josé a. lópez garcía-asenjo servicio de anatomía patológica sección de inmunohistoquímica
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Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario. José A. López García-Asenjo Servicio de Anatomía Patológica Sección de inmunohistoquímica. Marcadores tumorales. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
José A. López García-AsenjoServicio de Anatomía PatológicaSección de inmunohistoquímica
Marcadores tumorales Marcadores tumorales en la neoplasia de en la neoplasia de
ovarioovario
Marcadores tumorales
• El cáncer constituye el resultado de la transformación geno y fenotípica de la célula normal. En los últimos años se han realizado esfuerzos para identificar marcadores tumor-específicos, así como epítopos igualmente específicos
• Cualquier molécula que pueda ser identificada con el proceso de transformación maligna, proliferación, desdiferenciación y metástasis de las células neoplásicas puede, en última instancia, considerarse un marcador tumoral
Características biológicas de las neoplasias
1. Autosuficiencia en cuanto a señales de
crecimiento.
2. Insensibilidad a las señales inhibidoras del
crecimiento
3. Escape de la apoptosis
4. Potencial de multiplicación ilimitado
5. Capacidad de producir angiogénesis
6. Capacidad invasiva y metastatizante
• El valor clínico de un marcador tumoral depende de su utilidad
clínica y de su sensibilidad y especificidad.
• En esta línea, el uso de marcadores tumorales no sólo en el
diagnóstico y monitarización de la enfermedad sino a nivel
de pronóstico o de riesgo constituye cada vez más un campo
de desarrollo.
• Sensibilidad: La capacidad de un test para detectar pacientes
que actualmente presentan la enfermedad.
• Especificidad: La capacidad de un test para distinguir aquellos
pacientes que no tienen cáncer de aquellos que lo tienen.
Marcadores tumorales
• El valor umbral, también llamado valor cut-off, para un marcador tumoral se obtiene del percentil 95 de los valores encontrados en la población bajo investigación que se conoce que no tienen cáncer.
• Valor predictivo positivo (VPP) se define como la probabilidad de que un paciente con un test positivo tenga cáncer.
• Valor predictivo negativo (VPN) se define como la probabilidad de que un paciente con un test negativo no tenga cáncer.
Marcadores tumorales
Diagnóstico
• La frecuencia de valores elevados de los marcadores tumorales
en enfermedades no neoplásicas y su solapamiento entre
concentraciones normales y aquellas observadas en pacientes
con cáncer, plantea un problema en su diagnóstico.
• Utilización de patrones de marcadores múltiples parecen
asociarse con el desarrollo específico de procesos neoplásicos.
• CEA, CA125, CA19.9 y CA15.3
• Lugar primario y/o el desarrolllo de metástasis.
Marcadores tumorales
Diagnóstico
Marcadores tumorales
Monitorización del tratamiento
• Los valores de los marcadores tumorales pueden informar
sobre el desarrollo de una remisión o de una recidiva y, por
tanto, aportar información sobre la eficiencia del tratamiento.
• Deben considerarse siempre las tendencias y/o pendientes de
los valores seriados del marcador.
• Existen situaciones donde la instauración de un tratamiento,
normalmente de radio y/o quimioterapia, puede mostrar
incrementos del marcador tumoral.
Marcadores tumorales
Detección de recurrencia
• La monitorización de un marcador tumoral para la detección de
recurrencia posterior a su resección quirúrgica constituye la segunda
utilidad más frecuente de estas moléculas.
• Marcadores tumorales altamente sensibles para detectar la recurrencia
de la forma más precoz posible.
• Intervalos de seis meses a un año son normalmente suficientes para
proceder al análisis seriado del marcador específico.
• En la monitorización de la recidiva, la pendiente de los niveles séricos
de marcadores tumorales es más importante que en la monitorización
del tratamiento debido a que en éste último puede haber influencia o
cambios subsidiarios al mismo proceso terapéutico
Marcadores tumorales
Pronóstico
• La predicción de la supervivencia tanto global como libre de
enfermedad constituye uno de los objetivos principales en el
manejo del paciente oncológico.
Marcadores tumorales
• Existen dos grandes grupos de marcadores tumorales: los
marcadores tumorales de secreción cuya principal aplicación
está en el seguimiento y, algunas veces, en el pronóstico; y
los marcadores tumorales tisulares, que permiten
caracterizar biológicamente los tumores.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario
1 Tumores del epitelio de superficie
2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma
3 Tumores de células germinales
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario
1 Tumores del epitelio de superficie
2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma
3 Tumores de células germinales
Marcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Antígeno CA125
Descrito por Bast et al en 1983 como un antígeno que se
observaba elevado en el 80% de las mujeres con cáncer
epitelial de ovario. Es una glicoproteína que se expresa en
las células derivadas del epitelio celómico como en las
células mesoteliales de pleura, pericardio y peritoneo,
también en las trompas de Falopio, endometrio, endocérvix y
ovario.
Antígeno CA125
• La concentración sérica de CA125 está elevada en el 90% de
las mujeres con cáncer de ovario en estadios avanzados.
• También durante la menstruación, en el primer trimestre del
embarazo y en el postparto. En situaciones que provoquen
cambios mesoteliales y peritoneales: peritonitis, ascitis,
hemorragias intraabdominales y en enfermedades benignas
como la endometriosis y miomas uterinos.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Antígeno CA125
• Diagnóstico: La conjunción de la determinación de CA125,
con otros medios diagnósticos, principalmente la ecografía,
mejora la sensibilidad; sin embargo no puede afirmarse que
aquel constituya, por el momento, un sistema eficaz de
diagnóstico precoz del cáncer de ovario
• El CA125 se halla elevado en el 90% de los carcinomas de
ovario en estadios avanzados y sólo en el 50% de los estadios
iniciales. Rustin GS et al. Ann. Oncol. 1999; 10 (suppl 1):21-27
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Antígeno CA125
• Diagnóstico (Inmunohistoquímica):
Diagnóstico diferencial en metástasis de origen desconocido.
Valor limitado.
Expresión en adenocarcinomas de cérvix, endometrio, tiroides,
mama y gastrointestinales.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Antígeno CA125
• Seguimiento: Los niveles de CA125 no descienden hasta tres
semanas después de la cirugía debido al daño tisular ocasionado.
• Durante el seguimiento postquirúrgico se considera significativa una
elevación del 25% del valor anterior, con una confirmación posterior;
este criterio presenta una especificidad del 100% y una sensibilidad
del 40%.
• En el 70% de las pacientes una elevación del CA125 es la primera
manifestación de una recidiva en su enfermedad, 4 meses antes de
las manifestaciones clínicas. Según el grupo de van der Burg un
examen clínico y ginecológico aumenta la detección de recidivas a un
92%.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Antígeno CA125
• Monitorización del tratamiento: Rustin et al. (1996). Definieron una
respuesta del 50% cuando se observaba un descenso del 50% de los
niveles de dos muestras anteriormente elevadas, confirmándose esta
disminución con una cuarta muestra. Así mismo, definieron una
respuesta del 75% si existía un descenso del 75%. En cada caso, la
última determinación se debe de analizar al menos 28 días después
de la determinación precedente. La tasa de falsos positivos era
menor a un 3 %, sin embargo, la tasa de falsos negativos fue del
21%, lo cual supone un alto porcentaje de mujeres a las que se les
suspendería el tratamiento de acuerdo al valor de CA125. En estos
casos se debe evidenciar la respuesta con el seguimiento clínico y
radiológico.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Antígeno CA125
• Pronóstico: Nagele et al en un estudio con 201 mujeres en
estadio I mostraron que el CA125 presentaba valor pronóstico
independiente en un análisis multivariante, atribuyéndose un
riesgo relativo de fallecer 6.3 veces mayor en las mujeres con
valores de CA125 superiores a 65 U/ml.
• En 1999 The American Joint Committee on Cancer (AJCC)
consensuó que no existían suficientes estudios con el número
adecuado de pacientes para concluir que los niveles de CA125
preoperatorios presentasen valor pronóstico independiente en
las mujeres diagnosticadas de cáncer de ovario.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Otros marcadores tumoralesFactor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF) se ha detectado en el suero o en el líquido ascítico en el 70% de mujeres con carcinoma epitelial de ovario.
OVX-1. Complementario al CA125. Estudios preliminares han puesto de manifiesto la sensibilidad de la determinación de CA125, M-CSF y OVX-1 del 98% en la identificación del cáncer de ovario en estadios precoces sin embargo, la especificidad era baja y el 11% de las mujeres sanas y el 51% con enfermedades benignas presentaban valores aumentados.
Ácido lipofosfatídico (LPA). Sensibilidad en estadios avanzados cercana al 100% y en enfermedad limitada al ovario del 90% con especificidad del 90%.
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
InmunohistoquímicaCitoqueratinas CK 20 siempre negativa en Seroso
EMA y CEA Mayor expresión en neoplasias malignas no de tipo seroso.
Vimentina Variable
S-100 Borderline
WT-1 Positivo sólo en Seroso
N-Cadherina Positiva en Mucinoso
Amilasa Positiva en Seroso y Endometrioide
Laminina y C-IV Pérdida de expresión en invasión
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovarioMarcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario
Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario
1 Tumores del epitelio de superficie
2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma
3 Tumores de células germinales
Hum Pathol. 1998 Aug;29(8):840-5.
Mullerian inhibiting substance, alpha-inhibin, and CD99 expression in sex cord-stromal tumors and endometrioid ovarian carcinomas resembling sex cord-stromal tumors.Matias-Guiu X, Pons C, Prat J. Department of Pathology, Hospital de la Santa Creu i Sant Pau, Universitat Autonoma de Barcelona, Spain.
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Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario
1 Tumores del epitelio de superficie
2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma
3 Tumores de células germinales
Marcadores en tumores de células germinales
• Alfa-feto proteína
• Gonadotropina Coriónica
• Fosfatasa Alcalina Placentaria
• Lactógeno Placentario
• CD 117
• Citoqueratinas
• PAGF
• Desmina
Célula normal Reparación del DNA
Fracaso en la reparación de DNAMutación
Activación de oncogenespromotores
Alteración de genesreguladores de apoptosis
Inactivación de genes supresores
Expansión clonal
Progresión y heterogeneidad
Neoplasia maligna
Lesión del DNA
Marcadores tumorales
• El cáncer constituye el resultado de la transformación geno y fenotípica de la célula normal. En los últimos años se han realizado esfuerzos para identificar marcadores tumor-específicos, así como epítopos igualmente específicos
• Cualquier molécula que pueda ser identificada con el proceso de transformación maligna, proliferación, desdiferenciación y metástasis de las células neoplásicas puede, en última instancia, considerarse un marcador tumoral
Dianas moleculares de la lesión genética
• Protooncogenes
• Genes supresores
• Genes reparadores
• Genes que regulan la apoptosis
Productos de los oncogenesFactores de crecimiento
PDGF sis sobreexpresión Astrocitoma, osteosarcoma
FGF hst-1 sobreexpresión Cáncer gástrico
int-2 Amplificación Cáncer de vejiga, mama,
melanoma
Receptores de factores de crecimientoEGF erbB1 Sobreexpresión Carcinoma epidermoide
erbB2 Amplificación Carcinoma de mamaerbB3 Sobreexpresión Carcinoma de mama
CSF fms Mutación puntual Leucemia
ret Mutación puntual MEN
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Medical University, Shenyang, Liaoning, PR China
Methods used to determine EGFR status in human tumors
EGFR target Assay
Protein Expression IHC, ELISA, FACS, Ligand-binding assay, Western Blot.
RNA Northern Blot, mRNA protection assay, RT-PCR, dot blot, mRNA in situ hybridization
Gene amplif/mutation Southern bloth, FISH, slot blot, PCR
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DETERMINACION DEL STATUS DE Her-2/ neu
•Amplificación génica:Southern BlotDot BlotPCRHibridación “in situ”
•Transcripción:Northern BlotSlot BlotHibridación “in situ”
•Sobreexpresión de proteínaWestern Blot InmunohistoquímicaInmunoensayo
Herceptest
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Productos de los oncogenesProteínas transductoras de señalUnión a GTP ras mutación puntual Ca de pulmón, pancreas....No R TK abl Traslocación LMC y LMA
Reguladores del ciclo celularCiclinas ciclina DTraslocación Linfoma del manto
Amplicación Carcinoma de mama, hígado, esófago
CDK CDK4 Amplificación o Glioblastoma, melanoma,Mutación puntual Sarcoma
Proteínas reguladoras nuclearesActivadoras de myc translocacion L. De Burkitttranscripción N-myc Amplificación Neuroblastoma,
Carcinoma de c. pequeñasL-myc Amplificación Carcinoma de c. pequeñas
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Gynecology, Osaka Rosai Hospital, Osaka, Japan
Genes “supresores” y sus productosGen Función Mutaciones Mutaciones
somáticas hereditariasRTGF <Crecimiento Ca de colon ?CadherinaE Adherencia Ca estómago, mama Ca gástrico familiarNF-1 <TransducciónSchwannomas NF 1 y SarcomasNF-2 ? Schwannomas NF 2,Meningiomas y
Neurinomas acústicoAPC < TransducciónCa estómago, colon Poliposis familar
páncreas, melanoma Cancer de colonRb Reg. Ciclo Retinoblastoma Retinoblastoma
osteosarcoma.... Osteosarcomap53 Reg. Ciclo... Casi todos Li-FraumeniWT-1 Transcripción T. Wilms T. Wilmsp16 Reg. Ciclo Ca páncreas, esófago MelanomaBRCA-1 Reparación Cáncer de mama y
ovarioBRCA-2 Reparación Cáncer de mama
femenina y masculina
Hall J, Paul J, Brown R.
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o
Expansión clonal
Célula normal
Lesión del DNA
Reparación del DNA
Fracaso en la reparación de DNAMutación
Activación de oncogenespromotores
Alteración de genesreguladores de apoptosis
Inactivación de genes supresores
Progresión y heterogeneidad
Neoplasia maligna
Valverde JJ, Martin M, Garcia-Asenjo JA, Casado A, Vidart JA, Diaz-Rubio E.
Prognostic value of DNA quantification in early epithelial ovarian
carcinoma.
Obstet Gynecol. 2001 Mar;97(3):409-16.
Scott IS, Heath TM, Morris LS, Rushbrook SM, Bird K, Vowler SL,
Arends MJ, Coleman N.
A novel immunohistochemical method for estimating
cell cycle phase distribution in ovarian serous
neoplasms: implications for the histopathological
assessment of paraffin-embedded specimens.
Br J Cancer. 2004 Apr 19;90(8):1583-90.
Célula normal
Lesión del DNA
Reparación del DNA
Fracaso en la reparación de DNAMutación
Activación de oncogenespromotores
Alteración de genesreguladores de apoptosis
Inactivación de genes supresores
Progresión y heterogeneidad
Neoplasia maligna
Expansión clonal
ANGIOGÉNESIS TUMORAL
• 1-2 mm sin vascularización
• Aporte de nutrientes
• Secreción de Factores de crecimento por
células endoteliales
• Metástasis
• VEGF; bFGF