TOMA DE MUESTRAS EN MICROBIOLOGIA: IMPORTANCIA EN EL
DIAGNÓSTICO DE LAS INFECCIONES
Dra. Montserrat Ruiz GarcíaS. Microbiología
Hospital General Universitario de ElcheSeminario 17 de marzo de 2014
• Sociedad valenciana de Microbiología Clínica (SVAMC)– Ana Lloret Caballería (Coordinadora)– Manuel Canós Cabedo – Concepción Gimeno Cardona– Damiana González Granda– Pilar López García– Jose Miguel Nogueira Coito– Victoria Ortiz de la Tabla Ducasse– Gloria Royo García– Alberto Yagüe Muñoz
• Consellería de Sanitat– Francisca Almenar Roig– Gregorio Gómez Soriano
Manual de toma de muestras: Autores
Diagnóstico clínicoEstudio de síntomas y signos clínicos
Diagnóstico microbiologicoConfirmación de la etiología
Diagnóstico de las enfermedades infecciosas
• Demostración de la presencia del microorganismo
• De sus productos
• De la respuesta inmune
Diagnóstico microbiológico de las enfermedades infecciosas
Toma de muestras
“Toda al información diagnóstica que el
laboratorio de Microbiología puede
proporcionar,
DEPENDE DE LA CALIDAD DE LA MUESTRA
RECIBIDA”
El término calidad incluye
– Muestra apropiada– Bien recogida– Transporte adecuado
Toma de muestras en Microbiología
Indicadores de nivel de calidad (FASE PREANALÍTICA)
– Número de muestras rechazadas– Muestras contaminadas– Adecuación de las peticiones a las
muestras
Toma de muestras en Microbiología
“Es IMPRESCINDIBLE la comunicación entre el
personal sanitario y Microbiología para optimizar la
toma de muestras y aumentar la calidad en la fase
preanalítica”
Filiación y datos administrativos
Para evitar errores, es importante utilizar etiquetas
con CÓDIGO DE BARRAS
y comprobar que la etiqueta del volante coincide con la de la
muestra
VOLANTE DE PETICIÓNDATOS DEL PACIENTE
• El objetivo de este Manual es hacer recomendaciones sobre:– Muestras más adecuadas– Forma de recogida– Transporte– Conservación
• Señalando: – El material necesario– La técnica de obtención– El volumen– Número de muestras– Modo de transporte según características de
las muestras o microorganismos a investigar
Manual de toma de muestras: objetivo
OBJETIVOS
• Evitar el informe de resultados con escaso o nulo valor, o que provoquen confusión acerca del diagnóstico y tratamiento del paciente
• Prevenir los problemas de seguridad biológica que se puedan producir en el personal del laboratorio
CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS
• Muestra no etiquetada o etiquetada de forma que
pueda llevar a la confusión
• Transporte/almacenamiento inadecuado
• Tiempo excesivo desde la toma de la muestra
• Contenedor inadecuado, roto o no estéril
CRITERIOS DE RECHAZO
• Muestras con contaminación exterior evidente
• Muestras no adecuadas a la petición solicitada
• Cantidad insuficiente
• Muestra previamente manipulada
• Suero en tubo no primario
CRITERIOS DE RECHAZO
• Fecha de obtención
• Naturaleza del producto
• Localización exacta de la toma
• Procedimiento de extracción
• Indicar si se ha aplicado alguna técnica
especial: punción vesical, etc.
VOLANTE DE PETICIÓNDATOS DE LA MUESTRA
VOLANTE DE PETICIÓNDATOS CLÍNICO-EPIDEMIOLÓGICOS
• Fecha de comienzo de la enfermedad
• Sospecha diagnóstica
• Estado inmunitario
• Tto. antibiótico, aunque lo ideal es recoger la muestra antes de iniciarlo
• Determinaciones– CULTIVO: Bacterias Hongos Mycobacterias Anaerobios Mycoplasmas– VIRUS– SEROLOGÍA
• Indicar la sospecha de microorganismos poco habituales o exigentes
– Nocardia– Vibrio cholerae– Actinomyces– Brucella– Legionella
VOLANTE DE PETICIÓNÁREA PARA LA SOLICITUD
CARACTERISTICAS ESPECIALES DE LA TOMA DE MUESTRAS EN
MICROBIOLOGIA
• Sitio exacto de la lesión
• Aplicar precauciones universales
• Máximas condiciones de asepsia para evitar contaminaciones
• No poner en contacto con desinfectantes
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA GENERALIDADES
• Tomar lo antes posible
• Antes del tratamiento antibiótico
• Recoger preferentemente por aspiración en lugar de hisopos o torundas
• Cantidad adecuada
• Identificación correcta
OBTENCIÓN DE LA MUESTRA GENERALIDADES
UROCULTIVOS
• La muestra adecuada es la primera orina de la mañana
recogida en un contenedor estéril
• Procedimiento:
– Lavado de genitales
– DESECHAR LA PRIMERA PARTE DE LA MICCIÓN (FLORA
URETRAL)
– RECOGER LA SEGUNDA PARTE DE LA MICCIÓN
• La orina de los niños que no controlan los esfínteres debe
recogerse en una bolsa colectora
UROCULTIVOS
• El volumen mínimo debe estar entre 1 y 10 ml
– Hongos o micobacterias (20 ml)
– Parásitos (> 50 ml)
• Si no se procesa en una hora, mantener en nevera
• En catéteres permanentes no recoger del reservorio, hay que
pinchar con una aguja estéril en el catéter
COPROCULTIVOS
• Recoger la parte con moco, pus o sangre
• Cantidad necesaria: 1-2 gramos o 5-10 ml
• Si no se procesa en una hora, mantener en nevera;
salvo que se sospeche Shigella (en este caso, mantener
a temperatura ambiente)
COPROCULTIVOS
• Si es necesario recoger hisopos (neonatos o adultos
debilitados), utilizar medio de transporte
• Solicitar los estudios especiales indicando datos clínicos
y/o epidemiológicos:
– Clostridium difficile, Vibrio spp, Escherichia coli
O157:H7
PARÁSITOS EN HECES
• Tres muestras de tres días alternos
• Volumen: 2-4 gramos
• Si la muestra es líquida, hay que procesarla de inmediato y
si es sólida, puede mantenerse a 4ºC
• Indicar datos epidemiológicos (viajes, residencia en el
extranjero, etc)
• OXIUROS: Técnica de Graham (colocación de un celofán
transparente en los bordes del ano y después adherir en un
porta de cristal).
OXIUROS: TÉCNICA DE GRAHAM
EXTRACCIÓN DE HEMOCULTIVOS
HEMOCULTIVOS
1.- Rotular los frascos con las etiquetas del paciente, indicando si es la 1ª o la 2ª extracción
2.- Desinfección de los tapones de los frascos con un antiséptico
3.- Seleccionar la vena y desinfectar la zona de venipunción en círculos excéntricos, primero con etanol 70º(30 segundos), luego con povidona iodada (1 minuto). Dejar secar un minuto
HEMOCULTIVOS
4.- Utilizar guantes estériles para la extracción de sangre
5.- Inocular en cada frasco: aerobio (color azul) y anaerobio (color dorado) el volumen adecuado de sangre (8 ml) comenzando por el frasco anaerobio
6.- Agitar suavemente el frasco y enviarlo inmediatamente al servicio de Microbiología. En el laboratorio de Microbiología se deben introducir en la estufa de 37ºC.
FRASCOS DE HEMOCULTIVOS
Tubos y medios especiales para determinaciones serológicas en microbiología
TUBO AMARILLO (SUERO)
• Aspergillus• Borrelia• Brucella• Chagas (Trypanosoma cruzi)• Citomegalovirus (IgG,IgM)• Criptococo• Epstein-Barr (IgG,IgM)
/Monosticon/Paul-Bunnell• Fiebre Q o Coxiella Burnetti• Hepatitis A (IgG),crónica, aguda, B, C,
prevacunación, postvacunación• Herpes simple (IgG,IgM)• Hidatidosis• HIV• HTLV• Leishmania• Legionella• Mycoplasma• Parotiditis (IgG,IgM)• Parvovirus (IgG,IgM)• Proteus o Rickettsias• Rubeola (IgG,IgM)• Salmonella• Sarampión (IgG,IgM)• Sífilis, Lúes o RPR• Toxoplasma (IgG,IgM)• Varicela (IgG,IgM)• Western-blot VIH Y VHC
TUBO EDTA LARGO CON SEPARADOR(NÁCAR)
• Carga Viral o PCR, DNA, RNA…de– Hepatitis B– Hepatitis C– VIH
• Genotipo Hepatitis C• Resistencias genotípicas ( 2 tubos )• Tropismo VIH (V3)• PCR Citomegalovirus• PCR Enterovirus• PCR Herpesvirus
TUBO EDTA CORTO (VIOLETA)
• PCR Paludismo, plasmodium o malaria• PCR de Chagas o Trypanosoma cruzi
QUANTIFERON O IGRA’S
(TUBOS PARA DETERMINACIÓNTUBERCULOSIS)
( rojo, gris, violeta ) sin centrifugar
DETERMINACIONES EN MUESTRAS NO SEROLOGICAS
• Muestras que precisan medio especial de transporte:
– PCR de Chlamydias– Papilomavirus (HPV)– PCR de Gripe (frotis faríngeo y
nasal)• Heces para PCR de Norovirus• Orina para antígeno de Legionella y
Pneumococo (mínimo 10 ml.)
CHLAMYDIA
GRIPE
PAPILOMAVIRUS
HECES Y ORINA
DUDAS Y CONSULTAS
966 61 61 22(SEROLOGÍA)
TRACTO RESPIRATORIO
• Superior: Exudado faringo-amigdalino
– Utilizar medio de transporte
– Amígdalas y faringe posterior
– No tocar boca, lengua o úvula
• Inferior: Esputo
– Primera hora de la mañana en envase estéril
– Enjuagar la boca con agua
– Expectoración profunda, no saliva
– Si el procesamiento se retrasa más de una hora: nevera
– No almacenar más de un día
TRACTO GENITAL
• Exudado vaginal
– Utilizar torundas con medio de transporte
– No refrigerar. Almacenar a temperatura ambiente o en estufa a 37ºC
– Si hay sospecha de gonococo, Chlamydias o Mycoplasmas, obtener un exudado endocervical
• Exudado uretral:
– Utilizar torundas con medio de transporte
– No refrigerar. Almacenar a temperatura ambiente o en estufa a 37ºC
– Tomar antes de la primera micción de la mañana o después de una hora de la última micción
PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
• Ulceras y heridas
– Lavar previamente con suero fisiológico
– Recoger la muestra con jeringa y aguja. Si no hay
suficiente cantidad, se instila suero fisiológico y se
aspira
– Si esto no es posible, recoger en torunda
• Exantemas: Igual que las úlceras y heridas
• Abscesos
– Punción aspiración con jeringa y aguja. Inoculación en
medio para anaerobios
Laboratorio de Microbiología
• Jefe de Sección: Dra. Gloria Royo García• Facultativos:
– Pilar López García – Victoria Sánchez Hellín– Montserrat Ruiz García
• Supervisora: Minerva Conca
• Teléfonos: 966 61 61 21 (bacteriología) 966 61 61 22 (serología) 966 61 64 94 (supervisora)• E-mail: [email protected]