practica vinos

DEPARTAMENTO DE ANÁLISIS ANÁLISIS INSTRUMENTAL

BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLAFACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

DEPARTAMENTO DE ANÁLISISANÁLISIS INSTRUMENTAL

PRÁCTICA No. 7DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIERRO TOTAL EN

VINOS

OBJETIVOS:

1. Realizar curvas de calibración2. Medir espectrofotométricamente Fe(II) y Fe (III) en vinos

INTRODUCCIÓN:

El hierro (II) forma un complejo de color rojo con 1,10-fenantrolina según la reacción:

Para asegurarnos de que todo el hierro presente en la muestra se encuentra en forma de

Fe2+ añadimos, antes de la formación del complejo, un agente reductor como es el clorhidrato de

hidroxilamina, el cual reduce el Fe3+ a Fe2+ según la reacción:

4 Fe 3+ + 2 NH2OH 4 Fe 2+ + N2 O + 4 H3O + + H 2 O

30


La formación del complejo hierro (II) con fenantrolina se da en un intervalo de pH

comprendido entre 2 y 9, aunque éste es suficientemente amplio, para asegurar la formación

cuantitativa del complejo se adiciona al medio acetato sódico que neutraliza el ácido formado

durante la reducción del hierro (III) y ajusta el pH a un valor al que se puede efectuar la formación

del complejo.

Este método puede aplicarse a vinos blancos o poco coloreados y permite determinar el contenido

total de hierro (Fe2+ + Fe3+) en el vino.

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

Disoluciones necesarias

- Disolución patrón de hierro (II)

Preparar una disolución de hierro pesando 1.404 g de sulfato ferroso amónico hexahidratado.

Transferir cuantitativamente la muestra pesada a un matraz aforado de un litro y añadir suficiente

agua para disolver la sal. Añadir 2.5 ml de H2SO4 concentrado, enrasar con agua desionizada y

homogeneizar. Guardar la disolución resultante en una botella de polietileno preparada para tal

fin.

- Disolución 2. 10-3M de 1,10-Fenantrolina

Disolver 100 mg de monohidrato de 1,10-fenantrolina en 100 ml de agua desionizada.

- Disolución de clorhidrato de hidroxilamina al 10%

Disolver 10 g de clorohidrato de hidroxilamina en 100 ml de agua desionizada.

- Disolución 0.1M de acetato sódico

Disolver 8.20 g de acetato de sodio en 1000 ml de agua desionizada.

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Material e instrumentación necesarios- Matraces aforados de 50 mL

- Pipetas de 1, 2, 5 y 10 mL

- Espectrofotómetro

PROCEDIMIENTO:

Obtención de la función de calibrado

Construir una recta de calibrado, adicionando en matraces de 50 ml, 0, 0.5, 1.0,

1.5, 2.0, 2.5 y 3.0 mL de disolución patrón de sulfato ferroso amónico hexahidratado, 2

mL de clorhidrato de hidroxilamina (pipeta de 2 ml), 10 ml de acetato sódico (pipeta de

10 mL), 5 mL de 1,10-Fenantrolina (pipeta de 5 ml) y enrasar con agua destilada.

Esperar 10 minutos y medir la absorbancia a 510 nm de longitud de onda.

Preparación de la muestra a analizar

Para el análisis de la muestra, pipetear 5 ml de vino a un matraz aforado de 50 ml y añadir

las mismas cantidades de los reactivos anteriormente citados. Esperar al menos 10 minutos para

que se desarrolle el color completamente y por último, medir la absorbancia en el

espectrofotómetro a 510 nm de longitud de onda.

Método de adición de patrón

Se prepara una serie de cuatro patrones en matraces aforados de 50 ml añadiendo a todos

ellos en el orden indicado 2.5 ml de muestra de vino y a continuación 0, 1.0, 2.0 y 3.0 ml

respectivamente de la disolución patrón de Fe (II) de 20 ppm, 2 ml de clorohidrato de

32


hidroxilamina al 10 %, 10 ml de acetato sódico 0.1 M y 5 ml de 1,10-fenantrolina, enrasando

finalmente con agua destilada. Se mide la absorbancia a 510 nm de las disoluciones preparadas

frente al blanco correspondiente, transcurridos diez minutos de su preparación.

Resultados

1. Obtención de la Recta de calibrado

Matraz nº mL de Fe(II) g/ mL de Fe(II) A (510 nm)

1

2

3

4

5

6

7

2. Medida de la Muestra

Réplicas A (510 nm)

1

2

3

33


3. Método de adición de patrón

Matraz nº mL de muestra mL de Fe (II) g/ mL de Fe(II) A (510 nm)

(añadidos)

1 2.5 0

2 2.5 1.0

3 2.5 2.0

4 2.5 3.0

Representaciones gráficas

1.- Función de calibrado.

2.- Método de adición de patrón.

Tratamiento de datos

34


Expresión de resultados

Expresar en ppm el contenido en hierro de las muestras analizadas:

A. Encontrado mediante la función de calibrado:

- Resultado individual:.......................... CV (%)...........

- Resultado de grupo:............................ CV (%)...........

Encontrado con el método de adición de patrón:

- Resultado individual:..............

- Resultado de grupo:................. CV (%)...........

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. ¿Para que sirve la determinación de Fe total en vinos?2. ¿Cuales son los valores permitidos de Fe total en vinos?3. ¿La determinación de r y r2 en las curvas de calibración en que nos ayuda?4. ¿Qué función tiene la 1,10-fenantrolina en la práctica?5. ¿Para que nos sirve el usar el método de adición estándar?6. ¿Por qué otro método podría determinar Fe total en vinos?

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PRÁCTICA No. 3DETERMINACIÓN DE ALCOHOL ETÍLICO

OBJETIVO:

Determinar la concentración de etanol por refractometría

INTRODUCCIÓN

Cuando la radiación atraviesa un medio transparente se produce una interacción entre el campo eléctrico de la radiación. La radiación resultante conserva sus frecuencias características pero tanto la velocidad como la dirección de propagación pueden cambiar, esta desviación se conoce como índice de refracción. El índice de refracción de un líquido varía con la temperatura y la presión, no así la refracción específica.

La refractometría presenta las siguientes ventajas

a) fácil y rápida

b) no destruye la muestra

c) requiere unas cuantas gotas de muestra

MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS

1. 2 Pipetas serológicas de 5 ml2. Pipetas pasteur3. 5 matraz aforado de 10 ml4. Probeta de 50 ml5. Piceta

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6. Refractómetro Abbe7. Etanol8. Agua9. Muestra de bebida comercial que contenga etanol.

Procedimiento

1. Preparar soluciones de etanol de concentración: 10, 20, 30, 40 y 50 % con un volumen de 10 ml.

2. Medir el índice de refracción de cada una de las soluciones.3. Medir el índice de refracción de las muestras problema.4. Graficar el índice de refracción contra la concentración, ajustando la recta mediante

mínimos cuadrados.5. Encontrar la concentración de etanol de las muestras problema

Tabla de concentraciones de soluciones de etanol para construir la curva de calibración

solución Concentración (%) η1 102 203 304 405 50

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO

1. Aparte del índice de refracción que más podemos medir con el refractómetro de Abbé2. Explique la diferencia entre refracción y reflexión3. ¿Qué relación existe entre el índice de refracción y la concentración?4. ¿Qué interpretación se le puede dar al índice de refracción?

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PRÁCTICA No. 9DETERMINACIÓN DE COBRE EN UNA BEBIDA ALCOHÓLICA

MEDIANTE ABSORCIÓN ATÓMICA

OBJETIVOS:

3. Conocer el funcionamiento del equipo de Absorción atómica4. Realizar una curva de calibración de cobre5. .Realizar curva de calibración mediante el método de adición estándar

INTRODUCCIÓN:La espectroscopía de absorción atómica (a menudo llamada AA) es un método que utiliza comúnmente un nebulizador pre-quemador (o cámara de nebulización) para crear una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama con una longitud de trayecto más larga.

La temperatura de la llama es lo bastante baja para que la llama de por sí no excite los átomos de la muestra de su estado fundamental. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitación de los átomos del analito es hecha por el uso de lámparas que brillan a través de la llama a diversas longitudes de onda para cada tipo de analito.

En la AA, la cantidad de luz absorbida después de pasar a través de la llama determina la cantidad de analito en la muestra. Una mufla de grafito para calentar la muestra a fin de desolvatarla y atomizarla se utiliza comúnmente hoy día para aumentar la sensibilidad. El método del horno de grafito puede también analizar algunas muestras sólidas o semisólidas. Debido a su buena sensibilidad y selectividad, sigue siendo un método de análisis comúnmente usado para ciertos elementos traza en muestras acuosas (y otros líquidos).

41

http://es.wikipedia.org/wiki/Grafito

http://es.wikipedia.org/wiki/Mufla_de_grafito

http://es.wikipedia.org/wiki/Analito

http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81tomo

http://es.wikipedia.org/wiki/Espectroscop%C3%ADa


En un atomizador con llama la disolución de la muestra es nebulizada mediante un flujo de gas oxidante mezclado con el gas combustible y se transforma en una llama donde se produce la atomización. El primer paso es la desolvatación en el que se evapora el disolvente hasta producir un aerosol molecular sólido finamente dividido. Luego, la disociación de la mayoría de estas moléculas produce un gas atómico.

EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS:

6. Espectrofotómetro de Absorción atómica.7. 15 matraz aforado de 10 mL.8. 2 Pipetas de 1 mL.9. 2 pipetas de 2 mL.10. 2 pipetas de 5 mL.11. 2 pipetas de 10 mL.12. Agua destilada en una pizeta.13. Muestras: Mezcal de diferentes marcas.

PROCEDIMIENTO:

1. Curva patrón

Partiendo de una disolución patrón de 10 mg/L para las siguientes diluciones según la siguiente tabla (1):

Estándar No- Vol. De disolución patrón Aforo con agua1 0.4 mL 10 mL2 0.8 mL 10 mL3 1.2 mL 10 mL4 1.6 mL 10 mL5 2.0 mL 10 mL

42


Leer los estándares y muestras a λ=324.74 nm, Slit 2.7/0.8 nm.

Con los datos obtenidos llenar la siguiente tabla (2):

Estándar No. Absorbancias Concentración (mg/L)12345

MuestrasA

2. Método de Adición Patrón.

En matraces aforados de 10 mL, a partir de una disolución patrón de 10 mg/L preparar las siguientes disoluciones según la siguiente tabla (3):

Estándar No. Vol. De disolución patrón Volumen de muestraMuestra - -

1 0.4 mL 8 mL2 0.8 mL 8 mL3 1.2 mL 8 mL4 1.6 mL 8 mL5 2.0 mL 8 mL

Aforar las disoluciones anteriores con agua.

Leer los estándares y muestras a λ=324.75 nm Slit 2.7/0.8 nm.

Con los datos Obtenidos llenar la siguiente tabla (4):

Estándar No. Absrobancias Concentración (mg/L)Muestra

12345

RESULTADOS y CUESTIONARIO:

43


1. Completar la tabla (2) calculando las concentraciones de los estándares2. Con los datos obtenidos en la tabla (2) graficar A vs Concentración.3. A partir de los datos obtenidos de la gráfica, completa la siguiente tabla:

Regresión Linealm=b=r=

4. Se cumple la ley de Lambert-Beer, si o no y ¿Por qué?5. Calcula la concentración en la muestra6. Completar la tabla (4) calculando la concentración de los estándares7. Con los datos obtenidos en la tabla (4) graficar A vs Concentración en la misma

gráfica del punto 2.8. A partir de los datos obtenidos de la gráfica completa la siguiente tabla:

Regresión Linealm=b=r=

9. Indica, ¿Cuál es la concentración de la muestra?10. Con tus resultados anteriores:

a. Existen interferencias, si las hay de que tipob. ¿Que resultado reportarías y por qué?

11. En base a la NOM-142-SSA1-1995, indica si el dato que obtuviste esta dentro de lo establecido o no y que conclusión darías.

CONCLUSIONES

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LICENCIADO EN FARMACIA

PRÁCTICA No. 2 “DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE ÁCIDO ASCÓRBICO (VITAMINA C) ENTABLETAS EFERVESCENTES MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIÓN INDIRECTA

ESPECTROFOTOMÉTRICA BAJO CONDICIONES DE AMORTIGUAMIENTO”.

I.-OBJETIVOS:

Cuantificar ácido ascórbico en tabletas efervescentes mediante una curva de

calibración indirecta bajo condiciones químicas optimizadas.

Reconocer la sustancia que da la absorbancia al pH de trabajo, así como calcular

el coeficiente de absortividad a la longitud de onda seleccionada.

II.- INTRODUCCIÓN

Los principios de preparación y trazo de una curva de calibración ya fueron estudiados en

prácticas anteriores, donde se considera que la respuesta del instrumento es lineal

respecto a la concentración de la sustancia a cuantificar, sin embargo debe considerarse

que si la curva es indirecta existe una o varias reacciones efectuadas en los sistemas de

preparación, dado que la sustancia de interés da señal muy pobre o no da señal, este

reactivo que genera la reacción debe encontrarse en exceso , considerando el siguiente

estado de equilibrio de manera general:

aX bY → cZ Keq’ > 1

inicio Vst Cst

agrega VyCy

equilibrio aε VyCy-b/a VstCst c/a VstCst

En el caso de que Y dé la señal, el modelo matemático que describe la respuesta gráfica

es: P = Ky [Y] y considerando el estado de equilibrio anterior entonces:

[Y] = VyCy - b/aVstCst / Vaforo. La función será:

P = Ky [(VyCy - b/a VstCst )/ Vaforo]

27


Vst, Vy, Vaforo, representan los volúmenes de los reactivos utilizados al preparar los

sistemas del estándar, reactivo Y y el aforo utilizado, Cst , Cy representan las

concentraciones molares del estándar (stock) y la concentración del reactivo Y agregado

para generar la reacción

Entonces se puede graficar P=f (Vst Cst / V aforo), obteniéndose una función de pendiente

igual a -Kyb/a y ordenada al origen igual a KyVyCy/Vaforo

En esta práctica se propone la cuantificación indirecta de ácido ascórbico en una forma

farmacéutica, siguiendo las variaciones de una especie colorida (Y).

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

MATERIAL POR EQUIPO REACTIVOS

8 tubos de ensaye con gradilla Agua destilada

6matraces volumétricos de 10 mL Ácido ascórbico estándar

2 vasos de precipitados de 50 mL

1 pipeta volumétrica de 0.5 1, 2,3,4,5 mL Buffer Ácido acético /Acetato 0.01 M

pH=4.53 matraz volumétrico de 25 mL

1 piseta, espátula y mortero con pistilo

1 agitador magnético c/barra

1 embudo con papel filtro Tabletas efervescentes (leer el marbete y

anotar el contenido de ácido ascórbico)

Un espectrofotómetro con celdas. 2,6 diclorofenol indofenol

28


I

V

.

-

P

R

O

C

E

D

I

M

I

E

N

T

O

E

X

P

E

R

I

M

E

N

T

A

L

1

.

1

P

r

e

p

a

r

a

c

i

ó

n

d

e

s

o

l

u

c

i

o

n

e

s

-- Buffer de acetatos 0.01 M pH = 4.5

--Solución estándar de

ácido ascórbico: Se pesan

50 mg de ácido ascórbico en

un vaso de precipitados de

50 mL se disuelven en

aproximadamente 10 mL de

Buffer de acetatos pH= 5 y

aforan a 25 mL con agua

destilada (solución A), de

esta solución se toman 2

mL, y mezclan con 10 mL de

Buffer pH=5 y se aforan a 25

mL con agua destilada

(solución B) stock. (9 x10-

4M)

--Solución de 2,6

diclorofenolindofenol(DFI)

0.04 M: Pesar 100 mg de 2,6

diclorofenolindofenol en un

vaso de precipitados y

agregar 5 mL de buffer pH=5

agitar y trasvazar al matraz

de 10 mL y aforar con agua

destilada.

-- Solución problema: Si

la tableta contiene 1.0 g de

ascórbico, se pesan 50 mg

de polvo de tabletas*

finamente pulverizadas y se

afora a 10 mL con agua

destilada.

* si la formulación es de 2.0 g pesar 25 mg de polvo.

1.1 Tabla 1 Preparación de Sistemas (curva de calibración y problema)

Sistema 0

Soln. Buffer de acetatos pH=4.5 2

Soln. B (stock) de ascórbico (9x10-4M) 0

Soln. de 2,6 diclorofenolindofenol 0.04 M 0

Soln. Problema 0

Aforo con agua destilada 10 10


3 .Calibración del espectrofotómetro: El procedimiento de calibración se realizará

de acuerdo al instructivo utilizando al sistema cero como blanco reactivo.

4. Determinación de (longitud de onda) de trabajo: Identifique cuáles el sistema

más concentrado en 2,6 diclorofenoindofenol y realice el espectro de absorción, el

cuál obtendrá al variar la en el espectrofotómetro que en este caso en particular será

de 460 a 560 nm a intervalos de 10 nm.

Nota: para cada cambio de se debe ajustar el espectrofotómetro con el blanco

nuevamente.

1. Registre los datos de absorbancia y % de Transmitancia: en la tabla No. 1,

posteriormente se realizará el gráfico correspondiente.

2. Obtenga la curva de calibración: una vez que se ha elegido la longitud de onda,

lea los sistemas de la curva de calibración registre los datos y graficar.

V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla 2- Datos experimentales del espectro de absorción.

Longitud de onda (nm) 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560

Absorbancia

% Transmitancia

30


Gráfica 1.- Espectro de Absorción A= f( Longitud de onda )

Tabla 3- . Curva de Calibración Indirecta

Sistema 1 2 3 4 5 6 7

Concentración M de

Ascórbico estándar

Absorbancia

31


Grafico 2.- Curva de Calibración Indirecta de Ac. Ascórbico A = f(M)

VI. INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MÍNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIÓN DEL INFORME DE TRABAJO.

1.- Datos Generales

I) CARÁTULA. Incluir en

éste orden: Nombre de la

Universidad, nombre de la

Facultad, nombre de la

Sección, nombre de la

asignatura comenzando con

“Laboratorio de…”,

Número y nombre de la

práctica, Número de equipo,

Nombre de los integrantes

(solamente de aquellos que

participaron en su

realización, se dará por

entendido que los que no

aparezcan no recibirán

calificación correspondiente

a esa práctica. También es

importante recordar que

aquellas personas que

faltaron a la parte

experimental de la práctica

no tendrán calificación de

reporte y por ende no se

colocará su nombre, a

menos que halla repuesto la

práctica en otro grupo bajo

autorización de los

profesores y su informe lo

realizará de manera

individual), Nombre de los

profesores (incluir grado:

QFB, Q, M en C, Dr., etc.),

Fecha de realización de la

práctica y Fecha de entrega

de reporte.

II) NÚMERO Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base

al objetivo general del

Manual y a las actividades

realizadas en la práctica

redactar 2-3 objetivos

particulares recordando que

deben responder el ¿Qué?,

¿Cómo? y ¿Para qué?.

32


VI) INTRODUCCIÓN. Incluir

solamente aplicaciones del

Método de cuantificación en

las diferentes áreas que

contempla su carrera,

incluyendo ejemplos

(recordar que deben citar las

referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:

Preparación

del STD; indicando los volúmenes, masas y/o concentraciones reales que se emplearon en caso de una modificación a la parte experimental reportada en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y densidad (en caso de reactivos líquidos).

Preparación de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar la marca, presentación y gramaje de la muestra empleada en caso que el alumno la halla proporcionado.

Preparación de los sistemas de la

curva de calibración; en forma de tabla incluyendo número y nombre. En el caso del buffer especificar la concentración y pH reales con las que se trabajaron, así como de la solución DFI.

Calibración del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir imágenes o dibujos y será con base a la explicación del profesor no a lo reportado en el Manual.

Realización del espectro de absorción; mismas consideraciones del punto anterior.

Lectura de los sistemas de calibración; mismas consideraciones del punto anterior.

Disposición de residuos; mencionar cómo se dispusieron los residuos en la sesión experimental.

2) RESULTADOS. Incluir:Tabla No. 2.- Datos experimentales del espectro de absorción, completa.

Gráfico del espectro

de absorción indicando número y nombre

CORRECTO (el nombre correcto de un espectro de absorción incluye el nombre del analito, la composición de la matriz así como las condiciones de amortiguamiento impuestas y la concentración del analito, la cual es bien conocida ya que se emplea un sistema de la curva de calibración para su realización), considerar que se incluirán 2 gráficos, uno en función de Absorbancia y otro en % Transmitancia.

Tabla No. 3.- Datos experimentales de la Curva de calibración.

33


Gráfico de la curva de calibración indicando número y nombre CORRECTO (el nombre correcto del gráfico de una curva de calibración se puede indicar bajo el

modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).

Además debe incluir forzosamente: Ecuación de la recta bajo el modelo:

PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la

ordenada al origen)

No indicar la propiedad y la concentración del analito como “x” y “y”, y también

debe incluir Coeficiente de determinación (r2).

Incluir tabla: con número y nombre. Muestra empleada (nombre comercial) Presentación

Lote y fecha de caducidad (u origen)

Marbete (enfocándose sólo al analito que se cuantificó

experimentalmente)

Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cápsula,

por 100ml, etc.)

% de principio activo con respecto al marbete

b) ANÁLISIS DE RESULTADOS. Incluir:Realizar el análisis e interpretación correspondiente al valor del coeficiente de

determinación para la validez de los resultados de cuantificación.

Analizar los criterios químicos que se emplearon para elegir la λ óptima en los 2 espectros de absorción. Además justificar porqué se consideró ese rango de nm para realizar el barrido.

Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en los sistemas de la curva; además, proponer la reacción representativa llevada a cabo entre el ácido ascórbico y el DFI, así como el cálculo de la Keq´ considerando que en los equilibrios redox el cálculo de la Keq´ no es mediante Ley de acción de masas, sino mediante la fórmula general considerando los E°´ y

Analizar la relación de las variables involucradas y contrastarlas con la Ley de Lambert & Beer.

34


Calcular el Coeficiente de absortividad molar, incluyendo unidades correctas, la manera de cómo se calculó especificando de que analito corresponde y su interpretación.

Incluir los cálculos de cuantificación, en el siguiente orden: Cálculo de la concentración del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo en Preparación del STD), cálculo de la concentración de los sistemas de la curva, Interpolación de la propiedad de la muestra en la ecuación de la curva, regresión a las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo en Preparación de la muestra) y cambio de unidades a las similares al marbete así como

el % de principio activo; esto se debe reportar con los datos de ambos sistemas problema (6 y 7), al final discutir sobre los resultados obtenidos en ambos sistemas (6 y 7).

Con base al % de principio activo (recordar que el comparativo entre el resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles errores que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que cometió y las acciones preventivas que sugieres para la mejoría.

3. CONCLUSIONES. Con

base al objetivo general del

Manual y a los redactados

por ustedes (particulares).

4. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. Deberán ser citadas ya sea

en la introducción o en el

análisis de resultados en

caso que se hallan

empleado.

DATOSÁcido ascórbico(C6H8O6) pKa’s = 4.05, 7.252,6 diclorofenolindofenol ( C12H7Cl2NO2 ) pKa= 5.758 (forma ácida roja, básica azul)

C6H7O6 - / C6H6O6 + H+ + 2e-Eo´ = 0.13 V ( a pH=4.5)

C12H7Cl2NO2 / C12H7Cl2NO22-

Eo´ = 0.43 V ( a pH=4.5)(roja) (Incolora)

35


VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIÓN DE RESIDUOS

El ácido acético glacial debe

trabajarse en la campana

extractora utilizando una

perilla y nunca cerca de

algún mechero, añadir

siempre el ácido al agua,

tener precaución al preparar

la mezcla debido al

desprendimiento de calor. La

inhalación de sus vapores es

altamente tóxico produce

trastornos en las vías

respiratorias. Cualquier

contacto directo con la piel u

ojos debe de lavarse con

abundante agua.

Prácticas de Análisis Instrumental 5

Práctica 2

DETERMINACION DE HIERRO EN VINOS PORESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA

Objeto de la práctica

Llevar a cabo medidas de absorbancia atómica para la determinación de elementos a nivel de trazas en muestras reales utilizando el método de adición estándar

El hierro en los vinos

El contenido de hierro en los vinos suele oscilar entre 4 y 20 mg por litro, con contenidos medios de 6 a 12 mg/L. Su origen puede ser diverso. Una cantidad que apenas sobrepase los 3 ò 4 mg por litro constituye el hierro normal o hierro biológico absorbido por las raíces de la viña. Otra parte procede de la tierra o de los polvos terrosos que puedan manchar la superficie de las uvas. Además, ciertas cantidades pueden proceder de las herramientas metálicas utilizadas en su elaboración (trituradoras de uvas, prensas de acero, herramientas de vendimia, etc.) o en su almacenamiento (tornillos de las compuertas de los barriles, etc.)

Las sales de hierro se encuentran en el vino en los estados de oxidación (II) y (III). Las sales ferrosas son totalmente solubles y dejan el vino límpido, mientras que ciertas sales férricas (que pueden originarse por oxidación de las sales ferrosas por el oxígeno atmosférico) son insolubles o coloreadas. Este es el caso del fosfato férrico, sal blanquecina origen de la "quiebra blanca". Por otra parte, las combinaciones del hierro (III) con los poli-fenoles, coloreados de azul oscuro, son la causa de la "quiebra azul". Los vinos blancos están más sujetos a la primera, y, por el contrario, los vinos tintos, ricos en taninos, dejan un poso azulado o ennegrecido: "quiebra negra". Una concentración total de hierro del orden de los 10 mg/litro indica riesgo de quiebras férricas, si bien, este valor límite varía mucho en función de la composición del vino..

Prácticas de Análisis Instrumental 6

Reactivos• FeSO4.(NH4)2.SO4.6 H2O (Sal de Mohr) sólido

Material y aparatos• Matraces aforados de 50 mL• Pipetas de varios volúmenes• Espectrofotómetro de absorción atómica con llama

Técnica experimental

En cinco matraces aforados de 50 mL se ponen 10 mL de vino (o el volumen adecuado al contenido de hierro). Añadir a continuación a cada uno de ellos, 0, 5, 10, 15 y 20 mL de una disolución patrón de hierro conteniendo 10 p.p.m. de Fe. (Esta disolución se obtendrá por dilución de otra que contenga 500 p.p.m. de Fe, preparada a partir de sal de Mohr ). Seguidamente se añade una gotita de n-octanol a cada matraz, se enrasan con agua desionizada y se mide la absorbancia atómica del hierro.

Resultados

Fe añadidoAmL p.p.m.

05

101520

Ecuación de la recta de regresión:Concentración de hierro en la muestra de vino (mg/L)

practica vinos

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