CRECIMIENTO MICROBIANO

Es el incremento ordenado e

irreversible de todos los constituyentes

celulares

Que permite la multiplicación de las

células

Como resultado final existirá un

crecimiento de numero de individuos

y aumento poblacional

CRECIMIENTO INDIVIDUAL.

• Aumento de masa y tamaño de las células

Bacterias y levaduras

• Aumento del volumen y del largo de las hifasHongos

CRECIMIENTO POBLACIONAL.

Por división celular mediante fisión

binaria, gemación o gemiparidad

Bacterias y

levaduras

Por germinación de las esporas

producidas durante los procesos

reproductivos

Hongos

Velocidad de

crecimiento

Es el cambio en el número de células o en la masa celular

experimentado por unidad de tiempo.

• En Microbiología el crecimiento se define más como un incremento en el número de células, más que en el incremento de tamaño de las células individuales.

• El crecimiento es un componente esencial en la función microbiana, ya que en la naturaleza cualquier célula tiene un período de vida finito y la especie se mantiene como resultado del crecimiento continuo de la población.

• El crecimiento de la mayoría de los microorganismos ocurre por el proceso de división celular, por ejemplo en las bacterias a través del proceso de fisión binaria.

• El tiempo necesario para completar un ciclo de crecimiento celular en las bacterias es muy variable y depende de varios factores, tanto nutricionales como genéticos.

• Bajo las mejores condiciones nutritivas la E. coli puede completar el ciclo en unos 20 minutos.

CURVA DE CRECIMIENTO Los estados metabólicos de las

células microbianas se dividen en 4 fases principales:

• Fase de latencia.• Fase de logarítmica.• Fase estacionaria.

• Fase de muerte.

• Denominada también fase de juventud fisiológica.

• Corresponde al período de adaptación o de ajuste de las células del microorganismo al medio.

• Durante ésta fase la división es escasa o nula, sin embargo hay una manifestación de intensa actividad metabólica, y también existe mayor susceptibilidad a los agentes físicos y químicos.

Fase de

latencia

• Denominada fase exponencial de crecimiento y corresponde con el período de crecimiento balanceado.

• La velocidad específica de crecimiento es máxima y la población se incrementa a ritmo constante.

• Depende del tipo de especie bacteriana y de los factores nutricionales y ambientales del cultivo.

FASE LOGARÍTMICA

FASE ESTACIONARIA

• Corresponde al período en el cual el número de células por unidad de volumen se mantiene constante, aunque eventualmente puede ocurrir una disminución de células viables.

• El efecto se debe al agotamiento de los nutrientes, y acumulación de productos del desecho metabólico como son los alcoholes, ácidos orgánicos y otras sustancias, que producen variaciones del pH, osmolaridad y otros.

• El resultado es la disminución de la velocidad de crecimiento, hasta que finalmente cesa, correspondiendo al inicio de la fase de declinación o muerte. En este período las células son más resistentes a los agentes físicos y químicos.

Fase de muerte

Corresponde al período en el cual ocurre una disminución de las células vivas en forma exponencial, debido a las condiciones críticas del medio, las células que se están muriendo se elongan, se hinchan o se distorsionan de forma anormal debido a una disminución de las reservas energéticas

Para el estudio de las reacciones metabólicas y fisiológicas de las bacterias

necesario cultivarlas

Son mezclas de sustancias que proporcionan en forma asimilable todos los elementos necesarios

para su crecimiento y multiplicación.

MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS DE CULTIVO

Para la preparación de un medio de cultivo se debe tomar en cuenta

Los microorganismos son diferentes y poseen

diferentes requerimientos nutricionales y ambientales

Para el cultivo correcto de un microorganismo determinado es necesario conocer sus exigencias nutritivas y suministrarlas en los medios de cultivo

con los nutrientes esenciales en la forma y proporción adecuadas.Se debe tomar en cuenta que la preparación de medios de cultivo deben ser

anoxénicos o puros y esto requiere la puesta en práctica de técnicas asépticas.

Si se toma el debido cuidado en la preparación de los medios de cultivo, resulta relativamente fácil cultivar en el laboratorio muchos tipos de

microorganismos.

TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Naturales o empíricos Sintéticos Semisintéticos

MEDIOS NATURALES EMPÍRICOS

Están constituidos por productos de origen animal o vegetal: gelatina, leche, huevo, suero, patata, levadura, etc.

Su composición exacta es desconocida, por su composición compleja y variable procedente de plantas y animales.

MEDIOS SINTÉTICOS

1. Son soluciones de cuerpos puros químicamente definidos, disueltos en agua destilada.

2. Poseen una composición constante, y se utilizan para estudios de crecimiento y metabolismo bacteriano.

1. Contienen sustancias de naturaleza química y productos de origen natural.

2. Actualmente son los medios de cultivo más utilizados para el aislamiento e identificación de la mayoría de microorganismos

3. En el comercio existen numerosos medios de cultivo deshidratados.

4. No existe un medio de cultivo universal que cubra las necesidades de todas las bacterias, la elección del medio de cultivo a utilizar para determinadas bacterias se hace tomando en cuenta las necesidades nutritivas de éstas y el hábitat natural del cual se recuperan.

MEDIOS SEMISINTÉTICOS

Clasificación

Medios generales.

Medios selectivos.

Medios de enriquecimiento.

Medios de diferenciación.

Medios de identificación.

Medios de multiplicación.

Medios de conservación.

Medios de transporte.

MEDIOS GENERALES O ENRIQUECIDOS

Estos medios de cultivo contienen nutrientes necesarios o que se les ha añadido ciertas sustancias para que en ellos puedan desarrollar la mayoría de microorganismos, permitiendo el crecimiento de bacterias Gram positivas, Gram negativas y hongos.

• Son aquellos que se utilizan para inhibir por completo el crecimiento de bacterias distintas de la que se quiere aislar y que están presentes en la muestra.

• La selectividad del medio se consigue por la adición de sustancias como las sales biliares, que inhiben a las formas cocáceas Gram positivas, o la azida sódica, que sólo permite el crecimiento de los cocos Gram positivos incluidos en el grupo enterococos.

• Los antibióticos y colorantes son otras sustancias que transforman los medios de cultivo en selectivos.

MEDIOS SELECTIVOS

Son aquellos que favorecen el crecimiento de algún tipo de bacterias que se encuentra en forma minoritaria en una mezcla de varios grupos bacterianos. Un ejemplo son los caldos selenito y tetrationato, que se utilizan para aumentar significativamente el número de Salmonella existente en un contenido intestinal. La selectividad de un medio de enriquecimiento no esta determinada solo por su composición química, a veces se obtiene el mismo efecto variando otros factores que intervienen en el crecimiento como la temperatura, pH, tensión de oxígeno, entre otros.

ENRIQUECIMIENTO

MEDIOS DE DIFERENCIACIÓN

• Son aquéllos que se utilizan para poner de manifiesto a las bacterias que dan positiva alguna propiedad bioquímica y que están presentes en una mezcla.

• El resultado de la acción bacteriana sobre el medio permite, como su nombre lo indica, diferenciar claramente aquellas bacterias (colonias) que dan positiva la reacción bioquímica, de aquellas otras que se comportan de forma inerte.

MEDIOS DE IDENTIFICACIÓN

Son aquellos que se utilizan para estudiar la acción de un solo tipo de bacterias frente a un determinado sustrato. Se diferencian de los medios de diferenciación, en que se siembran con bacterias pertenecientes a colonias aisladas. Se utilizan para los estudios de identificación de las bacterias.

MEDIOS DE MULTIPLICACIÓN

Son aquellos que poseen una composición determinada y óptima para el grupo de bacterias a las que va destinado, y que permitirá un máximo de aumento celular bacteriano en un mínimo de tiempo. Son medios utilizados en la industria, en la preparación de vacunas, de antibióticos, etc.

Son aquellos cuya composición favorece el mantenimiento de los microorganismos. Algunos incluyen glicerol y se guardan en congelador a –20 0C.

MEDIOS DE CONSERVACIÓN

Su finalidad es mantener en estado viable, aunque sin reproducción (o mínimamente), los microorganismos presentes en una muestra, permitiendo con posterioridad recuperar incluso a los que están minoritariamente presentes. Actualmente los medios de transporte más utilizados son: Medio de Stuart, medio Amies, medio Cary-Blair.

MEDIOS DE TRANSPORTE

FORMAS DE MEDIOS DE CULTIVO

• Hay medios de cultivo que pueden agruparse en más de uno de los apartados expuestos, que según su consistencia se diferencian en líquidos (caldos), semisólidos y sólidos (agares).

• Los medios semisólidos, que son aquellos que incluyen poca cantidad de agar (menor del 0.5%) y que generalmente se utilizan para estudiar la movilidad de los microorganismos.

MEDIOS SOLIDOS EN PLACASe preparan en cajas petri, la inoculación del espécimen o muestra se realiza por estriamiento en la superficie mediante un hisopo, asa de platino o varilla de vidrio estéril.

VENTAJAS• Permite obtener colonias aisladas.• Se puede realizar una identificación preliminar o

presuntiva de acuerdo a las características macroscópicas de las colonias.

• Permite realizar evaluaciones cualitativas de los microorganismos.

• Si se siembra volúmenes conocidos se puede realizar evaluaciones cuantitativas.

DESVENTAJAS• Se contamina muy fácilmente.• No permite inóculos muy grandes.• No permite tiempos prolongados de incubación

MEDIOS SOLIDOS EN PICO DE FLAUTA (INCLINADO o SLANT)

• Estos medios de cultivo se preparan en tubos de ensayo, su inoculación se realiza por siembra en profundidad y estriamiento en la parte inclinada.

VENTAJAS Soporta inóculos más grandes. No se contamina fácilmente. Permite mayores tiempos de incubación. Se utiliza para realizar pruebas de identificación bacteriana. Se utiliza como medios para conservar o mantener microorganismos.

DESVENTAJAS No se obtienen colonias aisladas. No se pueden realizar identificaciones preliminares. No permite realizar evaluaciones cualitativas ni cuantitativa

MEDIOS LIQUIDOSSe utilizan tubos de ensayo y medios de cultivo líquidos (caldos), su inoculación de realiza mediante asa de platino o aguja de inoculación.

VENTAJAS• Soporta inóculos más grandes.• No se contamina fácilmente.• Permite mayores tiempos de incubación.• Se utiliza como medios de enriquecimiento y para reactivar microorganismos.• En algunos casos permite una evaluación cuantitativa por el NMP

DESVENTAJAS• No se obtienen colonias aisladas.• No se pueden realizar identificaciones preliminares.• No permite realizar evaluaciones cualitativas.• Para el cultivo de virus y Rickettsias no son válidos los medios de cultivo

mencionados, ya que para su desarrollo dependen exclusivamente de células vivas.

Nombre del medio Indicado para: Componentes importantes

TSI Fermentación de azúcaresProducción de gasProducción de H2 S

Lactosa, Sacarosa yGlucosa

Sal de Fe y AmonioTiosulfato sódico

Rojo de Fenol (Indicador)

Citrato de Simmons

Utilización del carbono contenido en el citrato de sodio como fuente

de carbono para el crecimiento bacteriano

Citrato de Sodio

Azul de Bromotimol como indicador

AgarUrea

Determinar la producción de la enzima ureasa

UreaRojo de Fenol

como indicador

SIM Producción de H2 SProducción de Indol

Motilidad de la bacteria

Sal de Hierro y amonioTiosulfato sódico

TriptófanoAgar suficiente para hacerlo

semisólido

MEDIOS DE CULTIVO DIFERENCIALES

Nombre del medio

Indicado para

Componentes importantes

AgarTripticasa

Soya

Base para otros mediosPara crecimiento de

grampositivos y gramnegativosMantenimiento de cepas

Caseína Harina de soya

Cloruro de sodioAgar

AgarMuellerHinton

Para la realización deantibiogramaspor el método

de difusión en agar

Extracto de carneAlmidónCaseína

Agar

MEDIOS DE CULTIVO BASICOS

Nombre del medio

Indicado para Componentes importantes

AgarSangre

Para crecimiento de grampositivos y gramnegativos

Base de Agar tripticasa soya

Sangre animal o humana

Agar Tioglicolato

Para el cultivo de aerobios estrictos como también

anaerobios

Sustancias reductoras (tioglicolato y

cisteína)

MEDIOS DE CULTIVO ENRIQUECIDOS

Nombre del medio

Indicado para Componentes importantes

EMB Crecimiento de Bacterias

gramnegativas

AgarLactosaEosina

Azul de MetilenoAgar

SabouraudUtilizado para el

cultivo de hongos y levaduras

Nitrógeno de peptona

Agar Manitol

Es un medio selectivo para el aislamiento de Staphylococcus

Cloruro de sodio

MEDIOS DE CULTIVO SELECTIVOS DIFERENCIALES

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

Se elije el medio de cultivo que se va a preparar.

En este Caso BHI O AGAR SANGRE

Independiente que se vaya a preparar agar o caldo; es necesario tener en cuenta la fecha de vencimiento de los medios de cultivo y verificar los componentes del medio, antes de prepararlo.

PASO 1

PREPARACIÓN DE MEDIOS DECULTIVO

Antes de preparar el medio se realizan los cálculos pertinentes para el volumen que se quiera.

Teniendo los cálculos hechos, se procede a pesar la cantidad deseada. Tenga en cuenta el tipo de balanza que esta utilizando.

Con una espátula limpia pesar la cantidad deseada.

Asegúrese que la espátula no contenga restos de otros medios pesados anteriormente.

PASO Nº 3PASO Nº 2 PASO Nº 4

Verificar que el peso que salga en el Display de la balanza sea el número que se desea, hallado por medio del calculo.

Después de hidratar con el volumen de agua deseado, se calienta hasta que se disuelva completamente.

Se envía el medio al autoclave con cinta indicadora.

PASO Nº 5 PASO Nº 6 PASO Nº 7

Los medios de cultivo generalmente se sirven en las cajas, en una cámara de flujo laminar para evitar que se contamine el medio.

En su defecto el medio de cultivo se sirve al lado del mechero en las cajas de petri, colocando en cada una de ellas la cantidad necesaria.

Todo se realiza de manera aséptica.

Por último se dejan enfriar las cajas para que se solidifique el agar.

No se olvide de marcar las cajas de petri con el nombre del medio de cultivo, es muy importante que el marcaje sea correcto para evitar problemas en los resultados.

PASO Nº 8 PASO Nº 9 PASO Nº 10

El medio de cultivo en donde se desarrollan los microorganismos tiene que se estéril y estar libre de toda forma de microorganismos, una vez preparado, el método normal para una inmediata esterilización será por medio del autoclave, donde el vapor a presión sea el agente esterilizante.Los medios preparados y repartidos en cajas petri deben conservarse en atmósfera húmeda para evitar desecación y mantener en refrigeración de 4 a 8 oC. No se recomienda su almacenamiento prolongado para evitar alteraciones.

• En caso de utilizar medios de cultivo en tubos, se debe tapar con algodón no absorbente; los tubos de tapa rosca deben estar flojos, o sea, con 1/5 de vuelta para permitir la salida de aire y la entrada de vapor, una vez terminada la esterilización, estos deben cerrarse herméticamente, el medio de cultivo se debe retirar inmediatamente del autoclave al final de la esterilización pues si se deja mucho tiempo puede contaminarse.

CONTROL DE CRECIMIENTO MICROBIANO

• Los procedimientos para eliminar los microorganismos tienen gran importancia en la práctica microbiológica industrial, médica y diagnóstica, que necesitan de equipos, materiales y reactivos libres de microorganismos o que presenten un riesgo mínimo de infección y contaminación.

• La destrucción, disminución de su número o inhibición de los microorganismos. Se puede llevar a cabo con diferentes métodos en función del lugar a aplicar y el grado de erradicación microbiana que se pretende conseguir.

• Por ello es conveniente definir inicialmente una serie de conceptos:

desinfectante

• Es la sustancia química que inhibe o destruye microorganismos al aplicarla sobre material inerte, sin alterarlo significativamente

Sanitizació

n

• . Es el proceso por el cual la contaminación microbiana se mantiene en niveles bajos que no representan peligro, mediante procesos de lavado de los objetos inanimados.

Germicida

• Es una substancia que destruye los microorganismos patógenos.

Biocida

• Substancia que mata o elimina toda vida microbiana, es utilizado en dependencia del microorganismo, bactericida, fungicida, virucida.

Descontaminac

ión.

• Es la remoción de microorganismos de implicación patógena, realizada por esterilización o desinfección.

Biostático

• Es un agente que previene el crecimiento de los microorganismos pero no necesariamente los destruye, este termino puede ser utilizado en dependencia del microorganismo, bacteriostático, fungistático.

Asepsia

• Procedimientos utilizados para prevenir que los microorganismos progresen en un medio determinado (quirófanos, laboratorios de microbiología, preparación de agentes terapéuticos. etc.).

Antisépticos.

• Son agentes desinfectantes que pueden utilizarse sobre las superficies corporales con el fin de reducir la cantidad de flora normal y de contaminantes microbianos de carácter patógeno. Tienen un menor grado de toxicidad que los desinfectantes y generalmente. menor grado de actividad.

Antimicrobian

os.

• Son sustancias químicas producidas por microorganismos o sintetizadas químicamente. que a bajas concentraciones son capaces de inhibir, e incluso de destruir, microorganismos sin producir efectos tóxicos en el huésped.

desinfectante

• Es la sustancia química que inhibe o destruye microorganismos al aplicarla sobre material inerte, sin alterarlo significativamente.

Sanitizació

n.

• Es el proceso por el cual la contaminación microbiana se mantiene en niveles bajos que no representan peligro, mediante procesos de lavado de los objetos inanimados

Germicida.

• Es una substancia que destruye los microorganismos patógenos.

• . Es un agente que previene el crecimiento de los microorganismos pero no necesariamente los destruye, este termino puede ser utilizado en dependencia del microorganismo, bacteriostático, fungistático.

Biostático

• . Substancia que mata o elimina toda vida microbiana, es utilizado en dependencia del microorganismo, bactericida, fungicida, virucida

Biocida

• . Es la remoción de microorganismos de implicación patógena, realizada por esterilización o desinfección.Descontaminación

• Es un término que se aplica a los procedimientos utilizados para prevenir que los microorganismos progresen en un medio determinado (quirófanos, laboratorios de microbiología, preparación de agentes terapéuticos. etc.).

Asepsia.

• Son agentes desinfectantes que pueden utilizarse sobre las superficies corporales con el fin de reducir la cantidad de flora normal y de contaminantes microbianos de carácter patógeno. Tienen un menor grado de toxicidad que los desinfectantes y generalmente. menor grado de actividad.

Antisépticos

• s. Son sustancias químicas producidas por microorganismos o sintetizadas químicamente. que a bajas concentraciones son capaces de inhibir, e incluso de destruir, microorganismos sin producir efectos tóxicos en el huésped.

Antimicrobiano

• Es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida microbianas, incluyendo bacterias, hongos y sus esporas así como de los virus.

• En la práctica todo proceso de esterilización tiene 1 x10-6 probabilidades de fallar

ESTERILIZACIÓN

Métodos de esterilización

Agentes físicos

Calor seco

Calor húmedo

Autoclavado

TindalizaciónAgentes químicos

CALOR SECO

• La destrucción de los microorganismos se realiza a:

30 minutos a 180 0C60 minutos a 170 0C2 horas a 160 0C. • Este proceso se utiliza para

esterilizar materiales o sustancias resistentes al calor como vidrio y metales.

• Se utiliza el esterilizador

CALOR HÚMEDO

• Calor en forma de vapor de agua.• Proceso es más eficaz que por calor seco.• Se utiliza el autoclave:• Presión: 15 psi• Temperatura:121 oC /126 oC/ 134 oC• Tiempo: 15 a 20 min/10/ min/3 min• Ventaja: mata todas las formas

vegetativas y esporuladas.• Usada para: medios de cultivo,

materiales, sustancias.

AUTOCLAVADO

TINDALIZACIÓN

• Esterilización intermitente.Temperatura: 56-100 oCTiempo: 30 minutosIntervalos cada 24 horas T ambiente a 37 oC.• Ventaja: destrucción de los microorganismos

sin alterar la composición química del material.

• Desventaja: las esporas germinan, únicamente sensible para las bacterias.

Flameado

Es un procedimiento simple y eficaz, consiste en la exposición de un objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia. Se esteriliza de esta forma, p. ej. ansas de cultivo de siembra.

Incineración

Es el mejor sistema para esterilizar todas aquellos productos en los que no importe su destrucción, p. ej. material biológico

• Es un proceso usado para remover los microorganismos y partículas microscópicas de soluciones termolábiles, aire y otros gases.

• Los disponibles en el mercado presentan poros de 0,0005 a 1 m.

• Muy utilizadas son las membranas filtrantes de poro 0.45 m que se utilizan para remover bacterias, levaduras y mohos de líquidos biológicos o farmacéuticos.

FILTRACIÓN

LUZ ULTRAVIOLETA

• Lámparas germicidas con vapor de Hg a baja presión son utilizadas para generar luz UV, la longitud de onda más adecuada es de 240 a 280 nm.

• Se utiliza en: Las antesalas de áreas hospitalarias críticas (Ej. quirófanos). Cabinas de seguridad biológica Preparación de vacunas Plásticos de uso farmacéutico Desinfección de agua. • No es aplicable en materiales o sustancias opacas debido a su bajo

poder de penetración. • El personal expuesto deberá protegerse los ojos y manos para evitar

lesiones oculares y dérmicas.

RADIACIONES IONIZANTES

Se utilizan diferentes tipos de radiación que incluye:• El microondas• Rayos gamma• Rayos X • Haz de electrones. • Se utilizan sobre todo en procesos industriales

para esterilizar dispositivos quirúrgicos, guantes, jeringas, suturas, medios de cultivo, etc.

AGENTES QUÍMICOS

• es esporicida, es efectivo en materiales orgánicos y produce productos finales no tóxicos, por lo que es muy utilizado en las industrias de alimentos y bebidas, y para esterilización en frío instrumental quirúrgico, se utiliza en concentración al 0.2%.

ACIDO PERACETICO

• Soluciones al 2% se utilizan para esterilizar equipo quirúrgico sobre todo en oftalmología, otorrinolaringología y los utilizados en terapia respiratoria.

GLUTARALDEHIDO

GAS VAPOR ESTERILIZANTES

oxido de etileno (eto)

formol o formaldehIdo

DiOxido de cloro

PEROXIDO DE HIDROGENO GAS PLASMA OZONO

SELECCION DE ESTERILIZANTES

Actividad• Bactericida,

esporicida, tuberculicida, fungicida y virucida.

Rapidez de acción• Lograr una

esterilización en corto tiempo.

Penetración: • Buena

penetración del empaque y el espacio interior del instrumental

Produce pequeños cambios en la apariencia o función de los materiales o instrumentales después de repetidos ciclos de esterilización.

Compatibilidad

No presenta riesgos a la salud y medio ambiente.

No tóxico

Resistencia de materiales orgánicos

No pérdida de los materiales orgánicos.

Adaptabilidad

Aplicable a pequeñas y largas

aplicaciones.

• Facilidad y exactitud de monitoreo del tratamiento.Monitoreo

• Razonable costo por equipamiento, instalación y operación.

Costo-eficiencia:

DESINFECCIÓN• En este proceso se eliminan los agentes patógenos

reconocidos, pero no necesariamente todas las formas de vida microbianas. (no elimina las esporas).

• Es un término relativo, donde existen diversos niveles de desinfección, desde una desinfección química, a una mínima reducción del número de microorganismos contaminantes. Estos procedimientos se aplican únicamente a objetos inanimados.

• Se aplica en circunstancias en que la esterilización no es necesaria o es impracticable. Los más comunes son:

COM

PUES

TOS

INO

RGÁN

ICO

S

NITRATO DE PLATA Y DERIVADOS ARGENTICOS.

DERIVADOS MERCURIALES

PERMANGANATO DE POTASIO

COMPUESTOS PEROXIDOS

DERIVADOS CLORADOS

DERIVADOS YODADOS

COM

PUES

TOS

ORG

ÁNIC

OS

ALCOHOLES

FENOLES

CLORHEXIDINA

DETERGENTES ANIÓNICOS

CLORURO DE BENZALCONIO Y

CETRIMIDA

COMPUESTOS DE AMONIO CUATERNARIO (QACs)

GLICOLES. PROPILENGLICOL Y ETILENGLICOL

SELECCION DE DESINFECTANTES

Los siguientes ítems deben ser considerados para seleccionar un desinfectante.

Tipo y números de microorganismos presentes.

Tipo y cantidad de materia orgánica presente.

Tiempo de contacto.

Tipo de superficie a desinfectar.

Tipo de agua a utilizar.

Aceptabilidad y seguridad medioambiental del producto

Actividad residual

Antimicrobianos

• En relación con el tipo de microorganismo que inactivan, se clasifican en:

Antibacterianos antivirales

antiprotozoarios antifúngicos.

Antimicrobianos

• Es el término más aceptado, pues incluye compuestos obtenidos a partir de microorganismos (antibióticos) y los producidos por síntesis química (quimioterápicos).

• Los antimicrobianos ejercen su acción de forma específica sobre alguna estructura o función microbiana.

• Poseen una elevada potencia biológica, es decir, que inhiben o destruyen las bacterias a muy baja concentración lo cual les diferencia de otras sustancias con acción antimicrobiana.

CLASIFICACIÓNPOR SU EFECTO ANTIMICROBIANO

• (impiden el desarrollo y multiplicación de las bacterias sin destruirlas.)BACTERIOSTATICOS

• Su acción es letal, produciendo la lisis bacteriana, con efectos irreversibles

BACTERICIDAS

• Moléculas que son activas sobre un número amplio de especies bacterianas (ej. tetraciclinas).

AMPLIO ESPECTRO

• cuando tienen acción sobre un número limitado de especies (ej. macrólidos).

ESPECTRO INTERMEDIO

• Son activos sobre un pequeño número de especies bacterianas (ej. glucopéptidos).

ESPECTRO REDUCIDO

POR EL ESPECTRO

• Cada familia o grupo de antibacterianos tiene una forma característica y preferente de acción en relación con la estructura química que posean, pueden actuar:

POR EL MECANISMO DE ACCIÓN

Inhibición de la síntesis de la pared.

Alterando la permeabilidad de la

membrana citoplasmática de la

bacteria.

Inhibiendo la síntesis proteica.

Bloqueando la síntesis de los ácidos nucleicos

Interfiriendo las vías metabólicas.

ANEXOS

Toma de colonias para la siembra de bacterias por estriamiento

SIEMBRA POR AGOTAMIENTO PARA AISLAMIENTO DE COLONIAS

Inoculación primaria Estrias en ángulos rectos Estrias para producir uncrecimiento en enrejado.

OTROS TIPOS DE SIEMBRA

TECNICAS DE INOCULACION DE ACUERDO AL TIPO DE CULTIVO

Se distribuyen en diferentes formas:

•Tubos de ensayo•Cajas petri•Placas Petriflim

CULTIVO EN CALDO

Líquido preparado para el desarrollo y estudio de las bacterias y otros microorganismos, muchas vacunas se han conseguido a partir de caldos de cultivo.

INOCULACIÓN EN MEDIOS DE PICO DE FLAUTA

Siembra en medios de pico de flauta

OTRAS TECNICAS DE AISLAMIENTO EN PLACAS

CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO EN MEDIOS SOLIDOS EN PLACA PETRI

• La siembra se realiza por estriamiento. Para una mejor observación de las colonias es preferible utilizar dispositivos de aumento como lupas o estereoscopios, se debe observar a contra luz o con luz reflejada. Es necesario tomar en cuenta que las características son diferentes en cada medio de cultivo.

• TAMAÑO. Se determina su diámetro promedio en mm.• FORMA. Punteada, circular, filamentosa, irregular, fusiforme.• ELEVACION. Plana, elevada, convexa, pulvinada, umbilicada.• BORDES. Lisa, ondulada, lobulada, filamentosa, estriada.• COLOR. Blanco, cremoso, amarillo verde, etc.• BRILLO. Brillante, mate.• CRECIMIENTO. Escaso, moderado, abundante.• CONSISTENCIA. Seca, viscosa, pastosa.• HEMOLISIS. Alfa, beta, gamma. (solo es aplicable en agares que

contienen sangre).

CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO EN MEDIOS INCLINADOS (SLANT)

La siembra se realiza por estriamiento a lo largo de la parte inclinada del medio de cultivo y podemos observar el crecimiento:

• Filiforme• Espinosa• Punteada• Arborescente• rizoide.

CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO EN MEDIOS LIQUIDOS

• La siembra se realiza por inoculación de los microorganismos en un punto adecuado de la pared interna del tubo que contiene el medio líquido o caldo de cultivo y podemos observar el crecimiento:

• Formación en la superficie de un anillo• Membrana• Película• Presencia en el fondo del tubo de sedimento• Crecimiento en el medio produciendo una turbidez.

CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO EN MEDIOS SEMISOLIDOS

• La siembra se realiza por picadura en el medio de cultivo y podemos observar el crecimiento:

• Filiforme• Granulosa• Papiliforme• Vellosa• Arborescente.

Toma de colonias para la siembra de bacterias por estriamiento

SIEMBRA POR AGOTAMIENTO PARA AISLAMIENTO DE COLONIAS

Inoculación primaria Estrias en ángulos rectos Estrias para producir uncrecimiento en enrejado.

OTROS TIPOS DE SIEMBRA

Siembra en medios de pico de flauta

CULTIVO DE ANAEROBIOSSiembra en profundidad

OTRAS TECNICAS DE AISLAMIENTO EN PLACAS

MORFOLOGIA DE COLONIAS EN PLACA

MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS EN PLACA DE PETRI (por inversión)

AGAR SANGRE EN PLACA DE PETRI (por estriamiento)

EN PLACAS PETRIFILM