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CONTROL DEL CRECIMIENTO
MICROBIANO. ESTERILIZACIÓN Y
DESINFECCIÓN. MODOS DE ACCIÓN.
Dr. Carlos A.Azañero Díaz
Biólogo - Microbiólogo Departamento de Biología, Microbiología y Biotecnología
Facultad de Ciencias
Universidad Nacional del Santa
DEFINICIÓN DE TÉRMINOS
ESTERILIZACIÓN
DESINFECCIÓN
AG. FÍSICOS
AG. QUÍMICOS
CALOR:
Seco
Húmedo
RADIACIONES:
Luz Ultravioleta
Radiaciones Ionizantes
AGENTES MECÁNICOS:
Filtración
Ultrasonidos
AGENTES FÍSICOS
LÍQUIDOS (Desinfectantes)
GASEOSOS:
Óxido de Etileno
Peróxido de Hidrógeno (Plasma Gas)
Formaldehido
Glutaraldehido
AGENTES QUÍMICOS
LA ACCIÓN LETAL DEL CALOR ES UNA RELACIÓN DE TIEMPO Y TEMPERATURA
La mayoría de bacterias, levaduras y hongos
80oC , 5-10 min
Mycobacterium tuberculosis
58oC , 30 min
Mycobacterium tuberculosis
59oC , 20 min
Mycobacterium tuberculosis 65oC , 2 min
Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis
60oC , 60 min
La mayoría de esporas patógenas
100oC , pocos min
H.E.P.A / U.L.P.A.:
Los filtros H.E.P.A (High efficiency Particulate Air) son filtros descartables de medio
filtrante seco y extendido.
Eficiencia mínima de 99,97 %: (penetración máxima del 0,03 %) en aerosoles de
0,3 micrones generados térmicamente (Norma MILSTD-282).
Los filtros U.L.P.A. (Ultra Low Penetration Air) son filtros con características
similares a los filtros H.E.P.A.
Eficiencia mínima de 99,999 % (penetración máxima inferior al 0,001 %) para
partículas de un tamaño entre 0,1 y 0,2 micrones.
Se utilizan en sectores hospitalario, industria farmacéutica, industria alimenticia,
industria química, industria veterinaria, cabinas de pintura, etc.
AGENTE ANTIMICROBIANO Sustancia química que mata o inhibe el desarrollo de los
microorganismos.
Un agente es cida cuando esta a altas concentraciones. Según los organismos que matan.
Bactericidas Fungicidas Algicida.
Un agente es estático cuando esta a
bajas concentraciones.
Bacteriostáticos
Fungistáticos
Algistaticos
Características generales de los agentes antimicrobianos
Varían en su toxicidad selectiva. 1. Algunos actúan de modo
selectivo y tienen efectos similares sobre células de todos los tipos.
2. Otros son mucho mas selectivos, son especialmente utilizados como agentes quimioterapicos.
EFECTOS DE LOS AGENTES ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO MICROBIANO
Efecto Bacteriostático:
Se observa cuando el crecimiento se inhibe,
pero las células no mueren.
Efecto Bactericidas:
Estos evitan la proliferación e inducen la muerte pero no tiene lugar la lisis o ruptura celular.
Efecto Bacteriolítico.:
Provocan la muerte celular por lisis.
Susceptibilidad relativa de los microorganismos
a los agentes antimicrobianos
3 grupos:
1º Formas vegetativas de bacterias y hongos, virus con envolturas.
2º Micobacterias, virus desnudos sin envoltura.
3º Formas de resistencia de bacterias y hongos (esporas).
PRIONES (EJC)
ESPORAS BACTERIANAS (Bacillus spp., Clostridium spp.)
MICOBACTERIAS (Mycobacterium tuberculosis)
VIRUS PEQUEÑOS SIN ENVOLTURA (Poliovirus)
BACTERIAS GRAMNEGATIVAS (Pseudomonas spp.)
HONGOS (Aspergillus spp., Candida spp.)
VIRUS MEDIANOS SIN ENVOLTURA (Adenovirus)
BACTERIAS GRAMPOSITIVAS (Staphylococcus spp.)
VIRUS CON ENVOLTURA (HIV, VHB)
Rela
ció
n d
ecre
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nte
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esis
tencia
NIVEL ALTO:
Glutaraldehido y formol.
NIVEL INTERMEDIO:
Alcoholes, halógenos, fenoles y yodóforos.
NIVEL BAJO:
Mercuriales, detergentes, clorhexidina y hexaclorofenol.
Según el nivel de actividad de los compuestos químicos.
Agentes desinfectantes
Efecto de la concentración del agente de
control
Tiempo (minutos)
Efecto de diferentes concentraciones de fenol sobre una población
de E.coli.
La temperatura
Tiempo
Efecto de la temperatura en el control de E.coli
con fenol a una concentración de 4,62 g/l
DESINFECCION ANTISEPSIA
Tiene por objeto destruir los microorganismos patógenos PRESENTES EN OBJETOS.
Tiene por objeto destruir los microorganismos patógenos PRESENTES EN TEJIDOS VIVOS.
Permite eliminar, matar, inactivar o inhibir a un microorganismo patógeno.
Intenta evitar la transmisión de microorganismos patógenos.
Capaces de matar los microorganismos patógenos. Se oponen a la sepsis o putrefacción de
materiales vivos.
Presentar efectos tóxicos sobre tejidos vivos, por lo
que se suelen emplear sólo sobre materiales inertes.
Baja actividad tóxica hacia los tejidos vivos
donde se aplican.
Bacteriostático:
impide la multiplicación bacteriana (reversible).
Bactericida:
efecto mortal(irreversible).
Agentes que actúan sobre la membrana citoplasmática y pared celular:
- ácidos y álcalis.
- detergentes.
- hexaclorofeno
Agentes que actúan sobre proteínas y enzimas:
- Las sales de metales pesados, el calor, el fenol y el alcohol.
- Sustancias oxidantes.
- Cl y Hg
- Formol, glutaraldehido y oxido de etileno.
- Alcohol, acido fenico y fenoles sintéticos.
Agentes que actúan por alteración de los ácidos nucléicos:
- Formol, agentes alquilantes
- Radicales ionizantes
- Radiación UV
DESINFECTANTES MÁS USADOS:
1. Alcoholes
2. Agentes oxidantes (Cloro, Yodo, Ac. Paracético, H2O2)
3. Agentes surfactantes
4. Derivados fenólicos
5. Aldehídos
6. Oxido de etileno
Alcoholes: Etanol e isopropanol
• Mecanismo de acción: desnaturalización de proteínas y
alteraciones en la membrana
• Nivel intermedio
• Escasa toxicidad
• Usos:
– antisépticos cutáneos en forma de sol. acuosa al
70-90 %
– Desinfectantes de objetos semicríticos y no críticos
Inactivación por la materia orgánica
Derivados del Cloro: Hipoclorito sódico en sol. acuosa
• Mecanismo de acción: Oxidación
• Alto o bajo nivel (en función de la concentración)
• Muy tóxico y corrosivo
• Usos:
– Tratamiento de aguas
– Desinfección de superficies ambientales en general
Inactivación por la materia orgánica e inestabilidad
Yodo y Yodóforos (Povidona yodada)
• Mecanismo de acción: Oxidación (< Cl) y halogenación
• Nivel intermedio
• Poco tóxicos
• Usos: Antisépticos de mayor uso (piel intacta, heridas,
colutorios, lavado quirúrgico de manos,...)
Inactivación por la materia orgánica. Proteger de la luz
Acido paracético
• Mecanismo de acción: Oxidación y alteración de la
permeabilidad de la membrana
• Alto nivel y esterilizante
• Tóxico y corrosivo de metales
• Usos:
– Esterilización de endoscopios
– Desinfección de instrumental
Se mantiene activo en presencia de materia orgánica
Peróxido de hidrógeno
• Mecanismo de acción: Oxidación
• Potencia variable (en función de la concentración y Tª)
• Soluciones concentradas son tóxicas y corrosivas
• Usos:
– Desinfección de lentes de contacto (3%)
– Desinfección de equipos médicos limpios (6%)
– Esterilización con PLASMAGAS
PLASMAGAS
Agente esterilizante. H2O2 vaporizado, sometido a radiaciones de
alta energía Mecanismo acción: formación de radicales libres
(oxígeno atómico) de alto poder microbicida. Ventajas frente al óxido de etileno:
- No productos secundarios tóxicos.
- Alta eficiencia.
Agentes surfactantes (Tensoactivos)
• Mecanismo de acción: Alteración de la membrana
• Bajo nivel
• Poco tóxicos
• Uso: Antisépticos
Cloruro de benzalconio (Dvdo. Amonio cuaternario)
Paraclorometaxilenol
Jabones y Detergentes
Derivados fenólicos
• Mecanismo de acción: Alteración de la membrana y
coagulación de proteínas
• Nivel intermedio
• Usos:
– Descontaminación ambiental
– Antisépticos:
– Hexaclorofeno
– Triclosan
Aldehídos (Glutaraldehído y formaldehído)
• Mecanismo de acción: Agentes alquilantes
• Alto nivel y esterilizantes
• Muy tóxicos y potencialmente carcinogénicos
• Usos:
– Esterilización de materiales no resistentes al calor
(glutaraldehído)
– Desinfección de cabinas de seguridad biológica
(formaldehído)
Oxido de etileno
• Mecanismo de acción: Oxidación y alquilación
• Alto nivel y esterilizante con rapidez de efecto
• Muy tóxico (cámara hermética y posterior aireación)
• Usos: Esterilización de materiales no resistentes al calor ni
a la humedad
CLASIFICACIÓN DE LOS OBJETOS SEGÚN EL RIESGO
Críticos: Contacto con sistema vascular o tejidos estériles. (instrumentos quirúrgicos, agujas, catéteres) ESTERILIZACION Semicríticos: Contacto con mucosas o piel no intacta. (sondas urinarias, endoscopios, …) DESINFECCIÓN DE ALTO NIVEL O ESTERILIZACIÓN No críticos: Contacto con piel intacta (termómetros, silla odontológica) LIMPIEZA O DESINFECCIÓN DE NIVEL INTERMEDIO O BAJO.