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Retrovirus: HIV 1 parte
Infecciones Virales Transmisibles por Vía Transfusional: Hitos, Paradigmas, Aprendizajes. Fundación Hemocentro Buenos Aires
Dra. Mirta Remesar
Laboratorio de ITT, Centro Regional de Hemoterapia
Dra. Andrea Mangano
Lab. Biología Celular y Retrovirus- CONICET
Hospital de Pediatría “Juan P. Garrahan”
7 de Noviembre de 2013
• Familia: Retroviridae
– subfamilia Lentiviridae
• HIV-1, HIV-2
Virus de la Inmunodeficiencia Humana (HIV)
• HIV-1, HIV-2
• Agente causal del Sindrome de
Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA)
(1983)
• Es un virus citolítico con tropismo por
células T CD4+ y macrófagos
Ciclo de Replicación del HIV-1
CD4
2. Transcripciónreversa
3. Integración
Desnudamiento
4. Ensamble
5.Brotación
1. Unión Transcriptasareversa
Integrasa
CCR5
CD4
CXCR4
6. Maduración
Proteasa
B, A/E, C, A/GD, Grupo O, HIV-2
HIV-2, A/G, G
B, A/B, A, A/E, C, D, FG, H, J, A/GA, Grupo O, HIV-2
C, A/E, BB/C, HIV-2
B, F, B/F, CA, C, A/G,
D, F, G, H, J, A/E,B, otros recombinantesGrupo O, N
B
McCutchan y col. 2000
SIVsm/HIVSIVsm/HIV--22
Sooty mangabeySooty mangabey
ORIGEN Y DISEMINACIÓN DE LA EPIDEMIA ORIGEN Y DISEMINACIÓN DE LA EPIDEMIA
•• HIVHIV--1 y HIV1 y HIV--22 •• Diferentes Diferentes
GorilaGorila
SIVcpz/HIVSIVcpz/HIV--11
Pan Pan trogloditestroglodites
•• HIVHIV--1 y HIV1 y HIV--22
•• HIVHIV--1 grupos1 gruposM, N, O, M, N, O, PP
•• HIVHIV--1 grupo M1 grupo Msubtipos y subtipos y
recombinantesrecombinantes
•• Diferentes Diferentes primatesprimates
•• Diferentes Diferentes introduccionesintroducciones
•• Diseminación Diseminación mundial mundial
Adaptada de Dr. Manuel Gomez Carrillo, CNRS
•HIV infecta células T CD4+ y del linaje de
macrófagos
•Monocitos
•Macrófagos
•Células dendríticas (piel)
INFECCIÓN POR HIV
•Células de la microgía (CNS)
•El virus produce una infección lítica de Céls. CD4+ y
una infección en macrófagos de tipo persistente y
productiva (bajo nivel)
•El virus altera las funciones de las células T y de los
macrófagos
Características del HIV-1
• Alta tasa replicativa (109- 10 10 partículas diarias)
• Tiempo de generación viral de 2.6 días con una
vida media de 6 horas.
• Tasa de mutación (1 sustitución por • Tasa de mutación (1 sustitución por
genoma/ciclo)
• Alta tasa de recombinación (3 a 30 rec/ciclo)
•• Rápida acumulación de variantes en órganos y tejidos Rápida acumulación de variantes en órganos y tejidos
•• Persistencia viral en reservoriosPersistencia viral en reservorios
�Historia de los métodos de tamizaje en donantes de
sangre
�Interpretación de pruebas confirmatorias de infección
�Historia natural de la infección: Etapas de la infección
�Incidencia de la infección: Estudios para definirla en una
población dada
�NAT en donantes de sangre: breve reseña de métodos y
algunos datos de detección de la infección en el mundo
Tamizaje en donantes de sangre
Las primeras pruebas para la detección de anticuerpos a-HIV fueron accesibles a principios de los años 80
Estaban basados en enzimo-inmunoensayos cuyos materiales antigénicos provenían de lisados virales materiales antigénicos provenían de lisados virales (primera generación)
La incorporación de antígenos recombinantes y péptidos específicos en los Elisas de segunda generación los hizo más estables y sensibles
Tamizaje en donantes de sangre
Posteriormente se incorporan los ensayos para detección combinada de HIV-1 y HIV-2, así como componentes antigénicos de HIV-1 grupo O
Los ensayos de tercera generación utilizan el principio de antígeno “sandwich”, el cual permite una menor dilución de la muestra y mejora la detección de anticuerpos IgM
Por lo tanto, se mejora la sensibilidad para la detección de anticuerpos en la sero-conversión temprana
Esquema de Elisa de formato de antígeno “sandwich” en fase sólida
Anticuerpos en la muestra
Antígeno en fase sólida
Conjugado: antígeno marcado
Sustrato
Tamizaje en donantes de sangre
Incorporación de Elisa para antígeno p24, con el objeto de detectar la infección temprana
Incorporación de ensayos de cuarta generación o “combos”, es decir, de detección simultánea de “combos”, es decir, de detección simultánea de anticuerpos y antígeno p24
Estas pruebas detectan la infección por HIV entre 1 y 14 días antes que los ensayos de tercera generación (sólo anticuerpos)
Tamizaje en donantes de sangre
Hacia fines de los años 90 se introducen en E.E.U.U. las pruebas para detección de ácidos nucleicos para HCV y HIV (NAT) para la reducción del periodo de ventana infeccioso
En los primeros tres años de NAT para HIV en dicho país, se encontraron 12 donaciones positivas para RNA de HIV-1 (negativas para p24 y anticuerpos) en 37 millones de donaciones
Período de ventana¿Cómo definirlo?: Período transcurrido entre la infección y la posibilidad de detectarla
�56 días con las pruebas para detección de anticuerpos de primera generación
�33 días con las pruebas de segunda generación�33 días con las pruebas de segunda generación
�22 días con las pruebas de tercera generación
�16 días con pruebas para p24 o “combo”
�11 días con pruebas para RNA de HIV por NAT en minipool