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I.  INTRODUCCION:

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 Existen ciertas sustancias químicas que influyen negativamente sobre las bacterias,pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes: (Baynes & Dominica!, "#$$%

B')E*+-).)+-: agentes que impiden el crecimiento microbiano%B')E*++D'-: agentes que destruyen (matan las bacterias%

En general, sino s/lo nos referimos a las bacterias, sino a cualquier tipo demicroorganismos, 0ablamos respectivamente de agentes microbiost1ticos y microbicidas%

 '0ora bien, para una misma sustancia química, la línea de demarcaci/n entre un efectomicrobiost1tico y otro microbicida depende muc0as veces de la concentraci/n de dic0asustancia y del tiempo durante el que act2a%

  3/mo podemos saber que un microorganismo est1 4muerto56 El 2nico criteriov1lido es la p7rdida irreversible de la capacidad de divisi/n celular, es decir, de la p7rdidade viabilidad, y se suele comprobar empleando t7cnicas con placas de 8etri (es decir,confirmando que no crecen en medios s/lidos adecuados%

9eamos unas cuantas definiciones b1sicas%

Agentes esterilizantes: son aquellos que producen la inactivaci/n total de todas lasformas de vida microbiana (o sea, su 4muerte5 o p7rdida irreversible de su viabilidad%()ambi7n existen agentes físicos esteriliantes, como ya vimos en los dos capítulosanteriores%

Agentes desinfectantes (o germicidas):  son agentes (sobre todo químicosantimicrobianos capaces de matar los microorganismos pat/genos (infecciosos de unmaterial% 8ueden (y en muc0os casos suelen presentar efectos t/xicos sobre tejidosvivos, por lo que se suelen emplear s/lo sobre materiales inertes%

Agentes antisépticos: son sustancias químicas antimicrobianas que se oponen a lasepsis o putrefacci/n de materiales vivos% -e trata de desinfectantes con baja actividadt/xica 0acia los tejidos vivos donde se aplican%

!imioter"picos: son compuestos químicos con actividad microbicida o microbiost1tica,con una toxicidad suficientemente baja como para permitir su administraci/n a unorganismo superior, en cuyos fluidos corporales y tejidos permanece estable un ciertotiempo a concentraciones tales que los 0ace eficaces como antimicrobianos dentro delorganismo%

)odos los días usamos agentes químicos para controlar el crecimiento microbiano:

detergentes y jabones para el cuerpo y la ropa, cloraci/n de las aguas potables,antis7pticos para la piel y el tratamiento de 0eridas, desinfectantes para tratar superficiesen la industria y en los laboratorios, quimioter1picos y antibi/ticos para tratarenfermedades bacterianas, etc%

II.  O#$%TI&O:

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Determinar el efecto bactericida o bacteriost1tico de algunos agentes químicoscomo colorantes b1sicos, desinfectantes y metales pesados%

III.  'ARCO T%RICO:

as raones principales para controlar los microorganismos son: prevenir la transmisi/n

de enfermedades, evitar el deterioro de los alimentos y evitar la contaminaci/n tanto enprocesos industriales que requieran cultivos puros, como en laboratorios de diagn/stico oinvestigaci/n% (Baynes & Dominica!, "#$$%

Términos importantes a tratar sore el control de microorganismos:%sterilizaci*n es el efecto de destruir toda forma de vida (un objeto esteriliado es aquelque no posee ninguna forma de vida, ni siquiera esporasAgente antimicroial es un compuesto por lo general químico que mata o interfiere conel crecimiento y actividad de los microoganismos% -e clasifica de acuerdo a su aplicaci/ny a c/mo act2a%$% El germicida es un agente químico que mata los microorganismos pero no

necesariamente las esporas (ejemplo el bactericida, mata bacterias, el fungicida, mata0ongos y el viricida mata los virus%

"% El agente microiost"tico es uno que in0ibe el crecimiento de los microoganismos,pero no los mata (ejemplo los agentes bacteriost1ticos, in0iben crecimiento bacterial%

;% El desinfectante es un compuesto que mata microorganismos, pero nonecesariamente las esporas% -e aplica sobre objetos inanimados%

<% El antis7ptico es parecido al desinfectante, pero 7ste se puede aplicar sobre tejidobiol/gico (cuerpo%

 Condiciones +!e infl!,en en la acci*n microiana

=ay ciertos factores que tienen que ser considerados a la 0ora de aplicar agentesquímicos o físicos para el control de microorganismos%

Concentraci*n del agente +!-mico: >ientras m1s concentrado est7 el agentequímico, m1s r1pido se destruir1n los organismos%Intensidad del agente f-sico: uanto m1s intenso es el agente físico (calor oradiaci/n m1s r1pidamente mata a los micoorganismos%Tiempo de eposici*n: ' mayor tiempo de exposici/n, mayor es el n2mero deorganismos destruidos%Temperat!ra: ' mayor temperatura se acelera la destrucci/n de los organismos%N/mero de organismos: >ientras mayor sea el n2mero de microorganismos,m1s tiempo se requiere para destruirlos%Clase de organismo: as c7lulas vegetativas (las que est1n metab/licamente

activas son m1s susceptibles que las esporas bacteriales%%stado fisiol*gico de las cél!las: >ientras m1s viejas sean las c7lulas, m1sr1pido se destruyen%Nat!raleza del medio amiente: 'lgunos ambientes desfavorecen ladestrucci/n r1pida de los microorganismos, como por ejemplo los mediosviscosos%

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0ACTOR%1 U2'ICO1 3ARA %4 CONTRO4 D% 'ICROOR5ANI1'O1:

 %l fenol , s!s deri6ados:El fenol se ad0iere a superficies inertes y proporciona lo que se llama una

desinfecci/n residual% -u acci/n se prolonga por varias 0oras% os compuestos defenol pueden actuar como microbicidas o microbiost1ticos dependiendo de laconcentraci/n que se utilice% os fenoles poseen efecto germicida pues da?an lamembrana y desnaturalian las proteínas bacteriales% @no de los derivados delfenol se llama cresolA 7stos tienen un efecto germicida superior al fenol% oscresoles se usan en jabones líquidos (ej% lysol es un jab/n m1s un cresol% troderivado del fenol es el 0exaclorofeno, el cual se usa en jabones para las manos(en cirugía y 0ospitales% @n ejemplo de este 2ltimo es el 80iso0ex% El fenol y susderivados por lo general no matan esporas%4os alco7oles:os alco0oles da?an la membrana, desnaturalian las proteínas, disuelven lípidosy des0idratan la c7lula% a concentraci/n m1s efectiva de alco0ol es el #C y los

m1s utiliados son el alco0ol etílico e isopropílico%8al*genos:os 0al/genos act2an sobre los microorganismos oxidando las proteínass yenimas esenciales% o matan las esporas% os 0al/genos m1s comunmenteusados son el cloro y el iodo%El cloro Es uno de los desinfectantes m1s usados y es microbicida contra lamayoría de los microorganismos% -e usa para limpiar las aguas contaminadas y seaplica en agua potable%El iodo  -e utilia com2nmente como un antis7ptico y es uno de los mejores que0ay para la piel% -e aplica principalmente como tintura de iodo% Es microbicidapara la mayoría de los organismos% El iodo tambi7n se emplea como iod/foro(compuesto de iodo con otros agentes% os iod/foros no manc0an ni irritan, un

ejemplo es el betadine%'etales pesados , s!s comp!estos:a acci/n antimicrobial de los metales pesados y sus compuestos se debe a lacombinaci/n del i/n met1lico con proteínas y las enimas del microorganismo,da?ando así el sistema%Comp!estos de merc!rio os m1s importantes de este grupo son los org1nicoscomo: mercurocromo, metiolato y metafen% )odos estos se usan como antis7pticosy son principalmente microbiost1ticos%Comp!estos de plata  El m1s que se usa es el nitrato de plata en soluci/n al $Cy se usa en los ojos de los reci7n nacidos%Comp!estos de core  El sulfato de cobre se usa para controlar el crecimiento dealgas en las piscinas%

Tintes: 'lgunos tintes se usan como agentes selectivos en medios de cultivos por suefecto bacteriost1tico% Ejemplos de estos tintes son el cristal violeta (violetagenciana, aul de metileno, eosina, 4carbol fucsina5, verde brillante% Estos tintesin0iben las bacterias ramF% El modo de acci/n no est1 claro, pero se cree queintervienen en los procesos de oxidaci/n celular%$aones , detergentes:@n jab/n es una sal de sodio o de potasio de un 1cido graso% os agentes quereducen la tensi/n superficial del agua (surfactantes y que se emplean

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principalmente para la limpiea de superficies se llaman detergentes (el jab/n esun ejemplo de un detergente% os detergentes se clasifican en cati/nicos,ani/nicos y noGi/nicos% os detergentes cati/nicos son mejores desinfectantes quelos dem1s% tro nombre con que se conocen a los detergentes cati/nicos soncuaternarios de amonio% Estos son bacteriost1ticos a bajas concentraciones ybactericidas a concentraciones mayores% Ejemplos de estos compuestos son el

Hep0iran y el *occal, que se usan como antis7pticos para la piel, adem1s deusarse para el saneamiento de lec0erías y plantas elaboradoras de alimentos%Estos compuestos no matan esporas%9cidos:=ay una serie de 1cidos org1nicos que se usan como conservantes en muc0osalimentos como el 1cido ac7tico, 1cido benoico, 1cido l1ctico, 1cido propi/nico y1cido s/rbico% El 1cido baja el p= y esto desnaturalia las proteínas% o matan lasesporas%

I&.  'AT%RIA4%1 ';TODO1:

'AT%RIA4%1:

 'gar nutritivo en tubos,ultivos en caldo nutritivo: Bacillus sp, E. coli, Salmonella sp, Staphylococcus sp.Discos de papel filtro%8lacas 8etri est7riles%8inas%

 'sa de Iolle%

R%ACTI&O1:

  1ol!ciones colorantes:J ristal violeta: $K$###, $KL###, $K$####%

J 9erde malaquita: $K$###, $KL###, $K$####%

J 'ul de metileno: $K$###, $KL###, $K$####%

  1ol!ciones desinfectantes:

J Menol: #%LC, $C y ;C%

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  1ol!ciones de materiales pesados:

< -ulfato de cobre: #%LC, $C y ;C%

J loruro de mercurio: #%LC, $C y ;C%

3ROC%DI'I%NTO:

olocar dos asadas de uno de los cultivos bacterianos a los tubos con los medios

licuados, meclar bien y verter el contenido de los tubos en las placas 8etri% Dejarenfriar%

Despu7s de la solidificaci/n del medio dividir la superficie de la placa en seis

partes iguales con un plum/n marcador% En condiciones as7pticas, coger un disco de papel de filtro con las pinas y

sumerja ligeramente uno de sus bordes en una de las soluciones antimicrobianas% @na ve que el colorante a impregnado el disco col/quelo sobre el agar en uno de

los sectores marcados% *epetir el procedimiento con cada uno de los agentes antimicrobianos y los

cultivos% +ncubar las placas a ;N por "< 0oras% bservar los resultados%

8O$A D% R%3ORT%

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M')*E- O@>+- O@E 'ME)' E*E+>+E)

>E-' $Shigellasp.

8inesol80yton "

="#"ejía

 'jo 'mpicilina L##mg% 'c% 1cticoristal violeta=g"l"8urexol "u-<-uperoxido $L

Desinfectante demanos9erde malaquita

>E-' ;

Staphylococcus sp.

8inesol

80yton "

="#"

ejía

ristal violeta

=g"l"

8urexol "

u-<

-uperoxido $L9erdemalaquita

olgate

ral B

>E-' LSalmonellasp.

actato

concentrado

 

ristal violeta9erde malaquita

 'jou-<ral B

 'mpicilina L##mg%8inesol

nocambios

mayorintensidadmoderadolevemente

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&.  Res!ltados , Disc!siones

Staphylococcus sp

 

Shigella sp.

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-eg2n

)ortora, et al ("##, os 0al/genos se utilian solo o como componentes de solucionesinorg1nicas u org1nicas% 'ctuando como germicidas, en el caso el cloro su acci/n se basaen la formaci/n de 1cido 0ipocloroso, y como desinfectante comercial en forma de0ipoclorito de sodio o calcio (lejía, comparando con nuestros resultados, el ensayo de lalejía tuvo un efecto positivo confirmando la teoría%

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-eg2n )ortora, et al ("##, los metales pesados como el mercurio, el cobre y el cinc seutilian como germicidas debido a trav7s de acci/n oligodin1mica, cuando los iones de losmetales pesados se combinan con grupos sulfidrilos(G-= se desnaturalian las proteínas,debido a esa acci/n el ensayo con el cloruro merc2rico y sulfato c2prico resulto positivo%

-eg2n egroni ("##P, los colorantes se utilian ampliamente en bacteriología para latinci/n y como indicadores% a acci/n bacteriost1tica de los colorantes se debe a lamodificaci/n del potencial de /xidoGreducci/n del medio, lo que in0ibe el desarrollo de losmicroorganismos, como los derivados del trifenilmetano (verde malaquita y cristal violeta,lo cual se vio en los resultados encontrados ya que dio positivo%

El pinesol es un limpiador desinfectante, la ra/n del resultado negativo puedo deberse almal manejo de las operaciones en el laboratorio, tambi7n puedo ser la escasaconcentraci/n de desinfectante%

-eg2n )ortora, et al ("##, los peroxígenos (agentes oxidantes como el oono elper/xido de 0idrogeno y otros ejercen su efecto mediante mol7culas oxidantes en el

interior de las c7lulas% o cual confirma los resultados obtenidos%

-eg2n s0oema!er("##", la ampicilina es un derivado semisint7tico de la penicilina esactivada contra la mayoría de las cepas de bacterias sensibles a la penicilina y centraalgunos bacilos ram negativos, enterobacterias% o cual comparado con los resultadoses confirmado, ya que nos mostr/ una respuesta positiva%

-efun 9anacloc0a ("##;, el consumo de ajo fresco constituye uno de los remedios m1sempleados popularmente para combatir las enfermedades inflamatorias y degenerativasosteoarticulares, lo cual confirma el resultado positivo de la prueba de laboratorio%

Salmonella sp.

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 'llaert % y Escol1 >% ("##" presentan un procedimiento para la preparaci/n de caldocon verde de malaquita (#%#;QgKl y cloruro de magnesio ($;%LRgKl que es un medio decultivo selectivo utiliado para el enriquecimiento de -almonella en agua y alimentos, enla cual se?alan utiliando un control macrosc/pico un caldo translucido de color aulGverdoso un crecimiento bueno para Salmonella Typhimurium y Escherichia coli.

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o se?alo en el p1rrafo anterior concuerda con el resultado observado en la placa 8etri enla cual se puede apreciar que el efecto del verde malaquita fue moderado, es decir, elcolorante mencionado no afecto el crecimiento de Salmonella en todo caso lo benefici/%

)abla $ Dosificaciones de agentes antimicrobianos en salmonelosis%

Muente: *omero y =errera ("##"

-eg2n *omero y =errera ("##" los pacientes que presentan gastroenteritis porSalmonellaA deben ser tratados con ampicilina o amoxicilina inicialmente, a menos que sesospec0e de organismos resistentes%

omo se aprecia en la tabla la dosis de ampicilina es Rg por día% En nuestro casoutiliamos L##mg lo cual resulto efectivo en la desinfecci/n adem1s se aprecia el 0alo detransparencia característico, con los dic0o se comprueba y se coincide en decir que laampicilina es un buen agente antimicrobiano para la Salmonella%

0auca % ($PP se?ala que los compuestos antibacterianos utiliados son elcloranfenicol, clorotetraciclina, estreptomicina y nitrofuraona% -u comportamiento 0a sidodemostrado in vitro, utiliando cepas de -almonella typ0ymurium que originaron la-almonelosis

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&I.  CONC4U1ION%1:

• El verde de malaquita promueve el crecimiento de -almonella• a ampicilina in0ibe el crecimiento de -almonella•

#I#4IO5RA02A:

 ''E*) % y Escol1 >% "##"% >7todos de 'n1lisis >icrobiol/gicos de 'limentos%Ediciones Día De -antos% >adrid% Espa?a% 8aginas

Baynes, S%, & Dominica!, >% "#$$% Bioquímica Médica. ;a% Edici/n% Elsevier >osby

Espa?a, -%%

='@' % $PP 8roduccion de uyes (avia 8orcellus Editorial Mao% +nstituto acionalde +nvestigaci/n 'graria% a >olina% 8er2%

E*+ >'*)'% "##P% >icrobiología Estomatol/gica% -egunda edici/n% Editorial>7dica 8anamericana% 'rgentina%

*>E* y =E**E*', "##"% -indrome Diarreico +nfeccioso% -egunda edici/n% Editorial>7dica 8anamericana% alada de )lalplan% >exico%

)*)*' E*'D S%, M@IE BE*DE *%, '-E =*+-)+E % "##% +ntroduccion a la>icrobiologia% ovena edicion% Editorial >7dica 8anamericana% 'rgentina%

9''=' 9''=' BE*'), 'T+@E*' M'*' -'9'D*%"##;%Mitoterapia% uarta edici/n% Editorial > >asson% Espa?a%