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MODULO Nº 10

EXAMEN DE PARASITOLOGÍA

1. ESTABLECER LA CLASIFICACIÓN DE LOS PARASITOS.

CLASIFICACION DE LOS PARASITOS

PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA Subphylum Mastigophora

Clase Zoomastigophorea Orden Retortamonadida

Chilomastix mesniliRetortamonas intestinalis

Orden Trichomonadida Trichomonas vaginalisTricomonas hominis

Orden Diplomonadida Giardia lamblia

Orden Kinetoplastida Leishmania spp Trypanosoma spp

Subphylum Sarcodina Clase Lobosea

Orden Amoebida Entamoeba histolytica Entamoeba coliEndolimax nanaIodamoeba bütschliiDientamoeba fragilisHartmannella castellaniiAcanthamoeba

Orden Schizopyrenida Naegleria

Clase Acarpomyxea Orden. Leptomyxida

Balamuthia PHYLUM APICOMPLEXA

Clase Sporozoea Subclase Gregarina

Orden Eugregarinidia Gregarina polymorpha

Subclase Coccidia Orden Eucoccidiida

Eimeria spp. Sarcocystis spp. Toxoplasma gondii Cryptosporidium parvum Pneumocystis carinii Plasmodium spp.

Subclase Piroplasmia Orden Piroplasmida

PHYLUM MICROSPORA PHYLUM MYXOZOA PHYLUM CILIOPHORA

Clase Kinetofragminophorea Subclase Vestibuliferia

Orden trichostomatida Balantidium coli.

PHYLUM NEMATODA Clase Adenophorea

Strongyloides stercolarisAncylostoma duodenaleAscaris lumbricoidesAnisakis sp.Dirofilaria immitisLoa loaOnchocerca volvulusWuchereria bancroftiBrugia malayiDracunculus medinensis

Clase Secernentea Trichuris trichiuraTrichinella spiralis

PHYLUM PLATYHELMINTHES Clase Digenea

Superorden Anepitheliocystidia Orden Strigeatida

Schistosoma sp. Orden Echinostomatida

Fasciola hepaticaSuperorden Epitheliocystidia

Orden Plagiochiida Dicrocoelium sp. Paragonimus

Orden Opistorchiida Opistorchis Clonorchis Metagonimus

Clase Cestoda Sub clase Eucestoda

Orden Pseudophyllidea Diphyllobothrium latum

Orden Cyclophyllidea Familia Dipylidiidae

Echinococcus granulosusEchinococcus multilocularis

Familia Hymenolepididae Hymenolepis nanaHymenolepis diminuta

Familia Taeniidae Taenia saginataTaenia Solium

Familia Anoplocephalidae Anoplocephala perfoliata

PHYLUM ARTROPODA Clase Arachnida

Subclase Acarina Orden Parasitiformes

Rhipicephalus sanguineusOrden Acariformes

Sarcoptes spp.Clase Insecta

División Endopterygota u Holometabola Orden Diptera

Anopheles spp.Aedes aegyptiCulex spp.Phlebotomus spp.

Orden Siphonaptera Pulex irritans

División Exopterygota o Heterometabola Orden Anoplura

Pediculus humanusPhtirius pubis

Orden Hemiptera Cimex lectulariusReduvius personatusTriatoma infestansRhodnius prolixus

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2. INDIQUE LAS PRINCIPALES DIFERENCIAS ENTRE Entamoeba histolytica Y OTROS PROTOZOARIOS INTESTINALES.

CaracteristicasEntamoeba histolytica

Entamoeba coli

Endolimax nana

Iodamoeba bütschlii

Dientamoeba fragilis

TrofozoitoTamaño 20 - 40 15 - 50 6 - 15 5 - 20 5 - 12

Inclusiones

Globulos rojos no hay

bacterias en las muestras frescas

Bacterias Bacterias Bacterias Bacterias

Cariosoma Pequeño y central

Grande y excentrico

Grande y central o

excéntrico

Grande, granuloso central o

excéntrico

De 4 a 8 gránulos de ceomatina; a

veces 2 nucleos

Movilidad Intensa direccional

Lenta, sin progresión

Lenta con progresión

Lenta con progresión

Intensa con progresión

  Quiste

Tamaño 5 - 20 10 - 33 5 - 14 7 - 13 No se conocen quistes

Forma Esféricos EsféricosEsféricos, ovoide o elíptico

IrregularesNo se conocen

quistes

Masa de Glucogeno

Sí Sí Sí SíNo se conocen

quistes

Nucleos 1 - 4 1 - 8

1 - 4 membrana nuclear mal

definida

Habitualmente 1, menbrana nuclear mal

definida

No se conocen quistes

Cuerpos Cromatoides

Alargados, 2 x 4 con bordes redondeados

Raros; si existen, son filamentosos

con extremos a ángulo recto o puntiagudos

No NoNo se conocen

quistes

Cariosoma Central ExcéntricosExcéntricos, a veces dividido

Central o excéntrico

redondeado de granulos grandes

No se conocen quistes

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3. ¿CÓMO ES EL CICLO VITAL, MORFOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LA Giardia lamblia, Balantidium coli, Toxoplasma gondii y tenias?

Giardia lamblia Balantidium coli Toxoplasma gondii Tenias

CIC

LO

VIT

AL

La vía es fecal-oral y se produce por la ingestión de elementos contaminados con materia fecal del hombre o de la mayoría de los vertebrados, que actúan como reservorios para la infección en el hombre. El período prepatente es de 6 a 15 días. El potencial infectivo es bajo. Alrededor de 100 elementos ya son infectantes.Localización: al ingerir los quistes, en el estómago se disuelve la pared, y al ingresar al duodeno los trofozoítos comienzan una activa división. Se los encuentraen intestino delgado donde viven fijados al tercio basal de las vellosidades, cubiertos por moco, también en el colon y en la vesícula biliar. Se los puede aislar en drenajes biliares.

El principal reservorio animal es el cerdo. Se transmite a través de la ingesta de alimentos o aguas contaminadas con heces de estos animales. Se ha descripto la infección a través de heces humanas infectadas.Localización: habita en el intestino grueso. Puede tener localización extraintestinal.

Por la ingestión de elementos contaminados con heces de gato, manipulación o ingestión de carne o vísceras mal cocidas (el orden de frecuencia de la contaminación por esta vía es: porcino, ovino y vacuno), por pasaje transplacentario, transfusión sanguínea y trasplante de órganos.En los animales, por canibalismo.Localización: el Toxoplasma es un parásito intracelular obligado. Puede afectar cualquier órgano de la economía, dependiendo del tipo de huésped.

El cerdo participa activamente como tal, es decir como hospedador natural y necesario. Por sus hábitos alimentarios, ingiere proglótides que contienen decenas de miles de huevos; así, debido a la acción de enzimas y sales biliares del tracto digestivo, rompe el embrióforo y eclosiona la oncosfera. Los embriones activados se fijan momentáneamente a la pared intestinal por medio de sus tres pares de ganchos, liberan enzimas hidrolíticas que destruyen el tejido y atraviesan la barrera intestinal, llegan al torrente circulatorio para localizarse en cualquier parte de la economía del animal: hígado, pulmones y músculos, donde sufre un proceso de vesiculización y de ser estructuras microscópicas continúan su desarrollo hasta transformarse en cisticercos en un tiempo promedio de tres a cuatro meses, dando como resultado la cisticercosis porcina.El humano adquiere la teniasis debido a la ingesta accidental del cisticerco contenido en carne de puerco cruda o mal cocida. Al ingresar por vía oral, el cisticerco llega al estómago, donde debido a la acción proteolítica del jugo gástrico la cubierta del quiste es parcialmente digerida. Al pasar al intestino delgado, el protoescólex contenido dentro de él evagina por la acción enzimática y biliar y, mediante sus ventosas y ganchos, se ancla en la pared intestinal, para continuar su desarrollo hasta alcanzar la forma adulta, llamada "lombriz solitaria", en un tiempo de cuatro meses.

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MO

RF

OL

OG

IA

Se presenta en dos formas.Trofozoíto: tiene forma de pera, posee dos núcleos y cuatro pares de flagelos, un disco suctorio (órgano de fijación) en la mitad anterior de la superficie ventral.Es la forma patógena y se destruye rápidamente en el medio ambiente.Quiste: ovoide, de 8 a 14 mm de largo por 7 a 10 mm de ancho, con cuatro núcleos y el doble de estructuras flagelares que el trofozoíto; es la forma infectante.

Es el protozoo más grande y el único ciliado que produce enfermedad en el humano.Trofozoíto: es oval, mide 50 a 200 mm, la membrana está rodeada de cilias.Presenta un micro y un macro núcleo. Es la forma patógena.Quiste: es redondeado, mide 40-60 mm, y contiene un solo parásito, posee también un micro y un macronúcleo. Es la forma infectante.

Se lo puede encontrar como zoítos libres, en multiplicación endocelular (endozoítos o taquizoítos) o como formas enquistadas (quistozoítos o bradizoítos).Las principales formas de presentación del agente son:Zoíto libre: tiene aspecto semilunar, mide alrededor de 4-7 mm de largo. Es la forma invasora y la manera en que se lo encuentra libre en sangre.Seudoquiste: es la célula del huésped repleta de parásitos (taquizoítos o endozoítos). El pseudoquiste se forma en caso de multiplicación acelerada, en determinado momento la célula estalla y quedan nuevamente zoítos libres que se diseminan por todo el organismo.Quiste: también es intracelular, puede llegar a medir entre 100 a 200 mm y se encuentra dentro de la célula huésped repleto de bradizoítosOoquiste: es el resultado de la reproducción sexual del parásito. Contiene dos esporoquistes, cada uno de los cuales contiene 4 esporozoítos.

Son de tamaño variable, desde 3 a 5 mm (Echinococcus) hasta más de 10 metros (Taenias y Diphyllobothrium) y de color blanco.La forma es acintada. Están constituidos por:1) un escólex o cabeza que sirve como órgano de fijación a través de 4 ventosas o dos botridias, y una corona o rostella que puede tener o no una corona de ganchos; 2) el cuello, que es la porción intermedia desde donde se van generando nuevos segmentos o proglótides y pueden ser inmaduros o grávidos; c) el cuerpo o estróbilo formado por los proglótides o segmentos en número de 3 -como el Equinococus- a centenares como las Taenias y el Diphiridium. Generalmente son hermafroditas, necesitan de un huésped intermediario y, algunos, de dos de ellos. Presentan formas larvarias(cysticercoides, cisticercos, caenurus, quística, procercoide o pleocercoide). Los huevos están constituidos por el óvulo fecundado, rodeado de vitelius y envuelto en membranas embrionarias; ovalados, con una sola cubierta, y operculados o esféricos con varias cubiertas y un embrión hexacanto.

DIA

GN

OS

TIC

O

Directo: búsqueda de trofozoítos o quistes en heces y líquido duodenal. El uso de enterotest en nuestra experiencia no fue más eficaz que el coproparasitológico. La reacción de PCR es importante para estudios de fuentes de contaminación, a través de la identificación de las diferentes cepas. Indirecto: análisis de antígenos específicos con la utilización de anticuerpos monoclonales por técnicas de ELISA o IFI. Los estudios serológicos sólo tienen valor epidemiológico.

Directo: por identificación de los trofozoítos en heces recién emitidas o recogidas con conservantes para trofozoítos, debido a que cuando hay patología los quistes se encuentran en muy poca cantidad. Se pueden hallar los trofozoítos en el material obtenido por raspado de las úlceras durante la sigmoideoscopia, o en material de biopsia.

Directo: observación del parásito en sangre y cortes histológicos.Aislamiento del parásito mediante inoculación a ratones y cultivo de tejidos.Actualmente la aplicación de PCR ha dado buenos resultados especialmente para el diagnóstico en pacientes inmunocomprometidos. Valoración de AcIgG: existen dos tipos de AcIgG valorables: los correspondientes a la pared celular del parásito, de aparición precoz, y los citoplasmáticos de aparición tardía, que son los que persisten crónicamente.Las siguientes 4 reacciones detectan ambos: reacción de Sabin-Feldman (SF), Inmunofluorescencia indirecta (IFI), Enzimoinmunoensayo (ELISA), La reacción de aglutinación directa Valoración de Ac IgMValoración de Ac IgAValoración de Ac IgE

Ante la presencia de síntomas, el primer diagnóstico es por la observación directa de las cadenas de proglótidos en las heces, o adheridos en la ropa. Es frecuente encontrar proglótidos en las heces de personas que no tienen ningún síntoma o malestar. En ocasiones el diagnóstico es facilitado por el mismo enfermo quien encuentra las proglótides en su propio bolo fecal.

El diagnóstico específico se debe hacer por la observación microscópica de huevos mediante diagnóstico coproparasitoscópicos (CPS), ya sea del método Faust (por flotación) o Ritchie (por sedimentación) o por frotis grueso (Kato-Katz). Algunos autores proponen una impresión anal con cinta adhesiva o método de Graham pero estos métodos no permiten diferenciar entre las dos especies de Taenia, por lo que el resultado debe reportarse como positivo a teniasis.

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4. EXPLIQUE LAS CARACTERISTICAS PRINCIPALES DE LAS DUELAS DE LA SANGRE Y DEL HIGADO.

DUELA DE SANGRE DUELA DEL HIGADOSchistosoma mansoni

Los gusanos adultos miden 10-12 mm (el macho) y 12-16 mm (la hembra). Presentan simetría bilateral; tienen ventosas fijadoras tanto orales como ventrales (acetábulo); tubo digestivo es incompleto, con boca, esófago, crura intestinal bifurcada, y carecen de ano.

los Schistosoma son dioicos, es decir, hay separación entre el macho y la hembra. Además, tienen dimorfismo sexual, el macho siendo considerablemente menor que la hembra.

Los huevos son excretados por los humanos en las heces, luego del cual, en el agua, se liberan las larvas llamadas miracidio. Estas penetran la piel del molusco dentro del cual se transforman en esporoquistes madres. Llenas en su interior de células germinativas, son capaces de generar más de 250 esporoquistes hijos, los cuales migran al hepato-páncreas y originan docenas de miles de cercarias. La mayoría mueren antes de 24 horas, otras son liberadas del molusco y penetran la piel del humano gracias a sus movimientos y secreciones líticas. Según la especie, en el hombre quien es el hospedador definitivo, completan su ciclo de vida en varios órganos.

Fasciola hepatica

La duela del hígado es un gusano plano, sin segmentos, carnoso, que mide de 2 a 3,5 cm de largo por 1 a 1,5 cm de ancho. Es de color blanquecino y posee tonalidades que van desde el cenizo hasta coloraciones parduscas.

Son hermafroditas.

El ciclo biológico de este parásito presenta cuatro fases:

Fase de embriogonia: Inicia desde que sale el huevo al medio, madura y desarrolla, hasta formarse el miracidium.

Fase de partenogonia: Es todo el desarrollo que el parásito realiza dentro del caracol hasta que sale la cercaria.

Fase de cistogonia: Inicia desde que sale la cercaria hasta que se enquista.

Fase de maritogonia: Desde que el quiste es ingerido por el hospedador definitivo hasta que termina su desarrollo y comienza a producir huevos.

Una fasciola adulta puede poner una media de 3 500 huevos al día, pero esta cifra puede variar

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5. SEÑALE COMO SE ESTABLECE EL DIAGNOSTICO DEL Necator americanus, Enterobius vermicularis y Ascaris lumbricoides.

Necator americanus Enterobius vermicularis Ascaris lumbricoidesD

IAG

NO

ST

ICO

La técnica más común de diagnóstico para Necator americanus es mediante la toma de una muestra de materia fecal, fijarla en formalina al 10% y concentrarla con la técnica de sedimentación con etilacetato de formalina, recogiendo entonces el sedimento para verlo al microscopio. Sin embargo los huevos de A. duodenale y N. americanus no pueden ser distinguidos entre sí, lo que puede hacerse por medio de la identificación de las larvas. Estas pueden ser encontradas en la materia fecal hasta que las muestras permanezcan a temperatura ambiente por un día o más.

El diagnóstico en el laboratorio de la presencia de oxiuros se efectúa por la recuperación de los huevecillos de la piel anal y perianal mediante el uso de la técnica de la cinta adhesiva (test de Graham) a través de la cual se pueden observar al microscopio. Las muestras deberán recogerse durante 3 días consecutivos para que sean representativas.Al contrario de otros nemátodos intestinales, los huevecillos de los oxiuros no se encuentran en la heces mientras que los gusanos adultos pueden aparecer en las heces o bien aparecer en la cinta adhesiva al momento del examen si el momento coincide con la deposición de huevecillos de la hembra en la zona anal y perianal.

El diagnóstico se efectúa en el laboratorio por la identificación en heces de los huevecillos característicos del áscaris. En muchas ocasiones se puede observar la presencia de lombrices adultas en las heces, identificadas por el propio huésped. la suboclusión o la oclusión del intestino puede ser detectada por radiografía de abdomen. la radiografía también puede ayudar en el diagnóstico de áscaris durante su migracion por pulmón, se toma una serie con el objetivo de demostrar infiltraciones cambiantes.

6. EFECTUAR UN CUADRO SINÓPTICO EXPLICATIVO SOBRE LOS INSECTOS Y LAS ENFERMEDADES QUE PROPAGAN.

INSECTOS MICROORGANISMO ENFERMEDAD QUE CAUSA

Anopheles spp. Plasmodium sp. Malaria

Aedes aegypti Dengue y Fiebre amarilla

Culex spp. Leishmania sp.Rickettsia sp.Borrelia sp.

LeishmaniasisTifoFiebre recurrente

Phlebotomus spp. Bartonella bacilliformis Bartonelosis

Musca domestica Salmonella sp.Shigella sp.

SalmonelosisShigelosis

Pediculus humanus Rickettsia prowazekiBorrelia sp.

TifoFiebre recurrente

Phtirius pubis Rickettsia prowazekiBorrelia sp.

TifoFiebre recurrente

Xenopsylla cheopis Peste bubonica

Cimex lectularius Tripanosoma sp. Enfermedad de Chagas

Reduvius personatus Tripanosoma sp. Enfermedad de Chagas

Triatoma infestans Tripanosoma sp. Enfermedad de Chagas

Rhodnius prolixus Tripanosoma sp. Enfermedad de Chagas

Dermacentor andersoni Pasteurella tularensisRickettsia sp.Borrelia sp.

TularemiaTifoFiebre recurrente

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7. ¿EN QUÉ CONSISTE GENERALMENTE LOS METODOS EN PARASITOLOGIA?

EXAMEN DIRECTO MACROSCÓPICOFundamento.Permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos adultos, enteros o fraccionados, así como los cambios en las características organolépticas de las heces eliminadas, (color, presencia de sangre y/o moco, consistencia, etc.).Observación.Observar las características organolépticas de las heces, útiles para la ayuda diagnóstica (consistencia, color, presencia de moco, sangre, alimento sin digerir), así como la presencia de gusanos cilíndricos, anillados o aplanados (enteros o parte de ellos)

EXAMEN DIRECTO MICROSCÓPICOFundamento.Buscar, principalmente en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas móviles de parásitos de tamaño microscópico (trofozoítos, quistes de protozoos: Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Balantidium coli, etc.; así como larvas o huevos de helmintos: Strongyloides stercoralis, Ancylostoma duodenale, Necator americanus, Trichostrongylus sp., Paragonimus, Fasciola, etc.).Observación Observar al microscopio a 10X ó 40X. No es aconsejable usar objetivo de inmersión (100X), pues se puede ensuciar el microscopio.Recorrer la lámina siguiendo un sentido direccional, ejemplo: de derecha a izquierda, o de arriba a abajo.

MÉTODOS DE CONCENTRACIÓNLos trofozoítos, quistes, ooquistes, larvas y huevos, pueden concentrarse por diversos procedimientos, lo cual permite corroborar el hallazgo del método directo y conocer la intensidad del enteroparasitismo. Estos procedimientos de concentración pueden ser: flotación, sedimentación, o por combinación de ambos métodos. La elección de cada procedimiento dependerá de las facilidades del laboratorio, el adiestramiento del personal, la procedencia de la muestra (zona geográfica), el conocimiento de la prevalencia de los parásitos (zona costeña, andina y selvática o área rural o urbana), y la especie del parásito que se desea investigar.

Métodos de concentración por sedimentación.

Técnica de la sedimentación espontánea en tubo (Técnica de concentración por sedimentación, sin centrifugación):Fundamento.Se basa en la gravidez que presentan todas las formas parasitarias para sedimentar espontáneamente en un medio menos denso y adecuado como la solución fisiológica. En este método es posible la detección de quistes, trofozoítos de protozoarios, huevos y larvas de helmintos.Observación.Examinar primero la preparación con solución fisiológica para observar formas móviles y de menor peso específico (trofozoítos, quistes y larvas) y luego la preparación con lugol para observar sus estructuras internas, de estos y de otros parásitos de mayor peso específico (huevos, larvas).

Método de sedimentación rápida (TSR, MSR) (Concentración por sedimentación sin centrifugación)Fundamento.Se basa en la gravidez de los huevos que, por su tamaño y peso sedimentan rápidamente cuando se suspenden en agua.ObservaciónObservar la presencia de huevos. Este método es especialmente útil para la búsqueda de Fasciola hepatica, Paragonimus sp. y nemátodes como Ascaris lumbricoides (huevo fecundado o no fecundado), Trichuris trichiura, Hymenolepis nana, Diphyllobothrium pacificum, etc.

Método de Baermann (Método de concentración por migración)FundamentoSe basa en los tropismos positivos: geotropismo, termotropismo e hidrotropismo de los trofozoítos de protozoos y larvas de helmintos. Es útil principalmente para Balantidium coli y larvas de Strongyloides stercoralis.Observación.Observar trofozoítos y larvas en movimiento. En algunas ocasiones se pueden observar formas adultas de E. vermicularis macho.

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Para una mejor diferenciación de las larvas de los parásitos, realizar el método de Harada-Mori

MÉTODO CUANTITATIVO DE KATO – KATZ (ANÁLISIS CUANTITATIVO = hpg)FundamentoSe basa en la técnica de Kato y que permite cuantificar la presencia de huevos de helmintos. Se expresa en número de huevos por gramo de heces (hpg).

MÉTODOS DE COLORACIÓN PARA PROTOZOARIOSMétodo de Ziehl-Neelsen (modificado para observación de coccidias: Cryptosporidium y otros)Fundamento.Se basa en el comportamiento ácido-resistente de la cubierta de estos parásitos, los cuales se tiñen de rojo y destacan sobre un fondo verde o azul, dependiendo del colorante de contraste usado.

Coloración Gram y coloración tricrómica (para microsporidios).Fundamento.Se basa en la identificación de esporas de Enterocytozoon, Encephalitozoon, etc. por la combinación de las coloraciones Gram y tricrómica.

Coloración Trichrome (Gomori Wheatley).Fundamento.Permite colorear las estructuras internas de los protozoos para su caracterización. Esta técnica utiliza muestras de heces frescas, preservadas con PVA o fijadas con Schaudinn. Es un método rápido y de utilidad en el estudio de Entamoeba, Giardia, Balantidium, Cyclospora y otros protozoarios.

Coloración de May Grünwald.Utilidad.Colorea protozoarios, principalmente flagelados.Observación.Observar la lámina con objetivo de inmersión. Los protozoos se observan con su citoplasma de color azul claro y los núcleos de color púrpura

MÉTODOS DE COLORACIÓN PARA HELMINTOS

Coloración Carmín clorhídrico.Utilidad.Coloración de estructuras internas de especímenes adultos o segmentos de éste. Se usa de preferencia para el estudio de céstodes y tremátodes, ya que los nemátodes suelen deformarse con el montaje.La muestra debe ser lo más fresca posible.Observación.La observación y estudio de la morfología del ejemplar se realiza macroscópicamente e incluso sólo usando el estereomicroscopio

Coloración de Bonilla, Naar y Beloy.Utilidad.Las larvas de los nemátodes absorben el colorante, permitiendo diferenciar sus estructuras internas.

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