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CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA -CONCYT-
SECRETARIA NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA -SENACYT- FONDO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGÍA -FONACYT-
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA
LABORATORIO DE ENTOMOLOGIA APLICADA Y PARASITOLOGIA -LENAP-, ESCUELA DE BIOLOGIA
INFORME FINAL
Cruces experimentales entre especímenes silvestres, domésticos y peridomésticos de Triatoma dimidiata, principal vector de la Enfermedad de
Chagas en Guatemala
PROYECTO FODECYT No. 44 - 2007
Marianela Menes Hernández Investigador Principal
GUATEMALA, FEBRERO DE 2009.
AGRADECIMIENTOS La realización de este trabajo, ha sido posible gracias al apoyo financiero dentro del Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología, -FONACYT-, otorgado por La Secrectaría Nacional de Ciencia y Tecnología –SENACYT- y al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología –CONCYT-.
RESUMEN
La clasificación taxonómica de los triatominos y el reconocimiento de la mayoría de
las especies ha estado fundamentalmente basada en caracteres morfológicos externos,
utilizando las características como el color, la forma y dimensiones del exoesqueleto. Sin
embargo, en algunos casos las diferencias no son tan evidentes como para discernir si se
trata de verdaderas subespecies o de especies gemelas agrupadas en la misma categoría.
Esto ha llevado a la necesidad de emplear otras metodologías para observar los caracteres
más comúnmente utilizados. (Superlano et al., 2006). Los estudios de hibridización son una
herramienta extraordinariamente poderosa para analizar los fenómenos que pueden llevar a
una población a divergir o especiarse (por ejemplo, la formación de mecanismos de
aislamiento) (Martinez-Ibarra et al., 2008).
Los diferentes resultados mostrados por los métodos moleculares demuestran que el
conocimiento acerca del grado de aislamiento reproductivo entre los grupos de Triatoma
dimidiata es importante. Es por esto que es necesario realizar estudios de aislamiento para
reunir información adicional para la asignación apropiada de su nivel taxonómico.
Los resultados de los cruces experimentales intraespecíficos de Triatoma dimidiata
sensu lato, de Guatemala, apoyan los resultados obtenidos con la técnica molecular
utilizando el segundo espacio trascrito interno del ADNribosomal -ITS-2-, mostrando que
en Guatemala Triatoma dimidiata presenta poblaciones que han ido divergiendo,
aparentemente tanto por aislamiento geográfico como ecológico; estando representada por
dos grupos, Triatoma dimidiata dimidiata (Jutiapa, Los Amates y Amatitlán) y Triatoma
dimidiata maculipenis (San Cristóbal Verapaz), siguiendo líneas evolutivas diferentes y al
menos una especie críptica T. sp. aff. Dimidiata (Yaxhá, reproductivamente aislada). Los
resultados también muestran que las poblaciones silvestres de Los Amates y Amatitlán
representan un riesgo potencial para los programas de control y que en estas localidades
debe existir un sistema de vigilancia efectivo.
SUMMARY
The taxonomic classification of Triatomines and the recognition of the species has
been based on morphological characters, using features like color, shape and dimensions of
the exoskeleton. However, in some cases the differences are not obvious to discern if there
are subspecies or sibling species grouped in the same category. This situation has led to
find other methods to observe the most commonly characters (Superlano et al., 2006).
Hybridization studies are an extremely powerful tool to analyze the phenomena that can
lead to diverging population or species (i.e. formation of isolation mechanisms) (Martinez-
Ibarra et al., 2008).
The molecular methods show that knowledge about the degree of reproductive
isolation between groups of Triatoma dimidiata is important. Isolation studies are
necessary to gather additional information for the appropriate allocation of taxonomic level.
The experimental results of intraspecific crosses of T. dimidiata sensu lato, from
Guatemala, support the results obtained with molecular techniques using the Second
Internal Transcribed Space (ADNribosomal-ITS-2-). The result shown that Triatoma
dimidiata populations have been diverging apparently by geographical and ecological
isolation, being represented by two groups, Triatoma dimidiata dimidiata (Jutiapa, Los
Amates and Amatitlán) and Triatoma dimidiata maculipenis (San Cristobal Verapaz),
following different storylines and at least one cryptic species T. sp. aff. dimidiata (Yaxhá,
reproductively isolated). The results also show that the sylvan populations from Amatitlán
and Los Amates represent a potential risk for the vector control programs and it is
necessary an effective surveillance system.
INDICE PARTE I I.1 INTRODUCCIÓN 1 I.2 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA I.2.1 Antecedentes en Guatemala 3 I.2.2 Justificación del trabajo de investigación 4 I.3 OBJETIVOS I.3.1 Objetivos I.3.1.1 General 7 I.3.1.2 Específicos 7 I.4 METODOLOGIA I.4.1 Las Variables 8 I.4.1.1 Variables independientes 8 I.4.2 Estrategia metodológica 9 I.4.2.1 Población y muestra 9 I.4.3 El Método 10 I.4.3.1 Cruces experimentales entre especimenes de Triatoma dimidiata, sensu lato. 10 I.4.4 La Técnica Estadística 11 PARTE II II.1 MARCO TEORICO 12 II.1.1 LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS 12 II.1.2 LAS ENFERMEDADES OLVIDADAS 12 II.1.1 La Enfermedad de Chagas 13 II.1.2 Los Triatominae 14 II.1.3 El Triatoma dimidiata Latreille. 16 II.1.3.1 Clasificación: 16 II.1.3.2 Morfología 17 II.1.3.3 Distribución Geográfica 18 II.1.3.4 Biología, Importancia Epidemiológica y Retos de Control 20 II.1.4 Sistemática de Triatoma dimidiata. 23 II.1.5 Herramientas no moleculares para estudios en Triatominos 24 II.1.6 Cruces experimentales 25 PARTE III III. RESULTADOS 27 III.1 Cruces experimentales de la chinche picuda, Triatoma dimidiata sensu lato 27 III.1.1 Cruces entre chinches silvestres de Amatitlán, Guatemala y chinches silvestres de Los Amates, Izabal 27
III.1.2 Cruces entre chinches silvestres de Los Amates, Izabal
1
PARTE I I.1 INTRODUCCIÓN
La Enfermedad de Chagas afecta a 21 países y representa un grave problema de
salud en 17 países latinoamericanos (Ghul, 2006). Originalmente fue una zoonosis y ha
pasado a afectar al hombre por el proceso de domiciliación de sus vectores, los
Triatominos (Agudelo, 2006). Especies de Triatominos con poblaciones silvestres y
domiciliadas, representan un potencial riesgo para los programas de control porque pueden
infestar fácilmente las áreas tratadas a partir de sus poblaciones silvestres (Borges et al.,
1999; Angulo, 2006; Agudelo, 2006). La identificación de focos silvestres lleva a realizar
estudios profundos de las poblaciones para conocer mejor su dispersión, capacidad de
domiciliación y evaluar el posible peligro que puede representar para el hombre como
especies vectoras de la Enfermedad de Chagas (Agudelo, 2006).
En Guatemala, Triatoma dimidiata, es el principal vector de la Enfermedad de
Chagas, estando presente en 21 de los 22 departamentos del país. Siendo nativa de la
región, ocupa en general ecotopos naturales y artificiales próximos a las casas, asociados a
reservorios silvestres y peridomiciliares, presentando diferentes grados de antropofilia. Ha
sido encontrada en un amplio rango de hábitats silvestres, y parece representar un
ensamblaje de poblaciones morfológicamente variables (Zeledón, 1981; Schofield, 2005;
Panzera et al., 2006).
En estudios realizados se ha encontrado que la población del sitio arqueológico de
Yaxhá en Petén, se encuentra mayormente en bosque primario y rara vez invade las
residencias humanas (Monroy et al., 2003), situación diferente de la reportada en la
Península de Yucatán, México, donde los insectos silvestres entran en las casas en un
patrón estacional (Dumontiel et al., 2002). Panzera et al. (2006), identificaron por medio
de análisis cromosómicos, tres diferentes citotipos en poblaciones de Triatoma dimidiata,
el citotipo uno se encontró en las poblaciones domésticas de México, Guatemala, El
Salvador y Colombia; el citotipo dos se encontró en las poblaciones silvestres y domésticas
de la Península de Yucatán; mientras que el citotipo tres fue identificado exclusivamente
y chinches domésticas de Yupiltepeque y Comapa, Jutiapa. 29 III.1.3 Cruces entre chinches silvestres de Los Amates, Izabal y chinches silvestres de Yaxhá, Petén 30 III.1.4 Cruces entre chinches domésticas de Comapa, Jutiapa y chinches silvestres de Yaxhá, Petén 30 III.1.5 Cruce entre chinche domésticas de San Cristóbal, Alta Verapaz y chinches silvestre de Yaxhá, Petén. 31 III.1.6 Cruce entre chinche doméstica de Comapa, Jutiapa y chinche silvestre de San Luis, Petén 32 III.1.7 Cruce entre chinches silvestres de Los Amates, Izabal y chinches domésticas de San Cristóbal, Alta Verapaz 32 III.1.8 Cruce entre chinches domésticas de San Cristóbal, Alta Verapaz y chinches domésticas de Mérida, Yucatán. 34
III.2 Discusión de resultados 35 III.2.1 Poblaciones seleccionadas. 35 III.2.2 Cruces experimentales 37 III.2.2.1 Importancia de las poblaciones silvestres en los procesos de infestación. 39 III.2.2.2 Estatus Taxonómico de las poblaciones de Triatoma dimidiata. 43 III.2.2.2.1 Sistemática de Triatoma dimidiata. 43 III.2.2.2.1 Estatus Taxonómico de Triatoma dimidiata 45 PARTE IV IV.1 CONCLUSIONES 48 IV.2 RECOMENDACIONES 50 IV.3 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 51 PARTE V V.1 INFORME FINANCIERO 64
2
en la población silvestre de Yaxhá, Petén; Los datos sugieren fuertemente que Triatoma
dimidiata, considerada durante largo tiempo como una única especie (Lent &
Wygodzinsky, 1979), probablemente comprenda al menos dos especies crípticas
adicionales (Yucatán y Petén), por lo que recomiendan realizar estudios con otros
marcadores en orden de confirmar si los individuos de estos lugares pueden ser
considerados como especies diferentes. Los estudios realizados hasta el momento
únicamente han incluido a la población silvestre de Yaxhá; sin embargo, en los últimos
años se ha incrementado el número de especimenes silvestres asociados a comunidades
rurales en la región norte del país (Petén, Izabal y Alta Verapaz); estos especimenes han
sido colectados por personal del LENAP, personal del Ministerio de Salud o enviados por
gente de las comunidades y se han encontrado en diferentes ecotopos tales como cuevas,
palmeras, cúmulos de piedra, etc. Estos especimenes a pesar de ser silvestres, se han
reportado entrando a las viviendas atraídos por la luz representando un grave riesgo de
infestación para las viviendas.
De acuerdo con Bargues et al., (2008), el sur de México (incluyendo la península de
Yucatán y el estado de Chiapas) y casi toda Guatemala (al menos 10 departamentos)
constituyen un área evolucionariamente crucial donde un alto número de taxas se
sobreponen (Bargues et al., 2008). En el presente estudio se abordaron dos enfoques sobre
la importancia de las poblaciones silvestres de Triatoma dimidiata: el primero relacionado
con la Salud Pública y la importancia del papel de estas en las reinfestaciones; y el
segundo, relacionado con la sistemática de los Triatominos. Se realizaron cruces
experimentales entre especimenes provenientes de diferentes ecotopos, esta herramienta no
molecular ha sido recomendada como complementaria a la sistemática, en especial en los
Triatominae; con el fin de determinar si existen barreras reproductivas entre las poblaciones
silvestres y las domésticas y peridomésticas; lo cual nos puede ayudar a determinar su
importancia epidemiológica y el posible riesgo de infestación por parte de estas
poblaciones, así como aclarar su estatus taxonómico. Esta herramienta ya ha sido utilizada
en otras especies de Triatominos (Panzera et al., 2006; Pérez et al., 2002).
Palabras claves: Triatoma dimidiata, poblaciones silvestres, reinfestaciones, cruces
experimentales.
3
I.2 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
I.2.1 Antecedentes en Guatemala
La enfermedad de Chagas es endémica del continente americano y esta considerada
como una de las enfermedades parasitarias más serias en Latinoamérica (Schofield, 2001).
En la región mesoamericana, Guatemala presenta los índices más alarmantes con 4
millones de personas en riesgo, una seroprevalencia estimada en 730,000 casos y una
incidencia anual de 28,387 nuevos casos en ausencia de estrategias de control adecuadas
(OPS, 2000; Monroy, 2003; Schofield, 2000).
Desde 1999, Guatemala forma parte de la iniciativa Centroamericana para la
interrupción de la transmisión vectorial y transfusional de la Enfermedad de Chagas, quien
tiene entre uno de sus principales objetivos la disminución de la infestación domiciliar por
el vector Triatoma dimidiata, principal vector de la enfermedad en el país. Esta especie ha
sido ampliamente estudiada utilizando diferentes técnicas tanto fenéticas como genéticas.
Estos estudios han estado dirigidos principalmente a las poblaciones domésticas de este
vector, con el fin de plantear estrategias de control que disminuyan los índices de
infestación domiciliar. La principal estrategia utilizada hasta el momento, ha sido la
aplicación de insecticidas piretroides en las viviendas, sin embargo, las reinfestaciones o
poblaciones residuales de Triatoma dimidiata han sido reportadas después del rociamiento
(Acevedo, 2000; Nakagawa, et al., 2003a; Nakagawa et al., 2003b). Estos resultados han
evidenciado la necesidad de realizar estudios más profundos sobre la biología y
comportamiento de esta especie, incluyendo no solo a las poblaciones domésticas y
peridomésticas, sino también a aquellas que puedan representar focos de infestación en el
futuro, como es el caso de las poblaciones silvestres.
Se ha sugerido constantemente que Triatoma dimidiata puede constituir una serie de
sub-poblaciones relativamente aisladas pero con un pequeño flujo genético entre ellas
(Schofield, 2004; Landaverde, 2004; Menes, 2004), por lo cual es necesario realizar
estudios que ayuden a aclarar lo anterior. Los estudios poblacionales han contribuido a
4
comprender la diversidad y estructura de esta especie, pero han sido principalmente
aplicados a poblaciones domésticas, descuidándose aquellas poblaciones silvestres que
pueden representar un importante foco de infestación a las viviendas.
La importancia del estudio consiste en determinar si existen barreras reproductivas
entre poblaciones silvestres y domésticas de Triatoma dimidiata, ya que esto nos permitiría
inferir sobre la importancia epidemiológica de las primeras y sobre las medidas que deben
aplicarse para su control.
I.2.2 Justificación del trabajo de investigación
Desde el punto de vista de la Salud Pública, la Enfermedad de Chagas afecta a 21
países y representa un grave problema de salud en 17 países latinoamericanos (Ghul, 2006).
Entre los principales objetivos de la Iniciativa de los Países Centroamericanos para
la Interrupción de la Transmisión Vectorial y Transfucional de la Enfermedad de Chagas –
IPCA-, se encuentra la disminución de la infestación intradomiciliar por Triatoma
dimidiata, principal vector de la enfermedad en Guatemala (OPS, 2002). Esto se debe a que
se considera que el 80% de la transmisión total del parásito se da a través de los vectores
(OMS, 1991; Guhl, 2000; Schofield, 1994). La principal estrategia de control utilizada es el
rociamiento de las viviendas, sin embargo han sido reportadas las poblaciones reinfestantes,
constituyendo esto un grave problema en lo que se refiere al control. Debido a lo anterior,
es necesario realizar estudios que nos permitan entender la biología y el comportamiento de
estos insectos, y especialmente que esta información pueda ser correlacionada con la
transmisión de la enfermedad (Zeledón et al., 1970a; 1970b).
Triatoma dimidiata presenta características particulares que la hacen muy variable,
además que por ser nativa de la región, ocupa una amplia gama de ecotopos, principalmente
silvestres, que hacen que el control no sea efectivo. Recientemente se han encontrado
infestados gallineros experimentales colocados en los alrededores de una aldea del
departamento de Jutiapa, constituyendo un importante registro sobre la capacidad de
5
movilización de esta especie (datos LENAP, no publicados). La región norte del país se
caracteriza por conservar aún múltiples ecotopos silvestres en los cuales se puede refugiar
esta especie y que incluyen cuevas, selvas, madrigueras, palmeras, chultunes, cúmulos de
piedra, entre otros. Con la migración de asentamientos humanos a esta región se han
invadido zonas silvestres y las viviendas se han construido cercanas a estos ecotopos en los
que se encuentran las chinches, las cuales pueden ser atraídas por la luz de las viviendas y
llegar a estas. Cada vez son más frecuentes los reportes por parte de personas de las
comunidades que han visto a las chinches en diferentes sitios silvestres o llegar volando a
sus viviendas. Datos de disección de ampollas rectales para búsqueda del parásito en el
LENAP, mostraron que dos chinches silvestres colectadas en una palmera en el
departamento de Izabal, presentaron una alta parasitemia, lo cual nos indica que es de suma
importancia estudiar estas poblaciones, ya que se podría llegar a establecer un ciclo de
transmisión. La infección por Trypanosoma cruzi existe en muchas áreas como un ciclo
entre el Triatomino silvestre y los mamíferos pequeños como roedores y marsupiales. En
muchos lugares no hay ningún contacto humano con la chinche silvestre; la infección
humana sólo ocurre a través del contacto accidental con ésta, o por iniciación de un ciclo
doméstico de transmisión cuando invaden y colonizan casas. (Schofield, 1994; Schofield,
2000).
Desde el punto de vista de la sistemática, Schofield (2005), considera que el origen
de Triatoma dimidiata esta en la península de Yucatán, sin embargo es en la región norte de
Guatemala donde se manifiesta la mayor variación morfológica (Panzera et al., 2006).
Estudios moleculares han mostrado que Triatoma dimidiata de la península de Yucatán es
genéticamente diferente de otros especimenes colectados en otras regiones de México
(Marcilla et al., 2001). Panzera et al. (2006), identificaron por medio de análisis
cromosómicos, tres diferentes citotipos en poblaciones de Triatoma dimidiata, el citotipo
tres fue identificado exclusivamente en la población de Yaxhá, Petén; Los datos sugieren
fuertemente que Triatoma dimidiata, considerada durante largo tiempo como una única
especie, probablemente comprenda al menos dos especies crípticas adicionales entre las
que se encontraría Yaxhá (Petén), por lo que es importante realizar estudios con marcadores
moleculares para confirmar si los individuos de Petén pueden ser considerados como una
6
especie diferente. Los estudios realizados hasta el momento únicamente han incluido a la
población silvestre de Yaxhá (Sitio Arqueológico). En especimenes provenientes de
diferentes áreas de Petén, colectados por personal del LENAP así como enviados por
colaboradores, se ha observado una alta variabilidad fenotípica, principalmente en cuanto a
coloración y tamaño, sin embargo a la fecha no se han realizado estudios moleculares ya
que se ha contado con muy pocos individuos.
En los últimos años, se han aplicado diversas técnicas moleculares, con el fin de
llevar a cabo la identificación de especies; recientemente se ha sugerido la existencia de
herramientas complementarias, no-moleculares, a la sistemática moderna de insectos, en
particular en Triatominae, numerándose entre ellas los cruces experimentales (Dujardin,
2006).
La distinción entre los grupos puede contribuir dando coherencia
sistemática/taxonómica al conocimiento presente sobre el taxa. La distinción entre los
grupos puede facilitar la comprensión de las diferentres capacidades de transmisión
vectorial y características epidemiológicas de la Enfermedad de Chagas a través del área en
que T. dimidiata sensu lato está distribuida. (Bargues et al., 2008)
El objetivo del trabajo fue determinar la existencia de barreras reproductivas entre
poblaciones estrictamente silvestres (Yaxhá) o asociadas a comunidades rurales (San Luis,
Petén; Los Amates, Izabal; Amatitlán, Guatemala) y poblaciones domésticas y
peridomésticas de Triatoma dimidiata, con el fin de inferir sobre el papel que tienen estas
poblaciones en la infestación domiciliar y en el riesgo de reinfestación de focos ya tratados.
Se pretendió a la vez, dilucidar el estatus taxonómico de las poblaciones silvestres y
contribuir con los conocimientos sobre la biología y dinámica del principal vector de la
Enfermedad de Chagas en Guatemala, como aporte para el planteamiento de estrategias de
control.
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I.3 OBJETIVOS
I.3.1 Objetivos
I.3.1.1 General
Determinar si existen barreras reproductivas entre especimenes silvestres,
domésticos y peridomésticos de Triatoma dimidiata.
I.3.1.2 Específicos
Determinar el papel de las poblaciones silvestres en los procesos de infestación o
reinfestación.
Describir el estatus taxonómico de las poblaciones silvestres de Triatoma
dimidiata.
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I.4 METODOLOGIA
Para el presente estudio se utilizaron especimenes de Triatoma dimidiata sensu lato,
provenientes de distintas localidades y ecotopos en Guatemala. Adicionalmente se incluyó
una población proveniente de Mérida, Yucatán, México. La procedencia de los
especimenes y el tamaño de muestra se presentan en el cuadro 1.
Los especimenes fueron colectados por personal del Laboratorio de Entomología
Aplicada y Parasitología –LENAP- y personal de Vectores del Ministerio de Salud Pública
y Asistencia Social –MSPAS-, entre enero de 2007 y diciembre de 2008.
Cuadro 1. Sitios de colecta y tamaño de muestra de poblaciones de Triatoma dimidiata.
Localidad Departamento/País Ecotopo No.
Hembras
No.
Machos
Amatitlán Guatemala / Guatemala Silvestre 1 2
Los Amates Izabal / Guatemala Silvestre 8 12
Yaxhá Petén /Guatemala Silvestre 6 --
San Cristóbal
Verapaz
Alta Verapaz / Guatemala Doméstico 4 6
Comapa y
Yupiltepeque
Jutiapa / Guatemala Doméstico 3 6
Santa Isabel Petén / Guatemala Silvestre 1 --
Mérida Yucatán / México Doméstico -- 2
I.4.1 Las Variables
I.4.1.1 Variables independientes
Especimenes adultos, hembra y macho, de Triatoma dimidiata provenientes
de distintas localidades y ecotopos de Guatemala.
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I.4.2 Estrategia metodológica
I.4.2.1 Población y muestra
Selección de las poblaciones: La selección se realizó con base en la
importancia epidemiológica y taxonómica de las poblaciones, así como con la
disponibilidad de especimenes que alcanzaron el estado adulto (machos y hembras).
En el caso de Amatitlán, Guatemala; Los Amates, Izabal; y San Cristóbal Verapaz,
Alta Verapaz, se utilizaron especimenes de F1 obtenidos de colecciones vivas
colectadas en campo. En los casos restantes los especimenes fueron colectados por los
investigadores. La selección de los adultos utilizados se realizó de acuerdo con la
disponibilidad de pareja para realizar el cruce (hembra virgen).
Colecta de material biológico: En el mes de mayo de 2008, se realizó la
colecta de especimenes silvestres en el sitio Arqueológico Yaxhá-Nakum-Naranjo, en
Flores, Petén; así como en la aldea Santa Isabel en el municipio de San Luis en el
mismo departamento. Las colectas se llevaron a cabo utilizando la técnica de
búsqueda activa hombre-hora con la cual se revisaron cuevas, chultunes y
madrigueras. También se realizaron colectas nocturnas utilizando trampas de luz UV.
Los especimenes vivos fueron trasladados al insectario del LENAP, donde fueron
colocados en cultivos para su cuidado y alimentación.
Manejo de colecciones vivas de Triatoma dimidiata (cultivos): Durante el
desarrollo del proyecto se manejaron en el insectario del LENAP, 26 colecciones
vivas. Todos los especímenes se mantuvieron dentro de una incubadora, a una
temperatura de 24 a 27 º C. Cada cultivo fue monitoreado diariamente y alimentado
semanalmente, con el fin de que las ninfas alcanzarán exitosamente el estado adulto,
para poder realizar los cruces. La alimentación se realizó para cada frasco por
separado, utilizando sangre de ratón. Cada pareja correspondiente a cada cruce, se
monitoreo diariamente llenando una boleta en la que se registró el tiempo previo a la
oviposición, el número de huevecillos ovipuestos y la viabilidad de estos (anexo 1).
10
I.4.3 El Método
I.4.3.1 Cruces experimentales entre especimenes de Triatoma dimidiata, sensu
lato.
Selección del tamaño de muestra: Se esperaba contar con al menos tres
cruces en cada vía (Hembra de población 1 con macho de población 2 y viceversa),
para cada una de las poblaciones, según la metodología empleada por Belisario, Avila
& Diotaiuti, 2007 y Pérez et al., 2005. En algunos de los casos, no se obtuvo el
tamaño de muestra deseado (Ver cuadro 1), ya que las ninfas de los cultivos no
alcanzaron el estado adulto. En el caso de la población de Yaxhá, solo se obtuvieron
hembras a partir de las ninfas, por lo que no se pudieron realizar cruces en el sentido
contrario (machos de Yaxhá con hembras de otras localidades). Los especímenes
utilizados para los cruces fueron seleccionados a conveniencia, de acuerdo al sexo de
la chinche al llegar al estado adulto y a la disposición de otro especímen del otro sexo
y de otra población.
Obtención de hembras vírgenes: Cada ninfa de 5to estadio que se encontraba
en los cultivos fue separada en un frasco individual, debidamente identificado, hasta
alcanzar la fase adulta, para garantizar la obtención de hembras vírgenes para los
cruces.
Cruces experimentales: Se realizaron 24 cruces entre hembras y machos de
diferentes poblaciones y ecotopos, con el fin de observar si existían barreras
reproductivas entre las poblaciones. Para cada cruce, se tomó una hembra virgen (ya
que las hembras pueden ser copuladas por varios machos y almacenar el esperma). En
los casos posibles, los cruces se realizaron en ambos sentidos, es decir, hembra de
localidad o ecotopo 1 con macho de localidad o ecotopo 2; hembra de localidad o
ecotopo 2 con macho de localidad o ecotopo 1. Cada pareja fue colocada en un frasco
y debidamente identificada. Diariamente se monitoreo cada cruce, registrando la
presencia o ausencia de huevecillos y la viabilidad de estos, para determinar si había o
no fertilidad.
11
I.4.4 La Técnica Estadística
Por tratarse de un estudio descriptivo, no se empleo ninguna técnica
estadística para los datos.
12
PARTE II
II.1 MARCO TEORICO
II.1.1 LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS
Según las estimaciones de la OMS, las enfermedades infecciosas provocaron 14,7
millones de muertes en el año 2001, lo que representa el 26% de la tasa de mortalidad
global (OMS, 2003). Estas enfermedades pueden clasificarse en tres grupos: el primero
formado por SIDA, Tuberculosis y Malaria, las cuales siguen siendo las principales
causantes de un gran porcentaje de las muertes atribuidas a este tipo de enfermedades; el
segundo grupo conformado por las enfermedades olvidadas o desatendidas, cuya baja
mortalidad, a pesar de su elevada morbidez, las sitúan casi al final de las tablas de
mortalidad y, en el pasado han recibido escasa atención; el tercer grupo está formado por
enfermedades infecciosas cuya incidencia, muestra abruptos picos, estas enfermedades son
llamadas enfermedades emergentes con tendencia epidémica (OMS, 2003).
II.1.2 LAS ENFERMEDADES OLVIDADAS
Se estima que al menos 1 millón de personas en el mundo –la sexta parte de la
población mundial- sufre de una o más de las enfermedades olvidadas. Las poblaciones más
afectadas por estas enfermedades son las de mayor pobreza y más vulnerables y se
encuentra mayormente en las áreas tropicales y subtropicales del mundo (WHO, 2007).
Estas enfermedades desatendidas suponen una enorme carga económica en términos de
pérdida de productividad y los elevados costes que genera la atención médica prolongada
(OMS, 2003).
Las Enfermedades cubiertas por el Departamento de Enfermedades Olvidadas de la
OMS abarca Cólera, Leishmaniasis, Lepra, Fasciolaisis, Buruliasis, Filariasis Linfática,
Dengue y Dengue Hemorrágico entre otras (WHO, 2007).
13
II.1.1 La Enfermedad de Chagas
La Enfermedad de Chagas afecta a 21 países del continente americano y representa
un grave problema de salud en 17 países latinoamericanos, con un total estimado por la
OMS de 100 millones de personas expuestas a la Enfermedad y alrededor de 20 millones de
personas infectadas, considerándose una de las más importantes enfermedades tropicales
(Ghul, 2006; WHO, 2004; Angulo, 2006). Es causada por el protozoario flagelado
Trypanosoma cruzi (American Academy of Pediatrics, 2004).
La Enfermedad fue originalmente una zoonosis y ha pasado a afectar al hombre por
el proceso de domiciliación de sus insectos vectores (Agudelo, 2006). La interacción entre
los ciclos domésticos y silvestres ocurre como producto de diversos factores, la mayoría de
ellos dependientes del comportamiento humano (Agudelo, 2006). Actualmente, la
enfermedad esta relacionada al área rural y a la pobreza socioeconómica de los países
latinoamericanos (Tabaru et al., 1999); y mayoritariamente se transmite al ser humano a
través de los excrementos de insectos hematófagos, los Triatominos de la familia
Reduviidae;, los cuales defecan durante o después de la succión de sangre (American
Academy of Pediatrics, 2004).
Debido a su significación social y epidemiológica, así como su fuerte impacto
económico, el control de la Enfermedad ha llegado a ser una prioridad para la Salud
Pública. Las estrategias de control han sido dirigidas fundamentalmente a la interrupción de
la transmisión de la enfermedad mediante la eliminación de poblaciones domésticas y la
disminución del riesgo de transmisión por transfusiones de sangre de donantes infectados
(WHO, 1991), ya que raras veces resulta factible tratarla.
II.1.2 Los Triatominae
Forman una subfamilia bien caracterizada de los Reduvidos dentro del orden de los
Hemípteros, definida en base de su hematofagia obligada y las características asociadas con
este hábito, que la distingue de otros Reduvidos que son depredadores de invertebrados.
14
Actualmente son reconocidas 136 especies de triatominos, divididos en 6 tribus y 18
géneros (Forero et al., 2004). Los triatominos pasan por cinco estadíos ninfales, al final de
los cuales se produce una muda para pasar al siguiente estadio; hasta alcanzar el estadio
adulto.
Todos los Triatominos son originarios del ambiente natural, tornándose
epidemiológicamente importantes en la medida en que estrechan su relación con el hombre
(Diotauiti, 2006). El proceso más importante, en este sentido, es la colonización de
ambientes artificiales, es decir, la formación de colonias construidas por insectos jóvenes y
adultos, en generaciones consecutivas que pueden alcanzar altas densidades de
Triatominos. De manera general, las colonias tienen inicio con la introducción, pasiva o
activa, de Triatominos en el nuevo ambiente, muchas veces a partir de una única hembra
(Diotauiti, 2006).
El asentamiento humano ha cambiado dramáticamente los ambientes naturales, a
través de la deforestación extensiva. La simplificación del hábitat por el desarrollo de la
agricultura ha llevado a una considerable reducción de los nichos de los triatominos. Como
sea, donde las actividades humanas se extienden al bosque virgen en el cual están presentes
especies silvestres, la transmisión con el agente etiológico de la Enfermedad de Chagas,
Trypanosoma cruzi, puede ocurrir (WHO, 2002; Monroy, 2003).
De acuerdo con Barreto (1979) los Triatominos son clasificados desde especies
estrictamente silvestres, a especies cuyos adultos, a partir de ejemplares silvestres pueden
invadir las casas sin colonizarlas, otras formando pequeñas colonias y otras colonizando
indistintamente el peridomicilio y el intradomicilio.
Especies de Triatominos con poblaciones silvestres y domiciliadas, representan un
potencial riesgo para los programas de control de la Enfermedad de Chagas porque pueden
infestar fácilmente las áreas tratadas a partir de sus poblaciones silvestres (Borges et al.,
1999; Costa, 1999; Angulo, 2006; Agudelo, 2006).
15
En América del Sur, se han realizado estudios que han sido fundamentales para el
reconocimiento de la importancia del ciclo silvestre de algunas especies de Triatominos en
la Enfermedad de Chagas, la determinación de varios ecotopos naturales de diferentes
especies, y la correlación entre estas y el proceso de colonización de ambientes artificiales
(Barreto, 1979). Trabajos realizados en Colombia, muestran la importancia de realizar
estudios de taxonomía molecular para poder diferenciar poblaciones domésticas de
silvestres (Agudelo, 2006). Foranttini et al. (1971, 1975, 1977, 1983), estudiaron la
dinámica de poblaciones silvestres de Triatominos, creando el concepto de “período
infestante” para la época de mayor producción de adultos silvestres, que coincide con el
período de mayor invasión de las casas por insectos adultos, lo que ha tenido gran
importancia para los programas de control.
La identificación de focos silvestres lleva a realizar estudios profundos de las
poblaciones para conocer mejor su dispersión, capacidad de domiciliación y evaluar así el
posible peligro que puede representar para el hombre como especies vectoras de la
Enfermedad de Chagas (Agudelo, 2006).
Para Carcavallo (1988), la investigación de Triatominos en ambientes silvestres
tiene los siguientes objetivos:
a. Conocimiento de los ecotopos donde los diferentes vectores prevalecen;
b. Conocimiento de las relaciones tróficas existentes y tendencias de dispersión;
c. Evaluación de la movilidad de las especies y tendencias de dispersión,
d. Interpretación de los factores geográficos y climáticos que explican su distribución
geográfica;
e. Ponderación de la infección de los vectores potenciales y conocimiento de las fuentes
infectantes (reservorios);
f. Evaluación de la capacidad invasora de las diferentes especies con respecto a la vivienda
humana próxima o a los peridomicilios existentes dentro de su área de movilidad.
g. Conocimiento del comportamiento de las especies en sus ecotopos, especialmente sobre
su reproducción, alimentación y movilidad.
16
h. Conocimiento y ponderación de los enemigos biológicos existentes en el micro o
macrohábitat.
i. Conocimiento de los ritmos temporales de actividad.
La importancia vectorial de los triatominos en relación con la transmisión humana
de Trypanosoma cruzi depende del grado de asociación del vector con el hombre. De esta
forma, los triatominos son reconocidos como de importancia primaria, secundaria y
terciaria en la epidemiología de la enfermedad (Diotauiti, 2006).
Triatoma dimidiata, principal vector de la Enfermedad de Chagas en Guatemala, se
encuentra entre las especies secundarias (Días y Diotauiti, 1998; Zeledón, 1983),
caracterizadas por ser triatominos generalmente autóctonos de la región, capaces de invadir
y colonizar casas en pequeñas densidades; siendo nativos ocupan en general ecotopos
naturales y artificiales próximos a las casas, asociados a reservorios silvestres y
peridomiciliares, presentando diferentes grados de antropofilia.
II.1.3 El Triatoma dimidiata Latreille.
II.1.3.1 Clasificación:
Clase Insecta
Orden Hemiptera
Suborden Gynocerata
Familia Reduviidae
Subfamilia Triatominae
Tribu Triatomini
Complejo Phyllosoma
Subgrupo Rubrofasciata
Género Triatoma
Especie Triatoma dimidiata
(Dujardin, Schofield & Panzera, 2000; Sherlock, 2000)
17
Carcavallo et al (2000), opinan que en México hay tres especies relacionadas con T.
dimidiata, las cuales son T. hegneri, T. gomeznunezi y T. brailovskyi; las cuales forman un
complejo específico, con caracteres plesiomórficos muy similares a los de las Triatomas de
Sur América y completamente diferentes a las de México y Estados Unidos, sin embargo
recomiendan que deben realizarse estudios genéticos para clarificar esta hipótesis.
II.1.3.2 Morfología
Triatoma dimidiata es una especie bastante grande y con un colorido distintivo en el
cuerpo, que generalmente va desde píceo a negro, y en el conexivo y corium desde amarillo
pálido hasta amarillo naranja. El macho mide entre 24.5 a 32.0 mm, mientras que la hembra
mide entre 24.5 a 35.0 mm (Lent & Wygodzinsky, 1979; Lent & Jurberg, 1985).
Figura # 1. Morfología de Triatoma dimidiata. (Tomado de Bustamante 2001)
18
II.1.3.3 Distribución Geográfica
Esta especie se distribuye en Belice, Colombia, Costa Rica, Ecuador, El Salvador,
Guatemala, Honduras, México, Nicaragua, Panamá, Perú y Venezuela (OMS, 1991;
Zeledón, 1981). La importancia de Triatoma dimidiata como vector de la enfermedad de
Chagas se debe a su dispersión geográfica, abundancia y grado de infección (Galvấo et al.
1995).
Triatoma dimidiata es de amplia distribución, se ha encontrado desde el nivel del
mar hasta altitudes de 2,000 mts, desde la orilla del océano Atlántico hasta las costas del
pacífico (Monroy, 1994).
Triatoma dimidiata es completamente nativa de Centro América. Es una especie que
parece representar un ensamblaje de poblaciones morfológicamente variables distribuidas
desde México central hacia todos los países de Centro América, con poblaciones
adicionales en algunas partes de Colombia y en regiones costeras de Ecuador (Zeledón,
1981; Panzera et al., 2006). Ha sido encontrada en un amplio rango de hábitats silvestres,
como dentro de las casas y en los peridomicilios (Zeledón, 1981). Se ha reportado la
presencia de poblaciones domésticas y peridomésticas en contacto con poblaciones
silvestres locales en el sur de México, Guatemala, El Salvador, Honduras, Nicaragua,
Costa Rica, Panamá y algunas partes de Colombia (Schofield, 2006; Ramírez, et al., 2004).
Datos disponibles, parecen sugerir que Triatoma dimidiata puede representar una
serie de sub-poblaciones relativamente aisladas, con un pequeño flujo de genes entre ellas.
De ser esto verificado, podría ser posible alcanzar altos niveles de control en localidades
específicas y realizar monitoreos, por medio de marcadores genéticos y fenéticos
apropiados, del origen de potenciales reinfestaciones. Es por esto, que se considera como
una prioridad urgente el estudio de la estructura genética de poblaciones de Triatoma
dimidiata (Schofield, 2000).
El primer espécimen colectado fue en 1932 en Honduras Británica donde la especie
parece ser esencialmente silvestre, prefiriendo áreas forestales densas y cuevas (Petana,
19
1971 en Monroy, 2003). Esta situación es muy similar a la reportada en Yaxhá, Petén,
Guatemala, donde la especie se encuentra mayormente en bosque primario y rara vez
invade las residencias humanas, pero es diferente de la situación reportada en la Península
de Yucatán, México, en la cual los insectos entran en las casas en un patrón estacional
(Dumontiel et al., 2002). Los adultos voladores invaden las casas en la época seca del año,
que es la misma época en que los adultos de Triatoma dimidiata de Petén tienen su
dispersión e invaden diferentes ecotopos silvestres (Monroy, 2003).
A pesar que Triatoma dimidiata se aleja de los vectores epidemiológicamente más
importantes de la Enfermedad de Chagas, su amplia distribución y capacidad de colonizar
las viviendas humanas, lo ha convertido en el principal objetivo de extensas operaciones de
control. Las poblaciones domésticas raramente se asocian con las altas prevalencias de la
enfermedad de Chagas y suelen ser pequeñas, pero hay que tener en cuenta que presenta
poblaciones silvestres además de su distribución ya conocida, por lo que no se puede
considerar como candidata viable para la erradicación utilizando los métodos actuales
disponibles (Schofield, 2006).
Para Triatoma dimidiata en centro América, el escenario que surge es el de una
serie de poblaciones silvestres relativamente discretas, asociadas principalmente con
afloramientos rocosos donde los huéspedes de reservorios salvajes podrían ser
relativamente abundantes. Sobre esta distribución primitiva están uno o más eventos de
domesticación que conducen a cierto número de poblaciones domésticas y peridomésticas
(Schofield, 2006). Parece probable que algunas poblaciones domésticas se derivan ahora
directamente de otras poblaciones domésticas por medio del vuelo del adulto o del traslado
accidental asociado con personas, pero algunas derivan directamente de las invasiones
caseras por parte de insectos silvestres. Basados en esto, trazar el mapa de las poblaciones
silvestres de Triatoma dimidiata se convierte en algo de gran importancia operacional, ya
que existe en tales localidades la posibilidad de que la reinvasión de casas ya tratadas se
vuelva problemática (Schofield, 2006).
20
II.1.3.4 Biología, Importancia Epidemiológica y Retos de Control
Triatoma dimidiata es una especie completamente nativa de la región de América
Central (Schofield, 2000). Es reconocida como una de las tres principales especies vectoras
de Tripanosoma cruzi (Dujardin et al. 2000). En Guatemala, El Salvador, Nicaragua y
Costa Rica es el principal vector de la Enfermedad de Chagas y en Honduras el segundo
(Monroy, 1992; OPS, 2000). Sin embargo, se considera también importante en las
regiones costeras húmedas de Colombia, Ecuador y el norte de Perú.
Triatoma dimidiata Latreille se encuentra entre los vectores más importantes,
presenta poblaciones domésticas que tienden a ser relativamente pequeñas (Monroy et. al,
1994), son muy susceptibles a la infección con T. cruzi (Según Monroy et al. 2003a, el
19.1% de los insectos se encuentra infectado en Guatemala, mientras que Cedillos et al.
(2001) reporta una infección similar de 17.8% en El Salvador, ambos son datos generales
para cada país, aunque esto varía dentro de ellos dependiendo de la región), y su habilidad
para defecar durante o inmediatamente después de una comida sanguínea, es de mucha
importancia en la transmisión del parásito ya que es en general de tres a cuatro veces mayor
que en otras especies (Zeledón 1981). Esta especie es capaz de colonizar viviendas
humanas, especialmente aquellas de adobe o bajareque, en las cuales se esconden en las
grietas de las paredes. Se cree que el transporte pasivo de leña del campo a las viviendas
representa un medio importante para la entrada de la chinche al ambiente humano; otro
medio es la atracción por la luz artificial, ya que esta especie tiene gran capacidad de
vuelo. (Monroy 1992, Schofield 1994)
Según la clasificación de Guhl (2000), Triatoma dimidiata se encuentra dentro de
las especies adaptadas de manera relativamente estable a la vivienda, pero que también
conservan importantes ecotopos silvestres. Dentro de estos últimos, se le ha encontrado
sobre todo en montones de rocas y cuevas ocupadas por murciélagos. A veces las chinches
se encuentran en árboles huecos. (Schofield 1994).
21
En América Central, la abundancia y diversidad de poblaciones de Triatoma
dimidiata representa el mayor reto para el control vectorial, donde la presencia de
poblaciones selváticas puede representar uno de los mayores obstáculos para el control de
la especie (Schofield 2000).
Es una especie altamente variable especialmente en las mediciones relativas de la
cabeza y ojos, además es muy variable en sus aspectos cromáticos, proporciones corporales
y estructuras genitales (Lent y Jurberg 1985), al igual que en su comportamiento
intradomiciliar (Schofield 2000).
El tamaño total incrementa gradualmente de norte a sur dentro del rango de la
especie pero con muchas excepciones. La cabeza comienza a alargarse relativamente (y los
ojos a acortarse) de norte a sur, siendo más corta en algunos especimenes mexicanos y más
larga en los especimenes colombianos (Lent y Wygodzinsky 1979). Esta variabilidad llevó
a Usinger en 1941 a crear una nueva especie, Triatoma capitata, para ejemplares
procedentes de Colombia, alegando poseer una cabeza más larga y delgada, ojos menores y
ángulos humerales más aguzados que Triatoma dimidiata (Zeledón, 1982). Posteriormente,
Usinger (1944) describió tres subespecies denominadas capitata (para la forma
colombiana), dimidiata (para las formas Centro Americanas) y macullipennis (para la
forma mexicana). No obstante, después de una revisión de 160 individuos que
correspondían a todo el rango de la especie se encontró que hay una alta variabilidad y este
conocimiento actual es el que no permite hoy en día la separación en subespecies por lo
que Lent y Wygodzinsky (1979) recomiendan que se mantengan las formas conocidas de
una sola especie: Triatoma dimidiata (Zeledón, 1985).
Marcilla, et al. (2001) realizó estudios moleculares utilizando ITS-2 de rDNA
nuclear como marcador, los cuales sugieren que esta especie incluye varias poblaciones en
proceso de evolución divergente, con aislamiento geográfico como posible causa.
Recientemente, Bustamante et al. (2004) realizaron una comparación morfométrica entre
ocho poblaciones de Triatoma dimidiata provenientes de regiones geográficas diferentes
(México, Guatemala, Honduras y Colombia) y dos ecotopos, doméstico y silvestre. La
22
comparación mostró diferencias en la forma de la cabeza, relacionadas con la geografía,
mostrando una separación entre las poblaciones del norte, centro y sur. Únicamente la
posición de un grupo silvestre de Guatemala, de las cuevas de Lanquín, no se correlacionó
con la geografía; este grupo ya había sido previamente descrito por Lent & Wygodzinsky
(1979) con características propias de adaptación de los artrópodos a cuevas. Esta población
se mostró cercanamente relacionada con la población de Colombia, la cual a pesar de haber
sido colectada en casas podría provenir de cuevas cercanas, esta similitud entre las dos
poblaciones podría deberse a influencias evolucionarias o ecológicas.
La alta variabilidad de la especie se refleja también en los diferentes ecotopos en
que puede encontrarse: cuevas ocupadas por murciélagos, montículos de piedra, montículos
de adobe, ruinas, nidos de roedores o marsupiales, árboles huecos, palmeras (Zeledón 1981,
Monroy 1992, Schofield 1994, Monroy et al. 2003c).
En la actualidad, las poblaciones silvestres no se consideran candidatos factibles
para su eliminación de la región, implicando que el control debe estar basado
mayoritariamente en la eliminación de poblaciones domésticas, seguida de vigilancia e
intervenciones designadas a impedir la recolonización desde focos silvestres. La
eliminación local podría ser posible en áreas donde las poblaciones silvestres sean raras o
estén ausentes (Schofield 2000).
Datos disponibles, entre ellos estudios moleculares (Marcilla et al. 2001) y
Morfométricos (Bustamante et al. 2004), parecen sugerir que Triatoma dimidiata puede
representar una serie de subpoblaciones relativamente aisladas, con un pequeño flujo de
genes entre ellas. De ser esto verificado, podría alcanzarse altos niveles de control en
localidades específicas y realizarse monitoreos -por medio de marcadores genéticos y
fenéticos apropiados- del origen de potenciales reinfestaciones. Es por lo anterior, que se
considera como una prioridad urgente el estudio de la estructura genética de poblaciones de
Triatoma dimidiata (Schofield, 2000). Ibáñez-Bernal & Paz Rodríguez (1998) también
recomiendan realizar estudios para la caracterización genética de las poblaciones y análisis
moleculares para aportar, en conjunto con otros tipos de estudio, datos necesarios para
23
confirmar o modificar los esquemas clasificatorios al interior del género Triatoma; y los
cuales, en nuestro caso, también pueden servir para contribuir al conocimiento del estatus
especifico de las diferentes poblaciones, para dilucidar si estamos lidiando con una sola
especie o un complejo de especies.
II.1.4 Sistemática de Triatoma dimidiata.
Triatoma dimidiata fue tentativamente asignada dentro del complejo Phyllosoma
por Lent & Wygodzinsky (1979), recomendando realizar estudios de los estadios larvales
de la especie. A nivel intraespecífico, representa un ensamble de poblaciones
morfológicamente variables (Schofield, 2005). Usinger en 1941 y 1944, les dio un estatus
subespecífico a algunas poblaciones, llamando Triatoma dimidiata dimidiata a las formas
Centroamericanas de la especie, T. dimidiata capitata a la forma colombiana y T. dimidiata
maculipennis a la forma mexicana; Lent & Wygodzinsky (1979) realizaron una revisión de
especimenes a lo largo de todo el rango geográfico de su distribución y finalmente
sinonimizaron las tres subespecies al concluir que morfológicamente no era posible
distinguirlas entre ellas.
Recientemente, se ha encontrado que Triatoma dimidiata de la península de
Yucatán es genéticamente diferente de otros especimenes colectados en otras regiones de
México, por la sustitución de 14 nucleótidos en la secuencia del Espaciador Interno
Transcrito-2 (ITS2, por sus siglas en inglés) del ADN ribosomal (Marcilla et al., 2001). Las
interpretaciones actuales de evidencias genéticas disponibles en combinación con datos
epidemiológicos sugieren que Triatoma dimidiata se pudo haber originado en la región de
la península de Yucatán, posteriormente dispersándose para abrirle el camino a una serie de
poblaciones relativamente discretas, junto con una serie de supuestas derivaciones que
incluyen a Triatoma hegneri (isla de Cozumel), al complejo T. flavida (Cuba y Jamaica) y
varias especies del complejo Phyllosoma (México) (Schofield, 2006). El presunto y
principal fenotipo original de T. dimidiata está distribuido a lo largo de la Península de
Yucatán, donde la especie es principalmente silvestre o peridoméstica.
24
Panzera et al. (2006), identificaron por medio de análisis cromosómicos, tres
diferentes citotipos en poblaciones de Triatoma dimidiata de diferentes países de Centro
América, México y Colombia. El citotipo 1 correspondió a las poblaciones domésticas y
peridomésticas de los cuatro países estudiados; el citotipo 2 se encontró en las poblaciones
silvestres y domésticas de la Península de Yucatán; el citotipo tres fue identificado en la
población silvestre de Yaxhá, Petén; Los datos sugieren fuertemente que T. dimidiata,
considerada durante largo tiempo como una única especie, probablemente comprenda al
menos dos especies crípticas adicionales (morfológicamente indistinguibles, pero aisladas
reproductivamente), Yucatán y Petén.
II.1.5 Herramientas no moleculares para estudios en Triatominos
En los últimos años, han sido diseñadas y aplicadas diversas técnicas moleculares y
estadísticas, con el fin de llevar a cabo la identificación de especies, un área innovadora que
aún está en desarrollo (Bargues, 2006; García et al., 2000, 2003; Monteiro et al., 1999;
2003; 2004; Dotson & Beard, 2001). Se ha recomendado la existencia de herramientas
complementarias, no-moleculares, a la sistemática moderna de insectos, en particular en
Triatominae (Dujardin, 2006). Para poder aplicar una herramienta en esta área se debe tener
en cuenta la especie como provista por la hipótesis de la evolución, por lo que debería
responder a los siguientes criterios: a) Tener en cuenta la variabilidad intraespecífica y b)
Tener una base biológica. Las técnicas moleculares cumplen con ambas condiciones,
aunque responden mejor a la segunda, quedando muchas veces insatisfecha la primera, y es
en esta parte donde cobran importancia las herramientas no- moleculares (Dujardin, 2006).
Para entender las bases biológicas de las herramientas no-moleculares es
importante admitir que una especie algunas veces también es el producto de millones de
años de selección natural. Durante esta evolución, la especie desarrolla cambios de
comportamiento (fisiológicos) y estructurales para adaptarse a un nicho dado (o para evitar
algunos de ellos), no todos ellos son el efecto de cambios de secuencia nucleotidica. Esto
tiene consecuencias perceptibles en su fenotipo y en su ubicación en el ambiente natural.
25
Las herramientas no-moleculares buscan este tipo de consecuencia fenotípica que podría
compararse con una forma específica, una marca presente en alguna parte del fenotipo: su
comportamiento, su forma, o las especificidades de su hábitat (Dujardin, 2006).
Las herramientas no moleculares se pueden aplicar realizando estudios sobre:
a) Comportamiento: Es un componente importante para reconocer especies, detectarlas o
discutir su validez (Costa et al., 2003). Entre estos se encuentran los cruces experimentales
(Pérez et al., 2005), los cuales han sido sugeridos por Panzera et al. (2006), para entender el
origen y la divergencia de especies crípticas.
b) Forma: Se refiere al registro instable de la morfología, el que se ve afectado rápidamente
por cambios medioambientales o por desvío genético (Falconer, 1981) y que es detectado
de la mejor manera por técnicas biométricas cuantitativas. Entre estas se encuentra la
morfometría Tradicional y geométrica, patrones de sensillas antenales.
c) Hábitat: Su fundamento biológico es la idea de que una especie tiene un medio ambiente
definido, y que está limitada por él. Cada especie ocupa un nicho ecológico que se puede
describir cuantitativamente por parámetros medibles de sus lugares de sus lugares de
recolección (Dujardin, 2006). Creación de mapas temáticos de SIG basados en la
ocurrencia conocida de poblaciones silvestres georeferenciadas (Gorla, 2002), estudios de
campos detallados sobre los factores medioambientales que contribuyen a la presencia o
ausencia de Triatoma dimidiata silvestre (Schofield, 2006).
II.1.6 Cruces experimentales
De acuerdo con Ryckman (1962), el aislamiento reproductivo es el mejor criterio
para evaluar el estatus taxonómico de determinada población. (Costa et al., 2003).
Los estudios de hibridización en Triatominae permiten la formulación de hipótesis
concernientes al origen y divergencia de las especies. (Belisario, Avila & Diotaiuti, 2007).
Debido a las similitudes morfológicas, la mayoría de especies de Triatominos pueden ser
agrupadas en complejos específicos (Carcavallo et al., 2000), los cuales han sido muy
26
discutidos en orden de reevaluar la distinción de las especies y establecer términos precisos
para su identificación. (Belisario, Ávila & Diotaiuti, 2007).
Se considera que la hibridización en Triatominae:
a) Permite la formulación de hipótesis concernientes al origen y divergencia de las
especies.
b) Puede ayudar a entender la sistemática de los grupos y,
c) La hibridización experimental ha permitido el análisis cuantitativo de las relaciones
taxonómicas correlacionadas con los grados de similitud morfológica entre especies.
27
PARTE III
III. RESULTADOS
III.1 Cruces experimentales de la chinche picuda, Triatoma dimidiata sensu lato
III.1.1 Cruces entre chinches silvestres de Amatitlán, Guatemala y chinches
silvestres de Los Amates, Izabal
Los especímenes de Amatitlán corresponden a la F1 de un cultivo de laboratorio,
obtenido a través de los huevecillos de una hembra colectada en campo. El ecotopo
específico de esta población no se conoce a cabalidad pero se cree que provienen de los
lechos rocosos que se encuentran en este lugar y que llegan a los chalets y las viviendas
atraídas por la luz, pero sin colonizarlas. La población de Los Amates, Izabal, fue colectada
en una palmera en la que se encontró colonización, encontrándose especímenes de todos los
estadíos y adultos de ambos sexos. En las viviendas cercanas a este lugar se ha reportado la
presencia de adultos que llegan atraídos por la luz, pero no se ha encontrado colonización.
Los resultados de los cruces entre estas dos poblaciones se muestran en el cuadro 2.
Debido a que muy pocas chinches llegaron a la fase de adulto y a diferentes tiempos, en
ambos cultivos, no fue posible realizar los tres cruces esperados en cada vía. En las dos
parejas en las que hubo oviposición, los huevecillos fueron viables, obteniéndose en ambos
porcentajes de éxito de eclosión arriba del 50 %.
28
Cuadro 2. Parámetros observados en los cruces entre especimenes silvestres de Amatitlán y Los Amates, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición.
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillosovipuestos
No. huevecillos
eclosionados
% de éxito
eclosión* ♀ Amatitlán
vrs. ♂ Los Amates
16 20 77 58 75.32
♀ Los Amates vrs.
♂ Amatitlán (Cruce # 1)
27 21 171 91 53.22
♀ Los Amates**
vrs. ♂ Amatitlán (Cruce # 2)
-- -- -- -- --
* %de éxito de eclosión= (No. huevecillos eclosionados/No. huevecillos ovipuestos) * 100 ** La ♀ murió sin oviponer
Fuente: Datos experimentales FODECYT 044-2007 Del cruce de la hembra de Los Amates con el macho de Amatitlán, se obtuvo una
hembra con la cual se realizó un retrocruce con un macho de Los Amates. En el cuadro 3 se
muestran los resultados, observándose que hubo fertilidad obteniéndose huevecillos viables
con un porcentaje de éxito de eclosión del 92%.
Cuadro 3. Parámetros observados en el cruce entre espécimen F1 y silvestre de Los Amates, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ F1 vrs.
♂ Los Amates
14 35 51 47 92.16
Fuente: Datos experimentales FODECYT 044-2007
29
III.1.2 Cruces entre chinches silvestres de Los Amates, Izabal y chinches domésticas
de Yupiltepeque y Comapa, Jutiapa.
Los resultados de estos cruces se pueden observar en el cuadro 4. A excepción del
segundo cruce en el que la hembra murió sin haber ovipuesto, los 5 cruces restantes fueron
fértiles, obteniéndose huevecillos viables. En los cruces recíprocos, hembras de Comapa y
machos de Los Amates, se observó que el éxito de eclosión tendió a ser mayor (entre 63.01
y 90.14) que en la otra vía (entre 40.42 y 70.83).
Cuadro 4. Parámetros observados en los cruces entre especimenes silvestres de Los Amates y domésticos de Yupiltepeque, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición.
Ecotopos Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ Los Amates vrs.
♂ Yupiltepeque (cruce #1)
12 22 141 57 40.42
♀ Los Amates* vrs.
♂ Yupiltepeque, (cruce #2)
-- -- -- -- --
♀ Los Amates vrs.
♂ Yupiltepeque, (cruce #3)
18 26 72 51 70.83
♀ Comapa vrs.
♂ Los Amates (cruce #1)
16 26 173 109 63.01
♀ Comapa vrs.
♂ Los Amates (cruce #2)
16 24 142 128 90.14
♀ Comapa vrs.
♂ Los Amates (cruce #3)
14 25 184 164 89.13
*La hembra murió sin oviponer Fuente: Datos experimentales FODECYT 044-2007
30
III.1.3 Cruces entre chinches silvestres de Los Amates, Izabal y chinches silvestres de
Yaxhá, Petén
En este caso únicamente se realizaron cruces entre hembras de Yaxhá y machos de
los Amates. No se realizaron los cruces recíprocos, ya que solo se obtuvieron adultos
hembra a partir de las ninfas que fueron colectadas en Yaxhá, Petén. En el cuadro 5 se
muestran los resultados obtenidos, donde se puede observar que en los tres cruces hubo
oviposición, variando el número de huevecillos obtenidos entre 37 y 118; sin embargo,
ningún huevecillo fue viable.
Cuadro 5. Parámetros observados en los cruces entre especimenes silvestres de Yaxhá y Los Amates, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición.
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. de huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ Yaxhá vrs.
♂ Los Amates (cruce #1)
22 -- 118 -- 0
♀ Yaxhá vrs.
♂ Los Amates (cruce #2)
49 -- 37 -- 0
♀ Yaxhá vrs.
♂ Los Amates (cruce #3)
20 -- 97 -- 0
Fuente: Datos Experimentales FODECYT 044-2007
III.1.4 Cruces entre chinches domésticas de Comapa, Jutiapa y chinches silvestres de
Yaxhá, Petén
En el cuadro 6 se muestran los resultados para estos cruces y se puede observar que
a pesar de que hubo oviposición (79 y 70 huevecillos), no hubo viabilidad en ninguno de
los casos, al igual que en los cruces anteriores (III.1.3)
31
Cuadro 6. Parámetros observados en los cruces entre especimenes silvestres de Yaxhá y domésticos de Comapa, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición.
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. de huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ Yaxhá vrs.
♂ Comapa (cruce # 1)
12 -- 79 -- 0
♀ Yaxhá vrs.
♂ Comapa (cruce # 2)
23 -- 70 -- 0
Fuente: Datos Experimentales FODECYT 044-2007
III.1.5 Cruce entre chinche domésticas de San Cristóbal, Alta Verapaz y chinches
silvestre de Yaxhá, Petén.
Debido a que no se contó con más especimenes adultos de Yaxhá, únicamente se
logró realizar un cruce con un macho doméstico de San Cristóbal, Alta Verapaz. En el
cuadro 7 se puede observar que la hembra ovipuso 113 huevecillos, pero al igual que en los
demás cruces con hembras de Yaxhá, ninguno fue viable.
Cuadro 7. Parámetros observados en el cruce entre especimenes silvestre de Yaxhá y doméstico de San Cristóbal, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. de huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ Yaxhá vrs. ♂ San
Cristóbal
15 -- 113 0 0
Fuente: Datos Experimentales FODECYT 044-2007
32
III.1.6 Cruce entre chinche doméstica de Comapa, Jutiapa y chinche silvestre de San
Luis, Petén
Ya que la población silvestre de San Luis es muy difícil de colectar y las ninfas se
mueren fácilmente, únicamente se obtuvo una hembra por lo que solo se realizó un cruce
con un macho doméstico de Comapa. La hembra ovipuso únicamente 4 huevecillos,
muriendo un par de semanas después. Ningún huevecillo fue viable.
Cuadro 8. Parámetros observados en el cruce entre especimenes silvestre de San Luis y doméstico de Comapa hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. de huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ San Luis vrs.
♂ Comapa
-- 4 0 0
Fuente: Datos Experimentales FODECYT 044-2007
III.1.7 Cruce entre chinches silvestres de Los Amates, Izabal y chinches domésticas de
San Cristóbal, Alta Verapaz
Los resultados de los cruces entre estas dos poblaciones se muestran en el cuadro 9.
En el caso de los cruces entre hembras de San Cristóbal y machos de Los Amates, se
obtuvieron pocos huevecillos en los cuatro casos (33, 1, 57 y 15 respectivamente), de los
cuales ninguno fue fértil. Por el contrario, en los cruces recíprocos el número de huevecillos
ovipuestos fue mayor (entre 98 y 110) y aunque hubo viabilidad, el éxito de eclosión fue
mucho más bajo (aproximadamente 31 %) que en los cruces de la población silvestre de
Los Amates con las domésticas de Jutiapa (entre 75 y 90 %).
33
Cuadro 9. Parámetros observados en los cruces entre especimenes domésticos de San Cristóbal y silvestres de Los Amates, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. de huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ San Cristóbal
vrs. ♂ Los Amates
(cruce #1)
31 -- 33 0 0
♀ San Cristóbal
vrs. ♂ Los Amates
(cruce #2)
19 -- 1*
0 0
♀ San Cristóbal
vrs. ♂ Los Amates
(cruce #3)
17 -- 57 0 0
♀ San Cristóbal
vrs. ♂ Los Amates
(cruce #4)
12 -- 15 0 0
♀ Los Amates vrs. ♂ San
Cristóbal (cruce #1)
24 24 110 35 31.82
♀ Los Amates vrs. ♂ San
Cristóbal (cruce #2)
34 18 98 31 31.63
♀ Los Amates vrs. ♂ San
Cristóbal (cruce #3)
-- -- ** -- --
*La hembra murió a los pocos días de oviponer **La hembra murió sin oviponer
Fuente: Datos Experimentales FODECYT 044-2007
34
III.1.8 Cruce entre chinches domésticas de San Cristóbal, Alta Verapaz y chinches domésticas de Mérida, Yucatán.
En el cuadro 10 se muestran los resultados de los cruces entre estas poblaciones. En
ambos casos, el número de huevecillos fue bajo y únicamente en uno hubo viabilidad.
Cuadro 10. Parámetros observados en los cruces entre especímenes domésticos de San Cristóbal y domésticos de Mérida, Yucatán, México, desde la cópula hasta 122 días (4 meses) después de la primera oviposición.
Ecotopo Tiempo de oviposición
(días)
Tiempo de eclosión (días)
No. de huevecillos ovipuestos
No. de huevecillos
eclosionados
% de éxito de eclosión
♀ San Cristóbal
vrs. ♂ Mérida (cruce #1)
-- -- 51 0 0
♀ San Cristóbal
vrs. ♂ Mérida (cruce #2)
-- -- 15
10 67%
Fuente: Datos Experimentales FODECYT 044-2007
35
III.2 Discusión de resultados
III.2.1 Poblaciones seleccionadas.
Triatoma dimidiata, es el principal vector de la Enfermedad de Chagas en Centro
América. Presenta una extensa diversidad fenotípica, genotípica y de comportamiento en
los hábitats en que se encuentra, y sus poblaciones no domiciliadas pueden actuar como
fuentes de reinfestación en focos ya tratados. (Bargues et al., 2008, Nakagawa 2003a,
Nakagawa 2003b; Bustamante et al., 2004; Dorn et al., 2009).
En el país se le puede encontrar en un amplio número de ecotopos silvestres,
domésticos y peridomésticos, lo cual hace que no sea un candidato factible para su
erradicación. Sus poblaciones presentan diferentes grados de importancia epidemiológica,
que parecen estar relacionados con la estructura genética de las poblaciones. Panzera et al.,
2006, realizaron un estudio de variación cromosomal y tamaño genómico, en el cual
encontraron tres distintos citotipos para Triatoma dimidiata. El primero se encontró
asociado con las poblaciones de importancia epidemiológica en México y Centro América,
el tercero se encontró restricto a las poblaciones de Yucatán, México y, el segundo a la
población de Yaxhá en Petén, Guatemala; sugiriendo que las dos últimas podrían ser en
realidad especies crípticas. Bargues et al., 2008 y Dorn et al., 2009; realizaron estudios
moleculares utilizando el segundo espacio trascrito interno del ADNribosomal -ITS-2-, y
encontraron 3 grupos de Triatoma dimidiata genéticamente distintos, asociando al grupo 1
con las poblaciones de mayor importancia epidemiológica y al grupo 3 con poblaciones
silvestres de menor importancia epidemiológica. El grupo tres presentó diferencias
genéticas muy grandes con respecto a los otros grupos, sugiriéndose que podría tratarse de
una especie distinta a Triatoma dimidiata.
En Guatemala, se reportaron poblaciones con los citotipos 1 y 2 (Panzera et al.,
2006) y especímenes de los tres grupos genéticos identificados con ITS-2 (Bargues et al.,
2008; Dorn, et al., 2009). Es el único país en que se han encontrado tantos grupos
presentes, lo cual ya había sido sugerido por estudios utilizando técnicas de Morfometría
36
Tradicional (Bustamante et al., 2004). Este panorama hace que sea importante el estudio de
las poblaciones de la especie para dilucidar su importancia, tanto epidemiológica como
taxonómica.
En el estudio se incluyeron especímenes de los tres grupos genéticos (ITS-2) y los
dos citotipos presentes en el país, con el fin de establecer si existe barrera reproductiva
entre ellos.
La población doméstica de Jutiapa fue seleccionada por ser la de mayor importancia
epidemiológica en el país; además de su alto grado de domesticación (Citotipo 1, Grupo 1
ITS-2). Las poblaciones silvestres de Amatitlán y Los Amates fueron seleccionadas por el
riesgo que presentan como posibles focos de infestación, ya que se ha reportado su
presencia atraídas por la luz de las viviendas cercanas; además, datos de disección del
LENAP muestran que se han encontrado especímenes altamente parasitados en ambas
poblaciones, lo que representa un grave riesgo en caso de llegar a establecerse un ciclo de
transmisión (Grupo 1 ITS-2). La población de San Cristóbal Verapaz se seleccionó por la
disponibilidad del cultivo; además que se encuentra localizada en el área en que se reporta
el grupo 2 de ITS-2, lo cual coincide con que a pesar de ser doméstica representa una
población con importancia epidemiológica secundaria (chinches en proceso de
domesticación, con pocos casos de la enfermedad). La población silvestre de San Luis
(cuevas), no ha sido estudiada con ningún marcador molecular, pero se ha diferenciado
claramente utilizando técnicas de morfometría tradicional, se incluyó en el estudio por su
importancia taxonómica. La población silvestre de Yaxhá, se incluyó por su importancia
taxonómica (Citotipo 2, grupos 2 y 3 ITS-2). Aunque se han encontrado especímenes
positivos para la presencia del parásito, esta población es puramente silvestre y se podría
dar una infección por un contacto incidental. Los estudios fenotípicos (Bustamante et al.,
2004; Calderón-Fernandez et al., 2005; Catalá et al., 2005; Menes, 2004; Panzera et al.,
2006; Menes et al., 2007), así como los moleculares (Bargues et al., 2008; Dorn et al.,
2009), han sugerido reiteradamente que esta población podría ser en realidad una especie
críptica o encontrase en un avanzado estado de especiación. En Yaxhá, se reportó la
presencia de los grupos 2 y 3 de ITS-2 en la población silvestre; este mismo caso sucede en
37
Yucatán, pero en el grupo 2 se reportan especímenes domésticos de Triatoma dimidiata, es
por esto que se incluyeron especímenes de esta población (Citotipo 3, Grupos 2 ITS-2).
III.2.2 Cruces experimentales
Para apoyar los resultados genéticos, se ha sugerido en los últimos años el uso de
otras herramientas no moleculares, que sean complementarias y apoyen a la correcta
clasificación de los grupos, dentro de la sistemática de los Triatominos (Dujardin, 2006).
Los cruces experimentales han sido sugeridos, dentro de este tipo de herramientas, para
aplicarse a estudios del comportamiento, con el fin de entender el origen y divergencia de
especies crípticas (Perez et al., 2005; Panzera et al., 2006); así como los mecanismos de
aislamiento de las especies (Pérez et al., 2005). Se ha indicado su uso para reconocer
especies, detectarlas o discutir su validez (Costa et al., 2003).
Los estudios utilizando cruces experimentales en insectos parten del concepto de
especie propuesto por Dobzhansky (1937): “Una especie es un grupo de individuos
completamente fértiles, pero reproductivamente aislados de otros grupos similares debido
a sus características fisiológicas (produciendo incompatibilidad parental, híbridos
estériles, o ambos)”. Muchas especies de Triatominos, morfológicamente similares o no,
genéticamente cercanas o no, se conoce que producen híbridos bajo condiciones tanto
naturales como experimentales (Noireau et al., 1998; Mazzotti y Osorio 1942; Superlano et
al., 2006; Belisario, Avila & Diotaiuti, 2007; Costa et al., 2009; Martínez-Ibarra et al.,
2008)). De acuerdo con Pérez et al., (2005), además de su rol evolucionario, los estudios
de hibridización son herramientas poderosas para analizar fenómenos que pueden causar
divergencia poblacional y especiación, como por ejemplo, la formación de mecanismos de
aislamiento. El concepto de aislamiento reproductivo, como definición de especies debe
ser interpretado no solo como la posibilidad biológica de tener descendencia fértil, sino a
través de barreras geográficas o ecológicas que hacen que el apareamiento sea imposible
entre poblaciones que no son genéticamente incompatibles (Carcavallo et al., 2000). Los
eventos de hibridización son usualmente considerados como el final de la muerte
38
evolucionaría, ya que frecuentemente resultan en progenie no viable o infértil; sin
embargo, un enfoque alternativo asume que la hibridización natural guía a la producción de
nuevas combinaciones de genes, así como a nuevos alelos, por medio de la creación de
condiciones genéticas favorables para que ocurran cambios evolucionarios rápidos y
mayores (Pérez et al., 2005).
El principal enfoque que se ha utilizado para los estudios con cruces experimentales
es el de la hibridización entre especies; sin embargo, también se ha aplicado para estudios
de poblaciones geográficas, que con anterioridad habían sido sinonimizadas en una misma
especie. Triatoma brasiliensis melanica fue elevada al estatus de especie basado en la
comparación de su morfología, biología, ecología, cruces experimentales, aloenzimas y
secuencia de ADN mitocondrial con los otros miembros del complejo de especies T.
brasiliensis. Los resultados sugieren que T. brasiliensis melanica es verdaderamente una
unidad evolucionaria independiente y la forma más diferenciada del complejo, con una
composición genética incompatible e híbridos no viables con otros miembros del complejo
(Costa et al., 2006).
Los cruces experimentales también han sido utilizados para estudiar el grado de
aislamiento reproductivo de especies simpátricas y alopátricas en otro grupo de importancia
médica, Lutzomya, en el cual se encontró un fuerte aislamiento entre poblaciones de
Lutzomya longipalpis de un mismo complejo. (Souza et al., 2008).
En Guatemala, Triatoma dimidiata presenta poblaciones morfológicamente
variables, que pueden ser separadas utilizando técnicas morfométricas (Bustamante et al.,
2004; Calderón-Fernandez et al., 2005; Lehmann et al., 2005; Dujardin et al., 2009). Esta
información ha apoyado los resultados de otros estudios genéticos utilizando diferentes
marcadores moleculares, como el segundo espacio trascrito interno del ADNribosomal, el
cual mostró una variabilidad inusual en las secuencias intraespecíficas de algunas
poblaciones de Triatoma dimidiata. (Bargues et al., 2008; Dorn et al., 2009). Esta
variación también se ha encontrado en estudios cromosomales y de tamaño genómico en
39
ésta especie, los cuales sugieren que Triatoma dimidiata podría representar un complejo de
especies crípticas, morfológicamente indistinguibles (Bargues et al., 2008).
La situación de Triatoma dimidiata, es similar a la del complejo T. brasiliensis,
incluyendo poblaciones altamente variables, desde el punto de vista genético y
morfológico. Se han sugerido los estudios de cruces experimentales en esta especie, ya que
pueden ser de mucha utilidad para dilucidar la importancia epidemiológica de las
poblaciones, principalmente de las silvestres, así como para contribuir con su correcta
clasificación taxonómica, apoyando los resultados que se han obtenido con otras
herramientas.
III.2.2.1 Importancia de las poblaciones silvestres en los procesos de infestación.
Los resultados obtenidos, muestran que las barreras reproductivas no se encontraron
a nivel general entre un tipo de ecotopo y otro (silvestre con doméstico), sino a nivel
específico del tipo de hábitat en particular.
Los cruces entre especímenes silvestres de Los Amates, Izabal (palmeras) y
Amatitlán, Guatemala (rocas), produjeron huevecillos viables, con un éxito de eclosión por
arriba del 50%, no presentando barrera reproductiva a pesar de la distancia geográfica y el
hábitat particular del que provenía cada población. Debido a que no se obtuvieron
suficientes especímenes adultos de Amatitlán, no se pudieron realizar cruces con la
población doméstica de Jutiapa.
En el caso de los cruces de especímenes silvestres de Los Amates con especímenes
domésticos de Jutiapa, los resultados mostraron que no existen barreras reproductivas entre
estas poblaciones, ya que produjeron descendencia viable en ambos sentidos, es decir
hembras de Los Amates con machos de Jutiapa y viceversa. Los porcentajes de éxito de
eclosión variaron entre 40.42 y 90.14, siendo en general relativamente altos. Esta
información es importante, ya que no se le dado mayor importancia a la población de Los
Amates, desde el punto de vista epidemiológico; mientras que la población de Jutiapa es la
40
más importante epidemiológicamente, ya que en esta área se presenta gran cantidad de
casos y las chinches se encuentran bien domiciliadas (datos LENAP).
Las tres poblaciones anteriores, Los Amates, Amatitlán y Jutiapa, han sido ubicadas
dentro del grupo 1 de haplotipos encontrados por medio de la técnica molecular de ITS-2
(Bargues et al., 2008; Dorn et al., 2009). Este grupo se ha asociado con las poblaciones de
mayor importancia en la transmisión de la Enfermedad de Chagas. A nivel epidemiológico,
esta información es muy importante, ya que tanto en el caso de Los Amates como de
Amatitlán, los habitantes de las localidades, han reportado la presencia de las chinches,
atraídas por la luz de las viviendas. Adicionalmente, datos de disección del LENAP
(Menes, comunicación personal), muestran que en ambos lugares se han encontrado
especímenes altamente parasitados con Trypanosoma cruzi. Esto representa un grave riesgo
para los programas de control de la enfermedad, ya que estas poblaciones pueden llegar a
establecer un ciclo de transmisión, ya sea por contacto accidental con las personas o por el
establecimiento de un ciclo doméstico en las viviendas cercanas a su hábitat natural. Otro
factor importante es que se ha sugerido, que es necesario que exista un monitoreo a largo
plazo y vigilancia entomológica, ya que es posible que las poblaciones silvestres puedan
repoblar áreas libres del vector (Dorn et al., 2003).
Los cruces entre especímenes de Los Amates (palmeras) y San Cristóbal Verapaz
(domésticos-peridomésticos), mostraron que existen barreras reproductivas en una de las
vías. Al cruzar hembras de San Cristóbal Verapaz con machos de Los Amates, el número
de huevecillos ovipuestos fue bajo (entre 17 y 31) y ninguno de estos fue viable. En el
sentido contrario, hembras de Los Amates con machos de San Cristóbal Verapaz, el
número de huevecillos ovipuestos fue mayor (entre 98 y 110), pero aunque hubo
viabilidad, los porcentajes de éxito de eclosión fueron bajos (32%). Esta información indica
que, a pesar de que las poblaciones no se encuentran completamente aisladas
reproductivamente, han seguido rutas evolucionarias distintas y aunque se encuentran en un
proceso de especiación divergente, aún puede existir un flujo genético entre ellas. La
población de San Cristóbal Verapaz no ha sido estudiada molecularmente; sin embargo, la
localidad se encuentra ubicada en el occidente del país, cerca a los departamentos de Baja
41
Verapaz y Quiché. En estos dos lugares se ha reportado que sus poblaciones de Triatominos
presentan haplotipos que han sido ubicados dentro del grupo 2 identificado con ITS-2
(Bargues et al., 2008; Dorn et al., 2009), por lo que se podría asumir que está población
estaría incluida en el mismo grupo. El grupo 2 se ha asociado con poblaciones de menor
impacto epidemiológico, en áreas donde se presentan pocos casos de la enfermedad y las
chinches se encuentran en procesos de domicilización recientes y con poblaciones
principalmente peridomésticas. La mayor parte de poblaciones de este grupo, se encuentran
distribuidas en la parte sur de México y la península de Yucatán (Dorn et al., 2009). De ser
este el caso, esto explicaría la aparición de barreras reproductivas en un sentido y los bajos
porcentajes de éxito de eclosión en el otro, ya que cada grupo está tomando una ruta
evolutiva diferente. Debido a las características de esta población, es necesario que
posterior a la aplicación de insecticidas para la eliminación intradomiciliar del vector, se
establezcan sistemas de vigilancia con participación comunitaria, para evitar la repoblación
de las viviendas tratadas desde el peridomicilio o el ambiente silvestre.
Para probar la viabilidad entre especímenes de poblaciones diferentes que
pertenecieran ambas al grupo 2 de haplotipos encontrados con ITS-2, no se contó con
ninguna población guatemalteca, por lo que se realizaron cruces entre chinches de San
Cristóbal Verapaz, Guatemala y Mérida, México. En Mérida se ha reportado la presencia de
los grupos 2 y 3 viviendo en simpatría (Dorn et al., 2009). Los especímenes utilizados
fueron colectados en una localidad en la que se reportó la presencia del grupo 2.
Únicamente se pudieron realizar cruces en una vía, hembras de San Cristóbal Verapaz con
machos de Mérida. Los resultados mostraron que en ambos casos el número de huevecillos
ovipuestos fue relativamente bajo (51 y 15); sin embargo, en el primer caso, ningún
huevecillo fue viable, mientras que en el segundo, a pesar del bajo número de huevecillo,
10 de estos eclosionaron, dando un porcentaje de éxito de eclosión de 67%. Este dato es
interesante, ya que aunque no se puedo probar la viabilidad en el sentido contrario, las
hembras de san Cristóbal presentaron barreras reproductivas con la población de Los
Amates (grupo 1), mientras que con Mérida (Geográficamente más lejano que Los Amates
y Yaxhá), si hubo viabilidad aunque en muy bajo porcentaje. Estos resultados podrían estar
42
indicando que en este caso puede estar actuando un mecanismo de especiación más
asociado con barreras geográficas que ecológicas.
En el caso de la población silvestre de San Luis (cuevas), únicamente se pudo
realizar un cruce, ya que a pesar de los cuidados que se le dio a las colecciones vivas, estas
no lograron adaptarse a las condiciones de laboratorio, por lo que únicamente se obtuvo un
adulto. Por lo anterior no se puede sacar ninguna conclusión con respecto a su
comportamiento.
En el caso de la población silvestre de Yaxhá, Petén, a pesar de que sus colecciones
vivas se mantuvieron bajo las mismas condiciones que las demás colecciones, no se obtuvo
ningún macho, por lo que únicamente se pudieron realizar cruces en un sentido. Este
fenómeno podría deberse a un fenómeno conocido como conflicto sexual, el cual se da
cuando un aumento en el éxito reproductivo de un sexo determina un descenso en el éxito
reproductivo del otro sexo (Superlano et al., 2006). Se han descrito varios mecanismos a
través de los cuales la hembra puede sesgar la probabilidad de fertilización de los machos
(Eberhard, 1996 en Superlano et al., 2006); de la forma que sea, este tema debe ser
profundizado para explicar claramente el fenómeno.
Ninguno de los cruces realizados con hembras de Yaxhá, produjo huevecillos
fértiles, a pesar de que en la mayoría de los casos, el número de huevecillos no fue muy
bajo, en un caso 37 y en los demás entre 70 y 118 huevecillos, por lo que se descarta la
oviposición sin cópula. La población de Yaxhá ha sido ampliamente estudiada por métodos
fenéticos y moleculares (Menes et al., 2007; Bustamante et al., 2004, Calderón Fernández
et al., 2005; Lehman et al., 2005; Panzera et al., 2006a; Panzera et al., 2006b; Bargues et
al., 2008; Dorn et al., 2009). Los estudios morfométricos han mostrado una tendencia de
este grupo a separarse del resto de poblaciones de Triatoma dimidiata de Guatemala,
aunque la diferenciación no es completamente clara, presentando algún traslape (Menes et
al, 2007; Bustamante et al., 2004). Panzera et al., (2006), encontraron un citotipo
particular restricto a esta población llamándolo citotipo 2 y sugiriendo que Triatoma
dimidiata podría tratarse de un complejo de especies formado por al menos dos especies
43
crípticas, entre ellas, la de Yaxhá. Recientemente, Bargues et al., (2008) y Dorn et al.,
(2009), reportan que en este lugar se encuentran en simpatría (ocupan las mismas áreas
geográficas. (Superlano et al., 2006)), con base en los haplotipos encontrados con la técnica
de ITS-2, dos poblaciones de grupos genéticos diferentes (grupo 2 y grupo 3). Los
haplotipos del grupo 3 son os que predominan y dentro de este grupo se encontró una alta
divergencia, locual puede undicar que esta población ha pasado por un largo período de
especiación que la ha llevado al aislamiento reproductivo. La importancia de la población
de Yaxhá, desde el punto de vista epidemiológico, se debe a que representa un riesgo para
el contagio accidental de personas que se adentran en la selva, ya que normalmente estas
poblaciones se encuentran positivas para el parásito causante de la enfermedad de Chagas
(Monroy et al., 2003); además que el área norte del país ha sufrido frecuentes invasiones
por parte del humano, por lo que la destrucción del hábitat natural de las chinches puede
representar un riesgo ya que pueden invadir las viviendas cercanas. Como sea, es
importante mencionar la existencia de especies anteriormente consideradas como
estrictamente silvestres pero que han ido teniendo más y más contacto con hospederos
humanos, cambiando después sus características epidemiológicas. (Costa, 1999)
III.2.2.2 Estatus Taxonómico de las poblaciones de Triatoma dimidiata.
III.2.2.2.1 Sistemática de Triatoma dimidiata.
Triatoma dimidiata fue tentativamente asignada dentro del complejo Phyllosoma
por Lent & Wygodzinsky (1979), recomendando realizar estudios de los estadios larvales
de la especie. A nivel intraespecífico, representa un ensamble de poblaciones
morfológicamente variables (Schofield, 2005). Usinger en 1941 y 1944, les dio un estatus
subespecífico a algunas poblaciones, llamando Triatoma dimidiata dimidiata a las formas
Centroamericanas de la especie, T. dimidiata capitata a la forma colombiana y T. dimidiata
maculipennis a la forma mexicana; Lent & Wygodzinsky (1979) realizaron una revisión de
especimenes a lo largo de todo el rango geográfico de su distribución y finalmente
sinonimizaron las tres subespecies al concluir que morfológicamente no era posible
distinguirlas entre ellas.
44
Los estudios citogenéticos en Triatominos son particularmente interesantes ya que
todos tienen cromosomas holocéntricos con un comportamiento mitótico y meiótico
singular (Pérez et al., 2000; 2002; 2005). Inicialmente se consideraba un grupo homogéneo
a nivel cromosómico, aunque recientemente han mostrado niveles significativos de
variación citogenética intra e interespecífica, utilizando técnicas de bandeo. Una de las
características citogenéticas más importantes es la cantidad, distribución y comportamiento
de la heterocromatina constitutiva, revelada por bandeo-C (Panzera et al., 1995; Pérez et
al., 2002). Otros estudios genéticos aplicados a Triatominos pueden verse en: Panzera et
al., 2004; Panzera et al., 2006; Pérez et al., 2005; Pérez et al., 1997; Pérez et al., 2000.
A nivel intraespecífico, Panzera et al. (2006), aplicaron análisis cromosómicos
como marcadores taxonómicos para estudiar la variabilidad genética de poblaciones de
Triatoma dimidiata de diferentes países de Centro América, México y Colombia,
diferenciando tres grupos o citotipos, los cuales están restrictos a diferentes localidades
geográficas. El citotipo 1 estuvo presente en las poblaciones domésticas y peridomésticas
de los cuatro países estudiados, mientras que el citotipo 2 se encontró en las poblaciones
silvestres y domésticas de la Península de Yucatán; el citotipo tres fue identificado en la
población de Yaxhá, Petén, cercana a Yucatán, pero separadas por barreras geográficas
importantes, sugiriéndose que los citotipos encontrados representan especies crípticas
(morfológicamente indistinguibles, pero aisladas reproductivamente).
Los métodos moleculares basados en ADN, tales como RAPD, SSCP y
secuenciación de ADN pueden contribuir sustancialmente al entendimiento sobre la historia
evolutiva de los Triatominae (Bargues, 2006).
Las ventajas que ofrecen la secuenciación del ADN y su utilidad para aclarar ciertos
aspectos importantes de los triatominos, como su bionomía o su interrelación con la
transmisión, epidemiología y control de la Enfermedad de Chagas, han planteado la
necesidad de buscar marcadores moleculares con diferentes niveles de resolución (Bargues,
et al., 2002). Las técnicas moleculares más utilizadas en Triatominos han sido el RAPD, la
45
secuenciación de genes mitocondriales, los microsatélites, la secuenciación de genes y
espaciadores nucleares ribosomales (Bargues, 2006).
El marcador molecular ITS-2 del ADN ribosomal, permitió analizar las relaciones
entre especies estrechamente emparentadas, tales como las del complejo Phyllosoma
(Marcilla et al., 2001). T. dimidiata se confirma como una especie claramente diferente del
complejo Phyllosoma, incluyendo a su vez poblaciones presentando una variabilidad
genética alta como respuesta a diferentes divergencias evolutivas en las cuales el
aislamiento geográfico ha jugado un papel importante. Los trabajos más recientes con el
mismo marcador molecular demuestran que la población de T. dimidiata de Yucatán-Petén
se separa de las otras poblaciones de esta especie, por lo que su clasificación es confusa
(Bargues, 2006; Bargues et al., 2008). Bargues et al. (2008) sugiere la reclasificación del
estatus de estas dos poblaciones a especie: T. sp. aff. dimidiata, mientras que la autora
propone agrupar a las demás poblaciones de la región en 4 subespecies: T. d. dimidiata, en
Guatemala y Chiapas, México, incluyendo Honduras, Nicaragua y las poblaciones
introducidas del Ecuador; T. d. capitata en Colombia y Panamá; T. d. maculipennis, en
México y Guatemala; y T. d. hegneri en la Isla de Cozumel.
Esto dejaría a las poblaciones de nuestro país representadas por 2 especies: la
especie que según Bargues (2008) debe reclasificarse, representando a las poblaciones
silvestres del norte de Guatemala, específicamente de Petén (sin olvidar que para este
estudio solamente se utilizaron muestras de Yaxhá); y la especie T. dimidiata,
subclasificada en dos poblaciones geográficas o subespecies: maculipennis, representada
por las poblaciones domésticas del Quiché, y dimidiata, que incluiría poblaciones
domésticas de Jutiapa, Santa Rosa, Escuintla.
III.2.2.2.1 Estatus Taxonómico de Triatoma dimidiata
Se ha sugerido seguir analizando las poblaciones de T. dimidiata realizando cruces
experimentales entre diferentes poblaciones, con el objetivo de aportar nuevos datos sobre
la taxonomía de este insecto (Pérez et al., 2005; Dujardin, 2006; Panzera et al., 2006; Dorn
46
et al., 2009). Además los cruces son una buena estrategia para evaluar la adquisición de
aislamiento reproductivo de una población con respecto a otra, ya que demuestran
concluyentemente que si dos poblaciones cercanas, filogenéticamente hablando, no logran
producir descendencia, significa que ambas presentan incompatibilidades genéticas tan
grandes, que la reproducción entre sí se ha tornado imposible, es decir, adquirieron
aislamiento reproductivo, que en última instancia, representa el verdadero proceso que
conlleva a la especiación o formación de dos o más poblaciones nuevas de especies (Mayr,
1991). Esto si nos basamos en el concepto biológico de especies, propuesto por Theodosius
Dobzhansky en 1930 (Avise, 2004). Además Ryckman (1962, mencionado en Costa et al.,
2003) manifiesta que el aislamiento reproductivo es el mejor criterio para asignar un estatus
taxonómico a determinada población.
Triatoma dimidiata incluye poblaciones morfológicamente variables. Estudios
genéticos utilizando el segundo espacio trascrito interno del ADNribosomal, demostraron
una inusual variabilidad en las secuencias intraespecíficas en algunas de sus poblaciones.
(Bargues et al., 2008)
Los resultados obtenidos en este estudio apoyan los resultados obtenidos por
(Bargues et al., 2008 y Dorn et al., 2009), utilizando el ITS-2. La más alta variabilidad
intraespecífica ITS-2 conocida en los miembros de los Triatominos es 2.70% en
especímenes de Triatoma infestans colectados en un amplio rango geográfico. En Triatoma
dimidiata se detectó un resultado de 10.18% el cual parece estar pronunciadamente afuera
de los límites del rango de variabilidad intraespecífica conocido para especies de Triatoma.
(Bargues et al., 2008). El grupo 3 que incluye especímenes de Yucatán, Quintana Roo,
Yaxhá Guatemala y Yoro Honduras; presenta una alta divergencia entre el mismo (2.42%),
sugiriendo un viejo origen en la relativamente reducida área geográfica de distribución de
sus haplotipos. Los resultados apoyan que el grupo 3 puede diferenciarse como una especie
por si mismo. (Bargues et al., 2008). Panzera et al., (2006), encontró un citotipo restricto a
la población silvestre de Yaxhá, sugiriendo que podría tratarse de una especie críptica.
Nuestros resultados apoyan ambas hipótesis, ya que ninguno de los cruces que involucró
especímenes de Yaxhá presentó viabilidad, indicando que existen barreras reproductivas.
47
Las especies crípticas son aquellas aisladas reproductivamente que son difíciles de
distinguir por sus características morfológicas (Superlano et al., 2006); por lo anterior,
podría considerarse a la población de Yaxhá como una especie críptica, ya que además de
que se pueden encontrar diferencias genéticas (Bargues et al., 2008; Dorn et al., 2009;
Menes et al., 2007b), también hay diferencias de comportamiento (aislamiento
reproductivo) aunque morfológicamente son casi indistinguibles (Bustamante et al., 2004;
Menes et al., 2007a; Menes et al., 2007b). Sin embargo, el hecho de no haber podido
realizar cruces en ambas vías es una debilidad que debe ser resuelta a futuro con nuevas
colectas para la obtención de especímenes machos.
En cuanto a las poblaciones restantes, la divergencia de 5.62% mostrada por los
haplotipos (grupo 1 y 2) del ITS-2, sugiere un proceso de especiación a lo largo de su
distribución. Se ha propuesto que los procesos de especiación en la subfamilia Triatominae
han tenido lugar principalmente debido a factores ecológicos (Superlano et al., 2006); sin
embargo, los resultados también indican que varias poblaciones de Triatoma dimidiata
están siguiendo diferentes divergencias evolucionarias en las cuales el aislamiento
geográfico parece estar teniendo una importante influencia. Los resultados no apoyan el
nivel de especie para ellos, sin embargo es evidente que en los tres grupos se ha dado un
relativamente largo proceso de divergencia. (Bargues et al., 2008). Nuestros resultados
apoyan nuevamente la hipótesis, mostrando que a pesar de que existen algunas barreras
reproductivas entre el grupo 1 y 2, aun puede existir entre ellos flujo genético. Esto debe ser
comprobado con estudios más profundos que permitan estudiar la viabilidad de la
descendencia producida en los cruces entre estos grupos.
De acuerdo con lo anterior, en Guatemala Triatoma dimidiata presenta poblaciones
que han ido divergiendo, aparentemente tanto por aislamiento geográfico como ecológico;
estando representada por dos grupos, Triatoma dimidiata dimidiata y Triatoma dimidiata
maculipenis, siguiendo líneas evolutivas diferentes y al menos una especie críptica T. sp.
aff. dimidiata.
48
PARTE IV
IV.1 CONCLUSIONES
IV.1.1 Al determinar si existen barreras reproductivas entre especímenes silvestres,
domésticos y peridomésticos de Triatoma dimidiata:
a. Se determinó que existen barreras reproductivas (aislamiento reproductivo) entre
especímenes silvestres del Norte de Guatemala, y especímenes domésticos y
peridomésticos del resto del pais.
b. Se determinó que la poblacion de Yaxhá, Petén, se encuentra en aislamiento
reproductivo, debido a barreras reproductivas que provocan que no se logre
cruzar con otras poblaciones silvestres, domésticas y peridomésticas
provenientes de diferentes regiones del pais.
IV.1.2 Al determinar el papel de las poblaciones silvestres en los procesos de infestación
se obtuvieron las siguientes conclusiones:
a. Se determinó el papel de las poblaciones silvestres de chinches de la especie
Triatoma dimidiata en los procesos de infestación o reinfestación en los
departamentos de Izabal, Guatemala, Jutiapa, Alta Verapaz y Petén.
b. Las poblaciones silvestres de chinche de la especie T. dimidiata de Los Amates
y Amatitlán no presentaron barreras reproductivas entre ellas, a pesar de su
separación y las características ecológicas de sus hábitats (palmeras y rocas
respectivamente).
c. La población silvestre de Los Amates no presentó barreras reproductivas con la
población doméstica de Jutiapa.
d. Las poblaciones de Los Amates y Amatitlán representan un riesgo para los
programas de control, ya que además de reportarse la llegada a las viviendas de
especímenes atraídos por la luz y altas parasitemias en algunos de ellos, pueden
49
mantener un importante flujo genético con las poblaciones domiciliadas del
oriente y sur del país.
e. La población de Los Amates presentó barreras reproductivas en un sentido con
la población doméstica de San Cristóbal Verapaz; sin embargo en el sentido
contrario si hubo viabilidad.
f. La población silvestre de Yaxhá, no produjo huevecillos viables en ninguno de
los cruces con las poblaciones silvestres de Los Amates y domésticas de Jutiapa
y San Cristóbal Verapaz, indicando que se encuentra reproductivamente aislada.
IV.1.2 Al describir el estatus taxonómico de las poblaciones de Triatoma dimidiata se
obtuvieron las siguientes conclusiones:
a. La población de Yaxhá puede ser considerada como una especie críptica, ya que
puede diferenciarse genéticamente y también presenta diferencias de
comportamiento (aislamiento reproductivo).
b. Los resultados apoyan la presencia de tres grupos genéticos (agrupados por
haplotipos obtenidos utilizando ITS-2).
c. Las barreras reproductivas encontradas están relacionadas tanto con el
aislamiento geográfico (San Cristóbal Verapaz y Mérida) como el ecológico
(Yaxhá).
d. Las poblaciones de Triatoma dimidiata de Guatemala, están siguiendo diferentes
divergencias evolucionarias que han llevado a la formación de al menos dos
grupos, que a pesar de estarse aislando, aún pueden existir flujo genético entre
ellos.
e. En Guatemala se encuentran al menos dos grupos de Triatoma dimidiata y una
especie críptica.
50
IV.2 RECOMENDACIONES
IV.2.1 Para las conclusiones del papel de las poblaciones silvestres en los procesos de
infestación se sugieren las siguientes recomendaciones:
a. Mejorar el tamaño de muestra de las poblaciones por medio de colectas en el
campo o la obtención de F1 de padres colectados en su hábitat.
b. Realizar cruces experimentales con otras poblaciones silvestres y domésticas
para conocer mejor los mecanismos de aislamiento (geográfico o ecológico).
c. Continuar con los cruces experimentales para aquellas poblaciones en que no
pudieron realizarse en ambos sentidos.
IV.2.2 Para las conclusiones al describir el estatus taxonómico de las poblaciones de
Triatoma dimidiata se sugieren las siguientes recomendaciones:
a. Se deben utilizar nuevas herramientas no moleculares que complementen la
información fenética y genética de las poblaciones de Triatoma dimidiata para
entender los procesos de especiación que se están dando al interior del grupo.
b. Hacer una recopilación de los resultados obtenidos en estudios genéticos,
fenéticos y ecológicos de la población de T. dimidiata de Yaxhá, para poder
elevarla al nivel de especie.
c. Realizar cruces experimentales entre la población de Yaxhá y poblaciones
silvestres y domésticas de la península de Yucatán, Quintana Roo y Belice (con
individuos del grupo 3 de ITS-2).
d. Continuar con los cruces experimentales entre la descendencia obtenida de los
cruces del estudio, para probar la viabilidad de las generaciones siguientes (hasta
F3)
e. Incluir más poblaciones de Triatoma dimidiata para los estudios.
51
IV.3 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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PARTE V.
V.1 INFORME FINANCIERO
AD-R-0013
Nombre del Proyecto:
Numero del Proyecto: 044-2007Investigador Principal: Licda. Marianela Menes HernándezMonto Autorizado: Q98,857.00
12 meses Fecha de Inicio y Finalización: 01/01/2008 al 31/12/2008
Menos (-) Mas (+)
1 Servicios No Personales
122Impresión, encuadernación y reproducción 500.00Q 500.00Q
133 Viáticos en el interior 6,120.00Q 1,800.00Q 4,320.00Q
181Estudios,investigacionesy proyectos defactibilidad 68,000.00Q 60,000.00Q 8,000.00Q
2 Materiales y Suministros212 Alimentos para animales 500.00Q 500.00Q -Q 241 Papel de escritorio 650.00Q 194.50Q 455.50Q 243 Productos de papel o cartón 406.25Q 406.25Q -Q 261 Elementos y compuestos químicos 1,000.00Q 842.76Q 157.24Q 262 Combustibles y Lubricantes 1,600.00Q 1,000.00Q 1,145.00Q 1,455.00Q 267 Tintes, pinturas y colorantes 2,100.00Q 2,064.00Q 36.00Q 268 pvc 2,500.00Q 210.95Q 2,710.95Q -Q 272 Productos de vidrio 400.00Q 357.84Q 42.16Q 291 Útiles de oficina 2,650.00Q 1,477.91Q 751.70Q 420.39Q 292 sanitarios 1,150.00Q 488.20Q 602.95Q 58.85Q 293 Útiles educacionales 348.91Q 348.91Q -Q
295Útiles menores, médico-quirúrgicosy de laboratorio 700.00Q 570.34Q 129.66Q
3 Propiedad, planta y equipo329 Otras maquinarias y equipos 2,000.00Q 2,000.00Q -Q
Asignacion Presupuestaria
Cruces experimentales entre especímenes silvestres, domésticos y peridomésticos de triatomadimidiata, principal vector de la enfermedad de chagas en Guatemala.
Ejecutado Renglon Pendiente de Ejecutar
QUINCEAVA CONVOCATORIALINEA FODECYT
En EjecuciònGrupo
TRANSFERENCIA Nombre del Gasto
9 Asignaciones Globales(-) Gastos Administrativos (10%) 8,987.00Q 8,987.00Q -Q
TOTAL Q98,857.00 Q1,966.11 Q1,966.11 83,282.20Q 15,574.80Q
Monto Autorizado 98,857.00Q Disponibilidad: 15,574.80Q ( -) Ejecutado 83,282.20Q
Sub-total 15,574.80Q ( -) Apertura de Caja Chica
Total por Ejecutar 15,574.80Q