazamiento de ADN a vidrio comn de slice.

La absorcin de cido nucleico es el sustrato de vidrio ocurre debido al

mecanismo y principio similar al de cromatografa de adsorcin.

Esta invencin ha descubierto que una mezcla de gel slice y partculas de

vidrio puede ser usada para separar cido nucleico de otras sustancias en

la presencia de soluciones de sales caotrpicas.

Es una roca sedimentaria silcea formada

por micro-fsiles de diatomeas, algas

marinas unicelulares que secretan un

esqueleto silceo llamado frstula.

TIERRA DE DIATOMEAS

(DIATOMITA)

Baja densidad. Alta porosidad. Dureza . Capacidad abrasiva suave. Conductividad trmica muy baja. Alta resistencia a la temperatura. Capacidad muy alta para absorber

lquidos.

PRINCIPALES

USOS

Porosidad y Poder

Absorbente

Purificacin de

ADN

Filtro-ayuda

La diatomita puede ser utilizado para la retirada del DNA en

presencia del agente caotrpico altamente concentrado tal como el

ioduro de sodio, guanidinium hydrochloride y guanidinium

thiocyanate.

DIATOMITA

Quitan el DNA trenzada doble

pero no el ARN o las protenas.

La diatomita resultante enlazada con el ADN es

luego lavado con un tampn que contiene alcohol.

Este es luego dejado de lado y el ADN es eludo en un

tampn bajo en sal o en agua destilada.

La diatomita tiene

contenido de slice

hasta en un 94%. Ha

sido usado para

filtracin y en

cromatografas.

La separacin magntica es una manera simple y

eficiente el cual es utilizado actualmente en la

purificacin de cido nucleicos.

PURIFICACIN DE CIDO

NUCLEICO BASADO EN

PARTCULAS MAGNTICAS

Se utilizan

transportadores

magnticos.

Preparados A partir de

biopolmeros.

Polmeros sinttico

Vidrio poroso Basado en

materiales

magnticos

inorgnicos

Materiales con una

gran rea

superficial , son

preferidos para ser

usados en la

adherencia de

cidos nucleicos.

XIDO DE HIERRO

xido de hierro (II, III) u

xido ferroso frrico

(Fe3O4).

Magnetita

Los momentos

magnticos de los

distintos cationes de

hierro del sistema se

encuentran

fuertemente

acoplados.

Esta molculas van

actuar como un

imn.

Purificacin de

cidos nucleicos

en base

a:microesferas

magnticas .

Uso de perlas magnticas

cuya superficie tiene una

carga que se puede cambiar

basndose en el pH o

tampn.

A pH bajo, cargados

positivamente, atraen a las

molculas de ADN con

carga negativa, permitiendo

que las Prot y los

contaminantes se eliminen

mediante lavado.

El cido nucleico

es luego eludo de

las partculas

magnticas con un

tampn de elucin.

Purificacin de cido nucleico basado en

partculas magnticas

FASE ACUOSA: ARN

FASE ORGANICA: ADN Y

PROTEINAS

MUESTRA + Fenol equilibrado:Cloroformo (1:1) desproteiniza e inhibe nucleasas

El ADN y las proteinas pueden ser aislada de la fase orgnica por precipitacin con etanol o isopropanol .

ARN precipito a partir de la fase acuosa con isopropanol.

PH: reducido

Extraccin Fenol-Cloroformo: ADN

y/o ARN

Sistema de extraccin

automatica

Es un Sistema de instrumentacin muy grande, complejo y

costoso, diseado para un alto volumen de procesamiento de

muestras.

El hecho de automatizar el proceso de extraccin de cidos

nucleicos es beneficioso para una serie de razones:

Reduce el tiempo de trabajo.

Disminuye los costos laborales.

Aumenta la seguridad de los trabajadores

Aumenta la reproducibilidad calidad de los resultados.

Sobre todo minimiza el riesgo de contaminacin cruzada.

MagNA Pure LC 2.0

sistema de manipulacin de partcula

paramagntica para procesar la muestra y

proporcionar un rendimiento constante y

pureza ya que no hay detectable

contaminacin cruzada, entre las

muestras

El proceso de extraccin completo

dura unos 20 minutos desde el

comienzo hasta el final

SE DAN POR TRES PASOS SENCILLOS

Aadir la muestra lquida al cartucho del reactivo.

Oprimir el botn de Inicio. El ADN es eludo en un tampn de elucin al final del proceso

Colocar el cartucho del reactivo dentro de la mquina.

1

3

2

Magna pure

Roche Applied Science trabaja en el desarrollo de sistemas de

alta tecnologa para aplicacin en Genmica y Protemica

Pequeo tamao basado en el uso de

partculas magnticas.

El cido nucleico obtenido es altamente puro

Ausencia de contaminacin cruzada mediante

filtros Hepa.

Descontaminacin por rayos uv

Demora Mximo de 30 minutos

Es posible trabajar con un amplio rango de

muestras (sangre total, suero, plasma, tejidos,

clulas en cultivo, etc.),

MagNA Pure LC 2.0

Unidad inicio

Unidad de elucin y post-elucin

Unidad procesamiento

1

3

2

Permite hasta 32 aislamientos de cidos nucleicos

(DNA, RNA, , mrna y cidos nucleicos totales)

Muestras (tejidos, sangre, suero, clulas perifricas

mononucleadas, clulas blancas, tejidos vegetales

Realiza labores de pre-pcr en distintos formatos

La automatizacin ha ayudado en el aumento

del rendimiento y mejora la fiabilidad del

proceso

Por lo tanto las estaciones de trabajo robtico para extraccin

de cidos nucleicos deben cumplir con una verdadera Walk-away , automatizacin, lo que significa

un proceso totalmente automatizado

un sistema porttil de extraccin , ofrece varias ventajas , tales como la mano de obra reducida,

reduccin de los residuos y aumento de la velocidad

conclusiones

Permiten adquirir mejores resultados

Cantidad de aplicaciones bioqumicas como son:

relaciones de parentesco,

detectar enfermedades hereditarias

conocer genes de una persona, clonacin, etc.

Automatizacin de cido nucleico ,

Potencialmente beneficioso:

Reducir el tiempo de trabajo, la mano de obra, costos

Aumento de seguridad de los trabajadores

Oportunidad en la reproducibilidad y la calidad de los resultados