BIOQUÍMICA DE LA SALIVA

Cátedra de Bioquímica General y Bucal- Facultad de Odontología- UBA

� MAYORES Y MENORES

� Flujo reposo: 0.02-0.05 a 1.8 ml/min

� Flujo estimulado: 2.5- 5ml/min

� Cavidad oral: 1 ml de saliva – Forma una película de 100 µm de espesor

– Facilita el intercambio iónico entre saliva y esmalte

– Recambio 700-800 veces/día, elimina exceso de bacterias y restos alimenticios

GLANDULAS SALIVALES

SALIVA

Saliva Parcial

Suma de secreciones de las GS mayores y menores + Líquido gingival (transudado seroso)

Saliva total

Saliva parotídea o mezcla de saliva submaxilar y sublingual sin contaminación con el medio bucal

Líquido límpido y estéril

Líquido turbio, posee partículas en suspensión (bacterias, leucocitos, células descamadas del

epitelio bucal, restos alimenticios)

FUNCIONES DE LA SALIVA

ALIMENTACIÓN Y COMUNICACIÓN

� Humedecer ���� Degustación– secreción parotídea

� Lubricar ���� Bolo alimenticio, fonación, – mucinas submaxilares, sublinguales y gl. menores

– glicoproteínas rica en prolina (parotídea)

� Digerir ���� Amilasa salival – células serosas parotídeas y seromucosas submaxilares

– rol secundario sobre restos alimentarios entre dientes

� Digerir ���� Lipasa lingual

– glándulas linguales de Von Ebner

– imp. en recién nacido

INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS

� Limpieza físico-mecánica: por dilución y/o barrido.

� Lubricar y mantener mucosa bucal���� mucinas

– Glucoproteínas muy hidratadas, poco solubles, viscosas,

elásticas y adhesivas

– Sobre mucosas proveen barrera contra desecación y

agentes irritantes de alimentos o toxinas (limita

permeabilidad)

– Atemperante de alimentos muy fríos o calientes

– Aglutinación de bacterias evitando su adhesión

INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS

� Reducir el tiempo de Hemorragia ���� lisozima y Ca

– Activadores de coagulación

� Cicatrización de heridas bucales ���� factores de crecimiento

– Nervioso (FCN) y epidérmico (FCE)

� Acción antimicrobiana ���� Inmumoglobulinas, enzimas y péptidos.

– IgAs, IgG, IgM: aglutinan, opsonizan, facilitan fagocitosis

– Lisozima: hidroliza unión αααα 1-4 del ácido N-acetilmurámico y

N-acetilglucosamina en pared bacteriana

– Peroxidasa: 2H2O2 2H2O + O2

– Lactoferrina: bacteriostático quela Fe

– Histatinas: antifúngicos

REGULATORIAS –HOMEOSTASIS-

� pH bucal ���� 6,8 -7,2 mediante buffers– Bicarbonato/ácido carbónico– Péptidos ricos en histidina– Fosfatos

� Integridad dentaria ���� Ca2+, PO43-,F-, Mg2+

– capacidad buffer – maduración post-eruptiva del esmalte – limpieza mecánica y aglutinación (mucinas de bajo PM)– favorecer el ambiente iónico para una potencial remineralización

sin precipitación espontánea– Interviene en la formación de la película adquirida del esmalte

� Equilibrio hídrico ���� sensación de “boca seca”

Saliva final (secundaria): hipotónica. Se modifica su composición durante el

pasaje por los conductos

Saliva primaria: isotónica respecto al

plasma

MODELO DE SECRECIÓN SALIVAL

SIALONA: unidad fisiológica mínima

Acinos y ConductosIntercalares

Conductos estriados

Conductos excretores

Na+

K +

Cl -

HCO3-HCO3

-

MOVIMIENTOS IONICOS ACTIVOS Y PASIVOS

Pasivo

Activo

Tomada de Fisiología oral, Jenkins GN, 4ta. Edición, 1978

Secreción primaria:K, Na, Ca, HCO3

Cond. Estriados:Reabsorción: NaLiberación: K, HCO3

Ingreso a células acinares:Na, Ca, H2O, CO2

Cond. Estriados: Cl, Na, K y excretores: Na, H2O, K, Cl, HCO3

COMPOSICION QUÍIMICA

saliva mixta humana

Agua 99% puede llegar a 94-95 %

Sólidos < 1% 0,5 % (estimulada) - 6,0 % (no estimulad a)

Peso específico 1,002 - 1,008

pH (rango) 6,8 – 7,2

Saliva completaComponenteNo estimulada Estimulada

Suero, plasma o

sangreFlujo (ml/min) 0.011 1.0 --pH 6.7 6.8-7.5 7.35-7.45Bicarbonato (mM) 5 15-50 23-32Sodio (mM) 4-6 26 135-145Potasio (mM) 22 20 3.5-5.5Calcio (mM) 1.5-4 1.5-3 2-2.5Magnesio (mM) 0.2 0.15-0.2 1-1.5Cloruro(mM) 15 30-100 95-105Fósforo inorg.(mM) 6 4 1-1.5Fluoruro(µg%) 8-25 2-20 10-20Glucosa(mg%) 0.5-1.0 1.0 70-100Amoníaco (mg%) 12 4-8 0.08-0.11Urea (mg%) 20 13-22 14-40Proteínas (mg%) 225 -350 280-300 6.5-8.2 g%Osmolaridad(mOsm/kg)

87.7 132.0 296.0

COMPOSICIÓN SALIVA COMPLETA VERSUS SANGRE

Magnesio (mM) 0.2 0.15-0.2 1-1.5Cloruro(mM) 15 30-100 95-105Fósforo inorg.(mM) 6 4 1-1.5Fluoruro(µg%) 8-25 2-20 10-20Glucosa(mg%) 0.5-1.0 1.0 70-100Amoníaco (mg%) 12 4-8 0.08-0.11Urea (mg%) 20 13-22 14-40

COMPOSICIÓN DE LA SALIVA EN FUNCIÓN DE LA VELOCIDAD DE FLUJO SALIVAL VERSUS PLASMA

� CALCIO 50% IÓNICO 50% unido a proteínas.

� FOSFATOS w 80 % IÓNICO w PO43-, PO4H2-, PO4H- (pH salival)

ÉSTERES ORGÁNICOS

� Saliva parotídea calcio iónico y fosfatos: "no estimulada", superan el producto de solubilidad de la hidroxiapatita. “ estimulada” superan también la del fosfato octacálcico y la del fosfato dicálcico (brucita).

� El calcio y el fosfato CALCIFICAR PLACA BACTERIANAsarro, tártaro o cálculos dentales.

Saliva Submaxilar→ + [calcio ] pH - fuerza iónica → sarro cara lingual de incisivos inferiores

CALCIO Y FOSFATOS SALIVALES

COMPONENTES ORGÁNICOS SALIVA VERSUS PLASMA

PAROTIDA SUBMAXILAR PLASMA

UREA 15 mg% 7 mg % 25 mg%

AMONIACO 0.3 mg% 0.2mg %

PROTEINAS 250 mg % 150 mg% 6000mg %

pH 6.8-7.2 6.8-7.2 7.35

COMPONENTES PROTEICOS DE LA SALIVA

acinaresAmilasa, lipasa, mucinas, GP ricas en

prolina, GP básicas, P acídicas, P ricas

en tirosina (estaterina), P ricas en

histidina, peroxidasa, lactoferrina

Lisozima, IgAs, factores de crecimiento,

péptidos regulatoriosno acinares

Tomado de Ellison S.A.,1979

ORIGEN = LUGAR DE SÍNTESIS

GP = GLICOPROTEÍNAS P = PROTEÍNAS

PROTEÍNAS ACINARES EN RELACIÓN AL AUMENTO DEL FLUJO SALIVAL

VARÍAN EN FORMA DIRECTAMENTE PROPORCIONAL

VARÍAN EN FORMA INVERSAMENTE PROPORCIONAL

PROTEÍNAS NO ACINARES EN RELACIÓN AL AUMENTO DE FLUJO SALIVAL

Glicoproteínas:

• Proteínas más abundantes

• Confieren propiedades de viscosidad y lubricación

• Cadenas laterales de heterosacáridos unidos covalentemente a la proteína y ramificados

• Grupo carboxilo de ác. siálico (pK 2,6) ionizado a valores fisiológicos de pH , gran carga negativa

Estaterina: fosfopéptido de 47 aa. Junto con trazas de PPi evita la formación de cristales fosfocálcicos en glándulas y conductos salivales.

IgAs:

• Sintetizada por células plasmáticas como dímeros con cadena proteica J

• Componente secretor aportado por células acinares es parte de una proteína trans-membrana receptora de IgA

IONIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS DEPENDIENTE DEL PH

medio ácido

Carga neta +

polo negativo (cátodo)

medio básico

Carga neta –

polo positivo (ánodo)

H + H+

– OH – OH

pI

Carga neta 0

NH3+

NH3+

NH3+ NH3

+

NH2NH2

COOHCOOH COO -

COO - COO -

COO -

ELECTROFORESIS

SALIVA PAROTÍDEA ESTIMULADA

Proteínas aniónicas (pI bajo)

Glucoproteína parotídea

Peroxidasa

Lisozima

Protamina

3 Histonas

2 prot. Básicas (bajo PM) ven.serpiente

CÁTODO

ÁNODO

AMILASA

Ig As

PRP película adquirida

Seroalbúmina

Pieza sec libre

Proteínas catiónicas

(pI alto)

+Gel de poliacrilamida en columna

2 polipéptidos Ricos en His

SALIVA SUBMANDIBULAR

� Secreción a predominio seroso

� Concentración 5 veces menor que el de saliva parotídea.

� Composición más compleja aportada por células mucosas:– Glucoproteína responsable

del grupo sanguíneo (A;B;Oy de Lewis).

– Mucinas (alto PM)

VISCOELASTICIDAD

SALIVA SUBLINGUAL

� Secreción a predominio mucoso

� Mayor cantidad de aporte mucoso:– GP grupo sanguíneo– Mucinas

� Glucoproteína (alto PM):– pI < 3– Glúcidos 50% de su peso– Composición azúcares:

neutrosfucosaglucosaminaác. siálico

BUFFER SALIVALES

Aquellas solucionesque resisten cambios bruscos de pH-agregar un ácido o una base-

CO3H2 / CO3H-

HPO42- / H2PO4

-

SISTEMAS AMORTIGUADORES EN SALIVApH= -log (H+)

= log 1/(H+)Kd = [CO3H-] [H+]

[CO3H2 ]

Ka= (sal) . [H+]

(ácido)

[H+] = (ácido). Ka(sal)

pH= log 1/(H+) = log ( sal) + log 1 (ácido) Ka

pH = pKa + log (sal)(ácido)

pKa

Ecuación de Henderson-Hasselbach

pH = pKa + log [SAL]

[ACIDO]

pH = pKa + log [CO 3H- ]

[CO3H2 ]

Ka= (CO3H- ) (H+) / (CO3H2)

pKa es el log negativo de la cte de disociación del ácido con el signo cambiado (es el pH en el cual el 50% está disociado)

BUFFER SALIVAL

CO3H2 / CO3H-

NO ESTIMULADA ácido carbónico y bicarbonato

(> reabsorción de bicarbonato)

2-3 mM pH (pK de 6,1 )

ESTIMULADA 1ml/min o más

(+bicarbonato) 30 - 60 mM.

pH de 7,5 - 7,8

EFECTO DEL FLUJO SALIVAL SOBRE EL PH PRODUCCIÓN DE BICARBONATO

POR LA GLÁNDULA SALIVAL

Luego de la recolección, en la saliva en contacto con el aire el pH puede aumentar hasta 8,5-9,0 por la acción de la anhidrasa carbónica (AC).

pK 6,1

AC

AC

� H2PO4- H+ + HPO4

2-

pK 6,8

NO ESTIMULADA pH 6,1 ( 5mM)

ESTIMULADA 2 mM y el pH

H2PO4- / HPO4

2- (cte) ( Henderson-Hasselbach),

Este HPO42- es ahora el predominante, aunque su

concentración es semejante en la saliva no estimulada.

Producto iónico (Ca+2).(HPO42-) pH crítico

HPO42- / H2PO4

-pH Crítico

pH por debajo del cual el fluído en la superficie de los dientes se hace NO SATURADO respecto a la HA y permite la remoción

de calcio y fosfato del esmalte.

Si pH < pH crítico: disolución Si pH > pH crítico: precipitación

Producto iónico (Ca+2).(HPO42-) pH crítico

Por lo cual el producto iónico debe estar por encima del producto de solubilidad de la sal para proteger el esmalte

TITULACIÓN DE SALIVA MIXTA CON ÁCIDO

Regiones “buffers” : A, principalmente bicarbonato y fosfato; B, debido a proteínas salivales

Producción de amoníaco en saliva

FACTORES QUE AFECTAN LA COMPOSICIÓN SALIVAL

� Contribución relativa de varias glándulas:Según la glándula que secrete varía la proporción de sus componentes

� Velocidad de flujo :Regulado fisiológicamente (ritmo circadiano)Nausea: incrementa salivaciónMiedo y anestesia: disminuye � boca seca

� La naturaleza del estímulo:Comida seca y arena: salivación profusa y acuosaCarne: secreción espesa y mucosaDietas ricas en hidratos de carbono: aumenta amilasa

Gracias!