ComienzosDesarrollada por Mikhail Tswett, en 1906 con el fin de separar los colorantes que componen a las plantas.

ComienzosConsista en una columna de vidrio rellena de CaCO3 a la cul se le colocaba la muestra en la parte superior y se le circulaba ter de etilo, logrando que las sustancias ms afines al solvente salieran de la columna ms rpidamente que las menos afines.

Definicin La cromatografa es una tcnica que permite separar los diferentes componentes de una mezcla compleja. La separacin se logra por diferencias en la movilidad relativa de los solutos, lo cual se logra por las distintas interacciones fsicas y qumicas entre los componentes de la cromatografa.

Componentes bsicos de una cromatografa Fase estacionaria Fase mvil Soluto o muestra

ClasificacinSe aplican varios criterios De acuerdo al soporte Al tipo de equilibrio que se establece en la separacin Al estado de agregacin de la fase mvil

Segn el soporteCromatografas Planas Ventajas Sencillas Rpidas Bajo costo

Cromatografas Planas Desventajas Solo con fines analticos Poca eficiencia en la separacin No se adapta a sistemas automatizados

Segn el soporteCromatografas en columnaVentajas Mas verstiles Se adaptan a sistemas automatizados Mayor resolucin Mayor capacidad de carga Posibilidad de escalado a nivel productivo

Cromatografas en columnaDesventajas Necesidad de equipamiento Alto costo inicial Requiere personal capacitado

Segn el tipo de equilibrioMtodo especificoLquido lquido

Fase estacionariaLquido adsorbido sobre un slido Slido

Tipo de equilibrioDistribucin entre lquidos inmiscibles Adsorcin

Lquido - slido

Resinas de Intercambio inico Gel

Intercambio inico

Exclusin

Slidos/gel

Afinidad

Clasificacin segn equilibrio

Cromatografa de reparto: El soluto est en equilibrio entre el lquido de la fase mvil y el de la fase estacionaria por diferencias de solubilidades. Cromatografa de adsorcin: Fenmeno superficial en el cual las partculas del soluto son adsorbidas por la fase estacionaria.

Clasificacin segn equilibrio

Cromatografa de intercambio inico: Los iones del soluto son retenidos por los grupos funcionales que se encuentran en la fase estacionaria. Cromatografa de exclusin molecular: No hay equilibrio de separacin . Se separan por el tamao partculas. Cromatografa de afinidad: reaccin inmunolgica donde el soluto es el antgeno y los anticuerpos se encuentran adsorbidos en la fase estacionaria.

PARAMETROS A CONSIDERAR EN CROMATOGRAFIA

Algunos conceptos previosCROMATOGRAMATiempo de retencin= tiempo que transcurre desde la inyeccin de la muestra hasta que el soluto alcanza el detector( a veces esta magnitud se mide en volumen de elucin)

Tiempo muerto= es el tiempo necesario para que una especie que no se retiene en la fase estacionaria alcance el detector

Ancho del pico en la base= es el tiempo transcurrido desde que el soluto alcanza el detector hasta que lo abandona

Algunos conceptos previosFactor de retraso (Rf)= factor que se obtiene experimentalmente y me permite establecer la distancia recorrida por un soluto en relacin a la fase mvil. Aplica en las cromatografas PLANAS

Rf= Distancia recorrida por la muestra Distancia recorrida por el solvente

Ejemplo 1Se realizo un cromatografa en capa delgada para determinar la presencia de rojo cobalto en una muestra de pigmentos textiles. Para tal caso se corri junto con las muestras un patrn de colorantes que contena la muestra problema . Una vez terminada la cromatografa se midi la distancia recorrida por el solvente arrojando un valor de 8,6 cm; la muestra presento una distancia recorrida de 5,6cm y 7,4cm mientras que el patrn presento medidas de 2.9 cm, 5,7cm y 6,8cm.cual es el valor de Rf de las muestras y el patrn de colorantes? se encuentra el colorante en cuestin en la muestra? Patrones Rf= d muestra/d solvente 2.9/8.6=0.33 5.7/8.6=0.66 6.8/8.6=0.79 Muestras Rf= d muestra/d solvente 5,6/8,6=0.65 7,4/8,6=0.86

Constante de distribucin(Kc)= Valor terico que relaciona la concentracin de un soluto entre la fase mvil y la fase estacionaria. Kc=Cs CmConcentracin molar del analito en la fase mvil Concentracin molar del analito en la fase estacionaria

Factor de retencin (k) = factor que se puede determinar experimentalmente y permite comparar la velocidad de migracin de los diferentes solutos.

k= Tr Tm Tm

IMPORTANTE:k