UNIVERSIDAD ANDINA

NSTOR CCERES VELSQUEZ

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CAP.: FARMACIA Y BIOQUMICA

ASIGNATURA: BioqumicaDICENTE: MORALES CCARITA, Juan Richard

SEMESTRE ACADMICO: VII

INFORME PRCTICO N 6Titulo: HGADO GRASO O ESTEATOSIS1.- Objetivos: Inducir hgado graso utilizando un modelo animal. Cuantificar los lpidos totales extrados del hgado de los animales experimentales por medio de un mtodo colorimtrico. Observar las diferencias de concentraciones de lpidos entre un animal normal y uno al que se le indujo hgado graso.2.- Marco terico:

Es una acumulacin de grasas en las clulas del hgado. Los sntomas del hgado graso suelen ser fatiga crnica, dolor en la parte superior derecha del abdomen, malestar general y sensacin de pesadez despus de las comidas aunque tambin es cierto que hay muchos pacientes sin ningn sntoma.

El hgado graso (esteatosis) suele estar tambin un poco agrandado aunque no suele producir dolor. El problema es que si no tratamos esta enfermedad (esteatosis) algunos casos pueden terminar en una cirrosis irreversible.

Aunque algunos casos de hgado graso se relacionan con el alcoholismo la mayora se deben, hoy en da, a la obesidad y a altos niveles de colesterol y triglicridos. La mayor incidencia de la diabetes tipo dos (la que no necesita inyectarse insulina) tambin favorece el desequilibrio metablico.

Por qu se produce la esteatosis heptica?La causa de la acumulacin de grasa en el hgado no se conoce con certeza, pero hay algunos mecanismos que se han demostrado muy importantes en el desarrollo de la enfermedad:

Resistencia a la insulina, responsable del sndrome metablico, tan frecuente en el hipertenso. Estrs oxidativo. Liberacin de citoxinas. El hallazgo de hgado graso es extremadamente frecuente. Esta enfermedad se asocia a los siguientes factores de riesgo: Obesidad

Diabetes

Hipercolesterolemia

Hipertrigiceridemia

Sexo femenino

Produce sntomas? El hgado graso frecuentemente es asintomtico y solo es descubierto a raz de una ecografa abdominal.

La otra forma de llegar al diagnstico es a travs del hallazgo de elevaciones de las transaminasas descubiertas en un anlisis de sangre realizado por cualquier motivo.

Algunas personas se quejan de dolor abdominal leve a moderado en el hipocondrio derecho.

Slo un pequeo porcentaje de pacientes presentan sntomas de insuficiencia heptica, como por ejemplo trastorno de la coagulacin, aparicin de ictericia o retencin de lquido en el abdomen.

3.- Mtodos:Observacin, experimentacin

4.- Materiales:

Bao Mara.

Mechero.

Gradillas con tubos de ensayo

Vaso de precipitado con agua

Aceite vegetal

Solucin de Sudn III en frasco cuentagotas

Tinta roja en frasco cuentagotas

Solucin de Hidrxido sdico al 20%.

ter o cloroformo.

5.- Procedimiento:Para la realizacin de este trabajo de laboratorio se utilizaron dos cobayos, de las cuales una fue inyectada intraperitonealmente con 0.5ml de una solucin compuesta de tetracloruro de carbono y aceite mineral en partes iguales, tomando a la misma como rata experimental para la induccin de hgado graso.

El segundo cobayo fue tomado como cobayo control. 24 horas despus las ratas fueron sacrificadas y se les extrajo a ambas el hgado, del cual se obtuvieron y pesaron pequeas piezas que a continuacin se maceraron en presencia de cloroformo-metanol (3:1) para extraer los lpidos.

Del extracto de lpidos se tom una gota para llevar a cabo la hidrolizacin de los acil gliceroles en la solucin utilizando para esto 0.2 ml de cido sulfrico concentrado y calor por 10 minutos, luego de enfriar la solucin se agreg fosfovainillina y se incub a 37C por 15 minutos, finalmente se leyeron en el espectrofotmetro a 540nm los tubos de las dos muestras (rata experimental y control) obteniendo una absorbancia de 0.061 y 0.023 (respectivamente). La curva de calibracin se prepar utilizando soluciones patrn de lpidos de 250, 500, 750 y 1000 mg/dl y utilizando el mismo mtodo colorimtrico utilizado para la preparacin de las muestras.

PESOCOLORCONSISTENCIA

COBAYO CONTROLnormal normo colorContenido biliar: normal.consistencia: normal

Superficie heptica: normal, presenta rugosidades.

COBAYO CON CCl4ligeramente aumentadonormo colorContenido biliar: aumentado (1.5 ml.)

consistencia: rgidasuperficie heptica: lisa, presenta escasas rugosidades

6.- Conclusiones la esteatosis es la alteracin morfolgica ms frecuente, hallable en un 80% de los pacientes estudiados. Entre las grasas se encuentran triglicridos en una concentracion 10 veces superior a lo habitual. Es una consecuencia directa de la oxidacin del etanol en el hgado, 7.- Cuestionario:

1. Por que resulta conveniente la utilizacin de ratas hembra en el experimento de induccin de hgado graso por etionina?

Existe diferencia sexual en la respuesta de las ratas a la intoxicacin con etionina. Tambin las ratas hembras son menos susceptibles a los efectos agudos de la deficiencia de colina. En trabajos reportados anteriormente por nosotros se haba determinado que en el hgado graso inducido por etionina en ratones adultos, machos y hembras, no se oberv diferencias atribubles al sexo. El presente trabajo se realiz con el objetivo de determinar la progresin del hgado graso causado por etionina en ratones hembras y machos lactantes.

2. Por qu mecanismos el etanol induce el hgado graso?

Aparecen diferentes grados de dao heptico ante la exposicin a dosis similares de alcohol, se ha postulado que el avance de formas leves a formas graves de dao heptico alcohlico exige losefectos acumulados de varias noxas separadas (es decir, mltiples injurias). Por falta de tiempo, en estaexposicin se tratar la manera como el alcohol daa los hepatocitos, que son las clulas predominantesen el hgado; pero es importante reconocer que otras clulas, particularmente las clulas de Kpffer,macrfagos residentes en el hgado, y las clulas estrelladas, que producen el tejido fibrtico que se acumula en los hgados cirrticos, tambin se alteran con la exposicin al alcohol.

De acuerdo con esta teora, el etanol se metaboliza a acetaldehdo, producto intermedio txico, por accin de enzimas del hepatocito (diapositiva 10). En condiciones de exposicin infrecuente al etanol, ste se oxida y forma acetaldehdo, predominantemente por accin de la alcohol deshidrogenasa (ADH) citoslica,y el acetaldehdo resultante es destoxificado rpidamente convirtindose en acetato por accin de la aldehdo deshidrogenasa (ALDH) mitocondrial. El acetato, a su vez, pasa a ser un sustrato para el metabolismo intermediario y genera CO2 y H2O. Los polimorfismos de ADH/ALDH y los frmacos (Antabuse) que causan la sobreactividad de la ADH respecto a la ALDH, se han asociado con aumento del dao heptico en las personas, lo que apoya la importancia del acetaldehdo como sustancia hepatotxica

3. Por qu la deficiencia de cidos pantotenicos pueden determinar hgado graso?

El cido pantotnico tambin se conoce como vitamina B5. El cido pantotnico se forma de -alanina y cido pantoco. El pantotenato se requiere para la sntesis de la coenzima A (CoA), y es un componente del dominio de la protena transportadora de grupos acilos (ACP) de la sintasa de cidos grasos. El pantotenato, por lo tanto, se requiere para el metabolismo del ciclo del TCA de la va de los carbohidratos y de todas las grasas y protenas. Se han identificado al menos 70 enzimas que requieren CoA o los derivados de ACP para su funcin.

La deficiencia del cido pantotnico es extremadamente rara debido a su extensa distribucin en los cereales integrales, las legumbres y la carne. Los sntomas de la deficiencia del pantotenato son difciles de determinar puesto que son sutiles y se asemejan a los de otras deficiencias de la vitamina B.

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