INFORME DE VISITA AL CENTRO DE ACUICULTURA

MORRO SAMA – TACNA

INTRODUCCION

La importancia de la acuicultura está creciendo día a día, lo que hace imperativo que se

desarrollen mejores técnicas de manejo o gestión de reproductores y de producción de

larvas, a fin de asegurar el éxito en la producción de semilla.

En diversos rubros del cultivo acuícola, la reproducción artificial intensiva es la mejor

manera de lograr una producción de huevos de buena calidad, en una cantidad que

satisfaga con oportunidad el requerimiento de post larvas o alevines de las granjas de

engorde.

Las técnicas que se aplican con dicho fin permiten una incubación y eclosión de los

huevos en condiciones controladas, lo cual posibilita la obtención de altas tasas de

supervivencia de larvas.

La producción de semilla (post larvas o alevines) comprende básicamente la cría y

manejo de los reproductores, la producción de huevos, su incubación y la cría larvaria;

labores que se complementan con tareas o acciones que facilitan la producción, tales

como mantenimiento de las instalaciones, equipos y materiales, así como registro y

organización de los datos.

1. OBJETIVOS

1.1. Objetivo General:

Conocer el desarrollo de las investigaciones y producción de organismos acuáticos en el centro de Acuicultura “Morro Sama” de Tacna.

1.2. Objetivos Específicos:

Conocer el cultivo y manejo de Microalgas (Tetraselmis sp., Isochrysis sp., Nanochloris sp., Chaetoceros sp.).

Conocer el cultivo y manejo de Rotíferos. Conocer el cultivo y manejo de Artemia salina Conocer el cultivo y manejo de Abalón Californiano (Haliotis rufescens) Conocer el cultivo y manejo de Lenguado (Paralichthys adspersus) Conocer las Instalaciones y su funcionamiento dentro del centro Acuícola.

2. MARCO TEORICO

2.1. Datos Generales del centro de Acuicultura “Morro Sama” de Tacna

El centro de Acuicultura Morro Sama se encuentra ubicado en la localidad de Morro Sama, distrito de Sama Las Yaras, provincia de Tacna, Región Tacna. Este centro esta especializado en la producción de Lenguado, Microalgas, Microcrustaceos, Rotíferos y Abalon Rojo de California. En la siguiente tabla se muestran algunos datos referenciales y generales de la zona. Y en las figuras 1 y 2 se muestran la vista panorámica y satelital del centro acuícola.

Tabla Nº1: Datos Generales del Centro Acuícola Morro Sama.

UBICACIÓNDistrito Sama las

YarasLongitud 18º 0’ 0.30’’

Provincia Tacna Latitud 70º 53’ 12.26’’Región Tacna Vía referencial

de AccesoCarretera Costanera Tacna - Ilo Km. 80 DPA Morro Sama.

DATOS GENERALESCategoría Centro de

acuiculturaVías de Acceso Asfaltada y

AfirmadaÁrea total 30

HectáreasCiudad principal cercana

Tacna

Inicio de Actividades

1997 Responsable del Centro acuícola

Víctor Chili Layme

Trabajadores 10 beneficiarios 6 Asociaciones de pescadores artesanales.

ESPECIES TRABAJADASLenguado (Paralichthys adspersus)

Cultivo Masivo de Alevines de Lenguado

Turbot (Scophthalmus maximus)

Adaptación de la Tecnología de cultivo en la fase de engorde

Abalon Rojo de California (Haliotis rufescens)

Adaptación de la Tecnología de cultivo en la fase de engorde

Alimento Vivo Producción masiva de Artemias, Rotiferos y Microalgas.

Figura Nº1: Vista Panorámica del Centro Acuícola de Morro Sama

Fuente: FONDEPES (2010)

Figura Nº2: Vista Satelital del Centro Acuícola de Morro Sama

Fuente: FONDEPES (2010)

El centro de Acuicultura Morro Sama se encuentra ubicada a 75km de la carretera costanera Tacna –Ilo; localizado entre el Faro de la Marina (600m) y el Puerto Pesquero Grau(1km), en el distrtito de Sama, provincia de Tacna .Departamento de Tacna Region Tacna .

El area terrestre tiene una cobertura delimitada , por las siguientes coordenadas :.

Vertice :

B 17º59´48.2´´

70º52´55.1´´

C 18º00´33.9´´

70º52´44.8´´

D 18º00´33.9´´

70º52´56.0´´

E 18º00´26.6´´

70º53´06.0´´

F 18º00´13.0´´

70º53´06.0´´

G 18º00´13.0´´

70º53´15.5´´

H 17º59´48.2´´

70º53´03.8´´

DATOS FISICOS ,QUIMICOS Y CLIMATOLOGICOS DE LA ZONA

Condiciones del mar :

Temperatura .- El area oceanografica presenta temperaturas superficiales que varian entre 15.85 y 16.15 ºC, con un valor promedio de 15.96ºC.La temperatura del fondo presenta valores entre 15.05 y 15.50ºC con una gradiente ternica de 0.1ºC. Salinidad.- La salinidad superficial presenta valores entre 34.87 y 34.82 ‰ y en el fondo la salinidad fluctua entre 34.88 y 34.85‰. Oxigeno Disuelto.- La distribucion del oxigeno disuelto presenta valores de 7.28 a 7.11 ml/l en la superficie y de 6.74 a 5.05 ml/l en el fondo.Condiciones climaticas ambientales : Temperatura .- La temperatura media de la parte baja de las cuencas o zonas costeras oscila entre los 13.2ºC y 22.5ºC (Locumba ). Vientos .- Ligada a las interaccion Oceano –Continente ,debido ala corriente submarina peruana-chilena fluye hacia el sur por debajo de los 80m y la corriente de Humbolt, con influencia de los vientos el Anticiclon del Pacifico Sur. Lluvias.- Se caracteriza por ser una de las zonas mas aridas

2.2. Instalaciones

Para la implementación de un Hatchery, es necesario asegurar un flujo mínimo de agua con las condiciones adecuadas de salinidad, temperatura y libre de agentes contaminantes como químicos o bacterias para el correcto funcionamiento de la planta y no exponer el adecuado desarrollo de las especies cultivadas, así como

adecuar la distribución de los equipos encargados de la purificación del agua a las condiciones del laboratorio.

2.2.1. Generalidades

Un aspecto muy importante de toda instalación requerida para cultivos, lo constituye la renovación del agua, puesto que este elemento es el medio de cultivo para los organismos.

El manejo del agua involucra principalmente el hecho de tener que trasladarla hasta las instalaciones de cultivo, lo cual implica definir un sistema de bombeo y diseñar una red de distribución del agua, además del tratamiento para lograr la calidad requerida.

Por tratarse de agua de mar, se deben tomar medidas especiales para su manejo, debido a que es altamente corrosiva y puede tener gran contenido de materia orgánica.

Finalmente, la infraestructura básica debe incluir los elementos en donde se estabulen los animales para reproducción, así como aquellos que se necesiten para su mantenimiento, como son las estructuras para alimentación y circulación del agua.

Se puede considerar que existen tres tipos de hatchery :

Experimentales; que funcionan en laboratorios para investigaciones específicas y donde el cultivo de larvas se realiza en pequeña escala.

Preindustriales; que producen a mediana escala. Industriales; que comercializan sus productos y trabajan en gran escala.

En estos dos últimos tipos es donde se producen los problemas tecnológicos más críticos.

La instalación y funcionamiento de hatcheries para la producción masiva de semilla de moluscos sólo se justifica cuando el abastecimiento adecuado de semilla natural es difícil de lograr, por que:

La producción natural es tan pequeña que no es suficiente para satisfacer una alta demanda,

O cuando la especie objeto del cultivo tiene un alto valor comercial que permite absorber los altos costos de producción que significa la instalación y funcionamiento del hatchery.

Dichos costos están condicionados tanto por la necesidad de mano de obra calificada, como por la gran inversión que requiere la construcción, equipamiento, mantención y los elevados gastos de energía necesaria para el suministro constante de agua de mar, aire, temperatura y otros elementos, con el fin de mantener en óptimas condiciones los organismos en cultivo, así como la producción de alimento para ellos.

Mientras más largo sea el proceso de cultivo en el hatchery, mayores serán los costos de producción; por esta razón generalmente los hatcheries están destinados a cultivar organismos hasta el estado de postlarvas, para pasar de allí al ambiente natural, en donde será la naturaleza la que se encargará de suministrar el alimento y los requerimientos necesarios para su desarrollo, ocupándose el acuicultor de las labores adecuadas para mantener a los animales en cautiverio.

2.2.2. Descripción general del laboratorio

Cualquiera sean sus dimensiones, un hatchery comercial para semilla de moluscos y alevines deberá estar constituido por las secciones siguientes:

Succión y almacenamiento del agua

La estación de bombeo de agua de mar es un elemento esencial, ya que todo desperfecto que ocurra en el sistema sería catastrófico, por esta razón se requiere de equipos en duplicado y con repuestos.

Tratamiento del agua

Respecto al agua de mar, ésta rara vez es utilizada en su estado natural, pasando por diferentes procesos de filtración y purificación que varían de un hatchery a otro.

Sala de cultivo de microalgas

En todos los hatcheries, el alimento para las larvas lo constituyen las algas monocelulares vivas. Tener éxito en el cultivo larval implica primero tener éxito en el cultivo de microalgas, sin el más mínimo error.

Esta sala debe tener un termostato para mantener la temperatura entre 18 a 20 ºC. Los cultivos se realizan a pequeña escala (cepas axénicas) en recipientes con volúmenes de 250 a 5 000 ml de capacidad. La iluminación debe ser permanente .

Invernadero para cultivo masivo de microalgas

Con luz y temperatura ambiente, donde se realizará la producción en masa de microalgas. Los tanques de cultivo deberán ser de fibra de vidrio con 500 a más litros de capacidad, con válvula inferior de salida de agua.

Sala de desove y fecundación

Donde se realiza el acondicionamiento de ejemplares adultos, los que luego serán inducidos al desove y posterior colecta de huevos; aquí mismo se puede realizar la cuarentena. Los recipientes a usarse pueden ser de forma cuadrada, de material plástico, de 150 litros de capacidad y con tubería de salida de agua.

Sala de cultivo larval

Debe contar con tanques circulares de fibra de vidrio, con 500 a más litros de capacidad, base piramidal y una válvula de salida de agua en la parte inferior.

Pre engorde de post larvas (obtención de semillas)

Debe contar con tanques de forma rectangular tipo "raceway", con alrededor de 5 m3 de capacidad.

La separación efectiva de estos diferentes elementos o secciones no siempre se toma en cuenta en algunos hatcheries, pero es algo muy necesario ya que las condiciones ambientales que se requieren, especialmente en materia de iluminación y temperatura, así como la calidad del agua de mar, difieren de una sección a otra.

2.2.3. Infraestructura de apoyo hidráulico

Pre filtro

Es un dispositivo que cumple la función de retener parte de las partículas en suspensión, materia orgánica, estadios larvales y juveniles de crustáceos (cirrípedos), moluscos, equinodermos, cordados y algas; que se pueden introducir al sistema donde alguno de ellos se fijará y crecerán produciendo una obstrucción en el ducto de agua.

Los elementos filtrantes están constituidos por tres capas de similar espesor: la primera que se ubica en el fondo, con piedras de cuarzo de tamaño más bien grande; la segunda intermedia, con piedras de tamaño pequeño; y por último la tercera capa superior, está compuesta de arena.

Filtro de arena rápido

Este sistema permite retener partículas de gran tamaño, de aproximadamente 50 micras, con la finalidad de permitir un mejor funcionamiento y mayor durabilidad de los microfiltros, los que por el material con el que están construidos suelen tener un alto costo.

Por el elemento filtrante que utiliza, el filtro de arena tiene un costo menor y puede utilizarse durante un período prolongado. Por lo general, el material filtrante se renueva luego de 1-2 años de operación continua.

Tanque de almacenamiento de agua

Su uso proporciona algunas ventajas importantes como: disponer de una cantidad de agua que permite asegurar un suministro de ella a pesar de un corte de electricidad, además de darle un período de reposo al agua, lo que resulta apropiado para mejorar su calidad.

Tanque de acumulación para retrolavado

     Cumple la función de mantener un stock de agua, que puede ser alimentado de la misma línea del sistema de bombeo de agua de mar o de la línea de agua dulce que exista; siendo recomendable el uso de este tipo de agua, por que ayuda a mantener más limpio el interior de la tubería.

El objetivo de este sistema es realizar el llamado back wash o retrolavado, que consiste en invertir el sentido de circulación del agua por medio de una combinación de válvulas y cañerías; enviándola al pre filtro, provocando un

flujo contrario al normal para limpiarlo de la acumulación de partículas que van obstruyendo el paso del agua.

Bombas

Existe una gran variedad de bombas, pero entre las más usadas pueden mencionarse las centrífugas, consideradas apropiadas para este fin, no descartándose la posibilidad de usar las de otros tipos.

El costo de una bomba centrífuga es reducido en comparación con otros modelos, pudiendo encontrarse repuestos con relativa facilidad. Además, están construidas en distintos materiales, según el fluído.

Debe tenerse en cuenta el material, por cuanto al suministrar agua de mar la bomba puede ser rápidamente deteriorada por la corrosión.

Para asegurar una vida prolongada y un agua de buena calidad, se recomienda el uso de equipos de plástico inyectado o de acero inoxidable, que son de mayor costo.

Sin embargo, de no contarse con alternativas adecuadas, se puede emplear un equipo estándar de fierro fundido y de bronce, tomando las precauciones necesarias de control del contenido de metales disueltos en el medio.

Cuando se instalan tuberías es necesario tener en cuenta la potencia de la bomba para determinar el diámetro de éstas, y a la inversa si conocemos el diámetro de la tubería podemos seleccionar la bomba adecuada.

Microfiltros

Generalmente se utilizan en serie tres microfiltros de 5, 3 y 1 micra para eliminar partículas pequeñas que puedan interferir en el cultivo de las larvas. Los microfiltros pueden ser de cerámica o de algodón, siendo los más recomendables los primeros, que además son de mayor duración.

En la industria acuícola existen otras alternativas de filtros, pero lo importante es contar con sistema sencillo, higiénico y de fácil reposición; por que cuando se ensucian demasiado o se tupen se contaminan, siendo conveniente su rápida sustitución por otros.

Además, para una mayor duración, es recomendable que sean lavados diariamente.

Esterilización del agua

Este sistema cumple la función de eliminar los microorganismos vivos que logran atravesar los filtros, que en su mayoría son nocivos para las larvas o competidores por el alimento.

Entre los métodos más conocidos de esterilización se tiene la pasteurización y la exposición a la luz ultravioleta empleando un equipo que consta de varias lámparas; este último es el método más usado, por el menor costo de energía que requiere su operación.

Calentamiento del agua

La inducción al desove y el cultivo de larvas requieren que se acondicione la temperatura del agua, para lo cual es necesario utilizar una caldera u otro sistema alternativo que permita un control de la temperatura.

Hay que tener en cuenta el material de los calentadores, los que por lo general son de titanio. También son ampliamente utilizados aquellos que

cuentan con protección de porcelana, pero para pequeños volúmenes de agua.

Aireación

En los cultivos de organismos, para asegurar una alimentación adecuada, es necesario homogenizar el medio, a fin de evitar que el alimento se sedimente y que se formen gradientes de temperatura.

Para mantener aireados todos los sistemas de cultivo del laboratorio, se requiere de un sistema de conducción (tuberías) conectado a un equipo "blower" o soplador tipo root que proporciona aire mediante burbujeo.

Independientemente del tamaño del laboratorio o hatchery, en forma general estos son los equipos e instalaciones indispensables para su funcionamiento, los que pueden adaptarse según los recursos disponibles de cada uno.

Es recomendable que las instalaciones sean desmontables, ya que en determinado momento se puede producir una contaminación de la línea de suministro de agua de mar o de aire, por lo que se tendría que hacer una esterilización completa de los equipos y tuberías.

En general, es recomendable realizar periódicamente una limpieza de todo el sistema.

MATERIALES RECOMENDADOS PARA USO

Las larvas son muy sensibles a los iones de metales disueltos, por lo que es preciso que se tomen precauciones para evitar el contacto directo del agua con metales.

Además, se debe tener en cuenta que la mayoría de los metales reaccionan con el agua de mar, formando compuestos que pueden ser nocivos para las larvas.

Por este motivo, se recomienda que el sistema de suministro de agua sea de material plástico; destacándose el PVC, polietileno, policarbonato, fibra de vidrio o fibra poliester, teflón, entre otros.

Es necesario tener en cuenta que la utilización de productos clorados para la limpieza de las tuberías pueden provocar la formación de compuestos tóxicos en contacto con ciertas resinas.

Así mismo, debe tenerse presente que en contacto con el agua de mar todos los plásticos originan productos tóxicos; por esta razón su envejecimiento previo en agua de mar es una necesidad.

SELECCIÓN DE ÁREA DE UBICACIÓN

El lugar conveniente para la instalación de un hatchery es aquel que cuenta con las siguientes características:

Que el oleaje de la zona sea suave, lo que permite obtener mejor calidad de agua por existir una menor cantidad de partículas en suspensión, asegurando así un mejor funcionamiento y durabilidad de los equipos

Que no exista ninguna amenaza de contaminación de origen industrial, minero, agrícola o doméstico

Que se encuentre alejado de zonas de cultivos comerciales de moluscos, para evitar ser afectados por epizootias

Que exista la posibilidad de construir la sala de bombas a orillas del mar y en lugar no muy alto, debido a restricciones que imponen las bombas. Así mismo, el laboratorio o hatchery deberá estar lo más cerca posible de la sala de bombas, ya que toda distancia extra implica un mayor consumo de energía.

A estas condiciones se deben agregar todas las precauciones necesarias para asegurar que las instalaciones no sean deterioradas por eventos naturales, como por ejemplo marejadas.

En lo concerniente a la edificación, su naturaleza e implementación constituye también un elemento determinante, ya que es un ambiente en donde circulará agua de mar que debe ser tratada antes de su utilización en los cultivos.

La principal característica de un hatchery debe ser la limpieza, esto excluye las construcciones demasiado ligeras así como los dispositivos interiores rígidos o fijos, en especial para el caso de las tuberías y los tanques, los que deben ser desmontables o móviles que permitan la limpieza periódica del ambiente.

EDIFICACIONES DE APOYO

Laboratorio de microscopía

El control y seguimiento rutinario de todos los cultivos se realiza en un laboratorio dotado de microscopios, balanza y equipos auxiliares.

Almacén general

Funcionará como depósito de distintos equipos, así como del material de laboratorio y de insumos diversos.

Oficinas

Para realizar labores administrativas inherentes al laboratorio y para el procesamiento de datos.

Figura Nº3: Instalaciones de Cultivo de Abalon Rojo (Haliotis rufescens) en Chile.

Fuente: FONDEPES (2010)

2.3. Cultivos Auxiliares

Los cultivos auxiliares son los que proporcionan alimento vivo, esencial durante el desarrollo larvario de peces, crustáceos y moluscos. Bajo la denominación de cultivos auxiliares se desarrolla el cultivo de microalgas (chlorella, isochrisis, Tetraselmis o Chaetoceros, entre otras muchas) y de microinvertebrados (rotíferos, artemia, copépodos, cladóceros, entre otros) destinados a la alimentación de las especies objeto de los cultivos principales. Son cultivos paralelos a los de especies comerciales. (Wikipedia, 2010).

Uno de los factores limitantes en acuicultura es la obtención y producción de alimentos que cubran las necesidades de las especies que se cultivan para su comercialización. Además, esa producción de alimento, ha de resultar económicamente rentable (Wikipedia, 2010).

Mientras que en la naturaleza, el desarrollo y supervivencia de larvas y juveniles depende de la presencia de organismos planctónicos, que a su vez se producen cuando hay nutrientes adecuados (cadena trófica), en condiciones de cultivo hay que asegurar el aporte de nutrientes necesarios para que la especie objetivo se desarrolle en las mejores condiciones, por lo que es fundamental conocer la composición química de los alimentos vivos, y, a su vez, el contenido nutricional de las especies utilizadas como alimento vivo está relacionado directamente con su alimento (Wikipedia, 2010).

En el centro acuícola de Morro Sama se observo que los cultivos auxiliares con los que contaban y desarrollaban fueron de Artemia Salina, Rotiferos, y Microalgas.

2.3.1. Cultivo de Microalgas

Son llamadas microalgas a una gran cantidad de especies que constituyen el fitoplancton que abarca desde organismos autótrofos hasta microflagelados y microciliados auxótrofos.

Estas especies aportan un alto contenido nutricional para peces, crustáceos y moluscos, además de ofrecer facilidades de manejo en sistemas de cultivo tanto en laboratorio como en producción a gran escala con fines comerciales.

Debido a esto es necesario cultivar los diversos tipos de microalgas dándoles las condiciones y enriqueciéndoles con los nutrientes necesarios para darle mayor calidad a nuestros cultivos hidrobiologicos.

En el centro acuícola visitado la producción de las principales especies son: Tetraselmis sp., Isochrysis sp., Nanochloris sp., Chaetoceros sp.).

La producción de estas especies, brindan una calidad y cantidad adecuada, la cual permitirá abastecer los requerimientos necesarios para los cultivos que las necesitan. El creciente interés por invertir en la reproducción de moluscos, peces y crustáceos en nuestro país, nos compromete a seguir mejorando los procesos de producción en los diferentes niveles de cultivo, lo que permitirá proporcionar información a futuro, que conlleve a una actividad menos costosa y más rentable, teniendo como base principal el mitigar cualquier impacto negativo al medio marino.

La elaboración de este informe obedece a la experiencia y recopilación de datos obtenidos durante las labores que se desarrollaron en el centro acuícola, siendo este el trabajo que elaboran el personal profesional y técnico del Centro de Acuicultura Morro Sama – Tacna – FONDEPES.

DATOS FISICO Y QUIMICOS La temperatura de la sala de microalgas deberá estar entre 19-20ºC. La salinidad se encuentra en un promedio de 36.4 UPS. El pH en el rango varia de 7.5 – 8.5. El oxigeno disuelto (O2) entre 7-8mg/L. El Dióxido de Carbono (CO2), se inyecta 30Lt/minuto a través de la línea de

aire por 2 minutos cada 2 horas, solo a nivel de botellas. La Iluminación, la intensidad varia dependiendo del nivel y/o la especie en

cultivo. Se utilizan tubos fluorescentes de luz blanca de 40 watts.

MATERIALES Y EQUIPOS1. MICROALGAS

a. CEPAS DE PRODUCCION

Isochrysis galbana var. Tahiti. (proviene de Chile) Chaetoceros calcitrans. Chaeroceros gracilis. Isochrysis galbana var. Tahiti (cepa americana). Chaetoceros mulleri.. Nannochloris occulata. Tetraselmis suecica.

2. MATERIALES

REACTIVOS QUÍMICOS Nitrato de sodio NaNO3

Fosfato de sodio NaH2PO4H2O Metasilicato de sodio Na2SiO39H2O Triz (hidroximetil amino metano) Na2SiO39H2O EDTA (acido etileno diamino tetraacético di sódico) Na2SiO39H2O Cloruro férrico FeCl36H2O Cloruro de manganeso MnCl24H2O Molibdato de sodio Na2MoO42H2O Sulfato de cobre CuSO45H2O Sulfato de Zinc ZnSO47H2O Cyanocobalamina (B12) Biotina (H) Tiamina Hidroclórica (B1) Acido clorhídrico puro (37%) Bayfolan (Abonos foliares) Biofolka (Abonos foliares)

OTROS

Formol Aceite de inmersión Rojo de fenol Ortotholodine Lugol

Cloruro de potasio Buffer 4-7-10 Bacto Agar Agar Agar

MATERIALES DE LIMPIEZA Y DESINFECCION

Hipoclorito de sodio (lejía comercial) Hipoclorito de calcio al 70 % Avlonwill desinfectante hospitalario. Acido muriático Alcohol 96º Jabón bacteriológico Detergente lava vajilla Filtros para aire de 1µm Filtros para agua de mar, bobinados de 1µm, 20´´ de largo Filtros de papel 0.45 µm y 0.2 µm, 47mm de diámetro Mangas de filtrar de 1 µm y 16 ´´ de largo Otros

MATERIALES DE VIDRIO

Matraz de Kitasato de 4Lt y accesorios de filtrado

Erlenmeyer de 2-1-0.5-0.25 Lt.

Pipetas graduadas de 10-5-1ml

Frascos ambar de 1-0.5-0.25 Lt

Placas petri

Tubos de ensayo con tapas y sin tapas

Beakers de 1-0.5Lt

Probetas de 100-50-25ml

Camaras Neubauer

Termómetros de temperaturas máximas y mínimas

Termómetros ambientales Viales para la obtención de muestras

Otros

MATERIAL DE PLASTICO, SILICONA Y FIBRA DE VIDRIO

Baldes de 20 y 8 Lt Jarras de 2-1-0.5-0.25lt Vasos graduados Pipetas Llaves para aire Tapers rectangulares de diferentes tamaños Válvulas de ½,1/4,1´´ Gradillas Botellas de 20Lt de capacidad (Carboys) Fuentes Escurridores Embudos Ts, crucetas y conectores Tapones de jebe y de silicona # 10 Mangueras de 1´´ Tanques de fibra de vidrio Azafates

OTROS

Algodón Gasa quirúrgica Hilo nylon (macramé) Cinta de embalaje Papel toalla Papel Kraft Papel aluminio Toallas absorbentes Asa bacteriológica Mascaras antigases Mascarillas para polvo Lentes de protección Guantes de jebe Guardapolvos Mandiles plásticos

Botas de jebe Pantalones de agua Piedras difusoras Estantería de madera Luminarias (fluorescentes de 40 watts y respectivos accesorios) Tuberías de PVC Papel parafilm 3M Cinta adhesiva para control de esterilizado a vapor Ollas a presión Balón de gas Cinta teflón Cinta aislante Brochas

3. EQUIPOS

Microscopio Olla esterilizadora eléctrica Destilador de agua

Agitador magnético Balanza analítica Estufa para esterilizar material seco Autoclave

Refrigerador Cocina a gas

ACONDICIONAMIENTO DE AMBIENTE 1. LINEA DE AGUA SALADA

Llenar con agua salada e hipoclorito de calcio a 1000ppm Reposar por 24 horas Eliminar el agua Se hace circular agua de mar en las siguientes 48 horas Probar con el reactivo ortotholodine para verificar si hay residuos de cloro.

LINEA DE AIRE

Al inicio de la línea de aire hacer ingresar alcohol y dejar que circule por esta.

Se prende el blower para que desplace el alcohol por toda la tubería y luego se apaga.

Se deja que haga efecto el alcohol por varias horas.

LIMPIEZA DE SALAS Durante la producción se limpia las paredes, estantería de madera con el

desinfectante hospitalario “Avlonwill”, semanalmente. Los pisos diariamente se trapean con agua e hipoclorito de calcio a 500

ppm. El pediluvio se limpia diariamente, eliminando el agua, limpiando y

remplazandolo con agua e hipoclorito de 500ppm. Las mesas de cemento se limpia después de los trabajos diarios con

Avlonwill. Las ventanas, puertas, parte externa de tuberia de aire se limpia con un

paño humedecido en alcohol semanalmente. Los vidrios de las mesas y estantes se limpian diariamente con alcohol.

LIMPIEZA Y ESTERILIZADO DE MATERIALES

MATERIALES DE VIDRIO

Se prepara acido muriático mas agua en proporción 1:1 En esta solución se sumerge todo el material de vidrio, previo enjuague con

agua dulce. Transcurrido como mínimo 6 horas, se enjuaga con abundante agua dulce

cada recipiente, por 5 minutos. Se realiza una prueba para comprobar si queda algún residuo de acido con

el reactivo rojo del fenol. Se deja escurrir, se cubre con papel aluminio y se pone a esterilizar a

125°C por 2 horas.

2. MATERIAL DE PLASTICO BOTELLAS DE SIEMBRA

Se prepara una solución de acido muriático como la anterior proporción y se adiciona una parte de esta en cada botella, tambien se lava con agua dulce previamente, se agita vigurosamente las botellas y se deja de un día para el otro.

Al otro dia se enjuaga haciendo correr agua de mar filtrada e irradiada con luz UV por 15 minutos cada botella.

Se enjuaga con agua dulce, se deja escurrir y se cubre la boca del recipiente con papel kraft sujeto con una liga o con papel aluminio.

MATERIAL DE FILTRADO PARA AGUA DE MAR (filtros bobinados-magas de filtrar.)

Se sumergen en una solución de agua dulce e hipoclorito de calcio a 1000 ppm diariamente después del trabajo los filtros bobinados, las carcasas de los filtros y mangas de filtrar de un día para otro.

Al día siguiente se escurre y se enjuaga a presión durante 5 minutos cada filtro y cada bolsa de filtrar durante 3 minutos.

Se comprueba si no tiene residuos de cloro.

OTROS MATERIALES PLASTICOS (Tapones-mangueras siliconadas-jarras, embudos, vasos de muestreo)

Se sumergen en una solución de agua dulce con 500ppm de hipoclorito de calcio o hipoclorito de sodio, se deja de un día para el otro.

Al otro día se enjuaga con abundante agua dulce. Se comprueba si no hay residuos de cloro y se deja escurrir. El material que es posible esterilizar en estufa, se envuelve en papel krat y

se coloca en esta a 100 °C por 2 horas.

CALIDAD Y TRATAMIENTO DL AGUA DE MAR

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1µm Pasarla por equipo Ultravioleta Usarla para lavar botellas

PROCESO PARA EL CULTIVO DE MICROLGAS

1. SEMBRADO DE BOTELLAS A NIVEL DE 12 Y 18 LITROS Recibir agua salada en filtros bobinados de 1µm Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1µm Incorporar 0.5 ml de lejía por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962,

GUILLARD 1965) según Tabla n° Observar y contar con las muestras de microalgas (inoculo) Agregar inoculo Poner varilla para aire y tapon Llevar a cepario y colocar aire y luz.

SEMBRADO DE MATRACES A NIVEL DE 1 LITRO

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1µm Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1µm en un envase adecuado Incorporar 0.5 ml de lejía por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962,

GUILLARD 1965) según Tabla n° Llenar a 750ml de volumen los mateces Erlenmeyer de 1Lt de capacidad. Esterilizar en humedo el medio a 125°C, 1bar de presion por 30 minutos Colocar varillas de aireacion Adicionar vitaminas a los medios de cultivo Prender las luces ultravioleta de la campana por una hora Dejar reposar por una hora Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Observar y contar las muestras de microalgas (inoculo) Agregar inoculo junto a un mechero con buena flama

Levar a cepario y colocar aire y luz

SEMBRADO DE MATRACES A NIVEL DE 125 MILILITROS

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1µm Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1µm en un envase adecuado Incorporar 0.5 ml de lejía por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Filtrar con papel filtro de 0.45 µm en matraz kitasato con ayuda de una

bomba de vacío Se sigue el procedimiento anterior pero ahora con el papel filtro de 0.2 µm El agua filtrada es depositada en matraces Erlenmeyer de 2 lt. de capacidad

los cuales son esterilizados en la autoclave a 125°C, 1bar de presión por 30 minutos

Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962, GUILLARD 1965) según Tabla n°

Vaciar solamente 100ml del medio a cada matraz erlenmeyer de 250ml de capacidad, colocar tapon de algodón y papel aluminio

Esterilizar en la autoclave los medios a 125°C a 1 bar de presion por 30 minutos

Colocar los medios en la campana Adicionar vitaminas a lso medios de cultivo Prender las luces UV de la campana por 1 hora Dejar reposar por 1 hora Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Observar y contar las muestras de microalgas (inoculo) Agregar inoculo junto a un mechero con buena flama Levar a cepario y colocar aire y luz

MANTENIMIENTO Y SEMBRADO DE CEPAS (TUBOS)

Recibir agua salada en filtros bobinados de 1µm Pasarla por equipo ultravioleta. Filtrar el agua en mangas de 1µm en un envase adecuado Incorporar 0.5 ml de lejía por cada litro de agua salada Declorinar con tiosulfato de sodio a 30 ppm Comprobar con ortotholodine Filtrar con papel filtro de 0.45 µm en matraz kitasato con ayuda de una

bomba de vacío Se sigue el procedimiento anterior pero ahora con el papel filtro de 0.2 µm El agua filtrada es depositada en matraces Erlenmeyer de 2 lt. de capacidad

los cuales son esterilizados en la autoclave a 125°C, 1bar de presión por 30 minutos

Agregar nutrientes (F/2 MEDIO GUILLARD & RYTHER 1962, GUILLARD 1965) según Tabla n°

Vaciar en matraz erlenmeyer de 500ml de capacidad Esterilizar en la autoclave los medios a 125°C a 1 bar de presion por 30

minutos Adicionar vitaminas en la campana de siembra Sembrar los tubos a un nivel de 10ml en la campana de siembra Prender las luces UV de la campana por 1 hora Dejar reposar por 1 hora Observar y contar las muestras de microalgas (inoculo)

Agregar inoculo junto a un mechero con buena flama Rotular con el nombre de la especie y fecha de siembra Levar a cepario y colocar aire y luz

2.3.2. Cultivo de Artemias

La Artemia es un magnífico alimento vivo en tanto en acuicultura como en acuarofilia, por sus características de desarrollo, su pequeño tamaño de nauplio y metanauplio, que es adecuado para las larvas y juveniles de crustáceos y de peces, y por su fácil manejo. El valor nutritivo de los nauplios recién eclosionados es muy alto, pero decrece rápidamente cuando no disponen de alimento. Se obtiene un enriquecimiento de nutrientes esenciales utilizando un sustrato de microalgas (vivas o secas), o con una mezcla artificial de nutrientes (lípidos, aminoácidos, ácidos grasos, etc.)(Wikipedia, 2010).

Los cistes (huevos de resistencia) de Artemia se comercializan, generalmente deshidratados. Para iniciar un cultivo de Artemia, los cistes se introducen en agua de mar (hidratación) en unos recipientes preferiblemente cilíndricos para mayor facilidad de aireación, a pequeña concentración (10 g de huevos por L), con iluminación (2.000 lux) durante unos 10 minutos para excitar su actividad metabólica; El agua ha de mantenerse a unos 28 °C de temperatura con aireación fuerte. Con estas condiciones se logra la eclosión (aparición de las larvas) aproximadamente a las 24 h, siendo normal una tasa de supervivencia de un 80%.

Los huevos no eclosionados y las cáscaras restantes de los cistes pueden ser perjudiciales para los peces y crustáceos que los vayan a ingerir, Por lo que es necesario separar los nauplios recién eclosionados; para ello se utiliza su fototropismo (atracción por la luz) o bien se disuelven los restos con productos químicas que no dañen a los nauplios.

También, si se quiere mejorar el coeficiente de eclosión, se recomienda descapsular los cistes. Las cubiertas duras de los cistes pueden eliminarse mediante una breve exposición a una solución de hipoclorito de sodio (lejía); posteriormente, hay que hacer un lavado intenso para eliminar los restos de hipoclorito.

En el centro de producción acuícola de Morro Sama se conto con un método especifico para la producción y enriquecimiento de la Artemia. Esta artemia eclosiona y se desarrolla a 28ºC, inicialmente es un Ciste luego pasa a ser un nauplio de Artemia. Estos nauplios son conservados luego de ser tamizados en una superficie, a un temperatura de 5ºC. La cantidad producida de nauplios satisface las necesidades de alimento de las larvas de Lenguado en sus primeras etapas de vida. Estas larvas de lenguado son alimentadas diariamente con 30 millones de nauplio de artemia dentro de las instalaciones del centro acuícola.

Los nauplios de artemia se obtienen a través de huevos llamados cistes los cuales son comercializados en latas que suelen costar de 40 a 60 dólares, la mejora marca de cistes comerciales es INVE que brinda una mayor calidad de Artemia. Los nauplios de artemia al nacer se alimentan de su saco vitelino que contiene generalmente ácidos grasos esenciales propios, los cuales se agotan por consumo propio, debido a ello es necesario adicionar al medio de cultivo ácidos grasos artificiales. En la siguiente figura se

muestra una de las latas de cistes de artemia salina utilizadas en el centro experimental.

Figura Nº5: Lata de Cistes de Artemia Salina de la marca Biomarine.

Fuente: Propia (2010)

Por otro lado 1 gramo de Cistes de artemia son aproximadamente 200000 Huevos. También se comercializan Cistos descapsulador por los problemas que suelen generar las cascaras de los cistes (Ocasionan problemas esofágicos en las larvas de peces alimentados con estos).

En el centro acuícola de Morro Sama se tiene una densidad de larvas de Lenguado de aproximadamente 80000 larvas por tanque alimentadas diariamente con 2.8 gramos de cistes de artemia (560000 huevos). En la siguiente figura se muestran los cistes de artemia Salina deshidratados antes de iniciar el proceso de producción de este cultivo auxiliar.

Figura Nº6: Cistes de artemia salina deshidratados.

Fuente: Propia (2010)

La producción de artemia inicia con la hidratación de los cistes de artemia, para ello en el centro acuícola suelen utilizar cantidades de 10 gramos de cistes, la balanza utilizada fue de 0.1 gramos de precisión. Para hidratar estos cistes es necesario colocarlos en un recipiente con agua dulce por

media hora. En la siguiente figura se muestran los cistes hidratados nuevamente antes de iniciar el proceso de descapsulación.

Figura Nº7: Pesado de Cistes de artemia salina antes de iniciar la hidratación.

Fuente: Propia (2010)

Figura Nº8: Cistes de artemia salina hidratados.

Fuente: Propia (2010)

Luego de ello preparamos una solución que será llamada solución “Descapsuladora” la cual contendrá 95 mililitros de Hipoclorito de Sodio (Lejía a un 50% o 5 gramos por 100 ml), 45 mililitros de agua de mar y 1.5 gramos de NaOH (1.5 gramos).

Si en un cultivo nos piden 10 millones de Nauplios de artemia tenemos que fijar la meta en 10.5 u 11 millones de nauplios debido a varios factores que impiden a que lleguemos a la meta solicitada (Mortalidad, infecundidad, etc.)

Por otro lado preparamos una solución de Tiosulfato (10 gramos en dos litros de agua) (será añadido después para neutralizar el NaOH). Por ultimo se utilizara un tamiz para la limpieza de los futuros nauplios (este permitirá el paso del agua mas no de los nauplios). Este tamiz es de un tamaño de 100 micras de abertura. Este es comercializado por Yardas y su costo por yarda es de 800 soles. En la siguiente figura se muestra el proceso de Tamizado y limpieza de los aun cistes de artemia salina.

Figura Nº9: Cistes de artemia salina hidratados.

Fuente: Propia (2010)

La solución preparada con Tiosulfato es necesaria para eliminar restos de Lejía, aquí se introducen los huevos solo por 30 segundos, no más sino estos empezaran a quemarse. En la siguiente figura se muestran los huevos decapsulados (Cascara disuelta por la acción de la lejía y el NaOH). Nótese que hay algunos puntos blancos debido a la quemadura que ocasiono el Tiosulfato a los huevos más débiles.

Figura Nº10: Cistes de artemia salina hidratados.

Fuente: Propia (2010)

Luego de la limpieza preparamos un recipiente de 12 litros para los 10 gramos de cistes que utilizamos, este recipiente debe contener 70% de agua

de mar y 30% de agua dulce. Colocamos la artemia en este recipiente y lo dejamos por 24 horas esperando la eclosión y nacimiento de los nauplios de artemia. En la siguiente figura se muestra a los nauplios de artemia nacidos un día después de la decapsulación.

Figura Nº11: Nauplios de Artemia recién nacidos.

Fuente: Propia (2010)

La descapsulación también puede realizarse con acido acético a 28ºC. La artemia a los 10 días mide 400 micras. Estas son mantenidas y alimentadas con ácidos grasos de la marca CELCO, este acido graso se aplica a 1 gramo por un millón de artemias, la composición de este acido graso es DHA y EPA que cuestan 80 dólares el litro cada uno (en presentación polvo y liquido).

2.3.3. Cultivo de Rotiferos

Los rotíferos pertenecen al filo de los Nematelmintos (orden Monogonontes); son seudocelomados y hay más de 1800 especies, que en su mayoría son de agua dulce; también hay algunas especies marinas y otras terrestres que viven sobre musgos húmedos. Son organismos pluricelulares, de pequeño tamaño, visibles a través de microscopio óptico. Tienen un órgano rotatorio, con cilios, que realiza movimientos giratorios creando fuertes corrientes de agua que le sirven para captar su alimento. En general, son formas libres que forman parte del plancton, aunque también hay especies sésiles (Wikipedia, 2010).

El cuerpo de un rotífero generalmente es transparente, a veces coloreado en la región intestinal. Miden entre 100 micras y 3 mm; los machos son más pequeños y menos desarrollados que las hembras, midiendo algunos tan sólo 60 micras.

El cuerpo de todas las especies presenta un número constante de células, que en el caso del género Brachionus (la especie Brachionus plicatilis es la más importante en acuicultura) es de aproximadamente 1000; esas células no han de considerarse como identidades únicas, sino como un área de plasma; el crecimiento del animal se produce por un aumento de plasma y no por la división de las células.

En el cuerpo de un rotífero se diferencian tres partes:

cabeza, que es donde se encuentra el órgano rotatorio o corona rodeando la boca, que es más o menos ventral

tronco, donde está el tracto digestivo pie, que es una formación anillada retráctil sin segmentación, que

termina en uno o cuatro dedos

En su ciclo vital, presentan alternancia en la reproducción (sexual y asexual); hembras partenogenéticas originan nuevas hembras partenogenéticas, pero cuando las condiciones del medio son desfavorables se origina una generación de hembras y machos que se reproducen sexualmente.

El cultivo de Brachionus plicatilis se realiza en agua de mar mesohalina, filtrada a 1 micra y desinfectada con cloruro o con lejía (y neutralizada con bisulfito sódico). Su alimentación suele ser con levadura de panificación, en una concentración de 1 g por cada millón de rotíferos (desleída en agua, cada 8 horas). Cuando es necesario, se complementa la levadura con vitaminas (E, B6 y B12) y/o con aceite de pescado. La temperatura óptima de cultivo es de 22 a 25 °C La oxigenación ha de aportar al menos un 80 % de saturación, sin producir excesivo burbujeo. El pH debe mantenerse en torno de 7.5, porque a mayor pH menor producción y a menor pH menor fertilidad. El tiempo entre dos generaciones es de aproximadamente tres días.

En el centro de producción acuícola de Morro Sama se trabaja con dos especies de rotíferos, Sama sp. y Chilea sp. Estos rotíferos tienen una reproducción partenogénica (todas hembras). Las condiciones de cultivo deben ser óptimas, el cuerpo de agua del cultivo debe tener una concentración salina de 25 ppm, 25ºC de temperatura, aireación moderada, y 200 a 300 rotíferos por mililitro. El inoculo se inicia con 200 rotíferos por mililitro y se alimentan estos con microalgas y con levadura. En la siguiente figura se observan las fases iniciales de cultivo de rotíferos.

Figura Nº11: Inóculos y siembra de rotíferos en matraces de 400 mililitros.

Fuente: Propia (2010)

El cultivo de rotíferos se da de un gramos por millón, en las instalaciones del centro acuícola se cuenta con 5 cepas de rotíferos siendo las mas importantes, las mencionadas anteriormente como Sama sp. y Chilea sp. Hay do tamaños de rotíferos L y S, los L miden 200 micras y las S miden

300 micras. Es necesario ver el tamaño de la boca de la larva de lenguado para ver si es que estos rotíferos entran en ella o no. El rotífero es un alimento utilizado para todo tipo de larvas, es irremplazable, se reproducen cada 8 horas, estos suelen mantenerse en aproximadamente 10 rotíferos por mililitro. Las cepas de 2 semanas se mantienen en recipientes de 50 mililitros. Al igual que en las microalgas este desarrollo va acompañado de un flujo de recipientes de diferentes tamaños. En la siguiente figura se muestran recipientes de 50 litros en los cuales se tiene un cultivo de rotíferos en cantidades mayores.

Figura Nº12: Tanques de cultivo de rotíferos en grandes cantidades

Fuente: Propia (2010)

Los rotíferos se enriquecen con CELCO (0.1 gramos por millón de rotíferos), estos se enriquecen cada 8 horas. Debido a la alimentación es que se toman ciertas medidas asépticas para evitar contaminación considerando que los cultivos son de tipo Axénico.

2.4. Cultivo de Lenguado (Paralichthys adspersus)

Los peces planos son después de los salmónidos los que muestran las mejores perspectivas de desarrollo, dada su excelente calidad, alto precio y demanda en los mercados internacionales como Europa y Japón.

El lenguado nativo Paralichthys adspersus, es un pez plano queconstituye una de las especies que sustentan la pesqueria artesanal en el Peru, no solo por su importancia comercial y por los tonelajes desembarcados ,sino tambien por la preferencia del consumidor debido a su exquisitez,alcanzando altos precios en el mercado local .Cit por M.Samame y J.Castañeda (1999)

En 1984, en Chile se inician los primeros trabajos de investigacion de fecundacion artificial y mantenimiento de larvas de lenguado de ojos chicos (Paralichthys microps).

Posteriormente en 1986, en el departamento de acuicutura de la universidad catolica de l norte , tambien se desarrollo un proyecto para determinar la factibilidad del cultivo de lenguado (P. microps, Paralichthys adspersus)

La primera etapa del desarrollo del paquete tecnológico es la producción masiva de alevinos de lenguado, teniendo como base los trabajos preliminares realizados en el C.A.Morro Sama , para que de esa manera se asegure el abastecimiento de

estos a la empresa privada ,brindando el soporte técnico necesario para el surgimiento de esta actividad.

MATERIALES Y EQUIPOS

a) Semovientes Reproductores de lenguado nativo Paralichthys adspersus Rotiferos Brachionus plicatilis. Cistos de artemia Artemia sp Microalgas Nannochloris oculata e Isocrhysis galbana

b) Materiales de cultivo Tanques plancha metalica corrugada galvanizado cubierto con

liner de PVC con un diametro de 4m con 6m3 de capacidad para los reproductores

Tanques cilindroconicos, de fibra de vidrio de 500 y 1000 lt de capacidad para la incubacion y cultivo larvario respectivamente.

Tanques rectangulares de fibra de vidrio color celeste (1.3x1.3x0.5m) con 1000L de capacidad pàra la metamorfosis y alevinaje .

c) Material complementario y de manejo Piedras difusoras Mangueras de 3/16 ,3/4 y 1” de diámetro. Tamices de (60,300,500 y 700µ) Baldes de plástico (4,8y 20 lt) Pipetas de plástico (1,5y10 ml) Contadores manuales Termómetro digital y de canastilla Bandejas de plástico Canastas de plástico Ictiometro Plantillas de marcación Placas petri de 5 y 10 ml Probetas de 50, 500 y 1000 ml Jarras de plástico de 1y 2 lt. Calcales de 15 x 12 cm

d) Materiales de tratamiento del agua Filtros de discos mayor a 150 micras Filtros manga de 5 a 10 micras Batería de filtros cartuchos de 1.5 y 10 micras

e) Material de limpieza ,desinfección y antibióticos Esponjas y paños absorbentes. Formalina al 37% Amonio cuaternario Lejía Yodoforo

Acido muriático Terramicina (Oxitetraciclina )

f) Material de enriquecimiento nutritivo de alimento vivo DHA selco Aqua Grow DHA Alimento micropeletizado de 300 a 1400 µ

g) Equipos Estereoscopio Microscopio invertido Balanzas digitales de 100g y 6 kg Lámpara de luz ultra violeta Electrobomba de 1HP Blower 1 HP

MANEJO DE REPRODUCTORES

a) Selección y acondicionamiento de reproductores

Los criterios para la selección de reproductores son los siguientes

Características biológicas y morfológicas externas (mayor peso , talla ,color natural, sin malformaciones,etc)

Fig.1 evaluación de la talla del lenguado

Aspectos sanitarios ( libre de enfermedades) Características de madurez gonadal para estabular lotes potenciales

y lotes de reserva Se tendrá en cuenta el sistema empleado por Peleteiro et. al (1993)

para determinar la “no utilidad “de una hembra como reproductor considerando: no haber madurado el último año, no haber efectuado ninguna puesta en los dos últimos años y haber perdido peso desde el último periodo de puesta.

Para la selección de los machos se tendrá en cuenta las mismas condiciones anteriores en función de los controles de fluidez seminal.

Para el acondicionamiento de consideran los siguientes aspectos:

El marcaje de reproductores; se efectúa con plantillas de acero inoxidable empleando la técnica de marcado criogénico(quemadura en frio con N2 liquido) en el dorso del ejemplar .La marca permitirá el seguimiento del desempeño de cada ejemplar durante el proceso.

Estabulación de los ejemplares en tanques circulares de 4 m de diámetro cubiertos con malla rachell (80% sombra ),con flujo continuo de agua marina de 0.8 L/s tirante de agua (0.5-0.6m) a densidades de 5.6Kg /m2, proporción macho/ hembra de 1:1,bajo temperatura ambiente (13ºC a 20ºC)y exposición de fotoperiodo natural(12-15 horas día)

b) Control y Evaluación de la Madurez Gonadal

En los reproductores se realiza mensualmente el monitoreo del estado de maduración gonadal y la valoración de los productos sexuales ;tanto en machos como en hembras .

El comportamiento de madurez sexual se da en dos temporadas definidas, la primavera, en otoño – invierno de menor presencia de estadios avanzados y la segunda primavera –verano con una mayor frecuencia de estadios de maduración avanzad a.

La evaluación de la madurez gonadal se realiza en base ala siguiente escala:

Machos: la tala utilizada en Morro Sama valora subjetivamente la cantidad y viscosidad de la fluidez seminal que se extrae de cada uno de los ejemplares machos mediante suaves masajes en la zona abdominal.

Escala de calificación subjetiva:

NF No Fluye F/2 Fluyendo medio poca cantidad de semen y baja

consistencia (diluido)F Fluyente bueno repetidas fricciones (semen

consistente )FF Muy fluente a la primera fricción y en

abundante cantidad( semen muy consistente )

Hembras: Se realiza utilizando la tabla de maduración para turbo Scophthalmus maximus L.(Peleteiro, et.al 2001), la misma que ha sido modificada y adaptada para el lenguado nativo , que distingue los siguientes estadios de maduración, en función a la percepción de las características externas de las gónadas.

ESTADIO I Se observa un pequeño abultamiento en el comienzo del lóbulo inferior .

ESTADIO II.- La dilatación alcanza toda la longitud del lóbulo inferior

ESTADIO III Está completamente dilatado el lóbulo superior , que en algunos casos puede llegar a ocupar toda la cavidad abdominal y se considera como el estadio de prepuesta.

ESTADIO IV.-La hembra inicia la puesta.

c) REGISTRO DE PARAMETROS FISICOS Y QUIMICOS

Se efectuara diariamente la lectura y registro de la temperatura del agua con una frecuencia de cada dos horas en lo estanques de cultivo del plantel de reproductores .Se registran datos climatológicos del cielo, viento y de las condiciones del mar.

d) ALIMENTACION

El suministro de alimento es” ad libitum”, con una frecuencia interdiaria (con tasas de alimentación aproximadas entre 0.5- 1% del peso de la biomasa día).

La alimentación es mixta, empleando pescado fresco

(Pejerrey, caballa, anchoveta, jurel, etc) y pasta húmeda preparada artesanalmente a base de pescado fresco, harina de pescado y aceite de pescado descritas en la tabal 1 y tabla 2.

Fuente: FONDEPES 2009

Fuente: FONDEPES 2009

Se aplica dietas diferenciadas en dos periodos una dieta de recuperación (Enero-Abril),suministrad después del periodo de reproducción y una dieta enriquecida

(Mayo a Diciembre ) CON VITAMINAS B,C,E y ácidos grasos altamente insaturados tipo omega 3y 6 suministrada tres meses antes del periodo de puestas.

e) LIMPIEZA

Se efectúa quincenalmente preparándose previamente una solución desinfectante en un recipiente aparte , ene le cual se sumerge los materiales que se van a usar dentro de los tanques de reproductores .luego se baja el nivel del agua y simultáneamente con la ayuda de escobillones se remueve el material orgánico adherido a las paredes internas, piso del liner, de tal forma que pueda eliminarse restos de alimento no consumido , desechos del catabolismo por la salida central de estanque .

f) ASPECTOS SANITARIOS

Se realiza tratamiento preventivo básicamente con baños estáticos con formalina al 37% a una concentración de 167 ppm por 30 minutos.

DESOVE Y COLECTA DE HUEVOS

a) Desove.-

El desove es espontáneo, este ocurre durante las primeras horas de la noche (desde las 6pm) en los tanques de acondicionamiento, pudiendo cada hembra desovar de 2 a 5 veces por temporada en intervalo de 2 a 15 días. El numero de huevos por desove es variable, pudiendo llegar a 180000 por kilo de hembra.

b) Colecta.-Los tanques cuentan para el propósito, con un sistema de recolección de huevos basado en el principio de rebose, aprovechando la flotabilidad de los huevos fecundados y no fecundados, el que los transporta con el agua al exterior del tanque y los deposita en un colector de malla de 500 micras.Los huevos son filtrados y lavados con agua de mar micro filtrada e irradiada con UV, a través de tamices superpuestos de menor a mayor luz de malla con la finalidad de separar todo material orgánico extraño(excretas,algas,etc).

Fig.2 huevos embrionados de Paralichthys adspersus

Efectuar la separación de los huevos viables y no viables (gametos).

Los gametos no fecundados o lo huevos fecundados dañados, al cabo de media hora decantan al fondo por su mayor densidad, debido a la precipitación de sus proteínas y los huevos viables flotan en la columna de agua del recipiente que los contiene.

La separación de los gametos inviables se logra aflojando la llave de desfogue en la parte inferior del tanque con apenas un chorro de agua, colectándose en un recipiente para su posterior evaluación.

Los huevos viables son desinfectados con una solución germicida (yodofóro soluble) a una concentración de 100ppm por 15 minutos y trasladados al tanque de incubación.

INCUBACION, DESARROLLO EMBRIONARIO PRE-LARVA

a) INCUBACION

La incubación de los huevos se realiza en tanques cilindro cónicos de500litros de capacidad con agua de mar filtrada a 1micra,irradiada con luz UV ,aireación leve ,temperatura ambiente,con fotoperiodo natural y circuito de agua cerrado. Los huevos son colocados a una densidad aproximada de 500 huevos /litro. Donde permanecen aproximadamente por 48 horas.

Para determinar la eficiencia de los desoves se realiza una evaluación cualitativa y cuantitativa a una muestra de los huevos y se califica según los siguientes criterios.

Porcentaje de viabilidad superior al 60% determinado por el número de huevos que muestra la primera división celular.

Transparencia, tamaño y esfericidad. Medición del diámetro de los huevos ,en promedio registra

800micras.Si no cumplen con estas características, la puesta o el batch deben descartarse.

En la etapa de formación del embrión en lo posible evitar los choques térmicos y mecánicos que afectan la viabilidad del embrión.

La eclosión a 16ªC debe producirse entre las 40 y 54 horas posteriores a la fecundación, y al finalizar se debe determinar el porcentaje de eclosión.

b) PRE-LARVAS.Después de la eclosión, las pre-larvas se mantienen en las mismas incubadoras para que continúen su desarrollo. Aproximadamente 60

horas cuando ya sea posible observar la pigmentación de los ojos y la apertura de la boca.La densidad promedio es de 400 pre-larvas/litro (referencial Morro Sama).Para la evaluación de resultados de esta etapa se toma la siguiente información.

Determinar la densidad pre-larval tomando una muestra de 140ml a las pocas horas de ocurrida la eclosión

Evolución del periodo de pigmentación de ojos y apertura de la boca mediante la observación de una muestra.

Determinación del porcentaje de supervivencia. Registro de los parámetros físico, químicos. Calculo del porcentaje de mortalidad.

CULTIVO LARVARIO

a) Acondicionamiento de los Tanques de Cultivo

El cultivo se realiza bajo el sistema semi-continuo y con la técnica del agua verde (con inoculo de microalgas N.oculata 1x10^-6cel/ml e I.galbana 0.8x10^-6cel/ml).

Se llenan los tanques de cultivo de 0.5 y1m3 con agua microfiltrada e irradiada con UV,arireacion moderada y se adiciona alimento vivo (B.plicatilis),según dosis establecidas en la tabla 3

Siembra de larvas a una densidad de 25 larvas/litro.

b) Monitoreo y Evacuación Larvaria Registro de horario, parámetros físicos y químicos de la unidad

de cultivo Roteiferos: se tomaran dos muestras de 10ml del cultivo

(mañana y tarde) para determinar el consumo de alimento y reponer la cantidad necesaria de rotiferos al tanque para mantener la dosis alimentaria.

Artemia: se tomaran tres muestras de 10 ml del cultivo (mañana y tarde)para determinar el consumo de alimento y reponer la cantidad necesaria de aretemias al tanque para mantener la dosis alimentaria .

Microalgas: se sacara una muestra (cada tres dias ) y se realizara el conteo del numero de celulas en la camara de Neubauer para determinar el volumen de microalgas requeridas para mantener la concentracion establecida.

Supervivencia : cada dos dias se estimara el numero de larvas Por volumetria para determinar la tasa de supervivencia parcial y total calculado.

Crecimiento : se tomaran muestras vivas de cinco larvas cada tres dias ,registrando su talla para detrminar la tasa especifica de crecimiento(SGR)

Mortalidad: calculo del porcentaje de mortalidad .

c) Limpieza y recambio de aguaEn lo concerniente a limpieza existen dos tipos : la limpieza parcial,que es realizada diariamnete y la limpieza total, que es realizad con intervalos de 10 dias. Se procede de la siguiente manera :

La limpieza parcial de los tanques de cultivo se lleva acabo en la mañana y la tarde con esponjas de los tanquesy paños absorventes embebidos en una solucion de amonio cuaternario (20ppm), para limpiar las paredes internas del tanque , luego de bajar el nivel del agua.

La limpieza total del estanque de cultivo se lleva a cabo con una solucion de yodoforo soluble(200ppm).

Eliminacion de material organico extraño mediante sifoneo del fondo del estanque ,previo movimiento del agua en forma de remolino.

Los recambios de agua se realizan apartir del cuarto dia de cultivo ,dos veces al dia efectuando reemplazo desde el 20 a 82% del volumen por dia .

d) Alimentacion:La alimentacion de las larvas es a base de :

Rotiferos: enriquecidos con acidos grasos insaturados (DHA, EPA y ARA), en unmedio latamente concentrado durante 6hotras. La racion suministrada a las larvas sera suficiente para mantener una densidad de de 5-10 roteiferos /ml en el tanque, la frecuencia de alimentacion sera 2 veces al dia vease tabla 3.

Artemia: enriquecidos con “DHA”son suministrados a partir del decimo dia de cultivo larvario inicalmente con nauplio “Ao” y posteriormente con metanauplios “Al”, la dosis y ritmo alimenticio se describe en la tabla 3.

.

.

Metamorfosis y weaning

a) Iniciación.-

La metamorfosis de la larva se inicia entre los días 28y 35 después de producida la eclosión y dura aproximadamente 10 días.

Se evidencia progresivos cambios, con migración de ojo izquierdo en dirección anterodorsal y desarrollo de las espinas de la aleta caudal, anal y dorsal, hasta lograr la simetría característica de la especie.

Fig.3 metamorfosis del lenguado

b) Limpieza

Se efectuara de la siguiente manera

La limpieza parcial de los tanques de cultivo se lleva a cabo en la mañana y en la tarde con esponjas y paños absorbentes embebidos en una solución de amonio cuaternario (20ppm), para limpiar paredes internas del tanque, luego de bajar el nivel del agua.

La limpieza total del cultivo, se llevara a cabo cada cinco días con solución de yodofóro soluble (200ppm).

Eliminacion de material organico extraño mediante sifoneo del fondo del estanque ,previo movimiento del agua en forma de remolino.

Los recambios de agua son de 80% del volumen por dia ,se realizan con manqueras de plastco y se filtran pasando a traves de tamices de 700 micras.

c) Alimentación.-Se inicia de la siguiente forma:

En la etapa de weaning, ocurre el cambio de alimentación; gradual del alimento vivo al inerte y se inicia desde el día 40 al 50 de cultivo larval.

Después del día 50, los ejemplares tienen que estar adaptados totalmente al alimento inerte.

Cultivo de Alevines

a) Cosecha y siembra de alevines

Se lleva a cabo las siguientes actividades:

Llenado de los tanques rectangulares de fibra de vidrio color celeste con 1000 lt , de capacidad con agua microfiltrada e irradiada con UV. Suministrándoles una aireación moderada.

Siembra de alevines a una densidad de carga de 1.2 kg/m2 (aproximadamente 500alevines/m2).

c) Monitoreo y evaluación de alevines Registro diario de parámetros físicos y químicos de la unidad

de cultivo Supervivencia cada semana se estimara el numerode alevines

para determinar la tasa de supervivencia parcial y total.

Crecimiento : se tomaran muestras vivas de cinco larvas cada semana ,registrando su talla para determinar la tasa instantanea de crecimiento(K) y la tasa de crecimiento especifico (SGR).

Mortalidad: calculo del porcentaje de mortalidad .

d) Limpieza y recambio de aguaEn lo concerniente a limpieza existen dos tipos : la limpieza parcial,que es realizada diariamnete y la limpieza total, que es realizad con intervalos de 10 dias. Se procede de la siguiente manera :

La limpieza parcial de los tanques de cultivo se lleva acabo en la mañana y la tarde con esponjas de los tanquesy paños absorventes embebidos en una solucion de amonio cuaternario (20ppm), para limpiar las paredes internas del tanque , luego de bajar el nivel del agua.

La limpieza total del estanque de cultivo se lleva a cabo con una solucion de yodoforo soluble(200ppm).

Eliminacion de material organico extraño mediante sifoneo del fondo del estanque ,previo movimiento del agua en forma de remolino.

Los recambios de agua se realizan apartir del cuarto dia de cultivo ,dos veces al dia efectuando reemplazo desde el 20 a 80% del volumen por dia .

e) Selección y Estabulacion por tallasSe realizaran dos tipos de selección parcial y total, dependiendo del estadio de desarrollo , y se aplicara de la siguiente forma:

La selección parcial s e realizara cada dos dias, afin de retrirar los ejemplares menos desarrollados o con malformaciones.

La selección total ,o clasificacionpor tallas se realizara mensualmente , separando los ejemplares muy grandes medianos y pequeños que so estabulados en los tanques de cultivo correspondiemtes.

f) AlimentacionLa aliumentacion de los alevinos se realizara con alimento micropelletizado, con rangos de 300 a 1300 micras de diametro, con tasa de alimentacion decreciente de 5%, 4% y 3% y sumistro diario

Ventajas

a) La producción de alevines bajo condiciones controladas en “hatchery” permite asegurar el abastecimiento masivo y constante de estos así como establecer programas de mejoramiento de progenie mediante selecciones.

b) Lograr la determinación del comportamiento individualizado de la maduración gonadal y la calidad de desove y huevos por reproductor y batch.

c) conseguir supervivencias elevadas por encima del 5% en los cultivos larvarios desde la etapa de pre-larvas hasta alevines.

2.5. Cultivo de Abalón Rojo de California (Haliotis rufescens) (ADJUNTO)

3. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Los cultivos tanto de Artemia como Rotíferos necesitan de nutrientes algo caros, como por ejemplo los ácidos grasos que contienen DHA y EPA son obtenidos a través del CELCO, lo mismo sucede para los Rotíferos, que son enriquecidos con CELCO, una opción algo mas barata es la utilización de microalgas para la alimentación y nutrición de estos. Debido a que estas ya contienen de por si estos ácidos grasos además de dar ciertas ventajas al medio (Filtración y generación de oxigeno).

4. BIBLIOGRAFIA

Wikipedia 2010. Le enciclopedia en Linea.

Van Wyk, Peter (2005). Nutrition and Feeding of Litopenaeus vannamei inIntensive Culture Systems.

Martínez Córdova Rafael (1993). Camaronicultura, Bases técnicas yCientíficas para el cultivo de camarones Peneidos.

FAO (2010), El Langostino. Programa de información de especies acuáticas deLa Organización de las naciones unidas para la Agricultura y la Alimentación.