Ionización / desorción por laser asistida por Matriz

MALDI(Matrix-assisted Laser Desorption Ionization)

• Técnica de ionización

Generalidades

• Aplicación: compuestos de alto peso molecular

• Objetivo: análisis de proteínas, péptidos, glicoproteínas, oligosacáridos y oligonucleótidos

• Metodología se basa en el bombardeo de moléculas con un laser para producir la ionización

• Teoría: mecanismo no totalmente claro

ETAPAS

1. Mezcla de la muestra con una matriz solida

2. Excitación de la matriz

3. Ionización del analito

Matriz Analito Longitud de onda del láser (nm)

2 – amino – 4 – metil – 5 – nitropiridina Proteínas, Oligonucleótidos 3552 – amino – 5 – nitropiridina Oligonucleótidos 3556 – azo – 2 tiotiamina Proteínas 266, 337Ácido 2,5 – dihidrobenzoico Proteínas, oligosacáridos, oligonucleótidos 337, 355Ácido cafeico Proteínas, Oligonucleótidos 337Ácido ferúlico Proteínas, Oligonucleótidos 337, 335, 488Ácido 2 – (4 – hidroxifenilazo) Proteínas, Gangliósidos, polímeros industriales 266, 377Ácido 3 – hidroxipicolínico Oligonucleótidos, glicoproteínas 266, 308, 355Ácido nicotínico Proteínas, glicoproteínas, oligonucleótidos 2663 – nitrobencil alcohol Proteínas 266Ácido sinapínico Proteínas, polímeros industriales 377, 355Ácido a – ciano – 4 – hidroxi – cinámico Proteínas, oligosacáridos 337

Matrices mas utilizadas en MALDI

Desventajas: • Corto tiempo de vida media de los iones formados• Solo compatibles con analizadores de tiempo de vuelo (TOF)

Muestra en matriz

30.000 V

Pulso del láser

Analizador de masas

Detector Espectro de masas MALDI

Vacío de gran intensidad

Generación de iones en fase gaseosa requeridos para el análisis mediante espectrometría de masas de las proteínas por Desorción / ionización de la matriz asistida por láser (MALDI)