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    UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

    ESCUELA DE POSGRADO

    SECCIÓN DE POSGRADO DE LA FACULTAD DE INGENIERIAQUÍMICA

    PLAN DE TESIS

    “TRATAMIENTO DEL EXTRACTO DE LA SÁBILA (ALOE

    BARBADENSIS MILLER) CON LACTOBACILLUS

    ACIDOPHILUS PARA PROLONGAR SU TIEMPO DE

    ALMACENAMIENTO”

    PARA OPTAR EL TÍTULO DE ESPECIALISTA EN INGENIERIA

    QUÍMICA

    LIZ DEYSI HUINCHO ESPESA

    CALLAO – 2013

    PERU

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    INDICE

    INTRODUCCION 3

    I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 4

    I. Determi!"i# $e% &r'(%em! )I.! *'rm+%!"i# $e &r'(%em!, -I." O(.eti/', $e %! i/e,ti!"i# -I.4 +,tii"!"i# I.# Limit!"i'e, 4 !"i%i$!$e, 5

    II. MARCO TEORICO $II. Ate"e$ete, $e% e,t+$i' 6II.! M!r"' C'"e&t+!% 1

    II.!. 7!"teri!, A"i$' %8"ti"!, 1II.!.! 7i'tr!,'rm!"i# 1II9293 *!mi%i! $e L!"t'(!"i%%+, 16

    II.!.4 Pr'(i#ti"', 22II.!.# L!"t'(!"i%%+, A"i$'&:i%+, 22II.!.% P%!t! $e A%'e ;er! 2)II.!.& C',er/!"i# $e% e

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    INTRODUCCION

    El concepto de alimento funcional, aún no consensuado científicamente, surge en

    el seno de la nutrición óptima, encaminada a modificar aspectos genéticos y

    fisiológicos y a la prevención y tratamiento de enfermedades, más allá de la mera

    cobertura de las necesidades de nutrientes !os alimentos funcionales más

    relevantes y sobre los "ue recae la más sólida evidencia científica son los

    probióticos, microorganismos vivos representados fundamentalmente por los

    derivados lácteos fermentados !os derivados lácteos fermentados son un grupo

    de alimentos pionero en ofrecer estas características saludables, siendo claros

    e#ponentes dentro de los alimentos funcionales además de básicos para una

    alimentación saludable, lo "ue les $ace productos de consumo $abitual

    %ebido a la preocupación e interés actual de la población por las condiciones de

    salud y calidad de vida, es "ue $a aumentado la demanda de productos naturales,

    lo cual $ace "ue las industrias farmacéuticas y de los alimentos centren sus

    esfuerzos en investigaciones relacionadas con su utilización &na de las materias

    primas de gran demanda, tanto en el mercado e#terno como en el nacional, es el

     'loe vera, vegetal del cual se pueden obtener productos con fines

    cosmetológicos, farmacéuticos y alimenticios (or lo tanto, esta planta puedeaportar componentes nutricionales como materia prima para la elaboración de

    alimentos funcionales, considerados en la actualidad como los alimentos del

    futuro 'sí, el 'loe vera puede convertirse en una e#celente fuente de productos

    "uímicos nutricionales para el desarrollo y comercialización de nuevos productos

    para la industria de alimentos peruanos

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    I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

    I.1 Determinación del problema

    )radicionalmente, la función de la dieta $a sido proveer de los nutrientes

    necesarios para satisfacer los re"uerimientos metabólicos del organismo y,

    simultáneamente proporcionar al consumidor la satisfacción derivada de la

    ingestión de alimentos *in embargo, estudios recientes en nutrición apoyan la

    $ipótesis de "ue, más allá de satisfacer las necesidades nutricionales, la dieta

    puede modular varias funciones en el organismo y e+ercer un papel beneficioso o

    no en la resistencia a diferentes enfermedades %urante los últimos "uince aos,

    los conceptos convencionales de la nutrición, "ue $acían énfasis solamente en lasupervivencia, la satisfacción del $ambre y la prevención de efectos adversos, se

    $an e#tendido a la valoración de los alimentos para lograr el bienestar, el

    me+oramiento de la salud y del riesgo de contraer enfermedades

    En la actualidad se $an descubierto los denominados alimentos funcionales,

    cuyas investigaciones se iniciaron en -apón en la década del ./ del siglo pasado

    y, su estrategia consistió en desarrollar un sistema de regulaciones, "uepermitiera aprobar el uso sistemático de determinados alimentos con beneficio

    sobre la salud $umana, fundamentalmente para me+orar la calidad de vida de la

    población de la tercera edad, "ue constituía y aún constituye un sector amplio de

    la sociedad +aponesa

    El 'loe 0era es una planta de gran interés medicinal utilizada como tal desde

    $ace más de 3/// aos %e alrededor de 3// especies de 'loe, se $ademostrado científicamente "ue son cuatro tipos los "ue presentan mayores

    propiedades medicinales 'loe 2arbadensis iller, 'loe (erryi 2a4er, 'loe 5ero# y

     'loe 'rborescens 6o obstante, 'loe 2arbadensis iller es considerada como la

    más utilizada en la medicina curativa y la más popular en el mundo entero

    llamada comúnmente *ábila

    %ebido a las características especiales "ue la componen y por ser este un

    producto de origen biológico, el 'loe vera puede presentar distintos fenómenos

    "ue alteran la calidad y eficacia del producto alimenticio o cosmético, uno de los3

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    principales factores "ue inciden en su degradación son las enzimas "ue se

    encuentran en ella, además de este, también intervienen otros agentes como la

    luz, el o#igeno del aire y los microorganismos

    (or esta razón se re"uiere la aplicación de tratamientos de conservación y

    uno de ellos es el de biotransformación láctica7 la producción de ácido láctico por

    la fermentación de los productos vegetales, es aplicada como un método de

    conservación para la producción de productos terminados y semiterminados, se

    considera como una tecnología importante y se $ace necesario investigar más a

    fondo debido a la creciente cantidad de materia prima transformada en esta forma

    por la industria de los alimentos !as principales razones de este interés son los

    aspectos nutricionales, fisiológicos y los aspectos de $igiene del proceso y su

    correspondiente implementación y los costos de producción

    %ebido a la preocupación e interés actual de la población por las condiciones

    de salud y calidad de vida, es "ue $a aumentado la demanda de productos

    naturales, lo cual $ace "ue las industrias farmacéuticas y de los alimentos centren

    sus esfuerzos en investigaciones relacionadas con su utilización &na de las

    materias primas de gran demanda, tanto en el mercado e#terno como en el

    nacional, es el 'loe vera, vegetal del cual se pueden obtener productos con fines

    cosmetológicos, farmacéuticos y alimenticios %esde el punto de vista de la

    nutrición $umana, los científicos $an identificado más de 89 compuestos en el

     'loe vera7 principalmente vitaminas, minerales, enzimas y aminoácidos, además

    de otras sustancias de interés para nuestro organismo con acción emoliente,

    cicatrizante, coagulante, $idratante, antialérgica, desinfectante, anti inflamatoria,

    astringente, colerético y la#ante (or lo tanto, esta planta puede aportarcomponentes nutricionales como materia prima para la elaboración de alimentos

    funcionales, considerados en la actualidad como los alimentos del futuro 'sí, el

     'loe vera puede convertirse en una e#celente fuente de productos "uímicos

    nutricionales para el desarrollo y comercialización de nuevos productos para la

    industria "uímica de alimentos peruanos

    I. !orm"lación del problema

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    Problema #eneral

    :;ómo debe ser el )ratamiento del e#tracto de la *ábila

    Problema$ e$pec%&ico$

    a :;uáles son las ;aracterísticas ?uímicas, 5isico"uímicas y

    icrobiológicas del e#tracto de sábila

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    "ue además la aplicación de procesos industriales le resta su

    biodisponibilidad de sus nutriente, permitirá dirigir el proceso de

    biotransformación aplicando decisiones de tipo predictivo con lo cual se

    logra una mayor rentabilidad del productob (or otro lado, el mismo proceso de biotransformación ofrece la posibilidad

    de producir ácidos orgánicos y las bacteriocinas in situ evitando de ésta

    manera incorporar al producto biotransformado aditivos para su mayor

    prolongación de vida útil evitando un mayor gasto económicoc El estudio se +ustifica por"ue tecnológicamente el uso de esta bacteria se

    $aría más simple mane+ando variables como p@, temperatura o medición

    de la concentración de cloruro de sodio y se podría predecir como es el

    comportamiento del crecimiento y de esta manera estar seguro "ue el!actobacillus 'cidop$ilus estaría produciendo nisina otorgándole al

    alimento propiedades de inocuidad Esta situación es benéfica tanto para el

    productor como para el consumidord 'sí mismo los resultados de éste estudio permitirán evitar o ba+ar la dosis

    de aditivos "uímicos usados como conservadores de alimentos, y de esta

    manera no producir daos a la salud por los efectos secundarios por su

    consumo diario

    e 5inalmente, el presente proyecto tiene la finalidad de aportar informacióncientífica para cepas naturales "ue mantienen un genoma adaptado a una

    ecología microbiana muy típica de nuestros alimentos, para las cuales falta

    aporte de datos científicos para su me+or aprovec$amiento en procesos

    fermentativos sobre polisacáridos vegetales gelatinizados !os resultados a

    obtenerse permitirán pasar de la producción a nivel e#perimental a la

    producción a escala piloto

    I.- Limitacione$ !acilidade$a !a principal limitación es el tiempo "ue demandara la investigación,

    puesto "ue se deberá revisar bibliografía de diferentes países y además

    en diferentes idiomas, limitación "ue será superadab Otra limitación son la accesibilidad a los reactivos biológicos como son el

     'gar 'gar, ;aldo A*, 'gar A* y también de los cultivos de

    !actobacillus 'cidop$ilus

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    c El apoyo para el uso de materiales, e"uipos y algunos de los reactivos

    "ue se encuentran el los laboratorios "ue presenta la &niversidad

    6acional del ;allo, a los cuales nos brindan un fácil accesod El adelanto informático permite tener acceso a las bibliotecas virtuales,

    publicaciones de investigación en la BE2 y la facilidad de comunicarse

    con especialistas por internet a un ba+o costo

    II. !UNDAMENTO TEORICOII.1Antecedente$

    El concepto de alimento funcional, aún no consensuado científicamente,

    surge en el seno de la nutrición óptima, encaminada a modificar aspectos

    genéticos y fisiológicos y a la prevención y tratamiento de enfermedades, más allá

    de la mera cobertura de las necesidades de nutrientes !os alimentos funcionales

    más relevantes y sobre los "ue recae la más sólida evidencia científica son los

    probióticos, microorganismos vivos representados fundamentalmente por los

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    derivados lácteos fermentados !os derivados lácteos fermentados son un grupo

    de alimentos pionero en ofrecer estas características saludables, siendo claros

    e#ponentes dentro de los alimentos funcionales además de básicos para una

    alimentación saludable, lo "ue les $ace productos de consumo $abitual

    !os alimentos funcionales e+ercen su actividad en múltiples sistemas,

    especialmente el gastrointestinal, cardiovascular e inmunológico *e comportan

    como potenciadores del desarrollo y la diferenciación, moduladores del

    metabolismo de nutrientes, la e#presión génica, el estrés o#idativo y la esfera

    psí"uica

    %ado el alto crecimiento en el consumo de la sábila ba+o cual"uier

    presentación, $a tenido una elevada demanda en el mercado mundial debido a

    las diversas propiedades "ue se le acreditan y a las características propias del

    mane+o del producto 'un"ue el 'loe vera $a sido, y está siendo en la actualidad,

    ampliamente utilizado en el sector farmacéutico y cosmético, su uso $a estado

    limitado a la aplicación tópica *in embargo es reciente su incorporación en

    productos del sector alimenticio

    E#iste una gran gama de compuestos con actividad fisiológica concentrada en

    forma de suplementos

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    apenas afecta a las características físicoH"uímicas de las muestras de producto

    de manzana obtenidas

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     'l producir yogurt probiótico fortificado con 'loe vera usando lec$e

    descremada en polvo en el +ugo de 'loe vera y la mezcla de agua, incubación a

    38 L ; durante . $ !os recuentos bacterianos se determinaron mediante la

    técnica de placa de vertido, mientras "ue la sinéresis se determinó de acuerdo

    con procedimientos estándar !a sinéresis se aumentó de D,8 a .,3F

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    nivel general estimula la función $epática y renal, primordiales en la

    desinto#icación de nuestro organismo

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    alimentos sin generar resistencia entre los microorganismos

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    sido estudiadas 5unciona como un antinflamatorio, un fungicida, un antibiótico y

    un agente regenerativo ;ontiene elevados niveles de enzimas, esto lo $ace un

    cultivo de gran valor, ya "ue las enzimas ayudan al cuerpo a absorber los

    alimentos básicos y a la vez los purifica

    (ara evitar la incorporación de antimicrobianos se recomienda el uso de

    bacteriocinas producidas por las bacterias ácidolácticas

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    2ifidobacterium bifidum %* C/C3M, 2ifidobacterium bifidum %* C/D9 en

    medios suplementados con diversos sacáridos, incluidas las preparaciones

    prebióticas !a adición de sacáridos al medio e+erció una influencia significativa no

    sólo en el número de células bacterianas sino también la capacidad de su ácidoH

    creado !a glucosa, lactosa y sacarosa resultaron ser los más fáciles de los

    sacáridos disponibles para todas las cepas bacterianas ensayadas En los medios

    suplementados con estos azúcares el mayor número de células bacterianas se

    determinaron ' la escasez de los monos y disacáridos, todas las cepas de las

    bacterias analizadas fueron capaces de utilizar las preparaciones prebióticas

    como fuentes de carbono y energía en los medios de comunicación !as formas y

    la cantidad de isómeros del ácido láctico producido por !actobacillus 'cidop$ilus

    %* C//8M y 2ifidobacterium bifidum %* C/C3M se determinaron 'mbas cepas

    cumplir con los re"uisitos adoptados por la O* y producen más del 8/F de

    ácido láctico !

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    (or suerte, los factores determinantes "ue predominan en el crecimiento de

    microorganismos son solo unos pocos, entre los "ue destacan p@, aB y

    temperatura

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    productos alimenticios !as actividades más importantes de las bacterias ácidoH

    lácticas, tanto en alimentos como en preparaciones farmacéuticas son

    proporcionar sabor a la comida, promover la preservación de alimentos y

    promover la salud

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    naturaleza peptídica Entre los primeros se encuentran los ácidos orgánicos como

    el láctico ya mencionado, en menor proporción el ácido acético, peró#ido de

    $idrógeno, ácidos grasos volátiles y diacetilo El otro grupo son compuestos

    bactericidas de elevado peso molecular conocidos como bacteriocinas 'sí, el

    efecto antibacteriano de las 2'! puede observarse por mecanismos distintos al

    de la acidificación del medio El estudio de la producción de bacteriocinas de las

    2'! $a permitido obtener nuevos agentes bacteriostáticos de aplicación en

    alimentos sin generar resistencia entre los microorganismos

    El género !actobacillus está comprendida por bacterias en forma bacilar,

    comúnmente se asocian en cadenas cortas, son anaerobias facultativas ó

    microaerófilas, catalasa y citocromo negativos E#cepcionalmente pueden poseer

    motilidad, se mueven ayudados por flagelos peritricos !os !actobacillus son

    au#ótrofos "uimio organotróficos, necesitan medios comple+os para su

    crecimiento, degradan la sacarosa para producir lactato !a temperatura óptima

    de crecimiento de los lactobacilos está entre 3/ H D/ L;

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    aparato gastrointestinal de mamíferos y aves, incluyen alimentos de origen

    vegetal y animal

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    temperatura de D. L; !a velocidad má#ima de crecimiento del microorganismo

    ba+o estas condiciones es del orden del //.I$ para un inóculo de 1F y

    disminuye $asta llegar a valores del orden del //CD con inóculo del C9F7 lo

    contrario sucede con su crecimiento en masa celular o biomasa7 esta aumentada

    a medida "ue se incrementa el porcenta+e de inóculo, partiendo de un rendimiento

    de /1F con inóculos del 1F $asta llegar a /9F con inóculo del C9F !a mayor 

    producción de biomasa es del orden del .1C9F para una concentración de

    sacarosa de / gI! y un inóculo del C9F

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    residual de sacarosa de 19 gI! !a productividad total del proceso de

    fermentación del medio sin $idrólisis fue de 9,D gI$ de ácido láctico, mientras "ue

    la fermentación del medio invertido obtuvo una productividad menor de D,3 gI$7

    esto producto del aumento en el tiempo total de fermentación de 39 a D/ $ al

    $idrolizar la sacarosa !a productividad má#ima disminuyó de 9,9 a 3,M gI!$ de

    ácido láctico, al realizar el tratamiento enzimático %ebido a la alta eficiencia

    obtenida en la conversión de los azúcares en ácido láctico, la $idrólisis enzimática

    del medio es la me+or opción para obtener una concentración mayor de este

    compuesto y para su potencial aplicación en la producción de plásticos

    biodegradables

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    @ay muc$os tipos de productos lácteos fermentados "ue utilizan !

    acidop$ilus El más familiar para los estadounidenses son el dulce de lec$e

    acidop$ilus y yogur %ulce de lec$e acidop$ilus es consumida por los individuos

    "ue sufren de mala digestión de la lactosa y la intolerancia, una condición en este

    sentido apro#imadamente el 89F de la población mundial

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    Entre los criterios utilizados para "ue un microorganismo sea considerado

    probíótico están la capacidad de sobrevivir en su paso por el tracto

    gastrointestinal

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    sábila7 ésta y otras variantes se debe a la deformación del vocablo árabe Çabila 

    "ue significa planta espinosa 'l continente americano fue introducida por

    ;ristóbal ;olón en los tiempos del descubrimiento de 'mérica, debido a "ue éste

    la utilizaba como medicina para su tripulación En esos aos Espaa ya tenía

    plantaciones considerables de este vegetal, probablemente de+adas como

    $erencia de la invasión musulmana

    %urante siglos fue utilizada por sus propiedades medicinales y terapéuticas

    sin ningún entendimiento claro o análisis científico de cada una de sus

    propiedades

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    0arios polisacáridos $an sido detectados y aislados desde la pulpa del 'loe

    vera, incluyendo manosa, galactosa, arabinosa, sustancias pépticas y ácido

    glucurónico Estudios $an identificado a la manosa como el azúcar más

    importante presente en el gel de 'loe vera, mientras "ue otros estudios $an

    reportado la ausencia de este azúcar, encontrando a su vez a las sustancias

    pépticas como el mayor componente !as pectinas forman un grupo comple+o de

    polisacáridos, "ue están constituidas de ácido galacturónico !as discrepancias

    sealadas se deben principalmente a los diferentes lugares geográficos en donde

    se desarrolla la planta de 'loe vera

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    antimicrobianas

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    económico considerable a largo plazo

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    !a investigación científica "ue se $a llevado a cabo en las últimas décadas $a

    demostrado el papel "ue +uegan ciertos componentes "uímicosHnutricionales en la

    prevención y tratamiento de muc$as enfermedades Esta situación $a provocado

    un cambio del simple concepto de alimento como fuente de nutrientes a uno más

    integral "ue traduce la potencialidad "ue los alimentos pueden tener, no sólo de

    nutrir sino también de prevenir y curar enfermedades

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    28

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    30/52

    III. 6IP7TE8I8III.1 De&inición de la$ )ariable$ de la in)e$ti*ación

    !a presente investigación se caracteriza por ser longitudinal estudiando la

    variable a lo largo del tiempo establecido, por ser éste el determinante en la

    relación causa efecto

    (or su naturaleza, todas las variables identificadas son del tipo cualitativas

    (or su dependencia _ es dependiente, y las variables X, Q son independientes

    Es decir _f

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    31/52

    ;uadro 31

    Operacionalización de 0ariables

    VARIABLES

    DEPENDIENTEDIMENSIONES INDICADORES METODO

    X = Tratamiento del

    extracto de la Sábila (Aloe

    era! con Lactobacillus

     Acidophilus "ara "rolon#ar

    $% tiem"o de

    almacenamiento&

    'oa$ de Sábila

    )xtracto de

    $ábila

      Lactobacillus

    acidophilus

    *aracter+$tica$iniciale$

    *aracter+$tica$

    ,re - tratamiento

     Ti"o$ o *la$e$

    )n$a.o$/$ico%+mico$ .microbiol#ico$

    VARIABLES

    INDEPENDIENTE

    DIMENSIONES INDICADORES METODO

      = *aracter+$tica$

    %+mica$ i$ico%+mica$ .

    icrobiol#ica$ del

    extracto de $ábila (Aloe

    era!

    Extracto desábila

    Slido$ $ol%ble$

    (rix!

    '%medad

    ,rote+na$

    *eni:a$

    ;ra$a

    ibra total

    Actielda?l

    )n$a.o$

    microbiol#ico$

    @ = *aracter+$tica$

    %+mica$ i$ico%+mica$ .

    icrobiol#ica$ del

    extracto de $ábila (Aloe

    era! %e demanda el

    mercado de con$%mo

    *ondicione$

    /$ico%+mica$

    %ente de

    carbono *ondicione$

    microbiol#ica$

    "'

    Slido$ $ol%ble$

    (rix!

     Tem"erat%ra

    *oncentracin

    %mero de

    colonia$ Tiem"o

    de

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    • El )ratamiento escogido para el e#tracto de la *ábila

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    !os tipos de investigación "ue se realizaran en el presente traba+o de tesis

    son

    Por $" &inalidad es de tipo e#ploratorio, puesto "ue busca identificar

    nuevos rumbos para la investigación en campos del conocimiento no estudiados

    o poco estudiados

    Por $" di$e:o interpretati)o es e#perimental por"ue permitirá manipular

    el factor causal para determinar el efecto deseado

    Por el ;n&a$i$ de la nat"rale9a de lo$ dato$ mane(ado$ es del tipo

    cuantitativo por"ue las variables de la investigación son cuantitativas

    I2. Di$e:o de In)e$ti*aciónEl diseo de la presente investigación $a considerado tres momentos, los

    cuales se en la figura DC

    32

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    5igura DC%iseo de la investigación

    33

    PRIMERA ETAPA DE LA

    INVESTIGACION

    Identifcar Y 

    Método

    - Ce

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    I2.' Etapa$ de la In)e$ti*ación

    I2.+ *e $a considerado "ue la investigación propuesta tendrá tres etapasI2.- Primera etapa de la in)e$ti*aciónI2. En la primera etapa de la investigación se recurrirá a la

    revisión de la teoría vinculada a la variable de investigación ?ue en este

    será la variable X, con el propósito de identificar algunos argumentos

    científicos, antecedentes de estudio y bases científicasI2.3 8e*"nda etapa de la in)e$ti*aciónJ0. En la segunda etapa de la investigación se volverá a re"uerir

    de la revisión de la teoría vinculada a la variable de investigación En esta

    etapa la variable será Q, con el propósito de identificar algunos argumentos

    científicos, antecedentes de estudios y bases científicasJ0M )ambién se procederá con las entrevistas a especialistas en el

    tema, para conocer sus criterios vinculados a la variable de investigación y

    a los responsables de la generación del ob+eto de investigaciónI2.1< Tercera etapa de in)e$ti*aciónJ011 En la tercera etapa de la investigación con la teoría y la

    información lograda tanto en la primera etapa como en la segunda etapa,

    se realizara un riguroso análisis de la información En esta etapa se

    identifica a la variable _

    J01C

    I2.1'Población M"e$traJ01D !a población está representada por todas las unidades formadoras

    de colonia contenidas en un cepario, el cual es mantenido en estado de

    congelación $asta el momento de su usoJ019I2.1 !a muestra es de la misma dimensión "ue la población y es

    representativa considerando "ue todas la unidades formadoras de colonias

    se encuentra en estado óptimo de conservación y con las facultades de

    reproducción en sustratos apropiadosI2.13T;cnica$ e in$tr"mento$ de recolección de dato$

    I2.13.1 Materiale$

    I2.15 E="ipo$

    • Aefrigeradora congeladora, 19 pies3

    • 2ao de agua, 19 l capacidad• Estufa Jncubadora, )emperatura má#ima 9 T; sensibilidad 1 T;• Estufa Esterilizadora, )emperatura má#ima C9/ T;, sensibilidad 1 T;• (otenciómetro, rango de p@ 1Z1D

    34

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    • ;ontador de colonia, 'mplitud 19_• ;entrifugadora rpm 9,// g• 2alanza al /,1g• 2alanza analítica al /,///1gJ01M

    I2.< Material de )idrio

    J0C1• atraces erlenmeyer de C9/m! y 9//m!• (ipeta aforada de 9,//m!• (ipetas graduadas• 2ureta de 1/,//m! con pinza de o$r • 2omba de vacío• atraz erlenmeyer tipo (yre# de 1///m!•

    0asos de bo$emia de C9/m! y 1!• atraz aforado de 1///,//m!• (lacas petri 19 cm diámetro• )ubos de ensayo C/#C// cItapa rosca• )ubos de ensayo 19 # 1//• )ubos de centrífuga cónico graduados 1I1/ con tapa• (ipetas de 1/ m! div 11/• (ipeta 1 m!, div 1 1/

    I2.

    I2.'I2.+

    I2.-

    I2. Reacti)o$

    J0C8• 5enolftaleína•  'zul de 2romotimol• Etanol M9HMF vol•

    @idró#ido de sodio en lente+as, 6aO@• 2iftalato de potasio, ;.@9ODU

    J0C.

    I2.> Medio$ de c"lti)o reacti)o$

    J03/• ;aldo A*

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    •  'gar `llerH@inton

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    incubado a 3/L; $asta alcanzar su má#imo crecimiento !uego, 9 m! de

    este precultivo es aadidos a 1// ml de caldo A* %espués de 1C $oras

    de crecimiento a 3/L;, este cultivo será utilizado como inóculo primario

    J0D/

    J0D1(ara el inóculo definitivo se tomarán volúmenes suficientes $asta

    alcanzar una e"uivalencia de turbidez del nivel /9 de la escala

    c5arland

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    J08M&na vez obtenidos los parámetros se procederá a calcular P a una

    temperatura

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    J0MDEl medio se distribuirá en placas petri estériles y una vez solidificado

    tres de ellas se inocula, mediante siembra por diseminación, con E. coli  y

    tres restantes con #. parat"phi  2 *e de+an reposar los cultivos por 1 $ora

    para luego realizar tres perforaciones de /9 cm de diámetro donde se

    colocarán 1// ! del +ugo biofermentado, así como de los controles

    negativo y positivo

    J0M9

    J0M!as placas se incubarán a 38 L; durante CD $ y transcurrido este tiempo

    se evaluarán los resultados mediante la lectura en milímetros del

    diámetro del $alo de in$ibición del crecimiento de los microorganismos y

    se realizará el cálculo del porcenta+e del efecto in$ibitorio relativo

    respecto al control positivo de la manera siguiente

    J0M8

    J0M.   %Efectoinhibitorio=  Mediadiámetroinhibdeljugo

    mediadiámetrohaloinhibcontrolpositivo x 100

    J0MM

    J01//

    J01/1

    J01/CJ01/3

    J01/D

    J01/9

    J01/

    I2. CRONO#RAMA DE ACTI2IDADE8

    I2.1

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    J01C9 Ob+etivo especifico 1J01C

    #J01C8 J01C. J01CM J013/ J0131

    J013C Ob+etivos específicos C J0133J013D

    #

    J0139

    #J013 J0138 J013.

    J013M Ob+etivos específicos 3 J01D/J01D1

    #

    J01DC

    #

    J01D3

    #J01DD J01D9

    J01D Organización de información J01D8 J01D. J01DMJ019/

    #

    J0191

    #J019C

    J0193 Elaboración y presentación

    del Jnforme 5inalJ019D J0199 J019 J0198 J019.

    J019M

    #

    I2.1<

    I2.11

    V. PRESUPUESTOIV.%!

    I;91-3 ESPECIFICACION I;91-) N*+,-S,*- (S/.)

    IV.%#M01*230*- * 5,6-7, I;91-- 600900

    IV.%& B3*6*-8 I;91-5

    IV.%$

    I;910 Re!"ti/',

    I;911 12)0900I;912 2?0900I;91) M!teri!% $e e,"rit'ri' e

    eer!%

    IV.&%I;91 *'t'"'&i!,e Im&re,', I;915 200900

    IV.&$I;9150 M!teri!% M+%time$i! 4

    C'm&+t!"i#

    I;9151 100900

    42

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    . ;ampos -' C//C ;ultivos (robióticos y (rotectores, (ropiedades

    5uncionales

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    1M@u ?, _u -, @u X Evaluation of 'ntio#idant (otencial of 'loe vera

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    3DAoberfroid, 2 C//C (rebiotics and probiotics 're t$ey functional foods>

     American %. !linical +utrition. ,11.CH1..39*c$aafsma, N 1MM *tate of art concerning probiotic strains in mil4

    products -nternational iabetes /ederation +utrition +e0sletters 9C3HCD

    3*erna ;oc4 !7 -ulia 6aran+o E (roducción de ácido láctico por unamezcla de Lactococcuslactis y #treptococcussalivarius en fermentaciones

    en discontinuo evista !olombiana de Biotecnolo2a.C//9 0ol 0JJ, 6L

    //1pp 3CH3.38&rc$ % 'loe veraH6atures Nift 2lac4doGn (ublications, 2ristol, England

    1MMM7 pp 8H133.0ander %', 0lietinic4 '-, @oof !0 (lant products as potencial antiviral

    agents 2ull Jnts (asteur 1M.7 .DD 1/1H1/9

    3MBaller NA, angialico *, Aitc$ey ;A' c$emical investigation of 'loebarbadensis iller (roceedings of t$e O4la$oma 'cademy of *cience

    1MM.7 9. MH8D/Xagi ', @amada U, i$as$i U, @arada 6, 6is$io4a J *tructure

    determination of polysacc$arides in 'loe saponaria

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    J01MMJ0C//J0C/1J0C/CJ0C/3

    J0C/DJ0C/9J0C/J0C/8J0C/.J0C/MJ0C1/J0C11J0C1CJ0C13J0C1D

    I2.1-I2.1

    ANEO8

    47

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    demanda elmercado decon$%moJ

    %e demanda elmercado decon$%mo

    el mercado de con$%mo&mercado decon$%mo

    *ondicione$

    microbiol#ica$

    %mero de colonia$

     Tiem"o de

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    E8UEMA TENTATI2O DE LA TE8I8

    CARATULA

    PA#INA DE RE8PETO6O,A DE RE!ERENCIA DEL ,URADO APROBACI7N

    DEDICATORIA

    A#RADECIMIENTO

    INDICE

    TABLA DE CONTENIDO

    RE8UMEN

    AB8TRACTI. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

    I91 Determi!"i# $e% &r'(%em!I92 *'rm+%!"i# $e &r'(%em!,I93 O(.eti/', $e %! i/e,ti!"i#I9) +,tii"!"i#

    II. MARCO TEORICOII91 Ate"e$ete, $e% e,t+$i'II92 M!r"' C'"e&t+!%II9291 7!"teri!, A"i$' %8"ti"!,II9292 7i'tr!,'rm!"i#II9293 *!mi%i! $e L!"t'(!"i%%+,II929) Pr'(i#ti"',II929? L!"t'(!"i%%+, A"i$'&:i%+,II929- P%!t! $e A%'e ;er!II929 C',er/!"i# $e% e

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    52/52

    V. RESULTADOSVI. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

    ;I91 C'tr!,t!"i# $e :ite,i, "' %', re,+%t!$',;I92 C'tr!,t!"i# $e re,+%t!$', "' 'tr', e,t+$i', ,imi%!re,

    VII. CONCLUSIONES

    VIII. RECOMENDACIONESIX. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

    ANEXOS

    • M!tri $e C',i,te"i!• Otr', !e