8/8/2019 Un Protocolo de to

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Un protocolo deUn protocolo deaislamientoaislamiento

Por Ariel Aptekmann y Francisco Dur

La historia de como gastamos 40 horas hombre paraaislar la bacteria ms comn sobre la faz de la tierra

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EnterobacteriasEnterobacterias PseudomonasPseudomonas BacilosBacilos LactobacilosLactobacilos

Toma de muestraToma de muestraParqueParqueCentenarioCentenario

ParqueParqueCentenarioCentenario

ArrozArroz YogurisimoYogurisimo

EnriquecimientoEnriquecimiento CaldoCaldoMcConkeyMcConkey

Caldo M9Caldo M9 Calor Calor de fabricade fabrica

AislamientoAislamiento AgarEMBAgarEMB Agar CetrimidaAgar CetrimidaAgarAgarMosselMossel

Agar MRSAgar MRS

PurificacinPurificacin Agar NutritivoAgar Nutritivo Agar NutritivoAgar Nutritivo AgarAgarNutritivoNutritivo

No realizadoNo realizado

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Enterobacterias Pseudomonas Bacilos Latobacilos

Caracterizacinmicroscopica

Cocobacilos GRAM - Bacilos GRAM -

Bacilos GRAM + conEspora

Subterminal NoDeformante

BacilosGRAM +

Catalasa+

+- +

Oxidasa - + NR NR

Agar HierroKligler Ac/Ac G+ SH- Alk/SC G- SH- NR NR

Amilasa- - - NR

Proteasa NR + + NR

LipasaNR + + NR

API 20 ESuspenso NR NR NR

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Parque CentenarioParque Centenario

Posible fuente de

enterobacterias yPseudomonas sp

Columba livia (Paloma)

Anas platyrhynchos (Pato)

Homo sapiens (Vagabundo)

Agua, Suelo?

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Bacillus y sus amigusBacillus y sus amigus

Fuente de Bacillus sp

Fuente de los lactobacilos

Contiene Lactobacillusbulgaricus, Streptococcus

termophilus, Lactobacillus

casseiy una bifidobacteria noespecificada

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AislamientoAislamiento

Enterobacterias AgarEMB:

- Lactosa + Peptona de carne +Azul de Metileno + Eosina

Yellow

Pseudomonas sp Agar Cetrimida:

- Cetrimida

Bacillus sp Agar Mossel:

- Peptona de carne +Manitol + Rojo de fenol

Lactobacilos Agar MRS:

-Tween 80

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EnterobacteriasEnterobacterias

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Pseudomonas spPseudomonas sp

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Bacillus spBacillus sp

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LactobacilosLactobacilos

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Catalasa y OxidasaCatalasa y Oxidasa

Reaccion de la Catalasa :Reaccion de la Catalasa :

2 H2 H22OO22 H H22O + OO + O22 ((burbujasburbujas))

OxidasaOxidasa::

ReactivoReactivo dede KovacsKovacs diclorhidratodiclorhidrato dede tetrametiltetrametil--pp--fenilendiaminafenilendiamina ( rojo( rojo eses positivo)positivo)

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Agar HierroAgar Hierro KliglerKligler

Enterobacterias: Ac/Ac G+ SH-Pseudomonas spAlk/SCG- SH-

1-Pico alcalino/fondo cido (picorojo/fondo amarillo): el microorganismosolamente fermenta la glucosa.2-Pico cido/fondo cido (picoamarillo/fondo amarillo): elmicroorganismo fermenta glucosa, ylactosa.3-Pico alcalino/fondo alcalino (picorojo/fondo rojo): el microorganismo es nofermentador de azcares.4-La presencia de burbujas, o ruptura delmedio de cultivo, indica que elmicroorganismo produce gas.5-El ennegrecimiento del medio indicaque el microorganismo produce cidosulfhdrico.

Como interpretarlo:

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Amilasa, Proteasa yAmilasa, Proteasa y

LipasaLipasa

Lo que se puede observar es el haloLo que se puede observar es el halo

de degradacin o su ausencia, parade degradacin o su ausencia, paraprotenas, almidn, o lipasas.protenas, almidn, o lipasas.

El halo es indicador de enzimas lticas.El halo es indicador de enzimas lticas.

lipasa

amilasaproteasa

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API 20 EAPI 20 E

NMERO DE IDENTIFICACIN 5 144 572 1

Escherichia colicon excelente nivel de identificacin

El API 20 E es una batera de pruebasidentificatorias, especifico para enterobacterias, seusa en conjunto con un manual que permite

identificar una especie en base a los resultados.

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SobreSobre BacillusBacillus,,

PseudomonasPseudomonas yy

LactobacillusLactobacillusAunque no hicimos una identificacion completa para estos ultimos,obtuvimos algunos datos, catalasa, oxidasa, recuento, etc

Pero no son suficientes para identificar a nivel de especie.

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MUCHAS GRACIASPORMUCHAS GRACIASPOR

NO TIRAR TOMATES!NO TIRAR TOMATES!

Y si lo hicieron, gracias por la salsa gratis!

Ecolini, mascota oficial del equipo

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