- - - - L

CMAS (Annona diversifolia ~aftN

!!!o Baliesldr~J Patrón wmtfonso Rodriguez Páe;

E, 8!%:&ia Paz Reynoso ?r%Cisco Zavala Hernánde2 Juan Pablo Martinez Sorianc Lucrecia Flores Lopez Y-;;',%=' Francisco Puche Acosta mi

a Margarita . I Marroquin Anarade

DIVERSIDAD EN LAS ILAMAS (Annona diversifolia Saff .) DE LA TIERRA CALIENTE DEL BALSAS, MEXICO

Gustavo Ballesteros Patrón1, Luis Alfonso Rodriguez Paezl, Jesé de la Paz Reynoso2, Francisco Zavala I Juan Pablo Martinez Soriano3, Lucrecia Flores ¡ópezl, Francisco Puche ~ c o s t a i , Lila Margarita Marroquin Andrade4

1Profesor-investigador lnstituto Tecnológico de Cd. Altamirano, Gro. 2Auxiliar de Investigación lnstituto Tecnológico de Cd. Altamirano, Gro.

3Profesor-investigador Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN 4Profesor-investigador Universidad Autónoma Chapingo . - 4 Esta publicación hace parte del proyecto "Bases para la conservación de la ilama (Annona

diversifolia saff) en la Tierra Caliente del BalsasJi. La publicación puede se reproducida, L archivada en un sistema de recuperación o trasmitida en cualquier formato o por medio

corpóreo o incorpóreo, electrónico, mecánico, por fotocopia o grabación o de cualquier otra manera siempre y cuando se cite a los autores

CONTENIDO

I INTRODUCCI~N I 2 LA TIERRA CALIENTE DEL BALSAS 2

L 3 ASPECTOS BOTANICOS Y MORFOLÓGICOS DE LA ILAMA i Clasificación taxonómica de la ilama

Arquitectura de los árboles de ilama Patrón de ramificación del arbol de ilama Tipos de hojas más representativos de la ilama. Tipos de flores Porcentaje de prendimiento de los injertos de ilarna Principales formas de dehiscencia que presenta la ilama 8

4 CATALOGO DE LA VARIABILIDAD DE ILAMAS EN LA TIERRA CAI-IENTE DE GUERRERO PRESENTES EN EL BANCO DE GERMOPLASMA.

5 CARACTERIZACIÓN DE UNA POBLACIÓN DE ILAMAS 42 Las ilamas de otras zonas de guerrero 46 Análisis genético de diversidad vegetal de la ilama annona diversifolia frente a seis especies de Annonas con RAPD (Amplificación Aleatoria de Polimorfismos de DNA) como marcador molecular

6 BlBLlOGRAFlA 55

PROYECTO SAGARPA-SINAREFI "BASES PARA LA CONSERVACION DE LA ILAMA (Annona diversifolia SaW

EN LA TIERRA CALIENTE DEL BALSAS~~ INSTITLITO TECNOLOGICO DE CD. ALTAMIRANO

RED MEXICANA DE ANOIVACEAS Cd. Altamirano, Gro., Agosto de 2006.

.os frutales de la familia Annonaceae son ricos en calorías, vitaminas y minerales, y están catalogados dentro dc 1s frutas tropicales más deliciosas. Presentan aceptación en los mercados locales de las zonas en donde crecei m algunas se proyectan a los mercados internacionales Las especies de Annona mas conocidas y cultivadas por us frutos comestibles son: guanábana (A. muricata), saramuyo (A. squamosa), en tierras bajas tropicales, y :hirimoya (A. cherimolla Mili.) a altitudes superiores en los trópicos y subtrópicos. En general, los frutos de las inonáceas a nivel nacional son de poca significancía económica, ya que la superficie cultivada en México es laja y el consumo por lo general es local.

;in embargo, existen otras especies de anonáceas poco conocidas que tienen una gran potencialidad, como e inón amazónico (Rollinia mucosa), la anona o corazón de buey (A. reticulata), la cabeza de negro o guanacon; Annona purpurea) y la ilama, anona o ilamazapotl (A. diversifolia Saff.). La ilama es considerada como uno de lo: utos de mayor calidad dentro del género por su agradable sabor y el atractivo color de su pulpa. .a ilama es una especie originaria de México y Centroamérica, y se considera un recurso fitogenético amenazad( lor la presión de selección y la tala del bosque tropical caducifolio secundario en donde se encuentra comc iaterial tolerado. Por su potencialidad, esta especie ha sido asumida en forma prioritaria por la Red mexicana dc monáceas a través de un proyecto de conservación y fomento que incluye colectas, estudios de la diversidad : iontaje de un banco de germoplasma en la Tierra caliente, en consideración de que esta es la zona donde existt 3 mayor variabilidad conocida de esta especie. En el presente catalogo que hace parte de estos esfuerzo! iformamos sobre la diversidad de las ilamas en esta región y otras zonas de Guerrero, incluyendo su ubicaciói ~nriráfiria

Figura 1. Anonaceas tropicales mas conocidas 7

2. LA TIERRA CALIENTE DEL BALSAS

La Tierra Caliente del Balsas se localiza en la cuenca media del río del mismo nombre en la Depresión Austral y está formada por los municipios de Pungarabato, Coyuca, Ajuchitlán, Arcelia, Zirándaro, San Miguel Totolapan, Tlalchapa, Tlapehuala y Cutzaniala, correspondieiites a Guerrero, por los niunicipios de Huetaiiio de IVuñez, San Lucas y Caracuaro de Michoacán y por áreas de los municipios de Tlatlaya, Luvianos y Tejupilco del Estado de México. La temperatura media es de 28 O C, precipitación de 800-1000 mm anuales y el clima es cálido subhúmedo con lluvias en verano (Awo). La altura sobre el nivel del mar es de 250-350 m, los suelos son regosoles bajos en materia orgánica y nitrógeno y con tendencia a la alcalinidad. El relieve es plano con lomeríos que no sobrepasan los 500 metros de altitud en la zona del plan y con áreas serranas en el pié de monte de la Sierra Madre del Sur y el Eje neovolcánico transversal. Las actividades económicas básicas son la agricultura y la ganadería. Entre los cultivos principales están el maíz, mango, limón, papaya, plátano, ajonjolí, melón y pastos. Las poblaciones de ilarna se encuentran en zonas pedregosas con buen drenaje, eri lonieríos y estribaciones montañosas, localizadas en sitios cercanos a antiguos poblamientos indígenas purépechas y cuitlatecas. En la figura 2 presentamos la distribución de las poblaciones de ilama en la zona.

Figura 2. Distribución de la ilarna en la Tierra Caliente del Balsas

3. ASPECTOS BOTÁNICOS Y MORFOLOGICOS DE LA ILAMA

CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA DE LA ILAMA

Reino: Subreino: División: Subdivisión: Clase: Orden: Suborden: Familia: Género: Especie: Nombre científico: Nombre común:

Vegetal Embriophyta Espermatophyta Angiospermae Dicotiledoneae Ranales Magnolíneas Anonaceae Arinoiia Diversifolia Annona diversifolia Saff ilama, papauce, chirimoya, anona, ilamazapotl y zapote de vieja

ARQUITECTURA DE LOS ARBOLES DE ILAMA

Las ilamas son árboles de porte bajo, de raíces pivotantes y ramificaciones desde la base del tallo, con una altura promedio de 4 metros, aun cuando pueden ser más altos. En la zona de estudio se encuentra una variante denominada ilama zorro, que puede ser una variante silvestre o el ancestro de las formas domesticadas, ya que presenta una gran dehiscencia en los frutos y un sabor poco apreciado. Sus hojas son gruesas y convexas.

-. .".U "..,.".'"' "V 'VV U'""'"" "Y ..U..I" ""U.."" VI.."."

competencia

C. Forma de los árboles de ilama con competencia D. Forma del árbol de ilama sin competencia. Figura 3: Muestras de la arquitectura de arboles de ilama

PATRON DE RAMIFICACIÓN DEL ARBOL DE ILAMA

Los árboles de ilama se caracterizan por ser de bajo porte, generalmente con un eje central dominante y por tener ramificaciones desde la base, tal como se aprecia en la figura siguiente.

Figura 4. Tipo de ramificaciones de la ilama

TIPOS DE HOJAS MÁS REPRESENTATIVOS DE LA ILAMA. I

Fiel a su denominación especifica (diversifolia), existe en la ilama una gran diversidad de tamaños y formas de las hojas, hojas grandes de 27cm de largo por 15 cm de ancho y hojas pequeñas de 10 cm de largo por 5 cm de ancho. Las hojas son ovales, glabras, con bracteas deciduas y con una apariencia polvosa en el envés de las hojas, cuanto a la forma existen tres subtipos principales: a.) hojas de forma obovada; b.) hojas de forma elíptica; y c.) hojas de forma ovada. En al siguiente figura observamos las hojas de 20 tipos de ¡lamas evaluadas para la caracterización.

TIPOS DE FLORES

Las flores de la ilama tienen tres pétalos externos de longitud y de color variable según la variedad. En cuanto a color y taniaño la caracterización es la siguiente:

a. COLOR. Las flores fueron definidas en 6 tipos con respecto al color de pétalos, color Amarillo combinado con rosa, rosa combinado con púrpura, café, café combinado con púrpura, púrpura y color marrón;

b. TAMAÑO. Existe una gran diversidad de tamaños de la flor de ilama, se encuentran flores pequeñas de tan solo 4 cm de longitud y flores grandes de 12 cm de longitud. Con respecto al tamaño de los pétalos se encuentran flores pequeñas con pétalos de 2.4 cm y flores grandes con pétalos de 5.2 cm. También se encontró un árbol que produce Flores con 4 pétalos. En la figura siguiente se presenta una muestra de los tipos de flores encontrados.

m Figura 6. Colores y tamaños de flores

PORCENTAJE DE PRENDIMIENTO DE LOS INJERTOS DE ILAMA

Debido a la variabilidad en los árboles provenientes de semilla, se requiere de la utilización de métodos de propagación vegetativa que aseguren la fidelidad en las características fenotípicas observadas en los árboles padres. Para el montaje del banco de germoplasma y para el fomento de clones selectos se apeló al procedimiento de injerto de varetas por enchapado lateral, sobre patrones de ilama. Los resultados aparecen en el cuadro y la figura siguientes.

PRINCIPALES FORMAS DE DEHISCENCIA QUE PRESENTA LA ILAMA

Cuadro 1 : Injertación de varetas de ilama

Una de las limitaciones que presenta la ilama para su expansión hacia los mercados de las grandes ciudades, es la dehiscencia que presentan su frutos lo cual no es atractivo para consumidores urbanos,

ce la contaminación de la pulpa y acorta la vida de anaquel de los mismos. En la selección de uno de los criterios es el tipo de dehiscencia. En la figura siguiente se presentan

icia encontrados. C

No. Bloque

1 2 3 4 5 6

Total

No. Injertos muertos

17 5 7 2 o O 31

Plantas injertadas

1 O0 1 O0 1 O0 1 O0 1 O0 1 O0 600

% de injertos vivos 83 % 95 % 93 % 98 % 100 % 100 %

94.84 %

No. Injertos vivos 83 95 93 98 1 o0 1 O0 569

% de injertos muertos

17 % 5 % 7 % 2 % o % O %

5.16 %

4. CATALOGO DE LA VARIABILIDAD DE ILAMAS U LA T I L - CALIENTE DE GUERRERO "PESENTES EN t L BANCC GERMOPLASMA

! - * J lue tiene el S&¡ n de la Paz Machuc - I Tlalchapa GL este lugar se

1

- , - - . . . - . . . - . .- - . -. . LONG. WIOOO 29.605'.

LONG. W1OOO 29.613'. ALTITUD 386 M.S.N.M.

'O 10, COI DAD OTLj NG WIOO" 29 591'

JIYIUMU VILMI CrCb. MI. IY lar. 100' 29.590'. ALTITUD 387 M.&

I Id, LUMUNIUAUUILAltVtL LA1 NI LUMUNII

W10O029 500' ALTITUD 386M.S 1lG WIOOa

'&%, w- - --.

P LONG. W1OOO

f , .

-0NG. WIOOO 29.590'. ALTITUD 386

L I , ~ U I V I U I Y I U A U U I L ~ I ~ ~ T L . MI . N I O - LO.WI ,

ONG. W1OOO 29.590' ALTITUD 386 M.S.N.M.

!9.592'. ALTITUD 386 M.S.N.M.

,- - . L M . W 3'. ALTITUD 385 M.S.N.M.

TIPO 33. COMUNIDAD OTLATEPEC. LAT N% 28% LONG WIW 29.592'. ALTITUD 385%.~.

TIPO ~ ~ M U N I D A D OTLATEPEC LAT. ~18~28.841 ' , LONG. WiOO" 29.572'. ALTITUD 385 M.S.N.M.

COMUNIDAD OTLATEPEC. LAT. N18O 28.843, LONG. I 29.598'. ALTITUD 386 M.S.N.M.

- . , - -. . . - . . . - . .- - . - . . -. - - . -. . . .ONG. W1OOO 29.566'. ALTITUD 385

TIPO 39, C O M ~ D A D OTLATEPEC LATITUD NIBa 28.8X', LONG. WIOOo 29.566'. ALTlfLlD 385 M.S.N.M.

143, COM LONG. W

. -. . . - . - - . -. . 8'. ALTITUD 3

J 1 b ~ I U ~ ~ N I l U W W I Lnl CTCb. Lnl . 1 1 1 9 -1 1U y &. ,WJW 29510'. ALTITUD 388 M.S.N.M.

+ .<rn-'--t *.*L !J+ --- m;. , * 'l. /' ' 1

IONG. WIOOO 29.582 ALTITUD 391 M.S.N.M.

LONG. WIOOo 29.589'. ALTITUD 386 M.S.N.M.

Asimismo en la casa de este mismo productor de Otlatepec), se encontraron también los sigui€

TIPO IC, COMUNIDAD 1

LONG. W1OOO 29.877'. ALTITUD 342 M.S.N.M.

LAT. N1C 30.408', 6'. ALTITUD 344 M.S.N.M.

TIPO JNIDAD OTLATEPEC. LAT. N1 00° 29.845'. ALTITUD 342 M$

O 2, COMldaDAD NOPALES. ~%¡N180 L ~ ~ ~ . ' f i l O O O 28.923'. ALTITUD 388 M.S

COMUNIC IOPALES LAT N18O 22.937, LWW@NIOO~ ~6'. ALTITUD 388 M.S.N.M r' #

8.874'. ALTITUD 387 M;S.bj.M. TIPO 5, COMUNIDAD NOPALES. IAT. NIEO 22.814',

La variabilidad de ilamas encontradas en la comunidac

rt

TIPO 3. COMUNIDAD HUAXQUIAL. 1 nNG. WIOOO 28.163'. ALTITUD 403 M.S.N.M.

p-'lrllYmY I IUMUUI-. LnI I I UY I V IU L l.UUI>,

i WIOP 28.163'. ALTlT"D 403 M.S.N.M. . /

4, COMU -0NG W l

IAXQUIAL. LAT. N18 r. ALTITI in 41-11 M s

- TIPO 5, COMGNIDAD -.m HUAXQUIAL LAT N1B0 21.693'.

LONG. W1OOO 28.148'.ALTITUD 400 M.S.N.M. k ~ 1 0 0 ~ 2 f l 3 ' . ALTITUD 400 M.S.N.M

A eontinuación~se muestra una partelte tea variabilidad de fjamas ;entrada ei las Huertas mudapio de Tlapehwla Guettem. ~s tos hpos de ilamas ya se 6nvnl

'. LONG. V

i'. ALTtWt - x*:

. i - 13C;!

PORCENl

CENTAJE

5. CARACTERIZACIÓN DE UNA POBLACIÓN DE ILAMAS

La Región Tierra Caliente del Estado de Guerrero, es el lugar donde existe la mayor variabilidad conocida de características de esta especie, por lo cual se eligió para la caracterización una población de ilamas ubicada en la comunidad de San Antonio de las Huertas municipio de Tlapehuala Gro. Los resultados de las variables del fruto en los 21 tipos de ilama de San Antonio de las Huertas, se muestran en los cuadros 2 y 3

Cuadro 2. Resultados de las variables del fruto de los 21 tipos de ilama evaluadas para la caracterización. Estos resultados son los promedios de la evaluación de tres frutos por tipo.

Cuadro 4: Morfología de las hojas en los tipos de ilama evaluados

rea Foliar 1 Perímetro de 1 Eje Longitudinal 1 Eje Radial ilama (cm') hoja (cm.) (cm.) (cm.)

1 68.87 37.43 14.61 6.68

-

37 81.66 41.44 15.35 7.72 Promedio 69.87 38.16 14.14 6.88

índice de 1 Angulo 1 Angulo Redonda

0.62 0.64

LAS ILAMAS DE OTRAS ZONAS DE GUERRERO

Para establecer comparaciones entre la variabilidad de las ilamas de la Tierra caliente y las de otras zonas de Guerrero, se hicieron recolectas de mercado y campo en Atoyac de Álvarez, Tierra Colorada, Iguala y Chilpancingo. En todas estas zonas hay una menor variabilidad en los tipos de frutos que la presentada en la Tierra Caliente. En Atoyac de Álvarez, Costa Grande guerrerense se ha presentado una selección hacia genotipos de tamaño grande, cáscara lisa y pulpa de colores violeta y rojo. Es esta zona en donde existen huertos compactos con materiales selectos, probablemente como producto de un programa gubernamental de fomento de este cultivo, que se llevó a cabo hace unos diez años. En Tierra Colorada existen genotipos selectos adaptados en ambiente de transición climática entre: cálido y templado húmedo.

Figura 14. Muestra de ilamas del mercado de Atoyac

Figura 15. ilamas de Atoyac de Aivarez 1

11 FIGURA 17. ILAMAS DEL MERCADO DE TIERRA COLORADA

l-IbUKA 16. ILAMAS U t SAN MAKI IN U t LAS FLUKtS.

7 a';

ANALISIS GENÉTICO DE DIVERSIDAD VEGETAL DE LA ILAMA Annona diversifolia FRENTE A SEIS ESPECIES DE Annonas CON RAPD (AMPLIFICACION ALEATORIA DE POLIMORFISMOS DE DNA) COMO MARCADOR MOLECULAR

Uno de los aspectos más fundamental de la revolución causada por la PCR fue la posibilidad de generar grandes cantidades de DNA de segmentos específicos del genoma. El DNA en grandes cantidades puede ser fácilmente detectado directamente en electroforesis en gel a través de colorantes específicos para DNA (ejemplo bromuro de etidio). Entre tanto, la técnica de PCR presenta una limitación significativa en la obtención de marcadores moleculares anónimos distribuidos a través del genoma. La construcción de primers para la amplificación vía PCR dependía esencialmente del conocimiento previo de las secuencias de nucleótidos que flanquean las secuencias de DNA de interés. Para conocer estas secuencias es necesario una clonacion de estas secuencias. En vista de esto, con excepción de algunos genes de secuencia conocida, la PCR presento en inicio un uso limitado como técnica para obtención para marcadores moleculares (Ferreira y Grattapaglia, 1996).

Un gran avance en el área de marcadores moleculares basados en PCR ocurrió en 1990, con la idea de utilizar primers más cortos y de secuencia arbitraria para dirigir la secuencia de amplificación, eliminando así

independientemente por una tecnología con el nombre mas

en su trabajo clásico, demostrando la identi-

genéticos para mapeamiento. Welsh and McClelland, 1990 a su vez propusieron una denominación mas apropiada para la técnica, llamándola AP-PCR (primers arbitrario para la reacción en cadena de la polimerasa) una vez que los primers poseen la secuencia arbitraria su amplificación técnicamente ocurre en lugares especificas del genoma. Un experimento de este grupo fue esencialmente la generación de "fingerprints" (huellas digitales) genéricos y reproducirlas para la identificación del linaje, utilizando electroforesis de genes de poliacrilamida de mayor poder de resolución a la vez que primers un poco más largos. Con un atraso de algunos meses en su publicación, de forma independiente un tercer grupo también desarrollo el mismo método, de nombre DAF (amplificación de huellas digitales de DNA) y fue propuesto por este grupo para detectar diferencias genéticas entre organismos (Caetano-Anólles et al., 1991).

Independientemente del nombre utilizado y en las pequeñas variaciones de la metodología, la técnica de PCR utilizando primers de secuencia arbitraria abrió la perspectiva nueva para el análisis genomico de individuos y poblaciones. Además de facilitar y acelerar los est~idios que ya ocurren en las especies más tradicionales "Millo, tomate, arroz" la tecnología RAPD produce una verdadera "democra.tización" del análisis del polimorfismo molecular, que permite la realización de estudios de análisis genético en especies anteriormente no contempladas. Desde su descripción el uso de marcadores RAPD para el análisis genetico y el mejoramiento de plantas a tenido una rápida difusión.

Extracción de DNA Para la realización del presente trabajo se utilizaron cuatro metodología de extracción del DlVA ya que las especies del genero annona posee excepcionalmente altos niveles de polisacáridos, polifenoles y taninos entre otros metabolito secundarios que di,ficultan la extracción del DNA y su posterior análisis cori RAPD.

Protocolo de aislamiento Del DNA Se tomo 20mg de tejido (previamente congelado) con N2 liquido hasta tener un polvo fino, se deposito en tubo eppendor de 2 ml y agrego 750 uL de buffer de lisis , se invirtió el tubo hasta humedecer bien el tejido molido, se dejo reposar por 10 minutos, se agrego 0.8 uL de beta-mercaptoetanollmuestra. Posteriormente se agrega 750 uL de Fenollmuestra y se pone en Vortex, se centrifuga por 20 min. a 4°C por 13K RPM Se tomo la fase superior acuosa y se paso a otro tubo de 2 ml, se le agrega RNAsa 10 a 15 uL (IOmglml), se mezcla por inversión e incuba a 37 "C por 1 hora. Posteriormente se agrega 750 uL de isopropanol frió lentamente, se saca la madeja o centrifuga a 5 min a 4°C. Se efectúa dos lavado con etanol, uno al 80% y otro con absoluto, cada lavado se centrifuga a 13K RPM, se decanta y se seca la pastilla, finalmente se resuspende el DNA en 50uL de H20 MQ

Cuantificación del DNA Las muestras se les cuantifico su DNA en un espectrofotometro y una vez cuantificado se diluyeron a muestras con concentración 5OngluL

PCR - RAPD

Para la preparación de los tubos de 25uL para PCR se uso la siguiente tabla.

Los primer usados fueron los de Biogenics: 50-41, 60-34,13-18,70-22, 19-24 y 70-28

Reactivos

H20 Buffer Taq 10X Mg CIz Mezcla de 4NTPs Primer Polimerasa Taq Volumen Final

El programa para PCR que funciono fue el siguiente

94°C - 3 min 94°C - 1 rnin 7 36°C - 1 rnin } 34 Ciclos 72°C - 1 min

X-Reacciones Cantidad (uL)

1 Reacción

72°C - 7 min J 15°C - w

Concentración

1 X 2mM

200mM -- 20 pmol

1.5 U 50 ng

Cantidad (uL)

2.0 0.8 0.4 1.6 0.3

M = Marcador A l llama blanca (8) A2 llama Rosa (28) A3 llama Zorro (i?) A4 llama Púrpura (6) A5 llama Crema (2) A6 llama Roja (costa grande) A7 llama Morada (26) A8 = Muricata A9 = Montana A10 = Purpurea A l 1 = Chirimoya A1 2 = Saramuyo A1 3 = Reticulata (-) = Control Negativo

Análisis estadístico

En base a la interpretación en las diferentes fotografías se procedió al manejo de datos generados por diferentes iniciadores.

Se encontraron bandas correspondientes a tamaños de ADN que variaron desde 9162 pb hasta 500 pb de peso molecular, que este caso se manejaron como locus, entendiéndose como tal una secuencia de ADN que ocupa un lugar especifico dentro del cromosoma.

Con los datos obtenidos se procedió a agruparlos de manera descendente de acuerdo al numero dado a la variedad (figura 1) y con el paquete STADlSTlCA se realizo una estandarización de los mismos y ajustados a media igual a cero (O) y varianza igual uno (1).

Con los datos estandarizados se utilizo el procedimiento de agrupamiento de Wards, el cual es un método riguroso que trabaja con mínima varianza y que agrupa los datos de manera eficiente, lo cual se obtuvo el dendograma con el NTSYS ver. 2 . 1 0 ~ que se muestra en la figura 2 donde se encuentra claramente la relación genética de los materiales de Annona. El dendograma se obtuvo por medio de bandas que generaron durante la electroforesis de cada muestra de ADN tomando en cuenta el marcado de peso molecular de IKb, donde la presencia de las bandas es igual a 1 y en la ausencia de bandas igual a O, para poder anexarla a la matriz del dendograma

Al observar el dendograma se observa que los trece materiales se agrupan en 4 grupos, en el primer griipo se tiene a A l , A2, A3, A4, A5, A6 A7, en el segundo grupo están A8, A10 y A1 3 en tercer grupo A9 y A l 1 y en el cuarto grupo A12

A l = llama blanca (8) A2 llama Rosa (28) A3 = llama Zorro (i?) A4 = llama Púrpura (6) A5 llama Crema (2) A6 = llama Roja (costa grande) A7 llama Morada (26) A8 = IMuricata A9 = Montana A10 Purpurea A l 1 = Chirimoya A1 2 Saramuyo A1 3 = Reticulata

Figura 22. Dendograma obtenido con RAPD de los 13 materiales analizados

Castañeda Vildozola A. (S.F.) Catálogo de selecciones y cultivares de chirimoya presentes en el Banco de germoplasma en Coatepec de Harinas. México. Red Mexicana de Anonáceas. México

Cruz Pineda E. 2002. Cultivo de Anona. Boletín Técnico No. 7. Centro de Tecnología agropecuaria y forestal (CENTA). El Salvador.

León J. 1968. Botánica de los cultivos tropicales. IICA. San José, Costa Ricanrfngng

ores tipos de ilama que existen en orarlos al banco nacional de ilamas que

nizando en Cd. Altamirano, Guerrero.

ar las varetas es preferible que sea cuando los árboles es tas están maduras, esto es con el fin de facilitar el prendimiento de los injertos, ya

es difícil su prendimiento, porque se deshidratan rápidamente. ijeras de podar. Las varetas deben de medir entre 10 y 20cm tener de 3 a 10 yemas. Si la vareta tiene hojas es necesario olo esto nos sirve para protección de las yemas y también para

ver cuando el injerto a pegado.

2. Traslado de las varetas: Para el traslado de las varetas es necesario envolverlas c