cromatografÍa de gel filtraciÓn columna de vidrio lana de vidrio gel sephadex g-25 1 2 3 1.- k 3...
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CROMATOGRAFÍA DE GEL FILTRACIÓN
Columna de vidrio
Lana de vidrio Gel Sephadex G-25
1 2 3
1.- K3Fe(CN)4
2.- Hemoglobina
3.- Blue Dextrano
MATERIALES
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PROCEDIMIENTO:
1) Coloque lana de vidrio en el fondo de la columna y apisonela con una varilla de vidrio.
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2) Vierta la suspensión de gel , agitando esporádicamente con la varilla para resuspender el gel. Verifique que el tapón de la columna está cerrado.
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3) Deje sedimentar el sólido (gel) y luego abra el tapón para descartar el líquido en exceso (el menisco del líquido debe quedar a la altura del gel).
líquido
lana de vidrio
Gel
(12 cm de altura)
3
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4) Aplique gota a gota la muestra con la columna tapada. Acerque la punta de la pipeta al gel para que no se deforme el frente del gel con el agregado de muestra.
Muestra:
Mezcla de Proteína (roja)
+ Sal (amarilla)
4
Punta de la pipeta
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5) Siga agregando buffer con la columna destapada, para que el frente siga avanzando. Observe la separación de los componentes de la mezcla. Recoja fracciones de 2ml a la salida de la columna.
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