metodología para la toma y transporte de muestras de anaerobios
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TEMA 11
METODOLOGÍA PARA LA TOMA Y TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS
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TOMA DE MUESTRA DE ANAEROBIOS Y TRANSPORTE AL LABORATORIO
� GENERALIDADES� IMPORTANCIA DE LA MICROBIOTA ANEROBIA� RECOLECCIÓN DE MUESTRAS PARA ANAEROBIOS� TRANSPORTE DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS A LABORATORIO
� TRANSPORTE INMEDIATO� SISTEMAS DE TRANSPORTE
� SISTEMA SCOTT DE DOBLE TUBO� CULTURETTESISTEMA PORT-A CULT� SISTEMA PORT-A CULT
� INOCULACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA ANAEROBIOS� CONDICIONES DE TRABAJO� MEDIOS DE CULTIVO� TUBOS ROTATORIOS
� INCUBACIÓN DE MUESTRAS ANAEROBIAS EN EL LABORATORIO� ESTUFA ANAEROBIA� JARRA PARA ANAEROBIOS� SISTEMA GAS-PACK
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MUESTRAS DE ANEROBIOS
� GENERALIDADES� IMPORTANCIA DE LA MICROBIOTA ANAEROBIA EN LOS DIFERENTES ÓRGANOS
BOCA 3-10:1
RELACIÓNANAEROBIOS:AEROBIOS
� BOCA 3-10:1� SURCOS GINGIVALES 100-1.000:1� ESTÓMAGO 1:1� INTESTINO DELGADO 1:1� INTESTINO GRUESO 100-1.000:1� VAGINA 5-10:1
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ENFERMEDADES PRODUCIDAS POR ANAEROBIOS
Abcesos en cualquier órgano
Infección periodontal
Otitis media
Sinusitis
Endocarditis, bacteriemia y septicemia
Empiema torácicoEmpiema torácico
Apendicitis, peritonitis
Endometritis y salpingitis, absceso ovárico
Osteomielitis
Artritis séptica
Gangrena gaseosa
Mionecrosis clostrídica
Tétanos
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TIPOS DE MUESTRAS QUE PUEDEN CONTENER BACTERIAS ANAEROBIAS
� ORINA� PUNCIÓN SUPRAPÚBICA
� HECES� SANGRE, LCR, otros líquidos orgánicos� TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR
� ASPIRACIÓN TRASLARÍNGEA� TORACOCENTESIS� BRONCOSCOPIA� BRONCOSCOPIA
� OIDO� TIMPANOCENTESIS
� CAVIDAD ORAL Y DIENTES� APARATO GENITAL
� MASCULINO� FEMENINO
� HISOPADO DE ENDOCÉRVIX� BARTOLINITIS
� PUS, EXUDADOS Y QUEMADURAS� MUESTRAS DE CIRUGÍA
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Muestras no adecuadas para el cultivo de anaerobios
� Orina de chorro medio
� Esputo expectorado
� Heces (sólo para investigar Clostridium difficile), ni hisopados rectales
� Hisopado faríngeo y nasofaríngeo� Hisopado faríngeo y nasofaríngeo
� Hisopado de encías
� Hisopado vaginal
� Superficie de úlceras
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RECOLECCIÓN DE MUESTRAS PARA ANAEROBIOS CON AGUJA Y JERINGA
� MUESTRA DE ORINA POR PUNCIÓN SUPRAPÚBICA
� MUESTRA DE ORINA DE CATÉTER
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RECOLECCIÓN DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS CON AGUJA Y JERINGA
� Sangre� LCR� Otros líquidos orgánicos (sinovial, ascítico, etc.)� Abcesos, flemones, focos piogénicos
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TRANSPORTE AL LABORATORIO DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS RECOGIDAS CON AGUJA Y JERINGA
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MUESTRAS DEL TRI
� ASPIRACIÓN TRANSLARÍNGEA� CULTIVO DEL CATÉTER
� TORACOCENTESIS
� BROCOSCOPIA� CON CEPILLADO � CON CEPILLADO BRONQUIAL
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RECOLECCIÓN DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS CON HISOPO Y TRANSPORTE AL LABORATORIO
� Hisopado de endocérvix
� Hisopado de heridas, abscesos
� Transporte de hisopos al laboratorio� Sistema Culturette
� Sistema Scott de doble tubo
� Sistema Port-a-Cult
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RECOLECCIÓN Y
TRANSPORTE DE MUESTRAS
DE ANAEROBIOS
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EXAMEN MACROSCÓPICO DE LAS MUESTRAS
� Olor fétido
� Aspecto purulento
� Tejido necrótico
Presencia de gas� Presencia de gas
� Gránulos de azufre
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EXAMEN MICROSCÓPICO DE LAS MUESTRAS
� Tinción de gram: muchas infecciones anaerobias pueden ser polimicrobianas
� Tinción y observación de esporas (puede indicar Clostridium)
� Observación de ramificaciones en los extremos de las células o filamentos (puede indicar Actynomices)Observación de ramificaciones en los extremos de las células o filamentos (puede indicar Actynomices)
� Observación células fusiformes (puede indicar Fusobacterium)
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PRUEBAS PREVIAS AL CULTIVO
� Cromatografía de gases
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MEDIOS DE CULTIVO PARA ANAEROBIOS
Agar sangre para anaerobios con L-cistina, hemina y vitamina K
Agar chocolate
Medio no selectivo de uso general
Utilizado principalmente para aislar especies de Neisseria y Haemophilus; sin embargo, se puede requerir también para el aislamiento de anaerobios exigentes
Agar sangre con alcohol fenil etílico (PEA)/Agar Columbia con colistina y ácido nalidíxico (CNA)
Agar KVLB (kanamicina, vancomicina, sangre lacada)
Caldo tioglicolato (enriquecido con L-cistina, hemina y vitamina K)
Caldo de carne picada
aislamiento de anaerobios exigentes
Aislamiento de anaerobios obligados gram positivos
Aislamiento selectivo de bacilos gram negativos anaerobios
Caldos de enriquecimiento que se pueden usar como suplemento de medios sólidos particularmente si la muestra escasa (se pueden añadir unas gotas de parafina líquida para mantener mejor la atmósfera anaerobia). Subcultivar en medio para anaerobios
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MEDIOS ANAEROBIOS PREINCUBADOS EN ANAEROBIOSIS
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INCUBACIÓN DE BACTERIAS ANAEROBIAS
� ESTUFA PARA ANAEROBIOS
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INCUBACIÓN DE BACTERIAS ANAEROBIAS
� JARRAS PARA ANAEROBIOS
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INCUBACIÓN DE MUESTRAS DE ANAEROBIOS
� SISTEMA GAS-PACK
BO3H3 / Al/ Pd H2
H2 + O2 H2O
H2O + NaHCO3 CO2
Catalizador en la tapa
Debe aumentar la temperatura de la tapa
Indicador de azul de metileno