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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
INFORME DE TOMA DE MUESTRAS UYUMBICHO
GABRIELA MICHELLE HERRERA PAREDES
TERCERO “B”
QUITO 31 DE OCTUBRE DEL 2013
TEMA: TOMA DE MUESTRAS EN BACTERIOLOGÍA
LUGAR: Hacienda Universidad Central del Ecuador Uyumbicho
NORMAS DE BIOSEGURIDAD:
Overol Guantes Botas
ESPECIES ANIMALES UTILIZADAS:
Bovinos Porcinos Aves
HORA DE LA PRÁCTICA:
RESUMEN:
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
El objetivo de la presente práctica es aprender el método correcto de la toma de muestras para su posterior análisis serológico y bacteriológico.
Poner en práctica la teoría anteriormente indicada, para entender el uso de cada material, procedimientos adecuados, conocimiento de los métodos de transporte, etc.
Aprender a reconocer qué tipo de muestra es necesaria y como se obtiene para el estudio microbiológico de las distintas patologías.
Conocer la extracción, manejo y selección correcta de una muestra.
REVISIÓN DE LITERATURA:
Diagnostico Microbiológico: Detección de agentes microbianos que producen enfermedades Certificar calidad Ensayo de monitoreo Estándares de atención
Muestras: - Tejidos y órganos: En una necropsia, el tamaño de las muestras
debe ser mínimo 3 x 3 cm. Puestas en bolsas individuales de polietileno o recipientes estériles, se puede esterilizar frascos o tubos de ensayo hirviéndolos con sus tapas; porciones de intestino deben ser enviadas con los extremos amarrados
- En animales pequeños se deben enviar 3 por lote, tienen que estar con signos, o animales aparentemente sanos, al ser aves vivas se envían en cajas, si es órgano de 4-6 horas se debe congelar mas tiempo.
- Hisopos: para mientras de secreciones, exudados, contenidos o abcesos.
- Heces: directamente del recto del animal, en animales pequeños se hacen hisopados rectales, se deben enviar de 4 a 8 horas en congelación en animales grandes se toma directamente del recto.
- Leche: en envases estériles con tapa rosca y refrigeradas inmediatamente después de la recolección.
- Hemocultivos: estas muestras se toman en tubos de ensayo o botellas especiales con notificación previa al laboratorio
Leche para estudios bacteriológicos: - Generalmente para el estudio de Mastitis, producida por
Staphylococcus aureus, Streptocococcus agalacte, S. dysgalacte, S. viveris, Enterobacterias, Corimebacterium bovis, Mycoplasma, Campylobacter.
- Se debe lavar, enjuagar y secar al ubre- Se debe desinfectar las manos con alcohol al 70%- Con la misma solución se desinfecta el pezón y se seca- Se ordeña eliminando los tres primeros chorros- Se toma la muestra en recipientes de boca ancha, se necesita
aproximadamente 5 ml.Hisopo de barrido:
- Es una muestra que se toma para el diagnostico de enfermedades uqe estén presentes en las instalaciones; generalmente para el diagnostico de Salmonella
Calidad de agua:
- Se usa para conocer el riesgo y la calidad. Para saber esto se hace un análisis microbiológico nos indica la cantidad de microorganismos y se usa la formula UFC/g mediante las normas Inen.
- Se hace una dilución madre, es decir 90 ml de agua con 10ml de leche o dilución en 10
- Las diluciones dependen del tipo de alimento; existen diluciones 1:100, 1:1000, 1:10000; posterior a la dilución se siembra y al final se obtiene la caja con las colonias aisladas, se multiplica el factor de dilución por el numero de colonias, finalmente se hace un recuento total de las colonias formadas.
Tipo de prueba
Fundamento Medio de cultivo
Tipo de prueba
Resultados
Indol Triptofanasa Caldo trisptosa Reactivo de Kovacs
Rojo: +Incoloro: -
Rojo de metilo Acidos mixtos Caldo MRVP Rojo de metilo Rojo: +Incoloro: -
Vogues Proskauer
Acetoina Caldo MRVP Α-naftol Hidroxido de Potasio
Rojo: +Incoloro: -
Citrato Citratasa Citrato de Simmons
Azul de bromotinol
Azul: +Verde: -
Hidrólisis de la úrea
Ureasa Stuart o Cristensen
Fenolftaleina Fucsia: +Incoloro: -
Descarboxilasa Lisina Lisina descarboxilasa
Purpura de bromocresol
Purpura:+Incoloro: -
1
MATERIALES Y MÉTODOS:
Tubos de ensayo Frascos de orina Aguja hipodérmica con capuchón Algodón Alcohol Adhesivos Esferos
1 Stanchi, Nestor Oscar. Microbiologia Veterinaria . Buenos Aires, Republica argentina : Inter Médica, 2007.
Koneman. Diagnostico microbiologico. Argentina : Panamericana, Enero del 2008. 978-950-06-0895-4.
Métodos: Medios de Cari Blair Hisopado rectal Toma de muestra de Heces Toma de muestra de leche Toma de muestra de agua
RESULTADOS:
Muestra
Método Hora de la toma
Medio de transporte
Bovino Hemocultivo/ muestra de leche para Mastitis/ muestra de heces
11:05 Tubo de ensayo/Frascos de orina/ Guante lubricado
Aves Hisopado de barrido 10:50 Medio de Cari Blair o caldo triptosa
Porcino Hisopado rectal 11:15 GasaAgua Calidad de agua 10:40 Frasco de muestras de
orina
CONCLUSIONES:
Al realizar la practica se pudo constatar lo aprendido previamente en la teoría, la toma de muestras es muy importante para proceder a realizar un análisis bacteriológico acertado, con el mínimo margen de error y proceder a un posterior diagnostico en caso de presentarse la patología. La necesidad de que el estudiante sepa manejar un adecuado método de toma de muestras fue la finalidad más importante en el presente trabajo, saber cómo se toma la muestra dependiendo de lo que se quiere analizar del lugar del cual se toma la muestra y de la especie de la cual se hace la muestra. Como se pudo constatar la toma de muestras es indispensable para confirmar o descartar del diagnóstico predictivo realizado previamente por el médico veterinario.
BIBLIOGRAFÍA:
Stanchi, Nestor Oscar. Microbiologia Veterinaria . Buenos Aires, Republica argentina : Inter Médica, 2007.
Koneman. Diagnostico microbiologico. Argentina : Panamericana, Enero del 2008. 978-950-06-0895-4.
ANEXOS:
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
INFORME DE TOMA DE MUESTRAS DE LABORATORIO
GABRIELA MICHELLE HERRERA PAREDES
TERCERO “B”
QUITO 31 DE OCTUBRE DEL 2013
TEMA: Toma de muestras en bacteriología
LUGAR: Laboratorio de Bacteriología
NORMASDE BIOSEGURIDAD:
o Mandil
o Guantes
ESPECIES ANIMALES UTILIZADAS:
Gallina
Perro
HORA DE LA PRÁCTICA
09h00 Am
RESUMEN:
La presente practica realizada en las instalaciones de la Universidad
Central, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia se realizó con el
propósito de aprender el método de obtención de muestras, como
primer punto se procedió a una rápida revisión de materiales de
laboratorio y al correcto chequeo de las normas de bioseguridad; Acto
seguido se obtuvo la muestra de un perro cuyo propósito era un
análisis de otitis mediante un antibiograma, por el cual se obtuvo la
muestra mediante un hisopado del pabellón auricular, y de las partes
más afectadas.
Posteriormente se realizó una necropsia a una gallina para la
obtención de muestras para análisis bacteriológico de los órganos
más propensos a ser atacados por patológicas microbianas. Por
último se obtuvo una muestra de 30 a 40 ml de leche y muestra de
balanceado en sus respectivos recipientes (frasco de orina y bolsas
Zip).
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
El objetivo de la presente práctica es aprender el método correcto de la toma de muestras para su posterior análisis serológico y bacteriológico.
Poner en práctica la teoría anteriormente indicada, para entender el uso de cada material, procedimientos adecuados, conocimiento de los métodos de transporte, etc.
Aprender a reconocer qué tipo de muestra es necesaria y como se obtiene para el estudio microbiológico de las distintas patologías.
Conocer la extracción, manejo y selección correcta de una muestra.
REVISIÓN DE LITERATURA:
Toma de muestras avícolas para diagnóstico:
Principios generales:
Se necesita de un laboratorio adecuado para el diagnóstico de
patologías.
Se debe realizar un examen del animal vivo , y postmortem
Se debe proceder a la correcta identificación e la muestra
Muestras de Suero:
Hisopos orofaringeos
Hisopos traqueales
Muestra de tejidos frescos
Se debe tomar una segunda muestra y colorcarlas en una
solución de formalina
Muestras adicionales para histopatología:
Plumas
Hisopado de órganos
Raspado de intestino
Muestreo de sangre en pollos adultos:
o Se obtiene la muestra de la vena braquial
o Se necesita de aguja, jeringas, alcohol las 70%, tubos, marcador
indeleble
o Se obtiene de 3 a 4 ml de suero sanguíneo
Muestreo de sangre pollos jóvenes:
Se obtiene de la vena yugular
Se necesita de aguja, jeringas, alcohol asl 70%, tubos, marcador
indeleble
Se extrae de 0.1 a 0.5 ml
Muestras: - Tejidos y órganos: En una necropsia, el tamaño de las muestras
debe ser mínimo 3 x 3 cm. Puestas en bolsas individuales de polietileno o recipientes estériles, se puede esterilizar frascos o tubos de ensayo hirviéndolos con sus tapas; porciones de intestino deben ser enviadas con los extremos amarrados
- En animales pequeños se deben enviar 3 por lote, tienen que estar con signos, o animales aparentemente sanos, al ser aves vivas se envían en cajas, si es órgano de 4-6 horas se debe congelar mas tiempo.
- Hisopos: para mientras de secreciones, exudados, contenidos o abcesos.
- Heces: directamente del recto del animal, en animales pequeños se hacen hisopados rectales, se deben enviar de 4 a 8 horas en congelación en animales grandes se toma directamente del recto.
- Leche: en envases estériles con tapa rosca y refrigeradas inmediatamente después de la recolección.
- Hemocultivos: estas muestras se toman en tubos de ensayo o botellas especiales con notificación previa al laboratorio
Leche para estudios bacteriológicos: - Generalmente para el estudio de Mastitis, producida por
Staphylococcus aureus, Streptocococcus agalacte, S. dysgalacte, S. viveris, Enterobacterias, Corimebacterium bovis, Mycoplasma, Campylobacter.
- Se debe lavar, enjuagar y secar al ubre- Se debe desinfectar las manos con alcohol al 70%- Con la misma solución se desinfecta el pezón y se seca- Se ordeña eliminando los tres primeros chorros- Se toma la muestra en recipientes de boca ancha, se necesita
aproximadamente 5 ml.
Medios de guardar las muestras
Frascos de orina. Bolsas Zip, tubos de ensayo, Frascos de vidrio
Medios para el transporte de las muestras:
Medios de transporte en tubo sólido, líquido, semisólido
Hisopos
Necropsia en la gallina:
Se debe introducir a la gallina en alcohol y se procede a su posterior
chequeo minucioso de todo el cuerpo del animal para la
identificación de ectoparásitos, hongos, bacterias, etc.
Existen dos partes de análisis: séptica y aséptica
Parte aséptica:
Se procede a tomar uan muestra del cerebro para pruebas de
virología, se envía la muestra en una solución de formol.
Posteriormente se hace una insicion en el esternón para mantener
el equilibrio del cuerpo y se procede a una revisión de los órganos
internos; se toma una muestra del hígado, ya sea por hisopado o
por muestra de bilis. El medio de transporte en caso de hisopado
es por el medio de cari Blair
Luego se procede a la toma de los pulmones, vesícula, tráquea,
sacos aéreos y lumen.
Parte séptica
Aquí en cambio se debe hacer una toma de muestras mas
minucioso, se extrae el ibntestino se desinfecta bien, se corta la
bolsa de Fabricio para análisis histopatológico. Se pueden obtener
muestras de una porción del intestino para examen bacteriológico
en frascos adecuados, o para histopatología en formol.
Tom de muestras en perro:
Oreja:
Primero se debe realizar una limpieza del área que se sospecha,
luego se procede a su desinfección, la muestras debe ser tomada de
la región media del oído, colocamos en un tubo Cari Blair y se
proecede a su posterior análisis.
Suero:
En el caso del suero sanguíneo se debe obtener la muestra de la vena
yugular, la safena o la cefálica. Posteriormente se la coloca en un
tubo de ensayo para finalmente realizar el análisis.
Pruebas bioquímicas
Tipo de prueba
Fundamento Medio de cultivo
Tipo de prueba
Resultados
Indol Triptofanasa Caldo trisptosa Reactivo de Kovacs
Rojo: +Incoloro: -
Rojo de metilo Acidos mixtos Caldo MRVP Rojo de metilo Rojo: +Incoloro: -
Vogues Proskauer
Acetoina Caldo MRVP Α-naftol Hidroxido de Potasio
Rojo: +Incoloro: -
Citrato Citratasa Citrato de Simmons
Azul de bromotinol
Azul: +Verde: -
Hidrólisis de la úrea
Ureasa Stuart o Cristensen
Fenolftaleina Fucsia: +Incoloro: -
Descarboxilasa Lisina Lisina descarboxilasa
Purpura de bromocresol
Purpura:+Incoloro: -
MATERIALES Y MÉTODOS:
Tubos de ensayo Frascos de orina Aguja hipodérmica con capuchón Algodón Alcohol Adhesivos Esferos
Métodos: Medios de Cari Blair Hisopado rectal Toma de muestra de Heces Toma de muestra de leche Toma de muestra de agua
RESULTADOS:
Muestra
Método Hora de la toma
Medio de transporte
Perro Muestra de sangre, Muestra de heces
11:05 Tubo de ensayo medio triptosa/Frascos de
Muestra de secreción de oreja
orina/ hisopo rectal
Aves Muestra de órganos y asépticaMuestra de sangre
10:50 Hisopado tanto de la parte séptica como aséptica, tubo de ensayo.
Bovino Muestra de leche 11:15 frasco de orinaAlimento
Muestra de balanceado 10:40 Bolsas Zip
CONCLUSIONES:
Al realizar la práctica se pudo constatar lo aprendido previamente en la teoría, la toma de muestras es muy importante para proceder a realizar un análisis bacteriológico acertado, con el mínimo margen de error y proceder a un posterior diagnostico en caso de presentarse la patología. La necesidad de que el estudiante sepa manejar un adecuado método de toma de muestras fue la finalidad más importante en el presente trabajo, saber cómo se toma la muestra dependiendo de lo que se quiere analizar del lugar del cual se toma la muestra y de la especie de la cual se hace la muestra. Como se pudo constatar la toma de muestras es indispensable para confirmar o descartar del diagnóstico predictivo realizado previamente por el médico veterinario.
BIBLIOGRAFÍA:
Stanchi, Nestor Oscar. Microbiologia Veterinaria . Buenos Aires, Republica argentina : Inter Médica, 2007.
Koneman. Diagnostico microbiologico. Argentina : Panamericana, Enero del 2008. 978-950-06-0895-4.
Video de toma de muestras para diagnostico en aves.
Anexos: