clasetaller bacova2015mn

7/25/2019 claseTaller Bacova2015mn

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Bioq.NormaPorcel

Prof.Adjunta Bacteriologa

Fac.Bioq.Qca y Fcia

Ba lance delCo ntenidoVa ginal

BACOVA

En el marco del Programa de Educacin Continua

(PROECO)de la Fundacin Bioqumica Argentina y con la

participacin de distintas Universidades, Laboratorios

del Sector Pblico y Privado, se llev a cabo el proyecto

BACOVA cuyo objetivo prioritario fue Normatizar la

Metodologa (ya utilizada en pases centrales) para el

diagnstico de Vaginosis Bacteriana(VB), con la

adecuacin de estudios de alto valor predictivo en elLaboratorio, para asegurar la mxima cobertura en la

deteccinde la mujer en riesgo gineco-obsttrico

La informacin que se genera con

BACOVA est destinada para la atencin

primaria de:

La mujer en edad frtil embarazadas o no

sintomticas o asintomticas La mujer en proceso menopusico

sintomticas o asintomticas
http://search.mywebsearch.com/mywebsearch/redirect.jhtml?searchfor=Mujer+Menopausica&cb=HJ&p2=%5EHJ%5Exdm216%5EYY%5Ear&n=77DE8857&qid=8ba37be07669464a96e446c3b878ac21&ptb=EB431010-1556-4689-A560-BA7D3A979B0E&ct=PI&si=pconverter&pg=AJimage&action=pick&pn=3&ss=sub&st=hp&tpr=sbt&redirect=mPWsrdz9heamc8iHEhldEaCrMkj2WoJa5HSKVMCiy2vA7MTetMuC3IXVDJblaUXxnF2v%2BOWgN%2FlIcjp9L9P4SoYyZytvicczC7Piki5PoJuIuS4TZ81%2FYHNW5GLHTyHE6O2M683rimUz3gUwZYSgEI6c%2BiGGtFUFjstJ736T8yw%3D&ord=37&http://search.mywebsearch.com/mywebsearch/redirect.jhtml?searchfor=Mujer+Menopausica&cb=HJ&p2=%5EHJ%5Exdm216%5EYY%5Ear&n=77DE8857&qid=8ba37be07669464a96e446c3b878ac21&ptb=EB431010-1556-4689-A560-BA7D3A979B0E&ct=PI&si=pconverter&pg=AJimage&action=pick&pn=3&ss=sub&st=hp&tpr=sbt&redirect=mPWsrdz9heamc8iHEhldEUR%2FMjkI0%2BOkWKBUQoAdnwLIaVRZM6smvIs1CpUUayp6Vc434pDlYwbs%2BKeasd%2BJVQ%3D%3D&ord=47&http://search.mywebsearch.com/mywebsearch/redirect.jhtml?searchfor=Mujer+Embarazada+Imagenes&cb=HJ&p2=%5EHJ%5Exdm216%5EYY%5Ear&n=77DE8857&qid=c84d3d4f1cf64578ae8e423947a7b38b&ptb=EB431010-1556-4689-A560-BA7D3A979B0E&ct=PI&si=pconverter&pg=AJimage&action=pick&pn=2&ss=sub&st=hp&tpr=jrel2&redirect=mPWsrdz9heamc8iHEhldEYYhgMpXDZpKnO1RqNT6hiHhwppYrIeaC1WCZfKtc79pk3qjwfgC2S31Ij9h4GE7xcemrK16qBWv5FIICP82qXC6xkQtOm5PiiuFlYSdjQpx&ord=17&


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El estudio Balance del Contenido Vaginal(BACOVA) genera un informe completo sobreel anlisis morfolgico del contenido vaginalbasado en elexmen en fresco

tincin de Gram

coloracin de Giemsa

con lo que se logra integrar elpanorama biolgico de la ecologa

vaginal.

La base del informe la construyen dos nmeros:

Valor Numrico (VN)

Reaccin InflamatoriaVaginal (RIV)

El Valor Numrico (VN) expresa en un nmero, el balance

relativo de lactobacilos y microbiota anaerbica de 0 a 10 y la

Reaccin Inflamatoria Vaginal (RIV) indica en un nmero

entero la cantidad de leucocitos presentes en el CV.

La combinacin de estos dos criterios expresados en dos

nmeros permite establecer cada uno de los cinco EVBs.

Es en realidad un verdadero postulado morfolgico que

define el estado actual del contenido vaginal de la mujer en

estudio.

ESTADOS VAGINALES BASICOSElValor Numrico (VN) va de 0 a 10.

VN= 0 a 3: Equilibrio normal de la microbiotavaginal.No hay

evidencia de desequilibrio sistmico de los factore s

estrognicos y de no existir ningn otro criterio de

alteracin, se debe considerar estado normal de la funcin

vaginal.

VN= 4 a 6: Microbiota con cambios intermedios. Refiere a

algn grado de alteracin sistmica en el control del balance

del contenido vaginal, reflejado por la inversin de la

cantidad relativa de lactobacilos ,disminuida, con respecto a

la microbiota habitual anaerbica, aumentada. En ausenciade RIV, corresponde a un estadoevolutivo no determinado,

que va hacia la normalizacin o hacia un desbalance mayor

conducente al estado deVaginosis Bacteriana tpica.


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VN= 7 a 10: Microbiota alterada. Desequilibrio manifiesto,

con disminucin marcada o ausencia de lactobacilos y

aumento significativo de la microbiota habitual vaginal,

fundamentalmente anaerobia. Este estado, en ausencia de

reaccin inflamatoria manifiesta, es diagnstico de

Vaginosis Bacteriana.

ESTADOS VAGINALES BASICOS en MEF

Con el 100% de valor predictivo positivo y negativo,determina el diagnstico diferencial del estado normal delCV (MN), el estado de vaginosis [en su forma intermedia(MI) y Vaginosis Bacteriana Tpica (VB) ] y el de vaginitis, enlos EVB II: MN+RIV y EVBV:VMI.

Con valores de 60-70% de valor predictivo positivo informasobre la presencia de levaduras (Le) y/o tricomonas (TV)

Contribuye con un valor predictivo slo de alerta, de granimportancia clnica, en caso de la deteccin de Mex y/oclulas epiteliales no habituales en el CV.

En funcin de que Le (se asocia a EVB II: MN+RIV) y TV (se

asocia a EVB V: VMI) una vez establecido uno de estos EVBs,en el caso de d udas se deber intensificar la bsquedamorfolgica. Si no se detectan Le/ TV se debe recurrir acultivos y/o deteccin por amplificacin gnica de estosmicroorganismos

BACOVAESTADOS VAGINALES BASICOS EN MM


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En el marco de los criterios que infor ma BACOVA se

resolvi mantener la exclusin de la determinacin del pH

y/o la prueba de aminas.

El informe BACOVA est validado

exclusivamente para los criterios

microscpicos/morfolgicos.

El VN se amplia de 0 a 5 en base en base que es normal la

disminucin de lactobacilos y no hay aumento de la microbiota

anaerbica.

SOLICITUD DEL ESTUDIO

Criterios de exclusin:

El VN no est validado en la atencin de pre-pberes.

BACOVA no tiene valores predictivos vlidos en

muestras tomadas entre los tres das previos y hasta

cinco das despus de la menstruacin.

Tampoco en casos de hemorragia del tracto urogenital.

Recordar: El estado menstrual es de

exclusin absoluta

Toma de muestra con:

Espculo

Hisopos de algodn esterilizados

Concurrir

Sin relaciones sexuales las 48 h previas Sin tratamiento local 5 das antes

Toda medicacin que la paciente deba mantener, deber serconsignada enaclaraciones sobre lamuestra, al elaborar elinforme.

No deber utilizar duchas vaginales, uso de tampones, niningn cosmtico intimo desdecincodas antes de la toma dela muestra.

La higiene previa, en el da de toma de la muestra debe serde la regin externa genital con jabn comn.

En el caso de secrecin vaginal abundante (flujo), podrutilizar apsitos descartables y usar uno hasta el momento de

la toma de muestra. No existe ninguna restriccin sobre la emisin de orina, peroes preferible orinar una hora antes de la toma de la muestra.

Estandarizar en lo posible, la toma de muestra en la etapaovulatoria del perodo menstrual y la hora del da, sobre todoen el caso de seguimient o de la evolucin, en una mismapaciente. Se d eber asegurar la no interferencia con elperodo menstrual.


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La pacient e deber recibir toda aclaracin referent e a lapreparacin previa para la toma de muestra.

Debe prestar consentimiento para la realizacin del estudio.

Se le asegurar que todas las exigencias de bioseguridad estncontroladas en todo el proceso de toma, transporte y procesode la muestra.

La pacient e debe recibir las instrucciones escritas almomento de la solicitud del estudio.

Se deber evaluar la posible toma inmediata de la muestra o ensu defecto entregar las instrucciones, completando todaaclaracin que resultara necesaria.

La muestra, al ingresar al rea de proceso, siempre debe iracompaada de la siguiente ficha de toma de muestra (FTM)que debe ser completada por el profesional responsable de la

toma directa .

Consentimiento Informado y Ficha

Toma de Muestra:

La experiencia indica que la toma y

transporte de muestra es la etapa de laprestacin sujeta a la :

Mayor cantidad de variablesde muy difcil control

Procedimiento

bsico de la toma

Localizarla posicin del cuello de tero.

Verificar el acceso directo al fondo de saco

vaginal. Tomar con movimientos rotatorios (sin presionar

sobre las mucosas vaginales).

Evitar tocar las paredes del espculo o la regin

externa vaginal al retirar el hisopo.


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No excluyente

Debe constar en el informe la condicin

especial de la toma de muestra.

VN valido

RIV Leucocitos/ Clulas por Campo

(Giensa)

Hisopos

Se utilizaran dos hisopos por toma.estrilesestandarizar el tipo de hisoposin lubricantes

Un hisopo se introduce en el tubo en seco.

Con el segundo hisopo se hace unasegunda toma de fondo de saco y seintroduce en otro tubo conteniendo 0.5 mlde solucin fisiolgica estril.

Muestra en medio de transporte Stuart

Son muestras sobre las que existe una indicacinde cultivos bacterianos.

Si bien limita la posibilidad de la lectura en fresco,se ha determinado la validez del estudio BACOVAen una muestra tomada y transportada en mediode Stuart a los efectos de la determinacin del VN yla RIV.

El VN se realiza en la misma forma que en la tomaconvencional, pero la RIV se evala mediante elrecuento de leucocitos, por clula epitelial porcampo microscpico en la coloracin de Giemsa

Transporte de la muestra

Tratar de hacer el traslado en formainmediata.

Debe ser conservada a temperaturaambiente (20 +/- 5 grados).

Lo ideal es procesar la muestra destinadaal estudio en fresco en el plazo no mayorde una hora a partir de obtenida.


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Examen en fresco:

Iniciar lectura con 400x.

Apreciar la relacin lactobacilos con el resto de lamicrobiota habitual generando un VN preliminar.

Deteccin de bacterias mviles compatibles conMobiluncus.

Presencia de levaduras.

Presencia de Trichomonas.

Apreciacin global preliminar de la relacin leuc/campo yleuc / clula con 400x.

Deteccin de morfotipos bacterianos extraos.

Evaluacin de la presencia de Clulas guas y Clulasredondas.

Toda evidencia anormal que se detecte.

Secuencia de trabajo recomendadaSecuencia de trabajo recomendada

Lectura del Gram.

Establecer el valor numrico (VN)

Informar sobre Morfotipos extraos (Me)

Nmero de leucocitos por campo (RIV)

Punto de corte:

5 leucocitos por campo (1000x)


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Lectura del Gram para generar el informe de

valor numrico (VN).En la tabla que sigue se presenta el diagrama de

la metodologa propuesta por Nugent.

En la prctica se

debe realizar la

lectura de un

nmero de campos

microscpicos,

ledo con el

aumento mximo

con objetivo de

inmersin. Las

cruces + en cada

caso se asignan de

acuerdo a la

siguiente

interpretacin de la

lectura de cadacampo

Morfotipo de bacilos rectos Gram positivos compatibles

con Lactobacillus spp

Morfotipo de pequeos bacilos Gram variables

compatibles con Gardnerella vaginalis, Bacteriodes y

otros Anaerobios.

Morfotipo de bacilos curvos Gram negativos

compatibles con Mobiluncus spp.

Valor numrico : criterios morfolgicos

Clulas gua +2

Mtodo de lectura microscpica:

a.Verificar la correcta coloracin con

controles apropiados.

b.Verificar la homogeneidad de los

extendidos a obser var.

c. Sealar en forma imaginaria cuatro

cuadrantes del preparado y observar

dos campos por cuadrante y dos ms a

eleccin. As se completa la primera

lectura de 10 campos perfectamente

observados y document ados.

d. Si se obtiene una clara definicin

(de 0-3 o de 7 a 10, incluyendo

correccin clulas gua), se da por

terminado el estudio numric o. Si se

encuentra en zona de 4 a 6 (con

correccin de clulas

gua incluido), se procede a la lect ura,

en otro extendido diferente, de ocho

campos, siguiendo el mismo

procedimiento

e. Se analizan los resultados de ambas

lecturas y si persiste el resultado

intermedio, se informar, aclarando la

presencia o no de clulas gua.

Correccin de Lanzafame

Valores numricos de 7 o ms son

considerados de hecho VB y no

requieren correccin.

Correccin del VN por la adicin de dos puntos en caso

de la deteccin de clulas Gua, independiente de su

nmero, paraVaginosis Bacteriana

(Cuando VN se ubica entre 0 a 6 ).


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Lectura del Gram para establecer el

Nmero de Leucocitos por campo (Lpc)

Informar el recuento de Leucocitos por Lpc (leucocitos por

campo con 1000x)

Analizar no menos de cinco campos no adyacentes y calcular

el promedio de las lecturas obtenidas.

Si el resultado esta en la lnea de corte, cinco Lpc +/- dos,

confirmar si hay RIV o no, con el recuento de Leucocitos por

clula epitelial por campo, con Giemsa con aumento de 400X.

El valor de corte en esta coloracin es uno (1), ms de un

leucocito por clula epitelial por campo significan RIV

significativa

El informe de leucocitos ausentes, escasos o abundantes no

es tenido en cuenta.

Lectura de la coloracin de Giemsa

Incluye la evaluacin cuantitativa de leucocitos por clula

epitelial por campo.

Verificar o detectar la presencia o no de Tricomonas vaginalis.

Verificar o detectar la presencia o no de Levaduras.

Verificar la impresin sobre presencia de morfotipos extraos.

Deteccin de clulas Gua (CG) o clulas no habituales del CV

(alerta)

Confir mar el VN aproximado por la lectura del fresco y

determinado por el Gram.

Valor de la relacin de leucocitos por clula

epitelial por campo en la coloracin de

Giensa:

Esta es la metodologa que ofrece la mayor

sensibilidad y debe ser practicada en todos

los casos de estudio de mujeres

embarazadas.

INFORME DE LOS RESULTADOSEl informe es predictivo y no descriptivo.


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Bacilos Gram negativospequeos, pleomrficos

Clula gua en fresco (1000X) Coloracion de Gram (1000x)

Lectura del Gram para el informe de

Morfotipos Extraos

Por el momento los Mex se sistematizan en cuatro

grupos: cocos y/o bacilos Gram positivos

bacilos Gramnegativos (compatibles con enterob.)

bacterias corineformes

formas compatibles conActinomyces.

Una observacin previa con aumento de 100x, permite evaluar la

calidad del extendido y coloracin obtenidos y seleccionar reas

de estudio puntuales.

Utilizar en forma combinada el juego de aumentos de 400x y

1000x para tener una visin global de la distribucin relativa y una

aproximacin sobre el o los morfotipos extraos presentes.Formas bacterianas variables Bacilos curvos Gram variable


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Giemsa( 1000x).Coloracin de Gram Clula guia (1000X)

Complejo GAMM

Coloracion de Gram (1000X)

Fresco(1000X)

Hongos levaduriformes ( 1000 X)


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En fresco

En fresco con azul de metileno

Trichomonas vaginalis

Trichomonas vaginalis (Giemsa 1000x).

Vaginitis por Trichomonas vaginalis

Coloracin de Gram: diplococos intracelulares (1000x)

Neisseria gonorrhoeae
http://www.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.scielo.org.ar/img/revistas/ram/v39n2/a08fot1.gif&imgrefurl=http://www.scielo.org.ar/scielo.php%3Fscript%3Dsci_arttext%26pid%3DS0325-75412007000200008&usg=__mAy44PCU9rvRZCIkL2VkAUheSKk=&h=310&w=381&sz=34&hl=es&start=39&itbs=1&tbnid=SqVABloDxVmU-M:&tbnh=100&tbnw=123&prev=/images%3Fq%3Dclue%2Bcell%2Bvaginosis%2Bbacteriana%26start%3D36%26hl%3Des%26sa%3DN%26gbv%3D2%26ndsp%3D18%26tbs%3Disch:1


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Coloracion de Gram diplocos Gram negativos intra y

extracelu.lares(1000x) Exudado vaginal: Clula tipo coilocito (HPV?).( coloracin de Papanicolaou. 400x)

Propuesta de algoritmo diagnstico

de la disfuncin vaginal

PA: Prueba de aminas

RIV: Respuesta inflamatoria vaginal

VNt: Valor numrico

MH: Microbiota habitual

VB: Vaginosis bacteriana

TV: Trichomonas vaginalis

VVL: Vulvovaginitis por lev

VMI: Vaginitis microbiana inespecfica

La participacin en el proyecto es no arancelada y

abierta a todo profesional habilitado para la

realizacin de anlisis clnicos en todo el pas y las

actividades pueden iniciarse en cualquier poca

del ao.


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Ctedra de Bacteriologa

Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia

Universidad Nacional de Tucumn

E-mail: [email protected]

Coordinadores de BACOVA en Tucumn
mailto:[email protected]:[email protected]

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