UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
“Determinación de la concentración sérica de la pseudocolinesterasa y
consecuencias funcionales hepáticas en trabajadores de una empresa florícola
expuestos directa e indirectamente a plaguicidas organofosforados período mayo
2018”
Proyecto de trabajo presentado previo a la obtención del grado académico de Lic.
Laboratorio Clínico e Histotecnológico
AUTORA: Martha Ximena Guanochanga Chicota
TUTOR: Dr. Jaime Ernesto Acosta Coba
QUITO
2018
ii
©DERECHOS DE AUTOR
Yo, Guanochanga Chicota Martha Ximena, en calidad de autor de los derechos morales y
patrimoniales del trabajo de investigación previo a la obtención del Título de Licenciada en
Laboratorio Clínico e Histotecnológico de conformidad con el Art. 114 del CÓDIGO
ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS,
CREATIVIDAD E INNOVACIÓN, concedo a favor de la Universidad Central del Ecuador
una licencia gratuita, intransferible y no exclusiva para el uso no comercial de la obra, con
fines estrictamente académicos. Conservo a mi favor los derechos de autor sobre la obra,
establecidos en la normativa citada.
Así mismo, autorizo a la Universidad Central del Ecuador para que realice la digitalización
y publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de conformidad a lo
dispuesto en el Art. 144 de la ley Orgánica de Educación Superior.
El Autor declara que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de
expresión y no infringe el derecho de autor de terceros, asumiendo la responsabilidad por
cualquier reclamación que pudiera presentarse por esta causa y liberando a la Universidad de
toda responsabilidad.
iii
APROBACION DEL TRABAJO DE TITULACION POR EL TUTOR
Yo, Dr. Jaime Ernesto Acosta Coba, en calidad de tutor del trabajo de titulación,
modalidad proyecto de investigación, cuyo título es “ DETERMINACIÓN DE LA
CONCENTRACIÓN SÉRICA DE LA PSEUDOCOLINESTERASA Y
CONSECUENCIAS FUNCIONALES HEPÁTICAS EN TRABAJADORES DE UNA
EMPRESA FLORÍCOLA EXPUESTOS DIRECTA E INDIRECTAMENTE A
PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS PERÍODO MAYO 2018” , elaborado por la
estudiante GUANOCHANGA CHICOTA MARTHA XIMENA, para la obtención del
título de Licenciada en Laboratorio Clínico e Histotecnológico; considero que el mismo
reúne los requisitos méritos necesarios en el campo metodológico y en el campo
epistemológico, para ser sometido a la evaluación por parte del jurado examinador que se
designe, por lo que lo APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para continuar con
el proceso de titulación determinado por la Universidad Central del Ecuador.
En la ciudad de Quito, a los 9días del mes de agosto del año 2018.
iv
DEDICATORIA
Dedico este trabajo principalmente a Dios por haberme permitido llegar a este
momento tan especial en mi vida, por los triunfos y momentos difíciles que me han
enseñado a valorarlo cada día más.
A mis padres que a pesar de todas las dificultades que se presentaron a lo largo de mi
carrera nunca dejaron de pensar que la mejor muestra de amor y herencia que se le
puede dar a un hijo es la educación.
A mis hermanas y hermano que con sus concejos supieron guiarme por el camino
correcto y por estar siempre dispuestos a ayudarme.
A mi hija que con su llegada supo enseñarme que un título académico no solo sirve para
alcanzar un futuro bienestar económico, sino que es un ejemplo de que con constancia y
esfuerzo toda meta es posible de alcanzar.
v
AGRADECIMIENTO
Agradezco a la Universidad Central del Ecuador por haberme abierto las puertas de su
seno científico para poder estudiar mi carrera.
A los diferentes docentes que me brindaron sus conocimientos para poder formarme día
a día como un buen profesional.
A mi asesor de tesis el Dr. Jaime Acosta por haberme brindado la oportunidad de
recurrir a su capacidad y conocimiento científico y por guiarme durante el desarrollo
de mi tesis.
A mis amigas y amigos formadas durante todos los niveles de universidad ya que
gracias a su apoyo moral han aportado en un alto porcentaje a mis ganas de seguir a
delante en mi carrera profesional.
vi
ÍNDICE DE CONTENIDO
págs.
©DERECHOS DE AUTOR ................................................................................................... ii
APROBACION DEL TRABAJO DE TITULACION POR EL TUTOR ............................. iii
DEDICATORIA .................................................................................................................... iv
AGRADECIMIENTO ............................................................................................................ v
ÍNDICE DE CONTENIDO…………………………………………………………………vi
ÍNDICE DE TABLAS ........................................................................................................... ix
ÍNDICE DE ANEXOS ........................................................................................................... x
RESUMEN ............................................................................................................................ xi
ABSTRACT ......................................................................................................................... xii
INTRODUCCIóN ................................................................................................................... 1
CAPÍTULO I .......................................................................................................................... 3
1.EL PROBLEMA ................................................................................................................. 3
1.1. Planteamiento del problema ........................................................................................ 3
1.2. Formulación del problema ........................................................................................... 4
1.3. Preguntas directrices .................................................................................................... 4
1.4.OBJETIVOS ..................................................................................................................... 5
1.4.1. Objetivo general. ...................................................................................................... 5
1.4.2. Objetivos específicos ............................................................................................... 5
1.5.Justificación e Importancia ............................................................................................... 6
CAPÍTULO II ......................................................................................................................... 7
2.MARCO TEÓRICO ............................................................................................................ 7
2.1. Reseña histórica ........................................................................................................... 7
2.2. Plaguicidas ................................................................................................................... 8
2.3. Clasificación de los plaguicidas .................................................................................. 8
2.4. Efectos del uso de plaguicidas ..................................................................................... 9
vii
2.5. Plaguicidas inhibidores de la colinesterasa ............................................................... 10
2.6. Vías de contaminación............................................................................................... 12
2.7. Toxicocinética ........................................................................................................... 12
2.8. Mecanismo fisiopatológico........................................................................................ 13
2.9. Mecanismo de acción ................................................................................................ 13
2.10. Colinesterasa .......................................................................................................... 14
2.11. Hígado .................................................................................................................... 16
2.12. Captación y concentración ..................................................................................... 19
2.13. Tipos de toxicidad hepática ................................................................................... 19
2.14. Pruebas bioquímicas de función hepática .............................................................. 20
2.15. Fundamentación Legal ........................................................................................... 22
2.15.1.MARCO LEGAL GUBERNAMENTAL ................................................................. 23
CAPÍTULO III ..................................................................................................................... 27
3. METODOLOGÍA ...................................................................................................... 27
3.1. TIPO DE INVESTIGACIÓN .................................................................................... 27
3.2. POBLACIÓN ............................................................................................................ 27
3.3. Criterios de inclusión ................................................................................................. 27
3.4. Criterios de exclusión ................................................................................................ 27
3.5. VARIABLES ............................................................................................................. 28
3.6. ÁREA de Estudio .......................................................................................................... 28
3.6. OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES ......................................................... 28
3.7. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN ........................................................................ 32
3.8. CONTROL DE CALIDAD ....................................................................................... 37
CAPÍTULO IV ..................................................................................................................... 38
4.EXPOSICIÓN DE RESULTADOS .................................................................................. 38
4.1.Resultados cuantitativos ................................................................................................. 38
DISCUSIÓN ......................................................................................................................... 51
CAPÍTULO V ...................................................................................................................... 54
Conclusiones y recomendaciones ......................................................................................... 54
viii
BIBLIOGRAFÍA .................................................................................................................. 56
Anexos .................................................................................................................................. 59
ix
INDICE DE TABLAS
págs.
Tabla 1. Clasificación de los plaguicidas según la OMS. ...................................................... 8
Tabla 2. Clasificación de los plaguicidas según su uso y composición química.................... 9
Tabla 3. Efectos positivos y negativos del uso de plaguicidas. ............................................ 10
Tabla 4. Tabla de significación clínica de la enzima colinesterasa sérica. ........................... 16
Tabla5. Interpretación clínica de valores de TGO y TGP……………………………….….21
Tabla 6. Matriz operacional de variables ............................................................................. 28
Tabla 7. Tabla de distribución de los trabajadores según la alteración de la
pseudocolinesterasa .............................................................................................................. 38
Tabla 8. Género de los trabajadores de la empresa florícola. ............................................... 40
Tabla 9. Tabla cruzada de los niveles de pseudocolinesterasa, con relación al sexo del
trabajador .............................................................................................................................. 41
Tabla 10. Determinación de los niveles de TGO, TGP y fosfatasa alcalina a los
trabajadores con resultados disminuidos de pseudocolinesterasa………………………….43
Tabla 11. Tabla de distribución de los trabajadores según el área de trabajo………………45
Tabla 12. Tabla cruzada de la actividad que realiza en la florícola, en relación con los
niveles de pseudocolinesterasa……………………………………………………………..47
Tabla 13. Distribución del equipo de protección personal según el área de trabajo..............49
.
x
INDICE DE ANEXOS
págs.
Anexo N°1. Hoja de encuesta ocupacional ......................................................................... 59
Anexo N°2. Hoja de recomendaciones para el paciente. ..................................................... 61
Anexo N°3. Hoja de recolección de datos…………………………………………………..62
Anexo N° 4. Características del equipo SINNOWWA BS-3100 ......................................... 63
Anexo N° 5. Determinación cuantitativa de colinesterasa (Che) en suero y plasma ........... 64
Anexo N° 6. Determinación cuantitativa de aspartato aminotransferasa GOT (AST). ....... 68
Anexo N° 7. Determinación cuantitativa de alanina aminotransferasa GPT (ALT) ............ 72
Anexo N° 8. Determinación cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL) ................................. 76
Anexo N° 9. Hoja de control interno………………………………………………………..82
Anexo N° 10. Hoja de control externo ................................................................................. 84
Anexo N°11. Oficio de aprobación del protocolo por el comité de bioética de la FCM……85
Anexo N°12. Presupuesto para la realización del proyecto ................................................. 86
xi
TITULO: “Determinación de la concentración sérica de la pseudocolinesterasa y
consecuencias funcionales hepáticas en trabajadores de una empresa florícola expuestos
directa e indirectamente a plaguicidas organofosforados período mayo 2018”.
Autor: Guanochanga Chicota Martha Ximena
Tutor: Dr. Acosta Coba Jaime Ernesto
RESUMEN
El presente estudio de tipo descriptivo y de campo, tuvo como objetivo principal
determinar la existencia algún daño funcional hepático en trabajadores que presenten niveles
bajos de colinesterasa sérica, mediante la cuantificación de las enzimas TGO, TGP y
Fosfatasa alcalina, donde se analizaron 109 muestras de sangre entre hombres y mujeres.
Para la cuantificación sérica de la pseudocolinesterasa y de las enzimas hepáticas se utilizó
el método cinético espectrofotométrico. El muestreo se realizó al inicio de la jornada laboral
y mediante una encuesta se valoró las características personales y de seguridad de cada
trabajador. Se obtuvieron valores relativamente bajos de pseudocolinesterasa en 11
trabajadores que corresponde al 10.1% de la población , en los cuales se pudo observar
niveles ligeramente altos de : TGO en el 45.5 % (5 trabajadores), de TGP en el 36.4 % (4
trabajadores) y de Fosfatasa Alcalina en el 27.2 % (3 trabajadores), estos valores enzimáticos
no pueden considerarse como un indicativo de hepatotoxicidad causada por plaguicidas
organofosforados debido a la existencia de múltiples enfermedades y factores que pueden
causar ligeras variaciones de las enzimas estudiadas.
PALABRAS CLAVE: PLAGUICIDA/ COLINESTERASA SÉRICA/ DAÑO HEPÁTICO/
ENZIMAS HEPÁTICAS/ FLORÍCOLA
xii
TITLE: “Determination of serum concentration of pseudo-cholinesterase and hepatic
functional consequences in workers in a floricultural company, directly or indirectly exposed
to organo phosphorylated pesticides, during May 2018”.
Author: Guanochanga Chicota Martha Ximena
Tutor: Dr. Acosta Coba Jaime Ernesto
ABSTRACT
This descriptive and field study was mostly intended to determine the existence of a
hepatic functional damage in workers with low levels of serum cholinesterase, through
quantification of TGO, TGP enzymes and alkaline phosphatase, where 109 samples of blood
taken from men and women were analyzed. For the serum quantification of pseudo-
cholinesterase and hepatic enzymes, the kinetic spectrophotometric method was used.
Sampling was conducted at the beginning of the labor journey. Personal characteristics and
security of each worker were assessed through a survey. Relatively low values of pseudo-
cholinesterase were found in 11 workers, which corresponds to 10.1% of the population,
where relatively high values of TGO were found in 45.5 % (5 workers), TGP in 36.4 % (4
workers) and alkaline phosphatase in 27.2 % (3 workers). Enzymatic values cannot be
considered an indication of hepatotoxicity caused by organo-phosphorylated pesticides due
to the existence of multiple diseases and factors that can cause mild variations in enzyme
values.
KEYWORDS: PESTICIDE / SERUM CHOLINESTERASE / HEPATIC DAMAGE /
HEPATIC ENZYMES/ FLORICULTURAL COMPANY.
I CERTIFY that the above and foregoing is a true and correct translation of the original
document in Spanish.
__________________
Ernesto Andino
Certified Translator
IC: 1703852317
1
INTRODUCCIÓN
Los plaguicidas, cuando son bien empleados, pueden ser importantes para la producción
de muchos cultivos, así como para la protección de la salud humana. El control exitoso de
las plagas y de los vectores se funda en productos plaguicidas eficaces de calidad aceptable
que no causan ningún efecto indeseado cuando se lo utiliza como está recomendado (1).
La preocupación de aumentar y preservar sus cosechas ha acompañado al hombre desde
el momento de su asentamiento como agricultor, para lo cual ha emprendido una lucha contra
las distintas plagas que amenazan los cultivos mediante el uso de plaguicidas, lo que ha
generado una gran cantidad de sustancias químicas de alta agresividad contra los organismos
dañinos, pero que también producen efectos sobre el hombre y equilibrio del ecosistema. A
nivel mundial las producciones de plaguicidas orgánicos sintéticos han ido en aumento, con
el propósito de combatir diversas plagas para así poder asegurar la productividad del cultivo
y la inversión económica (2).
Se estima que del 30% al 45% de las cosechas a nivel mundial se salvan por el uso de
estos productos (3).
Según la OMS el empleo de dichos plaguicidas conlleva el riesgo de consecuencias
perjudiciales para la salud de los trabajadores, de los consumidores y el ambiente, bien sea
por exposición directa o indirecta, pudiendo producir intoxicaciones agudas, subagudas,
crónicas y hasta la muerte. Además de ocasionar, la contaminación del agua, de los suelos,
del aire y de los alimentos.
Los compuestos organofosforados son los responsables de gran parte de las intoxicaciones
por plaguicidas que tiene lugar en poblaciones laboralmente expuesta, debido a su gran
liposolubilidad, lo que facilita su ingreso por la piel; y por inhalación durante su manejo. Su
2
principal mecanismo de acción toxicológica es su poder de inhibición irreversible de la
colinesterasa, enzima humana que cataliza la hidrólisis de ésteres de la neurotransmisora
colina, por lo que la determinación de la actividad de esta enzima es un indicador de la
exposición a estos compuestos (4).
El hígado, que es el encargado de metabolizar a la gran mayoría de las sustancias que
ingresan al organismo, no está exento de los efectos tóxicos de los plaguicidas y por
consiguiente sus funciones se van a ver alteradas (5).
3
CAPÍTULO I
1. EL PROBLEMA
1.1. Planteamiento del problema
Los plaguicidas son una de las familias de productos químicos más ampliamente
empleadas por el hombre. Se han usado sobre todo para combatir las acciones dañinas de las
plagas sobre las cosechas. Todos ellos son biocidas lo que implica, habitualmente una alta
toxicidad humana que ha sido motivo de preocupación desde mitad del siglo XX debido su
amplio e indiscriminado empleo (6).
El efecto de los plaguicidas sobre la salud humana, animal y ambiental es preocupación
de la comunidad científica desde hace mucho tiempo, ya que el mal manejo de las prácticas
de aplicación de agroquímicos puede ocasionar serios problemas a la salud de la población
ocupacionalmente expuesta (1).
Las intoxicaciones agudas y complicaciones crónicas producidas por los plaguicidas
organofosforados constituyen en la actualidad un importante problema de salud pública. (7)
Según la OMS se producen anualmente más de tres millones de intoxicaciones por
plaguicidas y la mayoría son causadas por organofosforados. Los organofosforados son
absorbidos por las vías cutáneo mucosa, respiratoria y digestiva produciendo la inhibición de
la acetil-colinesterasa, enzima responsable de la interrupción de la actividad biológica de la
neurotransmisora acetilcolina (6).
Dentro de las colinesterasas se incluyen la acetilcolinesterasa o colinesterasa
eritrocítica y la acilcolina-acilhidrolasa o colinesterasa plasmática. La enzima plasmática
tiene importancia clínica ya sea en la detección de pacientes con disfunción hepática o
intoxicación con plaguicidas (7).
4
El hígado, que tiene como una de sus funciones degradar de sustancias ajenas al
organismo es considerado como un órgano blanco primario en casos de exposición crónica y
aguda a plaguicidas organofosforados, por consecuencia las variaciones en las funciones del
hígado pueden ser los indicadores más selectivos de reacciones tóxicas inducidas por la
exposición (5).
1.2.Formulación del problema
¿Cuáles son las alteraciones de la concentración sérica de la pseudocolinesterasa y las
consecuencias funcionales hepáticas en trabajadores de una empresa florícola expuestos
directa e indirectamente a plaguicidas organofosforados período mayo 2018?
1.3.Preguntas directrices
¿Cuál es el nivel de pseudocolinesterasa de los trabajadores expuestos a plaguicidas
organofosforados?
¿Cuál es el nivel de TGO – TGP y Fosfatasa Alcalina como marcador biológico de un
problema funcional hepático en trabajadores expuestos a plaguicidas organofosforados?
¿En qué área de trabajo existen alteraciones en los niveles de pseudocolinesterasa y de
enzimas hepáticas TGO, TGP Y Fosfatasa Alcalina?
5
1.4. OBJETIVOS
1.4.1. Objetivo general.
Determinar las alteraciones de la concentración sérica de la pseudocolinesterasa y
consecuencias funcionales hepáticas en trabajadores de una empresa florícola expuestos
directa e indirectamente a plaguicidas organofosforados período mayo 2018.
1.4.2. Objetivos específicos
1. Cuantificar los niveles de pseudocolinesterasa de los trabajadores expuestos de
manera directa e indirecta a plaguicidas organofosforados.
2. Observar que género presenta mayor alteración de la pseudocolinesterasa.
3. Determinar la existencia de un problema funcional hepático en los trabajadores
con pseudocolinesterasa alterada mediante los marcadores biológicos TGO-TGP
y fosfatasa alcalina.
4. Identificar en que área de trabajo se encuentran la mayor cantidad de individuos
que presentan alteraciones en los niveles de pseudocolinesterasa, TGO, TGP Y
Fosfatasa Alcalina.
6
1.5. JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA
La presente investigación es importante ya que la exposición a plaguicidas es un problema
de salud pública, por la gran cantidad de población expuesta. El impacto en la salud de los
agricultores se debe principalmente a la toxicidad de estos productos y las prácticas
inadecuadas en el manejo durante y después de su uso (8).
De acuerdo al grado de exposición a plaguicidas organofosforados el nivel de
colinesterasa sérica varía y siendo el hígado el encargado de eliminar tóxicos algunas de sus
funciones se pueden ver afectadas (5).
Surge así la necesidad de evaluar los niveles de la actividad de colinesterasa sérica y de
determinar otros marcadores biológicos que no representen altos costos económicos y que
además nos den un indicio del daño ocasionado por los plaguicidas a los hepatocitos como
lo son los marcadores enzimáticos TGO, TGP y fosfatasa alcalina.
Este estudio contribuye también con información que permitirá realizar programas
preventivos de vigilancia a la salud en los trabajadores expuestos a plaguicidas
organofosforados.
7
CAPÍTULO II
2. MARCO TEÓRICO
2.1. Reseña histórica
Desde los albores de la civilización el hombre ha luchado continuamente para mejorar sus
condiciones de vida. En su afán por producir las provisiones necesarias de alimentos, ha
combatido los estragos ocasionados por plagas de insectos y por las enfermedades de las
cosechas (9).
En los últimos cinco decenios, la lucha contra las plagas se ha basado esencialmente en el
uso masivo de plaguicidas sintéticos. En el área agrícola existe una extensa variedad de
plagas; más de 1500 enfermedades son causadas por aproximadamente 50000 especies de
hongos; más de 10000 especies de insectos constituyen plagas. Además, existen
aproximadamente 30000 especies de maleza, de las cuales unas 1800 son causa de grandes
pérdidas económicas (10).
En Ecuador, la utilización de plaguicidas empieza en los años 50. La demanda hasta el
año 1993 fue satisfecha exclusivamente con base a las importaciones, y es a partir de este
año en que se inicia la preparación de varios plaguicidas a nivel nacional. La cantidad de
plaguicidas importados ha tenido una tendencia creciente. A la presente fecha, en nuestro
país, existen 6 plantas que elaboran ingredientes activos, 30 formuladores de plaguicidas y
182 importadoras.
Según el Instituto Nacional de Estadísticas y Censos (INEC) en Ecuador se siembran
2'595.075 ha. de las cuales 1'191.131 hectáreas son tratadas con plaguicidas, existiendo
cultivos donde un alto porcentaje de productores (66 a 100%) utilizan regularmente estas
sustancias.
8
De igual manera, el número de casos de intoxicaciones también ha aumentado de manera
alarmante. En nuestro país, la notificación obligatoria de casos de intoxicaciones agudas por
plaguicidas realizadas por las unidades del Ministerio de Salud Pública (MSP) se inicia en
1978 con la implementación del Sistema de Vigilancia Epidemiológica.
2.2. Plaguicidas
La FAO/OMS define el termino plaguicida como “cualquier sustancia o mezcla de ellas
utilizada para prevenir o controlar o animales indeseables e incluso aquellas otras destinadas
a utilizarse como regulador del crecimiento de la planta, defoliante o desecante” (11).
Son sustancias usadas para controlar a los organismos que pueden afectar adversamente a
la salud pública, o a los organismos que atacan al alimento y otros materiales esenciales para
los seres humanos (12).
2.3. Clasificación de los plaguicidas
Tabla 1. Clasificación de los plaguicidas según la OMS.
Clase Texto
Ia
Ib
II
III
Sumamente peligroso
Muy peligroso
Moderadamente peligroso
Ligeramente peligroso
Fuente: Prevención de los riesgos para la salud derivados del
uso de plaguicidas en la agricultura, Fait Antonella, OMS 2004.
9
Tabla 2. Clasificación de los plaguicidas según su uso y composición química.
Insecticidas Herbicidas Fungicidas Rodenticidas
Organofosforados
Carbamatos
Organoclorados
Piretrinas y
piretroides
Compuestos
arsenicales y otros
compuestos
Compuestos
clorofenicos
Pentaclorofenol
Compuestos
nitrofenolicos
Paraquat,diquiat
Compuestos
arsenicales y otros
compuestos
Bencenos
sustituidos
Tiocarbamatos
Etileno bis
ditiocarbonato
Tioftalimidas
Compuestos
organometálicos
Inorgánicos
Cumarinas
Convulsivos
Colecalciferol
Fuente: Prevención de los riesgos para la salud derivados del uso de plaguicidas en la
agricultura, Fait Antonella, OMS 2004.
2.4. Efectos del uso de plaguicidas
A pesar de sus muchos méritos, los plaguicidas son algunas de las sustancias más tóxicas,
ambientalmente estables y móviles en el medio ambiente. Las cantidades de plaguicidas en
una región en particular dependen en gran medida de la intensidad de la aplicación y de los
tipos de cultivos.
Los plaguicidas tienen muchas ventajas, pero también hacen mucho daño al medio
ambiente y al hombre, por lo cual es importante tener en cuenta los efectos positivos y
negativos de los plaguicidas empleados, para lograr la selectividad total de sus acciones.
10
Tabla 3. Efectos positivos y negativos del uso de plaguicidas.
Positivos Negativos
Limitación o eliminación de muchas
enfermedades infecciosas y epidemias
transmitidas por insectos en los animales de
granja y aves.
Amenaza directa para la salud humana y
la vida: pueden ser cancerígenos,
neurotóxicos, y pueden alterar la regulación
hormonal y enzimática.
Mayores rendimientos de los cultivos
comestibles por reducción de las pérdidas
de alimentos durante el almacenamiento y
transporte.
Destrucción de todos los organismos
útiles que habitan en un área determinada.
Incrementar la producción de leche,
carne y cuero.
Resistencia d loa patógenos y las plagas
a los vennos
Mejora en la higiene personal después de
la destrucción y muerte de los insectos
(pulgas piojos y hormigas).
Contaminación de los cuerpos de agua y
suelos por plaguicidas arrastrados por el
viento o lixiviados por las lluvias
torrenciales.
Fuente: Prevención de los riesgos para la salud derivados del uso de plaguicidas en la
agricultura, Fait Antonella, OMS 2004.
2.5. Plaguicidas inhibidores de la colinesterasa
Se utilizan principalmente en la agricultura, para el control de insectos de cuerpo blando.
Están sustancias están formadas por compuestos de dos grupos químicos distintos: los
derivados organofosforados y carbamatos. En ambos grupos hay un amplio rango de
toxicidad (13).
2.5.1. Plaguicidas Carbamatos
Son derivados del ácido carbámico, hay algunos utilizados con fines medicinales y otros
utilizados como plaguicidas.
11
Los carbamatos también tienen buena absorción por la piel, mucosa inhalación he
ingestión. La mayoría de compuestos se metabolizan en el hígado y en la pared intestinal.,
no atraviesan con facilidad el sistema nervioso central (14).
Tienen en común las siguientes características:
Son biodegradables. Se hidrolizan fácilmente, aunque la foto degradación por
medio de los rayos solares es el principal mecanismo para desaparecer del
ecosistema.
No bioacumulables. Algunos carbamatos que tienen radicales aromáticos como
grupo sustituyente en la molécula tienen coeficiente de partición altos, y por lo
tanto son liposolubles.
Son de mediana a baja toxicidad.
Son inhibidores transitorios de la enzima colinesterasa (15).
2.5.2. Plaguicidas Organofosforados
Son esteres derivados de los ácidos fosfórico, fosfónico, fosforotionico o fosfonotioico.
Son sustancias lipofílicas que tienen una excelente absorción por vía oral, pulmonar, dérmica,
mucosa y conjuntival; aunque su vida media va del rango de minutos a horas; algunos
organofosforados pueden acumularse en tejido adiposo permitiendo redistribuirse incluso por
encima de las 48 h. Pueden atravesar el sistema nervioso central generando efectos directos
ahí. Varias enzimas hepáticas y de la mucosa intestinal están encargadas de su metabolismo
(14).
Su potencialidad tóxica sobre el ser humano es elevada, produciéndose gran número de
intoxicaciones en los procesos de fumigación y en los manipuladores de las fábricas (16).
La inactivación de la colinesterasa por los pesticidas inhibidores de la misma, permite la
acumulación de grandes cantidades de acetilcolina, con los efectos resultantes diseminados
que se divide en cuatro categorías:
Potencia de la actividad parasimpática pos-ganglionar, se afectan las siguientes
estructuras: pupila (miosis), músculo intestinal (estimulación), glándulas salivales y
sudoríparas (estimuladas), músculos bronquiales (constricción), vejiga (contracción),
12
nodo sinusal del corazón (reducción de su actividad) y nodo auriculoventricular
(bloqueo).
Despolarización persistente del musculo esquelético, que produce fasciculación que
se continúa con bloqueo neuromuscular y parálisis.
Estimulación inicial seguida de depresión de las células del sistema nervioso central,
que conduce a inhibición del centro respiratorio (depresión de la descarga frénica) y
convulsiones de origen central.
Estimulación o bloqueo ganglionar variable, con aumento o reducción en la presión
arterial, así como dilatación o constricción de las pupilas (13).
2.6. Vías de contaminación
a) Vía digestiva. - generalmente la más utilizada en envenenamiento de tipo suicida.
La absorción de las sustancias toxicas por esta vía está influenciada por la
presencia o no de alimentos a nivel del estómago y Ph de la sustancia tóxica.
b) Vía respiratoria. - Con frecuencia es característica de las intoxicaciones
laborales, posee una gran rapidez de acción, cuando el toxico es llevado con
suficiente presión y dispersión hasta el alveolo pulmonar.
c) Piel. - otra vía también vinculada a las actividades laborales; y en especial donde
cuando el agricultor no utiliza la ropa adecuada para realizar las actividades de
fumigación. El ingreso toxico por la piel es factible cuando esta se encuentra
lesionada o el plaguicida tiene afinidad por las grasas cutáneas.
d) Conjuntiva. - esta vía es típica de situaciones accidentales que dada sus
características presentan sus lesiones de manera localizada (17).
2.7. Toxicocinética
La mayoría de estos productos se excretan en la orina casi por completo en forma de
productos de desintegración metabólica. Antes de ser excretados permanecen unidos a las
proteínas de la sangre y los tejidos, en su metabolismo intervienen enzimas hidrolíticas y
oxidativas distribuidas en los tejidos.
13
2.8. Mecanismo fisiopatológico
a) Absorción de los organofosforados: Pueden penetrar al organismo por
inhalación, ingestión y a través de la piel intacta, debido a su alta liposolubilidad,
característica que hace que pasen las barreras biológicas más fácil, y por su
volatilidad facilitando su inhalación.
b) Metabolismo: Una vez absorbidos al ponerse en contacto con la piel intacta y las
mucosas (conjuntival, oral, nasal), se distribuyen en el organismo y van a sufrir
procesos normales de biotransformación, los cuales pueden agruparse en la
siguiente forma:
Reacciones generales de activación. - Consisten principalmente en reacciones de
oxidación catalizadas por oxidasas microsòmicas, dependiendo del
NADPH(hígado), por medio de las cuales el compuesto original se transforma en
otro más toxico; se denominan reacciones de “oxonizaciòn”.
Reacciones de destoxificaciòn. - Son reacciones hidrolíticas mediante las cuales
hay ruptura de un enlace en el éter del fósforo, produciéndose sustancias de menor
toxicidad y mayor solubilidad, lo cual facilita la excreción.
Reacciones de conjugación. - Se forman igualmente compuestos de fácil
excreción (15).
2.9. Mecanismo de acción
Los organofosforados desarrollan su toxicidad a través de la fosforilación de la enzima
acetilcolinesterasa en las terminaciones nerviosas. Los pesticidas organofosforados
reaccionan con la zona esterásica de la enzima colinesterasa formando una unión estable que,
si no se rompe mediante el tratamiento, se hace irreversible, quedando la enzima inhabilitada
para su función normal.
La pérdida de la función enzimática permite la acumulación de acetilcolina en las uniones
colinérgicas neuroefectoras (efectos muscarínicos), en las uniones mioneurales del esqueleto
y los ganglios autónomos (efectos nicotínicos) y en el sistema nervioso central (SNC) (20).
14
La acetilcolina es un neurotransmisor que interactúa con dos tipos de receptores
postsinápticos (nicotínicos y muscarínicos), y es responsable de la transmisión fisiológica del
impulso nervioso de:
a. Las fibras colinérgicas postganglionares simpáticas y parasimpáticas a las células
efectoras (receptores muscarínicos).
b. Las neuronas preganglionares a las postganglionares en los sistemas parasimpáticos y
simpáticos (receptores nicotínicos).
c. Los nervios motores al músculo esquelético (receptores nicotínicos).
d. Algunas terminaciones nerviosas en SNC.
Una vez es liberada y ha interactuado con su receptor, la acetilcolina es destruida mediante
la acción de la enzima acetilcolinesterasa, la cual reacciona con el neurotransmisor
hidrolizándolo y produciendo colina y ácido acético, que entran al pool metabólico
presináptico para ser utilizados nuevamente (21).
2.10. Colinesterasa
Son enzimas imprescindibles para el correcto funcionamiento del sistema nervioso
humano ya que inactiva a la acetilcolina lo que impide su acumulación y permite la
transmisión sincronizada de los impulsos nerviosos.
La transmisión del impulso nervioso se disminuye gracias a la inactivación de la
acetilcolina realizada por la acetilcolinesterasa. Este proceso es sumamente rápido, se estima
que en un milisegundo esta enzima puede hidrolizar una molécula de acetilcolina en ácido
acético y colina. (12)
El proceso es el siguiente:
Acetilcolina + acetilcolinesterasa → colina + acetilcolinesterasa acetilada.
Acetilcolinesterasa acetilada + H2O → acetilcolinesterasa + ácido acético + colina.
2.10.1. Tipos de colinesterasas
a) Colinesterasa verdadera, eritrocitaria, específica o de tipo e.- se encarga de
hidrolizar la acetilcolina en la placa motora principal. Se encuentra localizada
15
exclusivamente en las neuronas, en las sinapsis ganglionares de la estructura
neuromuscular del organismo y en los eritrocitos.
b) La pseudocolinesterasa, colinesterasa sérica, butirilcolinesterasa, o de tipo s.-
está presente en casi todos los ejidos (principalmente en el hígado) y en el plasma,
pero en poca concentración en el sistema nervioso central y periférico. Su
concentración se ve disminuida cuando los hepatocitos han sufrido algún tipo de
alteración.
La principal diferencia entre las dos variantes de colinesterasa es que la
acetilcolinesterasa es el marcador biológico de elección para diagnosticar una intoxicación
crónica y la butirilcolinesterasa para intoxicaciones agudas (12).
2.10.2. Variaciones en la actividad de las colinesterasas.
Pueden variar en una persona en intervalos de tiempo y existen variaciones según el sexo;
las colinesterasas eritrocítica y las plasmáticas varían independientemente, aun en ausencia
de inhibidores exógenos (22).
Las colinesterasas plasmáticas disminuyen en los periodos menstruales, en hepatitis,
desnutrición, enfermedades crónicas debilitantes, en las deficiencias de tiamina y de
proteínas.
En los casos de infección tetánica, las cifras bajan tanto o más que en las intoxicaciones
por inhibidores (17).
Valores de referencia
Hombres: 5100-11700 U/L
Mujeres: 4000-12600 U/L (10)
16
Tabla 4. Tabla de significación clínica de la enzima colinesterasa sérica.
DISMINUCION AUMENTO
Enfermedades no infecciosas: anemias
crónicas, carcinoma, desnutrición,
enfermedad trofoblástica, enfermedad
del colágeno, enfermedades y cáncer
hepáticos, epilepsia, fiebre reumática,
infarto del miocardio, mixedema,
uremia
Enfermedad infecciosa: hepatitis aguda,
infecciones agudas, síndrome de
choque toxico, tétanos, tuberculosis.
Condición: diálisis renal, hiperpixemia,
quemaduras.
Tratamiento: anticonceptivos orales,
estrógenos, quemaduras,
ciclofosfamida, clorpromacina, drogas
anti cáncer, plamasféresis.
Otros: rayos x
Alcoholismo
Ansiedad
Artritis
Asma bronquial
Bocio nodular
Diabetes
Esquizofrenia
Hiperlipemia
Hipertensión arterial
Nefrosis
Obesidad
Soriasis
Tirotoxicosis
Fuente: Tabla de significación clínica de la enzima colinesterasa sérica, disponible en
ttp://www.redalyc.org/articulo.oa?id=180513853002
2.11. Hígado
El hígado es el órgano interno de mayor tamaño del cuerpo humano, es de color marrón,
y presenta una superficie externa lisa. Tiene un peso aproximado de 1500 g, lo que supone
alrededor del 2.5 % del peso corporal en una persona adulta.
El hígado se localiza en la cavidad abdominal en el cuadrante superior derecho del
abdomen, es protegido por la caja torácica y el diafragma, se sitúa por debajo de las costillas
17
7ma y 11va del lado derecho y atraviesa la línea media hacia el pezón izquierdo, ocupando la
mayor parte del hipocondrio derecho. Este se mueve con los desplazamientos del diafragma,
esta movilidad facilita su palpación (23).
2.11.1. Anatomía
El hígado se compone de dos lóbulos, el lóbulo derecho, mayor y el izquierdo, menor que
se unen en la fosa cística. El lóbulo derecho presenta segmentos menores en su cara inferior,
los lóbulos caudados y cuadrado. La vesícula biliar se localiza en la cara inferior, el afosa
cística, y normalmente se extiende algo más allá del borde inferior del hígado.
El hígado dispone de una doble perfusión snguinea:1) arteria hepática, rama del eje celiaco
y 2) la vena porta, formada por la convergencia de las venas esplénicas y mesentéricas
superior.
Las venas hepáticas drenan la vena cava inferior que se encuentra parcialmente rodeada
por la cara posterior del hígado. Los vasos linfáticos hepáticos drenan fundamentalmente a
los ganglios linfáticos del hilio hepático y del tronco celíaco.
El conducto hepático común, formado por la unión de los conductos hepáticos derecho e
izquierdo, recibe el conducto cístico de la vesícula para formar el conducto colédoco. El
colédoco se une con el conducto pancreático justo antes de desembocar en el duodeno;
termina en la ampolla de Vater, donde su luz se encuentra protegida por el esfínter de Oddi.
2.11.2. Histología
El lobulillo hepático es una estructura poliédrica que se dibuja clásicamente como un
hexágono. Las triadas portales, situadas en la periferia en los ángulos del polígono, se
denominan así porque contiene ramas intrahepáticas de 1) los conductos biliares, 2) la arteria
hepática y 3) la vena porta.
Los espacios porta colágenos están rodeados de una capa circunferencial adyacente de
hepatocitos, denominada placa limitante. La vena centro lobulillar reside en el centro del
lobulillo. Desde ellas se irradian placas unicelulares de hepatocitos que se extienden hasta el
perímetro del lobulillo.
Entre las placas de los lobulillos se encuentran los sinusoides hepáticas, revestidos por
células endoteliales, células de Kupffer y células estrelladas (21).
18
a) Células endoteliales. - El sinusoide hepática este tapizado por una lámina de
células endoteliales, penetrada por numerosos orificios. El resultado es una
estructura parecida a un tamiz que proporciona una comunicación libre entre la luz
sinusoidal y el espacio de Disse.
b) Células de Kupffer. - Se sitúan bien en las lagunas entre las células endoteliales
adyacentes o en sus superficies, pertenecen al sistema monocítico-macrófago
derivado de la medula ósea. Las células de Kupffer activadas también liberan una
serie de citosinas, entre otras el factor de necrosis tumoral, las interleucinas, los
interferones y los factores de transformación y crecimiento α y β.
c) Células estrelladas. - Realizan una función especial de almacenamiento, se
dispersan bajo las células endoteliales en el espacio de Disse, también secretan
componentes de la matriz extracelular, entre otros, diversos colágenos, laminina y
proteoglucanos (24).
2.11.3. Funciones hepáticas
a) Metabolismos de los hidratos de carbono. El hígado es especialmente
importante para mantener los niveles normales de glucosa en la sangre.
b) Metabolismo de los lípidos. Los hepatocitos almacenan algunos triglicéridos;
degradan ácidos para generar ATP; sintetizan lipoproteínas, que transportan ácidos
grasos, triglicéridos y colesterol hacia las células del organismo y desde estas;
sintetizan colesterol, y usan el colesterol para formar sales biliares.
c) Metabolismo proteíco. Los hepatocitos desaminan los aminoácidos de manera
que pueden utilizarse en la producción de ATP o convertirlos en hidratos de
carbono o grasas. El amoniaco NH3 toxicoresultante se convierte luego en un
compuesto menos toxico, la urea, que se excreta en la orina. Los hepatocitos
también sintetizan la mayoría de proteínas plasmáticas, como la alfa y beta
globulinas, la albumina, la protrombina y el fibrinógeno.
d) Procesamiento de fármacos y hormonas. El hígado puede detoxificar sustancias
como el alcohol y excretar fármacos como la penicilina, eritromicina y
19
sulfonamidas en la bilis. Puede también altera químicamente o excretar hormonas
tiroideas y hormonas esteroideas, como los estrógenos y la aldosterona.
e) Excreción de bilirrubina. La bilirrubina es captada por el hígado desde la sangre
y se secreta con la bilis. La mayor parte de la bilis se metaboliza en el intestino
delgado por las bacterias y eliminada junto con las heces.
f) Síntesis de sales biliares. Las sales biliares se usan en el intestino delgado para
emulsionar y absorber los lípidos.
g) Almacenamiento. El hígado es el sitio primario de almacenamiento de algunas
vitaminas (A, B12, D, E y K) y minerales (hierro y cobre), que se liberan del
hígado cuando se requieren en alguna parte del cuerpo.
h) Fagocitosis. Las células retículo endoteliales estrelladas del hígado fagocitan los
glóbulos blancos, los glóbulos rojos envejecidos, algunas bacterias.
i) Activación de la vitamina D. la piel, el hígado y los riñones participan en la
síntesis de la forma activa de la vitamina D (25).
2.12. Captación y concentración
Los fármacos lipófilos y los contaminantes ambientales penetran fácilmente en los
hepatocitos porque el epitelio poroso de las sinusoides favorece en contacto íntimo de las
moléculas circulantes con los hepatocitos. La abundancia de membranas en el hígado
favorece la concentración de los productos lipófilos, el hígado extrae rápidamente de la
sangre otros agentes tóxicos porque constituyen el sustrato de los transportadores
sinusoidales (26).
2.13. Tipos de toxicidad hepática
En términos generales la toxicidad hepática es la inflamación del hígado causado por
sustancias que fueron inhaladas, inoculadas o ingeridas, estas sustancias se dividen en dos
categorías:
Hepatotoxicidad intrínseca, dependiente de la dosis o predecible. Aquella inducida
por hepatotoxinas que producen lesiones en todos los individuos expuestos por
20
encima de una cierta concentración. Es la que se encuentra casi exclusivamente
entre las sustancias químicas laborales, ambientales y domésticas.
Hepatotoxicidad no dependiente de la dosis o impredecible. Esta produce daño
hepático sólo en algunos individuos sin que exista aparente correlación con la dosis
administrada (27).
2.14. Pruebas bioquímicas de función hepática
Las pruebas de función hepática son aquellas que permiten determinar la capacidad global
del hígado para llevar a efecto sus funciones de destoxificaciòn, síntesis y metabolismo. Este
término incluye a todas las pruebas que mide las enzimas hepáticas, las cuales informan
acerca de aspectos parciales de daño en los hepatocitos. (28)
2.14.1. Pruebas indicadoras de necrosis
Transaminasas
Son enzimas que catalizan las reacciones químicas que se realizan en todas las células
vivas y son responsables de los procesos químicos esenciales para la vida. Las transaminasas
aspartato aminotransferasa (AST-TGO) y alanino aminotransferasa (ALT-TGP), están
implicadas en la interconversion de aminoácidos y cetoácidos y, por tanto, se requieren para
el metabolismo del nitrógeno y de los hidratos de carbono. Ambas transaminasas están
localizadas en las mitocondrias; la ALT se encuentra también en el citoplasma.
La TGP es más específica de daño hepático debido a que la primera se localiza casi
exclusivamente en el citosol del hepatocito, mientras que la TGO se encuentra en el citosol,
mitocondria, el corazón, músculo-esquelético, riñones, cerebro, páncreas, pulmón, eritrocitos
y leucocitos (29).
Alanina aminotransferasa o transaminasa glutámica pirúvica (ALT o TGP)
Es una enzima que participa en la transferencia de grupos amino formando el piruvato. Se
encuentra presente en el citosol de las células hepáticas, lo que la hace más específica que la
aspartato aminotransferasa, siendo su actividad 3000 veces aproximadamente mayor que en
el suero.
21
Sus niveles se incrementan de manera significativa en una necrosis celular aguda y en
menor forma en el transcurso destructivo crónico de los hepatocitos.
A pesar de estar presente en el músculo esquelético, miocardio y riñones se la considera
como una enzima hígado-específica (29).
Aspartato aminotransferasa o transaminasa glutámica oxalacética (AST o TGO)
Es un enzima de localización intracelular que existe en dos formas, una mitocondrial que
es la más abundante y la otra citoplasmática, su actividad sérica en condiciones normales es
baja o nula.
Se distribuye ampliamente en los tejidos corporales y su concentración es bastante elevada
en tejidos con actividad metabólica alta, la concentración de la enzima se encuentra en orden
descendente en los siguientes tejidos: cardíaco, hepático, renal músculo-esquelético y
eritrocitos, la enzima existe en las células del pulmón, cerebro y páncreas, pero en
concentraciones menores que en el suero sanguíneo.
Debido a su amplia distribución se considera una enzima inespecífica de tejido o de
órgano y por tanto es más útil cuando su concentración sérica se compara con los valores de
varias enzimas séricas diferentes (28).
TABLA 5. Interpretación clínica de valores de TGO y TGP.
Fuente: Chediak, R. Enzimología Clínica. Quito; 1980.
DETERMINACIÓN DIAGNOSTICO
TGO negativo No hay infarto, ni afección hepática con lesión
parenquimatosa reciente.
TGO positivo Infarto cardiaco o afección hepática.
TGO positivo y TGP negativo Infarto cardiaco.
TGO positivo y TGP positivo
Afectación hepática (rara vez infarto cardiaco con
grave insuficiencia cardiaca secundaria y
congestión hepática).
TGP negativo No hay afección hepática.
22
Valores de referencia:
TGP:
Hombres: 10 – 50 U/L
Mujeres: 10 – 35 U/L (29).
TGO:
Hombres: 10 – 40 U/L
Mujeres: 10 – 32 U/L (29).
2.14.2. Pruebas indicadoras de colestasis
Fosfatasa alcalina (ALP)
Al igual que las transaminasas, la fosfatasa alcalina también sirve para evaluar la
integridad de los hepatocitos. Se desconoce su función. Se halla presente en las células del
trofoblasto placentario, osteocitos, epitelio biliar y hepatocitos. Por tales razones el
incremento de esta enzima se puede dar en el último tercio del embarazo, enfermedades
intestinales, óseas y hepatobiliares o en el crecimiento debido a la alta actividad osteoblástica.
En patologías hepatobiliares el aumento de la actividad sérica de la fosfatasa alcalina se
asocia con problemas de secreción u obstrucción biliar.
Valores de referencia:
El rango normal es de 50 a 260 UI/L, aunque estos valores pueden variar con la edad y el
sexo de la persona (28).
2.15. FUNDAMENTACIÓN LEGAL
Esta investigación tiene su sustento legal en la Constitución de la República del Ecuador
el cual responde al cumplimiento de las normas jurídicas – legales organismos oficiales de la
inspección, control y vigilancia de la educación y de carácter institucional.
23
2.15.1. MARCO LEGAL GUBERNAMENTAL
CONSTITUCIÓN DEL ECUADOR
TÍTULO II-CAPÍTULO SEXTO
Sección tercera
Formas de trabajo y su retribución
Art. 326 numeral 5 establece que: Toda persona tendrá derecho a desarrollar sus labores
en un ambiente adecuado y propicio, que garantice su salud, integridad, seguridad, higiene y
bienestar. (30)
CÓDIGO LABORAL
CAPITULO III
De las enfermedades profesionales
Art. 410.- Obligaciones respecto de la prevención de riesgos. - Los empleadores están
obligados a asegurar a sus trabajadores condiciones de trabajo que no presenten peligro para
su salud o su vida. Los trabajadores están obligados a acatar las medidas de prevención,
seguridad e higiene determinadas en los reglamentos y facilitadas por el empleador. Su
omisión constituye justa causa para la terminación del contrato de trabajo.
CONSTITUCIÓN DEL ECUADOR
TÍTULO VII-CAPÍTULO PRIMERO
Sección primera
Educación
Art. 343: El sistema nacional de educación tendrá como finalidad el desarrollo de
capacidades y potencialidades individuales y colectivas de la población, que posibiliten el
aprendizaje, y la generación y utilización de conocimientos, técnicas, saberes, artes y cultura.
El sistema tendrá como centro al sujeto que aprende, y funcionará de manera flexible y
dinámica, incluyente, eficaz y eficiente (30).
Art. 350: El sistema de educación superior tiene como finalidad la formación académica
y profesional con visión científica y humanista; la investigación científica y tecnológica; la
24
innovación, promoción, desarrollo y difusión de los saberes y las culturas; la construcción de
soluciones para los problemas del país, en relación con los objetivos del régimen de
desarrollo (30).
Sección segunda
Salud
Art. 358: El sistema nacional de salud tendrá por finalidad el desarrollo, protección y
recuperación de las capacidades y potencialidades para una vida saludable e integral, tanto
individual como colectiva, y reconocerá la diversidad social y cultural. El sistema se guiará
por los principios generales del sistema nacional de inclusión y equidad social, y por los de
bioética, suficiencia e interculturalidad, con enfoque de género y generacional (30).
Art. 360.- El sistema garantizará, a través de las instituciones que lo conforman, la
promoción de la salud, prevención y atención integral, familiar y comunitaria, con base en la
atención primaria de salud; articulará los diferentes niveles de atención; y promoverá la
complementariedad con las medicinas ancestrales y alternativas (30).
Sección octava
Ciencia, tecnología, innovación y saberes ancestrales
Art. 385: El sistema nacional de ciencia, tecnología, innovación y saberes ancestrales, en
el marco del respeto al ambiente, la naturaleza, la vida, las culturas y la soberanía, tendrá
como finalidad:
Generar, adaptar y difundir conocimientos científicos y tecnológicos.
Recuperar, fortalecer y potenciar los saberes ancestrales.
Desarrollar tecnologías e innovaciones que impulsen la producción nacional,
eleven la eficiencia y productividad, mejoren la calidad de vida y contribuyan a la
realización del buen vivir (30).
La constitución de la República del Ecuador elaborada por la Asamblea Constituyente en
el año 2008, establece leyes debidamente respaldadas que promueven el desarrollo de
trabajos de investigación encaminados hacia la obtención de nuevos conocimientos que
favorezcan a la sociedad en general para el progreso y bienestar. De la misma forma en el
25
estatuto de la Universidad Central del Ecuador constan todas las normas y reglamentos que
se deben cumplir para la ejecución del trabajo investigativo como requisito previo para la
obtención de un título universitario, en el que se promueve el desarrollo del conocimiento
científico de los estudiantes y su difusión.
MARCO LEGAL INSTITUCIONAL
Estatuto de la Universidad Central del Ecuador (31).
Art. 72. La investigación. Constituye el eje transversal de la enseñanza- aprendizaje, y
tiene como objetivos:
Contribuir al avance de la ciencia básica, aplicada, humanística, artística,
incluyendo saberes ancestrales, con total respeto al ser humano y a la naturaleza,
por medio de investigaciones transdisciplinarias.
Fomentar la generación, aplicación y difusión de conocimientos científicos,
humanísticos, artísticos y tecnológicos, así como el rescate de los saberes
ancestrales.
Desarrollar tecnologías e innovaciones que coadyuven al avance de la producción
nacional y frenen la pérdida de los recursos naturales.
Colaborar en la solución de los problemas de la sociedad ecuatoriana, para mejorar
sus niveles de salud, alimentación y calidad de vida.
Elevar la preparación de docentes, investigadores y estudiantes, que propicien la
creación de una cultura y espíritu científicos, éticos y socialmente responsables.
Impulsar la formación de colectivos de investigación interdisciplinarios.
Fortalecer el Sistema Nacional de Ciencia, Tecnología e Innovación.
Art. 211. Títulos y grados. La Universidad Central del Ecuador concederá a sus egresados
los títulos y grados correspondientes, mediante el cumplimiento de todos los requisitos
establecidos en la Ley de Educación Superior, su Reglamento General, el Reglamento de
Régimen Académico, el Estatuto y los Reglamentos pertinentes. Los egresados tendrán un
plazo máximo de dos años para titularse, que se contarán desde la fecha de su egresamiento.
En caso contrario, deberán actualizar sus conocimientos de acuerdo con los programas
vigentes (31).
26
Art. 212. El trabajo de graduación o titulación constituye un requisito obligatorio para la
obtención del título o grado para cualquiera de los niveles de formación. Dichos trabajos
pueden ser estructurados de manera independiente o como consecuencia de un seminario de
fin de carrera. Para la obtención del grado académico de licenciado o del título profesional
universitario de pre o posgrado, el estudiante debe realizar y defender un proyecto de
investigación conducente a una propuesta que resolverá un problema o situación práctica,
con característica de viabilidad, rentabilidad y originalidad en los aspectos de aplicación,
recursos, tiempos y resultados esperados (31).
2.15.2. LEY ORGÁNICA DE LA SALUD
El Sistema Nacional de Salud cumplirá los siguientes objetivos:
1. Garantizar el acceso equitativo y universal a servicios de atención integral de
salud, a través del funcionamiento de una red de servicios de gestión
desconcentrada y descentralizada.
2. Proteger integralmente a las personas de los riesgos y daños a la salud; al medio
ambiente de su deterioro o alteración.
3. Generar entornos, estilos y condiciones de vida saludables.
4. Promover, la coordinación, la complementación y el desarrollo de las instituciones
del sector.
5. Incorporar la participación ciudadana en la planificación y veeduría en todos los
niveles y ámbitos de acción del Sistema Nacional de Salud (32).
27
CAPÍTULO III
3. METODOLOGÍA
3.1.TIPO DE INVESTIGACIÓN
Se aplicó un diseño de tipo descriptivo y de campo, ya que los datos de obtuvo de fuentes
primarias como fue la toma de muestra sanguínea y por encuesta ocupacional por el propio
investigador, en un momento puntual en el mes de mayo del 2018 en trabajadores de una
empresa florícola expuestos directa e indirectamente a plaguicidas organofosforados.
3.2.POBLACIÓN
Se tomó en cuenta a toda la población que abarca a 109 trabajadores que tienen contacto
directo e indirecto con los plaguicidas organofosforados entre hombres y mujeres que laboran
en una empresa florícola ubicada en la provincia de Pichincha, Cantón Mejía, lo que nos
permitió obtener resultados estadísticamente significativos.
Para determinar la población se tomará en cuenta los siguientes criterios de inclusión y
exclusión:
3.3.CRITERIOS DE INCLUSIÓN
Trabajadores expuestos directa e indirectamente a plaguicidas organofosforados.
3.4.CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
Si el trabajador pide abandonar el estudio.
Si el paciente no se encuentra en ayunas.
Trabajadores con enfermedades hepáticas diagnosticadas de manera previa a la
exposición a plaguicidas.
Trabajadores bebedores alcohólicos dependientes.
Trabajadores que consumen alimentos con alto contenido de grasa.
28
3.5.VARIABLES
Determinación de colinesterasa sérica.
Enzimas hepáticas.
Actividad laboral.
Género del trabajador.
3.6. ÁREA DE ESTUDIO
El estudio se realizará en la empresa florícola ubicado en la provincia de Pichincha en el
Cantón Mejía.
3.6.OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
TABLA 6. Matriz operacional de variables
29
Elaborado por: Ximena Guanochanga
*Valores referenciales tomados del inserto de cada prueba.
Variable Definición Dimensión Indicador Tipo de
variable
Escala Fuente
Colinesterasa
sérica
Enzimas que hidrolizan la
acetilcolina y que está presente en
casi todos los tejidos
principalmente en el hígado. (12)
Normal
Número de trabajadores con valores
entre: 3.100-7.700 U/L
Cuantitativa Continua Primaria
Alterada
Número de trabajadores con valores
< 3.100 U/L
Género Es la identidad sexual de los seres
vivos, la distinción que se hace
entre Femenino y Masculino. (33)
Femenino Número de trabajadores de género
femenino con sobreexposición a
plaguicidas organofosforados.
Cualitativa Nominal Primaria
Masculino Número de trabajadores de género
masculino con sobreexposición a
plaguicidas organofosforados.
Enzimas
Hepáticas
Las pruebas de enzimas hepáticas
son análisis de sangre que indican
cómo está funcionando el hígado.
(29)
TGO normal Número de trabajadores con valores:
M: <19 U/l F: <16 U/L
Cuantitativa Continua
Primaria
TGO alterada
Número de pacientes con valores:
M: >19 U/l F: >16 U/L
30
TGP normal Número de trabajadores con valores:
M: < 22 U/L F: <18 U/L
TGP alterada
Número de trabajadores con valores:
M:>22U/L F: >18 U/L
FAL
normal
Número de trabajadores con
valores entre: 60-170 U/L
FAL
alterada
Número de trabajadores con
valores: >170 U/L
Actividad
laboral
Actividad que desempeña un
individuo con remuneración
económica. (33)
Fumigador
Número de trabajadores distribuidos
en el área de fumigación.
Cualitativa Nominal Primaria
Bodega
Número de trabajadores personas
distribuidas en el área de bodega.
Cosecha
Número de trabajadores distribuidos
en el área de cosecha.
Pos-cosecha
Número de trabajadores distribuidos
en el área de pos-cosecha.
31
Mantenimiento
Número de trabajadores distribuidos
en el área de mantenimiento.
P. administrativo
Número de trabajadores distribuidos
en el área administrativa.
Condiciones de
Salud ocupacional
Número de trabajadores que utilizan
satisfactoriamente implementos de
seguridad.
32
3.7. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN
3.7.1. Técnicas e Instrumentos de recolección de datos
La recolección de los datos se realizó dentro del período de 2 semanas.
En primer lugar, se dialogó con los directivos de la empresa florícola, para obtener la
aprobación correspondiente y solicitar la participación voluntaria de los trabajadores
especificando el propósito del estudio, las condiciones, el manejo de los datos y los resultados
obtenidos.
Se realizó una encuesta para obtener información relevante de las actividades efectuadas
en la jornada laboral, años de trabajo, hábitos como fumar o beber alcohol y alimenticios,
utilización de equipo de protección personal. (Anexo N°1)
3.7.2. Técnica para recolección de la muestra mediante punción venosa
a) Materiales
Tubos vacutainer tapa roja sin aditivo de 4 ml MARCA VACUUM.
Agujas vacutainer 21GX1” MARCA PRECISION GLIDE.
Torniquete
Torundas de algodón con alcohol
Guantes de látex
Mandil
Marcador permanente
Pipetas analíticas calibradas.
Puntas para pipetas: amarillas y azules
Tubos de ensayo 5ml de vidrio
Gradilla para tubos de ensayo
Equipo SINNOWA BS-3100.
b) Toma de muestra biológica mediante punción venosa
Lavarse las manos, ponerse mandil y guantes de látex.
Descubrir el brazo del paciente y colocarlo en posición de declive, colocar la
ligadura 7.5 a 10 cm por encima del sitio de punción para que se ingurgite la vena.
33
Desinfectar la piel con una torunda embebida en alcohol 70%; con movimientos
circulares de adentro hacia afuera.
Introducir la aguja en un ángulo de 15° brazo-aguja aproximadamente, con el bisel
hacia arriba, en las venas cubital o media cefálica.
Recolectar la muestra con tubo vacutainer de vacío.
Retirar la aguja ejerciendo presión sobre el lugar de punción.
Codificar los tubos de acuerdo a los datos personales obtenidos mediante la
encuesta ocupacional.
Indicar al paciente que presione la zona de punción de 5 a 10 minutos (evita
formación de hematomas).
Desechar la aguja en un recipiente de paredes rígidas para esta afinidad
identificados con logotipo de contaminantes biológicos.
Las muestras se colocaron en una caja térmica con gel refrigerante a una
temperatura aproximada de 6ºC para transportarlas hasta el Laboratorio Clínico
L.B.C para su análisis en un tiempo no mayor a dos horas.
c) Transporte
El transporte de muestras se realizó en contenedores específicos para sustancias
infecciosas y muestras clínicas, manteniendo normas de bioseguridad y el sistema básico de
triple embalaje/envasado, recomendado por la Organización Mundial de la Salud (OMS),
garantizando así la estabilidad de las propiedades biológicas de las muestras.
3.7.3. Procesamiento de las muestras en laboratorio
Al llegar al laboratorio se centrifugaron las muestras a 5000 RPM durante 10 minutos.
Posteriormente se separó el suero en tubos de ensayo previamente codificados.
Los resultados fueron obtenidos por diagnostico laboratorial mediante la determinación
de colinesterasa sérica, por medio de la técnica de espectrofotometría. Se utilizó el método
cinético, en el equipo SINNOWA BS-3100.
A los pacientes cuyos resultados de colinesterasa sérica fueron menores a los valores de
referencia se les realizó las pruebas bioquímicas de TGO, TGP Y FAL para determinar la
existencia de un problema funcional hepático.
34
3.7.4. Pruebas químicas de laboratorio
Prueba: Colinesterasa sérica (Che).
Método: Cinético.
Principio del método:
Las reacciones involucradas en el ensayo de colinesterasa son las siguientes:
𝑃𝑟𝑜𝑝𝑖𝑜𝑛𝑖𝑡𝑖𝑜𝑐𝑜𝑙𝑖𝑛𝑎 + 𝐻2𝑂𝐶𝐻𝑂𝐸→ 𝐴𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑃𝑟𝑜𝑝𝑖𝑜𝑛𝑖𝑐𝑜 + 𝑇𝑖𝑜𝑐𝑜𝑙𝑖𝑛𝑎
𝑇𝑖𝑜𝑐𝑜𝑙𝑖𝑛𝑎 + 𝐷𝑇𝑁𝐵 → 5 − 𝑡𝑖𝑜 − 2 − 𝑛𝑖𝑡𝑟𝑜𝑏𝑒𝑛𝑧𝑜𝑎𝑡𝑜
La colinesterasa hidroliza la propionitiocolina (PTC) para formar Tiocolina que reacciona
con el ácido 5,5'-ditiobis-2-nitrobenzoico (DTNB) para producir 5-tio-2-nitrobenzoato
amarillo con una absorbancia máximo a 405 nm.
Por lo tanto, la tasa de cambio en la absorbancia en 405 nm es directamente proporcional
a la actividad colinesterasa.
Procedimiento manual
Calibrar el espectrofotómetro a 450 nm.
Reconstituir el reactivo con 6 ml de agua destilada.
Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a aire.
Pipetear 1.0 mL de reactivo en los tubos previamente rotulado se equilibra a 30 °
C o 37 ° C.
Agregar 10 μL de muestra (suero).
Leer inmediatamente.
Prueba: Aspartato aminotransferasa GOT (AST)
Método: NADH. Cinético UV.
Principio del método:
La aspartato aminotransferasa (AST) inicialmente llamada transaminasa glutamato
oxaloacética (GOT) cataliza la transferencia reversible de un grupo amino del aspartato al α-
cetoglutarato con formación de glutamato y oxalacetato.
El oxalacetato producido es reducido a malato en presencia de malato deshidrogenasa
(MDH) y NADH:
35
𝐿 − 𝐴𝑠𝑝𝑎𝑟𝑡𝑎𝑡𝑜 + 𝛼 − 𝐶𝑒𝑡𝑜𝑔𝑙𝑢𝑡𝑎𝑟𝑎𝑡𝑜𝐴𝑆𝑇→ 𝐺𝑙𝑢𝑡𝑎𝑚𝑎𝑡𝑜 + 𝑂𝑥𝑎𝑙𝑎𝑐𝑒𝑡𝑎𝑡𝑜
𝑂𝑥𝑎𝑙𝑎𝑐𝑒𝑡𝑎𝑡𝑜 + 𝑁𝐴𝐷𝐻 + 𝐻+𝑀𝐷𝐻→ 𝑀𝑎𝑙𝑎𝑡𝑜 + 𝑁𝐴𝐷+
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinada
fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de AST en la muestra
ensayada.
Procedimiento manual
Calibrar el espectrofotómetro a 340 nm.
Disolver el sustrato (R2) en 15 ml del tampón (R1).
Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a aire.
Pipetear 1.0 mL de reactivo en los tubos previamente rotulado se equilibra a 30 °
C o 37 ° C.
Agregar 50 μL de muestra (suero).
Mezclar e incubar 1 minuto.
Leer.
Prueba: Aspartato aminotransferasa GPT (ALT)
Método: NADH. Cinético UV.
Principio del método:
La alanina aminotrasferasa (ALT) inicialmente llamada transaminasa glutámico pirúvica
(GPT) cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato
con formación de glutamato y piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en
presencia de lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH:
𝐿 − 𝐴𝑙𝑎𝑛𝑖𝑛𝑎 + 𝐶𝑒𝑡𝑜𝑔𝑙𝑢𝑡𝑎𝑟𝑎𝑡𝑜𝐴𝐿𝑇→ 𝐺𝑙𝑢𝑡𝑎𝑚𝑎𝑡𝑜 + 𝑃𝑖𝑟𝑢𝑣𝑎𝑡𝑜
𝑃𝑖𝑟𝑢𝑣𝑎𝑡𝑜 + 𝑁𝐴𝐷𝐻 + 𝐻+𝐿𝐷𝐻→ 𝐿𝑎𝑐𝑡𝑎𝑡𝑜 + 𝑁𝐴𝐷+
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinado
fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra
ensayada.
36
Procedimiento manual
Calibrar el espectrofotómetro a 340 nm.
Disolver el sustrato (R2) en 15 ml del tampón (R1).
Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a aire.
Pipetear 1.0 mL de reactivo en los tubos previamente rotulado se equilibra a 30 °
C o 37 ° C.
Agregar 50 μL de muestra (suero).
Mezclar e incubar 1 minuto.
Leer.
Prueba: Fosfatasa alcalina (FAL)
Método: p-Nitrofenilfosfato. Cinético.
Principio:
La fosfatasa alcalina (FAL) cataliza la hidrólisis del p-nitrofenilfosfato (pNPP) a pH 10,4
liberando p-nitrofenol y fosfato, según la siguiente reacción:
𝑝 − 𝑁𝑖𝑡𝑟𝑜𝑓𝑒𝑛𝑖𝑙𝑓𝑜𝑠𝑓𝑎𝑡𝑜 + 𝐻2𝑂𝐹𝐴𝐿→ 𝑝 − 𝑁𝑖𝑡𝑟𝑜𝑓𝑒𝑛𝑜𝑙 + 𝐹𝑜𝑠𝑓𝑎𝑡𝑜
La velocidad de formación del p-Nitrofenol, determinado fotométricamente, es
proporcional a la concentración catalítica de fosfatasa alcalina en la muestra ensayada.
Procedimiento manual
Calibrar el espectrofotómetro a 405 nm.
Disolver el sustrato (R2) en 15 ml del tampón (R1).
Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a aire.
Pipetear 1.2 mL de reactivo en los tubos previamente rotulado se equilibra a 30 °
C o 37 ° C.
Agregar 20 μL de muestra (suero).
Mezclar e incubar 1 minuto.
Leer.
37
3.8. CONTROL DE CALIDAD
Para la validez del presente trabajo de investigación se utilizó controles de calidad
internos y externos.
Para el control interno se empleó calibradores que nos permitieron obtener una
exactitud independiente del sistema o instrumento empleado.
Para el control externo de la calidad se compararon nuestros resultados con un
laboratorio afiliado que cuenta con todas las certificaciones.
Estos controles constituyen una buena herramienta para mantener el desempeño analítico
dentro de márgenes aceptables estadísticamente. (Anexos 9 y 10).
38
CAPITULO IV
4. EXPOSICION DE RESULTADOS
4.1. RESULTADOS CUANTITATIVOS
4.1.1. Variable: Colinesterasa sérica.
4.1.1.1. Dimensiones:
Normal
Alterada
4.1.1.2. Indicadores:
Número de trabajadores con valores entre: 3.100-7.700 u/l
Número de trabajadores con valores: <3.100 U/L
TABLA 7. Tabla de distribución de los trabajadores según la alteración de la
pseudocolinesterasa.
DETERMINACIÓN
TRABAJADORES
Frecuencia Porcentaje
Pseudocolinesterasa
Normal 98 89.9%
Alterada 11 10.1%
Total 109 100%
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
39
GRÁFICO 1. Trabajadores según la alteración de la pseudocolinesterasa.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
Los resultados de los exámenes de laboratorio realizados a los 109 trabajadores de la empresa
florícola, en lo que respecta a los niveles de pseudocolinesterasa se observó que el 89.90%
(98 trabajadores) presentan niveles normales, mientras que el 10.10% (11 trabajadores)
niveles alterados.
4.1.2. Variable: Género
4.1.2.1. Dimensiones:
Masculino
Femenino
4.1.2.2. Indicadores:
Número de trabajadores de sexo masculino que trabajan en la florícola.
Número de trabajadores de sexo femenino que trabajan en la florícola.
40
TABLA 8. Género de los trabajadores de la empresa florícola.
GÉNERO FRECUENCIA PORCENTAJE
Masculino 46 42.2%
Femenino 63 57.8%
Total 109 100%
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
GRAFICO 2. Género de los trabajadores de la empresa florícola.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
En la presente investigación participaron 109 trabajadores de una empresa florícola,
expuestos de manera directa e indirecta a plaguicidas organofosforados, 63 pertenecían al
género femenino (57.8%) y 46 pertenecían al género masculino (42.2%).
41
4.1.3. Variable: Pseudocolinesterasa – Género
4.1.3.1. Dimensiones:
NORMAL
Género masculino
Género femenino
ALTERADA
Género masculino.
Género femenino.
4.1.3.2.Indicadores:
Número de trabajadores de género masculino con valores de pseudocolinesterasa
entre 3.100-7.700 u/l.
Número de trabajadores de género masculino con valores de pseudocolinesterasa
<3.100 U/L.
Número de trabajadores de género femenino con valores de pseudocolinesterasa
entre 3.100-7.700 u/l.
Número de trabajadores de género femenino con valores de pseudocolinesterasa
<3.100 U/L.
TABLA 9. Tabla cruzada de los niveles de pseudocolinesterasa, con relación al sexo del
trabajador.
DETERMINACIÓN
MASCULINO FEMENINO
Frecuencia Porcentaje Frecuencia Porcentaje
Pseudocolinesterasa
Normal 43 93.5% 55 87.4%
Alterada 3 6.5% 8 12.6%
TOTAL 46 100% 63 100%
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
42
GRÁFICO 3. Niveles de pseudocolinesterasa, con relación al sexo del trabajador.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
De los 109 trabajadores, observamos que existe una mayor alteración de la enzima
pseudocolinesterasa en el género femenino con un 12.60% (8 trabajadores), mientras que en
sexo masculino su porcentaje es de 6.50% (3 trabajadores).
4.1.4. Variable: Enzimas hepáticas
4.1.4.1. Dimensiones:
Normal
Alterada
4.1.4.2. Indicadores:
Número de trabajadores con pseudocolinesterasa alterada con valores de TGO:
Mujeres:<19 U/L
Hombres: <16 U/L
43
Número de trabajadores con pseudocolinesterasa alterada con valores de TGO:
Mujeres: >19 U/L
Hombres: >16 U/L
Número de trabajadores con pseudocolinesterasa alterada con valores de TGP:
Mujeres:<22 U/L
Hombres: <18 U/L
Número de trabajadores con pseudocolinesterasa alterada con valores de TGO:
Mujeres: >22 U/L
Hombres: >18 U/L
Número de trabajadores con pseudocolinesterasa alterada con valores de FAL
entre 60-170 U/L.
Número de trabajadores con pseudocolinesterasa alterada con valores de FAL
>170 U/L.
TABLA 10. Determinación de los niveles de TGO, TGP y fosfatasa alcalina a los
trabajadores con resultados disminuidos de pseudocolinesterasa.
Determinación
Trabajadores con niveles de
Che sérica alterada
Frecuencia Porcentaje
TGO
Normal 6 54.5%
Alterada 5 45.5%
TGP
Normal 7 63.6%
Alterada 4 36.4%
FAL
Normal 8 72.8%
Alterada 3 27.2%
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
44
GRÁFICO 4. Determinación de los niveles de TGO, TGP y fosfatasa alcalina a trabajadores
con resultados disminuidos de pseudocolinesterasa.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
A los trabajadores que presentaron valores disminuidos de pseudocolinesterasa, se les realizó
las pruebas TGO, TGP Y FAL, para detectar algún daño funcional hepático por exposición
a plaguicidas, así del 100% que representa a los 11 trabajadores; el 54,50% (6 trabajadores)
presenta un nivel normal de TGO mientras el 45,50%(5 trabajadores) presenta un nivel
aumentado, el 63,60% (7 trabajadores) presenta un nivel normal de TGP mientras que el
36,40%(4 trabajadores) presenta un nivel aumentado, el 72,80%(8 trabajadores) presenta un
nivel normal de FAL mientras que el 27,2% (3 trabajadores) presenta un nivel alterado
4.1.5. Variable: Actividad laboral
4.1.5.1. Dimensiones:
Fumigación
Bodega
45
Cosecha
Pos-cosecha
Mantenimiento
Personal administrativo
4.1.5.2. Indicadores:
Número de personas que trabajan en el área de fumigación.
Número de personas que trabajan en el área de bodega.
Número de personas que trabajan en el área de cosecha.
Número de personas res que trabajan en el área de pos-cosecha.
Número de personas que trabajan en el área de mantenimiento.
Número de personas que trabajan en el área administrativa.
TABLA 11. Tabla de distribución de los trabajadores según el área de trabajo.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
AREAS FRECUENCIA PORCENTAJE
Fumigación 14 12.8%
Bodega 3 2.8%
Cosecha 45 41.3%
Pos-cosecha 34 31.2%
Mantenimiento 8 7.3%
P. Administrativo 5 4.6%
Total 109 100%
46
GRÁFICO 5. Distribución de los trabajadores según el área de trabajo.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
Los 109 trabajadores de la empresa florícola se encuentran distribuidos de acuerdo a las áreas
de trabajo de la siguiente manera: 12.8% (14 trabajadores) fumigación, 2.8% (3 trabajadores)
en bodega, 41.3% (45 trabajadores) cosecha, 31.2% (34 trabajadores) pos-cosecha,7.3% (8
trabajadores) mantenimiento y 4.6% (5 trabajadores) se encuentran el área administrativa.
4.1.6. Variable: Pseudocolinesterasa - actividad laboral
4.1.6.1. Dimensiones:
NORMAL
Fumigación
Bodega
Cosecha
Pos-cosecha
Mantenimiento
47
Personal administrativo
ALTERADA
Fumigación
Bodega
Cosecha
Pos-cosecha
Mantenimiento
Personal administrativo
4.1.6.2.Indicadores:
Número de trabajadores que trabajan en las áreas de fumigación, cosecha, pos-
cosecha, mantenimiento y personal administrativo con valores de
pseudocolinesterasa entre 3.100-7.700 u/l.
Número de trabajadores que trabajan en las áreas de fumigación, cosecha, pos-
cosecha, mantenimiento y personal administrativo con valores de
pseudocolinesterasa <3.100 U/L.
TABLA 12. Tabla cruzada de la actividad que realiza en la florícola, en relación con los
niveles de pseudocolinesterasa.
Área de trabajo Determinación de colinesterasa sérica
Normal Alterada
Frecuencia Porcentaje Frecuencia Porcentaje
Fumigación 13 92.9% 1 7.1%
Bodega 3 100% 0 0%
Cosecha 37 82.2% 8 17.8%
Pos-cosecha 32 94.2% 2 5.8%
Mantenimiento 8 100% 0 0%
P.adminisrativo 5 100% 0 0%
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
48
GRÁFICO 6. Actividad que realiza en la florícola, en relación con los niveles de
pseudocolinesterasa.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
Según los resultados de los exámenes de laboratorio realizados a los 109 trabajadores de la
florícola, en lo que respecta a los niveles bajos de pseudocolinesterasa se observó la siguiente
distribución según el área de trabajo; el 7.1% (1 trabajador) fumigación,17.8% (8
trabajadores) cosecha,5.8% (2 trabajadores) pos-cosecha y 0% (0 trabajadores) en bodega,
mantenimiento y personal administrativo.
4.1.7. Variable: Equipo de protección personal.
4.1.7.1. Dimensiones:
Guantes
Delantal
Mascarilla
Gafas
Botas
49
4.1.7.2.Indicadores:
Número de trabajadores que utilizan guantes.
Número de trabajadores que utilizan delantal.
Número de trabajadores que utilizan mascarilla.
Número de trabajadores que utilizan gafas.
Número de trabajadores que utilizan botas.
TABLA 13. Distribución del equipo de protección personal según el área de trabajo.
Guantes Delantal Mascarilla Gafas Botas
f % f % f % f % f %
Fumigación 14 100% 14 100% 14 100% 14 100% 14 100%
Bodega 3 100% 1 33% 1 33% 0 0% 2 67%
Cosecha 39 88% 16 35% 4 9% 0 0% 26 59%
Pos-cosecha 34 100% 29 87% 10 31% 2 4% 32 96%
P. Administrativo 3 60% 2 40% 2 40% 0 0% 4 80%
Mantenimiento 7 88% 4 50% 1 13% 2 25% 8 100%
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
50
GRÁFICO 7. Distribución del equipo de protección personal según el área de trabajo.
Fuente: Encuesta aplicada a trabajadores de una empresa florícola con fecha: 12/04/2018
Elaborado: Ximena Guanochanga
Interpretación:
De los 109 trabajadores expuestos a plaguicidas organofosforados podemos observar que el
100% el área de fumigación utiliza todo el equipo de protección personal; en el área de
bodega el 100% utiliza guantes, 33% delantal y mascarilla, 67% botas y un 0% gafas; en el
área de cosecha el 88% utilizan guantes, 35 % delantal, 9% mascarilla, 0% gafas y 59% botas;
en el área de pos-cosecha el 100% utiliza guantes, 87% delantal, 31% mascarilla,4% gafas y
96% botas gafas; en el área de mantenimiento el 88% utiliza guantes,100% botas, 50%
delantal,13% mascarilla y 25% gafas y el persona administrativos el 60% utiliza guantes,
80% botas, 40%delantal y mascarilla y 0% gafas.
60%
88%
100%
88%
100%
100%
40%
50%
87%
35%
33%
100%
40%
13%
31%
9%
33%
100%
0%
25%
4%
100%
80%
100%
96%
59%
67%
100%
0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%
P. ADMINISTRATIVO
MANTENIMIENTO
POS-COSECHA
COSECHA
BODEGA
FUMIGACION
Guantes Delantal Mascarilla Gafas Botas
51
DISCUSIÓN
En el Ecuador el sector agropecuario es de vital importancia para la economía por su
capacidad de generación de empleo y ser fuente crucial de la generación de divisas a través
de la exportación de los productos tradicionales por lo que se siembra aproximadamente
2'595.075 ha. de las cuales 1'191.131 hectáreas son tratadas con plaguicidas inhibidores de
la colinesterasa existiendo cultivos donde un alto porcentaje de productores (66 a 100%)
utilizan regularmente estas sustancias según lo indica el INEC, 2014.
Los estudios en poblaciones expuestas a plaguicidas, constituyen en la actualidad el objeto
de investigaciones epidemiológicas y toxicológicas, partiendo del hecho de que cualquier
exposición a productos potencialmente peligrosos debe ser evitada en la medida de lo posible.
Sin embargo, un numeroso grupo de personas por motivos laborales está expuesto de manera
directa e indirecta a estos productos químicos lo que incrementa la probabilidad de sufrir
efectos adversos sobre su salud como lo menciona en su artículo Díaz (10).
Los resultados de los exámenes de colinesterasa sérica utilizados para identificar una
sobreexposición a plaguicidas organofosforados, realizados en este proyecto a 109
trabajadores de una empresa florícola distribuidos entre hombres y mujeres muestran que:
el 10.1% (11 trabajadores) presentan niveles de colinesterasa sérica ligeramente bajos,
similar a los valores obtenidos por Lozano, quien utilizó este biomarcador como un indicador
de exposición aguda a plaguicidas organofosforados en 80 trabajadores de una zona bananera
obteniendo como resultado que la mayoría de los individuos presentan niveles normales de
la enzima colinesterasa sérica y solamente diez personas (11,1 %) con valores menores a
3200 U/L (34).
Se pudo observar que existen mayor número de trabajadores pertenecientes al género
femenino con niveles de colinesterasa sérica disminuida el 12.6 % (8 trabajadores), mientras
que del género masculino existe una disminución en un 6.5% (3 trabajadores), que puede
deberse a que existe una mayor proporción de grasa en el cuerpo de las mujeres, lo permite
52
un mayor reservorio de plaguicidas lipofílicos; además de que también pueden absorber
plaguicidas a través de su piel más fácilmente que los hombres y una vez ahí estos plaguicidas
, pueden permanecer más tiempo en su cuerpo, particularmente si están embarazadas, según
lo señalado por en su libro por Watts Meriel (35).
La variaciones de la enzima colinesterasa sérica en el presente proyecto son ligeras por
lo que no se puede afirmar que exista una sobreexposición, teniendo en cuenta de que en la
actualidad no existen marcadores biológicos con suficiente especificidad analítica , es decir,
que sus valores solo se muevan significativamente producto de la exposición ambiental al
contaminante dado, como lo menciona en su artículo Ibarra José (36) , por lo que se debe
determinar todas las posibles causas de variación la enzima colinesterasa sérica tales como:
anemias crónicas, desnutrición, enfermedad del colágeno, epilepsia, fiebre reumática,
uremia, infecciones agudas, tétanos, tuberculosis , quemaduras, tratamientos con
anticonceptivos orales, estrógenos, plamasféresis como lo expresa Adum Mirella quien en
su artículo estudio los intervalos de referencia de la colinesterasa plasmática y eritrocitaria
en adultos sanos (22).
Se observó un ligero aumento en los valores de las enzimas hepáticas en los trabajadores
con niveles de colinesterasa sérica disminuida, distribuido de la siguiente manera: de TGO
el 45.50% (5 trabajadores), de TGP el 36,40% (4 trabajadores) y el 27,2% (3 trabajadores)
de Fosfatasa Alcalina, que puede ser un efecto derivado a la exposición a plaguicidas como
lo menciona en su artículo Karam Miguel (37) , pero se debe de tomar en cuenta la existencia
de ciertas enfermedades y medicamentos que causan elevaciones ligeras de las transaminasas
tales como : hígado graso, abuso de alcohol, enfermedades musculares, además de
medicamentos como, aspirina, acetaminofén, ibuprofen, neproxen ,diclofenaco,
fenybutazone , antibióticos como las tetraciclinas, sulfonamidas, sulfametoxazole,
trimetropin, nitrofurantoin, etc., fármacos para el colesterol y cardiovasculares; y para la
fosfatasa alcalina enfermedades óseas, hígado graso, así como condiciones fisiológicas como
el embarazo , como lo explica en su libro Baynes John (28).
53
Una de las medidas de control de riesgos por exposición a los plaguicidas es el uso
adecuado de los equipos de protección personal, además de las buenas prácticas durante la
jornada laboral. Nuestro estudio refleja que solamente el área de fumigación reportó el uso
del equipo de protección completo, las demás áreas solo utilizaban algunos de sus elementos,
similar a los datos obtenidos por García Ana en su artículo donde observa que sólo el 6 % de
los trabajadores manipulaban los plaguicidas utilizando la protección personal adecuada (38).
Sin embargo, aun cuando los trabajadores indicaron no contar con los equipos de protección
adecuados no se observa una variación significativa en las enzimas estudiadas que puede
deberse a la correcta señalización que presentan las áreas que se encuentran bajo tratamiento
con plaguicidas organofosforados lo que evita una sobreexposición.
54
CAPÍTULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. CONCLUSIONES
Los resultados de los exámenes de pseudocolinesterasa realizados, demostraron
que 11 trabajadores, tienen los niveles de pseudocolinesterasa alterados, sin
embargo, estas alteraciones son mínimas, por lo tanto, no son estadísticamente
significativos
En la presente investigación pudimos observar que tanto el trabajador expuesto de
manera directa e indirecta a plaguicidas organofosforados, presenta ligeras
variaciones en los niveles de pseudocolinesterasa.
El género femenino presenta mayor cantidad de trabajadores con niveles de
pseudocolinesterasa ligeramente alterada.
No se pudo determinar la existencia daño funcional hepático en los trabajadores
con niveles de pseudocolinesterasa bajos, ya que se obtuvieron valores de TGO,
TGP y Fosfatasa Alcalina ligeramente elevados a su valor referencial, que puede
deberse a la presencia de enfermedades no relacionadas con la hepatotoxicidad
causada por plaguicidas, o por la ingesta de algunos medicamentos.
El área de cosecha presenta mayor cantidad de trabajadores con
pseudocolinesterasa ligeramente alterada que puede deberse a que en esta área
existe mayor número de trabajadores y que en su mayoría son mujeres.
En cuanto al uso del equipo de protección personal, solamente el área de
fumigación utiliza el equipo de protección adecuada, mientras que las restantes
áreas solo utilizan ciertos implementos, lo que nos indica que muchos de los
participantes no son conscientes del riesgo al que están expuestos al estar en
contacto con los plaguicidas.
55
5.2. RECOMENDACIONES
Es necesario que los trabajadores conozcan cuales son los peligros y las
consecuencias de manipular plaguicidas organofosforados.
Se deben realizar exámenes periódicos de perfil hepático y pseudocolinesterasa a
los trabajadores expuestos a plaguicidas organofosforados, extrayendo al
trabajador su primera muestra sanguínea al iniciar labores, la cual será utilizada
como su nivel basal para los sucesivos controles.
Se puede optar por el uso de mascarilla de cara completa con filtro para vapores
orgánicos, lo cual maximiza la protección al trabajador.
Informar mediante talleres de capacitación sobre el uso y manejo de plaguicidas,
así como de los peligros que estos tienen sobre la salud del trabajador ya sea que
estén expuestos de manera directa e indirecta.
56
BIBLIOGRAFÍA
1. Santos S. Efectos de los fungicidas organofosforados y carbamatos en la salud de los
escolares. UNEMI. 2015; 8: p. 62-67.
2. García C. Problemática y Riesgo Ambiental por el uso de Plaguicidas en Sinaloa. Ra
Ximhai. 2012 diciembre; 8(3b).
3. Moreara I. Identificación de principios activos de plaguicidas en frutas, hortalizas y
granos básicos en Costa Rica: Una propuesta para la implementación de nuevas
metodologías de análisis. Pensamiento Actual. 2015 noviembre; 15(25).
4. Quer S. Toxicología Industrial Salvat, editor. Barcelona: ISBN; 1983.p.7-246.
5. Curtis K. Fundamentos de toxicología Madrid: Interamericana de España, S.A.U.;
2005.p.202-346.
6. Castell J. Mecanismo de toxicidad y patrones de lesión. CG. 2003; 2: p. 190-196.
7. Cárdenas J. Uso de plaguicidas inhibidores de acetilcolinesterasa en once entidades
territoriales de salud en Colombia,2002-2005. Biomédica. 2010 agosto; 6.
8. Orta I. Guía Actuación para la atención del paciente con intoxicación aguda por
organofosforados. HYGIA. 2013; 84: p. 6-9.
9. Jiménez M. Valores de referencia de colinesterasa plasmática y eritrocitaria en
población costarricense. Comparación del desempeño clínico de ambas enzimas.
Costarricense de Ciencias Médicas. 2000; 21: p. 117-126.
10. Díaz S. Niveles de colinesterasa en cultivadores de papa expuestos ocupacionalmente
a plaguicidas, Totoró, Cauca. Universidad Industrial de Santander. 2017; 49: p. 85-
92.
11. Cremlyn R. Plaguicidas modernos y su acción bioquímica México: LIMUSA S.A.;
1990.p.115-120.
12. Henao S. Plaguicidas inhibidores de las colinesterasas México; 1991.p.1-41.
13. Morell I. Plaguicidas. Aspectos ambientales, analíticos y toxicológicos. Castellón de
la Plana: Castelló d'Impressio.S.L.; 1998.p.18-25
14. Duffus J. Toxicología ambiental Barcelona: Omega; 1983.p.5-77.
57
15. Dreisbach. Manual de toxicología clínica México: El Manual Moderno; 2003.p.103-
109.
16. Peña J. Toxicología Clínica Colombia: Legis A.S.; 2010.p.35-40.
17. Córdoba D. Toxicología Colombia: El Manual Moderno Ltla.; 2006.p.121-154.
18. Marruecos L. Toxicología clínica Barcelona: Spriner-Verlag Ibérica S.A.;
1993.p.233-240.
19. Terán G. Manual Intoxicaciones Agudas por Plaguicidas Manabí: ABYA-YALA;
2013.p.9-18.
20. Fernández D. Intoxicación por organofosforados. Med. 2010; 18.
21. Rubín E. Patología Estructural Barcelona: Interamericana de España S.A.; 2006.
p.105119.
22. Adum M.. Determinación de intervalos de referencia de la colinesterasa plasmática y
eritrocitaria, en adultos sanos. Portoviejo: San Gregorio; 2015. p. 57-65.
23. Moor K. Anatomía con orientación clínica. Tercera ed. Barcelona: Lippincott
Williams & Wilkins; 2013.p.268-280.
24. Sibulesky L. Anatomía normal del hígado. Clinical Liver Disease. 2013; 16.
25. Tortora G. Principios de Anatomía y Fisiología México: Panamericana; 2006.p.924-
926.
26. Tejada F. Hepatotoxicidad por fármacos. Clínica de medicina familiar. 2010; 3.
27. Higuera M. Toxicidad hepática inducida por fármacos y herbolaria. Médica del
Hospital General de México. 2012; 8.
28. Baynes J. Bioquímica médica Barcelona: Elsevier España, S.L.; 2011.p.59-391.
29. Gómez A. Interpretación clínica del laboratorio Bogotá: Médica Internacional; 2014.
30. ECUADOR CDLRD. [Online].; 2008 [cited 2018 Octubre 04. Available from:
https://www.oas.org/juridico/pdfs/mesicic4_ecu_const.pdf.
31. ECUADOR EDLUCD. [Online].; 2010 [cited 2018 Octubre 04. Available from:
http://www.ces.gob.ec/images/Estatutos_Universidades/Resoluciones2016/Estatutos
2016/ESTATUTO_UCE.pdf.
58
32. SALUD LOD. [Online].; 2012 [cited 2018 Octubre 04. Available from:
https://www.todaunavida.gob.ec/wp-content/uploads/downloads/2015/04/SALUD-
LEY_ORGANICA_DE_SALUD.pdf.
Océano de México S.A. Océano práctico México, editor. México: Océano de México
S.A. de V.C.; 1995.
33. Marrero S. Evaluación a la exposición a organofosforados y carbamatos en
trabajadores de una comunidad agraria. Comunidad y Salud. 2017: p. 30-40.
34. Lozano L. Determinación del nivel de colinesterasa sérica en una población
ocupacionalmente expuesta a plaguicidas en el municipio Zona bananera, Magdalena.
[Online].; 2015 [cited 2017 Septiembre 21. Available from: dx.doi.org/10.16925/cu.
v2i1.1309.
35. Watts M. Pesticides & Breast Cancer. 1st ed. New Zealand; 2007.p.52-110
36. Ibarra J. Inhibición de la actividad de colinesterasa sanguínea como biomarcador de
exposición a compuestos organofosforados y carbamatos. Cubana de Salud y Trabajo.
2012; 13(3).
37. Karam M, R. Plaguicidas y salud de la población. CIENCIA ergo sum. 2005 Nov;
11(3).
38. García A. Prácticas de utilización de plaguicidas en agricultores. Gac Sanit. 2002 Feb;
16(3).
59
ANEXOS
ANEXO N°1. Hoja de encuesta ocupacional
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
DETERMINACION DE LA CONCENTRACION SERICA DE LA
PSEUDOCOLINESTERASA Y CONSECUENCIAS FUNCIONALES HEPATICAS
EN TRABAJADORES DE UNA EMPRESA FLORÍCOLA EXPUESTOS DIRECTA
E INDIRECTAMENTE A PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS
ENCUESTA
Estimados(as) trabajadores(as), con la finalidad de cumplir de la mejor manera con los
objetivos del presente proyecto de investigación, le solicitamos responder de la forma más
sincera las siguientes preguntas.
INSTRUCCIONES: Lea detenidamente las preguntas y marque con una X la opción que
considere correcta.
Nombre: …………………………………………………………
Edad: …………………………………………………………….
Fecha: ……………………………………………………………
1. Actividad laboral
Cosechador Fumigador
Pos-cosecha Bodega
Personal administrativo
2. Usa protección personal
60
Sí No
3. En caso de utilizar equipo de protección personal, con cuál de los siguientes
objetos labora:
Guantes Delantal Mascarilla
Gafas Botas
4. Toma algún tipo de medicación
Sí No
Que medicación: …………………………….
5. Consumo de alcohol
Siempre Casi siempre Nunca
6. Tiene o ha sufrido con alguna enfermedad hepática
Sí No
7. ¿Ha padecido alguna vez de hepatitis A/B/ C?
Sí No
8. Consume alimentos con alto contenido en grasa
Sí No
61
ANEXO N°2. Hoja de recomendaciones para el paciente.
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOTECNOLÓGICO
DETERMINACION DE LA CONCENTRACION SERICA DE LA
PSEUDOCOLINESTERASA Y CONSECUENCIAS FUNCIONALES HEPATICAS
EN INDIVIDUOS EXPUESTOS DIRECTA E INDIRECTAMENTE A
PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS
HOJA DE RECOMENDACIONES PARA EL PACIENTE:
No se necesita estar en ayunas.
Suprimir ejercicio intenso 48 horas antes.
Excluir 12 horas antes, alimentos altos en grasa, tabaco, alcohol, cafeína.
Suspender la ingesta de medicamentos que alteren las pruebas 24 horas antes de la
extracción sanguínea (anticonceptivos orales, ácido acetilsalicílico, esteroides
anabolizantes, estrógenos, diversos antibióticos)
Sueño reparador (no trabajo nocturno).
62
ANEXO N°3. Hoja de recolección de datos
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E HISTOTECNOLOGICO
Elaborado por: Ximena Guanochanga (2017).
CODIGO GENERO EDAD AÑOS DE
TRABAJO
ACTIVIDAD
LABORAL
RESULTADOS OBSERVACIONES
CHE(suero) TGO TGP FAL
U/L U/L U/L U/L
63
ANEXO N° 4. Características del equipo SINNOWWA BS-3100
EQUIPO SINNOWWA BS-3100
Es un Analizador de Bioquímica Semi-Automático (Espectrofotómetro
absorción).
Posee Potentes funciones en una unidad compacta para investigaciones
bioquímicas, enzimas, Inmunoturbidimetrics y las drogas.
Memoria de hasta 500 programas para almacenar los diferentes test.
Tiene el sistema abierto a cualquier marca de reactivo.
Realiza cálculos automáticamente, de modo que los resultados se muestran
directamente en la unidad de medida requerida.
Métodos: punto final, dos puntos, multipadrón, cinético, bicromático, suero
Solución Neutral.
Almacena 200 elementos, que pueden ser aumentados, modificados y borrados.
Volumen de aspiración de 500 μl.
Flujo a través de la célula: 32 μl.
Control de temperatura: + 0.2ºC.
Sistema óptico: filtros interferentes, 340, 405, 492, 510, 546, 578, 620.
Fuente de luz: lámpara halógena 6V 10W.
Rango fotométrico: 0-2, 5º.
Software: tecla de membrana, versión en inglés.
Elaborado por: Ximena Guanochanga (2017)
64
ANEXO N° 5. Determinación cuantitativa de colinesterasa (CHE) en suero y plasma
Determinación cuantitativa de colinesterasa (CHE) en suero y plasma
PRINCIPIO DEL MÉTODO
El Método utiliza butiriltiocolina como substrato específico para colinesterasa (CHE). La
Colinesterasa cataliza la hidrólisis del sustrato de butiriltiocolina formando butirato y
tiocolina. La tiocolina reduce el hexacianoferrato La disminución en absorbancia es
directamente proporcional a la actividad de CHE en la muestra.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La colinesterasa es un enzima presente en el plasma y sintetizado por el hígado. Su verdadera
función fisiológica se desconoce, por lo que su función sería hidrolizar colina en plasma. La
actividad de la colinesterasa está regulada por la función del hígado, es una prueba sensitiva
de la exposición de pesticidas organofósforos e identificación de pacientes con una forma
atípica de la enzima que presenta una sensibilidad alta a la sucinil-colina1.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de
laboratorio.
REACTIVOS
R 1
Tampón
Pitofosfato pH 7.6 92 mmol/L
Hexacianoferrato (III) 2.5 mmol/L
R 2
Substrato
Butiriltiocolina 91 mmol/L
Opcional Spintrol H CAL Ref. 1002012
PREPARACIÓN
Los reactivos están listos para su uso.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta, cuando se mantienen bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su
contaminación durante el uso. No utilice reactivos fuera de la fecha indicada. Estabilidad: 90
días a 2-8ºC una vez abierto, si se evita la contaminación y los viales se tapan inmediatamente
65
después de su uso. Indicadores de deterioro de los reactivos: - Presencia de partículas y
turbidez.
MUESTRAS
Suero fresco, plasma (EDTA heparina) no hemolizado y separado rápidamente de los
glóbulos rojos. No utilizar fluoruro de sodio como anticoagulante porque inhibe la
colinesterasa.
Estabilidad: 15 días a 2- 8ºC.
PROCEDIMIENTO
Condiciones de la prueba:
Longitud de onda (principal/sub): . . . . . . . . . . . .. .405 nm.
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . .. ……... . . paso de luz de 1 cm.
Temperatura constante . . .. …. . . . . . . . ………………37ºC.
Los reactivos deben alcanzar la temperatura de trabajo antes de utilizarlos.
Pipetear en una cubeta:
Blanco de reactivo Muestra
Agua destilada (L) 20 --
Muestra (L) -- 20
Reactivo 1 (L) 1000 1000
Mezclar e incubar durante 5 minutos. Añadir:
Reactivo 2 (L) 200 200
Mezclar con cuidado.
Leer la absorbancia A1 del blanco de reactivo y de la muestra a los 90 segundos y
efectuar una segunda lectura A2 después de los próximos 90 segundos.
CÁLCULOS
Actividad CHE =ΔA Muestra − ΔA Blanco
ΔA Calibrador − ΔA Blanco!+ x Conc. Calibrador = U/L
Unidades:
Una unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 mol de sustrato por
minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por litro (U/L).
66
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda monitorizar el rendimiento de los procedimientos de la prueba: SPINTROL
H Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210). Si los valores de control están fuera del
rango definido, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica. Cada laboratorio
deberá disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso que los
controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA
Adultos (37ºC)
Hombres: 5100-11700 U/L
Mujeres: 4000-12600 U/L
En niños menores de 6 meses, la actividad de la colinesterasa es del 40% al 50% mayor que
en adultos. En mujeres jóvenes, la actividad de la enzima es de un 64% al 74% mayor que en
hombres adultos. La actividad disminuye durante el embarazo. Estos valores son orientativos.
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Rango de medida:
Desde el límite de detección de 160 U/L hasta el límite de linealidad de 25000 U/L. Si los
resultados obtenidos fuesen mayores que el límite de linealidad, diluir 1/10 con NaCl 9 g/L
y multiplicar el resultado por 10.
Precisión:
Intraserie (n=20)
Media( U/L) 3850 6735 13749
SD 57.04 155.22 166.17
CV(%) 1.48 2.30 1.21
Interserie (n=20)
3850 6744 13758
62.86 139.14 181.32
1.63 2.06 1.32
67
Sensibilidad:
160 U/L
Exactitud:
Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se
comparan con otros reactivos comerciales (x).
Los resultados obtenidos fueron los siguientes:
Coeficiente de correlación (r): 0,9941.
Ecuación de la recta de regresión: y= 0,8639 x + 204,2644
Las características del método varían según el analizador utilizado.
INTERFERENCIAS
Se han descrito varias sustancias que causan cambios fisiológicos en la actividad del suero
colinesterasa. Se han observado interferencias menores al 5% en hemoglobina (hasta 500
mg/dL), bilirrubina (hasta 20 mg/dL) y triglicéridos (hasta 1000 mg/dL).
68
ANEXO N° 6. Determinación cuantitativa de aspartato aminotransferasa GOT (AST).
Determinación cuantitativa de aspartato aminotransferasa GOT (AST)
Conservar a 2-8ºC
PRINCIPIO DEL MÉTODO
La aspartato aminotransferasa (AST) inicialmente llamada transaminasa glutamato
oxaloacética (GOT) cataliza la transferencia reversible de un grupo amino del aspartato al α-
cetoglutarato con formación de glutamato y oxalacetato.
El oxalacetato producido es reducido a malato en presencia de malato deshidrogenasa
(MDH) y NADH:
L − Aspartato + α − Cetoglutarato𝐴𝑆𝑇→ Glutamato + Oxalacetato
Oxalacetato + NADH + 𝐻+𝑀𝐷𝐻→ Malato + 𝑁𝐴𝐷+
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinada
fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de AST en la muestra
ensayada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en el músculo del corazón,
las células del hígado, las células del músculo esquelético y en menores cantidades en otros
tejidos. Aunque un nivel elevado de AST en suero no es específico de enfermedad hepática
se emplea principalmente para su diagnóstico y seguimiento, junto con otras enzimas como
la ALT y ALP.
También se emplea en el control post-infarto, en pacientes con desórdenes del músculo
esquelético, y en otras afecciones. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta
todos los datos clínicos y de laboratorio.
69
REACTIVOS
R 1
Tampón
TRIS pH 7,8 80 mmol/L
Lactato deshidrogenasa (LDH) 800 U/L
Malato deshidrogenasa (MDH) 600 U/L
L-Aspartato 200 mmol/L
R 2
Substrato
NADH 0,18 mmol/L
α-Cetoglutarato 12 mmol/L
PREPARACIÓN
Reactivo de trabajo (RT):
Mezclar: 1 vol. de (R2) Substrato + 4 vol. (R1) Tampón.
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 72 horas a temperatura ambiente.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se
evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
Presencia de partículas y turbidez.
Absorbancias del Blanco a 340 < 1,00.
MATERIAL ADICIONAL
Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
Baño termostable a 25ºC, 30ºC o 37ºC (± 0,1ºC).
Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRAS
Suero o plasma. Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC.
70
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. …340 nm
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .. 1 cm paso de luz
Temperatura constante. . . . . . . . .. .. . . .25ºC / 30ºC / 37ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta:
RT(mL) 1.0
Muestra (Ul) 100
4. Mezclar, incubar 1 minuto.
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la
absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (ΔA/min).
CÁLCULOS
ΔA/min x 1750 = U/L de AST
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 μmol de
substrato por minuto, en condiciones estándar.
La concentración se expresa en unidades por litro (U/L). Factores de conversión de
temperaturas Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
Temperatura de
medición
Factor para convertir a
25°C 30°C 37°C
25°C
30°C
37°C
1.00
0.73
0.48
1.37
1.00
0.65
2.08
1.54
1.00
CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H
Normal y Patológico.
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el
instrumento, los reactivos y la técnica.
71
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el
caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA
25ºC 30ºC 37ºC
Hombres Hasta 19 U/L 26 U/L 38 U/L
Mujeres Hasta 16 U/L 22 U/L 31 U/L
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Rango de medida: Desde el límite de detección 1 U/L hasta el límite de linealidad 260 U/L.
Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10 con ClNa 9
g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Precisión:
Sensibilidad analítica:
1 U/L = 0,0048 ΔA/min.
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas
significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Los resultados obtenidos con 100 muestras fueron los siguientes:
Coeficiente de regresión (r): 0.9839.
Ecuación de la recta de regresión: y= 0.9866x + 0.588.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
Intraserie (n=20)
Media
(U/L)
17.0 1.35
SD 0.72 1.05
CV(%) 4.27 0.77
Interserie (N=20)
17.3 1.31
0.81 2.25
4.68 1.72
72
ANEXO N° 7. Determinación cuantitativa de alanina aminotransferasa GPT (ALT)
Determinación cuantitativa de alanina aminotransferasa GPT (ALT)
PRINCIPIO DEL MÉTODO
La alanina aminotrasferasa (ALT) inicialmente llamada transaminasa glutámico pirúvica
(GPT) cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato
con formación de glutamato y piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en
presencia de lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH:
L − Alanina + α − Cetoglutarato𝐴𝐿𝑇→ Glutamato + Piruvato
Piruvato + NADH + 𝐻+𝐿𝐷𝐻→ Lactato + 𝑁𝐴𝐷+
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinado
fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra
ensayada.
SIGNIFICADO CLÍNICO
La ALT es una enzima intracelular, se encuentra principalmente en las células del hígado y
el riñón. Su mejor aplicación es en el diagnóstico de las enfermedades del hígado. Se
observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la hepatitis, enfermedades de los
músculos y traumatismos.
Cuando se emplean en conjunción con la AST ayuda en el diagnóstico de infartos de
miocardio, ya que el valor de la ALT se mantiene dentro de los límites normales y aumenta
en los niveles de AST.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de
laboratorio.
73
REACTIVOS
R 1
Tampón
TRIS pH 7,8 100 mmol/L
Lactato deshidrogenasa (LDH) 1200 U/L
L-Alanina 500 mmol/L
R 2
Substrato
NADH 0,18 mmol/L
α-Cetoglutarato 15 mmol/L
PREPARACIÓN
Reactivo de trabajo (RT): Mezclar: 1 vol. de (R2) Substrato + 4 vol. (R1) Tampón.
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 72 horas a temperatura ambiente.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se
evita su contaminación.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
Presencia de partículas y turbidez.
Absorbancias del Blanco a 340 < 1,00.
MATERIAL ADICIONAL
Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
Baño termostable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC)
Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
Equipamiento habitual de laboratorio.
MUESTRAS
Suero o plasma.
Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
74
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. …340 nm
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz
Temperatura constante . . . . . . . . . . . .. .25ºC / 30ºC / 37ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta:
RT (mL) 1.0
Muestra (uL) 100
4. Mezclar, incubar 1 minuto.
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronómetro y leer la
absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (ΔA/min).
CÁLCULOS
ΔA/min x 1750 = U/L de ALT
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 μmol de
substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en unidades por
litro (U/L).
Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
Temperatura de
medición
Factor para convertir a
25 ºC 30 ºC 37 ºC
25 ºC
30 ºC
37 ºC
1.00
0.76
0.55
1.32
1.00
0.72
1.82
1.39
1.00
CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: SPINTROL H
Normal y Patológico (Ref. 1002120 y 1002210). Si los valores hallados se encuentran fuera
del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos y la técnica. Cada
75
laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso
de que los controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA
25ºC 30ºC 37ºC
Hombres Hasta 22 U/L 29 U/L 40 U/L
Mujeres Hasta 18 U/L 22 U/L 32 U/L
En recién nacidos normales se han descrito valores de referencia hasta el doble del de los
adultos, debido a su inmadurez hepática, estos valores se normalizan aproximadamente a los
tres meses. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca
sus propios valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
Rango de medida: Desde el límite de detección 3,9 U/L hasta el límite de linealidad 260
U/L.
Si la concentración de la muestra es superior al límite de linealidad, diluir 1/10 con ClNa g/L
y multiplicar el resultado final por 10.
Precisión:
Sensibilidad analítica: 1 U/L = 0,00052 ΔA / min.
Exactitud:
Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemáticas significativas cuando se
comparan con otros reactivos comerciales (x). Los resultados obtenidos con 100 muestras
fueron los siguientes: Coeficiente de regresión (r): 0.9946.
Ecuación de la recta de regresión: y= 1.0081x + 0.3629.
Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
Intraserie (n= 20)
Media
(U/L)
33,2 128
SD 1,00 1,47
CV (%) 3,02 1,14
Interserie (n= 20)
31,3 129
0,94 1,57
3,00 1,22
76
ANEXO N° 8. Determinación cuantitativa de fosfatasa alcalina (FAL)
Determinación cuantitativa de Fosfatasa alcalina (FAL)
Reactivo para la determinación cuantitativa In Vitro de fosfatasa alcalina (FAL) en suero o
plasma en equipos fotométricos.
RESUMEN
La fosfatasa alcalina (FAL), una enzima hidrolítica con una actividad máxima cuando el pH
es alcalino, se encuentra en la sangre en diferentes formas, que proceden principalmente de
los huesos y el hígado, pero también de otros tejidos como los riñones, la placenta, los
testículos, el timo, los pulmones y los tumores. Se observa un aumento en la actividad
fisiológica durante el crecimiento óseo en la infancia y el embarazo, mientras que el aumento
de la actividad patológica está asociada especialmente a las enfermedades hepatobiliares y
óseas. En las enfermedades hepatobiliares indican una oclusión del tracto biliar, como en la
colestasia causada por cálculos biliares, tumores o infecciones. También se observa un
aumento de los valores en las hepatitis infecciosas. En las enfermedades óseas, el aumento
de la actividad de la FA es una consecuencia del aumento de la actividad osteoblástica, como
por ejemplo en la enfermedad de Paget, la osteomalacia (raquitismo), las metástasis óseas y
el hiperparatiroidismo.
MÉTODO
Test cinético y fotométrico de acuerdo con IFCC (International Federation of Clinical
Chemistry and Laboratory Medicine).
PRINCIPIO
p − nitrofenilfosfato + 𝐻2O𝐹𝐴 → fosfato + p − nitrofenol
Reactivos Componentes y concentraciones
R1:
2-amino-2-metil-1-propanol pH 10,4 1,1 mol/L
Acetato de magnesio
2 mmol/L
77
Sulfato de cinc
0,5 mmol/L
HEDTA
2,5 mmol/L
R2:
p-nitrofenilfosfato
80 mmol/L
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS
Los reactivos se pueden conservar a una temperatura de 2 a 8 °C hasta el final del mes de
caducidad indicado en el envase, siempre que se evite la contaminación una vez abiertos los
frascos. No se deben congelar los reactivos. Protéjase el reactivo 2 de la luz directa.
Eliminación de residuos
Obsérvese la normativa legal al respecto.
Advertencias y medidas de precaución
1. Los reactivos contienen azida de sodio (0,95 g/L) como preservo. No ingerir. Evitar el
contacto con la piel y las mucosas.
2. Durante la reacción se origina p-nitrofenol. Tóxico en caso de inhalación, ingestión o
contacto con la piel. En caso de contacto de la piel o las mucosas con la mezcla de reactivo,
lavar con agua abundante.
3. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos y observar todas las medidas de
precaución necesarias para la manipulación de reactivos de laboratorio.
REPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Procedimiento del substrato
Los reactivos ya están listos para usar.
Procedimiento de medida con reactivo de uso y muestra
Mezclar 4 partes de R1 + 1 parte de R2 (p. ej. 20 mL R1 + 5 mL R2) = reactivo de uso
ESTABILIDAD AL ALMACENAMIENTO:
4 semanas de 2 a 8 °C 5 días de 15 a 25 °C
¡Protéjase el reactivo de uso de la luz directa!
78
MUESTRAS
Suero o plasma heparina
¡No deben utilizarse muestras hemolíticas!
ESTABILIDAD AL ALMACENAMIENTO
7 días de 20 a 25 °C
7 días de 4 a 8 °C
2 meses a -20 °C
¡Desechar las muestras contaminadas!
ESQUEMA DE LA PRUEBA
Hay disponibles a petición aplicaciones para sistemas automáticos.
Longitud de onda: Hg 405 nm, (400 - 420 nm)
Paso óptico: 1 cm Temperatura 37 °C
Método de medida: Respecto blanco de reactivo
PROCEDIMIENTO DEL SUBSTRATO
Blanco Muestra/ Calibrador
Muestra/Calibrador - 20 µL
Agua destilada 20 µL -
Reactivo 1 1000 µL 1000 µL
Mezclar, incubar aprox. 1 min. y, a continuación, añadir:
Reactivo 2 250 µL 250 µL
Mezclar, leer la absorbancia al cabo de 1 min. y poner en marcha el cronómetro. Volver
a leer la absorbancia al cabo de 1, 2 y 3 min.
PROCEDIMIENTO DE MEDIDA CON REACTIVO DE USO Y MUESTRA
Blanco Muestra/ Calibrador
Muestra/Calibrador 20 µL
Agua destilada 20 µL
Reactivo 1000 µL 1000 µL
79
Mezclar, leer la absorbancia al cabo de 1 min. y poner en marcha el cronómetro. Volver
a leer la absorbancia al cabo de 1, 2 y 3 min.
CÁLCULO CON FACTOR
A partir de las absorbancias interpretadas se calcula A/min. y se multiplica por el factor
correspondiente según la siguiente tabla: A/min x factor= actividad FA [U/l]
Procedimiento del
substrato
405 nm 3433
Procedimiento de
medida con reactivo de uso
y muestra
405 nm 2757
Con calibrador
ALP [U /L] =∆A /min Muestra
∆A /min Calibradorx Conc. Calibrador [U /L]
Calibradores y Controles
Para la calibración de sistemas fotométricos automatizados se recomienda el calibrador
DiaSys TruCal U.
Para el control de calidad interno deben medirse los controles DiaSys TruLab N y P con cada
serie de muestras.
Nº de pedido Tamaño del envase
TruCal U 5 9100 99 10 063
5 9100 99 10 064
20 x 3 mL
6 x 3 mL
TruLab N 5 9000 99 10 062
5 9000 99 10 061
20 x 5 mL
6 x 5 mL
TruLab P 5 9050 99 10 062
5 9050 99 10 061
20 x 5 mL
6 x 5 mL
80
CARACTERÍSTICAS
Rango de medida
El test es adecuado para medir actividades de FA que, como máximo, correspondan a un
A/min de 0,25.
Si se sobrepasa este valor, se recomienda diluir las muestras en una proporción 1/9 con
solución de NaCl (g/L) y multiplicar por 10 el resultado.
ESPECIFICIDAD/INTERFERENCIAS
No aparecen interferencias con ácido ascorbínico en cantidades de hasta 30 mg/dL, con
bilirrubina conjugada en cantidades de hasta 60 mg/dL, con bilirrubina no conjugada en
cantidades de hasta 25 mg/dL, hemoglobina hasta 100 mg/dL y con lipidemia hasta 2000
mg/dL de triglicéridos.
SENSIBILIDAD DEL TEST/LÍMITE DE PRUEBA
El límite inferior de prueba es de 2 U/L.
Precisión
En la serie n = 20 Valor medio
(VM) [U/L]
Desviación
estándar [U/L]
Coeficiente de
variación (CV) [%]
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
68,6
107
243
0,58
0,71
0,97
0,85
0,67
0,40
En la serie n = 20 Valor medio
(VM) [U/L]
Desviación
estándar [U/L]
Coeficiente de
variación (CV) [%]
Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3
69,2
104
238
1,37
1,22
2,40
1,99
1,08
1,01
COMPARACIÓN DE MÉTODOS
En la comparación de DiaSys Fosfatasa alcalina FS (y) con otro test comercial (x) se
obtuvieron los siguientes resultados con 104 muestras: y = 1,01 x - 1,51 U/L; r = 0,999
81
VALORES DE REFERENCIA
Adultos
Mujeres 20 - 50 años [U/L] 42 - 98
Hombres 20 - 50 años [U/L] 53 - 128
Mujeres > 60 años [U/L] 53 – 141
Hombres > 60 años [U/L] 56 - 119
sexo femenino sexo
masculino
1 – 30 días [U/L] 48 – 406 75 – 316
1 mes – 1 año [U/L] 124 – 341 82 – 383
1- 3 años [U/L] 108 - 317 104 – 345
4 - 6 años [U/L] 96 – 297 93 – 309
7 - 9 años [U/L] 69 – 325 86 – 315
10 -12 años [U/L] 51 – 332 42 – 362
13 -15 años [U/L] 50 – 162 74 – 390
16 -18 años [U/L] 47 - 119 52 - 171
82
ANEXO N° 9. Hojas de control interno
83
84
ANEXO N° 10. Hoja de control externo
85
ANEXO N°11. Oficio de aprobación del protocolo por el comité de bioética de la FCM.
86
ANEXO N°12. Presupuesto para la realización del proyecto
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E HISTOTECNOLOGICO
Recursos Cantidad Valor
unitario
Valor total
Kit Colinesterasa 2 40 80
Kit TGO 1 35 35
Kit TGP 1 35 35
Kit fosfatasa alcalina 1 13 13
Tubos rojos pq. 100u 1 12.50 12.50
Agujas vacutainer 21x1
(cj x100u)
1 8.38 8.38
Tubos de vidrio de 5ml 100 0.08 8
Torundas 1 5.50 5.50
Puntas de pipetas
amarillas
100 0.06 6
Puntas de pipetas azules 100 0.07 7
Capsula 1 0.30 0.30
Guantes de látex 1 7.10 7.10
Funda roja 4 0.25 1
Funda negra 2 0.25 0.50
Guardián 1 3.25 3.25
Couler 1 5.50 5.50
COSTO TOTAL 230.53
Elaborado por: Ximena Guanochanga (2017)
87
FOTOGRAFIAS
Empresa florícola
Realización de encuestas
88
Toma de muestras
Procesamiento de muestras