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INFECCIONES SEMINALES EN EL INFECCIONES SEMINALES EN EL VARÓN INFÉRTILVARÓN INFÉRTIL

Residentes Bioquímicas: Cabrerizo Romina Flores Andrea

Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari (UBA),

2009

Center for Disease Control; CDC 2000.

INFECCIONES SEMINALES EN EL VARÓN INFÉRTIL

La infertilidad es un problema de distribución mundial y magnitud creciente.

Infecciones genitales, consideradas causas importantes de trastornos reproductivos (MORBILIDAD).Un proceso infeccioso puede causar:

Primer Consenso Argentino sobre Diagnóstico de las Infecciones de las VíasEspermáticas y Glándulas Anexas en Infertilidad, 2001.

INFECCIONES SEMINALES EN EL VARÓN INFÉRTIL

Daño testicular primario.

Obstruir el tracto de salida de la vía seminal.

Afectar la funcionalidad de los espermatozoides.

ESTUDIO DEL VARÓN INFÉRTIL

En el estudio del varón infértil, generalmente las infecciones son SUBCLÍNICAS Y ASINTOMÁTICAS

LABORATORIO

Espermograma.

Estudios hormonales.

Estudios microbiológicos.

TRACTO GENITAL MASCULINOESPERMA: Suspensión de espermatozoides en plasma seminal.

TESTÍCULO:Espermatogénesis.Espermogénesis.

EPIDÍDIMO

CONDUCTOS DEFERENTES

AMPOLLA DEFERENTE

CONDUCTOS EYACULADORES

PRÓSTATA

VESÍCULAS SEMINALES

URETRA

ESPERMA

VOLUMEN: 2-6 mL.

ASPECTO Y COLOR: Opalescente grisáceo.

CONSISTENCIA: Viscosa (hilo de 2 cm); coagula espontáneamente.

pH: 7,2-7,8.

TRACTO GENITAL MASCULINO

Caracteres físicos:

TRACTO GENITAL MASCULINOESPERMA

Composición química:

<10% Espermatozoides.

>90% Plasma seminal.

40-60% Vesícula Seminal.15-30% Próstata.

~10% Epidídimo, Glándulas Uretrales (de Littré) y Bulbouretrales (de Cowper).

ESPERMA

Fructosa.

Prostaglandinas.

Aminoácidos.

Iones fósforo y potasio.

Ácido cítrico y ascórbico.

TRACTO GENITAL MASCULINO

Vesícula Seminal:

ESPERMA

Ácido cítrico.

Enzimas proteolíticas.

Fosfatasa ácida.

Iones calcio, sodio, zinc y potasio.

Factor antibacteriano prostático (PAF).

TRACTO GENITAL MASCULINO

Próstata:

*Colonización sólo en zona de uretra distal o anterior.

*Resto de su superficie, ESTÉRIL (libre de bacterias).

TRACTO GENITAL MASCULINOFLORA HABITUAL

TRACTO GENITAL MASCULINOFLORA HABITUAL

Staphylococcus aureus.Staphylococcus coagulasa negativos.Streptococcus grupo viridans.Streptococcus agalactiae.Enterococcus faecalis.Enterococcus spp.

Bacilos Gram positivos:Corynebacterium spp. Brevibacterium spp.

TRACTO GENITAL MASCULINOFLORA HABITUAL

Bacilos Gram negativos:Enterobacterias.Acinetobacter baumannii.

Bacterias anaerobias:Propionibacterium spp.

Ureaplasma urealyticum.

Micoplasmas:

VÍAS DE ACCESO

Canalicular ascendente: Ascenso de los microorganismos responsables de la infección desde la zona uretral o por reflujo de orina infectada.

Diseminación hematógena: Llegada de los microorganismos desde un foco distal.

Extensión directa: Llegada de los microorganismos desde el recto por medio de los canales linfáticos.

INFECCIONES SEMINALES

INFECCIONES SEMINALES DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Método GOLD STANDARD

Cultivo de Semen-Espermocultivo (OMS).

Método de SCREENING.

Stamey y Meares + Semen.

Cuantificación de polimorfonucleares en semen

Método: Reacción de Peroxidasas

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOCUANTIFICACIÓN DE POLIMORFONUCLEARES

AH2 + H2O2 A + 2 H2O

Fundamento: Visualización de la actividad de la enzima leucocitaria peroxidasa, en Cámara de Neubauer.

Rápido.

Específico.

Costo-efectivo.

COLOR CAFÉ

OSCURO

(C6H4NH2)2

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOCUANTIFICACIÓN DE POLIMORFONUCLEARES

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOCUANTIFICACIÓN DE POLIMORFONUCLEARES

Leucocitospermia: ≥ 0,5 x 106 PMN /mL

Ausencia de leucocitospermia NO EXCLUYE posibilidad de infección en individuos asintomáticos infértiles.

Un resultado positivo ÚNICO de leucocitospermia NO requiere tratamiento (TTO).

LEUCOCITOSPERMIA NO ES BUEN MARCADOR DE

INFECCIÓN.

Yanushpolsky y co. Fertil Steril 1996; 5: 822-5.

INFECCIONES SEMINALES DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Método GOLD STANDARD

Cultivo de Semen-Espermocultivo (OMS).

Método de SCREENING.

Stamey y Meares + Semen.

Cuantificación de polimorfonucleares en semen

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENDIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Orina de Primer Chorro ( O1).

Orina de Chorro Medio (O2).

Secreción prostática (SP).

Orina Post Masaje Prostático

(OPM).

Semen (S).

Muestras:

Los conteos de colonias son ≥ 1 log10 con respecto a los conteos de la orina de la primera porción (O1), o

Los conteos de colonias de la orina post masaje prostático (OPM) son ≥ 1 log10 con respecto a los conteos de la orina de la primera porción (O1).

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENDIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Se consideran positivos SP o S cuando:

TOMA DE MUESTRA

72 hs. de abstinencia sexual.

Retención urinaria de 3 hs. y deseo de orinar.

No presentar secreción uretral, ni infección urinaria.

Higienizar la zona con agua y jabón, enjuagar con abundante agua.

Retraer el prepucio y secar con gasa estéril.

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMEN

Recoger 10 mL de orina en frasco estéril.

Microscopía: Gram y fresco.

Cultivo: AS, CLDE/CPS/Levine, Saboreaud

(realizar recuento de colonias) y caldo

BHI o tioglicolato.

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENPROCESAMIENTO

Orina de Primer Chorro (O1):

Recoger la segunda porción de la orina (igual que en urocultivo).

Procesar de igual manera que O1.

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENPROCESAMIENTO

Orina de Chorro Medio (O2):

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENPROCESAMIENTO

Secreción prostática (SP):

Efectuar masaje prostático y recoger la muestra en frasco estéril.

Tinciones: Gram, IFD para estudio de Chlamydia.

Cultivo: AS, Levine, Saboreaud (realizar recuento de colonias) y caldo BHI o tioglicolato.

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENPROCESAMIENTO

Orina Post Masaje Prostático (OPM):

Recoger la orina restante luego de realizado el masaje prostático.

Procesar de igual manera que O1 y O2.

MÉTODO DE STAMEY Y MEARES + SEMENPROCESAMIENTO

Semen (S):

Obtener muestra por masturbación, recoger el volumen total en un frasco estéril.

Tinciones: Gram, Ziehl Neelsen, IFD para estudio de Chlamydia.

Cultivo: AS, Levine (realizar recuento de colonias), caldo BHI o tioglicolato y caldo Urea para el estudio de Ureaplasma.

Método GOLD STANDARD

Cultivo de Semen-Espermocultivo (OMS).

Método de SCREENING.

INFECCIONES SEMINALES DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Stamey y Meares + Semen.

Cuantificación de polimorfonucleares en semen

Se considera una muestra positiva aquella cuyo conteo de colonias es ≥ 103

UFC/ml de bacterias de patogenicidad reconocida ó ≥ 104 UFC/ml de bacterias potencialmente patógenas y solamente

una especie aislada.

Muestra: Semen.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOCULTIVO DE SEMEN-ESPERMOCULTIVO

Método GOLD STANDARD

Cultivo de Semen-Espermocultivo (OMS).

Método de SCREENING.

INFECCIONES SEMINALES DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Stamey y Meares + Semen.

Cuantificación de polimorfonucleares en semen

Se considera el semen positivo cuando el conteo de colonias es ≥ 1 log10 con respecto al conteo de la orina

de la primera porción (O1).

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOMÉTODO DE SCREENING

Muestras: O1 y Semen.

COMPARACIÓN DE MÉTODOSMÉTODO VENTAJAS DESVENTAJAS LIMITACIONES

STAMEY Y MEARES +

SEMEN

*Detecta el 100% de las infecciones prostáticas y seminales.

*Se procesan 5 muestras. *Se requiere de un médico para el masaje prostático.

*Elevado costo.

*Las muestras deben ser obtenidas en el laboratorio.

*Requiere de microbiólogos experimentados para interpretar los resultados.

CULTIVO DE SEMEN

*Se procesa una sola muestra que el paciente puede remitir al laboratorio.

*Bajo costo.

*En 1/4 de los pacientes se pierde el diagnóstico de prostatitis.

*Se desconoce la flora uretral, lo que puede conducir a errores diagnósticos.

SCREENING

*Se procesan 2 muestras que el paciente puede remitir al laboratorio.

*Bajo costo.

*En 1/4 de los pacientes se pierde el diagnóstico de prostatitis.

*Un resultado negativo NO descarta prostatitis.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOUREAPLASMA UREALITICUM

Muestras: O1 y Semen.

Método: Diluciones seriadas en Caldo U9 suplementado con urea Fundamento: Visualización de la actividad

de la enzima mycoplasmática ureasa, por viraje del indicador.

Método semicuantitativo: Se expresa en unidades cambiadoras de color (UCC)/mL.

(NH2)2CO +H2O CO2 + 2NH3

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOUREAPLASMA UREALITICUM

Se considera el semen positivo cuando el conteo de colonias es ≥ 1 log10 con

respecto al conteo de la orina de la primera porción (O1).

CHLAMYDIA TRACHOMATISDIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

Muestras: Semen y/o SP.

Método: IFD (Syva trak kit Chlamydia Direct IF)

Fundamento: Visualización en microscopio de fluorescencia de fluorocromo (FITC), unido a AcMo dirigido contra polisacárido específico de género.

S: 80-90% / E: 98-99%.

No permite el recuento diferencial, por lo tanto, el sitio de infección no puede ser determinado.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOCHLAMYDIA TRACHOMATIS

Se considera muestra POSITIVA cuando se observan 10 o más cuerpos elementales/campo.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIOCHLAMYDIA TRACHOMATIS

Imagen positiva: Se observan puntos verdes brillantes (“manzanas”).

Imagen negativa

INFECCIONES SEMINALES TRATAMIENTO

Condiciones que debe cumplir un antibiótico (ATB), para atravesar la barrera hemato-prostática y hemato-epididimal:

Liposolubilidad.

Bajo grado de ionización en plasma.

Baja unión a proteínas.

Radio y estructura molecular pequeña.

INFECCIONES SEMINALES TRATAMIENTO

Fluoroquinolonas.

Trimetoprima-sulfametoxazol.

Tetraciclinas.

Macrólidos.

Dosis de ATB: De acuerdo al patrón de sensibilidad de los microorganismos.

Duración del TTO: En discusión (hasta 3 meses).

TRATAMIENTOFALLAS

Presencia de cálculos.

Formación de biofilms.

Obstrucción de conductos.

Administración inadecuada de ATB.

Tiempo insuficiente de TTO.

Se considera la Velocidad Bactericida del Semen como método útil para monitorear la evolución del TTO.

Se debe constatar la negativización de los cultivos a los 3 y 12 meses post finalizado el TTO (CURA BACTERIOLÓGICA).

TRATAMIENTOMONITOREO

Objetivo: Monitorear en pacientes infectados, el comportamiento del microorganismos frente al ATB elegido.

Muestras: Plasma seminal de 4 pacientes infectados, tomadas el 1, 2 y 3° mes intra TTO y 2 meses post finalizado el TTO.

Metodología: Velocidad Bactericida del Semen.

SEGUIMIENTO DEL TRATAMIENTO ANTIBIOTICO EN PACIENTES CON INFECCION DE LA VÍA SEMINAL

Santoianni J; Predari SC; Gutiérrez M; De Paulis A Departamento de Microbiología, Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo LanariJornadas Argentinas de Microbiología, Rosario 2008.

TRATAMIENTOMONITOREO

Datos:

TRATAMIENTOMONITOREO

Metodología: Se enfrentó a cada una de las muestras (4 por paciente), contra el microorganismo causal de la infección.

Se realizo un control de crecimiento para asegurar la viabilidad del microorganismo (Control Positivo).

Se realizaron recuentos de los cultivos a las 6 y 24 hs.

MICROORGANISMO

TRATAMIENTO

1 mes TTO.

2 meses TTO.

2 meses post TTO.

3 meses TTO.

Control +

MONITOREO: ESQUEMA

TRATAMIENTOMONITOREO

Resultados:

PACIENTE ATMS fue

BACTERICIDA a partir de las 24hs.

TRATAMIENTOMONITOREO

Resultados:

PACIENTE B CIP fue

BACTERICIDA a partir de las 6 Hs.

TRATAMIENTOMONITOREO

Resultados:

PACIENTE CE. faecalis fue TOLERANTE a

MINO a las 24hs.

TRATAMIENTOMONITOREO

Resultados:

PACIENTE DC. Xerosis fue

TOLERANTE a TMS a las 24hs.

MONITOREO DEL TRATAMIENTOCONCLUSIONES

Con la administración del ATB adecuado durante 3 meses, se logró la CURA BACTERIOLÓGICA y no se observó recidiva en el control de TTO al año.

Para evaluar el mejor esquema terapéutico son necesarios estudios prospectivos con un número significativo de pacientes.

INFECCIONES SEMINALES CONCLUSIONES GENERALES

La infección del tracto genital masculino es un factor importante en infertilidad.

El estudio microbiológico se debe indicar en todo varón infértil, con alguna alteración en el espermograma, con o sin leucocitospermia.

El método de Stamey y Meares + semen, considerado GOLD STANDARD, permite localizar el sitio de infección y arribar al TTO adecuado.

El método mínimo de elección es el de SCREENING (O1 y S).

INFECCIONES SEMINALES CONCLUSIONES GENERALES

Todo resultado positivo para Chlamydia trachomatis se debe tratar, independientemente de su localización.

Los ATB a utilizar deben ser capaces de atravesar las barreras hemato-prostática y hemato-epididimal.

Los TTO de larga duración han demostrado ser los más efectivos; para lograr acortamiento de los mismos, se requiere de estudios prospectivos con elevado número de pacientes.

INFECCIONES SEMINALES BIBLIOGRAFÍA“1º CONSENSO ARGENTINO SOBRE DIAGNOSTICO DE LAS INFECCIONES DE LAS VIAS ESPERMATICAS Y GLANDULAS ANEXAS EN INFERTILIDAD”Jorge E. Santonianni, Eduardo Mormandi, Jorgelina Smayevsky, Alberto Nagelberg, Alicia Farinati,Claudio Terradas y Silvia C. Predari. Sociedad Argentina de Bacteriología Clínica y Sociedad Argentina de Andrología, 2001.

IMPROVEMENT OF SEMEN QUALITY IN INFECTED ASYMPTOMATIC INFERTILE MALE AFTER BACTERIOLOGICAL CUREEstela M. Cardoso, Jorge E. Santoianni, Adriana N. De Paulis, Juan A. Andrada, Silvia C. Predari, Alejandro L. Arregger. MEDICINA 1998; 58:160-164.

ASSESSMENT IN THE DIAGNOSIS OF MALE CHRONIC GENITAL TRACT INFECTIONJorge E. Santoianni, Adriana N. De Paulis, Estela M. Cardoso, Beatriz N. Gonzalez, Silvia C. Predari. MEDICINA 2000; 60: 331-334.

SEGUIMIENTO DEL TRATAMIENTO ANTIBIOTICO EN TRES PACIENTES CON INFECCION DE LA VÍA SEMINAL Santoianni J; Predari SC; Gutiérrez M; De Paulis A . Jornadas IDIM Lanari, 2008.

INFECCIONES SEMINALES BIBLIOGRAFÍAINFERTILIDAD MASCULINA, ASPECTOS CLÍNICOS E INVESTIGA CIONES BIOLÓGICASC. Poirot, B. Cherruau. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana, 2005; 39 (2): 225-41.

ENDOCRINOLOGÍA BÁSICA Y CLÍNICA Francis S. Greenspan, David G. Gardner. 6ta edición, 2005.

INFECCIONES POR CHLAMYDIA TRACHOMATIS Y MYCOPLASMA SP. SU RELACIÓN CON LA INFERTILIDAD MASCULINA. Guadalupe Gallegos-Ávila. Vol. XVlll, Núm. 3, Julio-Septiembre 2003. pp 106-112.

CAST

Laboratorio de Microbiología del IDIM Lanari.

Doctores: Jorge Santoianni, Adriana De Paulis, Miguel Gutierrez, Silvia C. Predari.

Graciela Vazquez.

Valeria, Mariana, Gabriela y Diego.

Karina Guiñazu y Patricia Indaburu.

Servicios de Metabolismo e Histocompatibilidad.

GRACIAS!!GRACIAS!!

EQUIPO IEQUIPO I

JORGEJORGE

GRACEGRACE

EQUIPO IIEQUIPO II

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FIN