informe de bioquímica n. 5

7/21/2019 Informe de Bioquímica N. 5

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Práctica No. 5 Producción de inoculantes fijadores de nitrógenoDiego Andrés Donoso Cod. 201212675Mauricio uertas Cod. 201212!06Profesor "uis #duardo Dia$.05 de agosto de 201!%ni&ersidad de la 'a(ana

)acultada de *ngenier+a

,esu-en El diazótrofo de vida libre azotobacter spp es una bacteria que realiza lafijación de nitrógeno aeróbicamente para que sea utilizada por las plantas y animales. Sebuscó realizar un seguimiento a un cultivo de azotobacter spp para analizar la capacidadde reducir fuentes de nitrógeno que se encuentren a su alrededor. Durante la práctica, nose realizó un seguimiento a la biomasa pero si a la masa de nitrógeno. os resultadosfueron positivos y mostraron que la bacteria fija el nitrógeno a pesar de que tambi!n utilizaeste para su desarrollo. Durante un per"odo de fermentación de #$ %oras, se observa unaumento el contenido de nitrógeno con respecto al tiempo cero. Este microorganismoposee una actividad importante respecto a la fijación de nitrógeno y se deber"a utilizar en

procesos de fertilización para reemplazar los actuales.

A(stract &%e diazotrop%s of free life azotobacter spp is a bacterium t%at does t%enitrogen fi'ation aerobically to be used by t%e plants and animals. (t )as searc%ed to do atrac* to a crop of azotobacter spp to analyze t%e capacity of reducing nitrogen sources t%atare around it. During t%is practice, it )asn+t follo) t%e biomass but t%e nitrogen mass, yes.&%e results )ere positives and s%o) t%at t%e bacterium set t%e nitrogen despite t%at it alsouse nitrogen for its gro)t%. During a period of fermentation of #$ %ours, )as observed anincrease of t%e content of nitrogen compared to cero time. &%is microorganism %as animportant activity in relation to t%e nitrogen fi'ation and it s%ould be used in process of fertilization to replace t%e actuals.

/(jeti&o ealizar un seguimiento al proceso de fermentación de la azotobacter spp paradeterminar la capacidad que tiene como fijador de nitrógeno de acuerdo a los cambios debiomasa y nitrógeno.

1. *ntroducción En la naturaleza el nitrógeno es uncomponente que se encuentra en el-/ del volumen total del aire, elcual forma parte de un ciclo en el

que las plantas del medio formannitritos para elaborar prote"nas yotros compuestos orgánicosnitrogenados 0Campos 1edoya,2$3. 4ara la realización esnecesario tener en cuenta que elmetabolismo del nitrógeno consiste

en la fijación que es la incorporacióndel nitrógeno atmosf!rico acompuestos orgánicos 5tiles paralos organismos 06. Campbell 7 8.9arrell, 2:3, y otra forma delnitrógeno inorgánico es el queencuentra en la tierra, que por medio de un proceso de nitrificaciónse reduce de nitrato a amoniaco,que se transforma en nitrógenoorgánico por las plantas y setransmite por medio de ellas a los

1



animales 06. Campbell 7 8. 9arrell,2:3.En el metabolismo ;2 de la forma; ;, que es una estructura detriple enlace que %ace a la mol!cula

casi inerte, por lo cual no la puedenaprovec%ar los animales, dado aesto una serie de microorganismosse especializan en reducir elnitrógeno a una forma utilizable, queson< bacterias, algas yactinomicetes. a fijación biológicade nitrógeno que por medio deestos microorganismos que tienenque utilizarlo para su crecimiento,en el que deben reducir el ;2

amonio 0;=#>3 o a nitrato 0;8$?3, por lo que le dan continuidad al ciclopara su posible utilización 0@ayz9igueroa, 2#3. Este proceso selleva a cabo por la reducción delnitrógeno mol!cula a ;=$ y paraello es necesaria la presencia de laenzima nitrogenasa 0Arbano &errón,B--3, para la realización de esteproceso se utiliza la reacción

catalizada por esta enzima que serepresenta en la siguiente reacción<

Dado a que esta reacción catalizadapor la nitrogenasa que esfuertemente endergónica y quetiene una in%ibición de la enzimacuando en el medio %ay nitrógenocombinado 0;8$

? o ;=#>3, pero este

ser"a un mecanismo de regulaciónlógico cuando la utilización de estasformas de nitrógeno requieranmenos energ"a que el proceso de lafijación biológica de nitrógeno 0D"az,1orsani, 7 @onza, 2:3.4ara la realización de esta reacciónse necesita una fuente de nitrógeno

entre los diferentesmicroorganismos o fuentes de lafijación de nitrógeno en el quepodemos encontramos al

Azotobacter que es una de las

bacteria que mejor fija al nitrógeno,que en la ruta de la asimilación denitrato se distingue en el transportede nitrato al interior celular, a trav!sde un sistema multicomponente, por la reducción del nitrato a nitritocatalizada por la nitrato reductasa yla reducción de nitrito %asta amoniocatalizada por la misma enzimaantes de la incorporación delamonio a esqueletos carbonados

0ega 4iqueres, paricio, 7 Castillo,BF3. En la fijación de nitrógenocomo se %ab"a nombrado antesayuda al crecimiento de losmicroorganismos, entonces para elestudio del crecimiento del

Azotobacter y poder valorar suefectividad del agente en unacantidad conocida de bacterias sepuede obtener comparando la

turbidez del medio que contiene lasbacterias en suspensión con unosestándares de turbidez. Estosestándares se obtienen por mediode la escala de @c9arland querepresenta una cantidad conocidade bacterias 0S. Garcia 7 G.1ermejo, 2H3.4ara la realización de la fijación delnitrogeno por medio del

Azotobacter en el laboratorio se

considera utilizar el m!todo de6jeldal que se basa en la o'idaciónde la muestra con ácido sulf5ricoconcentrado y caliente, con lo queel nitrógeno combinado se convierteen un ion amonio. Esta se trata conun e'ceso de base fuerte, se destilay se valora al final el amoniaco

2



liberado. Durante su etapa dedigestión u o'idación, en el que elcarbono e %idrogeno de la muestrase transforman en dió'ido decarbono y agua, dado a esto el

comportamiento del nitrógenodepende de la combinación en sevalla a encontrar, por lo que esteparte se considera el nivel cr"tico dela reacción 0Sierra lonso, @oranteIarcero, 7 4!rez Juintanilla, 2F3.Cuando la o'idación se completa,se enfr"a el contenido y se diluyecon agua, para darle continuación ala basicidad necesaria para que selibere el amoniaco de acuerdo con

la siguiente reacción 0Sierra lonso, @orante Iarcero, 7 4!rezJuintanilla, 2F3<

En este m!todo se requiere decompuestos que durante su procesode o'idación demanda de una salneutra con el fin de mejorar la

cin!tica del m!todo, para aumentar el punto de ebullición del ácidosulf5rico y con ella la temperatura ala que se desarrolla. 8trocompuesto necesario para recoger y determinar el amoniaco esnecesario de una disolución patrónque consiste en un e'ceso nomedido de ácido bórico en el frascocolector, que reacciona con el

amoniaco originando amonio yboratos 0Sierra lonso, @oranteIarcero, 7 4!rez Juintanilla, 2F3<

as reacciones que ocurren dentrodel m!todo de 6jeldal son<

2. Materiales reacti&osa. Materiales

Caja de 4etri con Azotobacter

spp

Escala de @c9arland

Erlenmeyer de : ml con

desprendimiento lateralErlenmeyer de B ml

gitador orbital @icroscopio

1alanza anal"tica, sensibilidad ,B

mg

Equipo 6jelda%l

@anto calefactor

p=metro(. ,eacti&os

@edio de cultivo< Caldo nutritivo

22 ml gua Destilada $ ml

@ezcla catalizadora< ,B: g dedió'ido de titanio &i82, ,B: g desulfato de cobre CuS8# y :,2 g desulfato de potasio 62S8#.

=idró'ido de sodio ;a8= al $2/

- ml Solución de ácido bórico =$18$ al

2/ F: ml

3



Solución de =Cl al ,-@

!. Procedi-iento

Proceso fer-entati&o

En una cabina de flujo laminar o al ladode un mec%ero, se tomó una caja de4etri y con asa bacteriológica se inoculoa 2 ml de medio de cultivo. Se Dejó por 2# %oras a $ KC con agitación de B:L2 rpm en un agitador orbital y se pasóel inóculo de la fermentación al medio decultivo 02 ml3 y se agita suavemente,del cual se toma una muestra de B ml delsistema fermentativo, el cual se guardóen un tubo para microcentr"fugar.Se colocó el medio inoculado en unagitador orbital y se dejó a $KC y conagitación de B:L2 rpm. Se &omaronmuestras del medio de cultivo cada #%oras.

uantificación de la (io-asa con

(ase en el n3-ero de células4

4ara el revelado de la muestra secentrifugo a :g M B minutos,

descartando el sobrenadante, en el cualse resuspendio la biomasa en B ml desolución salina isotónica con ayuda devorte', entonces se realizó la dilución dedic%a muestra en solución salina %astaalcanzar igual turbidez a alguno de lostubos de la serie de @c9arland.

uantificación de la (io-asa con

(ase en el eso de (io-asa4

Se pesó una membrana de acetato decelulosa de tamaNo de poro .22 o .#:Om en una balanza anal"tica, del cual setomaron B ml del cultivo final y secentrifugaron a : g por B: minutos.Se resuspendio la biomasa en : ml desolución salina isotónica, para filtrar atrav!s de la membrana de acetato de

celulosa, colocando la membrana en unaincubadora a H KC.

Deter-inación de nitrógeno total

• Digestión

En un balón de digestión se colocó en elsiguiente orden<

Tabla 1 Concentraciones de la muestra,la mezcla catalizadora y H2SO4 para laproceso de digestión o oxidación.

Se calentó al principio suavementedurante unos B minutos con el fin deeliminar la mayor parte de la %umedad,despu!s se subió gradualmente el calor %asta una temperatura tal que losvapores de S8$ no alcanzaron sino lamitad del cuello del balón de digestión yse mantuvo %asta obtener una soluciónde color verde esmeralda, al finalizar sedejaron enfriar los balones.

• Destilación y Absorción

4ara esta parte del m!todo de 6jeldal secolocó en el equipo de destilación el tubode digestión con la muestra y seprogramó para realizar una destilacióncon los siguientes parámetros<

gua< : ml Pcido bórico< F: ml al 2/

;a8=< - ml al $2/ o una densidad deB.$#&iempo de destilación< : min

• Titulación

Se tituló con =Cl, con un indicador de&asc%iro %asta que se produjo un virajede color o se obtuvo el valor inicial del p=

4



del ácido bórico 0p=< #.$ a #.:3 y seregistró el volumen de ácido gastado enla valoración para cada una de lasmuestras trabajadas.

. Datos cálculos.

De acuerdo al procedimiento, se preparóel medio de cultivo con losmicroorganimos y se tomaron muestrasde este durante #$ %oras de acuerdo a latabla 2

a determinación de biomasa con baseal n5mero de c!lulas y al peso, no sepudieron determinar por cuestiones detiempo. En la determinación de nitrógenototal se utilizó el m!todo de 6jeld%al.4ara la digestión se utilzarón doscatalizadores metálicos y una sal neutra,62S8#, la cual aumenta el punto deebullicón del =2S8# y por ende latemperatura de o'idación. Despu!s deo'idada la muestra, se realiza ladestilación y absorción en el aparato de*jeld%al para luego realizar la titulación.4ara la cuantificación de nitrógeno total

se %acen los cálculos de acuerdo a laneutralización ácido?base que se lleva acabo en la titulación y todas lasreacciones que ocurren en los procesosanteriores tiene una relaciónestequiom!trica B<B, por lo que<

ml

HCl∗mmol HCl

ml HCl ∗1mmol N H

4 H

2B O

3

1mmol HCl ∗

1mmol N H 4 H

2B O

3

1mmol N

os ml de =Cl utilizados en la racciónfueron los utilizados en la práctica menoslos utilziados en los blancos. En lareacción de neutralización, se toma comouna reacción entre un ácido fuerte y una

base fuerte porque el iondi%idrogenoborato formado en laabsorción que act5a como una baserelativamente fuerte 01ro)n 7 Sallee,BHF3. Cada uno de los datos

determinados se tabularon en la tabla $.

4ara el porcentaje de nitrógeno en lamuestra se calculo de la siguientemanera<

N en lamuestra= masade N

masade analito∗100

a linealización de datos para cadagrupo se %izó con la %erramienta de

e'cel y la desviación estandar delpromedio que se cálculo de acuerdo aporcentaje de nitrógeno en lamuestra0S*oog, est, 7 =oller, BF3.

5. Análisis de resultados.

Proceso de fer-entación.

El proceso de fijación de nitrógeno por diazótrofos es uno de los procesos más

importantes para el sostenimiento de lavida. 4ara analizar este proceso se %izoun seguimiento a la bacteria asimbióticaazotobacter spp en un cultivo apropiadopara su crecimiento y sostenibilidad0=ernandez, lfaro, 7 rrieta, B--3. diferencia de lo que ocurre en losprocesos de fijación en la naturaleza, laprincipal fuente de nitrógeno seencuentra en el cultivo en forma deprote"nas 0aminoácidos3 las cuales

utilizan esta fuente para su crecimiento yreducen el nitrógeno de las mismas paraque est! disponible en el medio. 4or faltade datos, no se pudo cuantificar elcambio en la biomasa durante elseguimiento pero se asume que losmicroorganismos se adaptaronfácilmente al medio y se encontraban en

5



la fase e'ponencial a la e'tracción de laprimera muestra. De acuerdo a otrosestudios 0ara @natilla, illalba naya, 78viedo I., 2F3 no sólo se %acomprobado la capacidad de la bacteria

en fijar el nitrógeno, pero como duranteel mismo la bacteria se puede encontrar en su proceso de crecimiento. Se realizóuna apro'imación al seguimientoadecuado de la biomasa, m!todo de@c9arlandB, pesando cada una de lasmuestras que se e'trajeron del cultivo,recopilados en la tabla 2 y $. 4ara losgrupos de Diego y @auricio, 6aren ySneider y Carlos y ;elson se observa unaumento y disminución at"picos entre las

muestras. Esto responde a unacontaminación al e'traer la muestra 2 decada uno de estos grupos y serepresenta de color amarillo en la tabla #y : porque en la fase de crecimiento losmicroorganismos son más sensibles a laradiación, temperatura, p=, etc 0&ortora,9un*e, 7 Case, 2F3. 4ara los gruposde aura y ivian y @a. 9ernanda yQonat%an, la muestra seis no guarda una

relación con sus demás datos por lo quese descarta. 4ara todos los grupos delaboratorio se observa un aumento de lamasa con respecto al tiempo deincubación lo que muestra un indicio delaumento de biomasa correspondiente ala etapa de crecimiento microbiano.

Deter-inación de nitrógeno total.

1 Está técnica se basa en la turbidezde una solución de un cultivo debacterias determinado y secuantifca de acuerdo a la escala deMcFarland oespectrootométricamente!" E#tra$do de microbiolo%$a basadaen la e#perimentación del %rupoeditorial E&'E()E*+

En la determinación del nitrógeno seutilizó el m!todo de 6jeld%al, ya utilizadoen otros estudios 06ir*, B:3. Se debetener en cuenta que la cuantificaciónrealizada fue a todo el nitrógeno presente

en la muestra, ya sea como el nitrógenoorgánico producido en el proceso defijación o el inorgánico. En base a0lonso S., @orante I., 7 4er!z J.,2F3 se asumió que todas las formasnitrogenadas presentes en los analitos seo'idaron a ion amonio despu!s delproceso de digestión. demás se asumeque el medio proporciona la cantidadsuficiente de nitrógeno para realizar elseguimiento a la bacteria sin que este

sea un factor limitante, tal como lo es elnitrógeno atmosf!rico en los procesosnaturales 0Eugenia 1aca 7 4ardo u"z,

gosto, 23. os grupos de ;at%aly y lejandra, aura y ivian, @a. 9ernanday Qonat%an, Cesar y ic*y y Carolina ySof"a guardan una relación entre susdatos de forma lineal con respecto altiempo de fermentación de las muestras.Se observa como la concentración de

nitrógeno con el tiempo disminuye paraestos grupos con una pendiente negativaen la relación de sus datos, gráfica B.Cómo se comprobó en 0Eugenia 1aca 74ardo u"z, gosto, 23, cuando elmicroorganismo está reduciendo elnitrógeno del ambiente, en este caso eldel cultivo, y este no es utilizado labacteria deja de reducir el nitrógeno paraevitar un gasto de energ"a innecesario.En la práctica todo el nitrógeno que se

transformaba, queda libre en el medio. pesar de esto los microorganismoscontin5an su crecimiento 0Stanier,(ngra%am, 7 R%eelis, B23y en esteproceso generan diferentes metabolitosque disminuyen la concentración denitrógeno. l analizar con detalle la

,



gráfica, la pendiente de los grupos de@a. 9ernanda y Qonat%an, aura y iviany ;at%aly y lejandra se apro'imada acero por lo que el cambio de laconcentración de nitrógeno en el tiempo

no fue muy grande, esto confirma quecuando no se utiliza el nitrógeno orgánicoproducido, este permanece en el medio yla bacteria no realiza un gasto de energ"ain5til. pesar de esto, si se alcanza aconsumir algo de nitrógeno para elcrecimiento del microorganismo, pero labacteria realiza el proceso de fijacióndurante este proceso por lo que elcambio neto es pequeNo. Esto muestra laalta efectividad de la bacteria respecto a

la fijación de nitrógeno y se correlacionacon otros estudios realizados 0&reto,Garc"a, @art"nez, 7 7 9ebles, 2B3.

En relación al porcentaje de nitrógeno enlas muestras, se aprecia un porcentajede :/ en masa de nitrógeno enpromedio durante #$ %oras en las que selleva a cabo el proceso. Este nitrógenocuantificado es el nitrógeno orgánico einorgánico del cultivo por lo que estosporcentajes no son una medida delrendimiento de la bacteria pero simuestran un aumento en comparación altiempo cero para estos grupos. asdesviaciones estándar con respecto alpromedio son pequeNas y relacionancomo la cantidad de nitrógeno no variómuc%o en el tiempo de fermentación ypor ende se correlaciona con lo e'plicadoanteriormente. 4ara los grupos de Diego

y @auricio, 6aren y Sneider y Carlos y;elson, la cuantificación de nitrógenoarrojó datos que no guardan una relaciónmatemática adecuada, lo que serelaciona con la contaminación delcultivo, antes mencionada. pesar deesto la azotobacter es un diazótrofo devida libre muy efectivo para utilizarlos

como sustituyentes en procesos defertilización 0ara @natilla, illalba naya,7 8viedo I., 2F3y tambi!n se usanotros metabolitos que produce en laindustria 0;ieto, 2B23.

6. onclusiones.

a azotobacter spp es un

diazótrofo con un buenrendimiento de acuerdo a lareducción que realiza delnitrógeno, por medio de sucomplejo enzimático.Dependiendo del medio que seencuentre y del consumo que setenga del nitrógeno, esta tendrá

una actividad fijadora relevante Este microorganismo posee una

actividad importante respecto a lafijación de nitrógeno y se deber"autilizar en procesos defertilización para reemplazar losactuales. Ano de los aspectosmás importantes es que es unmicroorganismo que realiza lafijación aeróbicamente a pesar deque el complejo enzimático esirreversiblemente desnaturalizadoen presencia de o'"geno.

7. i(liograf+a.

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Mayz Fi%ueroa. D! "24+! FiBaciónbioló%ica de nitró%eno!#evista Cientí$ca %&'

grícola . 1H2!

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'ierra -lonso. (!. Morante /arcero.'!. 0 érez uintanilla. !"2+! Experimentación enquímica analítica. Madrid6niversidad *ey Duan @arlos!

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'tanier. 7! *!. (n%raGam. &! D!. 0JGeelis. &! M! "1??2+!Microbiología. ;arcelona6Editorial *everté!

Aortora. >! D!. Fune. ;! *!. 0 @ase.@! &! "2+! )ntroducción a lamicrobiología. Madrid6Editorial médicaanamericana!

Areto. E!. >arc$a. M!. Mart$nez. )! *!.0 0 Febles. D! M! "21+!-vances en el maneBo de lossuelos y la nutrición or%ánica!ransformando el campocubano. vances de laagricultura sostenible. "pá%!1,+! &a =abana. @uba6Ediciones Funes!

rbano Aerrón. ! "1?CC+! ratado de$totecnia general. ;ilbao6MundiHEmpresa!

)e%a iKueres. D! M!. -paricio. ! D!. 0@astillo. D! "1??+! vances enel metabolismo delnitrógeno 3 de la $siología a

C



la biologia moleculara labiología molecular. @amas.'evilla6 'ecretario de

publicaciones de universidadde 'evilla!

?



8. Ane9os8.1. Datos ta(ulados.

ie%o yMauricio

@arlos y 9elson8aren y'neider

9atGaly y-leBandra

Aiempo enGoras

)olumenutilizado de

solución de =@l.?C M "ml+

Masa de 92

cuantifcada"m%+

)olumenutilizado de


Masa de 92

cuantifcada"m%+

)olumenutilizado de

solución de=@l .?C M"ml+

Masa de 92

cuantifcada"m%+

)olumenutilizado de


Mas

cuan"

estra 1 .? .C?1C .C .54, . .,14 1 1

estra 2 4 . .,14 .? .C?1C .C5 .C232 .? .

estra 3 1? .C .54, .C .54, . .,14 .C .

estra 4 23 .5 .,C, .? .C?1C .C5 .C232 . .

estra 5 2C .? .C?1C .C .54, . .,14 . .

estra , 43 .C .54, .? .C?1C .C .54, .C .

Tabla 2 e acuerdo al medio de culti!o se tomaron muestras en inter!alos durante 4"#oras con respecto al !olumen titulado de HC$ %,%&' ( en ml y la masa cuanti)cadade *2 para los grupos de iego y (auricio, Carlos y *elson, +aren y Sneider y *at#aly

y le-andra.

&aura y)ivian

Ma!Fernanda y

DonatGan

@esar y)icy

@arolina y'o$a

Aiempo en

Goras

)olumenutilizado

desoluciónde =@l.?C M

"ml+

Masa de92

cuantifcada"m%+

)olumenutilizado


"ml+

Masa de92

cuantifcada"m%+

)olumenutilizado


"ml+

Masa de92cuantifcada"m%+

)olumenutilizado


"ml+

Masa de92

cuantifcada"m%+

estr 1

. .,14 .? .C?1C 1.5 1.15 1.5 1.15

estr 2

4 .,5 .54CC .C5 .C232 1.4 1.5C 1.2 1.334

estr 3 1? ., .4C2 .C .54, 1.4 1.5C . .,14estr 4

23 ., .4C2 .C .54, 1 1.2? ., .4C2

estr 5

2C ., .4C2 .5 .,C, 1 1.2? .5 .343

estr ,

43 .55 .411, . .,14 .C .54, .3 .,C,

Tabla " e acuerdo al medio de culti!o se tomaron muestras en inter!alos durante 4"#oras con respecto al !olumen titulado de HC$ %,%&' ( en ml y la masa cuanti)cadade *2 para los grupos de $aura y i!ian, (a. /ernanda y 0onat#an, Cesar y icy yCarolina y So3a.

ie%o y Mauricio @arlos y 9elson 8aren y 'neider 9atGaly y -leBandra

esoanalito "%+

orcentaBede 92

en lamues

tra

esviaci

ón de lamuestra

conrespect

o alpromedi

o

esoanalito"%+

orc

enta Bede92

enla

muestra

esviaci

ón de lamuestra

conrespect

o alpromedi

o

esoanalito "%+

orcentaBede 92

en lamues

tra

esviaci

ón de lamuestra

conrespecto

alpromedi

o

esoanalito "%+

orcentaBe de92 en

lamuestr

a

esviaci

ón de lamuestra

conrespecto

alpromedi

o

est1

1.,?5.2,

L.14

1.4,

4.32L

.3211.,14

?3.C2

L.342

1.4C4

5.C?L .1,

est2

1.52

4.12L

.,5? 1.,4

5.33L

.3? 1.C,

4.C2L

.3,1 1.?,5

4.?,L .425



est3

1.311

5.CL

.5321.C33

4.11L

.431.,1

43.C,

L.31?

1.545

4.3L .44

est4

1.4C45

4.,2L

.321.,21

5.4CL

.4?C1.,C5

C4.CC

L.4

1.C25

3.43L .,,3

est5

1.5,?2

5.,CL

.44?1.,515

4.5L

.141.5,C

,3.?4

L.2,2

1.C3

3.42L .,

est,

1.5,C,

4.C1L

.1,1.C3C

4.C5L

.541.,,

34.53

L.155

1.C2,

4.1?L .125

romedio

5.5L

romedio 4.C

Lromedio

4.31L

romedio

4.3,L

Tabla 4 orcenta-e de *2 con respecto al peso de la masa cuanti)cada de *2 obtenidosen la tabla 2 y del analito 5g6 para cada una las muestras obtenidas, con surespecti!o promedio y su des!iación del promedio 7ue se c8lculo de acuerdo alporcenta-e de nitrógeno en la muestra, para los grupos de iego y (auricio, Carlos y*elson, +aren y Sneider y *at#aly y le-andra. 9l color amarillo corresponde a lascontaminaciones por sensibilidades a la radiación, pH, etc.

&aura y )ivian Mae y DonatGan @esar y )icy @arolina y 'o$a

esoanalit

o "%+

orcentaBede 92

en lamuestra

esviación de lamuestra

con

respecto alpromedi

o

esoanal

ito"%+

orcenta Bede92

enla

muestra


con

respecto alpromedi

o

esoanalit

o "%+

orcentaBede 92

en lamuestra

esviaciónde la

muestra con

respecto al

promedio

esoanalito

"%+

orcentaBe de92 en

lamuestra


con

respectoalpromedi

o

est1

1.5,C

3.51L

.2?41.,54

5.5L

.412 1.43,11.?4

L.22

1.,23C

1.5,L

.42

est2

1.?3C

3.,L

.21.55

4.C3L

.253 1.,,4?.4CL

.?C

1.C2? .13L .1C

est3

1.,52.?1L

.1331.5555

4.C5L

.211.,43

C?.,L

.1,?

1.335 4.,2L .?

est4

1.52C2

3.14L

.311.,?

4.2,L

.1441.4

4,.4L

.144?

1.4C3 2.5L .131?

est5

1.541C

3.11L

.121.C51

3.C4L

.4421.441

?.14L

.,2

1.5525 2.21L .1,??

est,

1.445

2.C5L

.11.553C

3.?L

.351.4,

14.32L

.2,,2

1.15 .4L .2?

romedio

3.1L

romedio

4.4L

romedio

C.?L

romedio

4.,1L

Tabla : orcenta-e de *2 con respecto al peso de la masa cuanti)cada de *2 obtenidosen la tabla " y del analito 5g6 para cada una las muestras obtenidas, con surespecti!o promedio y su des!iación del promedio 7ue se c8lculo de acuerdo alporcenta-e de nitrógeno en la muestra, para los grupos de $aura y i!ian, (a./ernanda y 0onat#an, Cesar y icy y Carolina y So3a. 9l color amarillo corresponde alas contaminaciones por sensibilidades a la radiación, pH, etc.



1 2 3 4 5

!2

!4

!,

!C

1

1!2

1!4

1!,

1!C

2

9atGaly y -leBandra

&aura y )ivianMa Fernanda y DonatGan

@esar y )icy

@arolina y 'o$a

Tiempo de ermentación 5#6

(asa de *2 5mg6

/igura 1 (asa de la cuanti)cación de *2 en 5mg6 obtenido de las muestras conrespecto al tiempo de ermentación de en dierentes #oras para los grupos de $auray i!ian, (a /ernanda y 0onat#an, Cesar y icy y Carolina y So3a.

informe de bioquímica n. 5

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