16-10-2013

1

I.F.I.INMUNOFLUORESCENCIA

INDIRECTA

T .M .Paola Hernndez Pino

LABORATORIO INMUNOLOGIA

HOSPITAL CLINICO U. DE CHILE

OCTUBRE 2013

CONTROL DE CALIDAD

CONTROL NEGATIVO: PBS

SUERO

CONTROL POSITIVO DE PATRON HOMOGENEO

MOTEADO

CENTROMERO

NUCLEOLAR

ENDOMISIO

MITOCONDRIAL

FACTORES A CONSIDERAR EN CALIDAD

TECNICA

PROCEDIMIENTO

MICROSCOPIO

TECNICA

MANUAL

AUTOMATICA

SUSTRATO

Clulas HEp-2

Neutrfilos humanos

Critidia Luciliae

PROCEDIMIENTO

SUSTRATO

Dilucin del suero

Aplicar muestra diluida sobre sustrato

PROCEDIMIENTO LAVADO

INCUBACION

CONJUGADO (FITC)

MEDIO DE MONTAJE

CUBRE OBJETO

FLUORESCENCIA

D FILTRO PRIMARIO

H FILTRO

SECUNDARIO (BARRERA)

F OBJETIVOS

FLUORESCENCIA

La fluorescencia ocurre cuando una molcula

absorbe luz, se excita y luego emite luz de

una longitud de onda ms larga.

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halgeno de tungsteno.

arco de vapor de mercurio

nueva

vieja

FUENTES DE LUZ

EXTINCION DE FLUORESCENCIA

IFI

ANA

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3

Patron: Homogeneo

Pocillo 2

Patron: moteado

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Anticuerpo: antinucleares

Patron: nucleolar

Pocillo 1

Patron: Nucleolar / Moteado / Homogeneo

Puntos fluorescentes en Mitosis

Patron: Nuclear dots

Patron: Huso Mitotico

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5

CITOPLASMATICO GRANULAR CITOPLASMATICO FIBRILAR

IFI

ANCA

Pocillo 5

ANCA

Patron: c ANCA

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6

IFI

DNA

IFI

ENDOMISIO

Pocillo 1

Muestra: Esofago de mono

Anticuerpo: Endomisio (EMA)

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Esofago de Mono

Patron: Anti Endomisio

IFI

AMA,AML,ACPA

Estomago de rata

Patron: Musculo liso

ACS ANTICELULAS

PARIETOGASTRICAS

Patron: Mitocondrial